專利名稱：大蒜體胚誘導(dǎo)的培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于大蒜組織培養(yǎng)技術(shù)，特別是從大蒜胚性愈傷組織誘導(dǎo)出體細胞胚的培養(yǎng)基。
背景技術(shù)：
植物組織培養(yǎng)中誘導(dǎo)外植體細胞分裂形成的愈傷組織，一類是疏松愈傷組織(非胚性愈傷組織)，一類是胚性愈傷組織。只有胚性愈傷組織在適宜的條件下，才可以繼續(xù)再分化，形成胚狀體，進而形成芽、根，再生出完整植株。胚狀體亦稱體細胞胚或體胚，是由體細胞產(chǎn)生的類似胚胎的結(jié)構(gòu)，其發(fā)育過程與合子胚類似，分為原胚、球形胚、心形胚、魚雷形胚及子葉胚等幾個階段。胚狀體再生系統(tǒng)不僅是最理想的基因轉(zhuǎn)化受體系統(tǒng)，也是組織培養(yǎng)快速繁殖的有效方法之一。人們利用胚狀體發(fā)生這一快速繁殖方式，在其表面包以一層特制的有機物質(zhì)等，即所謂“人工種子”，為快速生產(chǎn)種苗提供了新的途徑，但目前從大蒜胚性愈傷組織誘導(dǎo)出體細胞胚的誘導(dǎo)率較低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服大蒜莖尖組織培養(yǎng)中由胚性愈傷組織體胚誘導(dǎo)率低的問題，提供一種大蒜體胚高效誘導(dǎo)的培養(yǎng)基，用于大蒜的科研和生產(chǎn)。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下該大蒜體胚誘導(dǎo)的培養(yǎng)基是將6-芐基嘌呤6-BA、2，4-二氯苯氧乙酸2，4-D、水解酪蛋白CH、蔗糖、瓊脂溶解于基本培養(yǎng)基MS中而成的，其各組份的用量為以1L基本培養(yǎng)基MS加入量計MS 1L6-BA0.1-1.0mg2，4-D 0.1-1.0mgCH 200mg蔗糖20g瓊脂6g。
優(yōu)選為
MS 1L6-BA0.1mg2，4-D 1.0mgCH 200mg蔗糖20g瓊脂6g上述原料中，MS為基本培養(yǎng)基，提供培養(yǎng)組織生長發(fā)育所需的無機營養(yǎng)元素和部分有機營養(yǎng)元素；6-芐基嘌呤6-BA和2，4-二氯苯氧乙酸2，4-D是植物生長調(diào)節(jié)劑，具有促進培養(yǎng)組織形成體胚的作用；水解酪蛋白CH提供有機多肽類營養(yǎng)元素；蔗糖提供培養(yǎng)組織生長發(fā)育所的碳素營養(yǎng)；瓊脂的主要作用是固化培養(yǎng)基，起支撐作用。
上述各組份的用量是發(fā)明人在理論分析的基礎(chǔ)上進行大量試驗摸索總結(jié)得出的，按上述比例配制培養(yǎng)基，具有較好誘導(dǎo)效果。
上述培養(yǎng)基的制作方法是將6-BA、2，4-D、CH、蔗糖、瓊脂溶解于MS，攪拌均勻，PH值調(diào)整為5.8-6.0之間即可。
本發(fā)明的積極效果是利用本培養(yǎng)基大蒜體胚的誘導(dǎo)率可達到72.0％，一個莖尖分生組織可以誘導(dǎo)出15個體胚。
具體實施例方式
以下通過實施例進一步闡述本發(fā)明的有益效果實施例1培養(yǎng)基配方MS 1L6-BA1.0mg2，4-D 0.1mgCH 200mg蔗糖20g瓊脂6g實施例2培養(yǎng)基配方MS1L
6-BA1.0mg2，4-D 1.0mgCH 200mg蔗糖20g瓊脂6g實施例3培養(yǎng)基配方MS 1L6-BA0.1mg2，4-D 1.0mgCH 200mg蔗糖20g瓊脂6g試驗方法及結(jié)果將上述實施例的培養(yǎng)基用于大蒜體胚的誘導(dǎo)試驗材料大蒜徐州白蒜莖尖分生組織誘導(dǎo)出的胚性愈傷組織。
方法將大蒜徐州白蒜莖尖分生組織誘導(dǎo)出的胚性愈傷組織轉(zhuǎn)管接種到培養(yǎng)基上，胚性愈傷組織與培養(yǎng)基要結(jié)合緊密，每試管接種1個胚性愈傷組織，置于25℃、光強約2000Lux、每日光照12小時，培養(yǎng)4周后統(tǒng)計結(jié)果見下表大蒜體胚誘導(dǎo)率和體胚數(shù)量(4周) 由表中結(jié)果分析得出如下結(jié)論實施例1中體胚的誘導(dǎo)率為36.0％，平均每塊愈傷組織出胚數(shù)為8.6個；實例2中體胚的誘導(dǎo)率為42.0％，平均每塊愈傷組織出胚數(shù)為11.5個；實施例3中體胚的誘導(dǎo)率為72.0％，平均每塊愈傷組織出胚數(shù)為15.0個。
綜合以上分析，得出大蒜莖尖培養(yǎng)胚性愈傷組織體胚誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為MS 1L6-BA0.1mg2，4-D 1.0mgCH 200mg蔗糖20g瓊脂6g。
權(quán)利要求
1.一種大蒜體胚誘導(dǎo)的培養(yǎng)基，其特征是，它是將6-芐基嘌呤6-BA、2，4-二氯苯氧乙酸2，4-D、水解酪蛋白CH、蔗糖、瓊脂溶解于基本培養(yǎng)基MS中而成的，其各組份的用量為以1L基本培養(yǎng)基MS加入量計MS1L6-BA 0.1-1.0mg2，4-D0.1-1.0mgCH200mg蔗糖 20g瓊脂 6g。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大蒜體胚誘導(dǎo)的培養(yǎng)基，其特征是各組份的用量為MS1L6-BA 0.1mg2，4-D1.0mgCH200mg蔗糖 20g瓊脂 6g。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從大蒜胚性愈傷組織誘導(dǎo)出體胚細胞的培養(yǎng)基。它是將6－芐基嘌呤6－BA、2，4－二氯苯氧乙酸2，4－D、水解酪蛋白CH、蔗糖、瓊脂溶解于基本培養(yǎng)基MS中制成，其優(yōu)點是誘導(dǎo)率高.適用于大蒜的工廠化生產(chǎn)。
文檔編號A01H4/00GK1884489SQ20061008591
公開日2006年12月27日 申請日期2006年5月26日 優(yōu)先權(quán)日2006年5月26日
發(fā)明者張允剛 申請人:江蘇徐淮地區(qū)徐州農(nóng)業(yè)科學研究所