專利名稱：一種含有西曲依醇的植物提取物的制備方法及藥用用途的制作方法
●發(fā)明領域本發(fā)明涉及一種從腎蕨、豌豆、蕎麥、紅豆杉等植物中提取西曲依醇(5-O-甲基-myo-肌醇)的方法以及由該方法所得的提取物的用途。采用此方法從這4種植物中提取得到的提取物均含有西曲依醇，制備成的保健品、健康食品和藥品可用于預防和治療糖尿病及其并發(fā)癥。這些保健品、健康食品和藥品的制劑形式可以是口服制劑、也可以是注射制劑。這些保健品、健康食品或藥品的制劑中，化合物西曲依醇(5-O-甲基-myo-肌醇)的含量在1％～99％之間。
●背景技術糖尿病已成為繼心腦血管疾病和癌癥之后的第三號人類健康殺手，據(jù)統(tǒng)計，全世界有2億糖尿病病人，2003年中國有4800萬人飽受糖尿病的折磨，每年新增糖尿病患者120萬人，約有60％的2型糖尿病人未能得到早期診斷，耽誤了最佳醫(yī)療時期，每年因為糖尿病及其并發(fā)癥死亡的人數(shù)達到320萬，令人擔憂的是，我國最新的流行病調查證實，我國的糖尿病患病率高達10％。
糖尿病是一種常見的內分泌代謝綜合癥，是由多種遺傳基因和環(huán)境因素共同作用引起的一種臨床表現(xiàn)為高血糖狀態(tài)的綜合癥，分為胰島素依賴型(1型)和非胰島素依賴型(2型)兩種，其中2型糖尿病患者占糖尿病總人數(shù)的90％左右，是主要的糖尿病人群，也是糖尿病疾病研究和藥物開發(fā)的主要方向。最新的研究發(fā)現(xiàn)胰島素抵抗性是2型糖尿病的根本病因，這類病人雖能產生一定量的胰島素，但胰島素作用不靈敏。由于胰島素抵抗，人體胰島β細胞功能受損并最終衰竭，從而導致代謝紊亂，出現(xiàn)各種各樣的并發(fā)癥，例如糖尿病心臟病、糖尿病腎病、糖尿病神經病變、糖尿病血管病、糖尿病視網膜病變等。
研究證明肌醇類分子在胰島素作用的信號傳遞過程中起著重要的角色，通過給試驗動物補償肌醇類分子能有效地促進胰島素功能，降低血糖、血中胰島素、血甘油三脂水平等。
5-O-甲基-myo-肌醇(5-O-methy-myo-inositol，sequoyitol，西曲依醇)是中肌醇的甲基衍生物，西曲依醇在機體內參與基本生理生化過程，通過紅杉醇脫氫酶(E.C.1.1.1.143，sequoyitoldehydrogenase)將NAD(+)轉化成NADP。(見

圖1、圖2)早期研究表明西曲依醇能顯著降低糖尿病模型高血糖、抑制肝糖原分解和葡萄糖的吸收、降低血脂、改善自由基代謝和保護胰島β細胞，但不降低正常小鼠血糖；而且其毒性極低。(梁敬鈺，等，CN1488344A)是一個很有價值的抗糖尿病藥物。
研究表明，西曲依醇廣泛分步在多種植物中，尤其是在紅豆杉科植物中廣泛分布，包括云南紅豆杉(Taxus yunnanensis Cheng etL.K.Fu)，美麗紅豆杉(Taxus chinensis var.mairei(Lemee et Levl)Cheng El L.K.Fu)，曼地亞紅豆杉(Taxus media)、以及云南穗花杉(Amentotaxus yunnanensis)和榧樹(Torreya yunnanensis，Li SH，J Natural Products 2003)等。同時研究表明在其他一些植物中也發(fā)現(xiàn)有西曲依醇的分布，這些植物包括小葉羅漢松(Podocarpusbrevifolius，顧世海等人，中草藥1997)、加州海岸紅木(sequoia sempervirens，Sequoia gigantea，Arthur B等人，Phytochemistry，1968)、腎蕨類(Nephrolepis cordifolia)、銀杏(Ginkgo Liloba L.)以及某些豆類植物中(Medicago sativa，Ononisspinosa，Trifolium incarnatum，Simmondsia chinensis，DittrichP等人，Phytochemistry 1984，1987)、竹柏類(Podocarpus sellowii，Mukherjee R等人，Phytochemistry，1988；)、馬兜鈴類(Aristolochiaarcuata，Maurício C等人，Phytochemistry，2003，Aristolochiagigantea，Lucia MX等人，Phytochemistry，1997)以及蕓香科植物(Melicope micrococca，Sultana N等人，Phytochemistry)。前期所得西曲依醇多是從紅豆杉屬植物中發(fā)現(xiàn)的，由于紅豆杉植物資源的有限，使得大規(guī)模研究和開發(fā)西曲依醇收到了限制。進一步的研究發(fā)現(xiàn)西曲依醇廣泛存在于多種植物中，尤其是在蕨類、豆類、麥類植物中的存在，大大地豐富了資源，在原料成本上可以大大降低下來，使得大量制劑的工業(yè)化生產成為可能。
為解決西曲依醇的來源問題，我們對一些資源豐富的植物進行了西曲依醇提取的試驗，并采用這些不同來源的西曲依醇的提取物進行了生物活性試驗，獲得了理想的結果。采用這些含有西曲依醇的提取物進行動物的試驗結果表明這些提取物有明顯的降血糖功效。
●發(fā)明內容本發(fā)明提供了一種從腎蕨、豌豆、蕎麥、紅豆杉等植物中提取、分離得到的抗糖尿病活性的毒性低的天然植物提取物，所述提取物的主要有效成分為西曲依醇(5-O-甲基-myo-肌醇)，其含量在1％～99％之間。
本發(fā)明還提供了一種從藥用植物紅豆杉中提取具有抗糖尿病的植物提取物的方法，所述方法包括用溶劑提取，得浸膏，將浸膏經兩相萃取，柱層析，收集含有西曲依醇(5-O-甲基-myo-肌醇)得流份，濃縮、過濾、干燥，得到植物提取物粉末，其中提取所用的有機溶劑可以是不同濃度的乙醇、甲醇、丙酮或它們的混合物等，兩相萃取所用的溶劑是水不相溶的有機溶劑，例如乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、乙醚等。所述層析為大孔樹脂柱層析、纖維素柱層析、葡萄糖G或改性葡聚糖柱層析、活性炭柱層析等。
更具體的說，本發(fā)明所述從上述植物中提取西曲依醇提取物的方法包括將上述植物干燥，粉碎成粗粉，用不同濃度的甲醇、乙醇、丙酮等溶劑或者它們的混合物在0℃至沸點溫度下，優(yōu)選室溫至沸騰溫度下，更優(yōu)選在沸點溫度下提取，所用溶劑的量優(yōu)選為1∶1至20，更優(yōu)選為1∶2至10，更優(yōu)選為1∶8(腎蕨)，1∶4(豌豆)，1∶8(蕎麥)，1∶5(紅豆杉)，優(yōu)選提取1～5次，更優(yōu)選提取3次，經減壓濃縮后得浸膏，將浸膏用水不相溶性有機溶劑(例如乙酸乙酯、氯仿、乙醚等)萃取，以便除去親脂性成分，所述萃取溶劑的量為1∶2至12(體積/體積)；合并水層，濾過，用柱層析分離，所述層析例如大孔樹脂柱，葡聚糖G或改性葡聚糖柱層析，纖維素柱層析以及活性炭柱層析，用相應的洗脫劑洗脫，同時檢測洗脫液，收集含有西曲依醇的流份，減壓濃縮，靜置，過濾得到固形物，用乙醇、甲醇、丙酮等有機溶劑重結晶，干燥得植物提取物粉末，反復結晶多次，即可得到含量在90％以上的西曲依醇提取物。
本發(fā)明上述所述提取物可與常規(guī)賦型劑或輔料制備成保健品、健康食品或藥品，這種制劑可以是西曲依醇的單一成分，也可是含有西曲依醇的混合物，制劑形式可以是口服制劑，也可以是注射制劑，既可以是常規(guī)的片劑、膠囊劑、注射劑，也可以上述各種制劑的緩控釋制劑、靶向制劑等。
在制劑中使用的可以是西曲依醇，也可以是用已知的方法通過對西曲依醇與相應的酸、堿進行反應得到西曲依醇的可藥用鹽。
本發(fā)明的保健品、健康食品制劑中，西曲依醇作為治療有效成分，其有效劑量是含有1％或以上，因此，制劑中其他成分的各個用量比值相應地變化。優(yōu)選地，西曲依醇，或其可藥用鹽的重量比值范圍為20％～99％，當作為保健品、健康食品時，西曲依醇含量優(yōu)選在20％～60％，當作為藥品時，西曲依醇含量優(yōu)選的在60％～99％。
當口服給藥時，本發(fā)明的制劑形式可以是普通片、分散片、泡騰片、包衣片、糖衣片、膠囊(包括明膠膠囊、植物膠囊、腸溶膠囊等各種膠囊形式)、顆粒劑、錠劑、栓劑、粉劑、口服液、飲用小瓶或溶液、微粒、凝膠、滴丸或上述各種劑型的緩釋劑型、分散劑型。
具體的，將含有西曲依醇的活性物質，以及其他活性物質與各種類型賦形劑或載體如填充劑、崩解(或破碎)劑、粘合劑、潤滑劑、矯味劑、著色劑等進行混合，然后將混合物成形，由此制備成口服給藥劑型。
著色劑可以是食用的任何染料，例如胡蘿卜素、茜草根、莧菜紅、檸檬黃、日落黃等。
矯味劑包括各種屏味劑，例如蔗糖、單糖漿、甘露醇、山梨醇等甜味劑，薄荷油、茴香油、檸檬油等芳香劑，海藻酸鈉、阿拉伯膠、西黃芪膠等膠漿劑。
粘合劑包括淀粉漿、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素、乙基纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素、藻酸、卡波姆(carbomer)、糊精、藻酸鈉、聚甲基丙烯酸酯、麥芽糖糊精、液體葡萄糖、硅酸鎂鋁和瓜耳膠。
崩解劑可以是干燥淀粉、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)羧甲基淀粉鈉、羧甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、瓜耳膠、硅酸鎂鋁、甲基纖維素、微晶纖維素、纖維素粉、預膠化淀粉、海藻酸、藻酸鈉或低取代羥丙基纖維素等。
填充劑是淀粉、糖精、糊精、甘露醇、乳糖、硫酸鈣、磷酸氫鈣和微晶纖維素。
使用慣常的方法，在一種或多種潤滑劑存在的情況下，將顆粒壓制可以獲得片劑。適宜的潤滑劑是硬脂酸鈣、硬脂酸單甘油酯、棕櫚酰硬脂酸甘油酯、氫化蓖麻油、輕礦物油、硬脂酸鎂、聚乙二醇、苯甲酸鈉、十二烷基硫酸鈉、延胡索酸十八烷基鈉、硬脂酸、滑石粉和硬脂酸鋅。
然后可以使用聚合物的溶液如羥丙基甲基纖維素或乙基纖維素，將這些片劑進行包衣。
如使用濕法制粒過程，用活性成分與一種或多種賦型劑如粘合劑、崩解劑和填充劑的混合物為起始物料，制備壓片所用的顆粒。
為了得到硬膠囊，任選地在潤滑劑如硬脂酸鎂、硬脂酸、硬脂酸鋅、滑石粉存在的情況下，將活性成分與適宜填充劑(例如乳糖)的混合物填充入空的膠囊中，膠囊可以是明膠膠囊、植物膠囊，也可以是腸溶膠囊等。
將活性成分溶解在適宜溶劑(如聚乙二醇)中，接著裝入軟膠囊而制得軟明膠膠囊。
為了制備口服溶液或懸浮液，將活性成分與分散劑、潤濕劑、懸浮劑(如聚乙烯吡咯烷酮)、防腐劑(如對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯)、矯味劑或染料一起溶解到適宜溶劑中。
為了制備微囊，將活性成分與適宜稀釋劑、適宜穩(wěn)定劑、促進活性成分緩釋的物質或形成中芯的任何其它類型添加劑聯(lián)合，然后用適宜聚合物(例如樹脂)將芯包衣。然后，將得到的微膠囊任選地制為適宜劑量單位。
用常規(guī)方法，將活性成分與緩沖液、穩(wěn)定劑、防腐劑、增溶劑、張度劑和懸浮劑進行混合，得到注射制劑。根據(jù)已知的技術，采用包括配制藥液、除熱原、除菌、罐裝和凍干等步驟，然后制備成注射制劑的形式。
當注射給藥時，本發(fā)明組合物是用于靜脈輸注或肌肉注射的包裝在管形瓶、玻璃瓶或瓶中的注射溶液、干粉、或凍干粉和懸浮液形式。其中藥物可接受的載體選自低分子右旋糖酐、甘露醇、環(huán)糊精、可溶性淀粉、糖類物質、氯化鈉、纖維素類物質或水中的一種或多種。
根據(jù)本發(fā)明，這樣的保健品、健康食品或藥品可以是單獨采用含有西曲依醇制備的，也可以是含有西曲依醇的組合物，也可以是將其中的活性成分混合在一起的一個混合物，比如將活性成分混合后放在制備成一個單位制劑中，是同一個組合物中的基本組分。也可以是其中的活性成分分開，但是是以復合的形式包裝在一起的，比如不同的微粒放在一個膠囊中，或幾種各含有不同活性成分、采用不同顏色的膠囊放置一個包裝盒、瓶中。
根據(jù)本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案，西曲依醇或其鹽的用量在單一制劑中的重量含量比例是1％～99％，口服制劑其含量優(yōu)選地在60％～99％，而注射制劑含量優(yōu)選的在80％～99％。
在單位劑量的制劑中，單位制劑中含有1～100mg的西曲依醇，優(yōu)選的含有2-30mg西曲依醇。
為了進一步理解本發(fā)明，以下將結合實例和附圖對本發(fā)明做出詳細的，非限制性的說明。
實例一、低含量西曲依醇的提取物制備植物粉末，可以是腎蕨葉，紅豆杉樹皮、樹葉，豌豆種子等，先將其粉碎成粉末，取粗粉末10kg，以8倍體積的甲醇在75℃提取三次，合并提取液，濃縮成漿狀溶液，采用旋轉蒸發(fā)儀減壓濃縮至干，用1∶1(體積比)的乙酸乙酯/水兩相萃取，共萃取5次，合并水層，濾過，上大孔樹脂柱(D101型)，以蒸餾水、含水乙醇(乙醇5-20％)梯度洗脫，各洗脫液用鑒別試劑收集正反應的洗脫液，再行旋轉蒸發(fā)、減壓濃縮至干，得到植物提取物干燥品，即為低含量西曲依醇提取物，經含量測定，西曲依醇在該提取物中的含量為26.3％。
實例二、低含量西曲依醇的提取物制備取市售干燥豌豆，將其粉碎成粉末，取粗粉10kg，以4倍體積的乙醇在80℃提取三次，合并提取液，濃縮成漿狀溶液，采用旋轉蒸發(fā)儀減壓濃縮至干，用1∶1(體積比)的氯仿/水兩相萃取，共萃取5次，合并水層，濾過，上大孔樹脂柱(D101型)，以蒸餾水、含水乙醇(乙醇5％～20％)梯度洗脫，各洗脫液用鑒別試劑收集正反應的洗脫液，再行旋轉蒸發(fā)、減壓濃縮至干，得到植物提取物干燥品，即為低含量西曲依醇提取物，經含量測定，西曲依醇在該提取物中的含量為29.5％。
實例三、低含量西曲依醇的提取物制備取蕎麥粗粉10kg，以8倍體積的乙醇在80℃提取三次，合并提取液，濃縮成漿狀溶液，采用旋轉蒸發(fā)儀減壓濃縮至干，用1∶1(體積比)的氯仿/水兩相萃取，共萃取5次，合并水層，濾過，上大孔樹脂柱(D101型)，以蒸餾水、含水乙醇(乙醇5％～20％)梯度洗脫，各洗脫液用鑒別試劑收集正反應的洗脫液，再行旋轉蒸發(fā)、減壓濃縮至干，得到植物提取物干燥品，即為低含量西曲依醇提取物，經含量測定，西曲依醇在該提取物中的含量為21.2％。
實例四、高純度西曲依醇的提取物制備采用低含量西曲依醇的植物提取物，用甲醇重結晶，過濾得晶狀粉末，抽干，于70℃下干燥，得高含量西曲依醇的植物提取物。反復重結晶后，西曲依醇的純度可以達到98％以上。
實例五、西曲依醇的檢查方法取樣品5mg，精密稱定，置10ml量瓶中，以水溶解定容，搖勻。HPLC色譜條件氨基柱，5μm，4.6×250mm，檢測器蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)，漂移管溫度40℃，壓力3.5bar，進樣量20μl。流動相為乙腈-水(75∶25)，使用前經0.45μm有機濾膜抽濾脫氣，流速0.8ml/min。
采用高純度的西曲依醇提取物在上述條件下檢測，圖譜如下，西曲依醇出峰時間12.312min。(見圖3)實例六、西曲依醇的質譜分析取經過重結晶數(shù)次的西曲依醇提取物適量，以水為溶劑，制備成濃度為0.1mg/ml的溶液，直接進行質譜分析，結果可以看到m/z＝195的離子峰為最強峰，此峰為西曲依醇的分子離子峰，另外，m/z＝212的峰為第二強峰，此峰為西曲依醇的水合離子峰，說明在水溶液中西曲依醇有相當部分以水合離子的形式存在(見圖4)。
實例七、西曲依醇注射劑的制備采用精制后的西曲依醇提取物，制備成注射用原料。
西曲依醇水溶性好，將西曲依醇水溶后，過濾滅菌，按注射液制備工藝程序操作，制備注射液。按凍干粉針工藝程序操作，制備粉針劑。
采用精制后的注射用西曲依醇原料，按凍干粉針工藝程序操作，制備凍干粉針劑。取注射用西曲依醇原料，加注射用水溶解，加入預先除熱原的20％低分子右旋糖酐溶液，充分混勻，定體積最后定量，使得最后濃度為西曲依醇0.1g/ml，右旋糖酐0.05g/ml，采用活性炭去除熱原，0.22μm微孔濾膜過濾除菌，在100級潔凈區(qū)內按每瓶1ml灌裝入預先處理好的西林瓶中。在凍干箱內，-40℃預凍2小時，然后在-25℃，1.33Pa真空度下升華，游離水分去除90％后，加溫干燥，溫度控制不超過35℃至凍干結束，凍干箱內加塞密封。
實例八、西曲依醇提取物片劑的制備稱取西曲依醇提取物60g，淀粉40g，微晶纖維素20g，0.5％PVP水溶液適量制軟材，24目制粒，70℃干燥4小時，30目整粒，加入羧甲基淀粉鈉10g，微粉硅膠1.0g，混勻，壓片，制成1000片。
實例九、西曲依醇提取物分散片的制備稱取西曲依醇干燥提取物60g、微晶纖維素20g，交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮10g，低取代羥丙纖維素10g，混合均勻；滴加5％聚乙烯吡咯烷酮K30的乙醇液制軟材，過30目篩制粒，濕粒于60℃條件下進行干燥，用40目篩整粒，加入交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮10g，低取代羥丙纖維素10g，硬脂酸鎂5g，混勻，壓片，制成1000片。
測試1)分散均勻性的測定取2片西曲依醇提取物分散片置于100ml水中振搖，在20℃±1℃的溫度下，180秒鐘全部崩解并通過2號篩。2)溶出情況的測定采用人工胃液0.1mol/L鹽酸進行溶出度的測定。按照藥典二部附錄中溶出度測定法第二法(漿法)，漿速采用100轉/分，37℃，900ml溶出液。取西曲依醇提取物分散片在上述條件下，分別于2、4、6、8、10、15、20、30、45、60分鐘定時定點取樣5毫升(同時補充同樣的介質)、45μm微孔濾膜過濾，測定溶出量，計算相對累積溶出百分率。試驗結果見下表。
表1西曲依醇提取物分散片溶出度
實例九、西曲依醇提取物泡騰片的制備西曲依醇提取物原料按如下配方制備泡騰片西曲依醇提取物60克，酒石酸4.2克，碳酸氫鈉17.5克，吐溫-801.2克，聚乙烯吡咯烷酮(PVP)3.2克，低取代羥丙基纖維素(LHPC)1.6克，硬脂酸鎂0.64克，將上述試劑充分混合，壓片，共制成1000片。每片含西曲依醇提取物60mg。
檢查取內徑1.5cm、25ml具塞刻度試管10支，精密加水2ml，置37℃±1℃水浴中5分鐘后，管中分別投入供試品1片，密塞，20分鐘內觀察最大發(fā)泡量的體積，平均發(fā)泡體積為4.6ml，少于3ml的1片。
實例十、西曲依醇提取物膠囊制備取腎蕨西曲依醇提取物50g，過80目標準篩，另取微晶纖維素200g，微粉硅膠1.5g，充分研磨混勻，過80目標準篩，1號膠囊填充，制備成1000粒。
實例十一、復方西曲依醇提取物膠囊制備取腎蕨西曲依醇提取物、桑葉提取物和苦蕎提取物各20g，加入微晶纖維素190g，微粉硅膠2.0g，充分研磨混勻，過80目標準篩，1號膠囊填充，制備1000粒。
實例十二、西曲依醇提取物糖漿制備取蔗糖600g，置1000毫升燒杯中，加800毫升蒸餾水，加熱使溶解，然后加入西曲依醇提取物20g，攪拌使溶解，冷卻置室溫，濾過，收集濾液，自濾器上添加適量蒸餾水使成1000毫升，充分混勻后，分裝于10毫升安瓿瓶，100℃滅菌30分鐘，即得。
實例十三、西曲依醇提取物對四氧嘧啶誘發(fā)的小鼠血糖升高的影響試驗方法1)、按前面描述的方法，采用腎蕨干燥葉、豌豆為原料，提取西曲依醇，獲得腎蕨提取物(A)、豌豆提取物(B)，經檢測提取物中含有西曲依醇，在提取物中添加淀粉使最終提取物中西曲依醇含量為40％。2)、小鼠80只，隨機取出20只為正常組，其余小鼠尾靜脈注射四氧嘧啶65mg/kg，按文獻方法造模，根據(jù)血糖值分為4組，其中3組分別按0.1ml/10g體重經口給予60mg/kg腎蕨提取物、60mg/kg豌豆提取物、降糖靈75mg/kg，正常組及模型組給予等體積的蒸餾水，連續(xù)7天。以葡萄糖氧化酶法測定血糖。
試驗結果與正常組相比，對照組小鼠血糖極顯著升高(升高312.7mg/dl)。與對照組相比，降糖靈75mg/kg組(降低152.8mg/dl)、腎蕨提取物組(降低110.6mg/dl)和豌豆提取物組(降低195.2mg/dl)均能明顯降低四氧嘧啶誘發(fā)的高血糖。
實例十四、葡萄糖誘發(fā)的小鼠血糖升高試驗試驗方法取小鼠120只，隨機分為6組，其中4組分別按0.1ml/10g體重經口給予60mg/kg腎蕨提取物(含西曲依醇40％)和60mg/kg豌豆提取物(含西曲依醇40％)，正常組及對照組給予等體積的蒸餾水，連續(xù)7天。除正常組外，其余各組腹腔注射葡萄糖2g/kg，正常組注射等體積的生理鹽水，注射后30、60、90、120分鐘，小鼠眼眶后靜脈叢取血，分離血清，以葡萄糖氧化酶法測定血糖。
試驗結果與正常組相比，對照組小鼠腹腔注射葡萄糖后30、60、90、120分鐘，血糖極顯著升高。與對照組相比，腎蕨提取物組和豌豆提取物組在腹腔注射葡萄糖后30、60、90、120分鐘，顯著降低葡萄糖誘發(fā)的高血糖，其中90分鐘時，腎蕨提取物組降低15.5mg/dl，豌豆提取物組降低14.2mg/dl。
實例十五、口服給藥急性毒性初步試驗實驗方法取正常小鼠40只，雌雄各半，分為兩組，分別給予腎蕨提取物、豌豆提取物，按800mg/kg一次灌服，觀察動物的反應，7天后處死，肉眼觀察各臟器。結果動物無一死亡，健康情況良好、皮毛光澤、眼紅明亮、活動度好。7天后處死小鼠，肉眼觀察主要臟器均無異常。
權利要求
1.一種從腎蕨、豌豆、蕎麥、紅豆杉等植物中提取的具有防治糖尿病及其并發(fā)癥的提取物，其特征在于主要有效成分為西曲依醇(5-O-甲基-myo-肌醇)，其含量可在1％～99％之間。
2.根據(jù)權利要求1，所述的腎蕨包括腎蕨(Nephrolepis auriculata(L.)Trimen)、雙齒腎蕨(N.biseroata(Sw.)Schott.)、高大腎蕨(N.exaltata(Sw.)Schott.)、毛葉腎蕨(N.hirsutula(Forst.)Presl)、迷你腎蕨(N.cordifolia)、波士頓腎蕨(N.exaltata cv.Bostoniensis)等腎蕨屬植物。
3.根據(jù)權利要求1，所述的豌豆包括白花豌豆(Pisum sativum L.)，紫花豌豆(Pisum sativum arvensel)、軟莢豌豆(Pisum sativumvar.macrocarpum Ser.)、谷實豌豆(Pisum sativum var.arrense)、早生矮豌豆(Pisum sativum var.humile)等豌豆屬植物的種子。
4.根據(jù)權利要求1，所述的紅豆杉包括曼地亞紅豆杉(Taxus media)、或太平洋紅豆杉(Taxus brevifolia Nutt.)、加拿大紅豆杉(TaxusCanadensis)、歐洲短葉紅豆杉(Taxus baccata)等品種。
5.根據(jù)權利要求1，所述的蕎麥包括甜蕎(Fagopylrum esculentumMoench.)、苦蕎[F.tatarium(L.)Gaertn.]、翅蕎(F.emarginatumMitissner)、米蕎(Fagopyrum sp.)。
6.一種從腎蕨、豌豆、蕎麥、紅豆杉等植物中提取具有抗糖尿病的提取物的方法，所述方法包括用溶劑提取，得浸膏，將浸膏經兩相萃取、柱層析，收集含有西曲依醇的流份，經濃縮、過濾、干燥，得到植物提取物的粉末。
7.根據(jù)權利要求6的方法，其特征在于提取所用的有機溶劑是不同濃度的甲醇、乙醇、丙酮或它們的混合物。
8.根據(jù)權利要求6的方法，其特征在于兩相萃取所用的溶劑是水不相溶性有機溶劑，包括但不僅限于乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、乙醚。
9.根據(jù)權利要求6的方法，其特征在于所述層析為大孔樹脂柱層析、葡萄糖G或改性葡聚糖柱層析、纖維素柱層析、活性炭柱層析。
10.根據(jù)權利要求6的方法，將所得到的植物提取物的粉末用甲醇、乙醇、丙酮等有機溶劑進行重結晶數(shù)次，可以得到西曲依醇含量＞90％的植物提取物精品。
11.一種保健品、健康食品或藥品，其特征在于其中含有作為活性成分的西曲依醇，任選地以其一種可藥用鹽形式，是由其作為單一成分制備的制劑，也可以是其與一種或多種其他活性成分、賦形劑制備成的組合制劑。
12.根據(jù)權利要求11所述保健品、健康食品或藥品的單一成分制劑或組合制劑，用于預防和治療糖尿病或/和其并發(fā)癥。
13.根據(jù)權利要求12中任一項所述的藥物組合物，其特征在于西曲依醇或其鹽的含量在1％以上，其中保健品、健康食品中，西曲依醇含量優(yōu)選的在20％～60％，藥品中西曲依醇含量優(yōu)選的在60％～99％。
14.根據(jù)權利要求12的用途，其特征在于所述保健品、健康食品或藥品能顯著降糖尿病高血糖、抑制肝糖原分解和葡萄糖的吸收、降低血脂以及改善自由基代謝和保護胰島細胞，而且其毒性極低。
15.根據(jù)權利要求12的用途，其特征在于所述藥物可用于預防和治療糖尿病及其糖尿病性心腦血管方面并發(fā)癥，或其它與糖代謝紊亂有關的疾病，以及改善自由基代謝賀神經損傷。
16.根據(jù)前述任一項權利要求所述的藥物組合物，其特征在于西曲依醇可以是各種形式的可藥用鹽。其鹽包括但不僅限于枸櫞酸鹽、酒石酸鹽、醋酸鹽、乳酸鹽，鈉鹽、鉀鹽，鈣鹽，銨鹽、鎂鹽，鐵鹽、鋅鹽、鋁鹽等。
17.根據(jù)前述任一項權利要求所述的組合物，其特征在于其可制備成適宜于口服形式的保健品、健康食品或藥品的各種劑型，如片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液、糖漿、滴丸等，也可以是注射形式的制劑，如注射液、粉針、凍干粉針等，還可以是各種形式的外用制劑，例如透皮制劑、膏藥等，同時包括以上各種劑型的緩釋制劑或者靶向制劑。
18.根據(jù)前述任一項權利要求所述的應用，其特征在于保健品、健康食品或藥品中的單位劑量是含有1～1000mg的西曲依醇的單一成分制劑或復方制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從腎蕨、豌豆、蕎麥、紅豆杉等植物中提取西曲依醇(5－O－甲基－myo－肌醇)的方法以及由該方法所得的提取物的應用。采用此方法從這4種植物中提取得到的提取物均含有西曲依醇，制備成的保健品、健康食品和藥品可用于預防和治療糖尿病及其并發(fā)癥。這些保健品、健康食品和藥品的制劑形式可以是口服制劑、也可以是注射制劑。這些保健品、健康食品或藥品的制劑中，西曲依醇(5－O－甲基－myo－肌醇)的含量在1％～99％之間。
文檔編號A61P3/00GK1957992SQ200510100728
公開日2007年5月9日 申請日期2005年11月1日 優(yōu)先權日2005年11月1日
發(fā)明者孫明杰, 王霆 申請人:廣州威爾曼新藥開發(fā)中心有限公司, 孫明杰, 王霆