1.一種氯霉素半抗原,其特征在于,其分子結(jié)構(gòu)式為:
2.一種如本發(fā)明第一個方面所述的氯霉素半抗原的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
步驟1,取氯霉素,加入叔丁基二甲基氯硅烷、咪唑和無水N,N-二甲基甲酰胺,室溫反應(yīng)完全,純化,得到TBS-氯霉素,其分子結(jié)構(gòu)式如式(2)所示,其中氯霉素、叔丁基二甲基氯硅烷、咪唑和無水二甲基甲酰胺的用量比為:1g︰700-800mg︰300-500mg︰3-7mL;
步驟2,取TBS-氯霉素,加入二氯甲烷溶解,加入丁二酸酐、4-二甲氨基吡啶和三乙胺,室溫反應(yīng)完全,純化,得到含琥珀?;?TBS-氯霉素,其分子結(jié)構(gòu)式如式(3)所示,其中TBS-氯霉素、丁二酸酐、4-二甲氨基吡啶和三乙胺的用量比為:0.9746g︰0.81-0.83g︰0.24-0.26g︰100-300μL;
步驟3,取含琥珀?;?TBS-氯霉素,加入吡啶、乙腈和40%HF,冰浴冷卻后,室溫反應(yīng)完全,純化,得到權(quán)利要求1所述的氯霉素半抗原,其中含琥珀酰基-TBS-氯霉素、吡啶、乙腈和40%HF的用量比為:954.94mg︰2-4mL︰5-7mL︰1.5-2mL;
3.一種氯霉素抗原,其特征在于,由權(quán)利要求1所述的氯霉素半抗原與載體蛋白偶聯(lián)得到,其分子結(jié)構(gòu)式為:
4.一種制備如權(quán)利要求3所述的氯霉素抗原的方法,其特征在于,包括以下步驟:
步驟a,取權(quán)利要求1所述的氯霉素半抗原,加入無水N,N-二甲基甲酰胺混勻后,加入二環(huán)己基碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺,室溫反應(yīng)過夜,其中,氯霉素半抗原、二環(huán)己基碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺的用量比為:0.09mmol︰0.09-0.15mmol︰0.09-0.15mmol;
步驟b,離心,取溶液,將溶液緩慢加入載體蛋白溶液中,所用載體蛋白的量按照半抗原與載體蛋白的摩爾比15-40︰1計;
步驟c,反應(yīng)完全后,透析,得到氯霉素抗原。
5.一種氯霉素抗體,其特征在于,由權(quán)利要求3所述的氯霉素抗原免疫動物制備得到。
6.由權(quán)利要求5所述的氯霉素抗體制備的氯霉素酶聯(lián)免疫試劑盒。
7.權(quán)利要求1所述的氯霉素半抗原或權(quán)利要求3所述的氯霉素抗原在制備氯霉素抗體中的應(yīng)用。
8.權(quán)利要求5所述的氯霉素抗體或權(quán)利要求6所述的氯霉素酶聯(lián)免疫試劑盒在檢測動物源性食品中氯霉素殘留的應(yīng)用。