本發(fā)明屬于生物發(fā)酵領(lǐng)域，具體涉及一種春雷霉素發(fā)酵液的固液分離方法。
背景技術(shù)：
春雷霉素是放線菌發(fā)酵形成的微生物殺菌劑，具有高效低毒的特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于水稻稻瘟病及蔬菜病害的防治方面。春雷霉素易溶于水，在發(fā)酵液中存在于發(fā)酵液中，其固液分離主要是將菌絲體、菌體未利用的蛋白質(zhì)、糖、油脂去除，春雷霉素發(fā)酵液固液分離為后提取的第一步，是高濃度產(chǎn)品生產(chǎn)的必要環(huán)節(jié)，其發(fā)酵液中含有未利用的油脂、糖類，其固液分離難度較大。
傳統(tǒng)的固液分離方法為板框過(guò)濾，板框過(guò)濾具有成本較低的優(yōu)點(diǎn)，但板框過(guò)濾需要高壓，濾餅層被壓成濾速較慢，濾餅層中含有大量的春雷霉素，收率較低，通常只有70％左右，如果想提高收率，只能通過(guò)用大量的水沖洗濾餅，但由于其濾速較慢，過(guò)濾時(shí)間較長(zhǎng)，造成生產(chǎn)效率低下。陶瓷膜屬于錯(cuò)流過(guò)濾，陶瓷膜過(guò)濾具有濾速較快的優(yōu)點(diǎn)，生產(chǎn)過(guò)程中可以通過(guò)多次沖洗來(lái)提高收率，由于其過(guò)濾速度快，整個(gè)過(guò)濾過(guò)程用時(shí)是板框過(guò)濾的二分之一甚至更少，經(jīng)過(guò)多次沖洗，其收率超過(guò)90％。但是，如果采用該工藝，每批過(guò)濾完畢都需要對(duì)陶瓷膜進(jìn)行再生，再生過(guò)程需要用到大量的酸堿溶液，產(chǎn)生的酸堿及有機(jī)廢水難于處理，按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行處理，其生產(chǎn)成本必然大大提高，進(jìn)而影響農(nóng)民的使用成本，若不嚴(yán)格處理，將會(huì)對(duì)環(huán)境造成嚴(yán)重污染，行業(yè)內(nèi)甚至出現(xiàn)因環(huán)保不過(guò)關(guān)而停產(chǎn)的現(xiàn)象。隨著國(guó)家對(duì)環(huán)保要求越來(lái)嚴(yán)格，亟需開(kāi)發(fā)一種固液分離效率較高，同時(shí)產(chǎn)生廢水少的固液分離工藝。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種春雷霉素發(fā)酵液的固液分離方法，包括以下步驟：
1)將春雷霉素發(fā)酵液用草酸溶液或鹽酸調(diào)ph值為2.5～4之間；
2)發(fā)酵液中加入3～9mmol硫酸鋅溶液，3～5分鐘后，加入1～3mmol硫酸鋅溶液，攪拌轉(zhuǎn)速50～100r/min，攪拌30分鐘；
3)通過(guò)真空吸濾裝置過(guò)濾，收集上清液及濾渣；
4)濾渣中加入1～3倍體積的自來(lái)水，充分混勻，用離心機(jī)離心，收集清液。
優(yōu)選地，本發(fā)明所述的春雷霉素發(fā)酵液的固液分離方法中，所述步驟1)的ph值為4.0。
優(yōu)選地，本發(fā)明所述的春雷霉素發(fā)酵液的固液分離方法中，所述步驟2為發(fā)酵液中加入3mmol黃血鹽溶液，3分鐘后，加入1mmol硫酸鋅溶液。
優(yōu)選地，本發(fā)明所述的春雷霉素發(fā)酵液的固液分離方法中，所述步驟4)中真空吸濾裝置為真空帶式吸濾機(jī)。
優(yōu)選地，本發(fā)明所述的春雷霉素發(fā)酵液的固液分離方法中，所述的離心機(jī)為蝶式離心機(jī)或者管式離心機(jī)。
本發(fā)明的另一目的在于提供上述方法獲得的春雷霉素。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：
本發(fā)明發(fā)明人發(fā)現(xiàn)通過(guò)將發(fā)酵液調(diào)ph值為2.5～4.0，使酸蛋白沉淀，然后加入一定量的黃血鹽(亞鐵氰化鉀)、硫酸鋅，意外地使發(fā)酵液形成絮凝結(jié)構(gòu)，通過(guò)真空吸濾，在不破壞濾餅層結(jié)構(gòu)的前提下，實(shí)現(xiàn)快速過(guò)濾。濾渣收集后，加入一定體積的水，攪勻后，進(jìn)行離心分離，得到上清液及濾渣，如果濾渣中含春雷霉素仍較高，可重復(fù)該過(guò)程。本發(fā)明方法獲得的春雷霉素具有過(guò)濾速度快，收率高，廢水較少的優(yōu)點(diǎn)。
具體實(shí)施方式
下面將結(jié)合本發(fā)明中的實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
春雷霉素發(fā)酵液為小金色鏈霉菌(act.microaureusn.sp.)發(fā)酵產(chǎn)生的，培養(yǎng)基為1～5％黃豆餅粉、1～3％玉米油、1～5％葡萄糖及一定比例的無(wú)機(jī)鹽組成，罐溫28℃，通無(wú)菌空氣及開(kāi)攪拌發(fā)酵140～240小時(shí)而獲得。
實(shí)施例1
春雷霉素發(fā)酵液100m3,春雷霉素發(fā)酵液為小金色鏈霉菌(act.microaureusn.sp.)發(fā)酵產(chǎn)生的，培養(yǎng)基為1～5％黃豆餅粉、1～3％玉米油、1～5％葡萄糖及一定比例的無(wú)機(jī)鹽組成，罐溫28℃，通無(wú)菌空氣及開(kāi)攪拌發(fā)酵140～240小時(shí)而獲得
本專利方法：
1將春雷霉素發(fā)酵液用草酸溶液調(diào)ph值為2.5。
2發(fā)酵液中加入3mmol硫酸鋅溶液，3分鐘后，加入1mmol黃血鹽溶液,攪拌轉(zhuǎn)速50～100r/min，攪拌30分鐘。
3通過(guò)真空吸濾裝置過(guò)濾，濾布面積30m2，濾速1.5m3/m2.h，收集上清液及濾渣。
4濾渣中加入3倍體積的自來(lái)水，充分混勻，用離心機(jī)離心，離心速度20m3/h,收集清液。
現(xiàn)有技術(shù)試驗(yàn)
1將春雷霉素發(fā)酵液用草酸溶液調(diào)ph值為2.5
2通過(guò)100m2陶瓷膜過(guò)濾，采用高速錯(cuò)流方式，壓力為0.2～0.3mpa,流速為0.6m3/m2.h，發(fā)酵液體積降至35％時(shí)，加入自來(lái)水，控制發(fā)酵液體積為40％，自來(lái)水加入量為發(fā)酵液體積的300％，結(jié)果得到濾液380m3,效價(jià)3690ug/ml
實(shí)施例2
1將春雷霉素發(fā)酵液用草酸溶液調(diào)ph值為3.0。
2發(fā)酵液中加入4mmol硫酸鋅溶液，3分鐘后，加入2mmol黃血鹽溶液,緩慢攪拌30分鐘。
3通過(guò)真空吸濾裝置過(guò)濾，收集上清液及渣。
4渣中加入1～3倍體積的自來(lái)水，充分混勻，用離心機(jī)離心，收集清液。
實(shí)施例3
1將春雷霉素發(fā)酵液用草酸溶液調(diào)ph值為4.0。
2發(fā)酵液中加入6mmol硫酸鋅溶液，3分鐘后，加入2.5mmol黃血鹽溶液,緩慢攪拌30分鐘。
3通過(guò)真空吸濾裝置過(guò)濾，收集上清液及渣。
4渣中加入1～3倍體積的自來(lái)水，充分混勻，用離心機(jī)離心，收集清液。
實(shí)施例4
1將春雷霉素發(fā)酵液用草酸溶液調(diào)ph值為4.0。
2發(fā)酵液中加入9mmol硫酸鋅溶液，3分鐘后，加入3mmol黃血鹽溶液,緩慢攪拌30分鐘。
3通過(guò)真空吸濾裝置過(guò)濾，收集上清液及渣。
4渣中加入1～3倍體積的自來(lái)水，充分混勻，用離心機(jī)離心，收集清液。
以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。