本發(fā)明涉及一種新型絲氨酸衍生物、該等的制備制程、可使用于該等的制程的中間體及含有該化合物的藥物組成物。本發(fā)明還涉及關(guān)于絲氨酸衍生物在治療中的用途，例如作為生長激素促分泌素受體(也被稱為生長激素釋放肽受體或GHSRIa受體)的調(diào)節(jié)劑和/或用于治療和/或預(yù)防癌癥厭食癥/惡病質(zhì)；由抗癌藥物引起的惡病質(zhì)及厭食癥；由抗癌藥物引起的痛覺過敏；COPD(chronic obstructive pulmonary disease：慢性阻塞性肺病)/COPD惡病質(zhì)；肌少癥；飲食失調(diào)癥及神經(jīng)性飲食失調(diào)癥；體重降低抑制；癌癥患者術(shù)后早期恢復(fù)；慢性呼吸道感染；炎癥；IBD(inflammatory bowel disease：炎癥性腸病)；FD(functional-dyspepsia：功能性消化不良)；便秘；糖尿病性胃輕癱及胃輕癱；心臟衰竭；心肌梗塞；糖尿病神經(jīng)病變；帕金森氏癥；多發(fā)性硬化癥；生長激素缺乏癥的診斷及治療；老年人QOL(quality of life：生活質(zhì)量)的改善；脊髓損傷患者的腸道運(yùn)動(dòng)障礙；術(shù)后腸阻塞；及由嗎啡誘導(dǎo)的腸阻塞。

背景技術(shù)：

生長激素釋放肽是用于生長激素(GH)促分泌素受體的內(nèi)源性配體。生長激素釋放肽最初從胃里被純化，是位置3的絲氨酸被n-辛?；?8氨基酸肽類激素。生長激素釋放肽具有較強(qiáng)的GH釋放活性，因此被認(rèn)為在維持GH釋放及能量平衡方面發(fā)揮重要的作用(非專利文獻(xiàn)1)。尤其，認(rèn)為具有較強(qiáng)的食欲刺激活性。此外，已知生長激素釋放肽激動(dòng)劑對癌癥厭食癥/惡病質(zhì)(非專利文獻(xiàn)2、3及4)；由抗癌藥物引起的惡病質(zhì)及厭食癥(非專利文獻(xiàn)4及5)；由抗癌藥物引起的痛覺過敏(非專利文獻(xiàn)5)；COPD/COPD惡病質(zhì)(非專利文獻(xiàn)6及7)；肌少癥(非專利文獻(xiàn)8)；飲食失調(diào)癥及神經(jīng)性飲食失調(diào)癥(非專利文獻(xiàn)9)；體重降低抑制(非專利文獻(xiàn)10)；癌癥患者術(shù)后早期恢復(fù)(非專利文獻(xiàn)11)；慢性呼吸道感染(非專利文獻(xiàn)7)；炎癥(非專利文獻(xiàn)12)；IBD(非專利文獻(xiàn)12)；FD(非專利文獻(xiàn)4)；便秘(非專利文獻(xiàn)9)；糖尿病性胃輕癱及胃輕癱(非專利文獻(xiàn)4及13)；心臟衰竭(非專利文獻(xiàn)14、15及16)；心肌梗塞(非專利文獻(xiàn)14、15及16)；糖尿病神經(jīng)病變(非專利文獻(xiàn)17)；帕金森氏癥(非專利文獻(xiàn)18)；多發(fā)性硬化癥(非專利文獻(xiàn)19)；生長激素缺乏癥的診斷及治療(非專利文獻(xiàn)20)；老年人QOL的改善(非專利文獻(xiàn)20)；脊髓損傷患者的腸道運(yùn)動(dòng)障礙(非專利文獻(xiàn)21)；術(shù)后腸阻塞(非專利文獻(xiàn)4及22)；及由嗎啡誘導(dǎo)的腸阻塞(非專利文獻(xiàn)22)的治療和/或預(yù)防有用。

以往技術(shù)文獻(xiàn)

非專利文獻(xiàn)

{非專利文獻(xiàn)1}Scientifica 2013,Article ID 518909(http：//dx.doi.org/10.1155/2013/518909),25pages,2013

{非專利文獻(xiàn)2}The Oncologist 12,594-600,2007.

{非專利文獻(xiàn)3}Support Care Cancer 21,2409-2415,2013

{非專利文獻(xiàn)4}Neurogastroenterol Motil 20,177-184,2008

{非專利文獻(xiàn)5}Endocrinology 149,455-460,2008

{非專利文獻(xiàn)6}BMC Pulmonary Medicine 13,37-46,2013

{非專利文獻(xiàn)7}Methods in Enzymology 514,399-407,2012

{非專利文獻(xiàn)8}Arch Med Sci 9,166-171,2013

{非專利文獻(xiàn)9}Frontiers in Endocrinology 4,1-27,2013

{非專利文獻(xiàn)10}Ann intern Med 149,601-611,2008

{非專利文獻(xiàn)11}Gastric Cancer 17,200-205,2014

{非專利文獻(xiàn)12}Mol Nutr Food Res 52,855-866,2008

{非專利文獻(xiàn)13}Neurogastroenterol Motil 25,e140-e150,2013

{非專利文獻(xiàn)14}Journal of Cardiology 59,8-13,2012

{非專利文獻(xiàn)15}Curr Opin Clin Nutr Metab Care 16,619-624,2013

{非專利文獻(xiàn)16}Endocrinology 153,2436-2443,2012

{非專利文獻(xiàn)17}Biochemical and Biophysical Research Communications 389,405-408,2009

{非專利文獻(xiàn)18}Stereotact Funct Neurosurg 90,104-112,2012

{非專利文獻(xiàn)19}Ir J neurol 12,60-65,2013

{非專利文獻(xiàn)20}Drug Discovery Today 4,497-506,1999

{非專利文獻(xiàn)21}Neurogastroenterol Motil 21,71-77,2009

{非專利文獻(xiàn)22}Peptides 26,1598-1601,2005

發(fā)明的概要

發(fā)明要解決的技術(shù)課題

因此，希望找到調(diào)節(jié)生長激素釋放肽受體活性的新化合物。

用于解決技術(shù)課題的手段

[1]本發(fā)明提供一種下述化學(xué)式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽：

{化學(xué)式1}

其中：

A為芳基；優(yōu)選芳基為苯基、萘基或吡啶基；進(jìn)一步優(yōu)選芳基為苯基或吡啶基；更進(jìn)一步優(yōu)選A為苯基、2-吡啶基或3-吡啶基；

X為CH或N；

R¹獨(dú)立地選自由(1)氫、(2)鹵素、(3)C_1-6烷基，其中，該烷基未被取代或被一個(gè)以上的獨(dú)立地選自鹵素、羥基、-O-C_1-6烷基、氨基、C_1-6烷基氨基及(C_1-6烷基)(C_1-6烷基)N-中的取代基取代、(4)-O-C_1-6烷基，其中，該烷基未被取代或被一個(gè)以上的獨(dú)立地選自鹵素、羥基、-O-C_1-6烷基、氨基、C_1-6烷基氨基及(C_1-6烷基)(C_1-6烷基)N-中的取代基取代、(5)-CN及(6)-SO₂C_1-6烷基所構(gòu)成的群組；優(yōu)選R¹獨(dú)立地選自由以下所構(gòu)成的群組；(1)氫、(2)鹵素、(3)三氟甲基、(4)三氟甲氧基及(5)-CN；進(jìn)一步優(yōu)選R¹獨(dú)立地選自由以下所構(gòu)成的群組：(1)氫、(2)-F、(3)-Cl、(4)三氟甲基、(5)三氟甲氧基及(6)-CN；

R²為氫或C_1-6烷基，其中，該烷基未被取代或被一個(gè)以上的獨(dú)立地選自鹵素、羥基、-O-C_1-6烷基、氨基、C_1-6烷基氨基及(C_1-6烷基)(C_1-6烷基)N-中的取代基取代；優(yōu)選R²為C_1-6烷基，其中，該烷基未被取代或被1至3個(gè)獨(dú)立地選自鹵素中的取代基取代；進(jìn)一步優(yōu)選R²為甲基或二氟乙基；更進(jìn)一步優(yōu)選R²為甲基或2,2-二氟乙基；

p為1、2、3,或4；當(dāng)p為2以上時(shí)，R¹可相同或不同；優(yōu)選p為1或2。

[2]本發(fā)明提供[1]所述的上述化學(xué)式(I)所表示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中：

A為苯基、萘基或吡啶基。

[3]本發(fā)明提供[1]或[2]所述的上述化學(xué)式(I)所表示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中：

A為苯基、萘基或吡啶基；

R²為氫或C₁-C₆烷基，其中，該烷基未被取代或被1至3個(gè)獨(dú)立地選自鹵素中的取代基取代。

[4]本發(fā)明提供[1]至[3]中任一項(xiàng)所述的上述化學(xué)式(I)所表示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中：

A為苯基、萘基或吡啶基；

R¹獨(dú)立地選自由以下所構(gòu)成的群組；(1)氫、(2)鹵素、(3)三氟甲基、(4)三氟甲氧基、(5)-CN及(6)-SO₂C_1-6烷基；

R²為C_1-6烷基，其中，該烷基未被取代或被1至3個(gè)獨(dú)立地選自鹵素中的取代基取代。

[5]本發(fā)明提供[1]至[4]中任一項(xiàng)所述的上述化學(xué)式(I)所表示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中：

A為苯基、萘基或吡啶基；

R¹獨(dú)立地選自由以下所構(gòu)成的群組；(1)氫、(2)-F,(3)-Cl(4)三氟甲基、(5)三氟甲氧基、(6)-CN及(7)-SO₂CH₃；

R²為甲基或二氟乙基。

[6]本發(fā)明提供[1]至[5]中任一項(xiàng)所述的上述化學(xué)式(I)所表示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中：

A為苯基、2-吡啶基或3-吡啶基；

R¹獨(dú)立地選自由以下所構(gòu)成的群組；(1)氫、(2)-F、(3)-Cl、(4)三氟甲基、(5)三氟甲氧基及(6)-CN；

R²為甲基或2,2-二氟乙基。

[7]本發(fā)明的合適的個(gè)別化合物如下：

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2,4-二氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,5-二氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-(2-(三氟甲基)苯氧基)丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,4-二氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-甲氧基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(萘-2-基氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(萘-1-基氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-((5-氯吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氰基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-(吡啶-2-基氧基)丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-((5-氟吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氰基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-3-(2-氯苯氧基)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-3-(3-氯苯氧基)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-甲氧基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；及

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

或其藥學(xué)上可接受的鹽。

[8]本發(fā)明的更合適的個(gè)別化合物如下：

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2,4-二氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,4-二氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-甲氧基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氰基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-3-(2-氯苯氧基)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-甲氧基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

2-氨基-N-((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；及

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺；

或其藥學(xué)上可接受的鹽。

[9]本發(fā)明提供一種藥物組成物，其包含[1]至[8]中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽及藥學(xué)上可接受的載體。

[10]本發(fā)明提供[9]所述的藥物組成物，其還包含另一藥理活性劑。

[11]本發(fā)明提供治療患有由生長激素釋放肽受體介導(dǎo)的病癥或紊亂的包括人在內(nèi)的動(dòng)物的方法，其包含將有效量的[1]至[8]中任一項(xiàng)所述的化學(xué)式(I)的化合物或藥學(xué)上可接受的鹽給藥于前述受治者。

[12]本發(fā)明提供[11]所述的方法，其中，前述病癥或紊亂選自由以下所構(gòu)成的群組：癌癥厭食癥/惡病質(zhì)；由抗癌藥物引起的惡病質(zhì)及厭食癥；由抗癌藥物引起的痛覺過敏；COPD/COPD惡病質(zhì)；肌少癥；飲食失調(diào)癥及神經(jīng)性飲食失調(diào)癥；體重降低抑制；癌癥患者術(shù)后早期恢復(fù)；慢性呼吸道感染；炎癥；IBD；FD；便秘；糖尿病性胃輕癱及胃輕癱；心臟衰竭；心肌梗塞；糖尿病神經(jīng)病變；帕金森氏癥；多發(fā)性硬化癥；生長激素缺乏癥的診斷及治療；老年人QOL的改善；脊髓損傷患者的腸道運(yùn)動(dòng)障礙；術(shù)后腸阻塞；及由嗎啡誘導(dǎo)的腸阻塞；以及其組合。

[13]本發(fā)明提供[1]至[8]中任一項(xiàng)所述的化合物或藥學(xué)上可接受的鹽或其組成物在制造用于治療由生長激素釋放肽受體介導(dǎo)的病癥或紊亂的藥物中的用途。

[14]本發(fā)明提供[13]所述的用途，其中，前述病癥或紊亂選自由以下所構(gòu)成的群組：癌癥厭食癥/惡病質(zhì)；由抗癌藥物引起的惡病質(zhì)及厭食癥；由抗癌藥物引起的痛覺過敏；COPD/COPD惡病質(zhì)；肌少癥；飲食失調(diào)癥及神經(jīng)性飲食失調(diào)癥；體重降低抑制；癌癥患者術(shù)后早期恢復(fù)；慢性呼吸道感染；炎癥；IBD；FD；便秘；糖尿病性胃輕癱及胃輕癱；心臟衰竭；心肌梗塞；糖尿病神經(jīng)病變；帕金森氏癥；多發(fā)性硬化癥；生長激素缺乏癥的診斷及治療；老年人QOL的改善；脊髓損傷患者的腸道運(yùn)動(dòng)障礙；術(shù)后腸阻塞；及由嗎啡誘導(dǎo)的腸阻塞；以及其組合。

[15]本發(fā)明提供[1]至[8]中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其用于治療由生長激素釋放肽受體介導(dǎo)的病癥或紊亂。

[16]本發(fā)明提供一種藥物組成物的制備制程，其包含將[1]至[8]中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽與藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑進(jìn)行混合。

[17]本發(fā)明提供一種在有意識(shí)的禁食小鼠中生長激素(GH)反應(yīng)的測定過程，其包含將測試化合物口服給藥于BALB/c小鼠。

[18]本發(fā)明提供一種在大鼠中順鉑-誘導(dǎo)的惡病質(zhì)/厭食癥的測定過程，其包含在傍晚將測試化合物及順鉑給藥于處理得當(dāng)?shù)拇笫蟆?/p>

[19]本發(fā)明提供一種在承載有AH-130細(xì)胞的大鼠中惡病質(zhì)(體重降低及肌肉萎縮)的測定過程，其包含將測試化合物口服給藥于腹膜內(nèi)注射了大于1×10⁸的AH-130腹水肝癌細(xì)胞的未成熟的雄性大鼠。

發(fā)明效果

本發(fā)明的絲氨酸衍生物是生長激素釋放肽受體激動(dòng)劑，并且具有多種治療應(yīng)用，特別是用于治療癌癥厭食癥/惡病質(zhì)；由抗癌藥物引起的惡病質(zhì)及厭食癥；由抗癌藥物引起的痛覺過敏；COPD/COPD惡病質(zhì)；肌少癥；飲食失調(diào)癥及神經(jīng)性飲食失調(diào)癥；體重降低抑制；癌癥患者術(shù)后早期恢復(fù)；慢性呼吸道感染；炎癥；IBD；FD；便秘；糖尿病性胃輕癱及胃輕癱；心臟衰竭；心肌梗塞；糖尿病神經(jīng)病變；帕金森氏癥；多發(fā)性硬化癥；生長激素缺乏癥的診斷及治療；老年人QOL的改善；脊髓損傷患者的腸道運(yùn)動(dòng)障礙；術(shù)后腸阻塞；及由嗎啡誘導(dǎo)的腸阻塞。

如下述方案I所說明，本發(fā)明的特征在于位于絲氨酸衍生物的中央部分的絲氨酸部分。Pfizer Inc.于WO97/24369中揭示了生長激素釋放肽受體激動(dòng)劑，其被視為結(jié)構(gòu)上接近的先前技術(shù)。最接近的化合物被認(rèn)為是WO97/24369中的實(shí)施例183的化合物，其是方案II中所說明的高絲氨酸衍生物。與高絲氨酸的例子相比，本發(fā)明的絲氨酸衍生物對生長激素釋放肽受體顯現(xiàn)出更好的活性。如本說明書的實(shí)驗(yàn)中的表7所示，從高絲氨酸衍生物去除一個(gè)碳會(huì)使該活性急劇增加。

{化學(xué)式2}

方案I：絲氨酸衍生物

{化學(xué)式3}

方案II：高絲氨酸衍生物

相對于本領(lǐng)域中公開的其他化合物，本發(fā)明的化合物可顯示出更少的毒性、良好的吸收與分布、良好的溶解度、更少的血漿蛋白質(zhì)結(jié)合、更少的藥物-藥物相互作用、良好的代謝穩(wěn)定性、HERG通道中的減少的抑制活性和/或減少的QT延長。

具體實(shí)施方式

如同本領(lǐng)域技術(shù)人員領(lǐng)會(huì)到的那樣，本申請中所使用的術(shù)語“鹵素”或“鹵代”意在包括氟代、氯代、溴代及碘代。類似地，如在C_1-6中所示，1-6定義為用于認(rèn)定具有1、2、3、4、5或6的個(gè)數(shù)?；谏鲜龆x，如在C_1-6烷基中所示，C_1-6定義為用于認(rèn)定烷基基團(tuán)具有1、2、3、4、5或6個(gè)碳原子。被指定為用取代基獨(dú)立地取代的基團(tuán)可獨(dú)立地被多個(gè)那樣的取代基取代。

本申請中所使用的術(shù)語“烷基”是指直鏈飽和一價(jià)烴基或分支的飽和一價(jià)烴基，例如指甲基、乙基、丙基、2-丙基、丁基(包括所有異構(gòu)形態(tài))、戊基(包括所有異構(gòu)形態(tài))等。

本申請中所使用的術(shù)語“芳基”是指可含有選自O(shè)、N及S中的0至4個(gè)雜原子的單碳環(huán)或雙碳環(huán)或者單雜環(huán)或雙雜環(huán)，但并不限定于苯基、萘基、苯并呋喃基、苯并呋吖基、苯并咪唑啉酮基、苯并咪唑基、苯并異噻唑基、苯并異惡唑基、苯并噻二唑基、苯并噻唑基、苯并惡二唑基、苯并惡唑啉基、苯并惡唑基、苯并噻吩基、苯并三唑基、咔唑基、咔啉基、色滿基、噌啉基、2,3-二氧代吲哚基、呋喃基、呋吖基、呋喃并吡啶基、呋喃并吡咯基、咪唑基、咪唑并吡嗪基、咪唑并吡啶基、咪唑并嘧啶基、咪唑并噻唑基、吲唑基、吲哚嗪基、吲哚啉基、吲哚基、異苯并呋喃基、異色滿基、異吲哚基、異喹啉基、異惡唑并吡啶基、異惡唑啉基、異惡唑基、異噻唑基、萘啶基、惡唑啉基、惡二唑基、惡唑基、氧雜環(huán)丁烷基、2-氧代吲哚基、酞嗪基、吡唑并吡啶基、吡唑并嘧啶基、吡唑基、吡嗪基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡啶并嘧啶基、吡咯并吡啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹惡啉基、四唑并吡啶基、四唑基、噻二唑基(thiadiazolyl)、噻唑基、噻吩基、噻吩并吡嗪基、噻吩并吡唑基、噻吩并吡啶基、噻吩并吡咯基、三唑并嘧啶基、三唑基、4-氧代-1,4-二氫喹啉基、2-氧代-1,2-二氫吡啶基、4-氧代-1,4-二氫嘧啶基、2-氧代-1,2-二氫喹啉基、4-氧代-4H-吡啶并[1,2-a]嘧啶基、4-氧代-1,4-二氫-1,8-萘啶基及該等的N-氧化物。

本申請中所使用的術(shù)語“治療”是指緩解指定的病癥、消除或減輕病癥的病狀、延遲或消除病癥的進(jìn)展、以及預(yù)防或遲緩有病史的患者或受治者中該病癥的復(fù)發(fā)。

本申請中所使用的術(shù)語“傍晚”是指約16:00至24:00，優(yōu)選約17:00至20:00。

如果沒有特別提及，本申請中所使用的冠詞“a”或“an”是指其所提及的對象的單數(shù)形和復(fù)數(shù)形。

本申請中所使用的術(shù)語“動(dòng)物”包括哺乳動(dòng)物對象或非哺乳動(dòng)物對象。合適的哺乳動(dòng)物對象的例子可包括但并不限定于人、嚙齒類、伴侶動(dòng)物、家畜及靈長類。合適的嚙齒類可包括但并不限定于小鼠、大鼠、地鼠、沙鼠及豚鼠。合適的伴侶動(dòng)物可包括但并不限定于貓、狗、兔及雪貂。合適的家畜可包括但并不限定于馬、山羊，羊、豬、牛、美洲駝及羊駝。合適的靈長類可包括但并不限定于黑猩猩、狐猴、獼猴、狨猴、蜘蛛猴、松鼠猴及長尾猴。合適的非哺乳動(dòng)物對象的例子可包括但并不限定于鳥類、爬蟲類、兩棲類及魚類。鳥類的非限制性例子包括雞、火雞、鴨及鵝。優(yōu)選哺乳動(dòng)物對象為人。

本發(fā)明的化合物的鹽也包含于本發(fā)明的范疇內(nèi)。由于該等的藥學(xué)上的使用潛力，優(yōu)選化學(xué)式(I)的化合物的鹽為藥學(xué)上可接受。合適的藥學(xué)上可接受的鹽可包括酸加成鹽。藥學(xué)上可接受的酸加成鹽可通過化學(xué)式(I)的化合物與合適的無機(jī)酸或有機(jī)酸(諸如氫溴酸、鹽酸、氫碘酸、硫酸、硝酸、磷酸、對甲苯磺酸、甲磺酸或萘磺酸)任意地在諸如有機(jī)溶劑之類的合適的溶劑中反應(yīng)形成，以獲得通常通過例如結(jié)晶及過濾而分離的鹽。化學(xué)式(I)的化合物的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽的例子包括HCI、HBr、HI、硫酸鹽或硫酸氫鹽、硝酸鹽、磷酸鹽或磷酸氫鹽、乙酸鹽、苯甲酸鹽、琥珀酸鹽、糖酸鹽、反丁烯二酸鹽、順丁烯二酸鹽、乳酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、葡糖酸鹽、樟腦磺酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽及雙羥萘酸鹽。關(guān)于合適的藥學(xué)鹽，請查看文獻(xiàn)[Berge et al,J.Pharm,Sci,66,1-19,1977；P L Gould,International Journal of Pharmaceutics,33(1986),201-217]；及[Bighley et al,Encyclopedia of Pharmaceutical Technology,Marcel Dekker Inc,New York 1996,Volume 13,page 453-497]。例如三氟乙酸鹽等藥學(xué)上不可接受的其他鹽可對本發(fā)明的化合物的制備有用，該等構(gòu)成本發(fā)明的另一方面。本發(fā)明在其范疇內(nèi)包括化學(xué)式(I)的化合物的鹽的所有可能的化學(xué)計(jì)量及非化學(xué)計(jì)量形態(tài)。

有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)人員將理解很多有機(jī)化合物能夠與溶劑形成錯(cuò)合物，該等有機(jī)化合物在溶劑內(nèi)反應(yīng)或從溶劑中沉淀或結(jié)晶化。該等錯(cuò)合物被稱為“溶劑化物”。例如，含水的錯(cuò)合物被稱為“水合物”。本發(fā)明的化合物的溶劑化物在本發(fā)明范疇內(nèi)。

具有非藥學(xué)上可接受的抗衡離子或相關(guān)溶劑的鹽及溶劑化物包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)，例如在制備化學(xué)式(I)的其他化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽時(shí)用作中間體。

化學(xué)式(I)的化合物可以以晶體形態(tài)具備多形體，其包括在本發(fā)明的范疇內(nèi)。

另外，化學(xué)式(I)的化合物的所謂的“前體藥物”也包括在本發(fā)明的范疇內(nèi)。因此，其本身可能幾乎或完全不具有藥理活性的化學(xué)式(I)的化合物的特定衍生物當(dāng)給藥于體內(nèi)或體表時(shí)，例如可通過水解或水解性斷裂而轉(zhuǎn)化為具有目標(biāo)活性的化學(xué)式(I)的化合物。該種衍生物以“前體藥物”提及。關(guān)于前體藥物用途的進(jìn)一步的信息可查看下述文獻(xiàn)：Pro-drugs as Novel Delivery Systems,Vol.14,ACS Symposium Series(T Higuchi and W Stella)and Bioreversible Carriers in Drug Design,Pergamon Press,1987(ed.E B Roche,American Pharmaceutical Association)。

依本發(fā)明的前體藥物可通過例如將化學(xué)式(I)的化合物中存在的合適的官能基作為例如文獻(xiàn)：Design of Prodrugs by H.Bundgaard(Elsevier，1985)中所記載的“前體部分(pro-moiety)”，由本領(lǐng)域技術(shù)人員周知的特定部分取代而進(jìn)行制備。依本發(fā)明的前體藥物的一部分例子包括以下：

(i)當(dāng)化學(xué)式(I)的化合物中含有醇官能基(-OH)時(shí)，羥基被在體內(nèi)可轉(zhuǎn)化為羥基的部分取代的化合物。前述在體內(nèi)可轉(zhuǎn)化為羥基的部分是指，例如通過水解和/或酶例如酯酶在體內(nèi)可變換為羥基的部分。前述部分的例子包括但并不限定于在體內(nèi)可容易水解的酯基及醚基。優(yōu)選用酰氧基烷基、1-(烷氧基羰氧基)烷基、酞基及酰氧基烷氧基羰基(例如新戊酰氧基甲氧基羰基)取代羥基的氫的部分；及

(ii)當(dāng)化學(xué)式(I)的化合物中含有氨基時(shí)，將通過與合適的酸性鹵化物或合適的酸酐的反應(yīng)而制備的吡咯并吡啶酮衍生物作為前體藥物來舉例說明。作為前體藥物，尤其優(yōu)選吡咯并吡啶酮衍生物為-NHCO(CH₂)₂OCH₃、-NHCOCH(NH₂)CH₃等。

依前述實(shí)施例及其他前體藥物類型的實(shí)施例的替換基團(tuán)的進(jìn)一步的實(shí)施例可查看上述參考文獻(xiàn)。

此外，化學(xué)式(I)的化合物能夠以前體藥物的形式給藥。本申請中所使用的術(shù)語即化學(xué)式(I)的化合物的“前體藥物”是給藥于患者時(shí)最終在體內(nèi)釋放化學(xué)式(I)的化合物的化合物功能性衍生物。當(dāng)以前體藥物的形式給藥化學(xué)式(I)的化合物時(shí)，本領(lǐng)域技術(shù)人員可實(shí)施下列中的一種以上：(a)變更前述化合物的體內(nèi)起效時(shí)間；(b)變更前述化合物的體內(nèi)作用持續(xù)時(shí)間；(c)變更前述化合物的體內(nèi)輸送或分布；(d)變更前述化合物的體內(nèi)溶解度；以及(e)克服前述化合物所面臨的副作用或其他難點(diǎn)。用于制備前體藥物的典型的功能性衍生物包括在體內(nèi)以化學(xué)形態(tài)或酶的形態(tài)裂解的化合物的變形后的形態(tài)。包括磷酸鹽、酰胺、酯、硫代酯、碳酸鹽及氨基甲酸鹽的制備的該等變形后的形態(tài)對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是周知的。

特定的化學(xué)式(I)的化合物可存在一個(gè)以上的手性碳原子。在該情況下，化學(xué)式(I)的化合物作為立體異構(gòu)物存在。本發(fā)明擴(kuò)展至包括對映異構(gòu)物、非對映異構(gòu)物及其混合物例如外消旋體在內(nèi)的諸如化學(xué)式(I)的化合物的立體異構(gòu)物形態(tài)之類的所有光學(xué)異構(gòu)物。不同的立體異構(gòu)物形態(tài)可通過常規(guī)方法相互分離或分解，或者任意給定的異構(gòu)物可通過常規(guī)的立體選擇性或非對稱合成來得到。

本申請中，特定化合物可以以多種互變異構(gòu)物形態(tài)存在，且應(yīng)該理解為本發(fā)明包括所有該種互變異構(gòu)物形態(tài)。

本發(fā)明還包括本發(fā)明的化合物的所有合適的同位素變體(isotopic variation)。本發(fā)明的同位素變體被定義為至少一個(gè)原子被具有相同的原子數(shù)但原子質(zhì)量與自然界中常見的原子的原子質(zhì)量不同的原子替代?？蓳饺胗诒景l(fā)明的化合物中的同位素的例子分別包括諸如²H、³H、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁷O、¹⁸O、³¹P、³²P、³⁵S、¹⁸F及³⁶Cl之類的氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟及氯的同位素。本發(fā)明的特定同位素變體，例如摻入了諸如³H或¹⁴C之類的放射性同位素對藥物和/或基質(zhì)組織分布研究有用。從制備的容易性及可檢測性的觀點(diǎn)考慮，尤其優(yōu)選氚(即³H)及碳-14(即¹⁴C)的同位素。并且，由諸如重氫(即²H)之類的同位素進(jìn)行的取代由于更好的代謝穩(wěn)定性,可提供在特定治療方面的優(yōu)勢，因此有些情況可以優(yōu)選例如增加的體內(nèi)半衰期或減少的劑量的需要。本發(fā)明的化合物的同位素變體一般能夠通過諸如解說性方法之類的常規(guī)程序來進(jìn)行制備，或者能夠通過在后述的化合物中所記載的使用適當(dāng)?shù)耐凰刈凅w的合適的制劑來進(jìn)行制備。

本發(fā)明的另一實(shí)施形態(tài)還提供化學(xué)式(I)的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，其用于醫(yī)學(xué)療法，尤其用于治療由生長激素釋放肽受體介導(dǎo)的紊亂。

本發(fā)明的另一實(shí)施形態(tài)是有關(guān)用于預(yù)防和/或治療由生長激素釋放肽受體介導(dǎo)的紊亂的生長激素釋放肽受體活性的調(diào)節(jié)方法。

本發(fā)明的另一實(shí)施形態(tài)提供治療患有由生長激素釋放肽受體介導(dǎo)的紊亂的包括人在內(nèi)的動(dòng)物的方法，其包括將有效量的化學(xué)式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物給藥于前述受治者。該種治療包含給藥治療有效量的包括其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的化學(xué)式(I)的化合物的步驟。該種治療也可包含給藥治療有效量的含有包括其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的化學(xué)式(I)的化合物的藥物組成物的步驟。

本發(fā)明的另一實(shí)施形態(tài)提供化學(xué)式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物在制備用于治療由生長激素釋放肽受體介導(dǎo)的紊亂的藥物中的用途。

在生長激素釋放肽受體中，內(nèi)源性配體的生長激素釋放肽的作用顯示為有效的生長激素釋放活性、食欲刺激、胃運(yùn)動(dòng)的促進(jìn)及酸分泌、積極的心血管功效及對骨形成的直接作用。因此，生長激素釋放肽受體調(diào)節(jié)劑在生長激素不足、飲食失調(diào)癥、胃腸道疾病、心血管疾病、骨質(zhì)疏松癥、老化及分解代謝狀態(tài)或慢性消耗性綜合癥的治療中可獲得有益的效果(Kojima and Kangawa,Nature Clinical Practice,Feb 2006,VoI.2,No.2,80-88)。生長激素釋放肽受體調(diào)節(jié)劑在睡眼障礙的治療中也可獲得有益的效果(Brain Research,1088(2006)131-140)。

與生長激素釋放肽受體有關(guān)、因此可由生長激素釋放肽受體介導(dǎo)的、生長激素釋放肽受體調(diào)節(jié)劑可獲得有益的效果的特定紊亂包括肥胖癥及肥胖癥相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)因素。并且，肥胖癥相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)因素包括糖尿病、糖尿病相關(guān)并發(fā)癥、代謝綜合癥、心血管疾病(包括動(dòng)脈粥樣硬化及異常血脂癥)，但并不限定于此。

在由生長激素釋放肽受體介導(dǎo)的其他疾病和/或病癥中，生長激素釋放肽包括以下：生長激素不足狀態(tài)的治療、肌肉質(zhì)量的增加、骨密度的增加、男性及女性治療性性功能障礙的治療、促進(jìn)體重增加、促進(jìn)體重維持、促進(jìn)食欲增加(例如促進(jìn)體重增加、體重維持或食欲增加對具有伴有體重降低的紊亂的患者或治療中的患者有用)。伴有體重降低的疾病或紊亂的例子包括厭食癥、暴食癥、癌癥惡病質(zhì)、AIDS、消耗癥、惡病質(zhì)及虛弱老年人的消耗癥。伴有體重降低的治療的例子包括化療法、放射線療法、臨時(shí)或永久性固定化及透析。

疾病或病癥進(jìn)一步包括睡眼障礙、充血性心臟衰竭、代謝障礙、記憶功能改善、乳腺癌、甲狀腺癌、改善缺血性神經(jīng)或肌肉損傷。

本發(fā)明的化合物通過調(diào)節(jié)生長激素釋放肽受體的活性來發(fā)揮功能。該等可通過作為激動(dòng)劑、部分激動(dòng)劑、反向激動(dòng)劑、拮抗劑或部分拮抗劑發(fā)揮作用而使受體活化/非活化。

飲食失調(diào)癥包括：神經(jīng)性厭食癥(307.1)，包括亞型限制型(Restricting Type)及暴食/清除型(Binge-Eating/Purging Type)；神經(jīng)性暴食癥(307.51)，包括亞型清除型及非清除型；肥胖癥；強(qiáng)迫性飲食失調(diào)癥；暴食癥；及另行指定的飲食失調(diào)癥(307.50)[上述所列疾病后面的括號內(nèi)的數(shù)字是指Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders，第4版，由American Psychiatric Association(DSM-IV)出版和/或the International Classification of Diseases，第10版(ICD-10)中的分類代碼]。

本發(fā)明的另一實(shí)施形態(tài)提供化學(xué)式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物在制備用于治療飲食失調(diào)癥的藥物中的用途。

本發(fā)明的另一實(shí)施形態(tài)提供治療患有飲食失調(diào)癥的包括人在內(nèi)的動(dòng)物的方法，其包括將有效量的化學(xué)式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物給藥于前述受治者。

胃腸道疾病包括胃腸阻塞、胃潰瘍及諸如克羅恩氏病及潰瘍性結(jié)腸炎之類的炎癥性腸病。本發(fā)明的化合物也有可能對與胃食管反流和/或消化不良有關(guān)的癥狀的緩解、有或沒有食欲-/代謝相關(guān)的惡病質(zhì)的治療有用，并且在麻痹性腸阻塞或假梗阻及諸如便秘型大腸急躁癥之類的與便秘有關(guān)的病癥的治療中有用。

心血管疾病包括心臟衰竭及擴(kuò)張型心肌病。

分解代謝狀態(tài)或慢性消耗性綜合癥可在術(shù)后患者中出現(xiàn)，并且包括AIDS-相關(guān)消耗性綜合癥及諸如癌癥惡病質(zhì)之類的癌癥相關(guān)消耗性綜合癥。

雖然可以在治療中使用治療有效量的化學(xué)式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物作為化學(xué)原料而給藥，但也可將活性成分作為藥物組成物。因此，本發(fā)明的另一實(shí)施形態(tài)中提供在一種以上的藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑的混合物中含有化學(xué)式(I)的化合物或藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物的藥物組成物。載體、稀釋劑或賦形劑必須與制劑的其他成分相容，且對其接受者無害。本發(fā)明的另一實(shí)施形態(tài)還提供包含將化學(xué)式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物與一種以上的藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑進(jìn)行混合的藥物組成物的制備制程。

本發(fā)明的藥物組成物可被配制成通過任何適當(dāng)?shù)耐緩嚼缈诜?包括口腔或舌下)、直腸、鼻腔、局部(包括口腔、舌下或經(jīng)皮)、陰道或非口服(包括皮下、肌肉內(nèi)、靜脈內(nèi)或皮內(nèi))途徑給藥。因此，本發(fā)明的藥物組成物可被配制為例如片劑、膠囊、粉末、顆粒、錠劑、霜?jiǎng)┗蛞后w制劑，諸如口服或無菌非口服溶液或懸浮液。這樣的藥學(xué)制劑可通過藥學(xué)領(lǐng)域中周知的任何方法進(jìn)行制備，例如可通過將活性成分與載體或賦形劑結(jié)合來進(jìn)行制備。

用于口服給藥的片劑及膠囊可以是單位劑量型，且可含有：諸如結(jié)合劑，例如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨糖醇、黃芪膠、或聚乙烯吡咯烷酮；填充劑，例如乳糖、糖、玉米淀粉、磷酸鈣、山梨糖醇或甘氨酸；壓片潤滑劑，例如硬脂酸鎂、滑石、聚乙二醇或二氧化硅；崩解劑，例如馬鈴薯淀粉；或可接受的潤濕劑，諸如十二烷基硫酸鈉之類的常規(guī)賦形劑。片劑可按照藥學(xué)實(shí)踐中周知的方法進(jìn)行包衣?？诜后w制劑可以是例如水性或油性懸浮液、溶液、乳液、糖漿或酏劑的形態(tài)，或者是可在使用前用于與水或其他合適的媒介物進(jìn)行重構(gòu)(reconstitution)的干燥產(chǎn)物。該種液體制劑可含有常規(guī)添加劑：諸如懸浮劑，例如山梨糖醇、甲基纖維素、葡萄糖漿、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或氫化食用脂肪；乳化劑，例如卵磷脂、脫水山梨醇單油酸酯或阿拉伯膠；非水性媒介物(可包括食用油)，例如杏仁油、諸如甘油、丙二醇或乙醇之類的油脂；防腐劑，例如甲基或丙基對羥基苯甲酸或山梨酸；及根據(jù)需要可含有常規(guī)的調(diào)味劑或著色劑。

本發(fā)明的局部制劑可呈現(xiàn)為例如軟膏、霜?jiǎng)┗蛉橐骸⒀鄹嗉把刍蚨蝿?、浸漬敷料(impregnated dressing)及氣溶膠，且可含有諸如防腐劑、幫助藥物浸透的溶劑、軟膏及霜?jiǎng)┬螒B(tài)的潤膚劑之類的適當(dāng)?shù)某Ｒ?guī)添加劑。制劑也可含有諸如霜?jiǎng)┗蜍浉嗷|(zhì)及乳液用乙醇或油醇之類的相容的常規(guī)載體。該種載體可以在制劑中以約1％至高達(dá)約98％的含有量存在。更通常地，該等會(huì)形成高達(dá)約80％的制劑。

適合于非口服給藥的藥學(xué)制劑包括：水性及非水性無菌注射液，其可包含抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑及使給藥對象的血液與制劑具有等張性的溶質(zhì)等；及水性或非水性無菌懸浮液，其可包含懸浮劑及增稠劑。制劑可以以例如密封安瓿及小瓶等單位劑量或多劑量容器提供，并且可以以在使用前僅需要立即添加例如注射用水等無菌液體載體的冷凍干燥(凍干)的狀態(tài)儲(chǔ)存。臨時(shí)注射液和懸浮液可由無菌粉末、顆粒及片劑進(jìn)行制備。

用于直腸給藥的藥學(xué)制劑可以以栓劑或灌腸劑的形式提供。

載體為固體的適合于鼻腔給藥的藥學(xué)制劑可包含具有例如20至500微米范圍的粒子尺寸的較粗的粉末，該粉末采取以在鼻子靠近容器的狀態(tài)下例如以通過鼻道的迅速吸入的鼻煙的形式給藥。載體為液體的合適的制劑以包含活性成分的水性或油性溶液鼻噴霧劑或鼻滴劑的形式給藥。

適合于吸入給藥的藥學(xué)制劑包括微細(xì)顆粒的粉塵或氣霧，其可通過例如劑量加壓氣溶膠、噴霧器或吸入器等各種計(jì)量裝置來生成。

適合于陰道給藥的藥學(xué)制劑可以以子宮托、衛(wèi)生棉條(tampons)、霜?jiǎng)?、凝膠、糊劑、泡沫或噴霧制劑的形式提供。

應(yīng)當(dāng)理解，除了上述提及的成分以外，根據(jù)所需制劑類型,該制劑還可包含在領(lǐng)域中常見的其他的制劑。

化學(xué)式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的治療有效量取決于包括例如人或其他動(dòng)物的年齡及體重、需要治療的確切病癥及其嚴(yán)重程度、制劑的性質(zhì)、以及給藥途徑等在內(nèi)的許多因素，并且最終由護(hù)理醫(yī)師或獸醫(yī)做出判斷。但是，用于治療由生長激素釋放肽受體介導(dǎo)的紊亂的化學(xué)式(I)的化合物的有效量一般在一天0.1至100mg/kg的范圍內(nèi)(對象(動(dòng)物)的體重)，更通常地在一天1至10mg/kg(體重)的范圍內(nèi)。因此，對于70kg的成年動(dòng)物，一天的實(shí)際用量通常是70至700mg，并且，該用量可以一天單一劑量或者更通常地以一天的總用量相同的方式一天多次劑量(例如兩次、三次、四次、五次或六次)地提供。藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物的有效量可按照化學(xué)式(I)的化合物其本身的有效量的比例來確定。

用于在本發(fā)明中使用的的化學(xué)式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物可以與一種以上的其他治療劑組合使用。因此，在另一實(shí)施形態(tài)中，本發(fā)明提供化學(xué)式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物與另外的治療劑(抗肥胖劑可成為一例)的組合。在又一實(shí)施形態(tài)中，本發(fā)明還提供包含化學(xué)式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物與另一治療劑的組合在治療由生長激素釋放肽受體介導(dǎo)的紊亂中的用途。

當(dāng)化學(xué)式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物與一種以上的其他治療劑組合使用時(shí)，該化合物可以依次或同時(shí)通過任何方便的途徑給藥。

上面提及的組合為了方便使用，可以以藥學(xué)制劑的形式提供，因此包含如上所定義的組合的藥學(xué)制劑最佳地與藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑藥學(xué)制劑一起構(gòu)成本發(fā)明的另一形態(tài)。該種組成物的各構(gòu)成要素可以以分開的或結(jié)合的藥物制劑依次或同時(shí)給藥。

當(dāng)在結(jié)合于同一制劑中時(shí)，可以理解該兩種化合物必須是穩(wěn)定的且彼此以及與制劑中的其他組分相容，并且可以被配制用于給藥。當(dāng)分開配制時(shí)，可以以任何方便的制劑提供，為方便起見，可以以該化合物在該領(lǐng)域周知的方式提供。

當(dāng)一種化合物與針對相同疾病有效的第二治療活性劑組合使用時(shí)，各化合物的劑量可能與單獨(dú)使用化合物時(shí)的劑量不同。本領(lǐng)域技術(shù)人員可容易掌握適當(dāng)?shù)膭┝俊?/p>

本發(fā)明的化合物特別在炎性痛和泌尿系統(tǒng)疾病或紊亂的治療中可以有效地與另一藥理活性化合物或者兩種以上的其他藥理活性化合物結(jié)合。例如，生長激素釋放肽受體激動(dòng)劑、尤其是化學(xué)式(I)的化合物或其前體藥物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物可以與選自以下中的一種以上的藥劑組合而同時(shí)、依次或分開給藥：

-阿片鎮(zhèn)痛劑，例如嗎啡、海洛因、氫嗎啡酮、氧嗎啡酮、左啡諾、左洛啡烷、美沙酮、哌替啶、芬太奴、可卡因、可待因、雙氫可待因、氧可酮、氫可酮、丙氧芬、納美芬、納洛芬、納洛酮、納曲酮、丁丙諾啡、布托啡諾、納布啡或噴他佐辛；

-非甾體類抗炎藥(NSAID)，例如阿司匹林、雙氯芬酸、二氟尼柳、依托度酸、芬布芬、非諾洛芬、氟苯柳、氟比洛芬、布洛芬、吲哚美辛、酮洛芬、酮咯酸、甲氯芬那酸、甲滅酸、美洛昔康、萘丁美酮、萘普生、尼美舒利、硝基氟吡洛芬、奧沙拉秦、奧沙普秦、保泰松、吡羅昔康、柳氮磺吡啶、舒林酸、托美汀或佐美酸；

-巴比妥酸鹽類鎮(zhèn)定劑，例如異戊巴比妥、阿普比妥、仲丁比妥、布他比妥、普羅米那、美沙比妥、美索比妥、戊巴比妥、苯巴比妥、司可巴比妥、他布比妥、硫戊巴比妥或戊硫代巴比妥；

-具有鎮(zhèn)定作用的苯二氮卓，例如氯氮唑、氯卓酸鹽(clorazepate)、地西泮、氟西泮、勞拉西泮、奧沙西泮、替馬西泮或三唑侖；

-具有鎮(zhèn)定作用的H1拮抗劑，例如苯海拉明、吡拉明、異丙嗪、撲爾敏或氯環(huán)嗪；

-鎮(zhèn)定劑，例如苯乙派啶酮、甲丙氨酯、甲喹酮或氯醛比林；

-骨骼肌緩和劑，例如巴氯芬、卡立普多、氯唑沙宗、環(huán)苯扎林、美索巴莫或奧芬那君；

-NMDA受體拮抗劑，例如右美沙芬((+)-3-羥基-N-甲基嗎啡喃)或其代謝產(chǎn)物右啡烷((+)-3-羥基-N-甲基嗎啡喃)、氯胺酮、美金剛、吡咯喹啉醌、順式-4-(膦酰甲基)-2-呱啶甲酸、布地品、EN-3231(MorphiDex(商標(biāo))、嗎啡與右美沙芬的組合制劑)、托吡酯、奈拉美生(neramexane)或包含NR2B拮抗劑的培凈福太(perzinfotel)，例如艾芬地爾、曲索羅地(traxoprodil)或(-)-(R)-6-{2-[4-(3-氟苯基)-4-羥基-1-呱啶基]-1-羥基乙基-3，4-二氫-2(1H)-喹啉酮；

-α-腎上腺素能作用藥，例如多沙唑嗪、坦洛新、可樂定、胍法辛、右美托咪定、莫達(dá)非尼或4-氨基-6,7-二甲氧基-2-(5-甲烷-磺酰胺基-1,2,3,4-四氫異喹啉-2-基)-5-(2-吡啶)喹唑啉；

-三環(huán)抗抑郁藥，例如地昔帕明、丙米嗪、阿米替林或去甲替林；

-抗驚厥藥，例如卡馬西平、拉莫三嗪、托吡酯或丙戊酸；

-速激肽(NK)拮抗劑，尤其是NK-3、NK-2或NK-1拮抗劑，例如(αR,9R)-7-[3,5-雙(三氟甲基)芐基]-8,9,10,11-四氫-9-甲基-5-(4-甲苯基)-7H-[1,4]二氮雜芳辛并[2,1-g][1,7]-萘啶-6,13-二酮(TAK-637)、5-[[(2R,3S)-2-[(1R)-1-[3,5-雙(三氟甲基)苯基]乙氧基-3-(4-氟苯基)-4-嗎啉]-甲基]-1,2-二氫-3H-1,2,4-三唑-3-酮(MK-869)、阿瑞匹坦、拉奈匹坦、達(dá)匹坦或3-[[2-甲氧基-5-(三氟甲氧基)苯基]-甲基氨基]-2-苯基呱啶(2S,3S)；

-毒蕈堿拮抗劑，例如奧昔布寧、托特羅定、丙哌維林、曲司氯銨、達(dá)非那新、索非那新、替米維林及異丙托溴銨；

-COX-2選擇性抑制劑，例如塞來考昔、羅非考昔、帕瑞考昔、伐地考昔、地拉考昔、依托考昔或蘆米考昔；

-煤焦油鎮(zhèn)痛劑、尤其是撲熱息痛；

-神經(jīng)安定劑，例如氟哌利多、氯丙嗪、氟呱啶醇、奮乃靜、硫利達(dá)嗪、美索達(dá)嗪、三氟拉嗪、氟奮乃靜、氯氮平、奧氮平、利司哌酮、齊拉西酮、喹硫平、舍吲哚、阿立哌唑、索奈哌唑、布南色林、伊洛哌酮、哌羅匹隆、雷氯必利、佐替平、聯(lián)苯蘆諾、阿塞那平、魯拉西酮、胺磺必利、帕利哌酮(balaperidone)、帕潘立酮(palindore)、依利色林、奧沙奈坦、利莫納班、美克林坦(meclinertant)、Miraxion(商標(biāo))或沙立佐坦(sarizotan)；

-辣椒素(vanilloid)受體激動(dòng)劑(例如樹脂毒素)或拮抗劑(例如辣椒平)；

-瞬時(shí)受體電位陽離子通道亞型(V1、V2、V3、V4、M8、M2、A1)激動(dòng)劑或拮抗劑；

-β-腎上腺素能作用藥，例如普萘洛爾；

-局部麻醉劑，例如美西律；

-皮質(zhì)類固醇，例如地塞米松；

-5-HT受體激動(dòng)劑或拮抗劑、尤其是5-HT1B/1D激動(dòng)劑，例如依來曲坦、舒馬普坦、那拉曲坦、佐米曲坦或利扎曲坦；

-5-HT2A受體拮抗劑，例如R(+)-α-(2,3-二甲氧基-苯基)-1-[2-(4-氟苯基乙基)]-4-呱啶甲醇(MDL-100907)；

-膽堿能(煙堿性)鎮(zhèn)痛劑，例如伊普尼可林(TC-1734)、(E)-N-甲基-4-(3-吡啶基)-3-丁烯-1-胺(RJR-2403)、(R)-5-(2-吖丁啶基甲氧基)-2-氯吡啶(ABT-594)或煙堿；

-Tramadol(商標(biāo))；

-PDEV抑制劑，例如5-[2-乙氧基-5-(4-甲基-1-哌嗪基磺酰基)苯基]-1-甲基-3-正丙基-1,6-二氫-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮(西地那非)、

(6R,12aR)-2,3,6,7,12,12a-六氫-2-甲基-6-(3,4-亞甲二氧基苯基)-吡嗪并[2’,1’:6,1]-吡啶并[3,4-b]吲哚-1,4-二酮(IC-351或他達(dá)拉非)、

2-[2-乙氧基-5-(4-乙基-哌嗪-1-基-磺?；?-苯基]-5-甲基-7-丙基-3H-咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-4-酮(伐地那非)、

5-(5-乙酰基-2-丁氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-乙基-3-吖丁啶基)-2,6-二氫-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮、

5-(5-乙酰基-2-丙氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-異丙基-3-吖丁啶基)-2,6-二氫-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮、

5-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺?；?吡啶-3-基]-3-乙基-2-[2-甲氧基乙基]-2,6-二氫-7H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮、

4-[(3-氯-4-甲氧基芐基)氨基]-2-[(2S)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]-N-(嘧啶-2-基甲基)嘧啶-5-羧酰胺、

3-(1-甲基-7-氧代-3-丙基-6,7-二氫-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)-N-[2-(1-甲基吡咯烷-2-基)乙基]-4-丙氧基苯磺酰胺；

-α-2-δ配體，例如加巴噴丁、普瑞巴林、3-甲基加巴噴丁、(3-(氨基甲基)雙環(huán)[3.2.0]庚-3-基)乙酸、(3S,5R)-3-(氨基甲基)-5-甲基庚酸、(3S,5R)-3-氨基-5-甲基庚酸、(3S,5R)-3-氨基-5-甲基辛酸、(2S,4S)-4-(3-氯苯氧基)脯胺酸、(2S,4S)-4-(3-氟芐基)脯胺酸、[(1R,5R,6S)-6-(氨基甲基)雙環(huán)[3.2.0]庚-6-基]乙酸、3-((1-(氨基甲基)環(huán)己基)甲基)-4H-[1,2,4]惡二唑-5-酮、C-[1-((1H-四唑-5-基)甲基)環(huán)庚基]甲胺、(3S,4S)-(1-(氨基甲基)-3,4-二甲基環(huán)戊基)乙酸、(3S,5R)-3-(氨基甲基)-5-甲基辛酸、(3S,5R)-3-氨基-5-甲基壬酸、(3S,5R)-3-氨基-5-甲基辛酸、(3R,4R,5R)-3-氨基-4,5-二甲基庚酸及(3R,4R,5R)-3-氨基-4,5-二甲基辛酸；

-大麻素；

-代謝型谷胺酸亞型1受體(mGluR1)拮抗劑；

-血清素再吸收抑制劑，例如舍曲林、舍曲林代謝產(chǎn)物去甲基舍曲林、氟西汀、去甲氟西汀(氟西汀去甲基代謝產(chǎn)物)、氟伏沙明、帕羅西汀、西酞普蘭、西酞普蘭代謝產(chǎn)物去甲基西酞普蘭、草酸依地普侖、d,l-芬氟拉明、非莫西汀、伊福西汀、氰基度琉平(cyanodothiepin)、利托西汀、達(dá)泊西汀、奈法唑酮、西文氯胺及曲唑酮；

-去甲腎上腺素(norepinephrine)再吸收抑制劑，例如馬普替林、洛非帕明、米氮平、羥丙替林、非唑拉明、托莫西汀、米安色林、安非他酮、安非他酮代謝產(chǎn)物羥基安非他酮、諾米芬辛及維洛沙秦(Vivalan(商標(biāo)))、尤其是選擇性去甲腎上腺素再吸收抑制劑，例如瑞波西汀、尤其是(S,S)-瑞波西汀；

-雙血清素-去甲腎上腺素再吸收抑制劑，例如文拉法辛、文拉法辛代謝產(chǎn)物O-去甲文拉法辛、氯米帕明、氯米帕明代謝產(chǎn)物去甲氯米帕明、度洛西汀、米那普侖及丙米嗪；

-誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)抑制劑，例如

S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-L-同型半胱胺酸、

S-[2-[(1-亞氨基乙基)-氨基]乙基]-4,4-二氧代-L-半胱胺酸、

S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱胺酸、

(2S,5Z)-2-氨基-2-甲基-7-[(1-亞氨基乙基)氨基]-5-庚酸、

2-[[(1R,3S)-3-氨基-4-羥基-1-(5-噻唑基)-丁基]硫基]-5-氯-3-吡啶甲腈；

2-[[(1R,3S)-3-氨基-4-羥基-1-(5-噻唑基)丁基]硫基]-4-氯苯腈、

(2S,4R)-2-氨基-4-[[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]硫基]-5-噻唑丁醇、

2-[[(1R,3S)-3-氨基-4-羥基-1-(5-噻唑基)丁基]硫基]-6-(三氟甲基)-3-吡啶甲腈、

2-[[(1R,3S)-3-氨基-4-羥基-1-(5-噻唑基)丁基]硫基]-5-氯苯腈、或

N-[4-[2-(3-氯芐基氨基)乙基]苯基]噻吩-2-甲脒或胍乙基二硫化物；

-乙酰膽堿酯酶抑制劑，例如多奈哌齊；

-前列腺素E2 4亞型(EP4)拮抗劑，例如N-[({2-[4-(2-乙基-4,6-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)苯基]乙基}氨基)-羰基]-4-甲基苯磺酰胺、或

4-[(1S)-1-({[5-氯-2-(3-氟苯氧基)吡啶-3-基]羰基}氨基)乙基]苯甲酸；

-白三烯B4拮抗劑；例如1-(3-聯(lián)苯基-4-基甲基-4-羥基-苯并二氫呋喃-7-基)-環(huán)戊羧酸(CP-105696)、5-[2-(2-羧乙基)-3-[6-(4-甲氧基苯基)-5E-己烯基]氧基苯氧基]-戊酸(ONO-4057)或DPC-11870；

-5-脂肪氧合酶抑制劑，例如齊留通、6-[(3-氟-5-[4-甲氧基-3,4,5,6-四氫-2H-吡喃-4-基])苯氧基甲基]-1-甲基-2-喹諾酮(ZD-2138)或2,3,5-三甲基-6-(3-吡啶基甲基)-1,4-苯醌(CV-6504)；

-鈉通道阻斷劑，例如利多卡因；

-鈣通道阻斷劑，例如齊考諾肽、唑尼沙胺、米貝拉地爾；

-5-HT3拮抗劑，例如昂丹司瓊；

-降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)拮抗劑；

-緩激肽(BK1及BK2)拮抗劑；

-電壓門控鈉依賴性通道阻斷劑(Na_v1.3、Na_v1.7、Na_v1.8)；

-電壓依賴性鈣通道阻斷劑(N-型、T-型)；

-P2X(離子通道型ATP受體)拮抗劑；

-酸-敏感離子通道(ASIC1a、ASIC3)拮抗劑；

-血管收縮素AT2拮抗劑；

-趨化因子CCR2B受體拮抗劑；

-組織蛋白酶(B，S，K)抑制劑；

-σ1受體激動(dòng)劑或拮抗劑；及

其藥學(xué)上可接受的鹽及溶劑化物。

尤其，優(yōu)選本發(fā)明的治療劑或預(yù)防劑能夠與化療劑、免疫治療劑、利尿劑等組合使用。

化療劑的例子包括：諸如環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、美法侖、白消安、尼莫司汀、雷莫司汀、替莫唑胺等烷基化劑；諸如胺甲喋呤、氟尿嘧啶、替加氟、卡莫氟、去氧氟尿苷、卡培他濱、阿糖胞苷、安西他濱、依諾他濱、阿糖胞苷十八烷基磷酸鹽(cytarabine ocfosfate)、吉西他濱、巰嘌呤、氟達(dá)拉濱等核酸代謝物；諸如多柔比星、道諾霉素(daunorubicin)、吡柔比星、表阿霉素(epirubicin)、伊達(dá)比星、米托蒽醌、絲裂霉素C、博來霉素、培洛霉素等抗腫瘤抗生素；諸如長春新堿、長春堿、長春地辛、長春瑞濱、紫杉醇、多烯紫衫醇等微管抑制劑；諸如順鉑、卡鉑、奈達(dá)鉑等鉑類藥物；諸如伊立替康、拓?fù)涮婵?nogitecan)、依托泊苷等拓樸異構(gòu)酶抑制劑；諸如曲妥珠單抗、利妥昔單抗、伊馬替尼(imanitib)等分子靶向治療劑；等等。

免疫治療劑的例子包括胞壁酰二肽衍生物、香菇多糖、西佐糖(sizofiran)、烏苯美司、溶鏈菌(picibanil)、云芝多糖(krestin)、干擾素、白細(xì)胞介素、粒細(xì)胞集落刺激因子、紅細(xì)胞生成素等。

利尿劑的例子包括：諸如可可堿水楊酸鈉之類的黃嘌呤衍生物藥劑；諸如乙噻嗪(ethiazide)、環(huán)戊甲噻嗪、三氯甲噻嗪、氫氯噻嗪、氫氟甲噻嗪、芐氫氯噻嗪、戊氟噻嗪、泊利噻嗪(polythiazide)、甲氯噻嗪等利尿藥；諸如螺內(nèi)酯、三胺喋呤等抗醛固酮藥；諸如乙酰唑胺等碳酸酐酶抑制劑；諸如氯噻酮、美夫西特、吲達(dá)帕胺、呋塞米、阿佐酰胺等氯苯磺酰胺藥物；異山梨醇、依他尼酸、吡咯他尼、布美他尼等。

該種組合提供包括治療中的協(xié)同活性在內(nèi)的顯著的優(yōu)勢。

包括但并不限定于本說明書中引用的專利和專利申請，且通過參考而并入本文中的所有出版物，如同每個(gè)單獨(dú)的出版物在這里被充分闡述那樣，具體且單獨(dú)地通過參考而被并入本文中。

一般合成

在整個(gè)本申請中，以下述含義使用下述略語：

DCM 二氯甲烷

DMA N,N-二甲基乙酰胺

DME 1,2-二甲氧基乙烷

DMF N,N-二甲基甲酰胺

DMSO 二甲基亞砜

EDC 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽

EtOAc 醋酸乙酯

EtOH 乙醇

ESI 電噴灑游離

HOBT 1-羥基苯并三唑

HBTU 苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯

HPLC 高壓液相層析

LC 液相色譜

LG 離去基

MeCN 乙腈

MeOH 甲醇

MHz 兆赫茲

MS 質(zhì)譜分析

NMR 核磁共振

PG 保護(hù)基

T3P 2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環(huán)己烷(trioxatriphosphinane)2,4,6-三氧化物

TBME 甲基叔丁醚

TFA 三氟乙酸

THF 四氫呋喃

TLC 薄層層析

tR 滯留時(shí)間

UV 紫外線

術(shù)語“堿”對所使用的堿的種類同樣沒有特別限制，在此可同等地使用在該種類型的反應(yīng)中通常使用的任意堿。該種堿的例子包括以下：堿金屬氫氧化物，例如氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀、磷酸鉀及氫氧化鋇；堿金屬氫化物，例如氫化鋰、氫化鈉及氫化鉀；堿金屬醇鹽，例如甲醇鈉、乙醇鈉及叔丁醇鉀；堿金屬碳酸鹽，例如碳酸鋰、碳酸鈉、碳酸鉀及碳酸銫；堿金屬碳酸氫鹽，例如碳酸氫鋰、碳酸氫鈉及碳酸氫鉀；胺，例如N-甲基嗎啉、三乙胺、三丙胺、三丁胺、二異丙基乙胺、N-甲基呱啶、吡啶、4-吡咯烷吡啶、皮考啉，2,6-二(叔丁基)-4-甲基吡啶、喹啉、N,N-二甲基苯胺、N,N-二乙基苯胺、1,5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-5-烯(DBN)、1,4-二氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷(DABCO)、1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)、盧剔啶及可力?。粔A金屬氨基化物，例如氨基鋰、氨基鈉、氨基鉀、二異丙氨基鋰、二異丙氨基鉀、二異丙氨基鈉、雙(三甲硅基)氨基鋰及雙(三甲硅基)氨基鉀。其中，優(yōu)選三乙胺、二異丙基乙胺、DBU、DBN、DABCO、吡啶、盧剔啶、可力丁、碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、碳酸鉀、碳酸氫鉀、氫氧化鉀、磷酸鉀、氫氧化鋇及碳酸銫。

前述反應(yīng)一般且優(yōu)選在惰性溶劑的存在下進(jìn)行。只要不對反應(yīng)或試劑帶來壞影響、且溶劑可以將試劑溶解至至少某種程度，則對所使用的溶劑種類并沒有特別限制。適當(dāng)?shù)娜軇┑睦臃窍薅ㄐ缘匕ㄒ韵拢蝴u代烴，例如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及二氯乙烷；醚，例如二乙醚、二異丙醚、THF及二惡烷；芳香族烴，例如苯、甲苯及硝基苯；酰胺，例如DMF、N,N-二甲基乙酰胺(DMA)及六甲基磷酰三胺；胺，例如N-甲基嗎啉、三乙胺、三丙胺、三丁胺、二異丙基乙胺、N-甲基呱啶、吡啶、4-吡咯烷吡啶、N,N-二甲基苯胺及N,N-二乙基苯胺；醇，例如甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇及丁醇；腈，例如乙腈及芐腈；亞砜，例如二甲基亞砜(DMSO)及環(huán)丁砜；酮，例如丙酮及二乙酮。在該等溶劑中，優(yōu)選包含DMF、DMA、DMSO、THF、二乙醚、二異丙醚、乙二醇二甲醚、乙腈、二氯甲烷、二氯乙烷及氯仿，但并不限定于此。

實(shí)施例

用下述非限定性實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行說明，如沒有特別提及，所有試劑均是市售品，所有操作均在室溫至環(huán)境溫度即約18-25℃范圍內(nèi)進(jìn)行；使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在減壓下并在到達(dá)約60℃的浴溫度下進(jìn)行溶劑的蒸發(fā)；用薄層層析(TLC)或LC-MS(低分辨質(zhì)譜)監(jiān)控反應(yīng)，僅以說明的目的給出反應(yīng)時(shí)間；用以下技術(shù)中的至少一種來確認(rèn)所有分離化合物的結(jié)構(gòu)和純度：TLC(Merck硅膠60F₂₅₄預(yù)涂TLC板或Merck NH2F₂₅₄預(yù)涂HPTLC板)、質(zhì)譜分析或NMR。僅以說明的目的給出收率。使用Wakogel(注冊商標(biāo))C-300HGT或Fuji Silysia Chromatorex(注冊商標(biāo))DM2035(氨基型，30-50微米)或Biotage silica(32-63mm，KP-Sil)或Biotage氨基結(jié)合硅(35-75mm，KP-NH)來進(jìn)行快速管柱層析。通過下述裝置獲得低分辨質(zhì)譜資料(ESI)。

裝置；帶有UV2487檢測器及ZQ2000質(zhì)譜儀的Waters Alliance 2695 HPLC系統(tǒng)

利用下述裝置及條件，使用HPLC(制備型LC-MS)執(zhí)行化合物的提純。

裝置；Waters MS-trigger Auto-purification系統(tǒng)

管柱；Waters XBridge C18，19×50mm，5微米粒子尺寸

條件A：甲醇或乙腈/0.05％(v/v)氨水溶液

條件B：甲醇或乙腈/0.05％(v/v)甲酸水溶液

HPLC滯留時(shí)間的確定條件：

方法：QC1

裝置：帶有TUV檢測器及ZQ2000質(zhì)譜儀的Waters ACQUITY Ultra Performance LC

管柱：Waters ACQUITY C18，2.1×100mm，1.7微米粒子尺寸

管柱溫度：60℃

流速：0.7mL/min

運(yùn)行時(shí)間：3min

UV檢測：210nm

MS檢測：ESI正/負(fù)模式

流動(dòng)相：

A1：10mM乙酸銨

B1：乙腈

表1.梯度程式：

{表1}

方法：QC2

裝置：帶2996PDA檢測器及ZQ2000質(zhì)譜儀的Waters Alliance2795 HPLC系統(tǒng)

管柱：XBridge C18，4.6×50mm，3.5微米粒子尺寸

管柱溫度：45℃

流速：1.2mL/min

運(yùn)行時(shí)間：4.5min

UV檢測：210-400nm(掃描范圍)

MS檢測：ESI正/負(fù)模式

流動(dòng)相：

A：水

B：乙腈

C：1％甲酸水溶液

D：1％氨水溶液

表2.梯度程式：

{表2}

利用下述裝置及條件執(zhí)行光學(xué)純度評估：

裝置：帶有2996PDA detector的Waters Alliance2695 HPLC系統(tǒng)

管柱：DAICEL CHIRALCEL OD-H，4.6×250mm，5微米粒子尺寸

管柱溫度：25℃(室溫)

流動(dòng)相：正己烷/2-丙醇/二乙胺＝90/10/0.1(v/v/v)

流速：1mL/min

運(yùn)行時(shí)間：30min

自動(dòng)取樣器溫度：5℃

UV檢測：259nm

對于四甲基硅烷(TMS)以百萬分之一(parts per Million)(ppm)作為內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)，沒有特別提及就可以使用氘代氯仿(99.8％D)或二甲基亞砜(99.9％D)來作為溶劑，并以270MHz(JEOL JNM-LA 270分光儀)或300MHz(JEOL JNM-LA300)確定NMR資料；所使用的常規(guī)略語如下：s＝單線、d＝雙重線、t＝三重線、q＝四重線、m＝多重線、br＝廣域等?；瘜W(xué)記號具有該等通常的含義；M(摩爾/升)、L(升)、mL(毫升)、g(克)、mg(毫克)、mol(摩爾)、mmol(毫摩爾)。

每個(gè)制備化合物一般由ChemBioDraw(Ultra,version 12.0,CambridgeSoft)命名。

化學(xué)式(I)的所有絲氨酸衍生物可通過以下示出的一般方法中所記載的程序進(jìn)行制備，或者可通過實(shí)施例部分及制備部分中所記載的具體方法或在該等方法施加通常變更來進(jìn)行制備。本發(fā)明不僅包括化學(xué)式(I)的絲氨酸衍生物的該等制備制程的任意一種以上，而且還包括使用于其中的任意的新型中間體。

在下述一般方法中，除非另有說明，關(guān)于化學(xué)式(I)的絲氨酸衍生物的描述如前面所定義。

{化學(xué)式4}

<方案A>

在步驟A-a中，化學(xué)式(III)的化合物可通過去保護(hù)、接著通過對應(yīng)的鹽的動(dòng)態(tài)動(dòng)力學(xué)拆分，由化學(xué)式(II)的化合物進(jìn)行制備。去保護(hù)可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員所周知的常規(guī)方法來實(shí)施(由T.W.Greene et al.編輯的“Protective Groups in Organic Synthesis Forth Edition”(John Wiley&Sons,2007)中所記載的典型的氨基保護(hù)基)。此外，去保護(hù)的化合物可使用合適的溶劑，通過使用諸如D-酒石酸之類(但并不限定于此)的光學(xué)純酸的動(dòng)態(tài)動(dòng)力學(xué)拆分轉(zhuǎn)換為光學(xué)純鹽。合適的溶劑的例子包括諸如DCM(二氯甲烷)、丙酮、EtOAc、THF及水。動(dòng)態(tài)動(dòng)力學(xué)拆分可在溫度約0至150℃、進(jìn)一步優(yōu)選在約20至100℃下進(jìn)行。動(dòng)態(tài)動(dòng)力學(xué)拆分可進(jìn)行一段時(shí)間，一般情況下進(jìn)行約1hr至48hr。

在步驟A-b中，化學(xué)式(IV)的化合物可使用諸如T3P、HBTU及EDC-HOBT之類(但并不限定于此)的合適的縮合劑，通過與化學(xué)式(VII-a)的化合物的酰胺化，由化學(xué)式(III)的化合物進(jìn)行制備。優(yōu)選縮合可在諸如三乙胺及N,N-二異丙基乙胺之類的堿的存在下，在諸如EtOAc、THF、DMF、DMA及DCM之類的合適的溶劑中，在約-70至60℃的溫度下進(jìn)行約1-24小時(shí)。

在步驟A-c中，化學(xué)式(V)的化合物可通過去保護(hù)，由化學(xué)式(IV)的化合物進(jìn)行制備。去保護(hù)可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員所周知的常規(guī)方法來實(shí)施(由T.W.Greene et al.編輯的“Protective Groups in Organic Synthesis Forth Edition”(John Wiley&Sons,2007)中所記載的典型的氨基保護(hù)基)。

在步驟A-d中，化學(xué)式(VI)的化合物可使用諸如T3P、HBTU及EDC-HOBT之類(但并不限定于此)的合適的縮合劑，通過與2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸的酰胺化，由化學(xué)式(V)的化合物進(jìn)行制備。優(yōu)選縮合可在諸如三乙胺及N,N-二異丙基乙胺之類的堿的存在下，在諸如EtOAc、THF、DMF、DMA及DCM之類的合適的溶劑中，在約0至60℃的溫度下進(jìn)行約1-24小時(shí)。

在步驟A-e中，化學(xué)式(I)的化合物可通過去保護(hù)，由化學(xué)式(VI)的化合物進(jìn)行制備。去保護(hù)可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員所周知的常規(guī)方法來實(shí)施(由T.W.Greene et al.編輯的“Protective Groups in Organic Synthesis Forth Edition”(John Wiley&Sons,2007)中所記載的典型的氨基保護(hù)基)。

在步驟A-f中，化學(xué)式(VI)的化合物可使用諸如T3P、HBTU及EDC-HOBT之類(但并不限定于此)的合適的縮合劑，通過與化學(xué)式(VII-b)的化合物的酰胺化，由化學(xué)式(III)的化合物進(jìn)行制備。優(yōu)選縮合可在諸如三乙胺及N,N-二異丙基乙胺之類的堿的存在下，在諸如EtOAc、THF、DMF、DMA及DCM之類的合適的溶劑中，在約-40至60℃的溫度下進(jìn)行約1-24小時(shí)。

{化學(xué)式5}

<方案B>

在步驟B-a中，化學(xué)式(IX)的化合物可通過與化學(xué)式(XIV)的化合物的Mitsunobu反應(yīng)，由化學(xué)式(VIII)的化合物進(jìn)行制備。Mitsunobu反應(yīng)可在作為偶聯(lián)劑的偶氮-二羧酸酯(包括但并不限定于諸如偶氮二羧酸二乙酯、偶氮二羧酸二異丙酯、偶氮二羧酸二叔丁酯及雙(2-甲氧基乙基)偶氮二羧酸酯)的存在下，在有機(jī)溶劑中進(jìn)行，并且，可在諸如三苯基膦之類的合適的還原劑(但并不限定于此)的存在下，于惰性有機(jī)溶劑中進(jìn)行。合適的惰性有機(jī)溶劑的例子包括諸如THF、1,4-二惡烷、MeCN、TBME及甲苯。反應(yīng)可在約-20至150℃的溫度下進(jìn)行，進(jìn)一步優(yōu)選在約0至60℃下進(jìn)行。在一般情況下，反應(yīng)時(shí)間為約30分鐘至48小時(shí)，進(jìn)一步優(yōu)選約30分鐘至24小時(shí)。

在步驟B-b中，化學(xué)式(X)的化合物可通過去保護(hù)，由化學(xué)式(IX)的化合物進(jìn)行制備。去保護(hù)可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員所周知的常規(guī)方法來實(shí)施(由T.W.Greene et al.編輯的“Protective Groups in Organic Synthesis Forth Edition”(John Wiley&Sons,2007)中所記載的典型的氨基保護(hù)基)。

在步驟B-c中，化學(xué)式(XI)的化合物可通過氨基部分的保護(hù)，由化學(xué)式(X)的化合物進(jìn)行制備。保護(hù)可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員所周知的常規(guī)方法來進(jìn)行(由T.W.Greene et al.編輯的“Protective Groups in Organic Synthesis Forth Edition”(John Wiley&Sons,2007)中所記載的典型的氨基保護(hù)基)。

在步驟B-d中，化學(xué)式(VII-a)的化合物可通過化學(xué)式(XI)的酯化合物的水解進(jìn)行制備。水解可通過常規(guī)程序進(jìn)行。在典型的程序中，水解在堿性條件下例如在氫氧化鈉、氫氧化鉀或氫氧化鋰的存在下進(jìn)行。合適的溶劑包括水、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、2-甲氧基乙醇、乙二醇、THF、DME、1,4-二惡烷、DMF、及DMA，但并不限定于此。反應(yīng)可在約20至100℃的溫度下進(jìn)行約10min至24hr。

在步驟B-e中，化學(xué)式(XII)的化合物可通過酸性條件下的處理來進(jìn)行制備。在典型的程序中，反應(yīng)可在酸性條件下例如在氫氯酸、氫溴酸的存在下進(jìn)行。合適的溶劑包括水、1,4-二惡烷、THF、MeCN，但并不限定于此。反應(yīng)可在約50至120℃的溫度下進(jìn)行約1hr至24hr。

在步驟B-f中，化學(xué)式(VII-a)的化合物可通過氨基部分的保護(hù)，由化學(xué)式(XII)的化合物進(jìn)行制備。保護(hù)可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員所周知的常規(guī)方法來進(jìn)行(由T.W.Greene et al.編輯的“Protective Groups in Organic Synthesis Forth Edition”(John Wiley&Sons,2007)中所記載的典型的氨基保護(hù)基)。

在步驟B-g中，化學(xué)式(XIII)的化合物可通過氨基部分的保護(hù)，由化學(xué)式(X)的化合物進(jìn)行制備。保護(hù)可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員所周知的常規(guī)方法來進(jìn)行(由T.W.Greene et al.編輯的“Protective Groups in Organic Synthesis Forth Edition”(John Wiley&Sons,2007)中所記載的典型的氨基保護(hù)基)。

在步驟B-h中，化學(xué)式(VII-b)的化合物可通過化學(xué)式(XIII)的酯化合物的水解進(jìn)行制備。水解可通過常規(guī)程序進(jìn)行。在典型的程序中，水解在堿性條件下例如在氫氧化鈉、氫氧化鉀或氫氧化鋰的存在下進(jìn)行。合適的溶劑包括水、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、2-甲氧基乙醇、乙二醇、THF、DME、1,4-二惡烷、DMF及DMA，但并不限定于此。反應(yīng)可在約20至100℃的溫度下進(jìn)行約10min至24hr。

{化學(xué)式6}

<方案C>

在步驟C-a中，化學(xué)式(II)的化合物可通過與化學(xué)式(XVI)的化合物原位形成腙，接著進(jìn)行閉環(huán)，由化學(xué)式(XV)的化合物進(jìn)行制備。反應(yīng)可在金屬乙酸鹽(包括但并不限定于諸如乙酸鈉、乙酸鉀及乙酸鋰)的存在下進(jìn)行。合適的溶劑包括甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、2-甲氧基乙醇、乙二醇、THF、DME及1,4-二惡烷，但并不限定于此。反應(yīng)可在約50至150℃的溫度下進(jìn)行約1hr至48hr。

下述合成中的所有起始原料能夠商購、或者能夠通過中間體合成部分中另行提及的本領(lǐng)域技術(shù)人員所周知的常規(guī)方法來得到。

核合成部分

如下制備核化合物。將核化合物的名稱及結(jié)構(gòu)示于表3。

核1：3a-芐基-2-(2,2-二氟乙基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮2,2,2-三氟乙酸酯

步驟1：3a-芐基-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-羧酸叔丁酯

在回流溫度下，將1-叔丁基3-甲基3-芐基-4-氧代哌啶-1,3-二羧酸酯(2.4g，7.0mmol)、(2,2-二氟乙基)肼鹽酸鹽(930mg，7.0mmol)與乙酸鈉(2.3g，28mmol)的EtOH(40mL)混合物攪拌24hr。冷卻至室溫之后，在真空中濃縮混合物。用EtOAc(80mL)稀釋殘留物。用水清洗稀釋的混合物，并經(jīng)Na₂SO₄干燥。進(jìn)行過濾之后，在真空中濃縮濾液。通過管柱層析(硅膠，用25％EtOAc的己烷進(jìn)行洗脫)提純殘留物而獲得作為白色固體的標(biāo)題化合物(1.8g，65％的收率)。

MS(ESI)m/z：394(M+H)⁺

步驟2：3a-芐基-2-(2,2-二氟乙基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮2,2,2-三氟乙酸酯

在0℃下，在3a-芐基-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-羧酸叔丁酯(100mg，0.25mmol)的DCM(3mL)溶液中添加三氟乙酸(2mL)，并在相同溫度下，將混合物攪拌1hr。在真空中濃縮混合物而獲得作為淺黃色膠狀物的標(biāo)題化合物(104mg，＞99％的收率)。

MS(ESI)m/z：294(M+H)⁺,292(M-H)^-

核2：(R)-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2S,3S)-2,3-二羥基琥珀酸酯

步驟1：2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-羧酸叔丁酯

以與核1的步驟1類似的方式，以87％的收率(3600mg，淺紫色膠狀物)由1-叔丁基3-甲基4-氧代-3-(吡啶-2-基甲基)哌啶-1,3-二羧酸酯(3700mg，11mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H-NMR(270MHz,CDCl₃)delta 8.38(1H,d,J＝3.9Hz),7.58-7.50(1H,m),7.13-7.05(2H,m),5.94-5.30(1H,m),4.75-4.40(2H,br),4.10-3.76(2H,m),3.42-3.26(2H,m),2.93-2.50(4H,m),1.53(9H,s)。

MS(ESI)m/z：395(M+H)⁺。

步驟2：(R)-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

將2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-羧酸叔丁酯(4.9g，13mmol，外消旋)的DCM(50mL)溶液冷卻至0℃，并緩慢添加三氟乙酸(4.1mL)。在室溫下將混合物攪拌1.5hr，接著冷卻至0℃。在相同溫度下，在生成的懸浮液中添加三乙胺(9.6mL，69mmol)。用DCM(50mL)稀釋所生成的黃色的透明溶液，并用鹽水(30mL×3)清洗，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，并在真空中濃縮而獲得作為褐色油性的標(biāo)題化合物(3.8g，＞100％的收率)。

MS(ESI)m/z：295(M+H)⁺。

¹H-NMR(270MHz,CDCl₃)delta 8.41(1H,d,J＝5.9Hz),7.58-7.51(1H,m),7.14-7.06(2H,m),5.76(1H,tt,J＝55.7Hz,4.6Hz),4.16-3.72(2H,m),3.53-3.32(4H,m),2.74-2.52(4H,m)。未觀察到NH。

MS(ESI)m/z：295(M+H)⁺。

步驟3：(R)-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2S,3S)-2,3-二羥基琥珀酸酯

(R)-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(ca.12.5mmol)溶液溶解于DCM(6mL)和丙酮(20mL)中的溶液。在室溫下，在混合物中添加D-酒石酸(2.07g，13.8mmol)的丙酮-水(7:3，10mL)溶液?；旌衔锪⒓醋?yōu)榘咨珴{液。再次添加丙酮(10mL)，使混合物更容易攪拌。在室溫下徹夜攪拌之后，過濾混合物，用冷丙酮(10mL)清洗固體，并在減壓下以40℃干燥3小時(shí)而得到作為白色固體的標(biāo)題化合物(4.68g，84％)。

¹H NMR(DMSO-d₆,270MHz)delta 8.33(1H,d,J＝5.9Hz),7.66-7.60(1H,m),7.19-7.08(2H,m),5.96(1H,tt,J＝55.3Hz,4.0Hz),4.28(2H,s),4.03-3.74(2H,m),3.62(1H,d,J＝14.1Hz),3.41-3.18(4H,m),3.14(1H,d,J＝14.1Hz),2.50-2.33(2H,m)。

MS(ESI)m/z：295(M+H)⁺。

{表3}

中間體合成部分

如下制備中間體化合物。將中間體化合物的名稱及結(jié)構(gòu)示于表4。

中間體1：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2,4-二氟苯氧基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-(2,4-二氟苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

在0℃下，在(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(800mg，2.2mmol)、2,4-二氟苯酚(370mg，2.9mmol)及三苯基膦(760mg，2.9mmol)的THF(15mL)攪拌溶液中滴加雙(2-甲氧基乙基)偶氮二羧酸酯(670mg，2.9mmol)的THF(2mL)溶液。在室溫下將混合物攪拌2hr。濃縮混合物，并用EtOAc(50mL)稀釋殘留物。用飽和的NaHCO₃水溶液、接著用鹽水清洗稀釋的混合物，并經(jīng)Na₂SO₄干燥。進(jìn)行過濾之后，濃縮濾液。通過管柱層析(硅膠，用3％至13％EtOAc的己烷進(jìn)行洗脫)提純殘留物而獲得作為無色膠狀物的標(biāo)題化合物(771mg，74％的收率)。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.52(6H,d,J＝7.3Hz),7.30-7.16(9H,m),6.99-6.72(3H,m),4.29(1H,d,J＝9.5,5.2Hz),4.02(1H,dd,J＝9.5,6.9Hz),3.78-3.71(1H,m),3.24(3H,s),2.88(1H,d,J＝10.3Hz)。

MS(ESI)m/z：觀察到243(正離子)的片段信號。

步驟2：(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2,4-二氟苯氧基)丙酸酯

在室溫下，在(R)-甲基3-(2,4-二氟苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(760mg，1.6mmol)的DCM(10mL)攪拌溶液中添加三氟乙酸(3.7mL)，并在相同溫度下，將混合物攪拌2hr。在混合物中添加MeOH(25mL)，并將生成的混合物攪拌5min，接著在真空中濃縮。將殘留物溶解于DCM(20mL)中，接著，在室溫下，將三乙胺(0.67mL，4.8mmol)及二碳酸二叔丁酯(530mg，2.4mmol)依次添加到混合物中。在室溫下攪拌2hr之后，在真空中濃縮混合物。通過管柱層析(硅膠，用5％至14％EtOAc的己烷進(jìn)行洗脫)提純殘留物而獲得作為無色油的標(biāo)題化合物(470mg，88％的收率)。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 6.96-6.75(3H,m),5.53(1H,d,J＝8.8Hz),4.66-4.63(1H,m),4.42(1H,dd,J＝8.8,2.9Hz),4.25(1H,dd,J＝9.2,3.3Hz),3.79(3H,s),1.46(9H,s)。

MS(ESI)m/z：232(M-Boc+H)⁺。

步驟3：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2,4-二氟苯氧基)丙酸

在(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2,4-二氟苯氧基)丙酸酯(470mg，1.4mmol)的THF(10mL)攪拌溶液中添加LiOH一水合物(65mg，1.6mmol)，接著，將水(2mL)添加到混合物中。在室溫下，將混合物攪拌30min。在混合物中添加0.5N氫氯酸(hydrochloric acid)(2mL),并用EtOAc(50mL×2)萃取混合物。將萃取物經(jīng)Na₂SO₄干燥。進(jìn)行過濾之后，在真空中濃縮濾液。通過管柱層析(硅膠，用9％MeOH的DCM進(jìn)行洗脫)提純殘留物而獲得作為無色膠狀物的標(biāo)題化合物(200mg，45％的收率)。

MS(ESI)m/z：318(M+H)⁺,316(M-H)^-。

中間體2：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-苯氧基丙酸

步驟1：(R)-甲基3-苯氧基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟1類似的方式，以23％的收率(390mg，無色膠狀物)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(1.4g，3.9mmol)和苯酚(0.73g，7.8mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.54-7.49(6H,m),7.30-7.16(11H,m),6.96(1H,t,J＝7.3Hz),6.88(2H,d,J＝8.0Hz)4.26(1H,dd,J＝9.2,4.8Hz),4.03-4.00(1H,m),3.76-3.72(1H,m),3.22(3H,s),2.88(1H,br s)。

MS(ESI)m/z：觀察到243(正離子)的片段信號。

步驟2：(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-苯氧基丙酸酯

以與中間體1的步驟2類似的方式，以87％的收率(230mg，無色膠狀物)由(R)-甲基3-苯氧基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(390mg，0.89mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.28(2H,t,J＝7.7Hz),6.98(1H,t,J＝7.3Hz),6.88(2H,d,J＝8.1Hz),5.52(1H,d,J＝8.0Hz),4.67(1H,dt,J＝8.8,2.6Hz),4.40(1H,dd,J＝9.2,2.7Hz),4.20(1H,dd,J＝9.5,2.9Hz),3.77(3H,s),1.49(9H,s)。

MS(ESI)m/z：232(M-Boc+H)⁺。

步驟3：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-苯氧基丙酸

以與中間體1的步驟3類似的方式，以73％的收率(150mg，無色膠狀物)由(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-苯氧基丙酸酯(220mg，0.75mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：282(M+H)⁺,280(M-H)^-。

中間體3：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-氯苯氧基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-(4-氯苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟1類似的方式，以56％的收率(730mg，無色膠狀物)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(1.0g，2.8mmol)和4-氯苯酚(0.46g，3.6mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.53-7.49(6H,m),7.28-7.16(11H,m),6.82-6.77(2H,m),4.20(1H,dd,J＝9.2,4.8Hz),4.00-3.95(1H,m),3.80-3.67(1H,m),3.23(3H,s),2.87(1H,d,J＝10.3Hz)。

MS(ESI)m/z：觀察到243(正離子)的片段信號。

步驟2：(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-氯苯氧基)丙酸酯

以與中間體1的步驟2類似的方式，以95％的收率(480mg，無色膠狀物)由(R)-甲基3-(4-氯苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(720mg，1.5mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.23(2H,d,J＝8.8Hz),6.81(2H,d,J＝9.5Hz),5.49(1H,d,J＝8.1Hz),4.74-4.61(1H,m),4.37(1H,dd,J＝9.2,2.7Hz),4.18(1H,dd,J＝9.5,2.9Hz),3.72(3H,s),1.46(9H,s)。

MS(ESI)m/z：230(M-Boc+H)⁺。

步驟3：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-氯苯氧基)丙酸

以與中間體1的步驟3類似的方式，以58％的收率(260mg，無色膠狀物)由(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-氯苯氧基)丙酸酯(480mg，1.4mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：316(M+H)⁺,314(M-H)^-。

中間體4：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氯苯氧基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-(3-氯苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟1類似的方式，以76％的收率(890mg，無色膠狀物)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(900mg，2.5mmol)和3-氯苯酚(420mg，3.2mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.53-7.13(16H,m),6.95-6.70(3H,m),4.23(1H,dd,J＝9.2,4.7Hz),3.99(1H,dd,J＝9.5,6.6Hz),3.77-3.68(1H,m),3.23(3H,s),2.88(1H,d,J＝10.3Hz)。

MS(ESI)m/z：觀察到243(正離子)的片段信號。

步驟2：(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氯苯氧基)丙酸酯

以與中間體1的步驟2類似的方式，以73％的收率(450mg，無色油)由(R)-甲基3-(3-氯苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(880mg，1.8mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.20(1H,t,J＝8.1Hz),6.96(1H,d,J＝8.0Hz),6.89(1H,t,J＝2.2Hz),6.77(1H,dd,J＝8.4,2.6Hz),5.49(1H,d,J＝4.4Hz),4.69-4.65(1H,m),4.38(1H,dd,J＝9.2,2.6Hz),4.20(1H,dd,J＝8.8,2.9Hz),3.78(3H,s),1.46(9H,s)。

MS(ESI)m/z：230(M-Boc+H)⁺。

步驟3：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氯苯氧基)丙酸

以與中間體1的步驟3類似的方式，以57％的收率(240mg，無色膠狀物)由(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氯苯氧基)丙酸酯(440mg，1.3mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：316(M+H)⁺,314(M-H)^-。

中間體5：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氯苯氧基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-(3,5-二氯苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟1類似的方式，以42％的收率(530mg，無色固體)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(900mg，2.5mmol)和3,5-二氯苯酚(530mg，3.2mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.51(6H,d,J＝7.3Hz),7.35-7.17(9H,m),6.98-6.95(1H,br s),6.78(2H,d,J＝1.5Hz),4.21(1H,dd,J＝9.2,4.8Hz),3.97(1H,dd,J＝8.8,6.6Hz),3.74-3.67(1H,m),3.25(3H,s),2.88(1H,d,J＝10.3Hz)。

MS(ESI)m/z：觀察到243(正離子)的片段信號。

步驟2：(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氯苯氧基)丙酸酯

以與中間體1的步驟2類似的方式，以85％的收率(320mg，無色膠狀物)由(R)-甲基3-(3,5-二氯苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(520mg，1.0mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 6.98(1H,d,J＝1.5Hz),6.79(2H,d,J＝1.5Hz),5.45(1H,d,J＝8.8Hz),4.68-4.65(1H,m),4.37(1H,dd,J＝8.8,1.5Hz),4.20(1H,dd,J＝9.2,2.6Hz),3.79(3H,s),1.46(9H,s)。

MS(ESI)m/z：264(M-Boc+H)⁺。

步驟3：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氯苯氧基)丙酸

以與中間體1的步驟3類似的方式，以48％的收率(140mg，無色膠狀物)由(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氯苯氧基)丙酸酯(310mg，0.85mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：250(M-Boc+H)⁺,348(M-H)^-。

中間體6：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2-(三氟甲基)苯氧基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-(2-(三氟甲基)苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟1類似的方式，以55％的收率(690mg，無色膠狀物)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(900mg，2.5mmol)和2-(三氟甲基)苯酚(530mg，3.2mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.56-7.46(7H,m),7.30-7.17(10H,m),7.04-6.96(2H,m),4.36(1H,dd,J＝8.8,3.6Hz),4.07-4.02(1H,m),3.82-3.74(1H,m),3.22(3H,s),2.92(1H,d,J＝10.3Hz)。

MS(ESI)m/z：觀察到243(正離子)的片段信號。

步驟2：(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2-(三氟甲基)苯氧基)丙酸酯

以與中間體1的步驟2類似的方式，以86％的收率(420mg，無色油)由(R)-甲基3-(2-(三氟甲基)苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(680mg，1.3mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.56(1H,d,J＝8.1Hz),7.49(1H,t,J＝8.1Hz),7305(1H,t,J＝7.3Hz),6.96(1H,d,J＝8.1Hz),5.51(1H,d,J＝8.8Hz),4.72(1H,dt,J＝8.8,2.6Hz),4.48(1H,dd,J＝8.8,2.2Hz),4.30(1H,dd,J＝9.2,2.6Hz),3.78(3H,s),1.46(9H,s)。

MS(ESI)m/z：364(M+H)⁺。

步驟3：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2-(三氟甲基)苯氧基)丙酸

以與中間體1的步驟3類似的方式，以55％的收率(220mg，無色膠狀物)由(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2-(三氟甲基)苯氧基)丙酸酯(410mg，1.1mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：250(M-Boc+H)⁺,348(M-H)^-。

中間體7：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,4-二氟苯氧基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-(3,4-二氟苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟1類似的方式，以56％的收率(660mg，無色膠狀物)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(900mg，2.5mmol)和3,4-二氟苯酚(420mg，3.2mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.52-7.49(6H,m),7.30-7.17(9H,m),7.05(1H,q,J＝9.3Hz),6.73-6.65(1H,m),6.59-6.53(1H,m),4.17(1H,dd,J＝9.5,5.1Hz),3.94(1H,dd,J＝9.5,6.6Hz),3.73-3.66(1H,m),3.24(3H,s),2.87(1H,d,J＝10.3Hz)。

MS(ESI)m/z：觀察到243(正離子)的片段信號。

步驟2：(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,4-二氟苯氧基)丙酸酯

以與中間體1的步驟2類似的方式，以81％的收率(370mg，無色油)由(R)-甲基3-(3,4-二氟苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(650mg，1.4mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.06(1H,q,J＝9.3Hz),6.75-6.67(1H,m),6.61-6.55(1H,m),5.46(1H,d,J＝8.0Hz),4.70-4.61(1H,m),4.34(1H,dd,J＝8.8,2.9Hz),4.16(1H,dd,J＝9.5,2.9Hz),3.78(3H,s),1.46(9H,s)。

MS(ESI)m/z：332(M+H)⁺。

步驟3：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,4-二氟苯氧基)丙酸

以與中間體1的步驟3類似的方式，以57％的收率(200mg，淺褐色膠狀物)由(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,4-二氟苯氧基)丙酸酯(360mg，1.1mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：318(M-Boc+H)⁺,316(M-H)^-。

中間體8：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2-氯苯氧基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-(2-氯苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟1類似的方式，以68％的收率(880mg，無色固體)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(1000mg，2.8mmol)和2-氯苯酚(460mg，3.2mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.53(6H,d,J＝7.3Hz),7.36-6.92(11H,m),6.93-6.88(2H,m),4.35(1H,dd,J＝8.8,5.1Hz),4.05-3.99(1H,m),3.85-3.78(1H,m),3.24(3H,s),2.91(1H,d,J＝10.3Hz)。

MS(ESI)m/z：494(M+Na+H)⁺。

步驟2：(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2-氯苯氧基)丙酸酯

以與中間體1的步驟2類似的方式，以90％的收率(550mg，無色油)由(R)-甲基3-(2-氯苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(870mg，1.8mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.35(1H,dd,J＝8.1,1.5Hz),7.21(1H,td,J＝7.7,1.5Hz),6.96-6.90(2H,m),5.60(1H,d,J＝8.8Hz),4.76-4.66(1H,m),4.45(1H,dd,J＝9.2,2.6Hz),4.27(1H,dd,J＝9.5,2.9Hz),3.80(3H,s),1.46(9H,s)。

MS(ESI)m/z：330(M+H)⁺。

步驟3：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2-氯苯氧基)丙酸

以與中間體1的步驟3類似的方式，以51％的收率(260mg，無色膠狀物)由(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2-氯苯氧基)丙酸酯(540mg，1.6mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：216(M-Boc+H)⁺,314(M-H)^-.

中間體9：(R)-3-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

與中間體1的步驟1類似的方式，以35％的收率(550mg，無色膠狀物)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(1000mg，2.8mmol)和3,5-雙(三氟甲基)苯酚(830mg，3.6mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.52(6H,d,J＝7.3Hz),7.34-7.18(12H,m),4.28(1H,dd,J＝9.5,4.4Hz),4.03(1H,dd,J＝9.5,6.6Hz),3.81-3.70(1H,m),3.28(3H,s),2.93(1H,d,J＝9.5Hz)。

MS(ESI)m/z：觀察到243(正離子)的片段信號。

步驟2：(R)-甲基3-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟2類似的方式，以96％的收率(390mg，無色油)由(R)-甲基3-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(540mg，0.94mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.50(1H,s),7.31(2H,s),5.50(1H,d,J＝8.0Hz),4.79-4.69(1H,m),4.49(1H,dd,J＝9.1,2.6Hz),4.33(1H,8.8,2.9Hz),3.81(3H,s),1.46(9H,s)。

MS(ESI)m/z：432(M+H)⁺。

步驟3：(R)-3-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸

以與中間體1的步驟3類似的方式，以30％的收率(110mg，無色膠狀物)由(R)-甲基3-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸酯(380mg，0.88mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：418(M+H)⁺,416(M-H)^-。

中間體10：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟苯氧基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-(3-氟苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟1類似的方式，以74％的收率(1400mg，無色膠狀物)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(1500mg，4.2mmol)和3-氟苯酚(610mg，5.4mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.60-7.48(6H,m),7.31-7.15(10H,m),6.70-6.55(3H,m),4.22(1H,dd,J＝9.9,5.3Hz),3.99(1H,dd,J＝9.2,6.6Hz),3.76-3.68(1H,m),3.23(3H,s),2.88(1H,d,J＝10.5Hz)。

MS(ESI)m/z：478(M+Na)⁺。

步驟2：(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟苯氧基)丙酸酯

以與中間體1的步驟2類似的方式，以77％的收率(290mg，無色油)由(R)-甲基3-(3-氟苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(550mg，1.2mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.26-7.18(1H,m),6.72-6.57(3H,m),5.48(1H,d,J＝7.9Hz),4.72-4.62(1H,m),4.38(1H,dd,J＝9.2,2.6Hz),4.20(1H,dd,J＝9.2,3.3Hz),3.78(3H,s),1.46(9H,s)。

MS(ESI)m/z：314(M+H)⁺。

步驟3：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟苯氧基)丙酸

以與中間體1的步驟3類似的方式，以29％的收率(80mg，無色膠狀物)由(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟苯氧基)丙酸酯(290mg，0.93mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：300(M+H)⁺,298(M-H)^-。

中間體11：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-甲氧基苯氧基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-(3-甲氧基苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟1類似的方式，以43％的收率(830mg，無色膠狀物)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(1500mg，4.2mmol)和3-甲氧基苯酚(670mg，5.4mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.60-7.50(6H,m),7.30-7.13(10H,m),6.54-6.40(3H,m),4.24(1H,dd,J＝9.2,5.3Hz),4.01(1H,dd,J＝9.2,6.6Hz),3.82(3H,s),3.80-3.70(1H,m),3.23(3H,s),2.88(1H,d,J＝10.5Hz)。

MS(ESI)m/z：觀察到243(正離子)的片段信號。

步驟2：(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-甲氧基苯氧基)丙酸酯

以與中間體1的步驟2類似的方式，以93％的收率(530mg，淺褐色油)由(R)-甲基3-(3-甲氧基苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(820mg，1.8mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.17(1H,t,J＝8.2Hz),6.55-6.44(3H,m),5.49(1H,d,J＝7.9Hz),4.68-4.62(1H,m),4.38(1H,dd,J＝9.6,2.3Hz),4.18(1H,dd,J＝9.2,2.6Hz),3.78(3H,s),3.77(3H,s),1.46(9H,s)。

MS(ESI)m/z：326(M+H)⁺。

步驟3：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-甲氧基苯氧基)丙酸

以與中間體1的步驟3類似的方式，以43％的收率(220mg，無色膠狀物)由(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-甲氧基苯氧基)丙酸酯(530mg，1.6mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：312(M+H)⁺,310(M-H)^-。

中間體12：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2-氟苯氧基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-(2-氟苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟1類似的方式，以71％的收率(890mg，無色膠狀物)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(1000mg，2.8mmol)和2-氟苯酚(400mg，3.6mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.52(6H,d,J＝7.2Hz),7.28-7.15(9H,m),6397-6.87(4H,m),4.32(1H,dd,J＝9.2,5.3Hz),4.06(1H,dd,J＝9.9,6.6Hz),3.78(1H,br s),3.23(3H,s),2.89(1H,br s)。

MS(ESI)m/z：觀察到243(正離子)的片段信號。

步驟2：(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2-氟苯氧基)丙酸酯

以與中間體1的步驟2類似的方式，以89％的收率(550mg，無色油)由(R)-甲基3-(2-氟苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(890mg，2.0mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.10-7.02(2H,m),6.98-6.90(2H,m),5.54(1H,d,J＝7.9Hz),4.71-4.61(1H,m),4.46(1H,dd,J＝9.2,2.6Hz),4.27(1H,dd,J＝9.6,3.0Hz),3.78(3H,s),1.46(9H,s)。

MS(ESI)m/z：314(M+H)⁺。

步驟3：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2-氟苯氧基)丙酸

以與中間體1的步驟3類似的方式，以50％的收率(260mg，無色糖漿)由(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2-氟苯氧基)丙酸酯(550mg，1.7mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：300(M+H)⁺,298(M-H)^-。

中間體13：(R)-2-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酰胺基)-3-(4-氰基苯氧基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-(4-氰基苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟1類似的方式，以49％的收率(630mg，白色固體)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(1000mg，2.8mmol)和4-羥基苯甲腈(660mg，5.5mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.58(2H,d,J＝8.6Hz),7.56-7.48(6H,m),7.30-7.15(9H,m),6.91(2H,d,J＝8.6Hz),4.25(1H,dd,J＝9.2,4.6Hz),4.03(1H,dd,J＝9.2,5.9Hz),3.74(1H,m),3.25(3H,s),2.90(1H,d,J＝9.9Hz)。

MS(ESI)m/z：觀察到243(正離子)的片段信號。

步驟2：(R)-甲基2-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酰胺基)-3-(4-氰基苯氧基)丙酸酯

在室溫下，在(R)-甲基3-(4-氰基苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(630mg，1.4mmol)的DCM(8mL)攪拌溶液中緩慢添加三氟乙酸(3mL)，并在相同溫度下將混合物攪拌2hr。在混合物中添加MeOH(1mL)。將生成的混合物攪拌5min，接著在真空中濃縮。將殘留物溶解于DCM(5mL)中，接著，在室溫下將2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸(280mg，1.4mmol)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(WSC，390mg，2.0mmol)、1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇(HOBt，210mg，1.4mmol)及三乙胺(0.94mL，6.8mmol)依次添加到溶液中。徹夜攪拌之后，將飽和的NaHCO₃水溶液添加到混合物中，并用DCM(30mL×2)萃取混合物。將萃取物經(jīng)Na₂SO₄干燥。進(jìn)行過濾之后，在真空中濃縮濾液。通過管柱層析(硅膠，用25％至50％EtOAc的己烷進(jìn)行洗脫)提純殘留物而獲得作為白色固體的標(biāo)題化合物(220mg，40％的收率)。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.57(2H,d,J＝8.6Hz),7.33(1H,m),6.93(2H,d,J＝8.6Hz),4.97(1H,m),4.84(1H,m),4.43(1H,dd,J＝9.2,3.3Hz),4.29(1H,dd,J＝9.2,2.6Hz),3.78(3H,s),1.49(3H,s),1.47(3H,s),1.33(9H,s)。

MS(ESI)m/z：406(M+H)⁺,404(M-H)^-。

步驟3：(R)-2-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酰胺基)-3-(4-氰基苯氧基)丙酸

以與中間體1的步驟3類似的方式，以24％的收率(51mg，無色油)由(R)-甲基2-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酰胺基)-3-(4-氰基苯氧基)丙酸酯(220mg，0.54mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：392(M+H)⁺。

中間體14：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(萘-2-基氧基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-(萘-2-基氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟1類似的方式，以32％的收率(430mg，白色固體)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(1000mg，2.8mmol)和萘-2-醇(520mg，3.6mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.77-7.70(3H,m),7.56-7.40(7H,m),7.40-7.10(12H,m),4.39(1H,dd,J＝9.2,4.6Hz),4.17-4.08(1H,m),3.82-3.77(1H,m),3.24(3H,s),2.94(1H,d,J＝10.6Hz)。

MS(ESI)m/z：觀察到243(正離子)的片段信號。

步驟2：(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(萘-2-基氧基)丙酸酯

以與中間體1的步驟2類似的方式，以95％的收率(290mg，無色油)由(R)-甲基3-(萘-2-基氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(430mg，0.88mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.78-7.64(3H,m),7.47-7.32(2H,m),7.15-7.09(2H,m),5.55(1H,d,J＝8.6Hz),4.75-4.68(1H,m),4.52(1H,dd,J＝9.2,2.6Hz),4.33(1H,dd,J＝9.2,3.3Hz),3.78(3H,s),1.47(9H,s)。

MS(ESI)m/z：246(M-Boc+H)⁺。

步驟3：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(萘-2-基氧基)丙酸

以與中間體1的步驟3類似的方式，以46％的收率(130mg，無色糖漿)由(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(萘-2-基氧基)丙酸酯(290mg，0.84mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：332(M+H)⁺,330(M-H)^-。

中間體15：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(萘-1-基氧基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-(萘-1-基氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟1類似的方式，以46％的收率(920mg，白色固體)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(1500mg，4.2mmol)和萘-1-醇(780mg，5.4mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 8.16(1H,d,J＝8.6Hz),7.78(1H,d,J＝7.9Hz),7.56(6H,d,J＝7.9Hz),7.50-7.33(4H,m),7.30-7.17(9H,m),6.81(1H,d,J＝7.9Hz),4.46(1H,dd,J＝8.9,4.9Hz),4.26-4.20(1H,m),3.93-3.85(1H,m),3.25(3H,s),3.01(1H,d,J＝10.5Hz)。

MS(ESI)m/z：觀察到243(正離子)的片段信號。

步驟2：(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(萘-1-基氧基)丙酸酯

以與中間體1的步驟2類似的方式，以＞99％的收率(650mg，無色油)由(R)-甲基3-(萘-1-基氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(910mg，1.9mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 8.15-8.12(1H,m),7.81-7.78(1H,m),7.52-7.44(3H,m),7.36(1H,t,J＝7.9Hz),6.78(1H,d,J＝7.9Hz),5.63(1H,d,J＝8.6Hz),4.87-4.77(1H,m),4.52(1H,dd,J＝9.2,2.7Hz),4.42(1H,dd,J＝8.9,2.3Hz),3.79(3H,s),1.46(9H,s)。

MS(ESI)m/z：246(M-Boc+H)⁺。

步驟3：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(萘-1-基氧基)丙酸

以與中間體1的步驟3類似的方式，以69％的收率(420mg，無色糖漿)由(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(萘-1-基氧基)丙酸酯(640mg，1.9mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：332(M+H)⁺,330(M-H)^-。

中間體16：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-((5-氯吡啶-3-基)氧基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-((5-氯吡啶-3-基)氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟1類似的方式，以37％的收率(720mg，白色固體)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(1500mg，4.2mmol)和5-氯吡啶-3-醇(700mg，5.4mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 8.20(1H,d,J＝1.3Hz),8.16(1H,d,J＝2.0Hz),7.53-7.45(6H,m),7.34-7.15(10H,m),4.25(1H,dd,J＝9.2,4.6Hz),4.02(1H,dd,J＝9.2,6.6Hz),3.77-3.69(1H,m),3.27(3H,s),2.95(1H,d,J＝9.9Hz)。

MS(ESI)m/z：觀察到243(正離子)的片段信號。

步驟2：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-((5-氯吡啶-3-基)氧基)丙酸

在室溫下，在(R)-甲基3-((5-氯吡啶-3-基)氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(600mg，1.3mmol)的二惡烷(10mL)溶液中添加6N氫氯酸(3mL)。在回流溫度下，將混合物攪拌4hr。冷卻至室溫之后，在真空中濃縮混合物而獲得白色固體。將白色固體懸浮于二惡烷(5mL)中，并將飽和的NaHCO₃水溶液(1mL)和二-叔丁基二碳酸酯(550mg，2.5mmol)依次添加到混合物中。在室溫下，將混合物攪拌5hr，并用水(40mL)進(jìn)行稀釋。用DCM(10mL×2)清洗混合物，并通過添加2N氫氯酸(～pH5)而使水層酸化。用EtOAc(40mL×2)萃取水層，并將萃取物經(jīng)Na₂SO₄干燥。進(jìn)行過濾之后，在真空中濃縮濾液而獲得作為無色膠狀物的標(biāo)題化合物(390mg，97％的收率)。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 8.24(1H,s),8.18(1H,s),7.32-7.27(1H,m),5.59(1H,d,J＝7.2Hz),4.75-4.66(1H,m),4.53-4.45(1H,m),4.40-4.33(1H,m),1.47(9H,s)。未觀察到COOH。

MS(ESI)m/z：317(M+H)⁺,315(M-H)^-。

中間體17：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氰基苯氧基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-(3-氰基苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟1類似的方式，以23％的收率(580mg，無色固體)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(2000mg，5.5mmol)和3-羥基苯甲腈(1000mg，8.3mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.52(6H,d,J＝7.3Hz),7.50-7.16(11H,m),7.11-7.08(2H,m),4.26-4.21(1H,m),4.03-3.97(1H,m),3.77-3.69(1H,m),3.25(3H,s),2.90(1H,d,J＝9.9Hz)。

MS(ESI)m/z：觀察到243(正離子)的片段信號。

步驟2：(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氰基苯氧基)丙酸酯

以與中間體1的步驟2類似的方式，以93％收率(370mg，淺黃色油)由(R)-甲基3-(3-氰基苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(570mg，1.2mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.41-7.36(1H,m),7.28(1H,d,J＝6.6Hz),7.14-7.10(2H,m),5.48(1H,d,J＝7.9Hz),4.69(1H,d,J＝7.9Hz),4.41(1H,dd,J＝9.2,2.6Hz),4.25(1H,dd,J＝9.2,3.3Hz),3.79(3H,s),1.46,1.49(9H,s)。

MS(ESI)m/z：221(M-Boc+H)⁺。

步驟3：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氰基苯氧基)丙酸

以與中間體1的步驟3類似的方式，以45％的收率(150mg，無色膠狀物)由(R)-甲基2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氰基苯氧基)丙酸酯(360mg，1.1mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：307(M+H)⁺。

中間體18：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(吡啶-2-基氧基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-(吡啶-2-基氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟1類似的方式，分別使用代替雙(2-甲氧基乙基)偶氮二羧酸酯和三苯基膦的(E)-二氮烯-1,2-二基雙(哌啶-1-基甲酮)(ADDP，7000mg，28mmol)和三丁基膦(5600mg，28mmol)，以15％的收率(887mg，無色膠狀物)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(5000mg，14mmol)和吡啶-2-醇(2000mg，21mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：觀察到243(正離子)的片段信號。

步驟2：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(吡啶-2-基氧基)丙酸

以與中間體16的步驟2類似的方式，以38％的收率(210mg，無色膠狀物)由(R)-甲基3-(吡啶-2-基氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(860mg，2.0mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：283(M+H)⁺,281(M-H)^-。

中間體19：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-((5-氟吡啶-3-基)氧基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-((5-氟吡啶-3-基)氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟1類似的方式，以40％的收率(760mg，白色固體)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(1500mg，4.2mmol)和5-氟吡啶-3-醇(560mg，5.0mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：觀察到243(正離子)的片段信號。

步驟2：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-((5-氟吡啶-3-基)氧基)丙酸

以與中間體16的步驟2類似的方式，以46％的收率(230mg，無色膠狀物)由(R)-甲基3-((5-氟吡啶-3-基)氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(760mg，1.7mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：301(M+H)⁺,299(M-H)^-。

中間體20：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟1類似的方式，以81％的收率(2300mg，無色膠狀物)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(2000mg，5.5mmol)和6-(三氟甲基)吡啶-2-醇(900mg，5.5mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.68(1H,t,J＝7.9Hz),7.51(6H,d,J＝7.9Hz),7.28-7.14(10H,m),6.88(1H,d,J＝8.6Hz),4.78(1H,dd,J＝10.9,4.9Hz),4.47(1H,dd,J＝10.9,6.9Hz),3.77(1H,quint,J＝5.6Hz),3.16(3H,s),2.86(1H,d,J＝10.5Hz)。

MS(ESI)m/z：觀察到243(正離子)的片段信號。

步驟2：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)丙酸

以與中間體16的步驟2類似的方式，以70％的收率(580mg，無色固體)由(R)-甲基3-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(1200mg，2.4mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：251(M-Boc+H)⁺,349(M-H)^-。

中間體21：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-氟苯氧基)丙酸

步驟1：(R)-甲基3-(4-氟苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯

以與中間體1的步驟1類似的方式，以15％的收率(95mg，無色膠狀物)由(R)-甲基3-羥基-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(0.50g，1.4mmol)和4-氟苯酚(0.20g，1.8mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：478(M+Na)⁺，且觀察到243(正離子)的片段信號。

步驟2：(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-氟苯氧基)丙酸

以與中間體16的步驟2類似的方式，以72％的收率(45mg，無色油)由(R)-甲基3-(4-氟苯氧基)-2-(三苯甲基氨基)丙酸酯(95mg，0.21mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(270MHz,CDCl₃)：delta 7.00-6.93(2H,m),6.86-6.80(2H,m),5.49(1H,d,J＝7.9Hz),4.68(1H,d,J＝8.6Hz),4.40(1H,dd,J＝9.2,2.6Hz),4.19(1H,dd,J＝9.2,3.3Hz)。

MS(ESI)m/z：300(M+H)⁺,298(M-H)^-。

{表4-1}

{表4-2}

實(shí)施例1：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2,4-二氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2,4-二氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

在氮?dú)夥障?，?R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(100mg，0.25mmol)的EtOAc(3mL)懸浮液冷卻至-5℃，并在相同溫度下，將三乙胺(0.18mL，1.3mmol)滴加到懸浮液中。攪拌20min之后，在相同溫度下，將(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2,4-二氟苯氧基)丙酸(113mg，0.36mmol，中間體1的步驟3)的EtOAc(2mL)溶液和2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環(huán)己烷2,4,6-三氧化物(0.30mL，0.51mmol；在EtOAc中的1.7M溶液)依次添加到混合物中。在-5℃下攪拌1hr之后，通過添加飽和的NaHCO₃水溶液(5mL)而使混合物淬滅。用水稀釋混合物，并用EtOAc(20mL×3)進(jìn)行萃取。用鹽水清洗合并的有機(jī)層，并經(jīng)Na₂SO₄干燥。進(jìn)行過濾之后，在真空中濃縮濾液。通過管柱層析(硅膠，用50％EtOAc的己烷進(jìn)行洗脫)提純殘留物而獲得作為無色固體的標(biāo)題化合物(72mg，52％的收率)。

MS(ESI)m/z：543(M+H)⁺

步驟2：(R)-5-((R)-2-氨基-3-(2,4-二氟苯氧基)丙?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

在0℃下，在((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2,4-二氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(70mg，0.13mmol)的DCM(1mL)攪拌溶液中一次性添加三氟乙酸(1mL)，并在相同溫度下持續(xù)攪拌1hr。在真空中濃縮混合物，并用DCM(5mL)稀釋殘留物。用飽和的NaHCO₃水溶液、接著用鹽水清洗萃取的溶液，并經(jīng)Na₂SO₄干燥。進(jìn)行過濾之后，在真空中濃縮濾液而獲得作為無色膠狀物的標(biāo)題化合物(66mg，＞99％的收率)。

MS(ESI)m/z：443(M+H)⁺

步驟3：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2,4-二氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

在室溫下，在(R)-5-((R)-2-氨基-3-(2,4-二氟苯氧基)丙?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(66mg，0.15mmol)、2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸(38mg，0.19mmol)及三乙胺(0.083mL，0.60mmol)的DCM(1mL)溶液中添加苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU，68mg，0.18mmol)。攪拌1hr之后，在真空中濃縮混合物。使殘留物通過短管柱層析(氨基-凝膠，用EtOAc進(jìn)行洗脫)而獲得作為無色膠狀物的標(biāo)題化合物(60mg，87％的收率)。

MS(ESI)m/z：628(M+H)⁺,626(M-H)^-

步驟4：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2,4-二氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

在0℃下，在(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2,4-二氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(81mg，0.13mmol)的DCM(1mL)攪拌溶液中添加三氟乙酸(1mL)的一部分，并在相同溫度下持續(xù)攪拌2hr。在真空中濃縮混合物，并用DCM(5mL)稀釋殘留物。用飽和的NaHCO₃水溶液、接著用鹽水清洗，并經(jīng)Na₂SO₄干燥。進(jìn)行過濾之后，去除溶劑和揮發(fā)物。通過制備型LC-MS提純殘留物而獲得11mg(16％的收率)標(biāo)題化合物。

將制備型LC-MS和品質(zhì)檢驗(yàn)(QC)方法的條件示于表5。

實(shí)施例2：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以50％的收率(510mg，白色固體)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(800mg，2.0mmol)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-苯氧基丙酸(630mg，2.2mmol，中間體2的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.31-7.15(5H,m),7.10-6.90(3H,m),6.87(2H,d,J＝7.9Hz),5.52-5.42(1H,m),5.23-5.05(2H,m),4.61-4.50(1H,m),4.26-4.08(2H,m),3.23(1H,d,J＝13.2Hz),3.09(3H,s),3.08-2.90(2H,m),2.66-2.50(2H,m),1.45(9H,s)。未觀察到NHBoc。

MS(ESI)m/z：507(M+H)⁺,505(M-H)^-。

步驟2：(R)-5-((R)-2-氨基-3-苯氧基丙?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

以與實(shí)施例1的步驟2類似的方式，以95％的收率(390mg，白色固體)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(800mg，2.0mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：407(M+H)⁺。

步驟3：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟3類似的方式，以99％的收率(560mg，白色固體)由(R)-5-((R)-2-氨基-3-苯氧基丙?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(390mg，0.96mmol)和2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸(230mg，1.2mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.35-7.12(5H,m),7.10-7.04(2H,m),7.00-6.84(3H,m),5.52-5.42(1H,m),5.07(1H,d,J＝12.5Hz),4.85(1H,br s),4.64-4.52(1H,m),4.30-4.22(1H,m),4.16-4.10(1H,m),3.19(1H,d,J＝13.8Hz),3.07(3H,s),3.05-2.85(2H,m),2.64-2.50(2H,m),1.51(3H,s),1.49(3H,s),1.38(9H,s)未觀察到CONH和NHBoc。

MS(ESI)m/z：592(M+H)⁺,590(M-H)^-。

步驟4：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以86％的收率(395mg，白色固體)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(550mg，0.93mmol)制備標(biāo)題化合物。在該情況下，通過管柱層析(NH-凝膠，用0％至80％EtOAc的己烷進(jìn)行洗脫)提純標(biāo)題化合物。

¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)delta 8.45(1H,d,J＝7.3Hz),7.30-7.15(5H,m),7.12-6.85(5H,m),5.45-5.35(1H,m),5.09(1H,d,J＝12.5Hz),4.61(1H,d,J＝10.6Hz),4.24(2H,d,J＝6.6Hz),3.22(1H,d,J＝13.1Hz),3.08(3H,s),3.10-2.85(3H,m),2.65-2.48(2H,m),1.40(3H,s),1.35(3H,s)。未觀察到NH₂。

MS(ESI)m/z：492(M+H)⁺,490(M-H)^-。

產(chǎn)物的一部分通過制備型LC-MS進(jìn)行進(jìn)一步提純而獲得標(biāo)題化合物。

實(shí)施例3：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以53％的收率(73mg，白色固體)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(100mg，0.25mmol)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-氯苯氧基)丙酸(110mg，0.36mmol，中間體3的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：541(M+H)⁺。

步驟2：(R)-5-((R)-2-氨基-3-(4-氯苯氧基)丙?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

以與實(shí)施例1的步驟2類似的方式，以＞99％的收率(61mg，無色膠狀物)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(70mg，0.13mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：441(M+H)⁺。

步驟3：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟3類似的方式，以94％的收率(81mg，無色膠狀物)由(R)-5-((R)-2-氨基-3-(4-氯苯氧基)丙?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(61mg，0.14mmol)和2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸(35mg，0.17mmol)制備標(biāo)題化合物。

¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)delta 7.31-7.18(5H,m),7.09-7.08(2H,m),6.82(2H,d,J＝8.8Hz),5.46(1H,q,J＝7.1Hz),5.08(1H,d,J＝12.5Hz),4.86(1H,s),4.62-4.51(1H,m),4.31-4.20(1H,m),4.16-4.03(1H,m),3.19(1H,d,J＝13.9Hz),3.08-2.86(7H,m),2.65-2.53(2H,m),1.50(3H,s),1.49(3H,s),1.37(9H,s)。

MS(ESI)m/z：626(M+H)⁺,624(M-H)^-。

步驟4：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以16％的收率(11mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(81mg，0.13mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例4：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以61％收率(105mg，無色膠狀物)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(100mg，0.25mmol)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氯苯氧基)丙酸(120mg，0.38mmol，中間體4的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：541(M+H)⁺。

步驟2：(R)-5-((R)-2-氨基-3-(3-氯苯氧基)丙?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

以與實(shí)施例1的步驟2類似的方式，以＞99％的收率(79mg，無色固體)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(95mg，0.18mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：441(M+H)⁺。

步驟3：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟3類似的方式，以＞99％的收率(100mg，無色膠狀物)由(R)-5-((R)-2-氨基-3-(3-氯苯氧基)丙酰基)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(68mg，0.15mmol)和2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸(39mg，0.19mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：626(M+H)⁺,624(M-H)^-。

步驟4：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以14％的收率(11mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(92mg，0.15mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例5：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,5-二氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,5-二氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以47％的收率(86mg，無色膠狀物)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(130mg，0.32mmol)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氯苯氧基)丙酸(130mg，0.38mmol，中間體5的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：575(M+H)⁺。

步驟2：(R)-5-((R)-2-氨基-3-(3,5-二氯苯氧基)丙?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

以與實(shí)施例1的步驟2類似的方式，以＞99％的收率(70mg，無色膠狀物)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,5-二氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(76mg，0.13mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：475(M+H)⁺。

步驟3：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,5-二氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟3類似的方式，以＞99％的收率(89mg，無色膠狀物)由(R)-5-((R)-2-氨基-3-(3,5-二氯苯氧基)丙酰基)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(61mg，0.13mmol)和2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸(33mg，0.16mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：660(M+H)⁺,658(M-H)^-.

步驟4：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,5-二氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以18％的收率(12mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,5-二氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(81mg，0.12mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例6：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-(2-(三氟甲基)苯氧基)丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-(2-(三氟甲基)苯氧基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以66％的收率(77mg，無色膠狀物)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(130mg，0.32mmol)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2-(三氟甲基)苯氧基)丙酸(85mg，0.24mmol，中間體6的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：575(M+H)⁺,573(M-H)^-。

步驟2：(R)-5-((R)-2-氨基-3-(2-(三氟甲基)苯氧基)丙?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

以與實(shí)施例1的步驟2類似的方式，以86％的收率(45mg)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-(2-(三氟甲基)苯氧基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(64mg，0.11mmol)制備標(biāo)題化合物。

步驟3：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-(2-(三氟甲基)苯氧基)丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟3類似的方式，以＞99％的收率(79mg，無色膠狀物)由(R)-5-((R)-2-氨基-3-(2-(三氟甲基)苯氧基)丙酰基)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(45mg，0.095mmol)和2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸(23mg，0.11mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：660(M+H)⁺,658(M-H)^-。

步驟4：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-(2-(三氟甲基)苯氧基)丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以22％的收率(14mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-(2-(三氟甲基)苯氧基)丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(75mg，0.11mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例7：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,4-二氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,4-二氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以66％的收率(73mg，無色膠狀物)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(130mg，0.32mmol)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,4-二氟苯氧基)丙酸(77mg，0.24mmol，中間體7的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：543(M+H)⁺,541(M-H)^-。

步驟2：(R)-5-((R)-2-氨基-3-(3,4-二氟苯氧基)丙?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

以與實(shí)施例1的步驟2類似的方式，以92％的收率(54mg)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,4-二氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(72mg，0.13mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：443(M+H)⁺。

步驟3：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,4-二氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟3類似的方式，以＞99％的收率(91mg，無色膠狀物)由(R)-5-((R)-2-氨基-3-(3,4-二氟苯氧基)丙酰基)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(54mg，0.12mmol)和2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸(23mg，0.11mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：628(M+H)⁺,626(M-H)^-。

步驟4：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,4-二氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以15％的收率(12mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,4-二氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(91mg，0.15mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例8：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以60％的收率(66mg，無色固體)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(80mg，0.20mmol)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2-氯苯氧基)丙酸(77mg，0.24mmol，中間體8的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：541(M+H)⁺,539(M-H)^-。

步驟2：(R)-5-((R)-2-氨基-3-(2-氯苯氧基)丙?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

以與實(shí)施例1的步驟2類似的方式，以＞99％的收率(58mg)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(61mg，0.11mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：441(M+H)⁺。

步驟3：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟3類似的方式，以96％的收率(79mg，無色膠狀物)由(R)-5-((R)-2-氨基-3-(2-氯苯氧基)丙?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(58mg，0.13mmol)和2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸(32mg，0.16mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：626(M+H)⁺,624(M-H)^-。

步驟4：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以22％的收率(13mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氯苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(69mg，0.11mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例9：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以43％的收率(54mg，無色膠狀物)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(80mg，0.20mmol)和(R)-3-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸(100mg，0.24mmol，中間體9的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：643(M+H)⁺,641(M-H)^-。

步驟2：(R)-5-((R)-2-氨基-3-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)丙酰基)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

以與實(shí)施例1的步驟2類似的方式，以91％的收率(40mg)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(52mg，0.081mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：543(M+H)⁺。

步驟3：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟3類似的方式，以＞99％的收率(55mg，無色膠狀物)由(R)-5-((R)-2-氨基-3-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)丙?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(40mg，0.074mmol)和2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸(32mg，0.16mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：728(M+H)⁺,726(M-H)^-。

步驟4：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以32％的收率(14mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(50mg，0.069mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例10：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以45％的收率(48mg，無色膠狀物)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(80mg，0.20mmol)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟苯氧基)丙酸(79mg，0.26mmol，中間體10的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：525(M+H)⁺,523(M-H)^-。

步驟2：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

在0℃下，在((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(30mg，0.057mmol)的DCM(2mL)攪拌溶液中一次性添加三氟乙酸(2mL)，并在相同溫度下持續(xù)攪拌2hr。在真空中濃縮混合物而獲得黃色糖漿。將殘留物溶解于DCM(4mL)中。在室溫下，將混合物添加到三乙胺(0.017mL，0.23mmol)和苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU，27mg，0.072mmol)中。攪拌1hr之后，在真空中濃縮混合物。使殘留物通過短管柱層析(氨基-凝膠，用EtOAc進(jìn)行洗脫)而獲得作為白色固體的標(biāo)題化合物(51mg，＞99％的收率)。

MS(ESI)m/z：610(M+H)⁺,608(M-H)^-。

步驟3：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以32％的收率(13mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(48mg，0.079mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例11：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-甲氧基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-甲氧基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以62％的收率(85mg，無色膠狀物)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(80mg，0.20mmol)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-甲氧基苯氧基)丙酸(103mg，0.33mmol，中間體11的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：537(M+H)⁺,535(M-H)^-。

步驟2：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-甲氧基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例10的步驟2類似的方式，以96％的收率(78mg，白色固體)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-甲氧基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(70mg，0.13mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：622(M+H)⁺,620(M-H)^-。

步驟3：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-甲氧基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以18％的收率(9mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-甲氧基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(60mg，0.097mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例12：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以57％的收率(76mg，無色膠狀物)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(100mg，0.25mmol)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2-氟苯氧基)丙酸(114mg，0.38mmol，中間體12的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：525(M+H)⁺,523(M-H)^-。

步驟2：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例10的步驟2類似的方式，以＞99％的收率(74mg，無色膠狀物)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(60mg，0.11mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：610(M+H)⁺,608(M-H)^-。

步驟3：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以22％的收率(11mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(60mg，0.098mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例13：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(萘-2-基氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(萘-2-基氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以45％的收率(90mg，白色固體)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(140mg，0.36mmol)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(萘-2-基氧基)丙酸(130mg，0.39mmol，中間體14的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：557(M+H)⁺,555(M-H)^-。

步驟2：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(萘-2-基氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例10的步驟2類似的方式，以＞99％的收率(100mg，無色膠狀物)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(萘-2-基氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(87mg，0.15mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：642(M+H)⁺,640(M-H)^-。

步驟3：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(萘-2-基氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以14％的收率(13mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(萘-2-基氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.16mmol)制備標(biāo)題化合物.

實(shí)施例14：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(萘-1-基氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(萘-1-基氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以67％的收率(140mg，無色膠狀物)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(150mg，0.38mmol)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(萘-1-基氧基)丙酸(150mg，0.46mmol，中間體15的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：557(M+H)⁺,555(M-H)^-。

步驟2：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(萘-1-基氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例10的步驟2類似的方式，以82％的收率(120mg，無色膠狀物)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(萘-1-基氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(130mg，0.23mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：642(M+H)⁺,640(M-H)^-。

步驟3：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(萘-1-基氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以14％的收率(13mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(萘-1-基氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(110mg，0.17mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例15：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-((5-氯吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-((5-氯吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以53％的收率(170mg，無色膠狀物)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(250mg，0.64mmol)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-((5-氯吡啶-3-基)氧基)丙酸(180mg，0.58mmol，中間體16的步驟2)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：542(M+H)⁺,540(M-H)^-。

步驟2：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-((5-氯吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例10的步驟1類似的方式，以86％的收率(170mg，白色固體)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-((5-氯吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(160mg，0.30mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：627(M+H)⁺,625(M-H)^-。

步驟3：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-((5-氯吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以11％的收率(16mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-((5-氯吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(170mg，0.27mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例16：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氰基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氰基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以42％的收率(110mg，無色膠狀物)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(190mg，0.48mmol)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氰基苯氧基)丙酸(150mg，0.48mmol，中間體17的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：532(M+H)⁺,530(M-H)^-。

步驟2：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氰基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例10的步驟2類似的方式，以＞99％的收率(113mg，無色膠狀物)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氰基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(86mg，0.16mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：617(M+H)⁺,615(M-H)^-。

步驟3：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氰基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以14％的收率(12mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氰基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.17mmol，實(shí)施例X的步驟X)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例17：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-(吡啶-2-基氧基)丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-(吡啶-2-基氧基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以68％的收率(140mg，無色膠狀物)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(160mg，0.41mmol)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(吡啶-2-基氧基)丙酸(140mg，0.49mmol，中間體18的步驟2)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：508(M+H)⁺,506(M-H)^-。

步驟2：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-(吡啶-2-基氧基)丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例10的步驟2類似的方式，以86％的收率(130mg，無色固體)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-(吡啶-2-基氧基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(130mg，0.25mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：593(M+H)⁺,591(M-H)^-。

步驟3：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-(吡啶-2-基氧基)丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以12％的收率(12mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-(吡啶-2-基氧基)丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(120mg，0.20mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例18：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-((5-氟吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-((5-氟吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以58％的收率(120mg，無色固體)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(150mg，0.38mmol)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-((5-氟吡啶-3-基)氧基)丙酸(130mg，0.42mmol，中間體19的步驟2)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：526(M+H)⁺,524(M-H)^-

步驟2：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-((5-氟吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例10的步驟2類似的方式，以95％的收率(120mg，無色膠狀物)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-((5-氟吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(110mg，0.20mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：611(M+H)⁺,609(M-H)^-。

步驟3：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-((5-氟吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以15％的收率(13mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-((5-氟吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(110mg，0.17mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例19：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以78％的收率(170mg，無色固體)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(150mg，0.38mmol)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)丙酸(150mg，0.42mmol，中間體20的步驟2)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：576(M+H)⁺,574(M-H)^-

步驟2：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例10的步驟2類似的方式，以98％的收率(180mg，無色膠狀物)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(160mg，0.28mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：661(M+H)⁺,659(M-H)^-。

步驟3：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以8％的收率(12mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(170mg，0.26mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例20：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氰基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氰基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以36％的收率(29mg，白色固體)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(51mg，0.13mmol)和(R)-2-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酰胺基)-3-(4-氰基苯氧基)丙酸(51mg，0.13mmol，中間體13的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：617(M+H)⁺,617(M-H)^-

步驟2：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氰基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以54％的收率(13mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氰基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(29mg，0.047mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例21：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((2R)-1-(3a-芐基-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(非對映異構(gòu)物混合物)

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以84％的收率(120mg，無色膠狀物)由3a-芐基-2-(2,2-二氟乙基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮2,2,2-三氟乙酸酯(100mg，0.26mmol，核1的步驟2)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-苯氧基丙酸(86mg，0.31mmol，中間體2的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：557(M+H)⁺,555(M-H)^-

步驟2：(1-(((2R)-1-(3a-芐基-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(非對映異構(gòu)物混合物)

以與實(shí)施例10的步驟2類似的方式，以＞99％的收率(200mg，白色固體)由((2R)-1-(3a-芐基-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(120mg，0.22mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：642(M+H)⁺,640(M-H)^-。

步驟3：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以6％的收率(10mg)由(1-(((2R)-1-(3a-芐基-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(200mg，0.31mmol)制備標(biāo)題化合物。

在該情況下，在制備型LC-MS條件下，收集所希望的非對映異構(gòu)物作為極性更強(qiáng)的非對映異構(gòu)物。

實(shí)施例22：2-氨基-N-((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以40％的收率(50mg，無色膠狀物)由(R)-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2S,3S)-2,3-二羥基琥珀酸酯(100mg，0.23mmol，核2的步驟3)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-苯氧基丙酸(76mg，0.27mmol,中間體2的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：558(M+H)⁺,556(M-H)^-。

步驟2：(R)-5-((R)-2-氨基-3-苯氧基丙酰基)-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

在室溫下，在((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(50mg，0.090mmol)的DCM(1mL)攪拌溶液中添加三氟乙酸(5mL)，并在相同溫度下將混合物攪拌30min。在真空中濃縮混合物。通過強(qiáng)陽離子交換柱(Isolute(注冊商標(biāo))SCX，1g/6mL，Biotage)提純殘留物而獲得作為透明無色膠狀物的標(biāo)題化合物(35mg，84％的收率)。

MS(ESI)m/z：458(M+H)⁺。

步驟3：2-氨基-N-((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-3-苯氧基丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

將(R)-5-((R)-2-氨基-3-苯氧基丙?；?-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(34mg，0.074mmol)的溶液和2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸(18mg，0.089mmol)的EtOAc(2mL)冷卻至0℃。在混合物中依次添加三乙胺(0.031mL，0.22mmol)和2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環(huán)己烷2,4,6-三氧化物(0.087mL，0.15mmol；1.7M溶液的EtOAc)，并在相同溫度下，將生成的混合物攪拌1hr。在真空中濃縮混合物。接著，將三氟乙酸(2mL)添加到殘留物中，并在室溫下將混合物攪拌30min。在真空中濃縮混合物。通過強(qiáng)陽離子交換柱(BondElute(注冊商標(biāo))SCX，1g/6mL，Varian Inc.)提純殘留物，接著通過制備型LC-MS進(jìn)一步提純而獲得10mg(25％的收率)標(biāo)題化合物。

實(shí)施例23：2-氨基-N-((R)-3-(2-氯苯氧基)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-3-(2-氯苯氧基)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以30％的收率(40mg，無色膠狀物)由(R)-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2S,3S)-2,3-二羥基琥珀酸酯(100mg，0.23mmol，核2的步驟3)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2-氯苯氧基)丙酸(85mg，0.27mmol，中間體8的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：592(M+H)⁺,590(M-H)^-。

步驟2：(R)-5-((R)-2-氨基-3-(2-氯苯氧基)丙?；?-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

以與實(shí)施例22的步驟2類似的方式，以89％的收率(33mg，無色油)由((R)-3-(2-氯苯氧基)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(40mg，0.068mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：492(M+H)⁺。

步驟3：2-氨基-N-((R)-3-(2-氯苯氧基)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例22的步驟3類似的方式，以28％的收率(10mg)由(R)-5-((R)-2-氨基-3-(2-氯苯氧基)丙酰基)-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(30mg，0.060mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例24：2-氨基-N-((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以31％的收率(41mg，無色膠狀物)由(R)-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2S,3S)-2,3-二羥基琥珀酸酯(100mg，0.23mmol，核2的步驟3)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(2-氟苯氧基)丙酸(81mg，0.27mmol，中間體12的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：576(M+H)⁺,574(M-H)^-。

步驟2：(R)-5-((R)-2-氨基-3-(2-氟苯氧基)丙?；?-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

以與實(shí)施例22的步驟2類似的方式，以92％的收率(31mg，無色油)由((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(41mg，0.071mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：476(M+H)⁺。

步驟3：2-氨基-N-((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(2-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例22的步驟3類似的方式，以30％的收率(11mg)由(R)-5-((R)-2-氨基-3-(2-氟苯氧基)丙酰基)-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(31mg，0.065mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例25：2-氨基-N-((R)-3-(3-氯苯氧基)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-3-(3-氯苯氧基)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以37％的收率(49mg，無色膠狀物)由(R)-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2S,3S)-2,3-二羥基琥珀酸酯(100mg，0.23mmol，核2的步驟3)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氯苯氧基)丙酸(85mg，0.27mmol，中間體4的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：592(M+H)⁺,590(M-H)^-。

步驟2：(R)-5-((R)-2-氨基-3-(3-氯苯氧基)丙?；?-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

以與實(shí)施例22的步驟2類似的方式，以87％的收率(36mg，無色油)由((R)-3-(3-氯苯氧基)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(49mg，0.083mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：492(M+H)⁺。

步驟3：2-氨基-N-((R)-3-(3-氯苯氧基)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例22的步驟3類似的方式，以22％的收率(9mg)由(R)-5-((R)-2-氨基-3-(3-氯苯氧基)丙?；?-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(36mg，0.072mmol，實(shí)施例22的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例26：2-氨基-N-((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-甲氧基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-甲氧基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以48％的收率(64mg，無色膠狀物)由(R)-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2S,3S)-2,3-二羥基琥珀酸酯(100mg，0.23mmol，核2的步驟3)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-甲氧基苯氧基)丙酸(84mg，0.27mmol，中間體11的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：588(M+H)⁺,586(M-H)^-。

步驟2：(R)-5-((R)-2-氨基-3-(3-甲氧基苯氧基)丙?；?-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

以與實(shí)施例22的步驟2類似的方式，以82％的收率(43mg，無色油)由((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-甲氧基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(64mg，0.11mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：488(M+H)⁺。

步驟3：2-氨基-N-((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-甲氧基苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例22的步驟3類似的方式，以24％的收率(12mg)由(R)-5-((R)-2-氨基-3-(3-甲氧基苯氧基)丙?；?-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(43mg，0.089mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例27：2-氨基-N-((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以36％的收率(47mg，無色膠狀物)由(R)-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2S,3S)-2,3-二羥基琥珀酸酯(100mg，0.23mmol，核2的步驟3)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-氟苯氧基)丙酸(100mg，0.34mmol，中間體10的步驟3)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：576(M+H)⁺,574(M-H)^-。

步驟2：(R)-5-((R)-2-氨基-3-(3-氟苯氧基)丙酰基)-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

以與實(shí)施例22的步驟2類似的方式，以91％的收率(35mg，無色油)由((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(47mg，0.082mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：476(M+H)⁺。

步驟3：2-氨基-N-((R)-1-((R)-2-(2,2-二氟乙基)-3-氧代-3a-(吡啶-2-基甲基)-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(3-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例22的步驟3類似的方式，以36％的收率(15mg)由(R)-5-((R)-2-氨基-3-(3-氟苯氧基)丙?；?-2-(2,2-二氟乙基)-3a-(吡啶-2-基甲基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(35mg，0.074mmol)制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例28：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟1類似的方式，以56％的收率(45mg，白色固體)由(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(60mg，0.15mmol)和(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-氟苯氧基)丙酸(45mg，0.15mmol，中間體16的步驟2)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：525(M+H)⁺,523(M-H)^-。

步驟2：(R)-5-((R)-2-氨基-3-(4-氟苯氧基)丙酰基)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

以與實(shí)施例1的步驟2類似的方式，以定量收率(37mg，無色油)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(45mg，0.086mmol)制備標(biāo)題化合物。

步驟3：(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟3類似的方式，以96％的收率(50mg，無色油)由(R)-5-((R)-2-氨基-3-(4-氟苯氧基)丙酰基)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(37mg，0.86mmol)和2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸(26mg，1.3mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：610(M+H)⁺。

步驟4：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以22％的收率(11mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-3-(4-氟苯氧基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(45mg，0.074mmol)制備標(biāo)題化合物。

將制備型LC-MS和品質(zhì)檢驗(yàn)(QC)方法的條件示于表5。

{表5-1}

{表5-2}

{表5-3}

比較例1：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-4-苯氧基丁烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-羥基-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

在氮?dú)夥障?，?R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯(1500mg，3.81mmol)的EtOAc(30mL)懸浮液冷卻至-50℃，并在相同溫度下滴加三乙胺(1.06mL，7.62mmol)來實(shí)現(xiàn)(R)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(2R,3R)-2,3-二羥基琥珀酸酯的游離堿化(freebasing)及三乙基酒石酸銨(triethylammonium tartrate)的鹽形成。將混合物攪拌15min之后，將補(bǔ)加量的三乙胺(1.59mL，11.4mmol)滴加到混合物中，并在-50℃下將混合物攪拌10min。在混合物中添加溶解于EtOAc(20mL)中的三乙基銨(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-羥基丁酸酯(triethylammonium(R)-2-((tert-butoxycarbonyl)amino)-4-hydroxybutanoate)15min，并添加2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三磷雜環(huán)己烷2,4,6-三氧化物(4.49mL，7.63mmol，EtOAc中的1.7M溶液)10min。在-50℃下，將混合物另行攪拌2hr，并在相同溫度下，通過添加飽和的NaHCO₃水溶液(50mL)使反應(yīng)淬滅。將混合物加熱至室溫，用水(50mL)稀釋，并用EtOAc(50mL×3)萃取。用鹽水清洗合并的有機(jī)層，并經(jīng)Na₂SO₄干燥。進(jìn)行過濾之后，在真空中濃縮濾液。通過管柱層析(硅膠，用5％MeOH的EtOAc進(jìn)行洗脫)提純殘留物而獲得作為無色固體的標(biāo)題化合物(1170mg，69％的收率)。

MS(ESI)m/z：445(M+H)⁺。

步驟2：

((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-4-苯氧基丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

在0℃下，在((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-羥基-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(200mg，0.45mmol)、苯酚(64mg，0.68mmol)及三苯基膦(236mg，0.90mmol)的THF(8mL)溶液中逐滴添加雙(2-甲氧基乙基)偶氮二羧酸酯(211mg，0.90mmol)的THF(1mL)溶液。在室溫下徹夜攪拌之后，用水稀釋混合物，并用EtOAc萃取。用飽和的NaHCO₃水溶液和鹽水清洗萃取物，并經(jīng)Na₂SO₄干燥。進(jìn)行過濾之后，在真空中濃縮濾液。通過管柱層析(硅膠，15％至50％EtOAc的己烷)提純殘留物而獲得作為白色固體的標(biāo)題化合物(194mg，83％的收率)。

MS(ESI)m/z：521(M+H)⁺。

步驟3：

(R)-5-((R)-2-氨基-4-苯氧基丁?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

在0℃下，在((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-4-苯氧基丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(194mg，0.37mmol)的DCM(5mL)溶液中添加三氟乙酸(2mL)，并在相同溫度下將混合物攪拌30min。接著，在真空中濃縮混合物，用DCM稀釋殘留物，用飽和的NaHCO₃水溶液、接著用鹽水清洗混合物，并經(jīng)Na₂SO₄干燥。進(jìn)行過濾之后，在真空中濃縮濾液。通過管柱層析(硅膠，用10％至50％EtOAc的己烷進(jìn)行洗脫)提純殘留物而獲得作為無色膠狀物的標(biāo)題化合物(104mg，67％的收率)。

MS(ESI)m/z：421(M+H)⁺。

步驟4：

(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-4-苯氧基丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

在室溫下，在(R)-5-((R)-2-氨基-4-苯氧基丁?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(100mg，0.24mmol)、2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-甲基丙酸(73mg，0.36mmol)及三乙胺(0.13mL，0.95mmol)的DCM(6mL)懸浮液中添加苯并三氮唑-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU，48mg，0.36mmol)。在相同溫度下徹夜攪拌之后，在真空中濃縮混合物。使殘留物通過短管柱層析(硅-膠，用2％至20％EtOAc的己烷進(jìn)行洗脫)而獲得作為無色固體的標(biāo)題化合物(131mg，91％的收率)。

MS(ESI)m/z：506(M-Boc+H)⁺。

步驟5：

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-4-苯氧基丁烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

在0℃下，在(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-1-氧代-4-苯氧基丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(130mg，0.22mmol)的DCM(4mL)溶液中添加三氟乙酸(2mL)。在相同溫度下攪拌2hr之后，在真空中濃縮混合物。用DCM稀釋殘留物，用飽和的NaHCO₃水溶液和鹽水清洗混合物，并經(jīng)Na₂SO₄干燥。進(jìn)行過濾之后，去除過濾的溶劑和揮發(fā)物。通過制備型LC-MS提純殘留物而獲得9.4mg(9％的收率)作為淺褐色固體的標(biāo)題化合物。

將制備型LC-MS和品質(zhì)檢驗(yàn)(QC)方法的條件示于表6。

比較例2：2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(3,4-二氟苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：

((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(3,4-二氟苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟2類似的方式，以＞99％的收率(187mg，油)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-羥基-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，0.34mmol)和3,4-二氟苯酚(132mg，1.0mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：557(M+H)⁺,555(M-H)^-。

步驟2：

(R)-5-((R)-2-氨基-4-(3,4-二氟苯氧基)丁?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

以與實(shí)施例1的步驟3類似的方式，以41％的收率(62mg，黃色固體)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(3,4-二氟苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(187mg，0.34mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：457(M+H)⁺。

步驟3：

(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(3,4-二氟苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以＞99％的收率(84mg，無色固體)由(R)-5-((R)-2-氨基-4-(3,4-二氟苯氧基)丁?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(60mg，0.13mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：542(M-Boc+H)⁺。

步驟4：

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(3,4-二氟苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟5類似的方式，以12％的收率(9.3mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(3,4-二氟苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(84mg，0.13mmol)制備標(biāo)題化合物。

比較例3：

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：

((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟2類似的方式，以45％的收率(213mg，白色固體)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-羥基-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(130mg，0.29mmol)和3,5-雙(三氟甲基)苯酚(202mg，0.88mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：601(M-^tBu+H)⁺。

步驟2：

(R)-5-((R)-2-氨基-4-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)丁?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

以與實(shí)施例1的步驟3類似的方式，以62％的收率(50mg，褐色固體)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(213mg，0.15mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：557(M+H)⁺。

步驟3：

(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以＞99％的收率(67mg，白色固體)由(R)-5-((R)-2-氨基-4-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)丁酰基)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(50mg，0.090mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：742(M+H)⁺。

步驟4：

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟5類似的方式，以23％的收率(12mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(3,5-雙(三氟甲基)苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(59mg，0.080mmol)制備標(biāo)題化合物。

比較例4：

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(4-氟苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：

((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(4-氟苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟2類似的方式，以45％的收率(213mg，白色固體)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-羥基-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(60mg，0.14mmol)和4-氟苯酚(30mg，0.27mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：601(M-^tBu+H)⁺。

步驟2：

(R)-5-((R)-2-氨基-4-(4-氟苯氧基)丁?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

以與實(shí)施例1的步驟3類似的方式，以13％的收率(24mg，褐色膠狀物)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(4-氟苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(191mg，0.43mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：439(M+H)⁺。

步驟3：

(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(4-氟苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以82％的收率(28mg，無色膠狀物)由(R)-5-((R)-2-氨基-4-(4-氟苯氧基)丁酰基)-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(24mg，0.055mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：624(M+H)⁺,622(M-H)^-。

步驟4：

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(4-氟苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟5類似的方式，以42％的收率(9.8mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(4-氟苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(28mg，0.045mmol)制備標(biāo)題化合物。

比較例5：

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-((5-氟吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丁烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：

((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-((5-氟吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟2類似的方式，以＞99％的收率(182mg，淺褐色膠狀物)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-羥基-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，0.34mmol)和5-氟吡啶-3-醇(57mg，0.51mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：540(M+H)⁺。

步驟2：

(R)-5-((R)-2-氨基-4-((5-氟吡啶-3-基)氧基)丁?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮

以與實(shí)施例1的步驟3類似的方式，以21％的收率(32mg，淺褐色固體)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-((5-氟吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(182mg，0.34mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：440(M+H)⁺。

步驟3：

(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-((5-氟吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以89％的收率(38mg，淺褐色固體)由(R)-5-((R)-2-氨基-4-((5-氟吡啶-3-基)氧基)丁?；?-3a-芐基-2-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3(3aH)-酮(30mg，0.068mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：625(M+H)⁺,623(M-H)^-。

步驟4：

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-((5-氟吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丁烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟5類似的方式，以32％的收率(9.7mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-((5-氟吡啶-3-基)氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(38mg，0.061mmol)制備標(biāo)題化合物。

比較例6：

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(3-氰基苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

步驟1：

((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(3-氰基苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

在0℃下，在((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-羥基-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，0.34mmol)、3-羥基苯甲腈(60mg，0.51mmol)及三丁基膦(0.17mL，0.38mmol)的THF(2mL)溶液中逐滴添加1,1’-(偶氮羰基)-二哌啶(170mg，0.65mmol)的THF(4mL)溶液。在室溫下攪拌3天之后，將混合物用飽和的NaHCO₃水溶液和EtOAc稀釋來進(jìn)行分離。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥。進(jìn)行過濾之后，在真空中濃縮濾液。通過管柱層析(硅膠，50％至75％的EtOAc的己烷)提純殘留物而獲得作為無色膠狀物的標(biāo)題化合物(105mg，57％的收率)。

MS(ESI)m/z：546(M+H)⁺,544(M-H)^-。

步驟2：

3-((R)-3-氨基-4-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-氧代丁氧基)苯甲腈

以與實(shí)施例1的步驟3類似的方式，以＞99％的收率(74mg，淺褐色油)由((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(3-氰基苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(91mg，0.17mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：446(M+H)⁺。

步驟3：

(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(3-氰基苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯

以與實(shí)施例1的步驟4類似的方式，以＞99％的收率(105mg，黃色膠狀物)由3-((R)-3-氨基-4-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-氧代丁氧基)苯甲腈(74mg，0.17mmol)制備標(biāo)題化合物。

MS(ESI)m/z：631(M+H)⁺,629(M-H)^-。

步驟4：

2-氨基-N-((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(3-氰基苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)-2-甲基丙酰胺

以與實(shí)施例1的步驟5類似的方式，以19％的收率(17mg)由(1-(((R)-1-((R)-3a-芐基-2-甲基-3-氧代-3a,4,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(3H)-基)-4-(3-氰基苯氧基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(105mg，0.17mmol)制備標(biāo)題化合物。

{表6}

體外藥理學(xué)測定

在穩(wěn)定表達(dá)人生長激素釋放肽受體的HEK293細(xì)胞中由生長激素釋放肽受體激動(dòng)活性誘導(dǎo)的Ca²⁺內(nèi)流的測量

在37℃下，將穩(wěn)定表達(dá)人生長激素釋放肽受體的HEK293細(xì)胞在5％CO₂的加濕培養(yǎng)箱中保持于添加有10％胎牛血清、100單位/ml青霉素、100microg/ml鏈霉素及500microg/ml G418的達(dá)爾伯克氏改良伊格爾培養(yǎng)基(Dulbecco’s modified Eagle medium)(高葡萄糖)，并使其生長至60-80％的細(xì)胞匯合度(confluence)。在測定前一天，將細(xì)胞以10,000細(xì)胞/孔的密度接種于涂有多聚-D-賴氨酸的384-孔板(BD FALCON)，并在培養(yǎng)箱中徹夜培養(yǎng)。

在測定當(dāng)天，用分析緩沖液(20mM HEPES，pH7.4的Hanks’平衡鹽溶液)將細(xì)胞清洗三次，并在室溫下培養(yǎng)1小時(shí)，從而加載0.5microM Fluo-4AM試劑(Invitrogen)。

去除Fluo-4，并用分析緩沖液清洗之后，在細(xì)胞中添加各種化合物的濃縮液。用熒光成像讀板儀(fluorescence imaging plate reader)FDSS6000(Hamamatsu Photonics)監(jiān)控細(xì)胞內(nèi)鈣濃度的變化。

由11-點(diǎn)劑量-反應(yīng)研究確定本發(fā)明的化合物的EC₅₀值。使用各數(shù)據(jù)點(diǎn)的復(fù)孔(duplicate wells)平均值來生成曲線。最后，使用通過XL擬合(ID Business Solutions Ltd)確定的最佳擬合劑量曲線來計(jì)算出EC₅₀值。

所有被測化合物在上述測定中顯示出小于約500nanoM的EC₅₀。

優(yōu)選化合物在上述測定中顯示出小于約50nanoM的EC₅₀。

進(jìn)一步優(yōu)選化合物在上述測定中顯示出小于約10nanoM的EC₅₀。

優(yōu)選化合物如下：

實(shí)施例1-8、10-14、16及21-27。

進(jìn)一步優(yōu)選化合物如下：

實(shí)施例9、17、18及20。

表7.絲氨酸衍生物與高絲氨酸衍生物之間的生長激素釋放肽EC₅₀的比例

{表7}

體內(nèi)藥理學(xué)測定

在有意識(shí)的小鼠中的生長激素(GH)反應(yīng)

從Charles River Japan購入雌性BALB/c小鼠(7周齡)，并在每一個(gè)籠子容納四只或五只動(dòng)物。徹夜禁食之后，口服給藥測試化合物。在給藥后的5、10、30分鐘，采集血液樣品。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)使用兩只或三只動(dòng)物。使用EIA試劑盒(Rat Growth Hormone EIA KIT，SPI-Bio,France)測定小鼠GH的血漿濃度。

本發(fā)明的化合物在上述測定中顯示出大于等于15ng/ml的小鼠GH的血漿濃度。

麻醉的大鼠一般用于研究生長激素釋放肽化合物(常規(guī)方法參考以下：Endocrinol Japan 31(1984)539-547,Journal of Endocrinology 171(2001)481-489,Gastroenterology 123(2002)1120-1128,Peptides 32(2011)1001-1007)。在常規(guī)測定中，需要靜脈內(nèi)給藥測試化合物，因此該等不適用于口服藥物的探索性調(diào)研。但是，上述測定可在禁食狀態(tài)下口服給藥，其在藥物探索中對測試化合物的生長激素釋放的評估有用。這是用于評估生長激素釋放的，在有意識(shí)的禁食小鼠中生長激素(GH)反應(yīng)的測定過程的第一個(gè)實(shí)例。

在大鼠中順鉑-誘導(dǎo)的惡病質(zhì)/厭食癥的影響

從Japan SLC,Inc.購入雄性Wistar大鼠(7-8周齡)，在12-小時(shí)光照、12-小時(shí)黑暗的循環(huán)(早上8點(diǎn)開燈)下，分別單獨(dú)地容納于溫度和濕度經(jīng)控制的腔室中。使大鼠適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境至少5天，并進(jìn)行兩次處理。隨意供給食物和水。大鼠被分類為所謂的假手術(shù)對照組和順鉑處理組這兩組。從第0天至第2天，在光照周期的末期腹膜內(nèi)給藥順鉑(0.6mg/kg/day，Wako Pure Chemical)。對于假手術(shù)大鼠僅提供生理鹽水。在即將給藥順鉑之前，將測試化合物口服給藥3天(從第0天至第2天)。為了預(yù)防順鉑-誘導(dǎo)的中毒性腎損害，在給藥鹽或順鉑之后，立即皮下給藥2-3mL的生理鹽水。從第0天至第4天，每天測定體重及食物消耗量。

在用順鉑處理的大鼠中觀察到體重及食物消耗量統(tǒng)計(jì)上的顯著減少?；衔锏目诜o藥使用順鉑處理的大鼠的體重及食物消耗量顯著增加。

有一些關(guān)于生長激素釋放肽在短期內(nèi)顯示出影響減少食物的消耗量的報(bào)道(常規(guī)方法參考以下：Endocrinology 149(2008)455-460,Endocrinology 151(2010)3773-3782,Neurogastroenterol Motil 25(2013)373-e292,Peptides 46(2013)13-19,Vitamins and Hormones 92(2013)301-317)。但沒有關(guān)于在5天的研究中，生長激素釋放肽激動(dòng)劑顯示出抑制持續(xù)的體重降低和抑制食物攝取量的減少的報(bào)道。當(dāng)適用5天常規(guī)測定方法時(shí)，該等研究因大鼠中的順鉑-誘導(dǎo)的中毒性腎損害而未能獲得成功。為了解決該問題作出了巨大努力。最后，驚奇地發(fā)現(xiàn)如下改變條件會(huì)帶來成功的結(jié)果：1)在傍晚給藥；2)使用適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境至少5天且至少兩次被處理得當(dāng)?shù)拇笫?；?)加載鹽，其對惡病質(zhì)/厭食癥的評估有用。這是大鼠中順鉑-誘導(dǎo)的惡病質(zhì)/厭食癥的測定過程中的首例。

對承載有(bearing)AH-130細(xì)胞的大鼠中的惡病質(zhì)的影響

從Japan SLC,Inc.購入雄性Wistar大鼠(4周齡)，在12-小時(shí)光照、12-小時(shí)黑暗的循環(huán)(早上8點(diǎn)開燈)下，分別單獨(dú)地容納于溫度和濕度經(jīng)控制的腔室中。使大鼠適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境至少5天，并進(jìn)行兩次處理。隨意供給食物和水。大鼠被分類為所謂的假手術(shù)對照組和腫瘤承載(tumor bearers)組。在第0天，后者腹膜內(nèi)注射大于1×10⁸的AH-130腹水肝癌細(xì)胞(Tohoku University,Sendai,Japan)。對于假手術(shù)大鼠僅提供PBS。腫瘤承載組進(jìn)一步分類為處理組和未處理組，前者在光照周期的末期口服給藥測試化合物9天(第0天至第8天)。一周測定兩次體重。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，用CO₂處死大鼠，解剖胸大肌并進(jìn)行稱重。

在接種AH-130腹水肝癌細(xì)胞5天后，與假手術(shù)組相比，體重明顯減少。在給藥本發(fā)明的化合物的大鼠中，與對照組相比，第9天的體重及胸大肌重量顯著增加。

沒有關(guān)于生長激素釋放肽激動(dòng)劑抑制持續(xù)的體重降低的報(bào)道。為了解決該問題作出了巨大努力。最后，驚奇地發(fā)現(xiàn)如下改變條件會(huì)帶來成功的結(jié)果：1)利用未成熟的大鼠來代替成熟大鼠；2)增加細(xì)胞數(shù)(大于1×10⁸的AH-130腹水肝癌細(xì)胞)；及3)在傍晚給藥。上述測定過程對藥物探索中的惡病質(zhì)的評估有用。這是在承載有AH-130細(xì)胞的大鼠中的惡病質(zhì)(體重降低及肌肉萎縮)的測定過程中的第一個(gè)成功的實(shí)施例。