1.一種生物酶解法提取褐藻糖膠的方法,其特征在于,包括如下步驟:
步驟(1):海帶預(yù)處理,清洗海帶,切成小段、研磨成漿液;
步驟(2):向漿液中加入漿液重量5-7倍的水,攪拌均勻,浸泡12-36小時(shí)后,將漿液轉(zhuǎn)入酶解容器內(nèi);
步驟(3):向酶解容器內(nèi)加入酸性纖維素酶、半纖維素酶,攪拌均勻,PH控制在4.5-6.5之間,溫度控制在45-55℃之間,反應(yīng)8-12小時(shí),冷卻,得產(chǎn)品一;
步驟(4):向產(chǎn)品一加堿性果膠酶,攪拌均勻,PH控制在8.0-10.0之間,溫度控制在40-70℃之間,反應(yīng)7-12小時(shí),冷卻,得產(chǎn)品二;
步驟(5):向產(chǎn)品二加蛋白酶,攪拌均勻,PH控制在6.0-9.0之間,溫度控制在30-60℃之間,反應(yīng)3-11小時(shí),冷卻,得產(chǎn)品三;
步驟(6):向產(chǎn)品三中加入其重量5-7%的氯化鈉和重量10-15 倍的水,在50-80℃的溫度條件下,反應(yīng)120-160分鐘,得到褐藻酸鈉膠狀物;
步驟(7):向褐藻酸鈉膠狀物加入重量為其0.2-5%的改性凹凸棒土,脫色除腥味20-40min,得產(chǎn)品四;
步驟(8):將得到的產(chǎn)品四通過離心機(jī)分離出殘?jiān)?,得到產(chǎn)品五;用適量水洗滌殘?jiān)?,再次離心,得到產(chǎn)品六;
步驟(9):向產(chǎn)品六加入質(zhì)量濃度為90-94%的酒精,脫水15-30min,得到固相褐藻糖膠,酒精與產(chǎn)品六的體積比為1.5∶1。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物酶解法提取褐藻糖膠的方法,其特征在于:所述步驟(3)中酸性纖維素酶、半纖維素酶加入量分別為步驟(1)中加水后漿液重量的9-11%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物酶解法提取褐藻糖膠的方法,其特征在于:所述步驟(4)中堿性果膠酶加入量為步驟(1)中加水后漿液重量的6-10%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物酶解法提取褐藻糖膠的方法,其特征在于:所述步驟(4)中蛋白酶加入量為步驟(1)中加水后漿液重量的3-7%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物酶解法提取褐藻糖膠的方法,其特征在于:步驟(3):向酶解容器內(nèi)加入酸性纖維素酶、半纖維素酶,攪拌均勻,PH控制在5.5,溫度控制在48℃,反應(yīng)9小時(shí)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物酶解法提取褐藻糖膠的方法,其特征在于:所述步驟(4):向產(chǎn)品一加堿性果膠酶,攪拌均勻,PH控制在8.5,溫度控制在52℃,反應(yīng)8小時(shí)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物酶解法提取褐藻糖膠的方法,其特征在于:所述步驟(5):向產(chǎn)品二加蛋白酶,攪拌均勻,PH控制在6.9,溫度控制在42℃,反應(yīng)7小時(shí)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物酶解法提取褐藻糖膠的方法,其特征在于:向所述步驟(7)得到的產(chǎn)品四中加入700-800U/g褐藻糖膠裂解酶進(jìn)行酶解,加入量為產(chǎn)品四重量的10-15%,攪拌均勻,再加質(zhì)量濃度為8-9%的NaOH溶液,調(diào)pH至7-9,在20-45℃的溫度條件下酶解反應(yīng)3-4小時(shí),得到褐藻膠裂解酶酶解液,將褐藻膠裂解酶酶解液通過離心機(jī)分離獲得濾液,將濾液用酒精脫水得到固相褐藻糖膠寡糖。
9.根據(jù) 權(quán)利要求8所述的生物酶解法提取褐藻糖膠的方法,其特征在于:所述加入酒精質(zhì)量濃度為80-90%,酒精與濾液的體積比為1.4∶1。