專(zhuān)利名稱(chēng)：一種治療腦中風(fēng)的中藥組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域，特別涉及一種能夠治療腦中風(fēng)的藥物組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
腦中風(fēng)是指由于各種腦血管病變引起的，以急性起病和腦功能缺失為共同特征的最常見(jiàn)的神經(jīng)科疾病，是因?yàn)槌霈F(xiàn)了腦組織的缺血缺氧或者出血，根源在腦子的血管病變，包括了栓塞、血栓、供血不足、出血等。腦中風(fēng)有著高發(fā)病、高死亡、高致殘，主要癥狀包括偏癱、偏身感覺(jué)障礙(麻木)、語(yǔ)言障礙、智力障礙，這些都影響著患者及其家屬的生活質(zhì)量。據(jù)報(bào)道，腦中風(fēng)的發(fā)生率隨著經(jīng)濟(jì)和社會(huì)的發(fā)展而步步高升，占總死亡人數(shù)的百分之十六點(diǎn)八，幾乎每六名死亡者中便有一人是死于腦中風(fēng)。中風(fēng)的發(fā)生率與年齡成正比，一般而言，超過(guò)五十歲以上，發(fā)生率就逐漸增加，死亡率亦升高，且在天氣比較寒冷的季節(jié)，腦中風(fēng)發(fā)生率就升高，其中以每年十一月至翌年三月間的發(fā)生率最高。據(jù)估計(jì)，腦中風(fēng)的生還者只有十分之一可以恢復(fù)工作，十分之四有輕度殘障，但還可以自理起居飲食，另十分之四有嚴(yán)重后遺癥需人照料，剩下的十分之一可能需要終生住在醫(yī)院。引起腦中風(fēng)的原因很多，高血壓是長(zhǎng)期性的疾病，血壓忽高忽低均可能引起腦出血和腦缺血；血脂肪過(guò)高，使動(dòng)脈發(fā)生粥狀硬化、失去彈性，血流易凝固，形成血栓，引起腦中風(fēng)；其它如糖尿病、肥胖、煙酒、心臟病等等，也都是可能的原因。目前治療腦中風(fēng)的中藥組合物很多，對(duì)治療腦中風(fēng)都有一定的效果，但是它們都存在著療效不顯著、治療時(shí)間長(zhǎng)、治愈率低的問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題在于，提供一種對(duì)治療腦中風(fēng)具有療效顯著、治療程短、治愈率高的中藥組合物。
本發(fā)明的另一個(gè)目的在于，提供一種制備上述中藥組合物的方法。
本發(fā)明的目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，
一種治療腦中風(fēng)的中藥組合物，其特征在于，其包括如下活性組分石菖蒲、川芎、冰片。上述活性組分的重量配比為石菖蒲50-500、川芎50-500、冰片1-10。優(yōu)選重量配比石菖蒲150、川芎150、冰片4。
所述中藥組合物還包括如下重量配比的輔料聚乙二醇60005-50、聚乙二醇4000 5-50、聚山梨酯-80 0.5-3.5。優(yōu)選重量配比聚乙二醇6000 16.66、聚乙二醇4000 11.1、聚山梨酯-80 1.74。
上述治療腦中風(fēng)的中藥組合物的制備方法為按上述配比準(zhǔn)備好原料后，取石菖蒲、川芎用二氧化碳超臨界萃取或水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油，加入冰片、輔料基質(zhì)，制成臨床可接受的藥劑學(xué)上所說(shuō)的任何一種劑型。
石菖蒲和冰片是常用的芳香開(kāi)竅藥。石菖蒲開(kāi)竅豁痰、醒神益智；冰片醒神開(kāi)竅、清熱止痛。石菖蒲對(duì)CNS具有明確的作用，對(duì)于臨床上不同原因形成的腦水腫和腦性昏迷具有良好療效，能迅速消除意識(shí)障礙和神經(jīng)精神癥狀；具有明顯抗驚厥、促進(jìn)小鼠學(xué)習(xí)記憶、提高耐缺氧能力、中樞鎮(zhèn)靜作用和解熱鎮(zhèn)痛作用。研究表明，石菖蒲揮發(fā)油是其醒腦開(kāi)竅和鎮(zhèn)靜、抗驚厥的主要組分。石菖蒲揮發(fā)油中含幾十種成分，主要為β-細(xì)辛醚及α-細(xì)辛醚。國(guó)外報(bào)道細(xì)辛醚能保護(hù)腦皮質(zhì)細(xì)胞，減輕由天門(mén)冬氨酸(NMDA)或谷氨酸(Glu)引起的神經(jīng)毒性；能降低血脂、抗血小板聚集、抗血栓形成。以石菖蒲為主制成的復(fù)方制劑在治療中風(fēng)腦水腫方面效果顯著，并能改善實(shí)驗(yàn)性腦水腫神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞、毛細(xì)血管的受損程度。
冰片又名龍腦?！侗静菅芰x》記載“龍腦，此物大通利關(guān)膈熱塞，其清香為百藥之先，大人小兒風(fēng)涎壅，及暴得驚熱，甚濟(jì)用?！北焉耖_(kāi)竅、清熱止痛，用于治療熱病神昏、痰熱內(nèi)閉等癥。有報(bào)道大鼠灌服冰片制劑后能明顯提高慶大霉素在腦內(nèi)的濃度，增加血清中慶大霉素的濃度，且能增強(qiáng)伊文氏藍(lán)對(duì)腦組織的藍(lán)染程度，提示冰片有改善(提高)血腦屏障通透性的作用。
川芎為傘形科植物川芎的干燥根莖，具有活血行氣、祛風(fēng)止痛、開(kāi)郁燥濕等功效。中醫(yī)藥理論認(rèn)為川芎“辛香走竄而行氣，活血祛瘀以止血，上行頭目而祛風(fēng)，下入血海以調(diào)經(jīng)。并外徹皮毛，旁通四肢，為血中之氣藥”。
本發(fā)明將具有開(kāi)竅豁痰、醒神益智的石菖蒲和活血行氣、祛風(fēng)止痛、開(kāi)郁燥濕的川芎按照一定配比混合后進(jìn)行萃取揮發(fā)油，然后加入醒神開(kāi)竅、清熱止痛的冰片和其他輔料基質(zhì)得到的中藥組合物，對(duì)CNS具有明確的作用，對(duì)于臨床上不同原因形成的腦水腫和腦性昏迷具有良好療效，能迅速消除意識(shí)障礙和神經(jīng)精神癥狀；具有明顯抗驚厥、促進(jìn)小鼠學(xué)習(xí)記憶、提高耐缺氧能力、中樞鎮(zhèn)靜作用和解熱鎮(zhèn)痛作用；能保護(hù)腦皮質(zhì)細(xì)胞，減輕由天門(mén)冬氨酸(NMDA)或谷氨酸(Glu)引起的神經(jīng)毒性；能降低血脂、抗血小板聚集、抗血栓形成，有改善(提高)血腦屏障通透性的作用；改善實(shí)驗(yàn)性腦水腫神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞、毛細(xì)血管的受損程度。
下面結(jié)合藥效學(xué)和毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)，介紹本發(fā)明在治療腦中風(fēng)的效果。
藥效學(xué)試驗(yàn)1、抗凝血作用和大鼠血栓形成實(shí)驗(yàn)1.1動(dòng)物NIH小鼠，動(dòng)物合格證號(hào)2001A044；粵監(jiān)證號(hào)2004A018；SD大鼠，動(dòng)物合格證號(hào)2001A026；粵監(jiān)證號(hào)2004A021。所有動(dòng)物均購(gòu)自廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。
試驗(yàn)環(huán)境動(dòng)物房保持通風(fēng)、干燥、室溫22-25℃，濕度50-70％，鼠料定量飼養(yǎng)，自由飲水。
1.2藥物與劑量(1)、受試藥物醒神益智滴丸，麗珠醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司提供，其包括如下活性組分石菖蒲、川芎、冰片。
根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，小鼠最低有效劑量0.45g/kg體重；大鼠最低有效劑量0.21g/kg體重。低、中、高劑量比為1∶2∶4，小鼠相應(yīng)中、高劑量分別為0.90g/kg和1.8g/kg；大鼠相應(yīng)中、高劑量分別為0.42g/kg和0.84g/kg，灌胃給藥，每日兩次，上、下午各一次(2)、陽(yáng)性對(duì)照藥阿斯匹林腸溶片杭州恩華藥業(yè)集團(tuán)有限責(zé)任公司。灌胃給藥，每日二次，上、下午各一次，每次劑量為小鼠61mg/kg體重，大鼠28.2mg/kg體重。
(3)、陰性對(duì)照藥小鼠2.25％基質(zhì)，大鼠2.1％基質(zhì)(基質(zhì)用本發(fā)明組分中除去活性成分石菖蒲揮發(fā)油、川芎揮發(fā)油、冰片的輔料配制)。
給藥方法灌胃。
1.3數(shù)據(jù)及統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用x±SD表示，用SPSS 10.0軟件ANOVA方差分析進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。
1.4實(shí)驗(yàn)方法
1.4.1抗凝血作用取健康NIH小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分5組醒神益智滴丸高、中、低劑量組、陽(yáng)性對(duì)照組(給阿斯匹林，0.12g/kg.d)、陰性對(duì)照組(給等體積基質(zhì))，每組12只。灌胃給藥7d，分2次/d給藥，第7d給藥30min后用內(nèi)徑為1mm的玻璃毛細(xì)管插入小鼠內(nèi)眥眼球后靜脈叢取血，至毛細(xì)管血柱達(dá)5cm。每隔30s折斷毛細(xì)玻管1小段，檢查有無(wú)出現(xiàn)血凝絲。計(jì)算從毛細(xì)玻管采血到出現(xiàn)血凝絲的時(shí)間，即為凝血時(shí)間，與對(duì)照組進(jìn)行比較(見(jiàn)表1)。
表1醒神益智滴丸對(duì)小鼠凝血時(shí)間的影響(X±S)

與陰性對(duì)照組比*P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001結(jié)果提示醒神益智滴丸能延長(zhǎng)小鼠的凝血時(shí)間，與陰性對(duì)照組比較有顯著性差別，說(shuō)明該藥有抗凝血作用；與陽(yáng)性對(duì)照組比較，凝血時(shí)間無(wú)顯著性差別，說(shuō)明在抗凝血方面與現(xiàn)有藥品的療效相當(dāng)；另外，醒神益智滴丸有隨劑量增大作用增強(qiáng)的趨勢(shì)。
1.4.2大鼠血栓形成實(shí)驗(yàn)取健康SD大鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分5組醒神益智滴丸高、中、低劑量組、陽(yáng)性對(duì)照組(給阿斯匹林，0.0564g/kg.d)、陰性對(duì)照組(給等體積基質(zhì))，每組10只。灌胃給藥7d，分2次/d給藥，末次給藥30min后，大鼠用10％水合氯醛(3ml/kg體重)腹腔注射麻醉，取仰臥位，于腹正中線切開(kāi)皮膚約3cm，從腹白線打開(kāi)腹腔，找到下腔靜脈并分離，于左腎靜脈下方用粗線結(jié)扎下腔靜脈，縫合腹壁。2h后，重新打開(kāi)腹腔，在結(jié)扎下方2cm處用止血鉗夾住血管，將該段管腔內(nèi)血液吸盡，然后縱行剪開(kāi)管腔，觀察有無(wú)血栓形成，如有則取出60℃干燥，24h后稱(chēng)重。以血栓形成百分率和血栓重量為指標(biāo)。比較給藥組與對(duì)照組有無(wú)顯著差異(見(jiàn)表2)。
表2對(duì)大鼠血栓形成的影響(X±S，n＝10)

與陰性對(duì)照組比*P＜0.05結(jié)果提示醒神益智滴丸能降低大鼠血栓形成百分率，減少血栓重量，與陰性對(duì)照組比較有顯著性差別，說(shuō)明該藥有抑制大鼠血栓形成的作用。
2、對(duì)麻醉犬腦血管的影響2.1動(dòng)物健康雜種犬，由第二軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物房提供，動(dòng)物飼養(yǎng)合格證號(hào)SCXK(滬)20020006。體重10～13kg；性別雌雄兼用；每組動(dòng)物數(shù)犬6條。動(dòng)物總數(shù)30條2.2試驗(yàn)方法 動(dòng)物用戊巴比妥鈉靜脈麻醉(30mg·kg-1)；分離右頸總動(dòng)脈及頸外動(dòng)脈，結(jié)扎頸外動(dòng)脈后，在頸總動(dòng)脈上安放直徑為2.5～3mm的電磁流量計(jì)探頭，以MFV-1100/1200型電磁流量計(jì)記錄頸內(nèi)動(dòng)脈血流量(日本Nihon Kohden公司)；分離股動(dòng)脈，并行插管，經(jīng)壓力傳感器記錄動(dòng)脈平均血壓；針頭電極插入四肢皮下記錄標(biāo)II導(dǎo)聯(lián)心電圖，將頸內(nèi)動(dòng)脈血流量、血壓和心電信號(hào)通過(guò)PowerLab數(shù)據(jù)采集記錄分析系統(tǒng)(ML785/8S，AD Instruments，澳大利亞)輸入多導(dǎo)生理記錄儀。手術(shù)結(jié)束后，穩(wěn)定30分鐘，記錄一次各項(xiàng)指標(biāo)作為給藥前對(duì)照值，溶劑對(duì)照組灌胃給生理鹽水2ml/kg，陽(yáng)性藥對(duì)照組灌胃腦安膠囊160mg/kg。受試藥物組灌胃醒神益智滴丸，給藥后15、30、60、90、120、180分鐘分別記錄各項(xiàng)指標(biāo)值。180分鐘后處死犬，取大腦稱(chēng)重。以右頸總動(dòng)脈血流量乘以2代表全腦血流量(CBF)。腦血管阻力可用公式計(jì)算R＝BP(kPa)/[CBF(ml/min)·100g brain]。
2.3劑量設(shè)置根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，犬最低有效劑量為0.4g/kg，低、中、高劑量比為1∶3∶6，相應(yīng)中、高劑量分別為1.2g/kg和2.4g/kg。陽(yáng)性對(duì)照腦安膠囊(吉林省遼源亞?wèn)|藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)040716)，其推薦臨床劑量為1.6g/人/天，人按60kg體重計(jì)算，相應(yīng)劑量為27mg/kg/d，折算為犬的劑量為54mg/kg，設(shè)計(jì)陽(yáng)性藥劑量相當(dāng)受試藥物的中劑量，故取為160mg/kg。
2.4溶劑對(duì)照生理鹽水按2ml/kg灌胃給藥。
2.5觀察指標(biāo)及觀察時(shí)間觀察記錄頸內(nèi)動(dòng)脈血流量、血壓、心電圖、心率，觀察時(shí)間為給藥0、15、30、60、90、120、180分鐘。
2.6數(shù)據(jù)及統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用x±SD表示，用SPSS 10.0軟件ANOVA方差分析進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。
2.7試驗(yàn)結(jié)果麻醉犬在術(shù)后穩(wěn)定30min，記錄犬的心率、血壓、頸內(nèi)動(dòng)脈血流量作為給藥前對(duì)照值，然后分別灌胃醒神益智滴丸、腦安膠囊或生理鹽水，并于灌胃后15、30、60、90、120、180min分別記錄各項(xiàng)指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示(1)對(duì)腦血流量的影響溶劑對(duì)照組腦血流量15～180min有波動(dòng)，但與給藥前比較無(wú)顯著差異。醒神益智滴丸低、中、高劑量(0.4、1.2、2.4g/kg)組和陽(yáng)性對(duì)照腦安膠囊組灌胃給藥，腦血流量增加。醒神益智滴丸變化率與溶劑對(duì)照組同時(shí)間點(diǎn)比較醒神益智滴丸低劑量組(0.4g/kg)在給藥后30～60min腦血流量增加與空白對(duì)照組相比有顯著升高(P＜0.05)，90～120min時(shí)腦血流量增加具有非常顯著意義(P＜0.01)；中劑量組(1.2g/kg)及高劑量組(2.4g/kg)給藥后30～180min腦血流量增加具有非常顯著意義(P＜0.01)；腦安膠囊組給藥后60～180min腦血流量增加具有非常顯著意義(P＜0.01)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3及圖1。
(2)對(duì)腦血管阻力的影響溶劑對(duì)照組腦血管阻力15～180min有波動(dòng)，但與給藥前比較無(wú)顯著差異。醒神益智滴丸低、中、高劑量組(0.4、1.2、2.4g/kg)和腦安膠囊組灌胃給藥，腦血管阻力降低。變化率與溶劑對(duì)照組同時(shí)間點(diǎn)比較醒神益智滴丸低劑量組(0.4g/kg)在給藥后30min時(shí)腦血管阻力降低具有顯著意義(P＜0.05)，60～120min時(shí)具有非常顯著意義(P＜0.01)；中劑量組(1.2g/kg)給藥后，30～120min時(shí)腦血管阻力降低具有非常顯著意義(P＜0.01)，180min時(shí)仍有顯著意義(P＜0.05)；高劑量組(2.4g/kg)給藥后30～180min腦血管阻力降低與空白對(duì)照組相比，均有非常顯著意義(P＜0.01)；腦安膠囊組給藥后90～120min時(shí)腦血管阻力降低具有非常顯著意義(P＜0.01)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4及圖2。
(3)對(duì)血壓、心率的影響空白對(duì)照組、醒神益智滴丸中低劑量(0.4g/kg、1.2g/kg)及陽(yáng)性對(duì)照腦安膠囊組麻醉犬的血壓、心率各時(shí)間點(diǎn)略有變化，但之間無(wú)顯著性差異。醒神益智滴丸高劑量(2.4g/kg)組60～90min時(shí)血壓較空白對(duì)照組同時(shí)間點(diǎn)相比顯著降低(P＜0.01及P＜0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5、6及圖3、4。
試驗(yàn)結(jié)論醒神益智滴丸灌胃低、中劑量組(0.4g/kg、1.2g/kg)對(duì)血壓、心率無(wú)顯著影響；高劑量組60～90min時(shí)血壓顯著降低，其余各時(shí)間點(diǎn)及心率與空白對(duì)照組相比無(wú)顯著影響；各劑量組均可顯著增加麻醉犬的腦血流量，降低腦血管阻力。
毒理學(xué)研究1、急性毒性按中藥新藥審批辦法中有關(guān)急性毒性試驗(yàn)研究的具體要求，對(duì)醒神益智滴丸進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)。結(jié)果醒神益智滴丸小鼠經(jīng)口灌胃LD50為5.1255g/kg，LD50的95％平均可信限為5.1255±0.1686g/kg。醒神益智滴丸小鼠安全劑量為4.348g/kg，相當(dāng)于臨床用藥的348倍，在該劑量下，動(dòng)物呼吸較均勻，活動(dòng)稍有減少，其它一般狀態(tài)良好，進(jìn)食飲水正常，體重增加，無(wú)明顯的毒性反應(yīng)癥狀，動(dòng)物無(wú)一例死亡。說(shuō)明醒神益智滴丸雖有毒性反應(yīng)，但在該劑量下，沒(méi)有明顯的急性毒性作用。
2、長(zhǎng)期毒性大鼠連續(xù)3個(gè)月灌胃給予醒神益智滴丸。受試大鼠分為四組，每組20只，雌雄各半。高、中、低劑量組給藥劑量分別為每日1.4g/kg(體重)、0.7g/kg(體重)和0.35g/kg(體重)，對(duì)照組給予基質(zhì)。每日觀察一般狀況，每周測(cè)量體重1次，以調(diào)整給藥量。給藥3個(gè)月后，每組處死2/3只動(dòng)物進(jìn)行病理、血液學(xué)檢查、血液生化學(xué)檢查。剩余動(dòng)物停藥后繼續(xù)觀察2周，同樣進(jìn)行病理、血液學(xué)檢查、血液生化學(xué)檢查。結(jié)果高劑量組有些動(dòng)物活動(dòng)減少、毛發(fā)松散，精神狀態(tài)稍差；其它各組大鼠活動(dòng)基本正常，未出現(xiàn)明顯毒性癥狀或死亡。血液學(xué)檢查、血液生化學(xué)檢查及病理學(xué)檢查等結(jié)果表明連續(xù)給予醒神益智滴丸3個(gè)月后，高劑量組白細(xì)胞總數(shù)(WBC)、淋巴細(xì)胞數(shù)(LYM)和血糖(Glu)升高，血紅蛋白(HGB)降低(P＜0.05)，其余各項(xiàng)血液學(xué)、血液生化學(xué)檢查未見(jiàn)異常；病理學(xué)檢查，高劑量組2只大鼠心肌有灶狀水腫、空泡變性，其中1只伴纖維化瘢痕形成，其余各器官未見(jiàn)異常；病理解剖及器官指數(shù)未見(jiàn)異常，中、低劑量組未見(jiàn)異常；
表3醒神益智滴丸對(duì)麻醉犬腦血流量的影響(ml/min，x±SD，n＝6)

變化率與溶劑對(duì)照組同時(shí)間點(diǎn)比較，*P＜0.05，**P＜0.01
表4醒神益智滴丸對(duì)麻醉犬腦血管阻力的影響(kPa·min/ml·100g brain，x±SD，n＝6)

變化率與溶劑對(duì)照組同時(shí)間點(diǎn)比較，*P＜0.05，**P＜0.01
表5醒神益智滴丸對(duì)麻醉犬平均血壓的影響(kPa，x±SD，n＝6)

變化率與溶劑對(duì)照組同時(shí)間點(diǎn)比較，*P＜0.05，**P＜0.01
表6醒神益智滴丸對(duì)麻醉犬心率的影響(次/min，x±SD，n＝6)

變化率與溶劑對(duì)照組同時(shí)間點(diǎn)比較，*P＜0.05
停藥2周后，各組血液學(xué)、血液生化學(xué)檢查、病理解剖、組織學(xué)檢查及器官指數(shù)未見(jiàn)異常。說(shuō)明醒神益智滴丸在高劑量下雖有毒性反應(yīng)，但在該劑量下，沒(méi)有明顯的毒性作用；在中低劑量下，沒(méi)有毒性作用。
3、ICR小鼠骨髓細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)采用ICR小鼠體內(nèi)染色體畸變?cè)囼?yàn)方法，檢測(cè)了醒神益智滴丸對(duì)染色體的損傷作用，試驗(yàn)設(shè)2.0、1.0和0.5g/kg三個(gè)劑量組(分別相當(dāng)于小鼠LD50的1/2.5、1/5、1/10)，經(jīng)口一次給藥。結(jié)果顯示在受試劑量下ICR小鼠骨髓細(xì)胞染色體畸變率與對(duì)照組無(wú)顯著性差異，說(shuō)明該藥對(duì)ICR小鼠骨髓細(xì)胞染色體無(wú)致畸變作用。
4、嚙齒類(lèi)動(dòng)物微核試驗(yàn)按《新藥(西藥)臨床前研究指導(dǎo)原則匯編》的設(shè)計(jì)要求，應(yīng)用小鼠骨髓微核試驗(yàn)方法對(duì)醒神益智滴丸進(jìn)行致突變性研究。試驗(yàn)設(shè)2.0、1.0和0.5g/kg三個(gè)劑量組(分別相當(dāng)于小鼠LD50的1/2.5、1/5、1/10)，一次灌胃給藥。結(jié)果顯示在所設(shè)劑量下，醒神益智滴丸對(duì)NIH小鼠的微核誘發(fā)率(‰)與陰性對(duì)照組比較均無(wú)顯著差異(P＞0.05)，表明受試物醒神益智滴丸對(duì)NIH小鼠無(wú)誘發(fā)骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核的效應(yīng)。
5、微生物回復(fù)突變?cè)囼?yàn)按《新藥(西藥)臨床前研究指導(dǎo)原則匯編》的設(shè)計(jì)要求，選用組氨酸缺陷型鼠傷寒沙門(mén)氏菌(S.typhimurium)TA97、TA98、TA100、TA102及TA1535為指示菌株，采用標(biāo)準(zhǔn)平板摻入法檢測(cè)了醒神益智滴丸的致突變性。設(shè)5000、500、50、5、0.5μg/皿五個(gè)劑量組，試驗(yàn)在加和不加代謝活化系統(tǒng)(S9)條件下進(jìn)行。結(jié)果顯示，在5000μg/皿受試劑量下，對(duì)TA97和TA98菌株有一定的抑菌作用。受試物在不加代謝活化劑(S9)時(shí)，在各受試劑量下對(duì)TA98的回變菌落數(shù)均有明顯增加，但加入代謝活化劑(S9)時(shí)回變菌落數(shù)與對(duì)照無(wú)明顯差異，說(shuō)明藥物可經(jīng)代謝解毒。受試劑量下對(duì)其他各菌株在加或不加代謝活化劑(S9)條件下均與陰性對(duì)照組的回變數(shù)相近。表明醒神益智滴丸在不加S9時(shí)對(duì)TA98具有致突變性。但在加入代謝活化劑(S9)條件下無(wú)致突變性。
6、致畸敏感期毒性試驗(yàn)應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)致畸試驗(yàn)方法，檢測(cè)醒神益智滴丸對(duì)受孕SD大鼠在致畸敏感期的毒性。實(shí)驗(yàn)設(shè)3個(gè)劑量組，即1.0g·kg-1，0.5g·kg-1和0.25g·kg-1體重(相當(dāng)于小鼠LD50的1/5-20/1和臨床推薦劑量540mg/人/日，9.33mg/kg的25-100倍)和1個(gè)陰性對(duì)照(溶劑)，于GD6至GD15器官發(fā)生敏感期，采用灌胃給藥，GD20剖殺并觀察有無(wú)大體畸形、骨骼畸形及內(nèi)臟畸形。結(jié)果醒神益智滴丸在高劑量(1.0g·kg-1)時(shí)母鼠增重降低、活胎率降低和死胎率增高。對(duì)胎鼠性別比無(wú)明顯影響；也未見(jiàn)明顯的大體畸形、骨骼畸形和內(nèi)臟畸形。結(jié)論醒神益智滴丸在1.0g·kg-1劑量時(shí)，對(duì)大鼠有母體毒性和胚胎毒性，在0.5g·kg-1和0.25g·kg-1以下劑量未觀察到母體毒性和胚胎毒性，受試劑量下均未觀察到有明顯的致畸作用。


圖1醒神益智滴丸對(duì)麻醉犬腦血流量的影響；圖2醒神益智滴丸對(duì)麻醉犬腦血管阻力的影響；圖3醒神益智滴丸對(duì)麻醉犬血壓的影響；圖4醒神益智滴丸對(duì)麻醉犬心率的影響；具體實(shí)施方式
實(shí)施例一按照重量配比取石菖蒲50g、川芎50g、冰片1g、聚乙二醇6000 5g、聚乙二醇4000 5g、聚山梨酯-80 0.5g。準(zhǔn)備好原料后，取石菖蒲、川芎用二氧化碳超臨界萃取或水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油，加入冰片、輔料基質(zhì)，制成滴丸。
實(shí)施例二按照重量配比取石菖蒲500g、川芎500g、冰片10g、聚乙二醇6000 50g、聚乙二醇4000 50g、聚山梨酯-80 3.5g。準(zhǔn)備好原料后，取石菖蒲、川芎用二氧化碳超臨界萃取或水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油，加入冰片、輔料基質(zhì)，制成凝膠。
實(shí)施例三按照重量配比取石菖蒲150g、川芎150g、冰片4g、聚乙二醇6000 16.7g、聚乙二醇4000 11.1g、聚山梨酯-801.74g。準(zhǔn)備好原料后，取石菖蒲、川芎用二氧化碳超臨界萃取或水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油，加入冰片、輔料基質(zhì)，制成顆粒。
實(shí)施例四按照重量配比取石菖蒲150g、川芎150g、冰片4g、聚乙二醇6000 16.7g、聚乙二醇4000 11.1g、聚山梨酯-801.74g。準(zhǔn)備好原料后，取石菖蒲、川芎用二氧化碳超臨界萃取或水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油，加入冰片、輔料基質(zhì)，制成膠囊。
權(quán)利要求
1.一種治療腦中風(fēng)的中藥組合物，其特征在于，其包括如下活性組分石菖蒲、川芎、冰片。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療腦中風(fēng)的中藥組合物，其特征在于，所述活性組分的重量配比為石菖蒲50-500、川芎50-500、冰片1-10。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種治療腦中風(fēng)的中藥組合物，其特征在于，所述中藥組合物還包括如下重量配比的輔料聚乙二醇6000 5-50、聚乙二醇4000 5-50、聚山梨酯-800.5-3.5。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的一種治療腦中風(fēng)的中藥組合物，其特征在于，所述活性組分的重量配比為石菖蒲150、川芎150、冰片4。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種治療腦中風(fēng)的中藥組合物，其特征在于，所述中藥組合物還包括如下重量配比的輔料聚乙二醇6000 16.66、聚乙二醇4000 11.1、聚山梨酯-801.74。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的一種治療腦中風(fēng)的中藥組合物，其特征在于，所述中藥組合物為臨床可接受的藥劑學(xué)上所說(shuō)的任何一種劑型。
7.制備權(quán)利要求1-6中任意一頂所述的一種治療腦中風(fēng)的中藥組合物的方法，其特征在于，按上述配比準(zhǔn)備好原料后，取石菖蒲、川芎用二氧化碳超臨界萃取或水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油，加入冰片、輔料基質(zhì)，制成臨床可接受的藥劑學(xué)上所說(shuō)的任何一種劑型。
全文摘要
一種治療腦中風(fēng)的中藥組合物，其包括如下活性組分石菖蒲、川芎、冰片。上述活性組分的重量配比為石菖蒲50－500、川芎50－500、冰片1－10。優(yōu)選重量配比石菖蒲150、川芎150、冰片4。本發(fā)明將具有開(kāi)竅豁痰、醒神益智的石菖蒲和活血行氣、祛風(fēng)止痛、開(kāi)郁燥濕的川芎按照一定配比混合后進(jìn)行萃取揮發(fā)油，然后加入醒神開(kāi)竅、清熱止痛的冰片和其他輔料基質(zhì)得到的中藥組合物，對(duì)CNS具有明確的作用，能迅速消除意識(shí)障礙和神經(jīng)精神癥狀；具有明顯抗驚厥、促進(jìn)小鼠學(xué)習(xí)記憶、提高耐缺氧能力、中樞鎮(zhèn)靜作用和解熱鎮(zhèn)痛作用；有改善(提高)血腦屏障通透性的作用；改善實(shí)驗(yàn)性腦水腫神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞、毛細(xì)血管的受損程度。
文檔編號(hào)A61K31/045GK1799596SQ20051010052
公開(kāi)日2006年7月12日 申請(qǐng)日期2005年10月24日 優(yōu)先權(quán)日2005年10月24日
發(fā)明者解荷芝, 方永奇, 曹暉, 周俊, 孫虹 申請(qǐng)人:麗珠醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司