本發(fā)明涉及一種大環(huán)內(nèi)酯類化合物或其鹽，及其制備方法與應用。
背景技術：
：細菌耐藥問題日益嚴峻，耐藥菌的流行越來越廣，尤其是金黃色葡萄球菌(mrsa)。mrsa的定義為：對甲氧西林、苯唑西林、頭孢拉定耐藥或mec基因陽性的金葡菌。1961年首次分離出mrsa以來，其在世界各地的感染率和分離率逐漸上升，grundmann等認為全球可能多達5300萬人攜帶mrsa。我國是mrsa流行強度較高地區(qū)，防治形勢十分嚴峻。上海地區(qū)綜合性醫(yī)院mrsa感染現(xiàn)狀調查顯示，2008年的住院病人mrsa感染率為2.68％，在檢出的金葡菌中占81.85％。因此，亟需人們在控制抗生素濫用的同時，研究開發(fā)新型抗菌藥物，以征服日趨嚴重的耐藥細菌的感染。mrsa感染的治療是臨床十分棘手的難題之一，關鍵是其對許多抗生素有多重耐藥。mrsa的菌株通過過度產(chǎn)生β內(nèi)酰胺酶導致pbps(青霉素結合蛋白)性質的改變，因此mrsa幾乎對所有的β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥；且在同時還可能對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素、氨基糖苷類抗生素等多種抗菌藥物表現(xiàn)出耐藥性。針對這種耐藥機制的新藥開發(fā)策略主要有兩種：一是通過化學修飾方法尋找降低β內(nèi)酰胺酶適應性的β-內(nèi)酰胺抗生素；二是通過不具抗菌活性或低抗菌活性的化合物來恢復這類抗生素對mrsa的活性，這類化合物不直接殺死或抑制細菌，不會對細菌產(chǎn)生直接的選擇壓力，從而可以減少耐藥菌株的持續(xù)產(chǎn)生。目前，盡管臨床上應用的糖肽類抗生素萬古霉素和替考拉寧、脂肽類抗生素達托霉素、惡唑烷酮類抗生素利奈唑胺，以及四環(huán)類抗生素替加環(huán)素等對控制mrsa的感染起到了重要的作用，但是，由于這些抗生素缺少結構類別的多樣性，致使mrsa對這些常用抗生素的耐藥性發(fā)展和傳播日趨嚴 重。因此，臨床急需作用機制不同且活性強的新結構藥物，或對β-內(nèi)酰胺類抗生素增效作用更強的、作用機制新型的抗菌增效劑。技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明所要解決的技術問題是為了克服臨床耐甲氧西林金黃色葡萄球菌對β-內(nèi)酰胺類抗生素產(chǎn)生耐藥性的問題，而提供了一種大環(huán)內(nèi)酯類化合物或其鹽，及其制備方法與應用。本發(fā)明所述的大環(huán)內(nèi)酯類化合物或其鹽表現(xiàn)出了一定的單獨抗mrsa活性，且進一步地在與β-內(nèi)酰胺類抗生素共同使用時能夠明顯地增加β-內(nèi)酰胺類抗生素抑制耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的作用。本發(fā)明提供了一種如式i或式ii所示的大環(huán)內(nèi)酯類化合物或其鹽，其中，當r2為甲基和r1為時，r3為被至少兩個鹵素取代的苯基、或被“未取代或被鹵素取代的c1～4烷基”取代的苯基；當r2為甲基和r1為時，r3為或被“未取代或被鹵素取代的c1～4烷基”取代的苯基；當r2為甲基和r1為時，r3為或被“c1～4烷氧基”取代的苯基；當r2為氫和r1為時，r3為被一個鹵素取代的苯基、或被“c1～4烷氧基”取代的苯基；當r2為氫和r1為時，r3為取代或未取代的苯基；所述的“取代的苯基”中的取代基為鹵素、未取代或被鹵素取代的c1～4烷基、和c1～4烷氧基中的一個或多個；當r2為氫和r1為時，r3為取代或未取代的苯基；所述的“取代的苯基”中的取代基為鹵素，未取代或被鹵素取代的c1～4烷基，和c1～4烷氧基中的一個或多個；r7為取代或未取代的苯基；r8為氫或c1～4烷基；r6為取代或未取代的苯基；n為1或2；其中，所述的r7中“所述的取代的苯基”中的取代基為鹵素、未取代或被鹵素取代的c1～4烷基、和c1～4烷氧基中的一個或多個；所述的r6中“所述的取代的苯基”中的取代基為鹵素、未取代或被鹵素取代的c1～4烷基、和c1～4烷氧基中的一個或多個。當r2為甲基和r1為時，所述的r3為“被至少兩個鹵素取代的苯基”中，所述的苯基上的取代基的位置優(yōu)選“3和5位同時取代”(例如)，或“2、4和5位同時取代”(例如)。所述的r3為被“未取代或被鹵素取代的c1～4烷基”取代的苯基中，所述的苯基上的取代基的位置優(yōu)選4位；所述的“c1～4烷基”優(yōu)選甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基；進一步地所述的“被鹵素取代的c1～4烷基”優(yōu)選三氟甲基。當r2為甲基和r1為時，所述的r3為被“未取代或被鹵素取代的c1～4烷基”取代的苯基中，所述的苯基上的取代基的位置優(yōu)選4位取代；所述的“c1～4烷基”優(yōu)選甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基；進一步地所述的“被鹵素取代的c1～4烷基”優(yōu)選三氟甲基。當r2為甲基和r1為時，所述的r3為“被c1～4烷氧基取代的苯基”中，所述的苯基上的取代基的位置優(yōu)選4位取代；所述的“c1～4烷氧基”優(yōu)選甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基或叔丁氧基。當r2為氫和r1為時，所述的r3為“被一個鹵素取代的苯基”中，所述的苯基上的取代基的位置優(yōu)選4位取代；所述的鹵素優(yōu)選氟、氯、溴或碘。所述的r3為被“c1～4烷氧基”取代的苯基中，所述的苯基上的取代基的位置優(yōu)選4位取代；所述的“c1～4烷氧基”優(yōu)選甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基或叔丁氧基。當r2為氫和r1為時，所述的r3為鹵素取代的苯基中，所述的鹵素優(yōu)選氟、氯、溴或碘；所述的苯基上的取代基的位置優(yōu)選4位取代(如或)，“3和5位同時取代”(例如)，或“2、4和5位同時取代”(例如)。所述的r3為“未取代或被鹵素取代的c1～4烷基”取代的苯基中，所述的苯基上的取代基的位置優(yōu)選4位取代；所述的c1～4烷基優(yōu)選甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基；進一步地所述的“被鹵素取代的c1～4烷基”優(yōu)選三氟甲基。所述的r3為被“c1～4烷氧基”取代的苯基時，所述的苯基上的取代基的位置優(yōu)選4位取代；所述的“c1～4烷氧基”優(yōu)選甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基或叔丁氧基。當r2為氫和r1為時，所述的r3為鹵素取代的苯基中，所述的鹵素優(yōu)選氟、氯、溴或碘；所述的苯基上的取代基的位置優(yōu)選4位取代(如或)，“3和5位同時取代”(例如)，或“2、4和5位同時取代”(例如)。所述的r3為“未取代或被鹵素取代的c1～4烷基”取代的苯基中，所述的苯基上的取代基的位置優(yōu)選4位取代；所述的c1～4烷基優(yōu)選甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基；進一步地所述的“被鹵素取代的c1～4烷基”優(yōu)選三氟甲基。所述的r3為被“c1～4烷氧基”取代的苯基時，所述的苯基上的取代基的位置優(yōu)選4位取代；所述的“c1～4烷氧基”優(yōu)選甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基或叔丁氧 基。當所述的r7為鹵素取代的苯基時，所述的鹵素優(yōu)選氟、氯、溴或碘；所述的苯基上的取代基的位置優(yōu)選4位取代(如或)。當所述的r7為“未取代或被鹵素取代的c1～4烷基”取代的苯基時，所述的苯基上的取代基的位置優(yōu)選4位取代；所述的c1～4烷基優(yōu)選甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基；進一步地所述的“被鹵素取代的c1～4烷基”優(yōu)選三氟甲基。當所述的r7為被“c1～4烷氧基”取代的苯基時，所述的苯基上的取代基的位置優(yōu)選4位取代；所述的“c1～4烷氧基”優(yōu)選甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基或叔丁氧基。當r8為c1～4烷基時，所述的c1～4烷基優(yōu)選甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基。當所述的r6為鹵素取代的苯基時，所述的鹵素優(yōu)選氟、氯、溴或碘；所述的苯基上的取代基的位置優(yōu)選4位取代(如)，“3和5位同時取代”(例如)，或“2、4和5位同時取代”(例如)。所述的r6為“未取代或被鹵素取代的c1～4烷基”取代的苯基中，所述的苯基上的取代基的位置優(yōu)選4位取代；所述的c1～4烷基優(yōu)選甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基；進一步地所述的“被鹵素取代的c1～4烷基”優(yōu)選三氟甲基。所述的r6為被“c1～4烷氧基”取代的苯基時，所述的苯基上的取代基的位置優(yōu)選4位取代；所述的“c1～4烷氧基”優(yōu)選甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基或叔丁氧基。本發(fā)明所述的鹵素如未特殊限定，均優(yōu)選氟、氯、溴或碘。本發(fā)明所述的大環(huán)內(nèi)酯類化合物i可任意選自以下任一化合物：本發(fā)明所述的大環(huán)內(nèi)酯類化合物ii可任意選自以下任一化合物：本發(fā)明還提供了一種所述化合物i的制備方法，其包括以下步驟：將化合物6醇解，得到所述的化合物i，即可；其中，r1、r2和r3同前所述，r4為c1～4烷羰基。所述的r4中，所述的c1～4烷羰基優(yōu)選ch3c(o)。在制備大環(huán)內(nèi)酯類化合物i時，所述的醇解為將化合物6在醇的作用下發(fā)生分解反應，本發(fā)明中所述的醇既是反應物也是反應溶劑，具體的步驟和條件可參照本領域該類反應的常規(guī)進行選擇，本發(fā)明特別優(yōu)選如下：在制備化合物i的方法中，所述的醇優(yōu)選甲醇和/或乙醇；所述的醇與所述的化合物6的體積質量比優(yōu)選1～20ml/g，進一步優(yōu)選5～10ml/g。在制備化合物i的方法中，所述的醇解反應的溫度優(yōu)選50℃～80℃。在制備化合物i的方法中，所述的醇解反應的進程可以采用本領域中的常規(guī)測試方法(如tlc、hplc或nmr)進行監(jiān)控，一般以化合物6消失 時為反應終點，優(yōu)選反應時間1～24小時，進一步優(yōu)選2小時。在制備化合物i的方法中，所述的反應結束后優(yōu)選包括以下后處理步驟；柱色譜純化得到的粗產(chǎn)品，得到純化后的化合物i即可。所述的柱色譜純化的條件可以采用本領域中該類操作的常規(guī)方法，柱色譜純化優(yōu)選快速柱色譜分離(flash柱色譜分離)，采用的硅膠的規(guī)格優(yōu)選200～400目硅膠，更優(yōu)選200～300目硅膠。在所述的化合物i的制備方法中，優(yōu)選包括以下步驟：在有機溶劑中，縮合劑存在的條件下，將羧酸r3ch2cooh和/或酸酐與化合物5進行縮合反應，得到所述的化合物6，即可；其中，r1、r2、r3和r4同前所述。所述的化合物6的制備方法中，所述的反應可以參照本領域該類反應的常規(guī)方法，本發(fā)明特別優(yōu)選如下；在所述的化合物6的制備方法中，所述的有機溶劑優(yōu)選鹵代烴類溶劑，所述的鹵代烴類溶劑優(yōu)選氯代烴類溶劑，所述的氯代烴類溶劑優(yōu)選二氯甲烷。所述的有機溶劑與化合物5的體積質量比優(yōu)選1～20ml/g，進一步優(yōu)選8～10ml/g。在所述的化合物6的制備方法中，所述的r3ch2cooh和/或酸酐與所述的化合物5的摩爾比優(yōu)選1～3，更優(yōu)選2。所述的縮合劑優(yōu)選1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(edc·hcl或edci，cas號：25952-53-8)。所述的縮合劑與所述的化合物5的摩爾比優(yōu)選2～6，更優(yōu)選3～4。在所述的化合物6的制備方法中，所述的縮合反應的溫度為10℃～60℃，進一步優(yōu)選15℃～30℃。在所述的化合物6的制備方法中，所述的縮合反應的進程可以采用本領域中的常規(guī)測試方法(如tlc、hplc或nmr)進行監(jiān)控，一般以化合物5消失時為反應終點，優(yōu)選反應時間1～36小時，進一步優(yōu)選24小時。所述的化合物6的制備方法，所述的反應結束后優(yōu)選包括以下后處理步驟：調節(jié)ph至9.0～10.0，萃取，濃縮，即可。所述的調節(jié)ph可以采用無機堿，所述的無機堿優(yōu)選氫氧化鈉；所述的無機堿可以以其水溶液的形式參與反應，當無機堿以其水溶液的形式參與反應時，所述的無機堿的水溶液的摩爾濃度優(yōu)選3mol/l，所述的摩爾濃度是指無機堿的摩爾數(shù)與無機堿水溶液總體積的比例。所述的萃取可以采用本領域中萃取操作的常規(guī)方法，所述的萃取采用的溶劑優(yōu)選鹵代烴類溶劑，所述的鹵代烴類溶劑優(yōu)選氯代烴類溶劑，所述的氯代烴類溶劑優(yōu)選二氯甲烷。所述的濃縮后還可進一步包括干燥的操作。在所述的化合物i的制備方法中，優(yōu)選包括以下步驟：在有機溶劑中，將化合物4與羧酸r4oh和/或酸酐r4or4進行縮合反應，得到所述的化合物5，即可；其中，r1、r2、r3和r4同前所述。所述的化合物5的制備方法中，所述的反應可以參照本領域該類反應的常規(guī)方法，本發(fā)明特別優(yōu)選如下；在所述的化合物5的制備方法中，所述的有機溶劑優(yōu)選鹵代烴類溶劑，所述的鹵代烴類溶劑優(yōu)選氯代烴類溶劑，所述的氯代烴類溶劑優(yōu)選二氯甲烷。所述的有機溶劑與化合物4的體積質量比優(yōu)選1～20ml/g，更優(yōu)選5ml/g～10ml/g。在所述的化合物5的制備方法中，所述的羧酸r4oh或酸酐r4or4與所述的化合物4的摩爾比優(yōu)選1～3，更優(yōu)選2。在所述的化合物5制備方法中，所述的縮合反應的溫度優(yōu)選10℃～80℃進一步優(yōu)選15℃～30℃。在所述的化合物5的制備方法中，所述的縮合反應的進程可以采用本領域中的常規(guī)測試方法(如tlc、hplc或nmr)進行監(jiān)控，一般以化合物4消失時為反應終點，優(yōu)選反應時間3～6小時，進一步優(yōu)選4小時。所述的化合物5的制備方法，所述的反應結束后還可包括以下后處理步驟：加水，調節(jié)ph至9.0～10.0，有機溶劑萃取，濃縮，即可。所述的調節(jié)ph可以采用無機堿，所述的無機堿優(yōu)選氫氧化鈉；所述的無機堿可以以其水溶液的形式參與反應，當無機堿以其水溶液的形式參與反應時，所述的無機堿的水溶液的摩爾濃度優(yōu)選3mol/l，所述的摩爾濃度是指無機堿的摩爾數(shù)與無機堿水溶液總體積的比例。所述的濃縮后還可進一步包括干燥的操作。所述的化合物i的制備方法中，優(yōu)選包括以下步驟：將化合物3與進行縮合反應，得到所述的化合物4，即可；其中，r1和r2前所述。所述的化合物4的制備方法中，所述的反應可以參照本領域該類反應的常規(guī)方法，本發(fā)明特別優(yōu)選如下；在所述的化合物4的制備方法中，所述的縮合反應的溶劑優(yōu)選鹵代烴類溶劑，所述的鹵代烴類溶劑優(yōu)選氯代烴類溶劑，所述的氯代烴類溶劑優(yōu)選二氯甲烷。所述的溶劑與所述的化合物3的體積質量比優(yōu)選1～20ml/g，進一步優(yōu)選5～10ml/g。在所述的化合物4的制備方法中，所述的化合物3與所述的化合物的摩爾比值優(yōu)選1～3，進一步優(yōu)選1.5。所述的化合物4的制備方法中，所述的縮合反應的溫度優(yōu)選5～50℃，進一步優(yōu)選15℃～30℃。所述的化合物4的制備方法中，所述的縮合反應優(yōu)選在酸催化的條件下進行，所述的酸優(yōu)選有機酸，所述的有機酸優(yōu)選乙酸；所述的酸與所述的化合物3的摩爾比值優(yōu)選1～3，進一步優(yōu)選1。在所述的化合物4的制備方法中，所述的縮合反應的進程可以采用本領域中的常規(guī)測試方法(如tlc、hplc或nmr)進行監(jiān)控，一般以化合物3消失時為反應終點，優(yōu)選反應時間2～10小時，進一步優(yōu)選5小時。在所述的化合物4的制備方法中，所述的反應結束后優(yōu)選包括以下后處理步驟：除去溶劑、濃縮物溶于有機溶劑a，調節(jié)ph為1～2，過濾，調節(jié)濾餅的水溶液至ph為9～10，有機溶劑b萃取、濃縮，即可。其中，所述的有機溶劑a優(yōu)選芳香烴類溶劑，所述的芳香烴類溶劑優(yōu)選甲苯；所述的有機溶劑a的用量可以將所述的濃縮物溶解即可，所述的有機溶劑a與所述的化合物3的體積質量比優(yōu)選2.2～5ml/g。所述的調節(jié)ph為1～2一般通過加入酸進行調節(jié)；所述的酸優(yōu)選無機酸；所述的無機酸優(yōu)選鹽酸；所述的無機酸可以以其水溶液的形式參與反應；當所述無機酸以其水溶液的形式參與反應時，所述的無機酸水溶液的摩爾濃度優(yōu)選2mol/l，所述的摩爾濃度是指無機酸的摩爾量與無機酸的溶液體積的比。所述的調節(jié)濾餅的水溶液至ph為 9～10可以采用無機堿，所述的無機堿優(yōu)選氫氧化鈉；所述的無機堿可以以其水溶液的形式參與反應，當無機堿以其水溶液的形式參與反應時，所述的無機堿的水溶液的摩爾濃度優(yōu)選3mol/l，所述的摩爾濃度是指無機堿的摩爾數(shù)與無機堿水溶液總體積的比例。所述的有機溶劑b優(yōu)選鹵代烴類溶劑，所述的鹵代烴類溶劑優(yōu)選氯代烴類溶劑，所述的氯代烴類溶劑優(yōu)選二氯甲烷。所述的濃縮后還可進一步包括干燥的操作。所述的化合物i的制備方法中，優(yōu)選包括以下步驟：將化合物2在酸性條件下水解，得到所述的化合物3，即可；所述的化合物3的制備方法中，所述的反應可以參照本領域該類反應的常規(guī)方法，本發(fā)明特別優(yōu)選如下：在所述的化合物3的制備方法中，所述的酸性條件可以通過加入酸獲得，所述的酸優(yōu)選無機酸；所述的無機酸優(yōu)選鹽酸；所述的無機酸可以以其水溶液的形式參與反應；當所述的無機酸以其水溶液的形式參與反應溶液時，所述的無機酸水溶液的摩爾濃度優(yōu)選1～3mol/l；所述的摩爾濃度是指無機酸的摩爾量與無機酸的溶液體積的比。所述的酸與所述的化合物2的摩爾比值優(yōu)選1～10，進一步優(yōu)選5。所述的反應的溫度優(yōu)選10℃～60℃，進一步優(yōu)選15℃～30℃。在所述的化合物3的制備方法中，所述的水解反應的進程可以采用本領域中的常規(guī)測試方法(如tlc、hplc或nmr)進行監(jiān)控，一般以化合物2消失時為反應終點，優(yōu)選反應時間1～12小時，進一步優(yōu)選2～4小時。在所述的化合物3的制備方法，在所述的反應結束后優(yōu)選包括以下后處理步驟：調節(jié)ph至9.0～10.0，有機溶劑萃取，濃縮，得到所述的化合物3，即可。所述的調節(jié)ph可以采用無機堿，所述的無機堿優(yōu)選氫氧化鈉；所述的無機堿可以以其水溶液的形式參與反應，當無機堿以其水溶液的形式參與反應時，所述的無機堿的水溶液的摩爾濃度優(yōu)選3mol/l，所述的摩爾濃度是指無機堿的摩爾數(shù)與無機堿水溶液總體積的比例。所述的萃取可以采用本領域中萃取操作的常規(guī)方法，所述的有機溶劑優(yōu)選鹵代烴類溶劑，所述的鹵代烴類溶劑優(yōu)選氯代烴類溶劑，所述的氯代烴類溶劑優(yōu)選二氯甲烷。所述的化合物i的制備方法中，優(yōu)選包括以下步驟：在有機溶劑中，將化合物1與乙酸肼進行縮合反應，得到所述的化合物2即可；所述的化合物2的制備方法中，所述的縮合反應可以參照本領域該類反應的常規(guī)進行，本發(fā)明特別優(yōu)選如下：在所述的化合物2的制備方法中，所述的有機溶劑優(yōu)選醇類溶劑，所述的醇類溶劑優(yōu)選甲醇和/或乙醇。所述的有機溶劑與所述的化合物1的體積質量比優(yōu)選1～10ml/g，更優(yōu)選8ml/g。所述的化合物1與所述的乙酸肼的摩爾比值優(yōu)選1∶1～1∶50，更優(yōu)選1∶30。在所述的化合物2制備方法中，所述的縮合反應的溫度優(yōu)選40℃～100℃進一步優(yōu)選50℃～80℃。在所述的化合物2的制備方法中，所述的縮合反應的進程可以采用本領域中的常規(guī)測試方法(如tlc、hplc或nmr)進行監(jiān)控，一般以化合物 1消失時為反應終點，優(yōu)選反應時間12～72小時，進一步優(yōu)選46小時。所述的化合物2的制備方法，所述的反應結束后還可包括以下后處理步驟：調節(jié)ph至9.0～10.0，過濾，得到所述的化合物2，即可。所述的調節(jié)ph可以采用無機堿，所述的無機堿優(yōu)選氫氧化鈉；所述的無機堿可以以其水溶液的形式參與反應，當無機堿以其水溶液的形式參與反應時，所述的無機堿的水溶液的摩爾濃度優(yōu)選3mol/l，所述的摩爾濃度是指無機堿的摩爾數(shù)與無機堿水溶液總體積的比例。所述的過濾后還可包括用水清洗濾餅的操作；所述的過濾結束后還可進一步包括干燥濾餅的操作。本發(fā)明提供一種所述的化合物ii的制備方法，其包括以下步驟：將化合物10a醇解，得到所述的化合物ii，即可；其中，n、r6、r7和r8同前所述，r5為c1～4烷羰基。所述的r5中，所述的c1～4烷羰基優(yōu)選ch3c(o)。在制備大環(huán)內(nèi)酯類化合物ii時，所述的醇解為將化合物10a在醇的作用下發(fā)生分解反應，本發(fā)明中所述的醇既是反應物也是反應溶劑，具體的步驟和條件可參照本領域該類反應的常規(guī)進行選擇，本發(fā)明特別優(yōu)選如下：在制備化合物ii的方法中，所述的醇優(yōu)選甲醇和/或乙醇。所述的醇與所述的化合物10a的體積質量比優(yōu)選1～20ml/g，進一步優(yōu)選5～10ml/g。在制備化合物ii的方法中，所述的醇解反應的溫度優(yōu)選50℃～80℃。在制備化合物ii的方法中，所述的醇解反應的進程可以采用本領域中的常規(guī)測試方法(如tlc、hplc或nmr)進行監(jiān)控，一般以化合物10a消 失時為反應終點，優(yōu)選反應時間1～24小時，進一步優(yōu)選2小時。在制備化合物ii的方法中，所述的反應結束后優(yōu)選包括以下后處理步驟；柱色譜純化得到的粗產(chǎn)品，得到純化后的化合物ii即可。所述的柱色譜純化的條件可以采用本領域中該類操作的常規(guī)方法，柱色譜純化優(yōu)選快速柱色譜分離(flash柱色譜分離)，采用的硅膠的規(guī)格優(yōu)選200～400目硅膠，更優(yōu)選200～300目硅膠。所述的化合物ii的制備方法中，優(yōu)選包括以下步驟：催化劑存在下，將化合物9a與r6(ch2)nnh2反應，得到所述的化合物10a，即可；其中，n、r5、r6、r7和r8同前所述。在制備大環(huán)內(nèi)酯類化合物10a時，所述的反應可為本領域該類反應的常規(guī)方法，本發(fā)明特別優(yōu)選如下：在制備化合物10a的方法中，所述的溶劑優(yōu)選非極性質子溶劑，所述的非極性質子溶劑優(yōu)選n’n-二甲基甲酰胺。所述的溶劑與所述的化合物9a的體積質量比優(yōu)選1～50ml/g，進一步優(yōu)選16ml/g。所述的反應的溫度優(yōu)選10～80℃，更優(yōu)選60℃。所述的催化劑優(yōu)選1，8-二氮雜二環(huán)十一碳-7-烯(dbu)，所述的催化劑與所述的化合物9a的摩爾比優(yōu)選1～3，更優(yōu)選2。所述的r6(ch2)nnh2與所述的化合物9a的摩爾比優(yōu)選3～5。在制備化合物10a的方法中，所述反應的進程可以采用本領域中的常規(guī)測試方法(如tlc、hplc或nmr)進行監(jiān)控，一般以化合物9a消失時為 反應終點，優(yōu)選反應時間2～10小時，進一步優(yōu)選4小時。在制備化合物10a的方法中，所述的反應結束后優(yōu)選包括以下后處理步驟；加水、過濾，即可。所述的后處理結束后可以直接投入到所述化合物ii的制備中。所述的化合物ii的制備方法中，優(yōu)選包括以下步驟：堿性條件下，將化合物8a與n，n-羰基-二咪唑反應，得到所述的化合物9a，即可；其中，r5、r7和r8同前所述。在制備大環(huán)內(nèi)酯類化合物9a時，所述的反應可為本領域該類反應的常規(guī)方法，本發(fā)明特別優(yōu)選如下：在制備化合物9a的方法中，所述的溶劑優(yōu)選鹵代烴類溶劑，所述的鹵代烴類溶劑優(yōu)選氯代烴類溶劑，所述的氯代烴類溶劑優(yōu)選二氯甲烷。所述的溶劑與所述的化合物8a的體積質量比優(yōu)選2～10ml/g，進一步優(yōu)選5ml/g。所述的反應的溫度優(yōu)選10～80℃，更優(yōu)選10～35℃。所述的堿優(yōu)選4-二甲氨基吡啶(dmap)，所述的堿與所述的化合物8a的摩爾比優(yōu)選1～3，更優(yōu)選2。所述的n，n-羰基-二咪唑(cdi)與所述的化合物8a的摩爾比優(yōu)選1～3，更優(yōu)選2。在制備化合物9a的方法中，所述反應的進程可以采用本領域中的常規(guī)測試方法(如tlc、hplc或nmr)進行監(jiān)控，一般以化合物8a消失時為反應終點，優(yōu)選反應時間12～48小時，進一步優(yōu)選24小時。在制備化合物9a的方法中，所述的反應結束后優(yōu)選包括以下后處理步驟；加水，調節(jié)ph至9.0～10.0，有機溶劑萃取，有機層酸洗，濃縮，即可。其中，水的量與所述的化合物8a的體積質量比可以參照本領域常規(guī)進行選擇，本發(fā)明優(yōu)選1～5ml/g，更優(yōu)選2ml/g。所述的調節(jié)可以采用無機堿，所述的無機堿優(yōu)選氫氧化鈉；所述的無機堿可以以其水溶液的形式參與反應，當無機堿以其水溶液的形式參與反應時，所述的無機堿的水溶液的摩爾濃度優(yōu)選3mol/l，所述的摩爾濃度是指無機堿的摩爾數(shù)與無機堿水溶液總體積的比例。所述的有機溶劑優(yōu)選鹵代烴類溶劑，所述的鹵代烴類溶劑優(yōu)選氯代烴類溶劑，所述的氯代烴類溶劑優(yōu)選二氯甲烷。所述的酸洗優(yōu)選ph為4～5的酸水溶液，所述的酸水溶液優(yōu)選鹽酸水溶液。所述的化合物ii的制備方法中，優(yōu)選包括以下步驟：在有機溶劑中，將化合物7a與羧酸r5oh和/或酸酐r5or5進行縮合反應，得到所述的化合物8a，即可；其中，r5、r7和r8同前所述。所述的化合物8a的制備方法中，除了將化合物4換做化合物7a、用“羧酸r5oh和/或酸酐r5or5”替換“羧酸r4oh和/或酸酐r4or4”外，其他的步驟和條件參照上述化合物5的制備方法。本發(fā)明還提供了一種大環(huán)內(nèi)酯類化合物7a，其中，r7和r8的定義同前。本發(fā)明還提供一種所述的化合物7a的制備方法，具體為：除利用替換外，其余的步驟和條件參照所述的化合物4的制備方法。本發(fā)明提供了一種大環(huán)內(nèi)酯類化合物a的制備方法，其為下述任一方式：方式一，包括以下步驟：(1)以上述化合物3與進行縮合反應；(2)將步驟(1)得到的產(chǎn)物與羧酸r4oh和/或酸酐r4or4進行縮合反應；(3)在有機溶劑中，縮合劑存在的條件下，將羧酸r3ch2cooh和/或酸酐與步驟(2)得到的產(chǎn)物進行縮合反應；(4)將步驟(3)得到的產(chǎn)物進行醇解即可；其中，r1、r2、r3和r4的定義同前所述；方式二，包括以下步驟：(1)以上述化合物3與進行縮合反應；(2)在有機溶劑中，將步驟(1)得到的產(chǎn)物與羧酸r5oh和/或酸酐r5or5進行縮合反應；(3)堿性條件下，將步驟(2)得到的產(chǎn)物與n，n-羰基-二咪唑反應；(4)催化劑存在下，將步驟(3)得到的產(chǎn)物與r6(ch2)nnh2反應；(5)將步驟(4)得到的產(chǎn)物進行醇解，即可；其中，r5、r6、r7和r8的定義同前所述。所述的大環(huán)內(nèi)酯類化合物a的制備方法的方式一中，步驟(1)的反應步驟和條件同上述化合物4的制備方法；步驟(2)的反應步驟和條件同上 述化合物5的制備方法；步驟(3)的反應步驟和條件同上述化合物6的制備方法；步驟(4)的反應步驟和條件同上述化合物i的制備方法。所述的大環(huán)內(nèi)酯類化合物a的制備方法的方式二中，步驟(1)的反應步驟和條件同上述化合物7a的制備方法；步驟(2)的反應步驟和條件同上述化合物8a的制備方法；步驟(3)的反應步驟和條件同上述化合物9a的制備方法；步驟(4)的反應步驟和條件同上述化合物10a的制備方法；步驟(5)的反應步驟和條件同上述化合物ii的制備方法。本發(fā)明還提供了由上述大環(huán)內(nèi)酯類化合物a的制備方法制備得到的大環(huán)內(nèi)酯類化合物a。本發(fā)明還提供了一種所述的大環(huán)內(nèi)酯類化合物a在制備抑制耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的藥物中的應用。所述的應用進一步優(yōu)選為所述的大環(huán)內(nèi)酯類化合物a與β-內(nèi)酰胺類抗生素聯(lián)用在制備抑制耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的藥物中的應用。本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，其包括所述的大環(huán)內(nèi)酯類化合物a和β-內(nèi)酰胺類抗生素。所述本發(fā)明中所述的大環(huán)內(nèi)酯類化合物i或ii的鹽是指本發(fā)明的大環(huán)內(nèi)酯類化合物i或ii與酸反應形成的鹽，所述的酸可以為本領域中常規(guī)的無機酸或有機酸；所述的無機酸可為鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；所述的有機酸可為乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、蘋果酸、丙二酸、琥珀酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸等。本發(fā)明還提供了所述的大環(huán)內(nèi)酯類化合物i、大環(huán)內(nèi)酯類化合物i的鹽、大環(huán)內(nèi)酯類化合物ii或大環(huán)內(nèi)酯類化合物ii的鹽在制備抑制耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的藥物中的應用。所述的應用進一步優(yōu)選為所述的大環(huán)內(nèi)酯類化合物i、大環(huán)內(nèi)酯類化合物i的鹽、大環(huán)內(nèi)酯類化合物ii或大環(huán)內(nèi)酯類化合物ii的鹽，與β-內(nèi)酰胺類抗生素聯(lián)用在制備抑制耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的藥物中的應用。本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，其包括所述的大環(huán)內(nèi)酯類化合物i、大環(huán)內(nèi)酯類化合物i的鹽、大環(huán)內(nèi)酯類化合物ii和大環(huán)內(nèi)酯類化合物ii的鹽中的一種或多種，以及β-內(nèi)酰胺類抗生素。本發(fā)明還提供了所述的藥物組合物在制備抑制耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的藥物中的應用。本發(fā)明中，所述的β-內(nèi)酰胺類抗生素是本領域中常規(guī)的β-內(nèi)酰胺類抗生素，是指分子中含有由四個原子組成的β-內(nèi)酰胺環(huán)的抗生素，優(yōu)選臨床最常見的青霉素類抗生素、頭孢菌素類抗生素、碳青霉烯類抗生素、頭霉素類抗生素和單環(huán)β-內(nèi)酰胺類抗生素中的一種或多種。所述的青霉素類抗生素優(yōu)選青霉素、青霉素g、青霉素鈉、青霉素v鉀、氨芐西林、氨芐青霉素、羧芐西林鈉、苯唑西林、氯唑西林、雙氯西林、氟氯西林、卞星青霉素、呋布西林、阿莫西林、美洛西林、奈夫西林、替卡西林、阿洛西林、哌拉西林和美西林中的一種或多種；進一步優(yōu)選青霉素鈉、氨芐青霉素、羧芐西林鈉和苯唑西林鈉中的一種或多種。所述的頭孢菌素類抗生素優(yōu)選頭孢氨芐、頭孢替安、頭孢羥氨芐、頭孢唑啉、頭孢拉啶、頭孢克洛、頭孢呋辛、頭孢匹胺、頭孢硫脒、頭孢丙烯、頭孢曲松、頭孢妥倫匹酯、頭孢地嗪、頭孢他美酯、頭孢克肟、頭孢泊肟酯、頭孢他啶、頭孢他啶鉀、頭孢地尼、頭孢拉氧、頭孢替唑、頭孢噻肟、頭孢哌酮、頭孢噻吩、頭孢孟多、頭孢匹羅、頭孢吡肟和頭孢唑南中的一種或多種；進一步優(yōu)選頭孢拉啶、頭孢噻吩、頭孢唑啉、頭孢氨芐、頭孢孟多、頭孢替安、頭孢克洛、頭孢呋辛、頭孢曲松、頭孢哌酮、頭孢他啶鉀、頭孢噻肟、頭孢吡肟和頭孢地嗪中的一種或多種。所述的碳青霉烯類抗生素優(yōu)選亞胺培南、美羅培南和帕尼培南中的一種或多種；進一步優(yōu)選亞胺培南和/或美羅培南。所述的頭霉素類抗生素優(yōu)選頭孢西丁、頭孢西丁鈉、頭孢美唑、頭孢美唑鈉、頭孢替坦和頭孢米諾中的一種或多種，進一步優(yōu)選頭孢西丁、頭孢西丁鈉、頭孢美唑和頭孢美唑鈉中的一種或多種。所述的單環(huán)β-內(nèi)酰胺類抗生素優(yōu)選氨曲南。本發(fā)明中，所述的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(mrsa)為本領域中常 規(guī)的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌，優(yōu)選耐甲氧西林金黃色葡萄球菌模式菌；所述的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌模式菌優(yōu)選mrsaatcc43300(methicillin-resistantstaphylococcusaureusatcc43300，即mrsaatcc43300)。atcc為美國模式培養(yǎng)物集存庫(americantypeculturecollection)的簡寫mrsaatcc43300為其標準模式菌。在不違背本領域常識的基礎上，上述各優(yōu)選條件，可任意組合，即得本發(fā)明各較佳實例。本發(fā)明所用試劑和原料均市售可得。本發(fā)明的積極進步效果在于：本發(fā)明的大環(huán)內(nèi)酯類化合物i或其鹽，大環(huán)內(nèi)酯類化合物ii或其鹽中表現(xiàn)出了一定的單獨抗mrsa活性，進一步地在與β-內(nèi)酰胺類抗生素共同使用時能夠明顯的增加β-內(nèi)酰胺類抗生素抑制耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的作用；測試結果顯示體外增效作用好，是一類新型的增效劑，能夠緩解耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(mrsa)對β-內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥性，是一類具有良好市場開發(fā)前景的藥物。附圖說明圖1為化合物sipi8294的分子立體結構投影圖。圖2為化合物sipi8510的分子立體結構投影圖。具體實施方式下面通過實施例的方式進一步說明本發(fā)明，但并不因此將本發(fā)明限制在所述的實施例范圍之中。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，按照常規(guī)方法和條件，或按照商品說明書選擇。實施例19-腙克拉霉素克拉霉素(10g，13.37mmol)溶于甲醇(80ml)中，加入乙酸肼(36.9g，0.4mol)，加熱回流46h。旋蒸除去部分甲醇后，加入水(200ml)，用3nnaoh水溶液調節(jié)ph至9～10，過濾，濾餅水洗，干燥得白色固體粗品10.7g(收 率105.0％)。實施例23-脫克拉定糖-3-羥基-9-腙克拉霉素9-腙克拉霉素(5.1g，2mmol)溶于10ml1n鹽酸水溶液中，室溫攪拌4h。加入二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9～10，分液，水層用二氯甲烷(5ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗(10ml)，飽和氯化鈉干燥后旋干得粗品3.8g，收率94.7％。實施例33-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氯苯亞乙基腙)克拉霉素(化合物4-2)3-脫克拉定糖-3-羥基-9-腙克拉霉素(9g，15mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入對氯苯乙酮(2.3g，15mmol)和冰乙酸(0.85ml，15mmol)，室溫攪拌5h，蒸干除去溶劑；加入適量甲苯(20ml)使油狀混合物完全溶解，逐滴加入2n鹽酸水溶液至ph1-2，大量白色固體析出，過濾，濾餅加入水(40ml)和二氯甲烷(40ml)，3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗(20ml)，飽和食鹽水洗，干燥后旋干，得產(chǎn)物10.1g，收率90.9％。實施例42’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氯苯亞乙基腙)克拉霉素3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氯苯亞乙基)腙克拉霉素(10.1g，13.6mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入乙酸酐(2.55ml，27.2mmol)，室溫攪拌4h。加水20ml，3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗(20ml)，飽和食鹽水洗，干燥后旋干，得產(chǎn)物10.3g。實施例53-脫克拉定糖-3-(4-三氟甲基苯乙酰基)-9-(4-氯苯亞乙基腙)克拉霉素(化合物zkt-2-4)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氯苯亞乙基腙)克拉霉素(1.1g，1.41mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-三氟甲基苯乙酸(0.57g，2.82mmol)，分批加入edci(1.08g，5.64mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml) 抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.39g，收率30.1％，hplc純度90.3％。ms(esi+，m/e)：926[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.81(d，j＝8.6hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.58(d，j＝8.2hz，2h，3-苯環(huán)2，6-h)，7.48(d，j＝8.1hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，7.36(d，j＝8.6hz，2h，3-苯環(huán)3，5-h)，5.47(s，1h)，5.21(dd，j＝11.2，2.1hz，1h)，5.05(d，j＝11.0hz，1h)，3.89(s，1h)，3.86(d，j＝7.2hz，1h)，3.80(dd，j＝16.5，9.1hz，2h)，3.72(dd，j＝9.4，5.9hz，2h)，3.40(s，1h)，3.32(s，1h)，3.15(dd，j＝10.1，7.2hz，1h)，2.95(s，3h)，2.89-2.80(m，1h)，2.73(q，j＝6.5hz，1h)，2.27(s，6h)，1.97(dtd，j＝15.0，7.5，5.4hz，1h)，1.66-1.57(m，1h)，1.51(ddd，j＝14.3，7.4，3.9hz，2h)，1.44(d，j＝13.4hz，1h)，1.26(d，j＝4.6hz，6h)，1.20(s，3h)，1.11(dd，j＝16.0，6.8hz，7h)，1.02(d，j＝7.0hz，3h)，0.90(d，j＝6.7hz，3h)，0.82(t，j＝7.4hz，3h).13cnmr(100mhz，cdcl3)δ179.78(1-co)，173.54(3-co)，170.60(9-n＝c-)，159.74(9-c＝n-)，137.80(9-苯環(huán)4-c)，137.16(9-苯環(huán)1-c)，135.83(3-苯環(huán)1-c)，130.02(3-苯環(huán)2，6-c)，129.69(3-苯環(huán)4-c)，128.69(9-苯環(huán)2，6-c)，128.00(9-苯環(huán)3，5-c)，14.86(9-n＝c-ch3).實施例63-脫克拉定糖-3-(3，5-二氟苯乙?；?-9-(4-氯苯亞乙基腙)克拉霉素(化合物zkt-2-35)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氯苯亞乙基腙)克拉霉素(1.1g，1.41mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入3，5-二氟苯乙酸(0.48g，2.82mmol)，分批加入edci(1.08g，5.64mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.4g，收率32％，hplc純度92.6％。ms(esi+，m/e)：895[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.81(d，j＝8.6hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.37(d，j＝8.6hz，2h，3-苯環(huán)2，6-h)，6.93-6.86(m，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，6.73(tt，j＝8.9，2.2hz，1h，3-苯環(huán)4-h)，5.48(s，1h)，5.22(dd，j＝11.2，2.1hz，1h)，5.05(d，j＝11.1hz，1h)，3.89(d，j＝0.7hz，1h)，3.86(d，j＝7.2hz，1h)，3.85-3.76(m，1h)，3.71(d，j＝3.5hz，1h)，3.68(d，j＝5.7hz，2h)，3.41(s，1h)，3.40-3.34(m，1h)，3.29(dd，j＝14.3，7.2hz，1h)，3.16(dd，j＝10.1，7.3hz，1h)，3.10-3.03(m，1h)，2.95(s，3h)，2.86(dd，j＝11.1，6.8hz，1h)，2.73(q，j＝6.6hz，1h)，2.36(d，j＝3.8hz，1h)，2.29(d，j＝4.7hz，9h)，2.26-2.21(m，1h)，2.02-1.91(m，1h)，1.65-1.54(m，3h)，1.54-1.48(m，1h)，1.45(t，j＝9.7hz，1h)，1.26(d，j＝5.1hz，6h)，1.20(s，3h)，1.16-1.10(m，9h)，1.02(d，j＝7.0hz，3h)，0.95(d，j＝6.7hz，3h)，0.83(t，j＝7.4hz，3h).13cnmr(100mhz，cdcl3)δ179.78(1-co)，173.52(3-co)，170.28(9-n＝c-)，164.31(3-苯環(huán)3，5-c)，159.76(9-c＝n-)，137.54(9-苯環(huán)4-c)，137.07(9-苯環(huán)1-c)，135.85(3-苯環(huán)1-c)，128.70(9-苯環(huán)2，6-c)，128.01(9-苯環(huán)3，5-c)，14.88(9-n＝c-ch3)實施例73-脫克拉定糖-3-(2，4，5-三氟苯乙酰基)-9-(4-氯苯亞乙基腙)克拉霉素(化合物zkt-2-245)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氯苯亞乙基腙)克拉霉素(1.1g，1.41mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入2，4，5-三氟苯乙酸(0.54g，2.82mmol)，分批加入edci(1.08g，5.64mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.51g，收率40％，hplc純度94.1％。ms(esi+，m/e)：912[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.81(d，j＝8.6hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.36 (d，j＝8.6hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，7.17(dd，j＝17.0，8.6hz，1h，3-苯環(huán)6-h)，6.94(td，j＝9.5，6.6hz，1h，3-苯環(huán)3-h)，5.48(s，1h)，5.22(dd，j＝11.1，2.0hz，1h)，5.06(d，j＝11.0hz，1h)，3.93(d，j＝7.2hz，1h)，3.89(s，1h)，3.81(dt，j＝21.5，8.9hz，1h)，3.76-3.60(m，4h)，3.41(s，1h)，3.30-3.21(m，1h)，3.18(dd，j＝10.1，7.3hz，1h)，2.95(s，3h)，2.87(td，j＝13.6，6.8hz，1h)，2.73(q，j＝6.7hz，1h)，2.42(dd，j＝16.6，8.0hz，1h)，2.29(s，9h)，2.24(dd，j＝7.6，3.3hz，1h)，1.96(ddd，j＝15.1，7.6，5.5hz，1h)，1.61(t，j＝12.9hz，2h)，1.56-1.47(m，1h)，1.45(d，j＝14.2hz，1h)，1.39-1.17(m，12h)，1.14(dd，j＝13.3，6.8hz，6h)，1.02(dd，j＝6.7，4.6hz，6h)，0.83(t，j＝7.3hz，3h).13cnmr(100mhz，cdcl3)δ179.77(1-co)，173.51(3-co)，169.90(9-n＝c-)，159.75(3-苯環(huán)2-c)，148.54-147.87(3-苯環(huán)4，5-c)，137.16(9-苯環(huán)4-c)，135.83(9-苯環(huán)1-c)，128.69(9-苯環(huán)2，6-c)，128.00(9-苯環(huán)3，5-c)，14.87(9-n＝c-ch3).實施例83-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氟苯亞乙基腙)克拉霉素3-脫克拉定糖-3-羥基-9-腙克拉霉素(9g，15mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入對氟苯乙酮(2.1g，15mmol)和冰乙酸(0.85ml，15mmol)，室溫攪拌5h，蒸干除去溶劑；加入適量甲苯(20ml)使油狀混合物完全溶解，逐滴加入2n鹽酸水溶液至ph1-2，大量白色固體析出，過濾，濾餅加入水(40ml)和二氯甲烷(40ml)，3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用20ml二氯甲烷抽提，合并二氯甲烷層，20ml水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干，得產(chǎn)物10g，收率90.1％。實施例92’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氟苯亞乙基腙)克拉霉素3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氟苯亞乙基)腙克拉霉素(10g，13.5mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入乙酸酐(2.53ml，27mmol)，室溫攪拌4h。加水(20ml)，3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗(20ml)，飽和食鹽水洗，干燥后旋干，得產(chǎn)物10.2g。實施例103-脫克拉定糖-3-(4-三氟甲基苯乙?；?-9-(4-氟苯亞乙基腙)克拉霉素(化合物zkt-3-4)2’-o-乙酰基-3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氟苯亞乙基腙)克拉霉素(1.05g，1.37mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-三氟甲基苯乙酸(0.56g，2.74mmol)，分批加入edci(1.04g，5.48mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.36g，收率28.9％，hplc純度89.6％。ms(esi+，m/e)：910[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.87(dd，j＝8.9，5.5hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.59(d，j＝8.2hz，2h，3-苯環(huán)3，5-h)，7.48(d，j＝8.1hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，7.08(t，j＝8.7hz，2h，3-苯環(huán)2，6-h)，5.52(s，1h)，5.21(dd，j＝11.2，2.2hz，1h)，5.05(d，j＝11.1hz，1h)，3.89(d，j＝1.1hz，1h)，3.88-3.80(m，2h)，3.79-3.69(m，3h)，3.41(s，1h)，3.32(s，1h)，3.15(dd，j＝10.1，7.2hz，1h)，2.96(s，3h)，2.95-2.91(m，1h)，2.84(dt，j＝13.5，6.8hz，1h)，2.73(q，j＝6.7hz，1h)，2.29(d，j＝9.0hz，9h)，2.25(dd，j＝7.7，3.5hz，1h)，2.02(s，1h)，2.01-1.91(m，1h)，1.66-1.57(m，1h)，1.51(ddd，j＝11.3，9.1，6.5hz，2h)，1.44(d，j＝13.9hz，1h)，1.26(d，j＝6.8hz，6h)，1.20(s，3h)，1.14(d，j＝7.5hz，3h)，1.10(d，j＝6.1hz，3h)，1.03(d，j＝7.0hz，3h)，0.91(d，j＝6.8hz，3h)，0.82(t，j＝7.4hz，3h).13cnmr(100mhz，cdcl3)δ179.64(1-co)，173.55(3-co)，170.62(9-n＝c-)，165.17(9-苯環(huán)4-c)，159.81(9-c＝n-)，137.81(9-苯環(huán)1-c)，134.91(3-苯環(huán)1-c)，130.20(3-苯環(huán)2，6-c)，129.71(9-苯環(huán)2，6-c)，128.63(3-苯環(huán)3，5-c)，125.58(9-苯環(huán)3，5-c)，115.55(3-苯環(huán)4-cf3)，14.98(9-n＝c-ch3)實施例113-脫克拉定糖-3-(2，4，5-三氟苯乙?；?-9-(4-氟苯亞乙基腙)克拉霉素(化合物zkt-3-245)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氟苯亞乙基腙)克拉霉素(1.05g，1.37mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入2，4，5-三氟苯乙酸(0.56g，2.74mmol)，分批加入edci(1.04g，5.48mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.54g，收率43.9％，hplc純度96.8％。ms(esi+，m/e)：896[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.90-7.83(m，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.17(ddd，j＝10.2，8.6，6.9hz，1h，3-苯環(huán)6-h)，7.12-7.04(m，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，6.94(td，j＝9.5，6.6hz，1h，3-苯環(huán)3-h)，5.52(s，1h)，5.22(dd，j＝11.2，2.2hz，1h)，5.06(d，j＝11.0hz，1h)，3.94(d，j＝7.2hz，1h)，3.89(d，j＝1.2hz，1h)，3.84(dd，j＝10.1，7.0hz，1h)，3.70(dd，j＝6.9，3.3hz，3h)，3.41(s，1h)，3.33(s，1h)，3.29-3.22(m，1h)，3.18(dd，j＝10.1，7.2hz，1h)，2.95(s，3h)，2.87(dd，j＝11.1，6.8hz，1h)，2.73(dd，j＝13.6，6.6hz，1h)，2.42(ddd，j＝11.8，8.7，4.6hz，2h)，2.30(d，j＝3.3hz，9h)，2.24(d，j＝3.3hz，1h)，1.97(ddd，j＝14.3，7.5，2.2hz，2h)，1.68-1.57(m，2h)，1.56-1.39(m，3h)，1.28(s，3h)，1.26(d，j＝6.9hz，3h)，1.20(s，3h)，1.14(dd，j＝12.7，6.8hz，8h)，1.02(dd，j＝6.8，4.5hz，6h)，0.84(d，j＝7.3hz，3h).13cnmr(100mhz，cdcl3)δ179.63(1-co)，173.51(3-co)，165.16(9-n＝c-)，162.68(9-苯環(huán)4-c)，159.80(9-c＝n-)，157.32(3-苯環(huán)2-c)，154.90(3-苯環(huán)4-c)，150.89(3-苯環(huán)5-c)，129.07(9-苯環(huán)2，6-c)，128.63(9-苯環(huán)3，5-c)，14.97(9-n＝c-ch3)實施例123-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-三氟甲基苯亞乙基腙)克拉霉素3-脫克拉定糖-3-羥基-9-腙克拉霉素(9g，15mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入對三氟甲基苯乙酮(2.8g，15mmol)和冰乙酸(0.85ml，15mmol)，室溫攪拌5h，蒸干除去溶劑；加入適量甲苯(20ml)使油狀混合物完全溶解， 逐滴加入2n鹽酸水溶液至ph1-2，大量白色固體析出，過濾，濾餅加入水(40ml)和二氯甲烷(40ml)，3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗(20ml)，飽和食鹽水洗，干燥后旋干，得產(chǎn)物10.3g，收率89％。實施例132’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-三氟甲基苯亞乙基腙)克拉霉素3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-三氟甲基苯亞乙基)腙克拉霉素(10.3g，13.3mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入乙酸酐(2.49ml，26.6mmol)，室溫攪拌4h。加水20ml，3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗(20ml)，飽和食鹽水洗，干燥后旋干，得產(chǎn)物10g。實施例143-脫克拉定糖-3-(4-氟苯乙?；?-9-(4-三氟甲基苯亞乙基腙)克拉霉素(zkt-4-f)2’-o-乙酰基-3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-三氟甲基苯亞甲基腙)克拉霉素(1.1g，1.35mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-氟苯乙酸(0.416g，2.66mmol)，分批加入edci(1.04g，5.4mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.61g，收率50％，hplc純度91.7％。ms(esi+，m/e)：910[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.97(d，j＝8.2hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.66(d，j＝8.3hz，2h，3-苯環(huán)2，6-h)，7.31(dd，j＝8.6，5.4hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，7.01(t，j＝8.6hz，2h，3-苯環(huán)3，5-h)，5.40(s，1h)，5.21(dd，j＝11.1，2.2hz，1h)，5.04(d，j＝11.0hz，1h)，3.90(s，1h)，3.87(d，j＝7.2hz，1h)，3.78(dd，j＝10.3，7.1hz，1h)，3.74(d，j＝3.5hz，1h)，3.69(d，j＝15.2hz，1h)，3.63(d，j＝15.2hz，1h)，3.40(s，1h)，3.32(s，1h)，3.16(dd，j＝10.1，7.2hz，1h)，3.05 (dq，j＝12.0，6.1hz，1h)，2.98(s，3h)，2.85(ddd，j＝17.9，12.7，6.5hz，1h)，2.78-2.70(m，1h)，2.31(d，j＝13.6hz，9h)，2.24(dd，j＝7.6，3.3hz，1h)，2.03-1.91(m，1h)，1.67-1.48(m，3h)，1.45(d，j＝13.4hz，1h)，1.27(d，j＝8.6hz，6h)，1.21(s，3h)，1.13(dd，j＝6.8，4.1hz，6h)，1.03(d，j＝7.0hz，3h)，0.89(d，j＝6.8hz，3h)，0.82(t，j＝7.4hz，3h).13cnmr(100mhz，cdcl3)δ180.07(1-co)，173.63(3-co)，171.20(9-n＝c-)，159.53(3-苯環(huán)4-c)，159.09(9-c＝n-)，142.04(9-苯環(huán)1-c)，131.45(3-苯環(huán)2，6-c)，129.52(9-苯環(huán)2，6-c)，126.98(9-苯環(huán)3，5-c)，125.72(9-苯環(huán)4-cf3)，115.70(3-苯環(huán)3，5-c)，14.94(9-n＝c-ch3)實施例153-脫克拉定糖-3-(4-甲氧基苯乙?；?-9-(4-三氟甲基苯亞乙基腙)克拉霉素(zkt-4-o)2’-o-乙酰基-3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-三氟甲基苯亞甲基腙)克拉霉素(1.1g，1.35mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-甲氧基苯乙酸(0.45g，2.66mmol)，分批加入edci(1.04g，5.4mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.53g，收率42.5％，hplc純度90.4％。ms(esi+，m/e)：922[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.97(d，j＝8.2hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.65(d，j＝8.4hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，7.25(d，j＝8.6hz，2h，3-苯環(huán)2，6-h)，6.85(d，j＝8.6hz，2h，3-苯環(huán)3，5-h)，5.41(s，1h)，5.22(dd，j＝11.1，2.1hz，1h)，5.03(d，j＝11.0hz，1h)，3.90(s，1h)，3.88(d，j＝7.2hz，1h)，3.80(s，1h)，3.78(s，3h)，3.74(d，j＝3.6hz，2h)，3.62(d，j＝8.4hz，1h)，3.40(s，1h)，3.28(s，1h)，3.15(dd，j＝10.1，7.2hz，1h)，3.08-3.00(m，1h)，3.00-2.94(m，3h)，2.92-2.79(m，2h)，2.74(dd，j＝12.9，5.8hz，1h)，2.31(d，j＝15.0hz，9h)，2.26-2.18(m，1h)，1.97(dtd，j＝14.8，7.4，5.2hz，2h)，1.68-1.59(m，1h)， 1.58-1.48(m，2h)，1.45(d，j＝13.7hz，1h)，1.27(d，j＝6.9hz，3h)，1.25(s，3h)，1.21(s，3h)，1.12(dd，j＝9.5，6.9hz，6h)，1.03(d，j＝7.0hz，3h)，0.90(d，j＝6.7hz，3h)，0.82(t，j＝7.4hz，3h).13cnmr(100mhz，cdcl3)δ180.10(1-co)，173.72(3-co)，171.66(9-n＝c-)，159.50(3-苯環(huán)4-c)，158.98(9-c＝n-)，142.059-苯環(huán)1-c)，130.57(3-苯環(huán)2，6-c)，129.81(9-苯環(huán)2，6-c)，125.77(9-苯環(huán)3，5-c)，125.69(9-苯環(huán)4-cf3)，114.12(3-苯環(huán)3，5-c)，55.40(3-苯環(huán)4-och3)，14.94(9-n＝c-ch3)實施例163-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氟苯亞甲基腙)克拉霉素3-脫克拉定糖-3-羥基-9-腙克拉霉素(9g，15mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入對氟苯甲醛(1.9g，15mmol)和冰乙酸(0.85ml，15mmol)，室溫攪拌5h，蒸干除去溶劑；加入適量甲苯(20ml)使油狀混合物完全溶解，逐滴加入2n鹽酸水溶液至ph1-2，大量白色固體析出，過濾，濾餅加入水(40ml)和二氯甲烷(40ml)，3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗(20ml)，飽和食鹽水洗，干燥后旋干，得產(chǎn)物9.8g，收率92.3％。實施例172’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氟苯亞甲基腙)克拉霉素3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氟苯亞甲基)腙克拉霉素(9.8g，13.8mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入乙酸酐(2.57ml，27.6mmol)，室溫攪拌4h。加水20ml，3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷層，20ml水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干，得產(chǎn)物10.1g。實施例183-脫克拉定糖-3-(4-氟苯乙?；?-9-(4-氟苯亞甲基腙)克拉霉素(zkt-5-f)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氟苯亞甲基腙)克拉霉素(1g，1.33mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-氟苯乙酸(0.41g，2.66mmol)，分批加入edci(1.02g，5.32mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽 提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.52g，收率46.4％，hplc純度94.5％。ms(esi+，m/e)：846[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.28(s，1h)，7.76(dd，j＝8.5，5.6hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.30(dd，j＝8.3，5.5hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，7.11(t，j＝8.6hz，2h，3-苯環(huán)2，6-h)，7.00(t，j＝8.6hz，2h，3-苯環(huán)3，5-h)，5.65(s，1h)，5.20(dd，j＝11.1，1.9hz，1h)，5.01(d，j＝11.0hz，1h)，4.10(dq，j＝14.0，6.8hz，1h)，3.90-3.79(m，2h)，3.74-3.59(m，3h)，3.40(s，1h)，3.29(s，1h)，3.16(dd，j＝10.1，7.3hz，1h)，3.05(q，j＝6.7hz，1h)，2.86(s，3h)，2.82(dd，j＝11.1，6.8hz，1h)，2.77-2.70(m，1h)，2.37-2.31(m，1h)，2.29(s，6h)，2.21(dd，j＝7.3，3.3hz，1h)，2.02(s，1h)，1.96(ddd，j＝14.5，7.6，2.0hz，1h)，1.66-1.44(m，4h)，1.28(d，j＝5.4hz，3h)，1.24(d，j＝6.9hz，3h)，1.18(d，j＝5.2hz，3h)，1.16-1.09(m，8h)，1.06(d，j＝6.9hz，3h)，0.87(d，j＝6.7hz，3h)，0.81(t，j＝7.3hz，3h).13cnmr(100mhz，cdcl3)δ183.90(1-co)，173.67(3-co)，171.18(9-n＝c-)，163.45(9-苯環(huán)4-c)，157.64(3-苯環(huán)4-c)，131.04(3-苯環(huán)2，6-c)，130.17(9-苯環(huán)2，6-c)，116.23(s)，116.01(9-苯環(huán)3，5-c)，115.68(3-苯環(huán)3，5-c)實施例193-脫克拉定糖-3-(4-氯苯乙酰基)-9-(4-氟苯亞甲基腙)克拉霉素(zkt-5-c1)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氟苯亞甲基腙)克拉霉素(1g，1.33mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-氯苯乙酸(0.45g，2.66mmol)，分批加入edci(1.02g，5.32mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱 層析分離得產(chǎn)物0.59g，收率51.7％，hplc純度92.1％。ms(esi+，m/e)：862[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.28(s，1h)，7.76(dd，j＝8.7，5.5hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.27(d，j＝7.2hz，4h，9-苯環(huán)3，5-h3-苯環(huán)2，6-h)，7.10(t，j＝8.6hz，2h，3-苯環(huán)3，5-h)，5.65(s，1h)，5.19(dd，j＝11.1，2.1hz，1h)，5.01(d，j＝11.0hz，1h)，4.10(dq，j＝14.0，7.0hz，1h)，3.88-3.80(m，2h)，3.69(d，j＝3.8hz，1h)，3.66(d，j＝2.8hz，1h)，3.63(s，1h)，3.40(s，1h)，3.30(s，1h)，3.15(dd，j＝10.1，7.2hz，1h)，3.00-2.91(m，1h)，2.86(s，3h)，2.85-2.80(m，1h)，2.73(dd，j＝14.5，7.5hz，1h)，2.36-2.30(m，1h)，2.27(d，j＝13.6hz，6h)，2.20(dt，j＝10.1，7.4hz，1h)，2.14-2.03(m，1h)，1.96(tdd，j＝15.0，7.6，2.2hz，1h)，1.65-1.44(m，4h)，1.27(s，3h)，1.24(d，j＝6.9hz，3h)，1.19(s，3h)，1.11(t，j＝6.4hz，6h)，1.06(d，j＝7.0hz，3h)，0.89(d，j＝6.7hz，3h)，0.81(t，j＝7.4hz，3h).13cnmr(100mhz，cdcl3)δ183.89(1-co)，173.64(3-co)，170.94(9-n＝c-)，165.70(9-苯環(huán)4-c)，157.64(9-c＝n-)，133.42(3-苯環(huán)2，6-c)，132.24(9-苯環(huán)2，6-c)，130.93(3-苯環(huán)3，5-c)，116.22(9-苯環(huán)3，5-c)實施例203-脫克拉定糖-3-(4-甲氧基苯乙?；?-9-(4-氟苯亞甲基腙)克拉霉素(zkt-5-o)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氟苯亞甲基腙)克拉霉素(1g，1.33mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-甲氧基苯乙酸(0.44g，2.66mmol)，分批加入edci(1.02g，5.32mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.39g，收率34.2％，hplc純度90.4％。ms(esi+，m/e)：858[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.27(s，1h)，7.76(dd，j＝8.6，5.6hz，2h，9- 苯環(huán)2，6-h)，7.24(d，j＝8.6hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h3-苯環(huán)2，6-h)，7.11(t，j＝8.6hz，2h)，6.84(d，j＝8.6hz，2h，3-苯環(huán)3，5-h)，5.65(s，1h)，5.20(dd，j＝11.1，2.0hz，1h)，5.01(d，j＝11.0hz，1h)，4.10(dq，j＝13.9，6.9hz，1h)，3.87(d，j＝7.2hz，1h)，3.84(s，1h)，3.78(s，3h)，3.71(d，j＝3.4hz，1h)，3.64(d，j＝15.1hz，1h)，3.58(d，j＝15.1hz，1h)，3.40(s，1h)，3.26(s，1h)，3.15(dd，j＝10.1，7.3hz，1h)，3.07-2.98(m，1h)，2.87(s，3h)，2.83(dd，j＝11.1，6.8hz，1h)，2.73(q，j＝6.9hz，1h)，2.38-2.30(m，1h)，2.27(d，j＝12.6hz，6h)，2.24-2.16(m，1h)，1.96(dtd，j＝15.0，7.5，5.5hz，1h)，1.67-1.57(m，1h)，1.57-1.43(m，3h)，1.26(s，3h)，1.24(d，j＝7.0hz，3h)，1.19(s，3h)，1.13(d，j＝7.6hz，3h)，1.11(d，j＝6.2hz，3h)，1.06(d，j＝7.0hz，3h)，0.88(d，j＝6.7hz，3h)，0.81(t，j＝7.4hz，3h).13cnmr(100mhz，cdcl3)δ183.91(1-co)，173.68(3-co)，171.64(9-n＝c-)，158.97(9-苯環(huán)4-c)，157.59(9-c＝n-)，130.94(3-苯環(huán)2，6-c)，130.64(9-苯環(huán)2，6-c)，116.22(9-苯環(huán)3，5-c)，116.00(3-苯環(huán)3，5-c)，55.20(3-苯環(huán)4-och3)實施例213-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氯苯亞甲基腙)克拉霉素3-脫克拉定糖-3-羥基-9-腙克拉霉素(9g，15mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入對氯苯甲醛(2.1g，15mmol)和冰乙酸(0.85ml，15mmol)，室溫攪拌5h，蒸干除去溶劑；加入適量甲苯(20ml)使油狀混合物完全溶解，逐滴加入2n鹽酸水溶液至ph1-2，大量白色固體析出，過濾，濾餅加入水(40ml)和二氯甲烷(40ml)，3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗(20ml)，飽和食鹽水洗，干燥后旋干，得產(chǎn)物9.9g，收率91.1％。實施例222’-o-乙酰基-3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氯苯亞甲基腙)克拉霉素3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氯苯亞甲基)腙克拉霉素(9.9g，13.7mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入乙酸酐(2.56ml，27.4mmol)，室溫攪拌4h。加 水(20ml)，3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗(20ml)，飽和食鹽水洗，干燥后旋干，得產(chǎn)物10.1g。實施例233-脫克拉定糖-3-(4-三氟甲基苯乙酰基)-9-(4-氯苯亞甲基腙)克拉霉素(zkt-6-4)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氯苯亞甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.96mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-三氟甲基苯乙酸(0.8g，3.92mmol)，分批加入edci(1.5g，7.83mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.53g，收率29.6％，hplc純度90.4％。ms(esi+，m/e)：912[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.71(d，j＝8.4hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.60(d，j＝8.4hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，6.91(t，j＝8hz，2h3-苯環(huán)2，6-h)，6.76-6.72(m，1h，3-苯環(huán)4-h)13cnmr(100mhz，cdcl3)δ183.93(1-co)，173.37(3-co)，170.43(9-n＝c-)，157.43(9-c＝n-)，137.74(3-苯環(huán)1-c)，136.77(9-苯環(huán)4-c)，133.12(3-苯環(huán)2，6-c)，129.92(9-苯環(huán)2，6-c)，129.13(9-苯環(huán)3，5-c)，125.43(3-苯環(huán)3，5-c)實施例243-脫克拉定糖-3-(3，5-二氟苯乙酰基)-9-(4-氯苯亞甲基腙)克拉霉素(zkt-6-35)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氯苯亞甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.96mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入3，5-二氟苯乙酸(0.8g，3.92mmol)，分批加入edci(1.5g，7.83mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.56g，收率33.1％，hplc純度90.4％。ms(esi+，m/e)：980[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.72(d，j＝8.4hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.41(d，j＝8.4hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，6.91(t，j＝8hz，2h3-苯環(huán)2，6-h)，6.76-6.72(m，1h，3-苯環(huán)4-h)13cnmr(100mhz，cdcl3)δ183.93(1-co)，173.34(3-co)，170.07(9-n＝c-)，164.29(3-苯環(huán)3-c)，164.16(3-苯環(huán)5-c)，157.25(9-c＝n-)，137.22(9-苯環(huán)4-c)，136.76(3-苯環(huán)1-c)，133.06(9-苯環(huán)1-c)，129.27(9-苯環(huán)2，6-c)，129.12(9-苯環(huán)3，5-c)，112.69(3-苯環(huán)2，6-c)，103.68(3-苯環(huán)4-c)，實施例253-脫克拉定糖-3-(2，4，5-三氟苯乙?；?-9-(4-氯苯亞甲基腙)克拉霉素(zkt-6-245)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氯苯亞甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.96mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入2，4，5-三氟苯乙酸(0.8g，3.92mmol)，分批加入edci(1.5g，7.83mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.69g，收率39.2％，hplc純度93.8％。ms(esi+，m/e)：998[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.71(d，j＝8.4hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.41(d，j＝8.4hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，7.20-7.18(m，1h3-苯環(huán)6-h)，6.96-6.93(m，1h，3-苯環(huán)3-h)13cnmr(100mhz，cdcl3)δ183.95(1-co)，173.33(3-co)，169.68(9-n＝c-)，157.43(3-苯環(huán)2-c)，136.73(9-c＝n-)，133.12(3-苯環(huán)4-c)，129.29(3-苯環(huán)5-c)，129.12(9-苯環(huán)2，6-c)，128.63(9-苯環(huán)3，5-c)，119.38(3-苯環(huán)6-c)，119.32(3-苯環(huán)1-c)實施例263-脫克拉定糖-3-(4-氟苯乙酰基)-9-(4-氯苯亞甲基腙)克拉霉素(zkt-6-f)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氯苯亞甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.96mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-氟苯乙酸(0.6g，3.92mmol)，分批加入edci(1.5g，7.83mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.62g，收率41.9％，hplc純度91.1％。ms(esi+，m/e)：962[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.72(d，j＝8.4hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.41(d，j＝8.4hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，7.31(dd，j＝5.2，5.6hz，2h3-苯環(huán)2，6-h)，7.03(t，j＝10.2hz，2h，3-苯環(huán)3，5-h)13cnmr(100mhz，cdcl3)δ183.92(1-co)，173.43(3-co)，170.98(9-n＝c-)，163.38(3-苯環(huán)4-c)，160.93(9-c＝n-)，157.97(9-苯環(huán)4-c)，136.74(3-苯環(huán)2，6-c)，133.14(9-苯環(huán)2，6-c)，130.92(9-苯環(huán)3，5-c)，115.51(3-苯環(huán)3，5-c)實施例273-脫克拉定糖-3-(4-氯苯乙酰基)-9-(4-氯苯亞甲基腙)克拉霉素(zkt-6-c1)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氯苯亞甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.96mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-氯苯乙酸(0.67g，3.92mmol)，分批加入edci(1.5g，7.83mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.55g，收率31.7％，hplc純度90.8％。ms(esi+，m/e)：878[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.71(d，j＝8.4hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.41(d，j＝8.4hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，7.30-7.27(m，4h3-苯環(huán)2，6-h3-苯環(huán)3，5-h)13cnmr(100mhz，cdcl3)δ183.95(1-co)，173.41(3-co)，170.75(9-n＝c-)，157.40(9-c＝n-)，136.64(9-苯環(huán)4-c)，133.37(3-苯環(huán)4-c)，130.86(3-苯環(huán)2，6-c)，129.28(3-苯環(huán)3，5-c)，129.13(9-苯環(huán)2，6-c)，128.73(9-苯環(huán)3，5-c)實施例283-脫克拉定糖-3-(4-甲氧基苯乙酰基)-9-(4-氯苯亞甲基腙)克拉霉素(zkt-6-o)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-氯苯亞甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.96mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-甲氧基苯乙酸(0.65g，3.92mmol)，分批加入edci(1.5g，7.83mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.44g，收率25.7％，hplc純度88.8％。ms(esi+，m/e)：874[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.71(d，j＝8.4hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.41(d，j＝8.4hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，7.31(t，j＝11.2hz，2h3-苯環(huán)2，6-h)，6.86(d，j＝8.8hz，2h，3-苯環(huán)3，5-h)13cnmr(100mhz，cdcl3)δ183.82(1-co)，173.43(3-co)，171.34(9-n＝c-)，158.86(3-苯環(huán)4-c)，157.25(9-c＝n-)，136.64(9-苯環(huán)4-c)，133.06(3-苯環(huán)2，6-c)，130.38(9-苯環(huán)2，6-c)，128.18(9-苯環(huán)3，5-c)，113.38(3-苯環(huán)3，5-c)，55.20(3-苯環(huán)4-och3)實施例293-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-三氟甲基苯亞甲基腙)克拉霉素3-脫克拉定糖-3-羥基-9-腙克拉霉素(9g，15mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入對三氟甲基苯甲醛(2.6g，15mmol)和冰乙酸(0.85ml，15mmol)，室溫攪拌5h，蒸干除去溶劑；加入適量甲苯(20ml)使油狀混合物完全溶 解，逐滴加入2n鹽酸水溶液至ph1-2，大量白色固體析出，過濾，濾餅加入水(40ml)和二氯甲烷(40ml)，3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗(20ml)，飽和食鹽水洗，干燥后旋干，得產(chǎn)物10.2g，收率89.9％。實施例302’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-三氟甲基苯亞甲基腙)克拉霉素3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-三氟甲基苯亞甲基)腙克拉霉素(10.2g，13.5mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入乙酸酐(2.53ml，27mmol)，室溫攪拌4h。加水20ml，3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗(20ml)，飽和食鹽水洗，干燥后旋干，得產(chǎn)物10.3g。實施例313-脫克拉定糖-3-(4-三氟甲基苯乙酰基)-9-(4-三氟甲基苯亞甲基腙)克拉霉素(zkt-7-4)2’-o-乙酰基-3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-三氟甲基苯亞甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.87mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-三氟甲基苯乙酸(0.76g，3.74mmol)，分批加入edci(1.43g，7.48mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.45g，收率25.4％，hplc純度89.1％。ms(esi+，m/e)：946[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.89(d，j＝8hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.70(d，j＝8.4hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，7.60(d，j＝10.8hz，2h3-苯環(huán)2，6-h)，7.49(d，2h3-苯環(huán)3，5-h)13cnmr(100mhz，cdcl3)δ184.66(1-co)，173.39(3-co)，170.43(9-n＝c-)，157.05(9-c＝n-)，137.89(9-苯環(huán)1-c)，137.70(3-苯環(huán)1-c)，132.49(9-苯環(huán)4-c)，132.16(3-苯環(huán)4-c)，129.99(3-苯環(huán)2，6-c)，129.91(9-苯環(huán) 2，6-c)，125.78(9-苯環(huán)3，5-c)，125.70(3-苯環(huán)3，5-c)，125.47(9-苯環(huán)4-cf3)，125.26(3-苯環(huán)4-cf3)實施例323-脫克拉定糖-3-(3，5-二氟苯乙?；?-9-(4-三氟甲基苯亞甲基腙)克拉霉素(zkt-7-35)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-三氟甲基苯亞甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.87mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入3，5-二氟苯乙酸(0.64g，3.74mmol)，分批加入edci(1.43g，7.48mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.51g，收率30.1％，hplc純度91.6％。ms(esi+，m/e)：914[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.89(d，j＝8hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.70(d，j＝8.4hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，6.91(d，j＝6hz，2h3-苯環(huán)2，6-h)，7.49(m，1h3-苯環(huán)4-h)13cnmr(100mhz，cdcl3)δ184.66(1-co)，173.37(3-co)，170.10(9-n＝c-)，164.29(3-苯環(huán)3-c)，161.83(3-苯環(huán)5-c)，157.25(9-c＝n-)，137.92(9-苯環(huán)4-c)，137.21(3-苯環(huán)1-c)，132.49(9-苯環(huán)1-c)，128.28(9-苯環(huán)2，6-c)，125.79(9-苯環(huán)3，5-c)，125.56(3-苯環(huán)4-cf3)，112.76(3-苯環(huán)2，6-c)，103.68(3-苯環(huán)4-c)實施例333-脫克拉定糖-3-(2，4，5-三氟苯乙酰基)-9-(4-三氟甲基苯亞甲基腙)克拉霉素(zkt-7-245)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-三氟甲基苯亞甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.87mm01)溶于8ml二氯甲烷中，加入2，4，5-三氟苯乙酸(0.71g，3.74mmol)，分批加入edci(1.43g，7.48mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.49g，收率28.1％，hplc純度94.9％。ms(esi+，m/e)：932[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.89(d，j＝8hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.70(d，j＝8.4hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，7.22-7.18(m，1h3-苯環(huán)6-h)，6.98-6，92(m，1h3-苯環(huán)3-h)13cnmr(100mhz，cdcl3)δ184.67(1-co)，173.36(3-co)，169.71(9-n＝c-)，157.15(3-苯環(huán)2-c)，137.90(9-c＝n-)，128.27(3-苯環(huán)4-c)，125.79(3-苯環(huán)5-c)，125.75(9-苯環(huán)2，6-c)，119.38(9-苯環(huán)3，5-c)，119.20(3-苯環(huán)6-c)，119.02(3-苯環(huán)1-c)實施例343-脫克拉定糖-3-(4-氟苯乙?；?-9-(4-三氟甲基苯亞甲基腙)克拉霉素(zkt-7-f)2’-o-乙酰基-3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-三氟甲基苯亞甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.87mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-氟苯乙酸(0.58g，3.74mmol)，分批加入edci(1.43g，7.48mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.55g，收率33％，hplc純度91.5％。ms(esi+，m/e)：896[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.89(d，j＝8.4hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.71(d，j＝8.4hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，7.34-7.28(m，2h3-苯環(huán)2，6-h)，7.05-7.00(m，2h3-苯環(huán)3，5-h)13cnmr(100mhz，cdcl3)δ184.66(1-co)，173.46(3-co)，171.08(9-n＝c-)，163.38(3-苯環(huán)4-c)，160.93(9-c＝n-)，137.92(9-苯環(huán)1-c)，132.49(9-苯環(huán)4-c)，132.16(3-苯環(huán)2，6-c)，129.40(9-苯環(huán)2，6-c)，125.79(9-苯環(huán)3，5-c)，125.56(9-苯環(huán)4-cf3)，115.58(3-苯環(huán)3，5-c)實施例353-脫克拉定糖-3-(4-氯苯乙?；?-9-(4-三氟甲基苯亞甲基腙)克拉霉素(zkt-7-c1)2’-o-乙酰基-3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-三氟甲基苯亞甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.87mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-氯苯乙酸(0.64g，3.74mmol)，分批加入edci(1.43g，7.48mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.58g，收率34.1％，hplc純度89.6％。ms(esi+，m/e)：912[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.89(d，j＝7.8hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.69(d，j＝8hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，7.33-7.28(m，4h3-苯環(huán)2，6-h3-苯環(huán)3，5-h)13cnmr(100mhz，cdcl3)δ184.66(1-co)，173.43(3-co)，170.05(9-n＝c-)，157.09(9-c＝n-)，137.90(9-苯環(huán)1-c)，133.49(9-苯環(huán)4-c)，132.48(3-苯環(huán)4-c)，132.15(3-苯環(huán)1-c)，130.83(3-苯環(huán)2，6-c)，128.72(9-苯環(huán)2，6-c)，128.26(3-苯環(huán)3，5-c)，125.78(3-苯環(huán)3，5-c)，125.56(9-苯環(huán)4-cf3)實施例363-脫克拉定糖-3-(4-甲氧基苯乙?；?-9-(4-三氟甲基苯亞甲基腙)克拉霉素(zkt-7-o)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-三氟甲基苯亞甲基腙)克拉霉素(1.5g，1.87mmol)溶于8ml二氯甲烷中，加入4-甲氧基苯乙酸(0.62g，3.74mmol)，分批加入edci(1.43g，7.48mmol)，室溫攪拌24h，加水(5ml)和二氯甲烷(10ml)，用3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(10ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗，飽和食鹽水洗，干燥后旋干得粗品。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用4g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.57g，收率33.6％，hplc純度93.1％。ms(esi+，m/e)：908[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.89(d，j＝8hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.70(d，j ＝8.4hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，7.27(t，j＝10.8hz，2h3-苯環(huán)2，6-h)，6.92-6.86(m，2h3-苯環(huán)3，5-h)13cnmr(100mhz，cdcl3)δ184.64(1-co)，173.54(3-co)，171.34(9-n＝c-)，158.96(3-苯環(huán)4-c)，157.05(9-c＝n-)，137.92(9-苯環(huán)4-c)，132.92(9-苯環(huán)1-c)，132.14(3-苯環(huán)2，6-c)，129.72(9-苯環(huán)2，6-c)，128.26(9-苯環(huán)3，5-c)，114.63(3-苯環(huán)3，5-c)，55.28(3-苯環(huán)4-och3)。實施例373-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-甲氧基苯亞乙基腙)克拉霉素的制備3-脫克拉定糖-3-羥基-9-腙克拉霉素(9g，15mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入對甲氧基苯乙酮(2.25g，15mmol)和冰乙酸(0.85ml，15mmol)，室溫攪拌5h，蒸干除去溶劑；加入適量甲苯(20ml)使油狀混合物完全溶解，逐滴加入2n鹽酸水溶液至ph1-2，大量白色固體析出，過濾，濾餅加入水(40ml)和二氯甲烷(40ml)，3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗(20ml)，飽和食鹽水洗，干燥后旋干，得產(chǎn)物10g，收率90.6％。實施例382’-o-乙酰基-3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-甲氧基苯亞乙基腙)克拉霉素的制備3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-甲氧基苯亞乙基)腙克拉霉素(10g，13.6mmol)溶于50ml二氯甲烷中，加入乙酸酐(2.55ml，27.2mmol)，室溫攪拌4h。加水(20ml)，3nnaoh調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(20ml)抽提，合并二氯甲烷層，水洗(20ml)，飽和食鹽水洗，干燥后旋干，得產(chǎn)物10.2g。實施例392’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-o-(咪唑羰氧基)-9-(4-甲氧基苯亞乙基腙)克拉霉素的制備2’-o-乙酰基-3-脫克拉定糖-3-羥基-9-(4-甲氧基苯亞乙基腙)克拉霉素(10.2g，13mmol)溶于50ml二氯甲烷中，依次加入cdi(4.2g，26mmol)、dmap(3.17g，26mmol)，室溫攪拌反應24h；加水(20ml)，用3nnaoh 調節(jié)ph至9-10，分液，水層用二氯甲烷(20ml)抽提，合并有機層，水洗，ph4-5酸洗(15ml)，飽和食鹽水洗，干燥后旋干，得產(chǎn)物9.3g，收率82％。實施例403-脫克拉定糖-3-o-(苯甲胺甲?；?-9-(4-甲氧基苯亞乙基腙)克拉霉素(zkt-101)2’-o-乙酰基-3-脫克拉定糖-3-o-(咪唑羰氧基)-9-(4-甲氧基苯亞乙基腙)克拉霉素(0.5g，0.57mmol)溶于8mldmf，依次加入dbu(0.23ml，1.15mmol)和芐胺(0.31ml，2.87mmol)，60℃反應4h，冷卻反應，加水(10ml)，過濾得濾餅。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用2g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.35g，收率70.8％，hplc純度91％。ms(esi+，m/e)：869[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.85(d，j＝8.7hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.31(d，j＝3.9hz，5h，3-苯環(huán)2，6-h9-苯環(huán)3，5-h3-苯環(huán)4-h)，6.91(d，j＝8.7hz，2h，3-苯環(huán)3，5-h)，5.66(s，2h)，5.24(d，j＝10.6hz，1h)，4.88(d，j＝11.0hz，1h)，4.39-4.28(m，2h)，3.97(d，j＝7.2hz，1h)，3.89(s，1h)，3.84(s，3h)，3.73(s，1h)，3.45(s，1h)，3.19-3.11(m，1h)，2.95(s，3h)，2.89-2.78(m，2h)，2.71(d，j＝6.8hz，2h)，2.30(s，9h)，2.02(s，1h)，2.01-1.93(m，1h)，1.66-1.57(m，1h)，1.50-1.35(m，3h)，1.25(d，j＝6.2hz，6h)，1.21(s，3h)，1.17-1.06(m，12h)，1.01(d，j＝6.8hz，3h)，0.83(t，j＝7.2hz，3h).13cnmr(100mhz，cdcl3)δ179.13(1-co)，173.88(9-n＝c-)，161.03(9-c＝n-)，160.30(9-苯環(huán)4-c)，156.7l(3-苯環(huán)4-c)，138.73(3-co)，131.47(3-苯環(huán)l-c)，128.74(9-苯環(huán)l-c)，128.32-127.80(9-苯環(huán)2，6-c3-苯環(huán)2，6-c)，55.45(9-苯環(huán)och3)，14.84(9-n＝c-ch3)實施例413-脫克拉定糖-3-o-(4-氟苯甲胺甲酰基)-9-(4-甲氧基苯亞乙基腙)克拉霉素(zkt-102)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-o-(咪唑羰氧基)-9-(4-甲氧基苯亞乙基腙)克拉霉素(0.4g，0.46mmol)溶于10mldmf，依次加入dbu(0.14ml，0.92mmol) 和4-氟芐胺(0.26ml，2.3mmol)，60℃反應5h，冷卻反應，加水(10ml)，過濾得濾餅。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用2g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.26g，收率63.4％，hplc純度90.1％。ms(esi+，m/e)：887[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.85(d，j＝8.9hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.28(dd，j＝5.9，2.2hz，2h，3-苯環(huán)2，6-h)，7.01(dt，j＝8.5，2.9hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，6.92(d，j＝8.8hz，2h，3-苯環(huán)3，5-h)，5.64(s，1h)，5.45(t，j＝6.0hz，1h)，5.29-5.20(m，1h)，4.88(d，j＝11.1hz，1h)，4.37(dd，j＝14.7，6.2hz，1h)，4.26(dd，j＝14.7，5.9hz，1h)，3.96-3.89(m，2h)，3.84(s，4h)，3.73(d，j＝2.4hz，1h)，3.44(s，1h)，3.13(dd，j＝9.9，7.4hz，1h)，3.03(dd，j＝13.6，6.1hz，1h)，2.95(s，3h)，2.88-2.79(m，1h)，2.72(dd，j＝13.4，6.5hz，1h)，2.29(s，3h)，2.24(s，6h)，2.04-1.89(m，2h)，1.68-1.58(m，1h)，1.56-1.40(m，3h)，1.28-1.23(m，6h)，1.21(s，3h)，1.13(td，j＝14.1，5.2hz，12h)，1.01(d，j＝7.0hz，3h)，0.84(t，j＝7.3hz，3h).13cnmr(100mhz，cdcl3)δ179.14(1-co)，173.81(9-n＝c-)，161.03(9-c＝n-)，160.29(9-苯環(huán)4-c)，156.69(3-苯環(huán)4-c)，134.57(3-co)，131.46(3-苯環(huán)1-c)，129.66(9-苯環(huán)1-c)，128.94-128.54(9-苯環(huán)2，6-c3-苯環(huán)2，6-c)，55.44(9-苯環(huán)och3)，14.83(9-n＝c-ch3)實施例423-脫克拉定糖-3-o-(4-甲氧基苯甲胺甲?；?-9-(4-甲氧基苯亞乙基腙)克拉霉素(zkt-103)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-o-(咪唑羰氧基)-9-(4-甲氧基苯亞乙基腙)克拉霉素(0.4g，0.46mmol)溶于8mldmf，依次加入dbu(0.14ml，0.92mmol)和4-甲氧基芐胺(0.3ml，2.3mmol)，60℃反應5h，冷卻反應，加水(10ml)，過濾得濾餅。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用2g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.27g，收率65.3％，hplc純度89.8％。ms(esi+，m/e)：899[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.85(d，j＝8.9hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.22(d，j＝8.4hz，2h，3-苯環(huán)2，6-h)，6.92(d，j＝8.9hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，6.83(d，j＝8.5hz，2h，3-苯環(huán)3，5-h)，5.64(s，1h)，5.34(t，j＝5.7hz，1h)，5.25(dd，j＝11.0，1.7hz，1h)，4.88(d，j＝11.0hz，1h)，4.28(ddd，j＝30.2，14.5，5.9hz，2h)，3.94(d，j＝7.3hz，1h)，3.90(s，1h)，3.84(s，3h)，3.78(d，j＝5.0hz，3h)，3.74(d，j＝2.5hz，1h)，3.45(s，1h)，3.13(dd，j＝9.7，7.7hz，1h)，3.08-2.99(m，1h)，2.96(s，3h)，2.88-2.79(m，1h)，2.76-2.68(m，1h)，2.30(s，3h)，2.26(s，6h)，1.98(dtd，j＝15.0，7.5，5.4hz，1h)，1.69-1.58(m，1h)，1.56-1.44(m，2h)，1.41(d，j＝14.1hz，1h)，1.26(d，j＝8.8hz，7h)，1.21(s，3h)，1.13(dd，j＝6.2，2.9hz，6h)，1.10(d，j＝7.5hz，3h)，1.01(d，j＝6.9hz，3h)，0.84(t，j＝7.3hz，3h).13cnmr(100mhz，cdcl3)δ179.19(1-co)，173.86(9-n＝c-)，161.03(9-c＝n-)，160.28(9-苯環(huán)4-c)，159.2l(3-苯環(huán)4-c)，131.49(3-co)，130.80(3-苯環(huán)2，6-c)，129.33(9-苯環(huán)2，6-c)，55.43(9-苯環(huán)och33-苯環(huán)och3)，14.85(9-n＝c-ch3)實施例433-脫克拉定糖-3-o-(4-甲基苯甲胺甲酰基)-9-(4-甲氧基苯亞乙基腙)克拉霉素(zkt-104)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-o-(咪唑羰氧基)-9-(4-甲氧基苯亞乙基腙)克拉霉素(0.4g，0.46mmol)溶于8mldmf，依次加入dbu(0.14ml，0.92mmol)和4-甲基芐胺(0.27ml，2.3mmol)，60℃反應4.5h，冷卻反應，加水(10ml)，過濾得濾餅。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用2g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.31g，收率75.4％，hplc純度93.1％。ms(esi+，m/e)：883[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.85(d，j＝8.8hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.18(d，j＝7.7hz，2h，3-苯環(huán)2，6-h)，7.11(d，j＝7.7hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，6.92(d，j＝8.8hz，2h，3-苯環(huán)3，5-h)，5.65(s，1h)，5.36(t，j＝5.7hz，1h)，5.24(d， j＝10.7hz，1h)，4.88(d，j＝11.0hz，1h)，4.31(qd，j＝14.8，6.2hz，2h)，3.94(d，j＝7.2hz，1h)，3.90(s，1h)，3.84(s，3h)，3.74(d，j＝1.6hz，1h)，3.45(s，1h)，3.13(dd，j＝9.5，7.9hz，1h)，3.08-2.99(m，2h)，2.96(s，3h)，2.83(dt，j＝17.5，6.8hz，1h)，2.72(d，j＝6.7hz，1h)，2.31(d，j＝6.3hz，6h)，2.25(s，6h)，2.00-1.93(m，1h)，1.69-1.58(m，1h)，1.58-1.47(m，1h)，1.42(s，1h)，1.36(d，j＝23.4hz，1h)，1.29-1.20(m，9h)，1.18-1.06(m，12h)，1.01(d，j＝6.8hz，3h)，0.84(t，j＝7.2hz，3h).13cnmr(100mhz，cdcl3)δ179.19(1-co)，173.88(9-n＝c-)，161.03(9-c＝n-)，160.30(9-苯環(huán)4-c)，156.62(3-co)，137.38(3-苯環(huán)4-c)，135.63(9-苯環(huán)l-c)，131.49(3-苯環(huán)2，6-c)，129.52(9-苯環(huán)2，6-c)，55.46(9-苯環(huán)och3)，14.86(9-n＝c-ch3)實施例443-脫克拉定糖-3-o-(β-苯乙胺甲酰基)-9-(4-甲氧基苯亞乙基腙)克拉霉素(zkt-105)2’-o-乙?；?3-脫克拉定糖-3-o-(咪唑羰氧基)-9-(4-甲氧基苯亞乙基腙)克拉霉素(0.4g，0.46mmol)溶于8mldmf，依次加入dbu(0.14ml，0.92mmol)和苯乙胺(0.29ml，2.3mmol)，60℃反應2.5h，冷卻反應，加水(10ml)，過濾得濾餅。粗品加10ml甲醇加熱回流2h。用2g200～300目硅膠拌樣后flash柱層析分離得產(chǎn)物0.29g，收率71.9％，hplc純度92.3％。ms(esi+，m/e)：883[m+h]+1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.85(d，j＝8.8hz，2h，9-苯環(huán)2，6-h)，7.31(t，j＝7.3hz，2h，3-苯環(huán)2，6-h)，7.23(t，j＝7.3hz，1h，3-苯環(huán)4-h)，7.18(d，j＝7.0hz，2h，9-苯環(huán)3，5-h)，6.92(d，j＝8.9hz，2h，3-苯環(huán)3，5-h)，5.65(s，1h)，5.25(dd，j＝11.1，2.1hz，1h)，4.99-4.91(m，1h)，4.87(d，j＝11.1hz，1h)，4.00(d，j＝7.3hz，1h)，3.97-3.91(m，1h)，3.89(s，1h)，3.84(s，3h)，3.79(d，j＝1.9hz，1h)，3.64(dq，j＝13.5，6.9hz，1h)，3.44(s，1h)，3.32-3.21(m，2h)，3.17(dd，j＝10.0，7.4hz，1h)，2.96(s，3h)，2.83(t，j＝6.9hz，2h)，2.72(dd，j＝13.2，6.3hz，1h)，2.45-2.35(m，1h)，2.33-2.26(m，9h)，2.22(d， j＝5.6hz，1h)，2.05-1.94(m，1h)，1.62(dd，j＝20.5，8.4hz，2h)，1.51(ddd，j＝14.2，11.2，7.2hz，1h)，1.41(d，j＝14.1hz，1h)，1.27(s，3h)，1.26(d，j＝5.6hz，4h)，1.21(s，3h)，1.18(d，j＝6.1hz，3h)，1.08(t，j＝6.3hz，6h)，1.02(d，j＝7.0hz，3h)，0.84(t，j＝7.3hz，3h).13cnmr(100mhz，cdcl3)δ179.19(1-co)，173.87(9-n＝c-)，161.03(9-c＝n-)，160.30(9-苯環(huán)4-c)，156.58(3-co)，138.64(3-苯環(huán)4-c)，131.49(9-苯環(huán)1-c)，128.84(3-苯環(huán)2，6-c)，128.23(9-苯環(huán)2，6-c)，55.46(9-苯環(huán)och3)，14.86(9-n＝c-ch3)。發(fā)明人在之前的工作中，以克拉霉素為原料并將其他反應底物進行相應的調整，按照本發(fā)明所述的化合物i的制備方法制得了化合物sipi8294和sipi8510，并對上述兩個化合物進行了單晶x射線衍射實驗，數(shù)據(jù)證明兩個化合物的晶體為9位亞腙均為ee構型。sipi8294的單晶x-射線結構測定結果如下：衍射實驗：sipi8294晶體呈無色透明塊狀，衍射實驗用晶體大小為0.25×0.28×0.34mm，屬正交晶系，空間群p212121，晶胞參數(shù)：a＝14.1087(2)，b＝14.6439(2)，α＝β＝γ＝90.0°，晶胞體積晶胞內(nèi)不對稱單位數(shù)z＝4。用brukersmartapex-ii衍射儀收集衍射強度數(shù)據(jù)，cukα輻射，石墨單色器，單導管直徑φ＝0.50mm，晶體與ccd探測器距離d＝60.3mm，管壓40kv，管流30ma，掃描方式：ω掃描，收集總衍射點數(shù)為27587個，獨立衍射點數(shù)為9874個，可觀察點數(shù)(甲2≥2σ|f|2)為9505個。結果表明：晶態(tài)下分子排列屬第一類空間群，故樣品應具有旋光活性，flack系數(shù)為0.06(3)，可確定晶體中化合物sipi8294的9位亞腙為ee構型，其絕對構型如下述結構式所示，分子立體構型投影圖如圖1所示。晶態(tài)下分子間存在氫鍵聯(lián)系，分子以范德華力和氫鍵維系其在空間的穩(wěn)定排列。sipi-8510的單晶x-射線結構測定結果：衍射實驗：sipi-8510晶體呈無色透明柱狀，衍射實驗用晶體大小為0.10×0.12×0.15mm，屬三斜晶系，空間群p1，晶胞參數(shù)：a＝9.8189(1)，b＝11.0611(1)，α＝87.7820(1)，β＝84.960(1)，γ＝63.9760(1)°，晶胞體積晶胞內(nèi)不對稱單位數(shù)z＝1。用brukersmartapex-ii衍射儀收集衍射強度數(shù)據(jù)，cukα輻射，石墨單色器，單導管直徑φ＝0.50mm，晶體與ccd探測器距離d＝60.3mm，管壓40kv，管流30ma，掃描方式：掃描，收集總衍射點數(shù)為8741個，獨立衍射點數(shù)為5550個，可觀察點數(shù)(|f|2≥2σ|f|2)。結果表明：晶態(tài)下分子排列屬第一類空間群，故樣品應具有旋光活性，flack系數(shù)為0.04(3)，可確定晶體中化合物的9位亞腙為ee構型，其絕對構型如下述結構式所示，分子立體構型投影圖如圖2所示。晶態(tài)下分子間存在氫鍵聯(lián)系，分子以范德華力和氫鍵維系其在空間的穩(wěn)定排列。據(jù)此，本領域技術人員可以很明確地確定由本發(fā)明所述的制備方法制備得到的化合物i、化合物ii和化合物7a的9位亞腙均為ee構型。效果實施例1化合物增效β-內(nèi)酰胺類抗生素抗mrsa活性1.材料與儀器：1.1實驗菌株：標準菌株(均購自美國模式菌株收集中心atcc)耐甲氧西林耐藥金黃色葡萄球菌atcc433001.2培養(yǎng)基lb液體培養(yǎng)基：胰蛋白胨10g/l，酵母提取物5g/l，氯化鈉10g/llb固體培養(yǎng)基：在所述的lb液體培養(yǎng)基的基礎上另加15g/l純化瓊脂粉。1.3材料及試劑：試劑名稱規(guī)格來源瓊脂粉生化試劑北京鼎國昌盛生物技術有限責任公司胰蛋白胨工業(yè)級英國oxoid公司酵母提取物工業(yè)級美國difco公司nacl分析純國藥集團化學試劑有限公司無水乙醇分析純國藥集團化學試劑有限公司二甲亞砜分析純國藥集團化學試劑有限公司naoh分析純國藥集團化學試劑有限公司1.4實驗儀器：2.實驗方法：2.1稀釋實驗接種物的制備采用生長方法制備相當于0.5麥氏單位的標準化接種物，再用mhb培養(yǎng)基按1∶150稀釋，得到用于實驗的初始菌液，并在15min內(nèi)接種，用于測 定藥物mic實驗。2.2藥物單獨作用下的mic測定抗生素和新型化合物單獨最低抑菌活性(mics)的測定采用微量稀釋法，參照clsim07-a9標準制備倍比稀釋的抗菌藥物。以不含藥物的camhb接種管為陽性對照，不接種細菌的培養(yǎng)物作為陰性對照，使每管最終菌液濃度約為0.25-0.5×106cfu/ml。將培養(yǎng)物置于37℃，培養(yǎng)16-20h后，觀察細菌的生產(chǎn)情況，并判讀藥物單獨的最低抑菌濃度(mics)。2.3聯(lián)合抑菌實驗mic的測定聯(lián)合抑菌試驗中組合藥物倍比稀釋方法(棋盤法)：采用微量稀釋法，固定待測化合物的終濃度，再按照m07-a9操作步驟依次將組合藥物中的待測抗生素倍比稀釋，以含單一抗生素或單一待測紅霉素衍生物的培養(yǎng)液位陽性對照，不接種細菌的培養(yǎng)物為陰性對照，使培養(yǎng)液最終菌弄度約為0.25-0.5×106cfu/ml。將培養(yǎng)物置于37℃，培養(yǎng)16-20h后，觀察細菌的生長情況，判讀各組合藥物中抗生素的mics。2.4fic值得計算fic指數(shù)＝a藥聯(lián)合時mic/a藥單測時mic+b藥聯(lián)合時mic/b藥單測時mic判斷標準：fic≤0.5為協(xié)同作用，0.5-1為相加作用，1-2為無關作用，＞2為拈抗作用。3.統(tǒng)計學分析以上實驗均重復3次，實驗結果采用t-test組間數(shù)據(jù)進行差異顯著性分析。p值小于0.05具有顯著性差異。4.測定方法：受試菌：耐甲氧西林金葡菌mrsaatcc43300，meca陽性；根據(jù)美國臨床標準化委員會(clinicalandlaboratorystandardsinstitute，clsi)的臨床試驗標準，苯唑西林mic法用以檢測meca介導的苯唑西林耐藥。實驗測定項目：(1)大環(huán)內(nèi)酯類新化合物及苯唑西林單獨使用時對mrsa atcc43300的mic值；(2)對28個大環(huán)內(nèi)酯類新化合物以8μg/ml、4μg/ml、2μg/ml和1μg/ml的濃度梯度分別與苯唑西林聯(lián)用，測定不同濃度下苯唑西林的mic。mic的測定方法參照clsim07-a9《需氧菌的稀釋法抗菌藥物敏感性試驗》執(zhí)行標準，第九版。稀釋試驗接種物的制備：采用生長方法制備相當于0.5麥氏單位的標準化接種物，再用mhb培養(yǎng)基按1∶150稀釋，并在15min內(nèi)接種，用于測定藥物mic。抗生素和新型化合物單藥最低抑菌活性(mic)的測定采用宏量稀釋法，參照m07-a9標準制備倍比稀釋的抗菌藥物。以不含藥物的camhb接種管為陽性對照，不接種細菌的培養(yǎng)物作為陰性對照，使每管最終菌液濃度約為0.25×106～0.5×106cfu/ml。聯(lián)合抑菌試驗中組合藥物倍比稀釋方法：采用微量稀釋法，固定待測酰內(nèi)酯類衍生物的終濃度，再按照m07-a9操作步驟依次將組合藥物中的待測抗生素倍比稀釋。以含單一抗生素或單一待測酰內(nèi)酯類衍生物的培養(yǎng)液為陽性對照，不接種細菌的培養(yǎng)物為陰性對照，使培養(yǎng)液最終菌濃約為0.25×106～0.5×106cfu/ml。將培養(yǎng)物置于37℃，培養(yǎng)16～20h后，觀察細菌的生長情況。并判讀藥物單獨的mic以及組合藥物中抗生素的mic，以mic報告之?？咕幬锫?lián)合用藥可以出現(xiàn)4種結果：1)無關作用：兩種藥物聯(lián)合作用的活性等于其單獨活性；2)拈抗作用：兩種藥物聯(lián)合作用顯著低于二者單獨抗菌活性；3)累加作用：兩種藥物聯(lián)合作用時的活性等于兩種單獨抗菌活性之和；4)協(xié)同作用：兩種藥物聯(lián)合作用顯著大于二者單獨作用的總和。判斷其是否有增效作用采用分級抑菌濃度fic(fractionalinhibitoryconcentration)指數(shù)判斷。fic指數(shù)＝(a藥聯(lián)合時mic/a藥單測時mic)+(b藥聯(lián)合時mic/b藥單測mic)fic指數(shù)≤0.5為協(xié)同作用；0.5～1為相加作用；1～2為無關作用；＞2為拈抗作用。5大環(huán)內(nèi)酯類化合物活性結果表1中，化合物sipi-8294結構詳見專利cnl04337826a第24頁；化合物sipi-8555和sipi-8556結構詳見專利cnl04341471第10頁。表1大環(huán)內(nèi)酯類化合物苯唑西林聯(lián)用抗mrsaatcc43300的mic(μg/ml)a以聯(lián)合抑菌試驗計算分級抑菌濃度(fractionalinhibitoryconcentration，fic)指數(shù)。表1中出現(xiàn)的mic值的兩組不同數(shù)據(jù)(例如64/128)，是在實驗中出現(xiàn)的原始數(shù)據(jù)，表示其在mic的測試中符合實驗規(guī)范。在自身抗mrsa活性方面，有20個化合物活性優(yōu)于陽性對照sipi-8294(64μg/ml)，其中7個化合物mic小于16μg/ml，即顯示出一定的單獨抗mrsa活性，最優(yōu)的為zkt-6-c1，達到4/8μg/ml，zkt-5-f、zkt-5-cl和zkt-6-245次之，為8μg/ml。在增效苯唑西林抗mrsa活性方面，聯(lián)用濃度為1-8μg/ml的范圍內(nèi)，除zkt-7-4和zkt-7-35外，其余25個化合物均顯示出不同程度的增效作用，22個化合物活性顯著優(yōu)于sipi-8294，15個化合物顯著優(yōu)于化合物sipi-8555和sipi-8556。其中zkt-2-245和zkt-3-245為最優(yōu)，聯(lián)用濃度為1μg/ml時， 苯唑西林的mic為8/16μg/ml，增效16倍；聯(lián)用濃度為2μg/ml時，苯唑西林的mic為1/2μg/ml，增效128倍；聯(lián)用濃度為4μg/ml時，苯唑西林的mic可降至0.25μg/ml和0.0625μg/ml，增效512-2048倍，是目前所有化合物中在任意一聯(lián)用濃度梯度下增效活性最優(yōu)的化合物。總結不同的聯(lián)用濃度下增效活性最優(yōu)的mic及對應的化合物數(shù)量(表2)：當大環(huán)內(nèi)酯類新化合物與苯唑西林的聯(lián)用濃度為1μg/ml時，苯唑西林mic為8-16μg/ml的化合物有7個；當聯(lián)用濃度為2μg/ml時，苯唑西林mic＜4μg/ml的化合物有10個；當聯(lián)用濃度為4μg/ml時，苯唑西林mic≤1μg/ml的化合物有7個；當聯(lián)用濃度為8μg/ml時，苯唑西林mic＜11μg/ml的化合物有5個。不僅在原有基礎上使增效活性提高了幾個數(shù)量級，而且增效活性優(yōu)異的化合物數(shù)量也顯著增多。表2各聯(lián)用濃度梯度下增效活性最優(yōu)的mic及對應的化合物數(shù)量當前第1頁12