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一種表皮細(xì)胞培養(yǎng)基及其制備方法與流程

文檔序號:12411312閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種表皮細(xì)胞培養(yǎng)基,其特征在于,主要由以下成分及其濃度組成:基礎(chǔ)培養(yǎng)基10-15g/L,胰島素10-30mg/L,谷氨酰胺1-10mg/L,飛燕草素10-100μg/L,桑色素1-10ng/L,兒茶素45-65μM,表皮生長因子5-10μg/L,糖皮質(zhì)激素50-300μg/L,轉(zhuǎn)化生長因子-β1-3μg/L,亞硒酸鈉1-10μg/L,檸檬酸鐵銨0.2-1.5mg/L,硝酸鐵0.3-0.8mg/L和EDTA-2Na 4-10mg/L。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述表皮細(xì)胞培養(yǎng)基,其特征在于,由以下成分及其濃度組成:基礎(chǔ)培養(yǎng)基12g/L,胰島素14.5mg/L,谷氨酰胺7.5mg/L,飛燕草素34μg/L,桑色素5.25ng/L,兒茶素63.5μM,表皮生長因子8.2μg/L,糖皮質(zhì)激素150μg/L,轉(zhuǎn)化生長因子-β2.6μg/L,亞硒酸鈉6μg/L,檸檬酸鐵銨1.35mg/L,硝酸鐵0.45mg/L和EDTA-2Na 6.25mg/L。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述表皮細(xì)胞培養(yǎng)基,其特征在于,所述基礎(chǔ)培養(yǎng)基為Ham’s F12或DMEM-L。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的表皮細(xì)胞培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于,由以下步驟組成:

(1)稱取基礎(chǔ)培養(yǎng)基、飛燕草素、桑色素、兒茶素、亞硒酸鈉、檸檬酸鐵銨、硝酸鐵和EDTA-2Na,溶于35℃,800mL超純水中,攪拌至完全溶解,得溶液I;

(2)將上述所得溶液I冷卻至15-16℃,加入相應(yīng)量的胰島素、谷氨酰胺、表皮生長因子、糖皮質(zhì)激素和轉(zhuǎn)化生長因子,加入200mL超純水輕微攪拌至均勻,得溶液II;

(3)用1mol/L氫氧化鈉溶液或1mol/L鹽酸溶液調(diào)溶液II的pH至7.2,得溶液III;

(4)將溶液III用0.22μm無菌濾膜正壓過濾除菌,即得。

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