一種梨樹誘導(dǎo)體胚形成培養(yǎng)基的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種梨樹離體葉片的誘導(dǎo)體胚形成培養(yǎng)基，屬于植物學(xué)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]梨樹是薔薇科梨屬，多年生落葉果樹，喬木，在全球均有廣泛分布，全世界約有35個原生種，野生分布于歐、亞及非洲，分類上分為東方梨及西洋梨兩大類。中國梨栽培面積和產(chǎn)量僅次于蘋果。
[0003]梨樹為一種具有較高開發(fā)價值的樹種，目前，通常采用的繁殖方式為扦插繁殖，而此種繁殖方式易感染葉斑病等真菌性病害，春夏季其又易受蚜蟲危害，其病毒嚴(yán)重，葉片花斑易脫落，良種化程度降低；而劣質(zhì)種苗的使用又導(dǎo)致梨樹固有的優(yōu)良特性日益喪失，這在一定程度上約束了該樹種的發(fā)展和推廣應(yīng)用，因此，選擇、繁育優(yōu)良梨樹品系成為一個十分突出的生產(chǎn)問題，組培快繁是梨樹良種產(chǎn)業(yè)化的一種有效途徑，相關(guān)方面的報道也較多，但有關(guān)梨樹葉片直接誘導(dǎo)體細(xì)胞胚及再生快繁系統(tǒng)的技術(shù)研究未見有成功的報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種能夠有效為生產(chǎn)上提供量大質(zhì)優(yōu)、提純復(fù)壯的梨樹苗木的梨樹誘導(dǎo)體胚形成培養(yǎng)基。
[0005]為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的:
一種梨樹誘導(dǎo)體胚形成培養(yǎng)基，其特征在于，包括1/2改良MS+ 0.5?1.0 mgL 'θ-ΒΑ+ 0.3 ?0.5mgL J2, 4-D + 0.5 ?1.0mgL JNAA + 6.0 ?7.0gL 1 瓊脂 + 30gL 1 蔗糖 +0.1 ?0.3% phytagel,且 pH 值為 5.8 ?6.0。
[0006]一種梨樹體誘導(dǎo)體胚形成培養(yǎng)基，優(yōu)選包括1/2改良MS+ 0.8 mgL 'θ-ΒΑ +
0.4mgL l2, 4-D +0.8mgL:NAA + 6.5gL 1 瓊脂 + 30gL 1 鹿糖+0.2% phytagel,且 pH 值為
6.0o
[0007]進(jìn)一步，所述的改良MS包括常量營養(yǎng)元素、微量營養(yǎng)元素和有機(jī)試劑。
[0008]更進(jìn)一步，所述的常量營養(yǎng)元素的組分和其對應(yīng)的濃度如下:
硝酸鉀1900 mg/L ；
硫酸銨1500 mg/L ；
七水硫酸鎂350mg/L ；
二水氯化鈣420 mg/L ；
無水磷酸二氫鉀185 mg/L ；
乙二胺四乙酸二鈉26.8 mg/L;
七水硫酸亞鐵15.9 mg/L ο
[0009]所述的微量營養(yǎng)元素的組分和其對應(yīng)的濃度如下:
四水硫酸錳22.5 mg/L;
硫酸鋅6.8 mg/L ； 硼酸5.4 mg/L ；
碘化鉀1.Ο mg/L ；
鉬酸鈉0.2 mg/L ；
硫酸銅0.02 mg/L ；
氯化鈷(λ 05 mg/L ο
[0010]而所述的有機(jī)試劑的組分和其對應(yīng)的濃度如下:
鹽酸硫胺素 10.0 mg/L ；
煙酸1.0 mg/L ；
鹽酸卩比卩多醇 1.0mg/L ；
肌醇100.0 mg/L ο
[0011]本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明通過改良基本培養(yǎng)基及成分、調(diào)整培養(yǎng)條件等配套措施，使得植株移栽成活率可達(dá)到96%以上，種苗生長健壯，可有效解決優(yōu)良種苗種質(zhì)退化問題，也可為生產(chǎn)上提供大量優(yōu)質(zhì)提純復(fù)壯的梨樹苗木，此外，還可為梨樹遺傳轉(zhuǎn)化或誘變育種選育新品種提供一個理想的受體體系。
【具體實施方式】
[0012]下面將結(jié)合具體實施例詳細(xì)說明本發(fā)明的【具體實施方式】:
實施例1
梨樹誘導(dǎo)體胚形成培養(yǎng)基，包括1/2改良MS+ 0.5 mgL1-BA + 0.3mgL J2, 4-D +
0.5mgL:NAA + 6.0gL 1 瓊脂 + 30gL 1 鹿糖 +0.1% phytagel,且 pH 值為 5.8。
[0013]
實施例2
梨樹誘導(dǎo)體胚形成培養(yǎng)基，包括1/2改良MS+ 1.0 mgL1-BA + 0.5mgL J2, 4-D +
1.0mgL:NAA + 7.0gL 1 瓊脂 + 30gL 1 鹿糖+0.3% phytagel,且 pH 值為 5.9。
[0014]
實施例3
梨樹體誘導(dǎo)體胚形成培養(yǎng)基，包括1/2改良MS+ 0.8 mgL1-BA + 0.4mgL J2, 4-D+0.8mgL:NAA + 6.5gL 1 瓊脂 + 30gL 1 鹿糖+0.2% phytagel,且 pH 值為 6.0。
[0015]上述實施例以實施例3為最佳實施例。
[0016]且其中上述的3個實施例中，改良MS包括常量營養(yǎng)元素、微量營養(yǎng)元素和有機(jī)試劑，其中，常量營養(yǎng)元素的組分和其對應(yīng)的濃度如下:
硝酸鉀1900 mg/L ；
硫酸銨1500 mg/L ；
七水硫酸鎂350mg/L ；
二水氯化鈣420 mg/L ；
無水磷酸二氫鉀185 mg/L ；
乙二胺四乙酸二鈉26.8 mg/L;
七水硫酸亞鐵15.9 mg/L ο
[0017]所述的微量營養(yǎng)元素的組分和其對應(yīng)的濃度如下: 四水硫酸錳22.5 mg/L;
硫酸鋅6.8 mg/L ；
硼酸5.4 mg/L ；
碘化鉀1.0 mg/L ；
鉬酸鈉0.2 mg/L ；
硫酸銅0.02 mg/L ；
氯化鈷0.05 mg/L ο
[0018]而所述的有機(jī)試劑的組分和其對應(yīng)的濃度如下:
鹽酸硫胺素 10.0 mg/L ；
煙酸1.0 mg/L ；
鹽酸卩比卩多醇 1.0mg/L ；
肌醇100.0 mg/L ο
[0019]本發(fā)明利用近幾年植物細(xì)胞和組織培養(yǎng)中的熱點研究植物體細(xì)胞胚胎發(fā)生技術(shù)快繁種子繁殖困難的梨樹才是解決上述問題的根本途徑，它不但能解決梨樹種質(zhì)退化的問題，達(dá)到優(yōu)良種苗脫毒、提純復(fù)壯及快速繁殖的目的，而且也是高效再生種子來源的重要途徑，還是進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化或誘變育種選育新品種的理想受體材料。
[0020]以上已以較佳實施例公開了本發(fā)明，然其并非用以限制本發(fā)明，凡采用等同替換或者等效變換方式所獲得的技術(shù)方案，均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.一種梨樹誘導(dǎo)體胚形成培養(yǎng)基，其特征在于，包括1/2改良MS+ 0.5?1.0 mgL 'θ-ΒΑ+ 0.3 ?0.5mgL J2, 4_D + 0.5 ?1.0mgL JNAA + 6.0 ?7.0gL 1 瓊脂 + 30gL 1 蔗糖 +0.1 ?0.3% phytagel,且 pH 值為 5.8 ?6.0。2.—種梨樹誘導(dǎo)體胚形成培養(yǎng)基，其特征在于，包括1/2改良MS+ 0.8 mgL 'θ-ΒΑ +0.4mgL l2, 4-D +0.8mgL:NAA + 6.5gL 1 瓊脂 + 30gL 1 鹿糖+0.2% phytagel,且 pH 值為6.0o3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種梨樹誘導(dǎo)體胚形成培養(yǎng)基，其特征在于，所述的改良MS包括常量營養(yǎng)元素、微量營養(yǎng)元素和有機(jī)試劑。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種梨樹誘導(dǎo)體胚形成培養(yǎng)基，其特征在于，所述的常量營養(yǎng)元素的組分和其對應(yīng)的濃度如下: 硝酸鉀1900 mg/L ； 硫酸銨1500 mg/L ； 七水硫酸鎂350mg/L ； 二水氯化鈣420 mg/L ； 無水磷酸二氫鉀185 mg/L ； 乙二胺四乙酸二鈉26.8 mg/L; 七水硫酸亞鐵15.9 mg/L ο5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種梨樹誘導(dǎo)體胚形成培養(yǎng)基，其特征在于，所述的微量營養(yǎng)元素的組分和其對應(yīng)的濃度如下: 四水硫酸錳22.5 mg/L; 硫酸鋅6.8 mg/L ； 硼酸5.4 mg/L ； 碘化鉀1.0 mg/L ； 鉬酸鈉0.2 mg/L ； 硫酸銅0.02 mg/L ； 氯化鈷0.05 mg/L ο6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種梨樹誘導(dǎo)體胚形成培養(yǎng)基，其特征在于，所述的有機(jī)試劑的組分和其對應(yīng)的濃度如下: 鹽酸硫胺素 10.0 mg/L ； 煙酸1.0 mg/L ； 鹽酸卩比卩多醇 1.0mg/L ； 肌醇100.0 mg/L ο
【專利摘要】一種梨樹誘導(dǎo)體胚形成培養(yǎng)基，其特征在于，包括1/2改良MS+？0.5～1.0mgL-16-BA？+？0.3～0.5mgL-12,4-D？+？0.5～1.0mgL-1NAA？+？6.0～7.0gL-1瓊脂？+？30gL-1蔗糖+0.1～0.3%？phytagel,且pH值為5.8～6.0。本發(fā)明通過改良基本培養(yǎng)基及成分、調(diào)整培養(yǎng)條件，使繁殖困難的梨樹通過體細(xì)胞胚發(fā)生途徑快繁，植株移栽成活率達(dá)到96%以上，種苗生長健壯，可有效解決優(yōu)良種苗種質(zhì)退化問題，也可為生產(chǎn)上提供大量優(yōu)質(zhì)提純復(fù)壯的苗木，還可為梨樹遺傳轉(zhuǎn)化或誘變育種選育新品種提供一個理想的受體體系。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號】CN105379625
【申請?zhí)枴緾N201510938585
【發(fā)明人】不公告發(fā)明人
【申請人】青島百瑞吉生物工程有限公司
【公開日】2016年3月9日
【申請日】2015年12月16日