本發(fā)明涉及藥物化學技術領域，特別是涉及一種6-甲基7位脫氮嘌呤核苷類化合物及其用途。

背景技術：

rna病毒具有突變率高，繁殖率高和繁殖時間短的特點。這是由于單鏈rna鏈的性質不穩(wěn)定，作為遺傳物質，其在復制和表達過程中，出現(xiàn)錯誤的頻率相當高，且修復機制的酶活性很低，甚至沒有。直至2013年，已識別具有感染人類能力的rna病毒已經達到了180種，且每年以新增2個種類的速度快速增長。

近年來，甲型流感病毒(influenzaa)不斷爆發(fā)嚴重的疫情，目前的治療方式有疫苗、m2離子通道抑制劑(如金剛烷胺和金剛乙胺)和神經氨酸酶抑制劑(如奧司他韋和扎那米韋)。但是，有效的預防和治療的疫苗無法跟上influenzaa亞型的變異速度，而臨床上用于治療influenzaa藥物(包括達菲在內)出現(xiàn)了不同程度的耐藥性。此外，利巴韋林還具有造成細胞溶血等的副作用，所以有必要致力于開發(fā)出不易出現(xiàn)耐藥的高效抗influenzaa藥物。

登革熱病毒(denv)，是一種通過蚊媒傳播的黃病毒科rna病毒，在這幾年里，蔓延快速，已經成為全球關注的健康問題。據(jù)who報告，全球有五分之二的人面臨登革熱感染的風險。2000年以后，每年保持1億人感染的水平，并已導致22000萬的兒童死亡。denv有四種亞型，以denv-2造成的病癥最為嚴重。預防denv的疫苗必須包括四種亞型的抗原，否則，如果疫苗在體內生成的抗體對應不上denv的亞型，會有造成病情加重的可能。所以，目前雖然在研發(fā)登革熱疫苗上投入很大，但并沒有真正能用于臨床的疫苗面市，專門用于抗登革熱病毒的有效藥物更是無從說起。

此外，丙肝病毒(hcv)是全世界慢性肝病的主要病因，且能進一步惡化為肝硬化、肝癌等惡性疾病。但長期以來都是以peg干擾素α和利巴韋林聯(lián)合治療，該方法大概只有50％的適用率。即便rna依賴的rna聚合酶抑制劑索非布韋(sofosbuvir)的上市能有效治愈hcv，但其昂貴價格卻讓人望而卻步。面對這些重大疫情，能真正及時大范圍使用并治愈疾病的藥物卻寥寥無幾。

因此，開發(fā)出高效的各類病毒尤其是rna病毒的抑制劑是在目前新藥研發(fā)領域中具有重要價值和巨大潛力。

技術實現(xiàn)要素：

基于此，本發(fā)明的目的在于提供一種

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取以下技術方案：

具有式i結構特征的6-甲基7位脫氮嘌呤核苷類化合物或者其藥學上可接受的鹽：

其中：

x選自：ch3，cf3，cf2h，cfh2，h，鹵素，or³，ocor³,cn，n3，-c≡cr⁴；

y選自：h，鹵素，or³，ocor³，cn，n3，-c≡cr⁴，ococh(nhr⁵)r⁶；

z選自：cr³r⁴，o，s，nr³，co，co2，conr³，so2，so2nh，nconr³，nco2，oconr³，csnr³，ncsnr³，c1-c10烷基，c2-c10不飽和烷基,c3-c7環(huán)烷基，芳基，r¹⁰取代芳基，r¹⁰取代的含有一個或多個o、n、s雜原子的芳雜環(huán)，或沒有；

w選自：h，鹵素，or³，ocor³，n3；

r¹選自：h，酯基，酰胺基，取代或不取代單膦酸酯，取代或不取代雙膦酸酯，取代或不取代三膦酸酯，co2r³；

r²選自：h,鹵素,cn,酰胺基，酯基，cf3，chf2，ch2f，no2，c1-c10烷基，c2-c10不飽和烷基,c1-c10取代烷基，取代或非取代c3-c7環(huán)烷基，芳基，r¹⁰取代芳基，r¹⁰取代的含有一個或多個o、n、s雜原子的芳雜環(huán)，coor³，萘環(huán)，conr³r⁴，coor³，或沒有；

r³選自：h，c1-c6烷基，c2-c6不飽和烷基，r¹⁰取代的c1-c6烷基，o、n、s雜原子取代的c1-c6烷基，o、n、s雜原子取代的c2-c6不飽和烷基；

r⁴選自：h、c1-c6烷基，c2-c6不飽和烷基，r¹⁰取代的c1-c6烷基，o、n、s雜原子取代的c1-c6烷基，o、n、s雜原子取代的c2-c6不飽和烷基；

r⁵選自：h，c1-c6烷基，芳烷基；

r⁶選自：h，c1-c6烷基，芳烷基，c1-c6取代烷基，氨基酸側鏈基；

r¹⁰選自：h，鹵素，c1-c6烷基，氰基，c1-c6烷氧基，cf3，c2-c6不飽和烷基，c6-c10取代芳烷基，cf3，chf2，ch2f，or¹¹，nr¹¹r¹²，cn，co2r¹¹，conr¹¹r¹²，so2r¹¹，so2nr¹¹r¹²，no2，nconr¹¹r¹²，nco2r¹¹，oconr¹¹r¹²，csnr¹¹r¹²，ncsnr¹¹r¹²；

r¹¹、r¹²獨立地任選自：h、c1-c6烷基，c2-c6不飽和烷基，o、n、s雜原子取代的c1-c6烷基，o、n、s雜原子取代的c2-c6不飽和烷基。

在其中一些實施例中，r¹選自：h、cor³、氨基酸形成的酯基，或如下基團：

其中：

r⁷選自：h,c1-c6烷基,c3-c7環(huán)烷基,芳基，r¹⁰取代芳基，含有一個或多個o、n、s雜原子的芳雜環(huán)；

r⁸，r¹⁶，r¹⁷，r¹⁸獨立地任選自：h，c1-c6烷基，c3-c7環(huán)烷基；

r⁹選自：氨基酸的側鏈基團，h，c1-c6烷基，含有o、s、氨基、呱基、咪唑、羧基、酰胺基的c1-c6烷基，芳基取代c1-c6烷基，含有取代苯基的芳基，含有取代吲哚基的芳基；

r¹⁰選自：h，cn，no2，c1-c6烷基，c1-c6取代烷基，鹵素，or³，nr³r⁴，sr³，co2r³，conr³r⁴，芳基,取代芳基，含有一個或多個o、n、s雜原子的芳雜環(huán)；

r¹¹，r¹²獨立地任選自：h、c1-c6烷基，c2-c6不飽和烷基，o、n、s雜原子取代的c1-c6烷基，o、n、s雜原子取代的c2-c6不飽和烷基；

ar選自：芳基，取代芳基，含有一個或多個o、n、s雜原子的芳雜環(huán)；

r²選自：ch3,cf3，cn，鹵素，c2-c10不飽和烷基，如下基團，或沒有：

其中，

a選自：ch2，n；

b選自：c，o，nh，s；

r¹⁰選自：h，c1-c6烷基，c1-c6不飽和烷基，c6-c10取代芳烷基，鹵素，cf3，chf2，ch2f，or¹¹，nr¹¹r¹²，cn，co2r¹¹，conr¹¹r¹²，so2r¹¹，so2nr¹¹r¹²，no2，nconr¹¹r¹²，nco2r¹¹，oconr¹¹r¹²，csnr¹¹r¹²，ncsnr¹¹r¹²；

z選自如下基團或沒有：

其中，

r¹³，r¹⁴獨立地任選自：h，鹵素，cn，c1-c6烷基，c2-c6不飽和烷基，含氟取代c1-c6烷基，c1-c6烷氧基，c3-c6環(huán)烷基，c6-c10取代芳烷基，含有o、n、s、p雜原子的c1-c6烷基或環(huán)狀烷基或不飽和鏈狀或環(huán)狀烷基；

r¹⁵選自：h，c1-c6烷基，c2-c6不飽和烷基，c6-c10取代芳烷基，鹵素，cf3，chf2，ch2f，or¹¹，nr¹¹r¹²，cn，co2r¹¹，conr¹¹r¹²，so2r¹¹，so2nr¹¹r¹²，no2，nconr¹¹r¹²，nco2r¹¹，oconr¹¹r¹²，csnr¹¹r¹²，ncsnr¹¹r¹²。

在其中一些實施例中，x選自：ch3，h，鹵素；

y選自：h，鹵素，or³；

z選自：c2-c10不飽和烷基，或沒有；優(yōu)選乙烯基、或沒有；

w選自：oh，ocor³；

r¹選自：h，取代或不取代單膦酸酯，cor³；

r²選自：鹵素,cn,c2-c10不飽和烷基，芳基，r¹⁰取代芳基，r¹⁰取代的含有一個或多個o、n、s雜原子的芳雜環(huán)，coor³，萘環(huán)，conr³r⁴，coor³；

r³選自：h，c1-c6烷基，c2-c6不飽和烷基，r¹⁰取代的c1-c6烷基；

r⁴選自：h、c1-c6烷基，c2-c6不飽和烷基，r¹⁰取代的c1-c6烷基；

r¹⁰選自：h，鹵素，c1-c6烷基，氰基，c1-c6烷氧基，cf3。

在其中一些實施例中，x選自：ch3，h，f；優(yōu)選ch3；

y選自：h，f，oh；優(yōu)選f；

在其中一些實施例中，選自式ii結構特征化合物：

其中：

w選自：oh，或ocor³；

r¹選自：h，或cor³；

r²選自如下基團：

r³選自：異丙基。

r¹⁶選自：h，c1-c6烷基，c1-c6不飽和烷基，c6-c10取代芳烷基，鹵素，cf3，chf2，ch2f，or¹¹，nr¹¹r¹²，cn，co2r¹¹，conr¹¹r¹²，so2r¹¹，so2nr¹¹r¹²，no2，nconr¹¹r¹²，nco2r¹¹，oconr¹¹r¹²，csnr¹¹r¹²，ncsnr¹¹r¹²；

r¹¹、r¹²獨立地任選自：h、c1-c6烷基，c2-c6不飽和烷基，o、n、s雜原子取代的c1-c6烷基，o、n、s雜原子取代的c2-c6不飽和烷基。

在其中一些實施例中，r²選自如下基團：

r¹⁶選自：h，c1-c6烷基，c1-c6不飽和烷基，c6-c10取代芳烷基，鹵素，cf3，or¹¹，nr¹¹r¹²，cn，co2r¹¹，conr¹¹r¹²，so2r¹¹；

r¹¹、r¹²獨立地任選自：h、c1-c6烷基，c2-c6不飽和烷基，o、n、s雜原子取代的c1-c6烷基，o、n、s雜原子取代的c2-c6不飽和烷基。

在其中一些實施例中，選自式iii結構特征化合物：

其中：

x選自：ch3，f；

y選自：h，f；

r²選自：乙烯基，萘基，-cl，-br，乙炔基。

在其中一些實施例中，r²選自如下基團：乙烯基，-br。

本發(fā)明還公開了上述的6-甲基7位脫氮嘌呤核苷類化合物或者其藥學上可接受的鹽在制備抑制rna病毒的藥物中的應用。

在其中一些實施例中，所述rna病毒包括：hcv病毒，流感病毒，hrv病毒(鼻病毒)，rsv病毒，ebola病毒，登革熱病毒和腸道病毒。

所述應用包括單獨或與其它藥物聯(lián)用做為治療藥物用于rna病毒感染的預防和治療中。

與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明具有以下有益效果：

本發(fā)明的6-甲基7位脫氮嘌呤核苷類化合物或者其藥學上可接受的鹽，是依據(jù)rna病毒聚合酶的蛋白結構特征，設計和合成的一類新結構的化合物，該類化合物能夠抑制rna病毒，從而可以做為預防和治療如hcv,流感病毒，hrv(鼻病毒)，rsv，ebola病毒，登革熱病毒以及腸道病毒等rna病毒感染的潛在藥物。

具體實施方式

本文所用“烷基”是指飽和鏈狀烷基，“鏈狀烷基”是指直鏈或支鏈的烷基，如c1-c6烷基是指具有1至6個碳原子的飽和直鏈或支鏈的烷基，其中直鏈烷基的示例包括但不限于乙基，正丙基等，支鏈烷基的示例包括但不限于異丙基，叔丁基等；“環(huán)烷基”是指具有環(huán)狀結構的烷基，如c3-c4環(huán)烷基指具有3至4個碳原子的具有環(huán)狀結構的烷基，示例包括但不限于環(huán)丙基，環(huán)丁基、甲基取代環(huán)丙基等?！跋┗笔侵覆伙柡玩湢钔榛?，如c2～c6烯基表示碳原子數(shù)為2個到6個的具有一個雙鍵的直鏈或支鏈烯基，示例包括但不限于乙烯基、丙烯基、丁烯基、異丁烯基、戊烯基、己烯基等。

術語“雜環(huán)”代表具有5-7個成環(huán)原子、含有一到四個選自n、o、s的雜原子的飽和單環(huán)體系。示例包括但不限于：四氫呋喃、吡咯烷、哌啶、哌嗪、嗎啉等。

術語“芳雜環(huán)”代表具有5-6個成環(huán)原子、含有一到四個雜原子(選自n、o、s)且遵守hückel規(guī)則的單環(huán)體系。示例包括但不限于吡啶環(huán)、嘧啶環(huán)、噠嗪環(huán)、吡嗪環(huán)、呋喃環(huán)、噻吩環(huán)、噻唑環(huán)、噁唑環(huán)、異噁唑環(huán)、異噻唑環(huán)、咪唑環(huán)、吡唑環(huán)、三氮唑環(huán)、四氮唑環(huán)等。

術語“烷氧基”表示末端含有一個氧原子的直鏈或支鏈烷基，示例包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基等。

術語“取代”是指用指定取代基的基團置換特定結構中的氫基。本發(fā)明中烷基或環(huán)烷基上的取代，如沒有指明發(fā)生在特定的碳原子上，則表示可以發(fā)生在任何取代基個數(shù)尚未達到飽和的碳原子上。多個取代基從同一系列中選擇時，它們可以相同，也可以不同。本發(fā)明中苯環(huán)、芳雜環(huán)或者雜環(huán)上的取代，如沒有指明發(fā)生在特定的原子上，則表示可以發(fā)生在任何未被除氫與外的其它原子取代的位置。多個取代基從同一系列中選擇時，它們可以相同，也可以不同。

本發(fā)明包括式i-iii化合物的游離形式，也包括其藥學上可接受的鹽?？赏ㄟ^常規(guī)化學方法自含有堿性部分或酸性部分的本發(fā)明化合物合成本發(fā)明的藥學上可接受的鹽。通常，通過離子交換色譜或通過游離堿和化學計算量或過量的所需鹽形式的無機或有機酸在適當溶劑或多種溶劑的組合中反應制備堿性化合物的鹽。類似的，通過和適當?shù)臒o機或有機堿反應形成酸性化合物的鹽。

因此，本發(fā)明化合物的藥學上可接受的鹽包括通過堿性本發(fā)明化合物和無機或有機酸反應形成的本發(fā)明化合物的常規(guī)無毒鹽。例如，常規(guī)的無毒鹽包括自無機酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等制備的鹽，也包括自有機酸例如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、撲酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水楊酸、對氨基苯磺酸、2一乙酰氧基一苯甲酸、富馬酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羥乙基磺酸、三氟乙酸等制備的鹽。

如果本發(fā)明化合物為酸性的，則適當?shù)摹八帉W上可接受的鹽”指通過藥學上可接受的無毒堿包括無機堿及有機堿制備的鹽。得自無機堿的鹽包括鋁鹽、銨鹽、鈣鹽、銅鹽、鐵鹽、亞鐵鹽、鋰鹽、鎂鹽、錳鹽、亞錳鹽、鉀鹽、鈉鹽、鋅鹽等。特別優(yōu)選銨鹽、鈣鹽、鎂鹽、鉀鹽和鈉鹽。得自藥學上可接受的有機無毒堿的鹽，所述堿包括伯胺、仲胺和叔胺的鹽，取代的胺包括天然存在的取代胺、環(huán)狀胺及堿性離子交換樹脂例如精氨酸、甜菜堿、咖啡因、膽堿、n,n'－二芐基乙二胺、二乙胺、2一二乙基氨基乙醇、2一二甲基氨基乙醇、氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、n一乙基嗎啉、n一乙基哌啶、葡萄糖胺、氨基葡萄糖、組氨酸、羥鈷胺、異丙基胺、賴氨酸、甲基葡萄糖胺、嗎啉、哌嗪,哌啶、呱咤、多胺樹脂、普魯卡因、嘌呤、可可堿、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨基丁三醇等。

除在文獻中已知的或在實驗程序中例證的標準方法外，可采用如下實施例中的方法制備本發(fā)明化合物。結合下述的合成方案，能夠對本發(fā)明中所述的化合物以及合成方法進行更好的理解。實例中的所有參數(shù)及其余說明，除另加說明外，都是以質量為依據(jù)的。柱層析分離所用填料若未說明均為硅膠。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件，或按照制造廠商所建議的條件。所述的合成方案描述了可以用于制備本發(fā)明中所述的化合物的方法，所述的方法僅僅是為說明目的的說明性方案描述，并不構成對本發(fā)明所具有的范圍的限制。

實施例1堿基的制備

按照以上線路，包括如下步驟：

(1)2-氰基-4,4-二乙氧基丁酸乙酯(化合物1)的制備。

取一500ml的兩口瓶，將氰基乙酸乙酯(50g，0.44mol)溶于無水dmf(n,n-二甲基甲酰胺)(300ml)溶液中，加入乙醇鈉(36g，0.528mol，1.2當量)和碘化鈉(催化量)，在常溫下攪拌30min，加入2-溴-1,1-二乙氧基乙烷(66.5ml，0.44mol，1當量)，升溫至90℃，攪拌4h。冷卻至常溫，減壓蒸發(fā)除去大部分dmf，加入ea(乙酸乙酯)，攪拌10min，過濾，取濾液加飽和食鹽水萃取。收集有機相，干燥，旋干，過柱(pe：ea＝12:1，即石油醚：乙酸乙酯的體積比為12：)得淺黃色油狀液體產物61.3g，產率為60.5％。

化合物1的表征數(shù)據(jù)：¹h-nmr(400mhz,chloroform-d):σ1.18–1.22(m,6h),1.31(t,j＝7.2hz,3h),2.16–2.21(m,1h),2.24–2.29(m,1h),3.49–3.55(m,2h),3.64–3.71(m,3h),4.24(q,j＝7.2hz,2h),4.68(t,j＝5.4hz,1h).

(2)6-氨基-5-(2,2-二乙氧基乙基)-2-硫代-2,3-二氫嘧啶-4(1h)-酮(化合物2)的制備。

取一250ml單口瓶，加入化合物1(34g，14.8mmol)，用乙醇(100ml)溶解，加入乙醇鈉(12g，17.8mmol，1.2當量)，攪拌，加入硫脲(13.7g，17.8mmol，1.2當量)，升溫至95℃，回流過夜。冷卻至常溫，旋干，加入水溶解，用乙醚洗，收集水相，加入醋酸調至中性，過濾，干燥，得黃色固體的粗產品20.3g，產率為55％。

化合物2的表征數(shù)據(jù)：¹h-nmr(400mhz，dmso-d6):σ1.07(t,j＝7.2hz,6h),2.43(d,j＝5.4hz,2h),3.37–3.43(m,6h),3.56–3.61(m,2h),4.50(t,j＝5.4hz,1h),6.07(s,2h),11.5(brs,1h),11.7(brs,1h).

(3)2-硫代-2,3-二氫-1h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4(7h)-酮(化合物3)

取一250ml的單口瓶，加入化合物2(15g，5.7mmol)和0.2nhcl(18ml)，攪拌過夜，過濾，得橙黃色固體的粗產物20g。

化合物3的表征數(shù)據(jù)：¹h-nmr(400mhz，dmso-d6):σ6.33(s,1h),6.72(s,1h),11.28(s,1h),11.86(s,1h).

(4)1h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4(7h)-酮(化合物4)

取一500ml的單口瓶，加入化合物3(15g，90mmol)，用水(150ml)溶解，加入氨水(10ml)，攪拌，加入雷尼鎳(催化量)，升溫至100℃，回流5h。待反應完畢，在濾紙上墊上一層硅藻土，減壓過濾，將濾餅取出，用水和甲醇的混合液攪拌10min，再次過濾，旋干，得綠色固體產物8.25g，制備化合物3和4的兩步產率為54％。

化合物4的表征數(shù)據(jù)：¹h-nmr(400mhz，dmso-d6):σ6.43(s,1h),7.03(s,1h),7.82(s,1h),11.84(s,1h).

(5)4-氯-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(化合物5)

取一250ml的單口瓶，加入化合物4(10g，74.5mmol)和三氯氧磷(100ml)，升溫至100℃，回流反應5h。冷卻，旋干，置于0℃的低溫反應器中，加入冰塊淬滅，用乙酸乙酯萃取，干燥，旋干，過柱(pe：ea＝2:1)，得白色固體產物7.5g，產率為65.7％。

化合物5的表征數(shù)據(jù)：¹h-nmr(400mhz，dmso-d6):σ6.61(t,j＝3hz,1h),7.70(t,j＝3hz,1h),8.59(s,1h).

(6)4-氯-5-碘7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(化合物6)

取一250ml的兩口瓶，加入化合物5(5g，33mmol)，氬氣保護，加入無水dmf，緩慢加入nis(8.1g，36mmol，1.1當量)的無水dmf溶液，常溫攪拌3h。加入飽和硫代硫酸鈉溶液(50ml)淬滅反應，加入ea(100ml)，收集有機相，飽和食鹽水洗，萃取，無水硫酸鈉干燥，旋干，過柱(pe：ea＝4:1)，得白色固體產物7.4g，產率為82％。

化合物6的表征數(shù)據(jù)：¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):σ12.94(s,1h),8.59(s,1h),7.93(s,1h).

實施例2中間體的制備

(1)化合物8的制備

取一50ml兩口瓶，加入化合物6(112mg，0.40mmol)，氬氣保護，加入無水乙腈(5ml)溶解，加入bsa(n,o-雙三甲硅基乙酰胺)(0.11ml，0.44mmol，1.1當量)，常溫攪拌10min，加入溶解于干燥乙腈(5ml)中的化合物7(222mg，0.44mmol，1.1當量)，加入tmsotf(三氟甲磺酸三甲基硅酯)(0.081ml，0.42mmol，1.05當量)，室溫攪拌15min，升溫至80℃，直至tlc(薄層色譜)顯示原料反應完畢，冷卻至室溫，加入乙酸乙酯(75ml)稀釋，加入飽和nahco3(碳酸氫鈉)溶液，萃取，加入飽和食鹽水，萃取，na2so4干燥，旋干，過柱(pe：ea＝10:1)，得白色固體產物135mg，產率為45％。

化合物8的表征數(shù)據(jù)：¹h-nmr(400mhz,chloroform-d):σ8.58(s,1h),8.12(d,j＝7.2hz,2h),8.00(d,j＝7.2hz,2h),7.93(d,j＝7.2hz,2h),7.62–7.51(m,6h),7.43–7.36(m,4h),6.15(d,j＝4.4hz,1h),6.15(d,j＝18hz,2h),4.91(d,j＝12.4hz,1h),4.80(s,1h),4.70(d,j＝11.6hz,1h).

(2)化合物9的制備

取一50ml單口瓶，加入化合物8(228mg，0.315mmol)，無水四氫呋喃(5ml)溶解，置于-10℃，滴加異丙基氯化鎂氯化鋰溶液(1.3m，0.24ml，0.315mmol，1當量)，攪拌30min，tlc顯示原料反應完畢。加入1nhcl(5ml)溶液淬滅，加入ea萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，旋干，過柱(pe：ea＝10:1)，得白色固體產物151mg，產率為80％。

化合物9的表征數(shù)據(jù)：¹h-nmr(400mhz,chloroform-d):σ8.09(t,j＝5.6hz,3h),8.02-8.00(m,3h),7.61(d,j＝4.8hz,2h),7.59–7.34(m,10h),6.23(d,j＝7.6hz,1h),5.71(dd,j＝6.4,6.8hz,1h),4.73–4.66(m,3h),4.45(dd,j＝3.6,3.6hz,1h).

(3)化合物10的制備

取一25ml單口瓶，加入化合物9(100mg，0.17mmol)，無水四氫呋喃(5ml)溶解，加入pd(pph3)4(四三苯基膦鈀)(40mg，0.034mmol，0.2當量)，滴加三甲基鋁正己烷溶液(1.6m，0.2ml，2當量)，置于100℃回流，反應5min，冷卻至室溫，加入1nhcl(5ml)溶液淬滅，加入ea萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，旋干，過柱(pe：ea＝4:1)，得白色固體產物75mg，產率為78％。

化合物10的表征數(shù)據(jù)：¹h-nmr(400mhz,chloroform-d):σ8.75(s,1h),8.13(d,j＝6hz,2h),8.01(d,j＝6hz,2h),7.93(d,j＝6.4hz,2h),7.61–7.33(m,10h),6.74(d,j＝4.4hz,1h),6.57(d,j＝2.4hz,1h),6.26(t,j＝4.8hz,1h),6.17(t,j＝4hz,1h),4.88(d,j＝9.6hz,1h),4.79(d,j＝2.4hz,1h),4.70(d,j＝2.8hz,1h),2.70(s,3h).

(4)化合物11a或11b的制備

化合物11a：取一250ml的兩口瓶，加入化合物10(5g，8.7mmol)，氬氣保護，加入無水dmf，在常溫下緩慢加入nis(n-碘代丁二酰亞胺)(2.1g，9.6mmol，1.1當量)的無水dmf溶液，室溫攪拌3h。加入飽和硫代硫酸鈉溶液(50ml)淬滅反應，加入ea(100ml)，收集有機相，加入飽和食鹽水，萃取，干燥，旋干，所得粗產物11a直接投下一步。

化合物11b：取一250ml的兩口瓶，加入化合物10(1g，1.8mmol)，氬氣保護，加入無水dmf，在常溫下緩慢加入nbs(n-溴代丁二酰亞胺)(0.32g，2.0mmol，1.1當量)的無水dmf溶液，室溫攪拌3h。加入飽和硫代硫酸鈉溶液(50ml)淬滅反應，加入ea(100ml)，收集有機相，加入飽和食鹽水，萃取，干燥，旋干，所得粗產物11b直接投下一步。

(5)化合物12a或12b的制備

化合物12a或12b：取一100ml單口瓶，加入化合物11a或11b，加入nh3的甲醇溶液(30ml)溶液，室溫攪拌2h，旋干，過柱(dcm：iproh＝10：1，即二氯甲烷：異丙醇＝10:1)，分別得白色固體4.45g和0.48g，兩步產率均為80％。

化合物12a的表征數(shù)據(jù)：¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):σ8.66(s,1h),6.18(d,j＝6.2hz,1h),5.38(d,j＝6.4hz,1h),5.18(d,j＝4.8hz,1h),5.10(t,j＝5.5hz,1h),4.38(dd,j＝6.3,5.1hz,1h),4.09(dd,j＝5.0,3.2hz,1h),3.91(dd,j＝3.9,3.2hz,1h),3.64(dd,j＝11.9,5.6hz,1h),3.55(d,j＝11.9hz,1h),2.88(s,3h).ms(esi)c13h15ifn3o3requires:391.0.found:392.1.(m+h⁺).

化合物12b的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δ8.70(s,1h),8.06(s,1h),6.21(d,j＝6.2hz,1h),5.40(d,j＝6.3hz,1h),5.19(d,j＝4.8hz,1h),5.10(t,j＝5.4hz,1h),4.38(t,j＝6.2hz,1h),4.10(t,j＝4.9hz,1h),3.91(d,j＝3.6hz,1h),3.64(q,j＝11.9,5.2hz,1h),3.55(q,j＝11.9,5.5hz,1h),2.85(s,3h).¹³cnmr(125mhz,dmso-d6)δ159.5,151.6,149.7,126.3,115.6,88.1,86.6,85.5,74.3,70.6,61.5,21.1.ms(esi)c13h15brfn3o3requires:343.0,found:344.0.(m+h⁺).

實施例3

(1)化合物14的制備

取一50ml的兩口瓶，加入化合物13(1g，2.6mmol)，氬氣保護，無水dcm(10ml)溶解，置于-25℃下，加入pph3(三苯基膦)(2.2g，7.8mmol，3當量)的無水dcm(8ml)溶液，攪拌15min，再加入cbr4(2.8g，7.8mmol，3當量)的無水dcm(8ml)溶液，在-20℃下攪拌10min，直至原料反應完畢。加入硅膠，用濕法上柱，過柱(pe：ea＝12:1)，得無色透明液體1.115g(a構型)，產率為95％。

化合物14的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δ8.13(d,j＝7.2hz,2h),8.02(d,j＝7.6hz,2h),7.63-7.56(m,2h),7.50-7.42(m,4h),6.34(s,1h),5.29(dd,j＝5.3,2.8hz,1h),4.89-4.86(m,1h),4.80-4.76(m,1h),4.65-4.61(m,1h),1.72(d,j＝21.2hz,3h).

(2)化合物15的制備

取一50ml兩口瓶，加入化合物14(1.79g，7.6mmol，3當量)，氬氣保護，加入無水的mecn：tbuoh(乙腈：叔丁醇)(1.5:1)的混合溶液(8ml)，攪拌，加入tbuok(叔丁鉀)(0.85g，7.7mmol，3當量)的無水的mecn：tbuoh(1.5:1)的混合溶液(10ml)，攪拌30min，反應物溶解，變澄清，將化合物5(1.1g，2.5mmol)溶于無水mecn(10ml)，加入，緩慢升溫至50℃，攪拌5h，直至tlc顯示化合物反應完畢，冷卻至常溫，加入醋酸，調至中性，過濾掉生成的無機鹽，旋干，過柱(pe：ea＝10:1)，得白色固體產物0.65g，產率為50.1％。

化合物15的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δ8.67(s,1h),8.12(d,j＝7.6hz,2h),8.05(d,j＝4hz,2h),7.64–7.57(m,2h),7.49–7.41(m,5h)，6.64(d,j＝16hz,1h),6.59(s,1h),6.02(dd,j＝8,12hz,1h),4.92(dd,j＝4,4hz,1h),4.79–4.75(m,1h),4.67-4.11(m,1h),1.22(d,j＝20hz).ms(esi)requires:509.01.found:510.1(m+h⁺).

(3)化合物16的制備

取一25ml單口瓶，將化合物15(0.65g，1.27mmol)溶于無水thf(5ml)中，加入pd(ph3p)4(0.147g，0.127mmol，0.1當量)，加入alme3(三甲基鋁)的正己烷溶液(1.6m，0.1524mmol，0.91ml，1.2當量)，置于100℃下，回流反應5min，冷卻至常溫，加入ea稀釋，再加入1m稀鹽酸(10ml)，萃取，干燥，旋干，過柱(pe：ea＝4:1)，得白色固體產物0.59g，產率為96％。

化合物16的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δ8.77(s,1h),8.10(d,j＝8hz,2h),8.04(d,j＝8hz,2h),7.58–7.52(m,2h),7.46–7.34(m,5h),6.64(d,j＝20hz),6.53(d,j＝4hz,1h),6.07(dd,j＝12,8hz,1h),4.90(dd,j＝4.4hz,1h),4.77–4.73(m,1h),4.68–4.63(m,1h),2.70(s,3h),1.20(d,j＝20hz).ms(esi)requires:489.13.found:490.1(m+h⁺).

(4)化合物18a或18b的制備

化合物18a：取一50ml兩口瓶，加入化合物16(0.62g，1.26mmol)，氬氣保護，加入無水dmf(5ml)溶解，將nis(2g，8.87mmol，7當量)溶于無水dmf(5ml)，緩慢加入，置于80℃下，反應5h，用油泵旋去大部分dmf，ea溶解，加入飽和硫代硫酸鈉溶液(10ml)淬滅反應，加入ea(20ml)，收集有機相，加入飽和食鹽水，萃取，干燥，旋干，過柱(pe：ea＝5:1)，得白色固體產物(化合物17a)，直接用于下一步；將化合物17a用nh3的甲醇溶液(5ml)溶解，常溫攪拌30min，旋干，過柱(dcm：iproh＝10:1)，得白色固體產物0.323g，兩步產率為65％。

化合物18a的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod-d4)δ8.66(s,1h),8.13(s,1h),6.53(d,j＝20hz,1h),4.22(dd,j＝8,8hz,1h),4.06–4.03(m,1h),3.87(d,j＝4hz,2h),2.98(s,3h),1.00(d,j＝24hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ161.8,152.0,151.1,132.8,119.7,101.6(d,jc-f＝180hz),89.8(d,j＝39hz),83.4,72.3(d,j＝18hz),60.4,53.6,20.6,16.6(d,j＝25hz).ms(esi)c13h15ifn3o3requires:407.01.found:407.9(m+h⁺).

化合物18b，18c：參照化合物18a的方法制備化合物18b和18c。

化合物18b的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.74(s,1h),8.14(s,1h),6.46(d,j＝17.5hz,1h),5.70(d,j＝6.5hz,1h),5.35(t,j＝5hz,1h),4.20–4.12(m,1h),3.93(d,j＝9hz,1h),3.90–3.87(m,1h),3.73-3.69(m,1h),2.86(s,3h),0.94(d,j＝22.5hz,3h).¹³cnmr(125mhz,dmso-d6)δ159.7,151.6,148.8,125.3,115.3,101.9(d,jc-f＝180hz),88.3,87.8(d,j＝38hz),82.0,70.4(d,j＝18hz),58.8,20.9,16.3(d,j＝25hz).ms(esi)c13h15brfn3o3requires:359.03.found:360.0(m+h⁺).

化合物18c的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod-d4)δ8.68(s,1h),7.99(s,1h),6.56(d,j＝16hz,1h),4.21(dd,j＝8,12hz,1h),4.06-4.03(m,1h),3.84(m,dd,j＝4,4hz,2h),2.91(s,3h),1.02(d,j＝20hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ161.4,152.6,150.2,124.5,116.1,106.7,103.0(d,jc-f＝181hz),89.9(d,j＝39hz),83.4,72.4(d,j＝18hz),60.4,21.1,16.6(d,j＝25hz).ms(esi)c13h15clfn3o3requires:315.08.found:316.1(m+h⁺).

實施例4

(1)化合物21的制備

取一50ml單口瓶，將化合物19(1.962g，4.22mmol)溶于dcm(10ml)中，加入33％w/w的hbr(溴化氫)的醋酸溶液(2.1ml，8.45mmol，2當量)，室溫攪拌過夜。將反應液倒入50ml飽和nahco3溶液中，攪拌10min，dcm萃取，加入飽和食鹽水，萃取，干燥，旋干，得化合物20粗品。

取一100ml兩口瓶，加入化合物5(1.937g，12.66mmol，3當量)，氬氣保護，加入無水的mecn：tbuoh(1.5:1)的混合溶液(20ml)，攪拌，加入tbuok(1.42g，12.66mol，3當量)的無水的mecn：tbuoh(1.5:1)的混合溶液(15ml)，攪拌30min，反應物溶解，變澄清，將化合物20粗品溶于無水mecn(5ml)，加入，緩慢升溫至50℃，攪拌5h，直至tlc顯示化合物反應完畢，冷卻至常溫，加入醋酸，調至中性，過濾掉生成的無機鹽，旋干，過柱(pe：ea＝10:1)，得白色固體產物1.08g，兩步產率為54％。

化合物21的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δ8.69(s,1h),8.15(m,4h),7.60–7.56(m,1h),7.53–7.43(m,4h),6.91(dd,j＝2.8,2.8hz,1h),6.67(d,j＝4hz,1h),5.78(dd,j＝2.8,2.4hz,1h),5.41(dd,j＝2.8,2.8hz,1h),4.80–4.56(m,2h),4.12(d,j＝6.8hz,1h).(2)化合物22的制備

將化合物21(0.65g，1.28mmol)溶于無水thf(5ml)中，加入pd(ph3p)4(0.15g，0.128mmol，0.1當量)，加入alme3的正己烷溶液(1.6m，0.16mmol，0.95ml，1.2當量)，置于100℃下，回流反應5min，冷卻至常溫，加入ea稀釋，再加入1m稀鹽酸(10ml)，萃取，干燥，旋干，過柱(pe：ea＝4:1)，得白色固體產物0.58g，產率為96％。

化合物22的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δ8.79(s,1h),8.11–8.07(m,4h),7.66–7.41(m,7h),6.92(dd,j＝2,2hz,1h),6.59(d,j＝3.6hz,1h),6.59(d,j＝3.6hz,1h),5.76(d,j＝17.2hz,1h),4.80(t,j＝8.8hz,2h),4.55(d,j＝3.2hz,1h),2.71(s,3h).

(3)化合物24a或24b的制備

化合物24a：取一50ml兩口瓶，加入化合物22(0.62g，1.27mmol)，氬氣保護，加入無水dmf(5ml)溶解，將nis(2g，8.89mmol，7當量)溶于無水dmf(5ml)，緩慢加入，置于50℃下，反應5h，用油泵旋去大部分dmf，ea溶解，加入飽和硫代硫酸鈉溶液(10ml)淬滅反應，加入ea(20ml)，收集有機相，加入飽和食鹽水，萃取，干燥，旋干，過柱(pe：ea＝5:1)，得白色固體產物(化合物23a)，直接用于下一步。將化合物23a用nh3的甲醇溶液(5ml)溶解，常溫攪拌30min，旋干，過柱(dcm：iproh＝10:1)，得白色固體產物0.323g，兩步產率為66％。

化合物24a的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meoh-d4)δ8.64(s,1h),7.88(d,j＝2hz,1h),6.76(dd,j＝4,4hz,1h),5.15–5.00(m,1h),4.49–4.43(m,1h),3.98(q,j＝4.8,4.8hz,1h),3.87–3.77(m,2h),2.97(s,3h).¹³cnmr(125mhz,meoh-d4)δ162.2,152.7,152.1,135.3(d,j＝3hz),120.3,97.3(d,jc-f＝191hz),86.1(d,j＝4hz),84.6(d,j＝17hz),75.6(d,j＝24hz),63.0,53.9,21.3.ms(esi)c12h13ifn3o3requires:393.00.found:394.0(m+h⁺).

化合物24b，24c：參照化合物24a的方法制備化合物24b和24c。

化合物24b的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meoh-d4)δ8.65(s,1h),7.81(d,j＝2hz,1h),6.78(dd,j＝4,4hz,1h),5.16–5.01(m,1h),4.50–4.43(m,1h),3.98(q,j＝4.8,4.4hz,1h),3.87–3.77(m,2h),2.93(s,3h).¹³cnmr(125mhz,meoh-d4)δ162.0,153.1,151.7,129.8(d,j＝4hz),118.1,97.3(d,jc-f＝191hz),90.7,86.1(d,j＝4hz),84.4(d,j＝17hz),75.6(d,j＝25hz),63.0,21.7.ms(esi)c12h13brfn3o3requires:345.01.found:346.0(m+h⁺).

化合物24c的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.72(s,1h),7.88(d,j＝1.5hz,1h),6.74–6.68(m,1h),5.95(d,j＝3.6hz,1h),5.27–5.08(m,1h),5.27–5.08(m,1h),4.43(q,j＝4,4.4hz,1h),3.83(t,j＝4.4hz,1h),3.71–3.60(m,2h),2.83(s,3h).¹³cnmr(125mhz,dmso-d6)δ160.1,152.6,149.5,125.4(d,j＝3hz),114.8,104.4,95.8(d,jc-f＝191hz),83.9(d,j＝5hz),81.7(d,j＝17hz),73.1(d,j＝23hz),61.1,22.0.ms(esi)c12h13clfn3o3requires:301.06.found:302.1(m+h⁺).

實施例5

(1)化合物26的制備

取一50ml兩口瓶，加入化合物6(903mg，3.23mmol，1.1當量)、化合物25(1.7g，2.93mmol)，氬氣保護，無水乙腈(20ml)溶解，加入dbu(1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯)(1.3ml，8.69mmol，3當量)，在0℃下，滴加入tmsotf(2.1ml，11.62mmol，4當量)，升溫至80℃攪拌，直至tlc顯示原料反應完畢，冷卻至室溫，加入乙酸乙酯(75ml)稀釋，加入飽和nahco3溶液，萃取，飽和食鹽水洗，na2so4干燥，旋干，過柱(pe：ea＝10:1)，得白色固體產物0.87g，產率為40％。

化合物26的表征數(shù)據(jù)：¹h-nmr(400mhz,chloroform-d):σ8.75(s,1h),8.11-7.96(m,6h),7.69(s,1h),7.61-7.54(m,6h),7.47-7.34(m,6h),6.95(s,1h),6.03(d,j＝5.8hz,1h),4.95(dd,j＝12.2,3.4hz,1h),4.85(dd,j＝12.2,5.8hz,1h),4.72(dd,j＝5.8,3.4hz,1h),1.59(s,3h).

(2)化合物27的制備

取一50ml單口瓶，加入化合物26(456mg，0.63mmol)，無水四氫呋喃(5ml)溶解，置于-10℃，滴加異丙基氯化鎂氯化鋰溶液(1.3m，0.48ml，0.61mmol，1當量)，攪拌30min，tlc顯示原料反應完畢。加入1nhcl(10ml)溶液淬滅，加入ea萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，旋干，過柱(pe：ea＝10:1)，得白色固體產物291mg，產率為74％。

化合物27的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c26h22cln3o6requires:507.12.found:508(m+h⁺).

(3)化合物28的制備

取一25ml單口瓶，加入化合物27(202mg，0.34mmol)，加入無水四氫呋喃(8ml)溶解，加入pd(pph3)4(80mg，0.068mmol，0.2當量)，滴加三甲基鋁正己烷溶液(1.6m，0.4ml，2當量)，置于100℃回流，反應5min，冷卻至室溫，加入1nhcl(8ml)溶液淬滅，加入ea萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，旋干，過柱(pe：ea＝4:1)，得白色固體產物160mg，產率為79％。

化合物28的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c27h25n3o6requires:487.17.found:488(m+h⁺).

(4)化合物30a或30b的制備

化合物30a：取一250ml的兩口瓶，加入化合物28(2.5g，4.3mmol)，氬氣保護，加入無水dmf(20ml)，在常溫下緩慢加入nis(1.1g，30.3mmol，1.1當量)的無水dmf溶液，室溫攪拌3h。加入飽和硫代硫酸鈉溶液(25ml)淬滅反應，加入ea(50ml)，收集有機相，加入飽和食鹽水，萃取，干燥，旋干，所得粗產物直接投下一步。加入nh3的甲醇溶液(20ml)溶液，室溫攪拌2h，旋干，過柱(dcm：iproh＝10：1)得白色固體1.66g，兩步產率為80％。

化合物30a的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c13h16in3o4requires:404.12.found:405(m+h⁺).

化合物30b：參照化合物30a的方法制備化合物30b。

化合物30b的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c13h16brn3o4requires:357.03.found:358(m+h⁺).

實施例6

(1)化合物32的制備

取一250ml單口瓶，加入化合物31(5g，17.89mmol)，無水乙腈(100ml)溶解，分別加入koh(氫氧化鉀)(1.53g，26.84mmol，1.5當量)，tda-1(三(3,6-二氧雜庚基)胺)(5.73ml，17.89mmol，1當量)和化合物6(16.33g，35.78mmol，2當量)，置于50℃，直至tlc顯示原料反應完畢。冷卻至室溫，加入ea(80ml)稀釋，加入1mhcl(80ml)，過濾掉沉淀物，水洗，收集有機相，無水硫酸鈉干燥，旋干，過柱(pe：ea＝10:1)，得白色固體0.8g，產率為8％。

化合物32的表征數(shù)據(jù)：¹h-nmr(400mhz,chloroform-d):σ8.66(s,1h),8.14-8.08(m,4h),7.66-7.61(m,2h),7.58(d,j＝2.8hz,1h),7.54-7.47(m,4h),6.73(dd,j＝11.4,6.8hz,1h),5.84(dd,j＝13.4,5.5hz,1h),4.87(dd,j＝12.4,3.6hz,1h),4.73(dd,j＝12.4,4.5hz,1h),4.65(dd,j＝5.6,4.5hz,1h).

(2)化合物33的制備

取一50ml單口瓶，加入化合物32(800mg，1.25mmol)，無水四氫呋喃(10ml)溶解，置于-10℃，滴加異丙基氯化鎂氯化鋰溶液(1.3m，0.96ml，1.25mmol，1當量)，攪拌30min，tlc顯示原料反應完畢。加入1nhcl(10ml)溶液淬滅，加入ea萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，旋干，過柱(pe：ea＝10:1)，得白色固體產物519mg，產率為81％?；衔?3的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c25h18clf2n3o5requires:513.09.found:514(m+h⁺).

(3)化合物34的制備

取一25ml單口瓶，加入化合物33(500mg，0.97mmol)，無水四氫呋喃(8ml)溶解，加入pd(pph3)4(225mg，0.19mmol，0.2當量)，滴加三甲基鋁正己烷溶液(1.6m，1.2ml，2當量)，置于100℃回流，反應5min，冷卻至室溫，加入1nhcl(8ml)溶液淬滅，加入ea萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，旋干，過柱(pe：ea＝4:1)，得白色固體產物402mg，產率為84％?；衔?4的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c26h21f2n3o5requires:493.14.found:494(m+h⁺).

(4)化合物36a或36b的制備

化合物36a：取一50ml的兩口瓶，加入化合物34(400mg，0.81mmol)，氬氣保護，加入無水dmf，在常溫下緩慢加入nis(201mg，0.89mmol，1.1當量)的無水dmf溶液，室溫攪拌3h。加入飽和硫代硫酸鈉溶液(5ml)淬滅反應，加入ea(5ml)，收集有機相，加入飽和食鹽水，萃取，干燥，旋干，所得粗產物直接投下一步。加入nh3的甲醇溶液(10ml)溶液，室溫攪拌2h，旋干，過柱(dcm：iproh＝10：1)得白色固體273mg，兩步產率為82％?；衔?6a的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c12h12f2in3o3requires:410.99.found:412(m+h⁺).

化合物36b：參照化合物36a的方法制備化合物36b。化合物36b的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c12h12f2brn3o3requires:363.0.found:364(m+h⁺).

實施例7

(1)化合物38的制備

取一50ml單口瓶，加入化合物27(3g，7.7mmol)，無水dcm(20ml)溶解，加入咪唑(1.1g，16.9mmol，2.2當量)，攪拌溶解，在0℃下滴加((ipr)2sicl)2o(1,3二氯-1,1,3,3-四異丙基二硅氧烷)(2.5ml，7.7mmol，1當量)，攪拌15min，升至室溫攪拌，直至tlc顯示原料反應完畢。加入水和飽和食鹽水，dcm萃取，無水硫酸鈉干燥，旋干，得油狀液體2.9g，產率為60％。化合物38的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c24h40in3o5si2requires:633.16.found:634(m+h⁺).

(2)化合物39的制備

取一250ml單口瓶，加入化合物38(2.8g，4.42mmol)，tea(三乙胺)(1.5ml，10.6mmol，2.4當量)和dmap(4-二甲氨基吡啶)(54mg，0.44mmol)，無水乙腈(150ml)溶解，滴加醋酸酐(1ml，10.6mmol，2.4當量)，室溫攪拌1.5h。加入ea(100ml)稀釋，加入飽和nahco3溶液，萃取，水洗，收集有機相，無水硫酸鈉干燥，旋干，得無色油狀液體2.98g，產率為100％。

化合物39的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c26h42in3o6si2requires:675.17.found:676(m+h⁺).

(3)化合物40的制備

取一250ml單口瓶，加入化合物39(2.98g,4.40mmol)，無水乙腈(150ml)溶解，加入et3n3hf(氟化氫三乙胺絡合物)(1.44ml，8.81mmol，2當量)，室溫攪拌過夜，旋干，過柱(dcm：iproh＝10：1)得白色固體1.56g，產率為82％?；衔?0的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c14h16in3o5requires:433.01.found:434(m+h⁺).

(4)化合物41的制備

取一250ml單口瓶，加入化合物40(1.5g，1.84mmol)，dmf(50ml)溶解，加入tsohh2o(對甲基苯磺酸水合物)(1.31g，3.68mmol，2當量)，置于0℃，加入dhp(4.73ml，27.6mmol，15當量)，升至室溫，攪拌過夜。加入ea(100ml)稀釋，加入飽和nahco3溶液，萃取，飽和食鹽水洗，收集有機相，無水硫酸鈉干燥，旋干，過柱(pe：ea＝4:1)，得黃色固體1.68g，產率為81％?；衔?1的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c24h32in3o7requires:601.13.found:602(m+h⁺).

(5)化合物42的制備

取一100ml單口瓶，加入化合物41(1.6g，2.66mmol)，無水甲醇(30ml)溶解，滴加甲醇鈉的甲醇溶液(1m，2.7ml，2.7mmol，1當量)，室溫攪拌過夜，加入1mhcl溶液中和反應，萃取，飽和食鹽水洗，收集有機相，無水硫酸鈉干燥，旋干，過柱(pe：ea＝3:1)得黃色固體1.25g，產率為84％?；衔?2的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c22h30in3o6requires:559.12.found:560(m+h⁺).

(6)化合物43的制備

取一50ml單口瓶，加入化合物42(650mg，1.16mmol)，無水dcm(16ml)溶解，加入吡啶(0.7ml，8.7mmol，7.8當量)，置于0℃，滴加dast(二乙胺基三氟化硫)(0.77ml，5.80mmol，5當量)。升至室溫，攪拌過夜。加入飽和nahco3溶液中和反應，加入dcm和水，萃取，無水硫酸鈉干燥，旋干，過柱(pe：ea＝4:1)，所得產物直接投下一步，90％tfa溶液溶解，反應液攪拌2h，加入甲醇旋干，過柱(dcm：iproh＝10：1)得白色固體163mg，兩步產率為36％?；衔?3的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c12h13fin3o3requires:393.00.found:394(m+h⁺).

實施例8

(1)化合物45a的制備

取一25ml單口瓶，加入化合物18b(150mg，0.42mmol)，重蒸thf(5ml)溶解，滴加叔丁基氯化鎂的thf溶液(1m，0.88ml，0.88mmol，2.1當量)，滴加過程超過2min，攪拌30min，滴加化合物44(230mg，0.504mmol，1.2當量)的thf溶液，滴加過程超過3min，在35℃下攪拌18h。加入甲醇淬滅，旋干，過柱(dcm:iproh＝12:1)，得白色固體137mg，產率為52％?；衔?5a的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c25h31fbrn4o7prequires:628.11.found:629.1(m+h⁺).

(2)化合物46a的制備

取一10ml單口瓶，加入化合物18b(50mg，0.14mmol)和dmap(催化量)，重蒸dcm(2ml)溶解，加入tea(48μl，0.35mmol，2.5當量)，置于0℃，滴加異丁酰氯(35μl，0.35mmol，2.5當量)，攪拌5min，常溫攪拌0.5h，依次分別加入nahco3溶液和飽和食鹽水，萃取，旋干，重結晶。得白色固體28.6mg，產率為42％?；衔?6a的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c21h27fbrn3o5requires:499.11.found:500.1(m+h⁺).

實施例9

(1)化合物18d的制備

將化合物18a(300mg，0.9mmol)，pd(pph3)4(80mg，0.09mmol，10mol％)溶于無水dmf(5ml)，氬氣保護，加入三丁基(乙烯基)錫(650μl，2.7mmol，3當量)，置于100℃下攪拌30min，冷卻至常溫，旋干，過柱(dcm：iproh＝10:1)，得白色固體產物150mg，產率為66％。

化合物18d的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod-d4)δ8.62(s,1h),8.07(s,1h),7.10(dd,j＝11.2,10.8hz,1h),6.59(d,j＝18hz,1h),5.67(dd,j＝1.2,1.6hz,1h),5.29(dd,j＝1.6,1.2hz,1h),4.35(dd,j＝9.2,9.6hz,1h),4.08–4.04(m,1h),3.89(dd,j＝2.8,2.8hz,2h),2.82(s,3h),1.05(d,j＝22.4hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ161.2,151.7,151.6,129.3,123.6,117.6,117.4,115.7,101.6(d,jc-f＝180hz),89.7(d,j＝39hz),83.3,72.5(d,j＝18hz),60.6,22.6,16.4(d,j＝25hz).ms(esi)c15h17fn3o3requires:307.13.found:308.1(m+h⁺).

(2)化合物45b的制備：參照化合物45a的方法制備化合物45b?；衔?5b的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c27h34fn4o7prequires:578.21.found:579.1(m+h⁺).

(3)化合物46b的制備：參照化合物46a的方法制備化合物46b?；衔?6b的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c23h30fn3o5requires:447.22.found:448.1(m+h⁺).

實施例10

(1)化合物18e的制備

取一10ml單口瓶，將化合物18a(50mg，0.122mmol)，pd(oac)2(醋酸鈀)(3mg，0.0122mmol，10mol％),pph3(7mg，0.0244mol，20mol％)，溶于無水dmf(2ml)，氬氣保護，加入無水三乙胺(34μl，0.244mmol，2當量)，苯乙烯(22μl，0.184mmol，1.5當量)，置于100℃反應30min，冷卻至常溫，旋干，過柱(dcm：iproh＝10:1)，得白色固體產物23mg，產率為49％。

化合物18e的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.69(s,1h),8.25(s,1h),7.59(d,j＝7.6hz,2h),7.50(d,j＝16hz,1h),7.40(t,j＝7.2hz,2h),7.29(t,j＝7.2hz,1h),7.04(d,j＝16hz,1h),6.53(d,j＝18.4hz,1h),5.68(d,j＝7.2hz,1h),5.35(t,j＝4.8hz,1h),4.29–4.18(m,1h),3.97-3.90(m,2h),3.76–-3.73(m,1h),2.87(s,3h),1.01(d,j＝22.4hz,3h).¹³cnmr(125mhz,dmso-d6)δ206.3,159.8,151.0,150.0,137.0,128.7,127.3,126.1,121.8,119.8,115.5,114.7,100.5(d,jc-f＝180hz),87.5(d,j＝36hz),81.9,70.6(d,j＝18hz),59.2,30.6,23.0,16.1(d,j＝25hz).ms(esi)c21h22fn3o3requires:383.16.found:384.2(m+h⁺).

(2)化合物45c的制備：參照化合物45a的方法制備化合物45c。

化合物45c的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(500mhz,chloroform-d)δ8.75(s,1h),7.55(s,1h),7.40(d,j＝6hz,1h),7.32–7.20(m,10h),7.14(t,j＝5.6hz,1h),6.98(d,j＝12.8hz,1h),6.65(d,j＝15.2hz,1h),4.95–4.90(m,1h),4.65–4.61(m,1h),4.50–4.37(m,1h),4.32(d,j＝38.4hz,1h),4.23(d,j＝6.8hz,1h),3.99–3.94(m,1h),3.75(t,j＝8.8hz,1h),3.32(s,1h),2.90(s,3h),1.31(d,j＝5.6hz,3h),1.18–1.14(m,9h).¹³cnmr(125mhz,chloroform-d)δ202.7,202.7,189.9,180.4,180.3,180.2,167.0,160.2,159.0,158.0,156.9,155.8,154.5,151.4,149.8,149.8,148.4,146.2,146.0,129.6(d,jc-f＝181hz),109.4(d,j＝7.7hz),101.8,101.7(d,j＝52.4hz),98.4,94.7,80.0,51.2,50.2,50.1,48.9,48.8,44.9(d,j＝25hz).ms(esi)c33h38fn4o7prequires:652.25.found:653.1(m+h⁺).

(3)化合物46c的制備：參照化合物46a的方法制備化合物46c。

化合物46c的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(500mhz,chloroform-d)δ8.76(s,1h),7.60(s,1h),7.49(d,j＝6hz,2h),7.40(t,j＝5.6hz,2h),7.33–7.28(m,2h),6.94(d,j＝12.8hz,1h),6.67(d,j＝14.8hz),5.61(q,j＝6.8hz,1h),4.49–4.38(m,3h),2.90(s,3h),2.71(t,j＝4.8hz,2h),1.24–1.10(m,15h).¹³cnmr(125mhz,chloroform-d)δ176.9,176.6,160.7,152.2,151.1,137.3,130.5,129.1,128.1,126.5,120.8,119.9,117.0,116.9,99.7(d,jc-f＝184.5hz),89.2(d,j＝38.6hz),71.9(d,j＝16.1hz),62.2,34.3,34.1,30.0,23.6,19.4,19.3,19.2,19.1,17.3(d,j＝25hz).ms(esi)c29h34fn3o5requires:523.25.found:524.1(m+h⁺).

實施例11

(1)化合物18f的制備：參照化合物18e的方法制備化合物18f。

化合物18f的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod-d4)δ8.64(s,1h),8.19(s,1h),7.30(s,1h),7.21(q,j＝16.4hz,2h),7.11(s,1h),7.02(s,1h),6.60(d,j＝17.6hz,1h),4.35(dd,j＝23.8,8.9hz,1h),4.09(m,2h),3.92(d,j＝11.5hz,1h),2.89(s,3h),1.06(d,j＝22.1hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ161.3,151.9,151.8,143.9,128.7,127.0,125.4,124.2,123.4,119.8,117.5,116.8,102.4(d,j＝179.8),89.9(d,j＝37.5),83.4,72.6(d,j＝17.5),60.6,22.7,16.6(d,j＝25.1).ms(esi):c19h20fn3o3srequired:389.12.found:390.1(m+h⁺).

(2)化合物45d的制備：參照化合物45a的方法制備化合物45d。

化合物45d的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c31h36fn4o7psrequires:658.20.found:659.0(m+h⁺).(3)化合物46d的制備：參照化合物46a的方法制備化合物46d。

化合物46d的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c27h32fn3o5srequires:529.20.found:530.1(m+h⁺).

實施例12

(1)化合物48的制備

取一單口瓶，加入3-甲基-2-醛基噻吩(0.5ml)，氬氣保護，乙醚(5ml)溶解，將其置于0℃下攪拌，逐滴加入亞甲基三甲基硅基氯化鎂的乙醚溶液(1ml)，反應12h至反應完全。加入乙醚與飽和氯化銨溶液，取乙醚層，旋干，并加入1mhcl水溶液，攪拌2h，加入乙醚，萃取分液，干燥，低溫冷旋得粗產物3-甲基-2-乙烯基噻吩。

(2)化合物18g的制備

取一50ml單口瓶，加入化合物18a(50mg，0.12mmol)，三苯基磷(6.5mg，0.024mmol，20％mol)，醋酸鈀(3mg，0.012mmol，10％mol)，氬氣保護下加入含有上述粗產物3-甲基-2-乙烯基噻吩的dmf溶液，及三乙胺(35μl，0.24mmol，2當量)，置于100℃下反應0.5h。加入ea和飽和nahco3溶液，萃取，無水硫酸鈉干燥，旋干，過柱(dcm:iproh＝10:1)，得白色固體27mg，產率為55％。

化合物18g的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod-d4)δ8.69(s,1h),8.17(s,1h),7.12(s,2h),6.88(d,j＝3.2hz,1h),6.70(m,1h),6.61(d,j＝18hz,1h),4.35(m,1h),4.05(m,1h),3.93(m,1h),2.91(s,1h),2.50(s,1h),1.03(d,j＝22hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ161.3,152.0,151.9,144.3,128.9,127.0,124.8,124.2,123.4,120.0,117.5,116.8,102.4(d,j＝179.8hz),89.9(d,j＝37.5hz),83.4,72.6(d,j＝17.5hz),60.6,39.6,22.7,16.6(d,j＝25.1hz).ms(esi)c20h22fn3o3srequires:403.14.found:404.2(m+h⁺).

實施例13

(3)化合物18h的制備：參照化合物18f的方法制備化合物18h(35mg，產率61％)。

化合物18h的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod-d4))δ8.68(s,1h),8.25(s,1h),7.12(s,2h),7.17(s,1h),7.15-6.70(m,1h),7.12(d,j＝12.8hz,1h),6.61(d,j＝18hz,1h),4.35(m,1h),4.05(m,1h),3.93(m,1h),2.92(s,1h),1.05(d,j＝22hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ161.5,152.4,150.9,143.9,128.7,127.0,125.4,124.2,123.4,120.4,117.5,116.9,102.4(d,j＝180.0hz),89.9(d,j＝38.5hz),83.4,72.6(d,j＝17.6hz),60.8,22.6,16.8(d,j＝25.7hz).ms(esi)c19h19brfn3o3srequires:467.03.found:468.0(m+h⁺).

實施例14

(1)化合物18i的制備

參照化合物18g方法制備化合物18i(26mg，產率54％)。

化合物18i的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod-d4)δ8.72(s,1h),8.46(s,1h),7.89(d,j＝16hz,1h),7.83(d,j＝3.2hz,1h),7.56(d,j＝3.6hz,1h),7.29(d,j＝16hz,1h),6.64(d.j＝18hz,1h),4.39(dd,j＝24.4,9.4hz,1h),4.14(m,2h),3.97(m,1h),2.98(s,3h),1.11(d,j＝22.2hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ168.8,161.5,152.2,152.2,144.1,126.9,125.2,121.8,119.9,117.5,115.4,102.4(d,j＝178.9hz),90.0(d,j＝38.9hz),83.5,72.6(d,j＝17.6hz),60.6,22.6,16.7(d,j＝25.1hz).ms(esi):c18h19fn4o3srequired:390.1.found:391.0(m+h⁺).

實施例15

(1)化合物53的制備

取一50ml單口瓶，加入3-溴-2-甲醛噻吩(250mg，1.3mmol)，溴化亞銅(352mg，3.93mmol，3當量)，碘化亞銅(75mg，0.39mmol，30％mol)，dmf(5ml)溶解，加熱回流6h。加入ea及飽和nahco3溶液，萃取，無水硫酸鈉干燥，旋干，過柱(pe:ea＝6:1)，得到固體產物3-氰基-2-甲醛噻吩169mg，產率93.4％。

(2)化合物54的制備

取一100ml單口瓶，加入ph3p-ch2i(1.5g，3.65mol)與tbuok(408.8mg，3.65mmol)，n2保護，無水thf溶解，置于0℃下反應0.5h，加入化合物53反應5h。之后加入ea和飽和nahco3，萃取，無水硫酸鈉干燥，濃縮，得3-氰基-2-乙烯基噻吩粗產物。

(3)化合物18j的制備

參照化合物18g的方法制備化合物18j(28mg，產率56％)。

化合物18j的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod-d4)δ8.69(s,1h),8.68(s,1h),8.28(s,1h),7.40(s,2h),7.19(d,j＝18.8hz,1h),6.64(d,j＝18hz,1h),4.39(dd,j＝24.4,9.4hz,1h),4.14(m,2h),3.97(m,1h),2.91(s,3h),1.08(d,j＝22hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ161.5,152.1,135.9,135.8,131.7,131.6,127.0,124.4,123.3,121.9,116.0,115.9,111.9,102.4(d,j＝178.9),90.0(d,j＝38.9),83.5,72.6(d,j＝17.6),60.6,22.8,16.7(d,j＝25.1).ms(esi):c20h19fn4o3srequired:414.2.found:415.0(m+h⁺).

實例化合物18g-j可以根據(jù)化合物18g的兩種前藥實例的合成方法，合成出此類化合物的兩種前藥形式。

實施例16

(1)化合物18k的制備

參照化合物18h的方法制備化合物18k(30mg，產率65％)。

化合物18k的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod-d4)δ8.67(s,1h),8.21(s,1h),7.53(s,1h),7.37(s,1h),7.33(d,j＝16.4hz,1h),6.90(d,j＝16hz,1h),6.49(s,1h),6.43(s,1h),4.35(m,1h),4.11(m,1h),3.93(m,1h),2.91(s,3h),1.08(d,j＝22hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ161.4,154.5,151.9,143.5,123.3,118.8,118.7,117.6,116.9,112.6,109.4,102.5(d,j＝178.5hz),90.1(d,j＝38.6hz),83.4,72.6(d,j＝17.8hz),60.7,22.8,16.7(d,j＝25.3hz).ms(esi)c19h20fn3o4requires:373.14.found:374.0(m+h⁺).

(2)化合物45f的制備：參照化合物45a的方法制備化合物45f?；衔?5f的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c31h36fn4o8prequires:642.23.found:643.1(m+h⁺).

(3)化合物46f的制備：參照化合物46a的方法制備化合物46c。化合物46f的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c27h32fn3o6requires:513.23.found:514.1(m+h⁺).

實施例17

(1)化合物18l的制備

取一25ml單口瓶，將化合物18a(110mg，0.27mmol)，pd(pph3)2cl2(二(三苯基膦)二氯化鈀)(31mg，0.027mmol，10mol％)，cui(10mg，0.054mmol，20mol％)溶于無水dmf和thf的混合溶液(thf:dmf＝90:10，2ml)中，氬氣保護，加入無水三乙胺(75μl，0.54mmol，2當量)，三甲基硅乙炔(70μl，0.54mmol，2當量)，置于45℃下攪拌5h，冷卻至常溫，旋干，過柱(dcm：iproh＝10:1)，得白色固體產物。將產物溶于甲醇中，加入k2co3(74.5mg，0.54mmol，2當量)，常溫攪拌30min，過柱(dcm：iproh＝10:1)，得白色固體產物80mg，兩步產率為98％。

化合物18l的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod-d4)δ8.68(s,1h),8.18(s,1h),6.58(d,j＝17.6hz,1h),4.31(dd,j＝8.8,9.2hz,1h),4.06–4.03(m,1h),3.88(dd,j＝2.8,3.2hz,2h,),3.69(s,1h),2.92(s,3h),1.06(d,j＝22hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ162.3,152.7,150.8,132.2,118.8,101.6(d,jc-f＝180hz),98.4,89.8(d,j＝39hz),83.5,82.0,77.3,72.3(d,j＝18hz),60.5,20.7,16.4(d,j＝25hz).ms(esi)c15h15fn3o3requires:305.12.found:306.0(m+h⁺).

(2)化合物18m的制備

取一25ml單口瓶，加入化合物18l(35mg，0.12mmol)，碘苯(19μl，0.17mmol)，疊氮鈉(11.05mg，0.17mmol)，無水硫酸銅(7.1mg，0.06mmol)，維生素鈉(12mg，0.06mmol)，l-脯氨酸(7mg，0.06mmol)，碳酸鈉(6.4mg，0.06mmol)，在氬氣保護下，加入dmso：h2o＝9:1的混合溶液溶解，并于60℃下加熱攪拌5h。加入ea與飽和nahco3溶液萃取，用無水硫酸鈉干燥，旋干，過柱(dcm:iproh＝10:1)，得白色固體32mg，產率為68％。

化合物18m的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.06(s,1h),8.78(s,1h),8.20(s,1h),7.99(s,1h),7.97(s,1h),7.67(t,2h),7.55(t,1h),6.61(d,1h),5.72(d,1h),5.24(t,1h),4.26-4.16(m,1h),3.99-3.88(m,1h),3.75-3.70(m,1h),2.50(s,1h),1.03(d,j＝22hz,3h).¹³cnmr(125mhz,dmso-d6)δ160.3,151.3,150.1,141.3,136.6,129.9,129.6,128.7,125.3,121.5,120.1,115.3,106.0,101.9,100.5,87.7(d,j＝158.5hz),82.0,70.8(d,j＝70hz),59.3,23.1,16.3(d,j＝25hz).ms(esi)c21h21fn6o3requires:424.0.found:425.0(m+h⁺).

(3)化合物45g的制備：參照化合物45a的方法制備化合物45g?；衔?5g的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c33h37fn7o7prequires:693.25.found:694.1(m+h⁺).

(4)化合物46g的制備：參照化合物46a的方法制備化合物46g?；衔?6g的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c29h33fn6o5requires:564.25.found:565.1(m+h⁺).

實施例18

(1)化合物18n的制備

取一10ml單口瓶，加入化合物18a(50mg，0.122mmol)，pd(oac)2(3mg，0.0122mmol，10mol％),pph3(7mg，0.0244mol，20mol％)，溶于無水dmf(2ml)，氬氣保護，加入無水三乙胺(34μl，0.244mmol，2當量)，2-乙烯基吡啶(20μl，0.184mmol，1.5當量)，置于100℃反應30min，冷卻至常溫，旋干，過柱(dcm：iproh＝10:1)，得白色固體產物19.3mg，產率為41％。

化合物18n的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod-d4)δ8.69(s,1h),8.54(d,j＝4.5hz,1h),8.39(s,1h),7.97(d,j＝15.9hz,1h),7.84(m,1h),7.58(d,j＝7.9hz,1h),7.33–7.28(m,1h),7.14(d,j＝16.0hz,1h),6.64(d,j＝17.8hz,1h),4.39(dd,j＝24.4,9.5hz,1h),4.17–4.09(m,2h),3.95(m,1h),2.98(s,3h),1.10(d,j＝22.2hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ161.6,156.7,152.0,150.2,138.8,130.8,129.0,125.3,124.6,123.6,123.4,117.6,116.4,102.4(d,j＝179.6hz),90.0(d,j＝38.5hz),83.5,72.6(d,j＝17.8hz),60.6,23.0,16.6(d,j＝25.3hz).ms(esi):c20h21fn4o3required:384.16.found:385.1(m+h⁺).

(2)化合物45h的制備：參照化合物45a的方法制備化合物45h?；衔?5h的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c32h37fn5o7prequires:653.24.found:654.0(m+h⁺).

(3)化合物46h的制備參照化合物46a的方法制備化合物46h?；衔?6h的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c28h33fn4o5requires:522.24.found:523.1(m+h⁺).

實施例19

參照化合物18g的方法制備化合物18o?；衔?8o的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod-d4)δ8.67(s,1h),8.17(s,1h),7.51(d,j＝8.6hz,2h),7.33(d,j＝16.2hz,1h),7.02(d,j＝16.1hz,1h),6.96(d,j＝8.6hz,2h),6.63(d,j＝17.9hz,1h),4.39(dd,j＝24.4,9.3hz,1h),4.16–4.09(m,2h),3.94(s,1h),3.85(s,3h),2.94(s,3h),1.10(d,j＝22.2hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ161.4,160.9,151.7,131.5,131.0,129.9,129.3,128.6,123.0,117.7,115.2,115.0,102.3(d,j＝178.4hz),90.0(d,j＝38.8hz),83.4,72.7(d,j＝17.5hz),60.7,55.8,22.8,16.7(d,j＝25.2hz).ms(esi):c22h24fn3o4required:413.18.found:414.1(m+h⁺).

參照化合物18g的方法制備化合物18p?；衔?8p的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod-d4)δ8.68(s,1h),8.22(s,1h),7.64–7.57(m,2h),7.42(d,j＝15.8hz,1h),7.13(m,2h),7.06(d,j＝16.1hz,1h),6.63(d,j＝17.9hz,1h),4.38(dd,j＝24.4,9.4hz,1h),4.13(m,2h),3.95(m,1h),2.94(s,3h),1.10(d,j＝22.2hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ161.4,151.8,135.2,135.1,131.9,131.8,130.0,129.1,123.5,120.4,120.0,117.7,117.2,116.7,102.5(d,j＝178.5hz),90.1(d,j＝38.6hz),83.4,72.6(d,j＝17.8hz),60.7,22.8,16.7(d,j＝25.3hz).ms(esi):c21h21f2n3o3required:401.16.found:402.1(m+h⁺).

參照化合物18g的方法制備化合物18q。化合物18q的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod)δ8.71(s,1h),8.35(s,1h),7.76(d,j＝7.6hz,2h),7.65(dd,j＝24.2,7.2hz,3h),7.15(d,j＝13.2hz,1h),6.65(d,j＝17.7hz,1h),4.39(dd,j＝24.4,9.4hz,1h),4.14(m,2h),3.97(m,1h),2.98(s,3h),1.11(d,j＝22.2hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod)δ161.1,151.8,151.4,142.6,130.3,130.0,129.5,127.7,126.7,126.6,126.0,124.5,123.1,117.6,116.9,102.4(d,j＝178.9hz),90.0(d,j＝38.9hz),83.5,72.6(d,j＝17.6hz),60.6,22.6,16.7(d,j＝25.1hz).ms(esi):c22h21f4n3o3required:451.15.found:452.2(m+h⁺).

參照化合物18g的方法制備化合物18r?；衔?8r的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod)δ8.69(s,1h),8.28(s,1h),7.68(d,j＝7.2hz,6h),7.55(d,j＝16.1hz,1h),7.48(t,j＝7.5hz,2h),7.38(d,j＝7.3hz,1h),7.13(d,j＝16.1hz,1h),6.65(d,j＝18.0hz,1h),4.41(dd,j＝24.2,9.2hz,1h),4.14(m,2h),3.99–3.93(m,1h),2.98(s,3h),1.11(d,j＝22.3hz,3h).¹³cnmr(126mhz,meod)δ161.4,151.8,151.7,141.9,141.6,137.8,130.9,130.7,130.0,128.4,128.3,128.2,128.1,127.9,127.8,127.7,123.6,120.4,118.0,117.4,102.5(d,j＝178.5hz),90.1(d,j＝38.6hz),83.4,72.6(d,j＝17.8hz),60.7,22.8,16.7(d,j＝25.3hz).ms(esi):c27h26fn3orequired:459.20.found:460.2(m+h⁺).

參照化合物18g的方法制備化合物18s?；衔?8s的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod)δ8.71(s,1h),8.52(d,j＝5.6hz,2h),8.41(s,1h),7.83(d,j＝15.9hz,1h),7.61(d,j＝5.4hz,2h),7.08(d,j＝16.1hz,1h),6.64(d,j＝17.7hz,1h),4.39(dd,j＝24.3,9.6hz,1h),4.13(m,2h),3.96(m,1h),2.98(s,3h),1.11(d,j＝22.2hz,3h).¹³cnmr(126mhz,meod)δ161.6,152.1,152.0,150.2,147.6,127.3,126.4,125.1,125.0,123.1,122.3,117.5,116.2,102.4(d,j＝178.8hz),90.0(d,j＝38.8hz),83.5,72.6(d,j＝17.5hz),60.7,23.0,16.7(d,j＝25hz).ms(esi):c20h21fn4o3required:384.16.found:385.1(m+h⁺).

參照化合物18g的方法制備化合物18t?；衔?8t的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod)δ8.70(d,j＝8.4hz,2h),8.62(s,1h),8.46(d,j＝11.1hz,2h),8.19(d,j＝15.1hz,1h),7.20(d,j＝15.8hz,1h),6.65(d,j＝16.8hz,1h),4.39(dd,j＝24.8,9.7hz,1h),4.15(m,2h),3.97(d,j＝11.4hz,1h),2.98(s,3h),1.11(d,j＝22.2hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ161.6,152.8,152.1,145.8,144.8,144.5,143.6,130.1,127.5,125.2,118.3,116.0,102.0(d,j＝178.7hz),90.6(d,j＝38.9hz),83.3,72.6(d,j＝17.7hz),60.8,22.4,16.7(d,j＝25.0hz).ms(esi):c19h20fn5o3required:385.16.found:386.1(m+h⁺).

參照化合物18g的方法制備化合物18u?；衔?8u的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod)δ8.69(s,1h),8.53(s,1h),8.09(d,j＝15.6hz,1h),6.61(d,j＝17.6hz,1h),6.46(d,j＝15.6hz,1h),4.36(dd,j＝9.6,9.6hz,1h),4.10-4.06(m,1h),3.91(dd,j＝2.4,2.4hz,2h),3.79(s,3h),2.90(s,3h),1.08(d,j＝22hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ169.1,161.5,152.3,152.2,137.3,127.1,118.1,117.4,113.9,101.6(d,jc-f＝180hz),89.8(d,j＝38hz),83.6,72.2(d,j＝18hz),60.4,52.1,22.9,16.5(d,j＝25hz).ms(esi)c17h20fn3o5requires:365.14.found:366.0(m+h⁺).

實例化合物18o-u可以根據(jù)化合物18g實例的合成方法，合成出此類化合物以及其兩種前藥形式。

實施例20

(1)化合物18v的制備

取一10ml單口瓶，將化合物18a(50mg，0.12mmol)，pd(pph3)2cl2(9mg，0.012mmol，10mol％)，cui(5mg，0.024mmol，20mol％)溶于無水dmf(2ml)，氬氣保護，加入無水三乙胺(25μl，0.18mmol，1.5當量)，苯乙炔(25μl，0.18mmol，1.5當量)，置于45℃下攪拌5h，冷卻至常溫，旋干，過柱(dcm：iproh＝10:1)，得白色固體產物24mg，產率為51％。

化合物18v的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.77(s,1h),8.29(s,1h),7.56(d,j＝5.6hz,2h),7.44(d,j＝5.2hz,3h),6.51(d,j＝17.6hz,1h),5.71(d,j＝6.4hz,1h),5.35(s,1h),4.24–4.13(m,1h),3.97–3.88(m,2h),3.74-3.71(m,1h),2.92(s,3h),1.01(d,j＝22.4hz,3h).¹³cnmr(125mhz,dmso-d6)δ160.5,152.0,149.2,130.8,129.5,128.8,128.6,122.4,116.7,100.4(d,jc-f＝180hz),96.3,91.4,87.7(d,j＝40hz),82.9,82.0,70.3(d,j＝17hz),58.9,30.6,20.8,16.1(d,j＝25hz).ms(esi)c21h20fn3o3requires:381.15.found:382.2(m+h⁺).

(2)化合物45i的制備：參照化合物45a的方法制備化合物45c?；衔?5i的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c33h36fn4o7prequires:650.23.found:651.1(m+h⁺).

(3)化合物46i的制備：參照化合物46a的方法制備化合物46c?；衔?6i的表征數(shù)據(jù)：ms(esi)c29h32fn3o5requires:521.23.found:522.1(m+h⁺).

實施例21

根據(jù)上述反應路線，參照下述操作步驟，制備得到化合物18w，18x，18y，18z，18a和18b：取一10ml兩口瓶，加入化合物18a(50mg，0.12mmol)，硼酸試劑(0.18mmol，1.5當量)，na2co3(碳酸鈉)(40mg，0.36mmol，3當量)，pd(oac)2(3mg，0.012mmol，10mol％)，pph3(7mg，0.024mmol，20mol％)，氬氣保護，溶于去離子水：mecn(2:1)的混合溶液(5ml)，置于100℃下攪拌3h，冷卻至常溫，加入稀hcl(1m)調至中性，分液，收集有機相，依次用飽和nahco3溶液和飽和食鹽水水洗，收集有機相，干燥，旋干，過柱(dcm：iproh＝10:1)。

化合物18w的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.73(s,1h),7.92(s,1h),7.50–7.39(m,5h),6.58(d,j＝18.4hz,1h),5.66(d,j＝6.4hz,1h),5.22(s,1h),4.25–4.17(m,1h),3.95–3.85(m,2h),3.69–3.66(m,1h),2.46(s,3h),1.03(d,j＝22hz,3h).¹³cnmr(125mhz,dmso-d6)δ159.5,150.9,150.0,134.0,129.8,128.1,127.1,123.8,117.4,115.5,100.5(d,jc-f＝180hz),87.4(d,j＝36hz),81.8,70.5(d,j＝18hz),58.9,22.8,16.1(d,j＝25hz).ms(esi)c19h20fn3o3requires:357.15.found:358.2(m+h⁺).

化合物18x的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod-d4)δ8.70(s,1h),7.89(s,1h),7.52(t,j＝6.4hz,2h),7.22(t,j＝6.8hz,2h),6.68(d,j＝14.4hz,1h),4.36(dd,j＝7.6,7.6hz,1h),4.08(t,j＝4.4hz,2h),3.88(d,j＝10hz,1h),2.52(s,3h),1.13(d,j＝18hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ164.9,162.9,161.3,151.8,151.6,133.0(d,j＝8.1hz),131.6,131.6,125.7,118.9,117.7,116.0(d,j＝21.6hz),101.7(d,jc-f＝179hz),89.7(d,j＝38.6hz),83.3,72.5(d,j＝17.8hz),60.5,22.5,16.5(d,j＝25.3hz).ms(esi)c19h19f2n3o3requires:375.14.found:376.3(m+h⁺).

化合物18y的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod-d4)δ8.73(s,1h),8.03(s,1h),7.79(d,j＝6.4hz,2h),7.73(d,j＝6.8hz,1h),6.70(d,j＝14.4hz,1h),4.38(dd,j＝7.6,7.6hz,1h),4.09(t,j＝4hz,2h),3.89(dd,j＝1.6,2hz,1h),2.56(s,3h),1.15(d,j＝18.4hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ161.3,152.0,151.9,139.7,131.6,130.4(d,j＝32.3hz),126.3(d,j＝14hz),126.2,126.2,124.7(d,jc-f3＝269.5hz),118.5,117.4,101.7(d,jc-f＝179.4hz),89.7(d,j＝39.1hz),83.4,72.5(d,j＝17.8hz),60.5,22.9,16.5(d,j＝25.3hz).ms(esi)c20h19f4n3o3requires:425.14.found:426.1(m+h⁺).

化合物18z的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod-d4)δ8.68(s,1h),7.81(s,1h),7.40(d,j＝6.4hz,2h),7.03(d,j＝6.4hz,2h),6.68(d,j＝14.4hz,1h),4.36(dd,j＝7.6,7.6hz,1h),4.07(t,j＝4.4hz,2h),3.86(s,4h),2.52(s,3h),1.13(d,j＝18hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ161.3,160.9,151.6,151.6,132.3,127.5,125.2,119.8,117.9,114.8,101.7(d,jc-f＝179.1hz),89.7(d,j＝38hz),83.3,72.6(d,j＝17.9hz),60.6,55.7,22.4,16.5(d,j＝25.4hz).ms(esi)c20h22fn3o4requires:387.16.found:388.3(m+h⁺).

化合物18a的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod-d4)δ8.76(s,1h),8.61(s,2h),8.17(s,1h),7.62(s,2h),6.66(d,j＝14hz,1h),4.38(dd,j＝7.8,8.2hz,1h),4.10(d,j＝10hz,2h),3.90(d,j＝10hz,1h),2.637(s,3h),1.14(d,j＝18hz,3h,).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ161.4,152.2,150.1,145.0,127.2,126.3,117.0,116.9,101.7(d,jc-f＝179.5hz),89.8(d,j＝38.8hz),83.5,72.4(d,j＝17.9hz),60.5,23.2,16.5(d,j＝25.4hz).ms(esi)c18h19fn4o3requires:358.14.found:359.1(m+h⁺).

化合物18b的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod-d4)δ8.74(s,1h),7.99–7.94(m,3h),7.60–7.51(m,4h),7.46–7.41(m,1h),6.77(dd,j＝4.4,4.4hz,1h),4.39–4.93(m,1h),4.14(m,2h),3.86(m,1h),2.03(s,3h),1.24(q,j＝14.4hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ161.4,152.0,135.0,134.8,129.9,129.5,129.4,127.6,127.5,127.1,126.7,126.4,126.3,119.4,117.2,101.7(d,jc-f＝183hz),89.9(d,j＝30hz),83.3,72.6(d,j＝18.4hz),60.6,21.2,16.8(d,j＝25.4hz).ms(esi)c23h22fn3o3requires:407.16.found:408.16(m+h⁺).

實施例22

化合物18c的制備：將化合物18a(100mg，0.246mmol)，zn(cn)2(氰化鋅)(44mg，0.369mmol，1.5當量)，pd(pph3)4(43mg，0.0369mmol，15mol％)溶于無水dmf(2ml)，氬氣保護，置于150℃下攪拌5h，冷卻至常溫，旋干，過柱(dcm：iproh＝10:1)，得白色固體產物11mg，產率為15％。

化合物18c的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meod-d4)δ8.82(s,1h),8.76(s,1h),6.61(d,j＝16.8hz,1h),4.33(dd,j＝9.2,9.2hz,1h),4.09–4.06(m,1h),3.90(dd,j＝2.4,2.4hz,2h),2.91(s,3h),1.11(d,j＝22hz,3h).¹³cnmr(125mhz,meod-d4)δ162.7,153.2,151.0,136.3,117.8,116.1,101.4(d,jc-f＝174hz),102.8,89.8(d,j＝40hz),86.7,82.7,72.0(d,j＝18hz),60.3,20.8,16.3(d,j＝24hz).ms(esi)c14h15fn4o3requires:306.11.found:307.1(m+h⁺).

化合物18d的制備：將化合物18c(10mg，0.033mmol)置于10ml封管中，溶于1，4-二氧六環(huán)，加入氨水，雙氧水，擰緊，置于100℃下攪拌30min，冷卻至常溫，旋干，過柱(dcm：iproh＝10:1)，得白色固體產物6mg，產率為57％。

化合物18d的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.73(s,1h),8.18(s,1h),7.77(s,1h),7.23(s,1h),6.54(d,j＝18.4hz,1h),5.67(d,j＝6.8hz,1h),5.15(d,j＝5.2hz,1h),4.26–4.15(m,1h),3.95–3.89(m,2h),3.72–3.69(m,1h),2.86(s,3h),1.00(d,j＝22.4hz,3h).¹³cnmr(125mhz,dmso-d6)δ165.0,161.0,151.4,150.2,127.8,114.8,112.7,100.5(d,jc-f＝175.9hz),87.3(d,j＝40.6hz),82.0,70.9(d,j＝17.6hz),59.4,23.7,16.3(d,j＝25hz).ms(esi)c14h17fn4o4requires:324.12.found:325.1(m+h⁺).

化合物18e的制備：將化合物18a(40mg，0.1mmol)，pd(pph3)4(18mg，0.015mmol，15mol％)溶于無水dmf(10ml)，氬氣保護，加入三丁基(2-噻吩基)錫(57mg，0.15mmol，1.5當量)，置于100℃下攪拌30min，冷卻至常溫，旋干，過柱(dcm：iproh＝10:1)，得白色固體產物17.05mg，產率為48％。

化合物18e的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.74(s,1h),8.06(s,1h),7.60(d,j＝4hz,1h),7.24(t,j＝2.4hz,1h),7.17(dd,j＝2.8,2.8hz,1h),6.55(d,j＝14.4hz,1h),5.68(d,j＝5.6hz,1h),5.29(t,3.6hz,1h),4.24–4.16(m,1h),3.95(d,j＝7.2hz,1h),3.89–3.86(m,1h),3.71–3.67(m,1h),2.55(s,3h),1.01(d,j＝18hz,3h).¹³cnmr(125mhz,dmso-d6)δ159.8,151.3,149.8,134.4,128.2,127.6,126.2,125.1,115.7,109.4,100.5(d,jc-f＝179.1hz),87.5(d,j＝38.5hz),81.9,70.3(d,j＝17.3hz),58.8,22.5,16.2(d,j＝24.9hz).ms(esi)c17h18fn3o3srequires:363.11.found:364.2(m+h⁺).

實施例23

化合物24d合成步驟同合成化合物18l方法，白色固體產物，兩步產率為95％。

化合物24d的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meoh-d4)δ8.66(s,1h),7.95(d,j＝2hz,1h),6.75(dd,j＝4,4hz,1h),5.17–5.02(m,1h),4.50–4.44(m,1h),3.99(q,j＝4.8,4.4hz,1h),3.88–3.78(m,2h),3.67(s,1h),2.92(s,3h).¹³cnmr(125mhz,meoh-d4)δ161.9,152.6,150.9,133.9,118.6,97.8,96.4(d,jc-f＝192hz),85.3(d,j＝4hz),83.8(d,j＝17hz),81.7,77.4,74.8(d,j＝17hz),62.1,20.6.ms(esi)c14h14fn3o3requires:291.10.found:292.1(m+h⁺).

化合物24e合成步驟同合成化合物18u方法，白色固體產物，產率是49％

化合物24e的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meoh-d4)δ8.67(s,1h),8.29(s,1h),8.09(d,j＝16hz,1h),6.77(d,j＝15.6hz,1h),6.49(d,j＝15.6hz,1h),5.18(d,j＝52hz,1h),4.52(d,j＝18.4hz,1h),4.00(d,j＝4hz,1h),3.91–3.84(m,2h),3.79(s,3h),3.67(s,1h),2.89(s,3h).¹³cnmr(125mhz,meoh-d4)δ169.2,161.1,152.3,152.2,137.4,128.9,117.9,117.3,113.4,96.4(d,jc-f＝192hz),85.4,83.9(d,j＝17hz),74.6(d,j＝27hz),62.0,52.1,22.9.ms(esi)c16h18fn3o5requires:351.12.found:352.1(m+h⁺).

化合物24f合成步驟同合成化合物18d方法，白色固體產物，產率是68％。

化合物24f的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meoh-d4)δ8.60(s,1h),7.84(d,j＝1.6hz,1h),7.10–7.03(m,1h),6.76(dd,j＝4,4hz,1h),5.67(dd,j＝1.6,1.6hz,1h),5.29(dd,j＝1.2,1.6hz,1h),5.15–5.01(m,1h),4.51–4.45(m,1h),3.97(t,j＝4.8hz,1h),3.89–3.79(m,2h),2.82(s,3h).¹³cnmr(125mhz,meoh-d4)δ160.8,151.8,151.6,129.4,125.4(d,j＝4hz),117.3,117.0,115.5,96.5(d,jc-f＝192hz),85.1(d,j＝4hz),83.6(d,j＝17hz),74.9(d,j＝24hz),62.2,22.5.ms(esi)c14h16fn3o3requires:293.12.found:294.1(m+h⁺).

化合物24g合成步驟同合成化合物18d方法，白色固體產物，產率為48％。

化合物24g的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,meoh-d4)δ8.68(s,1h),7.76(s,1h),7.48(d,j＝3.6hz,1h),7.16(q,j＝4,2.8hz,2h),6.82(q,j＝3.2,3.2hz,1h),5.18–5.06(m,1h),4.51–4.46(m,1h),3.99(q,j＝3.6,4hz,1h),3.87–3.31(m,2h),2.01(s,3h).¹³cnmr(125mhz,meoh-d4)δ161.1,151.9,151.7,135.7,129.5,128.8,128.3,127.0,117.9,111.2,96.5(d,jc-f＝192hz),85.2,83.6(d,j＝17hz),74.9(d,j＝25hz),62.2,22.1.ms(esi)c16h16fn3o3srequires:349.09.found:350.1(m+h⁺).

化合物24h合成步驟同合成化合物18c方法，白色固體產物，產率為14％

化合物24h的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.85(s,1h),8.71(d,j＝1.6hz,1h),6.73(q,j＝4.4,4.4hz,1h),6.00(d,j＝3.6hz,1h),5.33–5.14(m,1h),5.20–5.14(m,1h),4.44(q,j＝3.6,3.6hz,1h),3.91(q,j＝4.4,4.8hz,1h),3.74–2.33(m,2h),2.82(s,3h).¹³cnmr(125mhz,dmso-d6)δ160.1,152.8,149.2,136.6,115.6,115.0,94.5(d,jc-f＝192hz),84.3,83.6(d,j＝6hz),81.9(d,j＝17hz),72.1(d,j＝23hz),60.1,20.7.ms(esi)c13h13fn4o3requires:292.10.found:293.0(m+h⁺).

化合物24i合成步驟同合成化合物18d方法，白色固體產物，產率是59％。

化合物24i的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.71(s,1h),8.15(s,1h),7.84(brs,1h),7.20(brs,1h),6.74(q,j＝4.4,4.4hz,1h),6.00(br,1h),5.26–5.11(m,1h),5.05(brs,1h),4.43–4.37(m,1h),3.89(q,j＝4.8,4.8hz,1h),3.71–2.64(m,2h),2.88(s,3h).¹³cnmr(125mhz,dmso-d6)δ164.8,160.9,151.2,150.4,129.5,114.9,112.2,94.7(d,jc-f＝191hz),83.5(d,j＝5hz),81.2(d,j＝17hz),72.9(d,j＝23hz),60.7,24.0.ms(esi)c13h15fn4o4requires:310.11.found:311.1(m+h⁺).

化合物24j合成步驟同合成化合物18v方法，白色固體產物，產率是53％。

化合物24j的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.75(s,1h),8.12(d,j＝1.6hz,1h),7.58(q,j＝2.4,1.2hz,2h),7.46(q,j＝5.6,4.4hz,3h),6.73(dd,j＝4.8,4.4hz,1h),5.96(d,j＝5.2hz,1h),5.30-5.12(m,2h),4.47–4.39(m,1h),3.88(q,j＝4.4,4.8hz,1h),3.75–3.63(m,2h),2.93(s,3h).¹³cnmr(125mhz,dmso-d6)δ160.8,152.5,149.9,131.8,131.3,129.3,129.1,123.0,117.0,96.5,95.4(d,jc-f＝191hz),91.8,83.7(d,j＝6hz),83.4,81.7(d,j＝17hz),72.9(d,j＝23hz),60.7,21.3.ms(esi)c20h19fn4o3requires:367.13.found:368.0.(m+h⁺).

化合物24k合成步驟同合成化合物18e方法，白色固體產物，產率是43％。

化合物24k的表征數(shù)據(jù)：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.62(s,1h),7.99(s,1h),7.55(d,j＝7.6hz,2h),7.47(d,j＝16hz,1h),7.37(t,j＝7.6hz,2h),7.26(t,j＝7.8hz,1h),7.06(d,j＝16.4hz,1h),6.79(q,j＝4,4hz,1h),5.19–5.04(m,1h),4.55–4.49(m,1h),4.01–3.97(m,1h),3.93–3.83(m,2h),2.91(s,3h).¹³cnmr(125mhz,dmso-d6)δ161.0,152.0,151.7,138.8,131.0,129.7,128.6,127.3,125.4,125.3,117.6,116.7,96.6(d,jc-f＝193hz),85.2(d,j＝4hz),83.7(d,j＝16hz),74.9(d,j＝24hz),62.3,22.8.ms(esi)c20h19fn4o3requires:369.15.found:370.0.(m+h⁺).

實驗例

(1)化合物的h1n1病毒和h3n2病毒抑制活性的測定。

1.mdck細胞的準備

在37℃、5％co2的培養(yǎng)箱中進行mdck細胞培養(yǎng)，培養(yǎng)基為加10％fbs和1％鏈霉素青霉素雙抗的dmem(購置invitrogen)。把培養(yǎng)好的mdck細胞消化5-10min,消化時間看細胞狀態(tài)而定，用完全培養(yǎng)基終止消化，然后用細胞計數(shù)板或細胞計數(shù)儀計數(shù)，以每孔2.5x10⁴個細胞計算,每塊96孔板以120孔計算制備細胞懸液，然后每孔加100μl鋪板。放到37℃孵箱培養(yǎng)18-24h貼壁備用。

2.病毒感染液的準備(實驗前準備)。50ml體系用量：dmem為48ml，7.5％bsa為2ml，2mg/mltpck胰酶為50μl。

3.稀釋化合物，用病毒感染液稀釋化合物，以每孔110μl計算，每種濃度化合物須做二個復孔，4#(h3n2a/hongkong/8/68)和3#(h1n1a/wsn/33)用ribavirin做對照，從10μm開始5倍稀釋共7個梯度。

4.洗板，把實驗用的鋪有mdck細胞的96孔板培養(yǎng)上清吸掉，每孔加100μlhanks液，輕輕拍打，然后吸掉上清，再加入100μlhanks液。

5.加入化合物，每孔100μl，設不加化合物對照。37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)三天。

6.加入cck-8，37℃孵育2h后于酶標儀上檢測光吸收，波長為450nm。

7.檢測的od值分析每個化合物的毒性。

(2)化合物對influenzaa抑制活性和細胞毒性的測試結果

表1目標化合物對influenzaa抑制活性和細胞毒性的測試結果

a:病毒的半抑制濃度；b:細胞的半抑制濃度。

從上述結果可知，本發(fā)明所提供的6-甲基7位脫氮嘌呤核苷類化合物對甲型流感病毒具有廣譜抑制作用，若干化合物對野生型h3n2和突變型h1n1流感病毒有抑制活性，對h1n1和h3n2兩種流感病毒半數(shù)抑制濃度，化合物18e、18n和18f少于陽性對照物利巴韋林，特別是化合物18n，具有很好的抑制活性，且細胞毒性較小。

(3)化合物的登革熱病毒抑制活性的測定方法

1、a549細胞培養(yǎng)基：含10％fbs(胎牛血清)的dmem完全培養(yǎng)基。病毒維持液：含2％fbs，1.2％cmc的dmem完全培養(yǎng)基?；衔镉胐mso溶解成10000μm至于-20℃冰箱保存，取用時用培養(yǎng)基稀釋成對應濃度。

2、化合物細胞毒性實驗(cc50：50％cytotoxicconcentration)

由此實驗確定化合物最大無毒計量(mntd，maximumnon-toxicdose)，即細胞存活80％以上所對應的化合物濃度，并以此濃度作為一個化合物劑量上限。將a549細胞鋪于96孔板，每孔細胞數(shù)1×10⁴，37℃，5％co2孵育24h。去除培養(yǎng)基更換成含0μm，0.41μm，1.23μm，3.7μm，11.1μm，33.3μm，100μm化合物的培養(yǎng)基(200μl/well，三復孔)37℃孵育48h。避光條件下，向每孔加入5mg/mlmtt28μl，37℃孵育4h。吸出廢液，每孔加入200μldmso(sigma)，避光混勻，用多功能酶標儀(biotek’ssynergy^tm2multi-detectionmicroplatereader)測定490nm吸光度。應用microsoftexcel2013計算cc50及mntd。

3、化合物抗病毒活性實驗

將a549細胞以4×10⁴/well鋪于24孔板，37℃，5％co2孵育24h。去除培養(yǎng)基，pbs清洗2次，加入200μl/well含對應濃度化合物病毒液(moi:1)吸附2h。去除病毒液，用pbs清洗3次，加入500μl含梯度濃度(0.0041倍、0.037倍、0.11倍、0.33倍、1倍的mntd)化合物的病毒維持液。37℃，5％co2培養(yǎng)48h，分別回收上清液和細胞沉淀，置于-80℃冰箱保存。

4、提取上清液中2型登革病毒rna

每份樣品取200μl上清液，應用magen^tm公司的病毒上清提取試劑盒(logpureviraldna/rnakit#10601)提取rna。每份樣品用50μl無rna酶的超純水洗脫，置于-80℃冰箱保存。

5、逆轉錄rna取10μl

rna洗脫液，應用thermo^tm公司的逆轉錄試劑盒(revertaidfirststrandcdnasynthesiskit#k1622)逆轉錄rna至cdna。產物置于4℃冰箱保存。

6、熒光定量pcr

denv2-ngc上下游引物及探針來源于lifetechnologies^tm公司，探針法pcr試劑來源于roche^tm的lightcycler480probesmaster#04887301001。

6.1制作標準曲線

取病毒原液，10倍稀釋(10^-5，10^-6，10^-7，10^-8，10^-9，10^-10)按相同步驟提取rna，逆轉錄rna，取相同量(2μl)做熒光定量pcr。以pcr的ct值為縱坐標，以拷貝數(shù)(copynumber)10的對數(shù)(即稀釋倍數(shù))為橫坐標，做直線回歸，得到log(copynumber)與ct值的關系。ct＝-3.092×log(copynumber)+43.96(r²＝0.905)

6.2熒光定量pcr

取樣品的逆轉錄產物2μl，做熒光定量pcr，檢測denv2-ngc，記錄ct值，根據(jù)標準曲線計算對應的拷貝數(shù)。以對應的無病毒，無化合物培養(yǎng)的上清樣品作為陰性對照組(mock)；以對應的有病毒，無化合物培養(yǎng)的上清樣品作為空白對照組(control)。每一塊24孔板均有一個陰性和空白對照孔。

6.3計算抑制率及ec50(病毒的半抑制濃度)：ct值＝-3.0924×log(病毒拷貝數(shù))+43.96病毒抑制率(％)＝100–(樣品組拷貝數(shù)/空白組拷貝數(shù))×100

ec50應用microsoftexcel2013的函數(shù)公式計算：log(ec50)＝forecast(50％，logconcentration,％viralinhibition)

(4)化合物對登革熱病毒抑制活性和細胞毒性的測試結果

表2.目標化合物對denv2ngc病毒抑制活性和細胞毒性的測試結果。

a:病毒的半抑制濃度；b:細胞的半抑制濃度。

從上述結果可知，本發(fā)明所提供的6-甲基7位脫氮嘌呤核苷類化合物對登革熱病毒有抑制活性，其中化合物18d和24b的抑制活性很好，分別達到2.081和0.183μm，選擇性分別為大于72和26,抑制活性和選擇性都優(yōu)于上市藥物利巴韋林(ec50＝11.821μm，選擇性為12)。特別是其中化合物18d，抑制活性非常好且細胞毒性小。

以上所述實施例的各技術特征可以進行任意的組合，為使描述簡潔，未對上述實施例中的各個技術特征所有可能的組合都進行描述，然而，只要這些技術特征的組合不存在矛盾，都應當認為是本說明書記載的范圍。

以上所述實施例僅表達了本發(fā)明的幾種實施方式，其描述較為具體和詳細，但并不能因此而理解為對發(fā)明專利范圍的限制。應當指出的是，對于本領域的普通技術人員來說，在不脫離本發(fā)明構思的前提下，還可以做出若干變形和改進，這些都屬于本發(fā)明的保護范圍。因此，本發(fā)明專利的保護范圍應以所附權利要求為準。