本發(fā)明涉及色素檢測領域，尤其涉及一種檢測合成著色劑的方法及其樣品前處理方法。

背景技術：

食品添加劑是指為改善食品品質(zhì)和色、香、味，以及為防腐、保鮮和加工工藝的需要而加入食品中的人工合成或者天然物質(zhì)。食品添加劑按照其功用共分為23大類，包括酸度調(diào)節(jié)劑、抗結劑、消泡劑、抗氧化劑、漂白劑、膨松劑、著色劑、護色劑、乳化劑、酶制劑、增味劑、面粉處理劑、被膜劑、水分保持劑、營養(yǎng)強化劑、防腐劑、穩(wěn)定和凝固劑、甜味劑、增稠劑、香料、膠姆糖基礎劑、咸味劑和其它。合理使用食品添加劑可以達到改善食品品質(zhì)，刺激食欲的效果，但濫用食品添加劑會給食用者的身體帶來危害。

食品著色劑是指賦予食品色澤和改善食品色澤的物質(zhì)，是以給食品著色為目的的食品添加劑，也稱食用色素。合理使用色素可以使食品具有悅目的光澤，使得食物產(chǎn)生了更加美味誘人的效果，能在很大程度上刺激著人們的感官和食欲。按著色劑的來源來分，可把著色劑分為兩大類：天然著色劑及合成著色劑。天然著色劑主要包括了吡咯類、多烯類、酮類、醌類和多酚類等，是從動植物組織中提取的色素，其中最多的當屬植物色素。常見的天然著色劑有辣椒紅、胭脂蟲紅、高梁紅、梔子黃、胡蘿卜素、可可色素、焦糖色素、姜黃等。合成著色劑又可以分偶氮類、氧蒽類和二苯甲烷類等，常見的合成著色劑有胭脂紅、莧菜紅、日落紅、赤鮮紅、檸檬黃、新紅、靛藍、亮藍等等。

合成著色劑指用人工化學合成方法所制得的食品著色劑，具有著色力強、色澤鮮艷、不易褪色、穩(wěn)定性好、易溶解、成本低等特點，合理使用可以獲得良好食品工藝效果和經(jīng)濟效益。但合成著色劑常以苯、甲苯等為原料，先制備色素中間體，再將一種或兩種中間體進行磺化、偶合、縮合和偶氮化等化學反應而制成，一旦過量食用輕則誘發(fā)過敏、中毒、腹瀉，重則致癌癥，威脅人的生命健康安全，所以食品中合成色素的檢測、監(jiān)測和監(jiān)管特別重要。

食品中合成著色劑的測定通常涉及兩個過程，一是食品樣品的前處理，提取和凈化食品樣品中的合成著色劑，或者對食品樣品進行適當?shù)奶幚硪詽M足后續(xù)測定要求；二是利用儀器設備對處理好的試樣進行測定已達到對食品樣品中合成著色劑定性定量的目的。

現(xiàn)有的食品中合成著色劑檢測的樣品前處理方法有聚酰胺吸附法、液液萃取法和固相萃取法，其中聚酰胺吸附法是利用聚酰胺中的酰胺基團能與酚類、蒽醌類、羧基類及硝基類化合物形成氫鍵，產(chǎn)生吸附作用，從而實現(xiàn)從食品樣品中提取和凈化合成著色劑的目的；液液萃取法是利用合成著色劑在兩種互不相溶溶劑的某一種中具有較大溶解度的特點來，提取和凈化食品樣品中的合成著色劑；固相萃取法是將由食品樣品制得的液體試樣加入到固相萃取柱中，合成著色劑與固定相發(fā)生吸附后，用適當溶劑淋洗去除雜質(zhì)，最后用解析液將合成著色劑從固定相上洗脫下來，從而實現(xiàn)食品樣品中合成著色劑提取和凈化。

現(xiàn)有的食品中合成著色劑檢測的儀器檢測方法有高效液相色譜法、高效薄層色譜法、毛細管電泳法、極譜法和分光光度法，其中高效液相色譜法是讓合成著色劑在色譜柱進行分離，依次流出，經(jīng)光譜或質(zhì)譜檢測，形成色譜圖，利用保留時間及光譜或質(zhì)譜特征定性，利用色譜峰面積定量；高效薄層色譜法讓合成著色劑在薄層色譜板進行層析分離，然后進行光譜掃描，利用比移值及斑點光譜特征進行定性，利用光譜強度進行定量；毛細管電泳法是讓合成著色劑在高壓電場驅動的基液中流過毛細管實現(xiàn)分離，依次流出，經(jīng)光譜檢測，形成電泳譜圖譜圖，利用保留時間及光譜特征定性，利用譜峰面積定量；極譜法是是利用合成著色劑在特定緩沖溶液中在滴汞電極上可產(chǎn)生敏感的極譜波且波高與著色劑濃度成正比的特征進行檢測的，當食品樣品中含有一種或兩種以上互補干擾的合成著色劑可用其進行定性定量分析；分光光度法是根據(jù)朗伯-比爾定律對合成著色劑的測定方法，具有導數(shù)光譜的分光光度計可以同時對兩種以上著色劑進行定量分析。

根據(jù)選用的前處理方法和儀器檢測方法可以形成多種具體的食品中合成著色劑的檢測方法，其中最常見的是利用聚酰胺吸附高效液相色譜測定食品中合成著色劑方法，該方法也是國標GB 5009.35—2016推薦的方法，具有廣泛適用性，但由于所用聚酰胺粉末過細，具體操作方法不合理，容易導致操作時間冗長且回收率不穩(wěn)定等問題，因此需要對該方法進行改進。

技術實現(xiàn)要素：

有鑒于此，有必要針對上述的問題，本發(fā)明提供一種檢測合成著色劑的方法及其樣品前處理方法。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案：

一種檢測合成著色劑的樣品前處理方法，包括以下步驟：

吸附著色劑：向試樣溶液中加入14-30目聚酰胺，加熱至58-62℃；冷卻至室溫，去除上層溶液，水洗至洗滌液為無色，得到吸附色素的聚酰胺顆粒；

濕法裝制聚酰胺柱：用水懸浮吸附色素的聚酰胺顆粒，裝入層析柱，待水滴干；

解析著色劑：用色素解析液解析出聚酰胺中吸附的著色劑。

優(yōu)選地，吸附著色劑時，加熱到60℃。

優(yōu)選地，吸附著色劑時，加熱后保溫0-20分鐘。

優(yōu)選地，所述濕法裝制聚酰胺柱的具體方法為：用水懸浮吸附色素的聚酰胺顆粒，得到聚酰胺懸浮液，將聚酰胺懸浮液全部裝入層析柱，打開層析柱下端的旋鈕開關，讓水從層析柱下端流出，待水完全流出后，關閉層析柱下端的旋鈕開關。

優(yōu)選地，解析著色劑的具體方法為：向裝有聚酰胺柱中加入色素解析液至液面到達層析柱近上端口處，靜置數(shù)分鐘，控制2-3滴/秒流速，收集流出液，重復上述步驟解析至流出液為無色，合并全部流出液得到流出混合液。

優(yōu)選地，所述檢測合成著色劑的樣品前處理方法還包含濃縮定容步驟：將流出混合液濃縮近干，轉移至容量瓶中定容，得到定容溶液。

優(yōu)選地，所述檢測合成著色劑的樣品前處理方法中，試樣溶液采用如下方法之一制備：

固體樣品：稱取樣品，加水浸提至樣品完全溶解得到試樣溶液；必要時加熱輔助提取；如浸提30分鐘樣品未完全溶解，先用紗布過濾樣品浸提液，再用水洗滌紗布至洗滌液為無色，合并濾液和洗滌液得試樣溶液；

液體樣品：稱取樣品，加水稀釋即得試樣溶液；

含有二氧化碳和/或酒精的樣品：含有二氧化碳和/或酒精的樣品，在稱量之后先加熱再按照固體或液體樣品的試樣溶液制備方法處理。

優(yōu)選地，所述色素解析液為乙醇、氨水和水按體積比7：2：1組成。

一種檢測合成著色劑的方法，包括以下步驟：將上述前處理方法制得的定容溶液過濾后作為上機測試液，進行液相色譜測定。

優(yōu)選地，所述液相色譜測定的條件為：色譜柱：Ultimate HPLC Column C18柱(250mmx4.6mm id，5μm)；柱溫：30℃；進樣量：10-20μL；流速：1.0mL/min；檢測波長：420nm、520nm、630nm；流動相：甲醇(A)-0.02mol/L乙酸銨溶液(B)，20％-35％A，3％/min；35％-98％A，9％/min；98％繼續(xù)6min；流速：1mL/min。

與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明具有如下有益效果：

(1)本發(fā)明中利用濕法裝制的方式制作了無篩板聚酰胺柱，是實現(xiàn)快速解析洗脫的關鍵環(huán)節(jié)。形成無篩板聚酰胺柱需要3個條件：第一是最底層聚酰胺能得到短暫支撐；第二是聚酰胺顆粒能夠快速沉降；第三是聚酰胺應該具有不規(guī)則的形狀。本發(fā)明方法在裝制聚酰胺柱之前先關閉層析柱管下端的活塞，以便給予最底層聚酰胺提供短暫的支撐；本發(fā)明方法使用的聚酰胺目數(shù)小顆粒大，所以在水中能夠快速沉降；同時也因為本發(fā)明方法使用的聚酰胺目數(shù)小顆粒大，所以聚酰胺形狀很不規(guī)則，隨著沉降的發(fā)生，聚酰胺顆粒間相互咬合，自然沉降聚塊，待聚酰胺完全沉降后就會聚集成結構穩(wěn)定的聚酰胺柱，此時打開層析柱下端的活塞，雖然最底層聚酰胺失去了支撐，但是由于聚酰胺顆粒間強烈的咬合作用，最底層聚酰胺顆粒已經(jīng)與其上層的聚酰胺顆粒聚集成塊，所以不會散落。

(2)聚酰胺柱是在沉降堆積過程中形成的，所以具有結構單向穩(wěn)定性，即向下沖洗聚酰胺柱時，聚酰胺柱十分穩(wěn)定，不會有聚酰胺顆粒散落問題，但調(diào)轉上述聚酰胺柱時，即將活塞調(diào)轉至上端時，聚酰胺柱十分不穩(wěn)定，很容易發(fā)生散落崩塌，所以上述聚酰胺柱可以被穩(wěn)定用于解析洗脫，也容易倒出用后廢棄的聚酰胺，便于層析柱玻璃管清洗和重復使用。

(3)本發(fā)明中使用的聚酰胺為14-30目的聚酰胺顆粒，較大且形狀十分不規(guī)則，所以裝制成的聚酰胺柱中聚酰胺顆粒間的縫隙較大，能夠讓液體快速通過，所以可以實現(xiàn)快速洗脫。聚酰胺的目數(shù)越大顆粒較小，形狀越接近于球狀，用于裝柱時咬合作用越小，越容易出現(xiàn)聚酰胺顆粒散落問題，同時也會導致聚酰胺顆粒間的縫隙變小，阻力變大，所以洗脫時流速會隨著聚酰胺目數(shù)增大顆粒減小而變慢直至最終無法自然流出。

(4)本發(fā)明采用恒溫定時方式進行聚酰胺吸附著色劑的操作，使得測試結果精密度高；本發(fā)明所涉及的洗滌除去聚酰胺表面雜質(zhì)的步驟，不需要使用抽濾裝制，操作便捷，成本低廉，安全環(huán)保，單個樣品平均耗時短。本發(fā)明采用層析柱代替砂芯漏斗與真空抽濾的裝置，簡化了前處理設備，可操作性強，比起電動抽真空，層析柱的自行滴出溶液更加可控。

(5)本發(fā)明不需要使用真空抽濾裝置，可以同時處理多個樣品，具有強大的批處理能力，大批量處理樣品時，單個樣品平均耗時短；本發(fā)明具有廣泛的樣品適用性，能夠順利地完成各種食品樣品的前處理，不會發(fā)生堵塞問題，同時處理大批量樣品耗時穩(wěn)定可以較為準確地估計，實際中便于工作安排；本發(fā)明實驗設施設備占用率低，成本低廉，方便快捷，批量處理能力強，安全環(huán)保，有利于獲得回收率高，精密度高，不確定度小的測定結果。

附圖說明

圖1為本發(fā)明檢測合成著色劑的方法流程圖。

圖2為實施例1混合標準色譜圖。

圖3為實施例2標準曲線圖。

圖4為實施例2樣品圖。

圖5為實施例3樣品圖。

具體實施方式

為了更好的說明本發(fā)明，下面結合附圖和具體實施方式作進一步說明。本發(fā)明中所用試劑或儀器均可由市場購得，是本領域所熟知的，在此不再贅述。

實施例1

一種檢測合成著色劑的樣品前處理方法，包括以下步驟：

制備試樣溶液：稱取20g(精確至0.001g)糖果(固體食品)樣品置于250mL燒杯中，加入150mL水浸泡提取30分鐘，得樣品浸提液。樣品浸提液中有未溶解的殘渣，先用紗布過濾樣品浸提液，再用水洗滌紗布至洗滌液為無色，合并濾液和洗滌液置于250mL燒杯中，得試樣溶液。

吸附著色劑：向盛有試樣溶液的250mL燒杯中加入14-30目聚酰胺5g，并用玻璃棒攪拌均勻，然后將該燒杯放入60℃水浴鍋中水浴20分鐘，每隔5分鐘攪拌燒杯中聚酰胺一次。20分鐘后取出上述試樣溶液燒杯，冷卻至室溫，傾倒出燒杯中的上層溶液，保留下層聚酰胺顆粒，然后加入150mL水，用玻璃棒攪拌洗滌聚酰胺顆粒，傾倒出洗滌液，反復進行洗滌操作，直至洗滌液為無色，傾倒出洗滌液，留下聚酰胺顆粒。

濕法裝制聚酰胺柱：向盛有聚酰胺顆粒的燒杯中加入150mL水，用玻璃棒攪拌使得聚酰胺懸浮起來得到聚酰胺懸浮液，然后將上述聚酰胺懸浮液全部裝入事先已經(jīng)關閉活塞的層析柱(總長31.5cm，帶活塞)，待聚酰胺完全沉降后打開層析柱下端的旋鈕開關，讓水從層析柱下端流出，待水完全流出后，關閉層析柱下端的旋鈕開關。

解析著色劑：向上述裝有聚酰胺的層析柱中加入色素解析液，直至解析液液面到達層析柱上端口下方1cm處，靜置2分鐘后打開層析柱下端的旋鈕開關，控制流速為2-3滴/秒，待解析液全部流出后，再向上述裝有聚酰胺的層析柱中加入色素解析液至解析液液面到達層析柱上端口下方1cm處洗滌聚酰胺，反復使用色素解析液洗滌聚酰胺，直至流出液為無色，用的坩堝收集全部流出液。優(yōu)選地，所述色素解析液為乙醇、氨水和水按體積比7：2：1組成。

濃縮定容：將盛有流出液的坩堝放在100℃水浴鍋上進行濃縮，待坩堝中溶液濃縮近干時，取下坩堝，冷卻至室溫。用膠頭滴管將坩堝中剩余溶液轉移至10mL容量瓶中，并用水洗凈坩堝，且將洗滌液全部轉移至上述10mL容量瓶中，然后用水定容至刻度線，搖勻，得到定容溶液。

一種檢測合成著色劑的方法，如圖1所示，包括以下步驟：取1.5mL上述定容溶液，過0.45μm濾膜，得上機測試液，進行液相色譜測定。

所述液相色譜測定的條件為：色譜柱：Ultimate HPLC Column C18柱(250mm×4.6mm id，5μm)；柱溫：30℃；進樣量：10μL；流速：1.0mL/min；檢測波長：420nm、520nm、630nm；流動相：甲醇(A)-0.02mol/L乙酸銨溶液(B)，20％-35％A，3％/min；35％-98％A，9％/min；98％繼續(xù)6min；流速：1mL/min。

本實施例中使用的標準品包含：檸檬黃標準品、莧菜紅標準品、新紅標準品、胭脂紅標準品、日落黃標準品、誘惑紅標準品、亮藍標準品和赤蘚紅標準品。

合成色素標準溶液：準確稱取按其純度折算為100％質(zhì)量的檸檬黃、莧菜紅、新紅、胭脂紅、日落黃、誘惑紅、亮藍、赤蘚紅標準品各0.1000g，裝入100mL容量瓶中，配成混合標準水溶液(1.00mg/mL)。準確吸取上述混合標準溶液(1.00mg/mL)0.50mL、1.00mL、2.00mL、3.50mL、5.00mL至100mL容量瓶中，分別配成標準系列5.0mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、35.0mg/L、50.0mg/L。

標準曲線的建立：分別量取制備的5.0mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、35.0mg/L、50.0mg/L標準溶液10μL注入液相色譜儀，按照上述色譜條件進行色譜測定，記錄色譜圖(色譜圖見圖2)。以濃度為橫坐標，相應色譜峰峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。

試樣中色素的含量由色譜數(shù)據(jù)處理軟件或按以下公式計算獲得，計算結果應扣除空白值，并保留小數(shù)點后一位小數(shù)：

式中：

X—試樣中色素的含量，單位為毫克每千克(mg/kg)；

c—從標準工作曲線求得的試樣溶液中色素含量，單位為毫克每升(mg/L)；

V—定容體積，單位為毫升(mL)；

m—取樣量，單位為克(g)。

待測樣品中測得胭脂紅，采用520nm進行定量，待測樣品中胭脂紅濃度為8.6mg/kg。

實施例2

本實施例中檢測飲料中的著色劑含量。其樣品前處理方法，包括以下步驟：

制備試樣溶液：稱取20g(精確至0.001g)飲料(液體)樣品置于250mL燒杯中，加150mL水稀釋即得試樣溶液。

樣品前處理的其他步驟與實施例1相同，但是色譜檢測方法與實施例1略有不同，具體為：

標準曲線：分別量取制備的5.0mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、35.0mg/L、50.0mg/L標準溶液10μL注入液相色譜儀，記錄峰面積，以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線圖(校正曲線圖見圖3)。

得到檸檬黃回歸方程y＝mX+b(m＝8.62248，b＝0.967911)，R＝0.99996；

得到亮藍回歸方程y＝mX+b(m＝40.48937，b＝2.73541)，R＝0.99997。

待測樣品中測得檸檬黃和亮藍，分別采用420nm和630nm進行定量(色譜圖見圖4)。以實施例1中的色譜條件進行測定：檸檬黃峰面積為72.578，所得樣品測定濃度33.2mg/kg；亮藍峰面積為94.865，所得樣品測定濃度9.10mg/kg。

實施例3

本實施例中檢測配制酒中的著色劑含量。其樣品前處理方法，包括以下步驟：

制備試樣溶液：稱取20g(精確至0.001g)配制酒置于250mL燒杯中，加熱揮發(fā)酒精至近干，加入150mL水溶解，得試樣溶液。

吸附著色劑：向盛有試樣溶液的250mL燒杯中加入14-30目聚酰胺5g，并用玻璃棒攪拌均勻，然后將該燒杯放入60℃水浴鍋中，每隔5分鐘攪拌燒杯中聚酰胺一次。15分鐘后取出上述試樣溶液燒杯，冷卻至室溫，傾倒出燒杯中的上層溶液，保留下層聚酰胺顆粒，然后加入150mL水，用玻璃棒攪拌洗滌聚酰胺顆粒，傾倒出洗滌液，反復進行洗滌操作，直至洗滌液為無色，傾倒出洗滌液，留下聚酰胺顆粒。

濕法裝制聚酰胺柱：向盛有聚酰胺顆粒的燒杯中加入150mL水，用玻璃棒攪拌使得聚酰胺懸浮起來，然后將上述聚酰胺懸浮液全部裝入事先已經(jīng)關閉活塞的層析柱管中，待聚酰胺完全沉降后打開層析柱下端的活塞，讓水從層析柱下端流出，待水完全流出后，關閉層析柱下端的活塞。

解析著色劑：向上述裝有聚酰胺的層析柱中加入色素解析液，直至解析液液面到達層析柱上端口下方1cm處，靜置2分鐘后打開層析柱下端的活塞，控制流速為2-3滴/秒，待解析液全部流出后，再向上述裝有聚酰胺的層析柱中加入色素解析液至解析液液面到達層析柱上端口下方1cm處洗滌聚酰胺，反復使用色素解析液洗滌聚酰胺，直至流出液為無色，用80mL的坩堝收集全部流出液。

濃縮定容：將盛有解析液的80mL坩堝放在100℃水浴鍋上進行濃縮，待坩堝中溶液濃縮近干時，取下坩堝，冷卻至室溫。用膠頭滴管將坩堝中剩余溶液轉移至10mL容量瓶中，并用水洗凈坩堝，且將洗滌液全部轉移至上述10mL容量瓶中，然后用水定容至刻度線，搖勻，得到定容溶液。

一種檢測合成著色劑的方法，包括以下步驟：取1.5mL上述定容溶液，過0.45μm濾膜，得上機測試液，進行液相色譜測定。

所述液相色譜測定的條件為：色譜柱：Ultimate HPLC Column C18柱(250mm×4.6mm id，5μm)；柱溫：30℃；進樣量：20μL；流速：1.0mL/min；檢測波長：420nm、520nm、630nm；流動相：甲醇(A)-0.02mol/L乙酸銨溶液(B)，20％-35％A，3％/min；35％-98％A，9％/min；98％繼續(xù)6min；流速：1mL/min。

本實施例中使用的標準品與實施例1相同，配制混合標準溶液的方法也與實施例1相同。標準曲線的建立方法如下：分別量取制備的5.0mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、35.0mg/L、50.0mg/L標準溶液20μL注入液相色譜儀，記錄峰面積，以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線圖。

得到日落黃回歸方程y＝mX+b(m＝10.30977，b＝0.318233)，R＝0.99993。

按照上述色譜條件在520nm進行定量檢測(色譜圖見圖5)，日落黃峰面積為117.937，所得樣品測定濃度11.4mg/kg。

效果實施例1、精密度實驗

為了考察本發(fā)明方法的精密度，采用混合標準溶液5.0mg/L，六次上樣進行精密度實驗。結果如表1所示。

表1、合成著色劑精密度實驗結果

由表1可知，本發(fā)明方法對各種合成著色劑的檢測結果穩(wěn)定，RSD為1.05-2.07％，精密度良好。因此，本發(fā)明方法可以用于多種合成著色劑的檢測，精密度良好。

效果實施例2、回收率實驗

選用糖果作為本底檢測本發(fā)明方法的回收率。根據(jù)檢出限的5倍設置最低添加水平，參考檢測目標物的限量和線性范圍。每種著色劑做三個添加水平，每個添加水平進行6次重復性試驗。按照實驗條件和步驟測定其回收率和精密度，結果如表2所示。

表2、糖果中合成著色劑回收率

由表2可知，本發(fā)明方法對合成著色劑的回收率穩(wěn)定性良好，在不同添加水平，不同合成著色劑的回收率均大于90％，該前處理方法適合此類樣品前處理。

效果實施例3、操作時間的對比

為了更好的說明本發(fā)明方法省時的有益效果，考察了本發(fā)明與GB 5009.35國標方法處理不同數(shù)量樣品的耗時，結果見表3和表4。

表3、熟手操作本發(fā)明和國標方法樣品前處理耗時的對比

表4、新手操作本發(fā)明和國標方法樣品前處理耗時的對比

由表3和表4可知，熟手操作本發(fā)明方法和國標方法處理單個樣品的時間較為接近，但使用本發(fā)明方法同時處理大批量樣品耗時顯著地短于使用國標方法同時處理大批量樣品的耗時。由于國標方法在吸附、裝柱、解析等耗時長的步驟不可以平行批量處理，解析時能自然流出，但很慢，實際使用時必須需抽濾。因此，不論是熟手還是新手采用本發(fā)明方法同時處理大批量樣品時的單個樣品的平均耗時顯著地短于使用國標方法同時處理大批量樣品時的單個樣品的平均耗時。

此外，本發(fā)明方法能夠順利地完成各種食品樣品的前處理，不會發(fā)生堵塞問題，同時處理大批量樣品耗時穩(wěn)定，可以較為準確地估計用時，便于工作安排；而使用國標方法經(jīng)常會因為樣品含糖量過大、含淀粉過多或是過于粘稠，最終出現(xiàn)堵塞問題，導致一個樣品需要數(shù)小時處理，甚至出現(xiàn)無法完成樣品處理檢測失敗的情況，實際中無法估計樣品處理的時間，無法進行有效的工作安排。

效果實施例4、不同目數(shù)聚酰胺對本發(fā)明的影響

聚酰胺粉的層析原理一般認為是氫鍵作用，由于各分離物質(zhì)和填料之間氫鍵強弱不同而得到分離。目數(shù)是表征顆粒大小的參數(shù)，目數(shù)大顆粒小而目數(shù)小則顆粒大。聚酰胺粉市售的有14-30目、30-60目、60-80目、60-90目、60-100目、80-100目、100-200目、200-400目等。聚酰胺粉中有大量微孔結構，如100-200目，其孔徑為0.45-1μm，接近層析膜的結構。常溫下，目數(shù)越大的聚酰胺粉末顆粒越小比表面積越大，對著色劑的吸附效果越好。

不同目數(shù)的聚酰胺顆粒在裝制無篩板聚酰胺柱的效果有顯著差異，小目數(shù)大顆粒(如14-30目)聚酰胺粉末用于裝制無篩板聚酰胺柱效果良好，而大目數(shù)小顆粒(如100-200目)聚酰胺粉末用于裝制無篩板聚酰胺柱效果較差，常會出現(xiàn)聚酰胺顆粒散落的情況?？紤]到不是所有目數(shù)的聚酰胺粉末都能裝制無篩板柱，選擇裝制底部有篩板的聚酰胺層析柱來比較不同目數(shù)的聚酰胺粉末裝制層析柱的流速。結果表明：當聚酰胺為14-30目時，每分鐘流出水180滴；30-60目，72滴；60-100目，20滴；100-200目，僅4滴，很顯然聚酰胺顆粒越小目數(shù)越大，裝制的層析柱流速越慢，而聚酰胺顆粒越大目數(shù)越小，流速越快。用大顆粒小目數(shù)的聚酰胺裝制成無篩板層析柱后少了篩板的阻礙作用流速更快，但為了保證洗脫效果，保證方法回收率，實際操作中需要通過調(diào)節(jié)層析柱下端的旋鈕開關，將流速控制在180滴/分鐘。

聚酰胺顆粒越小的流速越慢的原因是：聚酰胺粉與水有很強的親和力，而細小顆粒又堵塞了粒間通道，使水大部分經(jīng)粒間微孔而流動，所以液體流經(jīng)小顆粒聚酰胺柱時要克服很大阻力，解決的辦法是聚酰胺柱前增壓或柱后減壓，實際應用中常使用抽濾裝置進行柱后減壓操作以增大流速。

本發(fā)明方法采用60℃下恒溫0-20分鐘，使得顆粒較大的聚酰胺(如14-30目)實現(xiàn)高效率吸附，然后洗凈裝柱，液體流經(jīng)這樣顆粒較大的聚酰胺柱時阻力很小，可以實現(xiàn)自然快速流出，因此可以在無需抽濾裝置輔助下，實現(xiàn)快速洗脫，從而能夠快速大批量處理樣品。

效果實施例5、本發(fā)明與其他檢測方法比較

將本發(fā)明方法與其他檢測合成著色劑的方法進行比較。對比例1采用了唐俊、曾凱等發(fā)表的《食品中合成著色劑的測定》(廣州化工，2011年39卷第5期，120-121)中記載的方法，對比例2采用了申請?zhí)?01310015506.5、發(fā)明名稱為食品中水溶性偶氮染料快速檢測方法中記載的方法。結果如表5所示。

表5、不同檢測方法結果比較

由表5可知，對比例1和對比例2耗時長，需要抽濾輔助進行實驗，不利于大批量處理樣品。本發(fā)明方法耗時少，不需要抽濾等輔助手段，可以實現(xiàn)自然快速流出，因此可以在無需抽濾裝置輔助下，實現(xiàn)快速洗脫，從而能夠快速大批量處理樣品。

以上所述實施例僅表達了本發(fā)明的幾種實施方式，其描述較為具體和詳細，但并不能因此而理解為對本發(fā)明專利范圍的限制。應當指出的是，對于本領域的普通技術人員來說，在不脫離本發(fā)明構思的前提下，還可以做出若干變形和改進，這些都屬于本發(fā)明的保護范圍。因此，本發(fā)明專利的保護范圍應以所附權利要求為準。