本發(fā)明涉及藥物化學領域，具體涉及一種吡啶并氮雜環(huán)化合物、其異構體及藥學上可接受的鹽或藥學上可接受的溶劑合物，其制備方法以及包含所述化合物的組合物。本發(fā)明還涉及所述化合物、其異構體及藥學上可接受的鹽及藥物組合物作為多靶點蛋白激酶抑制劑在制備用于治療腫瘤疾病等與蛋白激酶特別是c-Met有關的疾病的藥物中的用途。

背景技術：

世界衛(wèi)生組織(WHO)在《全球癌癥報告2014》稱，2012年全球癌癥患者為1400萬人，預計到2025年遞增至1900萬人，到2035年將達到2400萬人。2012年，中國新增307萬癌癥患者并造成約220萬人死亡，分別占全球總量的21.9％和26.8％。在中國，每五個死亡者中就有一個死于癌癥。癌癥成為僅次于心血管疾病的第二大殺手，嚴重威脅著人類的健康。近年隨著人們對腫瘤生物學的深入研究，受體酪氨酸激酶由于在腫瘤發(fā)生、發(fā)展、耐藥中發(fā)揮重要的作用，已成為一種抗腫瘤藥物研發(fā)的靶點。

c-Met是受體酪氨酸激酶家族的重要成員，在絕大部分的癌及部分肉瘤中具有高表達且和預后差緊密相關，如肺癌、乳腺癌、結腸癌、前列腺癌、胰癌、胃癌、肝癌、卵巢癌、腎癌、神經膠質瘤、黑色素瘤等。c-Met通過與其配體HGF/SF相互作用或者通過其他途徑激活胞內段的酪氨酸激酶，誘導細胞增殖、侵襲、遷移，抑制細胞凋亡，促進血管生成，在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要的作用。不同于其他激酶，c-Met作為腫瘤信號網絡通路中的關鍵節(jié)點，可以與細胞表面其他腫瘤相關分子相互作用，從而交聯(lián)激活放大腫瘤相關效應，極大地促進了腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉移。研究表明，Met基因擴增與20％的表皮生長因子抑制劑(EGFR-TKIs)獲得性耐藥密切相關；Met抑制劑與EGFR抑制劑的聯(lián)合用藥能夠延緩EGFR-TKIs獲得性耐藥的產生，延長其臨床使用壽命。因此，靶向c-Met/HGF通路成為引人注目的腫瘤治療新策略，基于c-Met信號通路的化學阻斷特別是小分子c-Met激酶抑制劑的抗癌藥物研究成為目前癌癥治療領域的研究熱點。到目前為止，已有17個小分子c-Met抑制劑進入或正在進行臨床試驗，其中PF-2341066(Crizotinib)作為高度選擇性的ALK/c-Met雙重激酶抑制劑，于2011年被美國FDA批準用于ALK融合基因陽性的非小細胞肺癌的治療；XL184/BMS907351作為Met、VEGFR-2和RET等多重激酶抑制劑，于2012年底獲準用于甲狀腺髓樣癌的治療。雖然激酶抑制劑在臨床上表現出優(yōu)良的靶向治療效果，但腫瘤耐藥性變異的發(fā)生大大降低了這類藥物長期治療的有效 性?；瘜W結構的相似也使得激酶抑制劑的交叉耐藥性問題日益嚴重。另一方面，雖然沒有直接證據證明特異性激酶抑制劑優(yōu)于多重激酶抑制劑，但激酶的選擇性與脫靶效應密切相關。因此，新結構新機制先導化合物的發(fā)現是目前靶向c-Met激酶的抗腫瘤藥物研發(fā)的重點方向。

技術實現要素：

為了解決上述技術問題，本發(fā)明的一個目的是提供一種吡啶并氮雜環(huán)化合物、其異構體、藥學上可接受的鹽或藥學上可接受的溶劑合物，以及包含該化合物的藥物組合物。

本發(fā)明另一方面的目的是提供上述化合物的制備方法。

本發(fā)明又一方面的目的是提供上述化合物在制備用于抑制酪氨酸激酶c-Met活性的藥物中的應用，在制備用于預防或治療與生物體內的肝細胞生長因子及其受體(c-Met)相關的細胞異常增殖、形態(tài)變化以及運動功能亢進相關的疾病以及與血管新生或癌轉移相關的疾病的藥物中的應用，尤其是用于制備預防或治療腫瘤生長與轉移的藥物中的應用。

為了實現上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用如下的技術方案：

本發(fā)明一方面提供一種吡啶并氮雜環(huán)化合物、其異構體及藥學上可接受的鹽或藥學上可接受的溶劑合物，其具有如下通式I所示的結構：

通式I

其中，

表示單鍵或雙鍵；

R¹和R²各自獨立地選自氫和鹵素；優(yōu)選地，R¹和R²各自獨立地選自氫、F、Cl和Br；更優(yōu)選地，R¹選自氫、Cl和Br；R²選自氫、F和Cl；進一步優(yōu)選地，R¹為氫、Cl或Br；R₂為氫或F；

X不存在，或者X和Y各自獨立地為選自N、O和S；優(yōu)選地，X不存在，或者X和Y各自獨立地選自N和O；

n為0、1、2或3；優(yōu)選地，n為0、1或2；m為0或1；

R³不存在或者為氫、取代或未取代的C₁-C₆烷基、取代或未取代的C₆-C₁₀芳基、取代 或未取代的含有1-2個選自N、O、S中的雜原子的五元或六元飽和或不飽和雜環(huán)基團、或者取代或未取代的含有1-2個選自N、O、S中的雜原子的五元或六元雜芳環(huán)基團，其中，所述取代基可以為1或2個并各自獨立地為選自鹵素、-CN、-CF₃、-NO₂、羥基、氨基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、芐基、鹵素取代的C₁-C₆烷氧基和含有1-2個選自N和O中的雜原子的五元或六元飽和或不飽和雜環(huán)基或雜芳環(huán)基；更優(yōu)選地，R³不存在或者為氫、取代或未取代的C₁-C₆烷基、取代或未取代的C₆-C₁₀芳基、取代或未取代的含有1-2個選自N和O中的雜原子的五元或六元飽和或不飽和雜環(huán)基團、或者取代或未取代的含有1-2個選自N和O中的雜原子的五元或六元雜芳環(huán)基團，其中，所述取代基可以為1或2個并各自獨立地選自鹵素、-CN、氨基、芐基、C₁-C₆烷基和含有1-2個選自N和O中的雜原子的五元或六元飽和或不飽和雜環(huán)基團；進一步優(yōu)選地，R³不存在或者為氫、取代或未取代的C₁-C₆烷基、取代或未取代的C₆-C₁₀芳基、取代或未取代的含有1-2個選自N和O中的雜原子的五元或六元飽和或不飽和雜環(huán)基團、或者取代或未取代的含有1-2個選自N和O中的雜原子的五元或六元雜芳環(huán)基團，其中，所述取代基可以為1或2個并各自獨立地選自鹵素、芐基、C₁-C₄烷基和含有1-2個選自N和O中的雜原子的五元或六元飽和或不飽和雜環(huán)基團；最優(yōu)選地，R³不存在或者為C₁-C₃的烷基、取代或未取代的吡啶基、取代或未取代的嗎啉基、取代或未取代的哌啶基、取代或未取代的咪唑基、或者取代或未取代的哌嗪基，其中，所述取代基可以為1或2個并各自獨立地選自F、Cl、Br、C₁-C₂烷基、芐基和嗎啉基；

R⁶不存在或者選自氫和C₁-C₆的烷基；優(yōu)選不存在或者選自氫和C₁-C₄的烷基；更優(yōu)選不存在或者選自氫和C₁-C₂的烷基；最優(yōu)選不存在或者為氫或甲基；

R⁷不存在或者選自氫和C₁-C₆的烷基；優(yōu)選不存在或者為氫、甲基、乙基或丙基；最優(yōu)選不存在或者為甲基；

Z為氨基、苯基乙酰胺基或以下任一結構：

在上述通式II、III、IV、V中，R⁴選自氫、C₁-C₆烷基和C₅-C₁₀芳基或者雜芳基；優(yōu)選地，R⁴選自氫和C₁-C₆烷基；更優(yōu)選地，R⁴選自氫和C₁-C₃烷基；最優(yōu)選地，R⁴為氫或甲基；R⁵和R^5’各自獨立地選自氫、鹵素和C₁-C₆烷氧基；優(yōu)選地，R⁵和R^5’各自獨立地選自氫、F、Cl、Br和C₁-C₄烷氧基；更優(yōu)選地，R⁵和R^5’各自獨立地選自氫、F和C₁-C₂烷氧基；

最優(yōu)選地，Z為氨基、苯基乙酰胺基或以下任一結構：

環(huán)B為含有1或2個選自N、O、S中的雜原子的五元或六元飽和或不飽和雜環(huán)基團或者雜芳香基團；優(yōu)選地，環(huán)B為含有1或2個選自N或O中的雜原子的五元或六元飽和或不飽和雜環(huán)基團或者雜芳香基團；更優(yōu)選地，環(huán)B為含有1或2個N原子的五元或六元飽和或不飽和雜環(huán)基團或者雜芳香基團；最優(yōu)選地，環(huán)B與吡啶或者連同X形成具有如下簡式之一所示的結構：

其中，鹵素包括F、Cl、Br、I；

最優(yōu)選地，所述化合物選自下述化合物中的一種化合物：

本發(fā)明另一方面提供一種上述通式I所示吡啶并氮雜環(huán)化合物、其異構體、其藥學上可接受的鹽或其藥學上可接受的溶劑合物的制備方法，該方法如以下反應方案之一所示：

反應方案一：

其中，R⁸為R⁹為Y、R²、R³、R⁷、Z、m和n的定義與上述通式I中的定義相同；

(1)化合物5由化合物4經氯代反應得到，氯代試劑為氯化亞砜(SOCl₂)/N,N-二甲基甲酸銨(DMF)、三氯氧磷(POCl₃)/DMF或POCl₃/N,N-二異丙基乙胺(DIEA)/乙腈(MeCN)等，優(yōu)選為POCl₃/DMF。

(2)化合物6由化合物5去保護得到。去保護試劑為：三溴化硼(BBr₃)/二氯甲烷(DCM)、40％溴化氫(HBr)水溶液、吡啶鹽酸鹽、鹽酸或硫酸、鹽酸-氯化鋁、氯化鋁-乙硫醇、三甲基氯硅烷(TMSCl)/碘化鈉(NaI)、三氟甲磺酸。優(yōu)選為三氟甲磺酸。

(3)化合物6經Mitsunobu反應生成化合物7，所選試劑為偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)/三苯基膦(PPh₃)、N',N'-四異丙基偶氮二羧酰胺(TIPA)-三丁膦TBP、1,1'-(偶氮二羧酸)二哌啶(ADDP)-TBP、四甲基偶氮二甲酸銨(TMAD)-TBP、4,7-二甲基-3,4,5,6,7,8-六氫-1,2,4,7-四氮雜辛因-3,8-二酮(DHTD)-TBP、氰基亞甲基三正丁基膦(CMBP)或氰基亞甲基三甲基膦(CMMP)。優(yōu)選為DEAD/PPh₃。

(4)化合物7經親核取代反應生成化合物8，所選試劑為常用的有機堿或無機堿，例如無水碳酸鉀、碳酸銫、三乙胺(TEA)、DIEA、叔丁醇鉀、氫化鈉、甲醇鈉、乙醇鈉；優(yōu)選為無水碳酸鉀、碳酸銫、TEA、DIEA、叔丁醇鉀。

(5)化合物8經脫溴得到化合物9，優(yōu)選反應條件為：鈀碳Pd/C-甲酸銨、Pd/C-乙酰胺，Pd/C-氫氣；優(yōu)選為Pd/C-甲酸銨。

反應方案二：

其中，R⁸為R⁹為Y、R²、R³、R⁷、Z、m和n的定義與上述通式I中的定義相同；

(1)化合物5脫溴得到化合物10，優(yōu)選反應條件為：Pd/C-甲酸銨、Pd/C-乙酰胺，Pd/C-氫氣；優(yōu)選為Pd/C-甲酸銨。

(2)化合物11由化合物10去保護得到。去保護試劑為：BBr₃/DCM、40％HBr水溶液、吡啶鹽酸鹽、鹽酸或硫酸、鹽酸-氯化鋁、氯化鋁-乙硫醇、TMSCl/NaI、三氟甲磺酸。優(yōu)選為三氟甲磺酸。

(3)化合物11經Mitsunobu反應生成化合物12，所選試劑為DEAD/PPh₃、TIPA-TBP、ADDP-TBP、TMAD-TBP、DHTD-TBP、CMBP或CMMP。優(yōu)選為DEAD/PPh₃。

(4)化合物12經親核取代反應生成化合物9，所選試劑為常用的的有機堿或無機堿，例如無水碳酸鉀、碳酸銫、TEA、DIEA、叔丁醇鉀、氫化鈉、甲醇鈉、乙醇鈉；優(yōu)選為無水碳酸鉀、碳酸銫、TEA、DIEA、叔丁醇鉀。

反應方案三：

其中，R¹⁰為R⁹為X、Y、R²、R³、R⁶、R⁷、Z、m和n的定義與上述通式I中的定義相同；

(1)化合物14經脫氯得到化合物15，反應試劑為鋅(Zn)/醋酸(MeCOOH)。

(2)化合物16經氯代反應得到化合物17，氯代試劑為SOCl₂/DMF、POCl₃/DMF、POCl₃/DIEA/MeCN等，優(yōu)選為POCl₃/DIEA/MeCN。

(3)化合物17經親核取代反應生成化合物18，所選試劑為常用的有機堿或無機堿，例如無水碳酸鉀、碳酸銫、TEA、DIEA、叔丁醇鉀、氫化鈉、甲醇鈉、乙醇鈉；優(yōu)選為無水碳酸鉀、碳酸銫、TEA、DIEA、叔丁醇鉀。

反應方案四：

其中，R¹¹為R⁹為Y、R²和Z的定義與上述通式I中的定義相同；

(1)取代反應生成化合物19，所選試劑為常用的有機堿或無機堿，例如無水碳酸鉀、碳酸銫、TEA、DIEA、叔丁醇鉀、氫化鈉、甲醇鈉、乙醇鈉；優(yōu)選為無水碳酸鉀、碳酸銫、TEA、DIEA、叔丁醇鉀。

(2)化合物19經還原得到化合物20，所用的還原試劑為氯化鎳(NiCl₂)/硼氫化鈉(NaBH₄)、Zn/AcOH、Pd/C-H₂、Fe/氯化氫(HCl)、硫化鈉(Na₂S)/乙醇(EtOH)、硫氫化銨(NH₄HS)、氫化鋁鋰(LiAlH₄)；優(yōu)選為NiCl₂/NaBH₄、Pd/C-H₂。

(3)化合物20經環(huán)合得到化合物21及22，環(huán)合條件為醛基乙酸乙酯，溶劑為各種常規(guī)溶劑，例如甲醇(MeOH)、EtOH、乙腈(MeCN)、二氧六環(huán)等。

本發(fā)明另一方面還提供一種包含治療有效量的選自一種或多種通式I所示化合物、其異構體、藥學上可接受的鹽或藥學上可接受的溶劑合物的組合物。

本發(fā)明另一方面還提供通式I所示化合物、其異構體、藥學上可接受的鹽、藥學上可接受的溶劑合物及其組合物在制備作為多靶點蛋白激酶抑制劑的藥物中的應用，在制備用 于抑制酪氨酸激酶c-Met活性的藥物中的應用，在制備用于預防或治療與生物體內的肝細胞生長因子受體(c-Met)相關的細胞異常增殖、形態(tài)變化以及運動功能亢進相關的疾病以及與血管新生或腫瘤轉移相關的疾病的藥物中的應用，尤其是在制備預防或治療腫瘤生長與轉移的藥物中的應用。

所述激酶包括c-Met、Flt-1、PDGFR-ɑ、PDGFR-β、RET、c-Src、EPH-A2、FGFR、Abl、Lck、KDR、IGF-1α和ALK。

所述藥物用于治療和/或預防與蛋白激酶特別是c-Met有關的疾病，如腫瘤。

在本發(fā)明中，所述腫瘤為肺癌、甲狀腺髓樣瘤、惡性膠質瘤、胃癌、腎細胞癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌或結直腸癌。

本發(fā)明有如下有益效果：

通過對c-Met激酶活性篩選，發(fā)明人發(fā)現：上述通式I表示的化合物在10nM下對c-Met激酶有高效的抑制活性；在100nM下對c-Met激酶高表達的腫瘤細胞有高效的抑制活性。代表性化合物7S表現出良好的藥代性質：生物利用度F＝51.8％，平均滯留時間MRT＝2.6h，半衰期t_1/2＝1.66h,藥時面積AUC＝16652h*ng/ml。而且，該小分子抑制劑動物體內療效良好：每天口服給藥一次，100mg/kg組連續(xù)給藥21天，對人肺癌EBC-1裸小鼠皮下移植瘤相對腫瘤增殖率T/C為9.5％，腫瘤體積增長抑制率GI為96.5％，瘤重抑制率為86.9％，有效劑量內安全無毒。因此，通式I表示的化合物能夠有效的靶向c-Met介導的信號通路，能夠用于與c-Met激酶過度表達引起的腫瘤等相關疾病的治療。制劑學上允許的含有通式I表示的化合物的藥物組合物同樣能起到有效的靶向c-Met介導的信號通路，能夠用于與c-Met激酶過度表達引起的腫瘤等相關疾病的治療。

附圖說明

圖1顯示了化合物7S對人肺癌EBC-1裸小鼠移植瘤的實驗治療作用。

具體實施方式

實施例:

下面結合實施例對本發(fā)明作進一步描述，但不限制本發(fā)明的保護范圍。

化合物的¹H-NMR光譜數據測量使用Varian Mercury-300MHz或Varian Mercury-400MHz核磁共振，質譜EI-MS用Finnigan MAT 95質譜儀，ESI-MS使用Finnigan LCQ Deca質譜儀測定?？焖僦鶎游鲈诠枘zH(10-40μM)上進行。試劑純化參照Purification of laboratory Chemicals；D.D.Perrin；W.L.F.Armarego and D.R.Perrin Eds.,Pergamon Press:Oxiford,1980。

如未作特別說明，本發(fā)明所采用的試劑和方法等為本領域熟知的試劑和方法。

實施例1 片段II系列的合成

本片段合成參考WO 2011/137342 A1

1-(甲氧基羰基)環(huán)丙烷單羧酸(23)

將環(huán)丙烷二羧酸二甲酯(10.12g,63.99mmol)溶解在100mL(1:1 V:V)CH₃OH/H₂O中,室溫下攪拌，稱取(2.68g,63.99mmol)氫氧化鋰溶于20ml H₂O中，室溫下分三次慢慢加入上述溶液中，加完后繼續(xù)攪拌反應1h，反應完成后用稀鹽酸調節(jié)pH值到3，DCM萃取，無水硫酸鈉干燥，不經純化繼續(xù)下一步反應。

1-((4-氟苯基)氨基甲酰)環(huán)丙烷單羧酸(25)

將(9.21g,63.99mmol)化合物23、(12.15ml,127.98mmol)對氟苯胺溶于150ml DCM中，室溫下加入(12.97g，95.98mmol)HOBt(羥基苯并三唑)、(14.90g，95.98mmol)1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(EDC)，室溫攪拌，TLC跟蹤反應，反應完成后蒸去大部分的DCM，加入EA萃取，飽和NaHCO₃洗，pH＝3的水洗，飽和鹽水洗滌，加無水Na₂SO₄干燥，濃縮得到化合物24粗品。將得到的粗品直接溶于100mL(1:1 V:V)MeOH/H₂O中,室溫下攪拌，后加入(3.06g,127.98mmol)氫氧化鋰，加完后繼續(xù)攪拌反應1h，TLC跟蹤反應，反應完成后用稀鹽酸調節(jié)pH值到3，即析出大量固體，過濾，干燥得灰白色固體10.56g，兩步產率74.1％。¹H NMR(CDC1₃,300MHz):δ7.57-7.53(m,2H),7.05-7.00(m,2H),1.46-1.43(m,2H),1.40-1.37(m,2H)。

N-(3-氟-4-羥基苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙烷-1,1-二酰胺(26)

將(2.00g,8.97mmol)化合物25、(1.14g,8.97mmol)4-氨基-2-氟苯酚溶于10ml DCM中，室溫下加入(1.21g，13.46mmol)HOBt，(1.77g，13.46mmol)EDC，室溫攪拌，TLC跟蹤反應，反應完成后蒸去大部分的DCM，加入EA萃取，飽和NaHCO₃洗，pH＝3的水洗，飽和鹽水洗滌，加無水Na₂SO₄干燥，濃縮得到粗品，甲醇結晶得黃褐色固體63％。 ¹H NMR(DMSO,400MHz):δ10.51(s,1H),10.32(s,1H),10.00(s,1H),7.77(d,J＝12.9 Hz,1H),7.66–7.61(m,2H),7.41(d,J＝8.7Hz,1H),7.30(t,J＝8.8Hz,1H),7.15(d,J＝9.0Hz,2H),1.61(m,2H),1.44(m,2H).

N-(3-氟-4-羥基苯基)-N-(4-氟苯基)-N-甲基環(huán)丙烷-1,1-二酰胺(27)

化合物27的制備同化合物26，初始原料為對氟-N-甲基苯胺；¹H NMR(DMSO,300MHz):δ9.56(s,1H),9.42(s,1H),7.35–7.23(m,2H),7.19–7.03(m,2H),6.97–6.87(m,1H),6.85–6.75(m,1H),3.22(s,3H),1.38–1.10(m,4H).

N-(3,4-二氟苯基)-N-(3-氟-4-羥基苯基)環(huán)丙烷-1,1-二酰胺(28)

化合物28的制備同化合物26，初始原料為3,4-二氟苯胺；¹H NMR(CDCl₃,300MHz):δ10.64(s,1H),7.72–7.58(m,1H),7.13–7.00(m,2H),6.83(t,J＝8.5Hz,1H),6.52–6.34(m,2H),1.97(m,2H).

N-(4-氟-3-甲氧基)-N-(3-氟-4-羥基苯基)環(huán)丙烷-1,1-二酰胺(29)

化合物29的制備同化合物26，初始原料為4-氟-3-甲氧基苯胺；¹H NMR(DMSO,400MHz)：δ10.08(s,1H),9.87(s,1H),9.62(s,1H),7.57–7.48(m,2H),7.21–7.11(m,3H),6.87(t,J＝9.2Hz,1H),3.80(s,3H),1.50–1.37(m,4H)

N-(4-氟苯基)-N-(4-羥基苯基)環(huán)丙烷-1,1-二酰胺(31)

將(0.50g,2.24mmol)化合物25加入圓底燒瓶中，加入2ml SOCl₂，80℃反應2h，后濃縮得化合物30粗品，將濃縮物用5ml DCM稀釋；稱取(366mg，3.36mmol)對羥基 苯胺溶入30ml DCM中，加入(386mg，3.36mmol)DIEA，冰浴下將化合物30慢慢滴加到反應液中，滴加完畢后移至室溫繼續(xù)攪拌反應1h，反應完成后加入EA萃取，飽和NaHCO₃洗，pH＝3的水洗，飽和鹽水洗滌，加無水Na₂SO₄干燥，濃縮得到粗品，柱層析得土黃色固體化合物31，兩步產率63％。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ10.18(s,1H),9.74(s,1H),9.25(s,1H),7.63(dd,J＝8.1,5.2Hz,2H),7.36(d,J＝8.2Hz,2H),7.15(t,J＝8.4Hz,2H),6.70(d,J＝7.9Hz,2H),1.47–1.41(m,2H),1.14–1.06(m,2H).

N-(4-氨基苯基)-N-(4-羥基苯基)環(huán)丙烷-1,1-二酰胺(32)

化合物32的制備同化合物31，初始原料為對1,4-苯二胺，兩步產率56％。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ10.25(s,1H),9.57(s,1H),7.68–7.60(m,2H),7.30–7.10(m,4H),6.51(d,J＝8.6Hz,2H),4.96(s,2H),1.53–1.37(m,4H).

實施例2 片段III的合成

1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氫吡啶-3-甲酸(34)

將(300mg,1.95mmol)2-氧代-2H-吡喃-3-甲酸甲酯、(0.19ml,1.96mmol)對氟苯胺溶于5ml DMF中，室溫下攪拌反應6h后，后向反應液中加入(0.49g,2.54mmol)EDC、(60mg,0.49mmol)DMAP(二甲基氨基吡啶)，室溫下攪拌反應過夜，反應完成后，加入EA萃取，飽和NaHCO₃洗，飽和鹽水洗滌，加無水Na₂SO₄干燥，濃縮得到粗品。將得到的粗品直接溶于20mL 2N的NaOH的THF/H₂O(1:1 V:V)中,65℃攪拌反應2h，反應完成后用稀鹽酸調節(jié)pH值到1，即析出大量固體，過濾，干燥得土黃色固體化合物34。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ8.47(dd,J＝7.1,2.2Hz,1H),8.19(dd,J＝6.6,2.2Hz,1H),7.59-7.63(m,2H),7.39-7.44(m,2H),6.78(dd,J＝6.6,7.1Hz,1H).

N-(3-氟-4-羥基苯基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氫吡啶-3-碳酰胺(36)

將(0.52g,2.24mmol)化合物34加入圓底燒瓶中，加入2ml SOCl₂，80℃反應2h，后濃縮得化合物35，將濃縮物用5ml DCM稀釋；稱取(427mg，3.36mmol)對羥基-3氟-苯胺溶入30ml DCM中，加入(386mg，3.36mmol)DIEA，冰浴下將化合物35慢慢滴加到反應液中，滴加完畢后移至室溫繼續(xù)攪拌反應1h，反應完成后加入EA萃取，飽和NaHCO₃洗，飽和鹽水洗滌，加無水Na₂SO₄干燥，濃縮得到粗品，柱層析得土黃色固體化合物36，兩步產率52％。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ11.79(s,1H),9.72(s,1H),8.55(d,J＝7.2Hz,1H),8.11(dd,J＝13.6,6.3Hz,1H),7.74(d,J＝13.5Hz,1H),7.59(dt,J＝13.0,6.5Hz,2H),7.41(dd,J＝16.3,7.6Hz,2H),7.20–7.09(m,1H),6.92(t,J＝9.2Hz,1H),6.72(dd,J＝14.6,7.3Hz,1H).

實施例3 片段IV的合成

4-(芐氧基)-3-氟苯胺(37)

將對羥基-3-氟苯胺(1.0g,7.87mmol)溶解在10mL無水DMF中,冷卻到0℃，加入(0.88g,7.87mmol)叔丁醇鉀，攪拌10min后，加入(1.35g,7.87mmol)芐溴，TLC跟蹤，反應完成后加入EA萃取，飽和NaHCO₃洗，飽和鹽水洗滌，加無水Na₂SO₄干燥，濃縮得到化合物37粗品，柱層析得無色液體，產率52％。¹H NMR(CDCl₃,300MHz):δ7.41-7.28(m,5H),6.91(dd,1H),6.46(dd,1H),6.32(m,1H),4.97(s,2H),4.98(s,2H).

1-(4-(芐基氧基)-3-氟苯基)-N-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氫吡啶-3-碳酰胺(41)

化合物41的合成同36，初始原料為4-(芐氧基)-3-氟苯胺(37)。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ11.93(s,1H),8.56(dd,J＝7.2,1.9Hz,1H),8.10(dd,J＝6.6,1.9Hz,1H),7.79–7.70(m,2H),7.65–7.37(m,7H),7.37–7.27(m,1H),7.20(t,J＝8.8Hz,2H),6.70(t,J＝7.0Hz,1H),5.30(s,2H).

1-(3-氟-4-羥基苯基)-N-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氫吡啶-3-碳酰胺(42)

將上述(432mg,1mmol)化合物41溶入3ml三氟乙酸中，后滴入100μl三氟甲磺酸， 攪拌反應，TLC跟蹤，反應完成后加入EA沖稀，用2N的NaOH調節(jié)pH＝6，EA萃取，飽和鹽水洗滌，加無水Na₂SO₄干燥，濃縮得到化合物42粗品，柱層析得淡黃色固體，產率87％。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ11.96(s,1H),10.40(s,1H),8.55(dd,J＝7.3,2.1Hz,1H),8.08(dd,J＝6.6,2.1Hz,1H),7.73(dd,J＝8.9,5.0Hz,2H),7.47(dd,J＝11.8,2.3Hz,1H),7.26–7.03(m,4H),6.69(t,J＝6.9Hz,1H).

實施例4 片段V的合成

本片段合成參考J Med Chem,2008,51,5330-5341

3-氧代-4-苯丁酸乙酯(44)

稱取(2g,13.9mmol)丙二酸環(huán)(亞)異丙酯溶于40ml二氯甲烷中，加入(1.65g,20.9mmol)吡啶，冷卻到0℃，后慢慢滴加(2.14g,13.9mmol)苯乙酰氯，0℃下繼續(xù)攪拌反應3h，完成后加入100mlDCM沖稀，加入50ml 1N的HCl，攪拌，分離有機相，無水Na₂SO₄干燥，濃縮得到粗品。將粗品直接加入50ml EtOH中，回流過夜，濃縮后柱層析得淺黃色油狀物，兩步反應產率44％。¹H NMR(CDCl₃,300MHz)：δ7.42–7.14(m,5H),4.15(q,J＝7.1Hz,2H),3.81(s,2H),3.43(s,2H),1.24(t,J＝7.2Hz,3H).

4-(二甲氨基)-2-((二甲氨基)亞甲基)-3-氧代-4-苯丁酸乙酯(45)

將上述液體加入DMF-DMA中，110℃下攪拌反應3h，反應完成后濃縮，加入EA攪拌得白色固體，產率81％。¹H NMR(DMSO,300MHz)：δ7.37–7.14(m,5H),7.06(s,1H),7.04(s,1H),4.07–3.87(m,2H),2.92(s,6H),2.65(s,6H),1.13(t,J＝7.1Hz,3H).

4-氧代-5-苯基-1,4-二氫吡啶-3-甲酸乙酯(46)

將上述固體溶于EtOH中，加入3eq的NH₄Cl，回流2h，后冷卻到室溫，過濾干燥得淡黃色固體，產率76％。¹H NMR(DMSO,300MHz)：δ8.22(s,1H),7.86(s,1H),7.64–7.56(m,2H),7.47–7.25(m,3H),4.21(q,J＝7.1Hz,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,3H).

4-氧代-5-苯基-1,4-二氫吡啶-3-甲酸(47)

將上述固體溶于乙醇中，加入2N的NaOH，70℃攪拌反應2h，完成后冷卻，加入1.5N的HCl，得固體，過濾干燥，產率90％。¹H NMR(DMSO,300MHz)：δ13.21(s,1H),8.62(s,1H),8.25(s,1H),7.75–7.62(m,2H),7.53–7.36(m,3H).

5-(4-氟苯基)-4-氧代-1,4-二氫吡啶-3-甲酸(48)

化合物48的合成同47，初始原料為對氟苯乙酰氯。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ13.21(s,1H),8.63(s,1H),8.27(s,1H),7.73(dd,J＝8.7,5.7Hz,2H),7.29(t,J＝8.9Hz,2H).

實施例5 N-(4-((7-氯-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(1S)的合成

5-(甲氧基亞甲基)-2,2-二甲基-1,3-二氧六環(huán)-4,6-二酮(49)

將10g米氏酸加入40ml原碳酸三甲酯中，100℃攪拌反應3h，反應完成后冷卻，加入石油醚超聲得大量沉淀，過濾，PE沖洗得產物，無需純化直接用于下一步。

5,7-二氯-1,6-萘啶-4(1H)-酮(51)

將1g，6.13mmol的2,6-二氯-4-氨基吡啶溶于異丙醇中，后加入2eq化合物49，后升溫至110℃攪拌反應1h后析出大量固體，繼續(xù)攪拌反應2h，后冷卻到室溫，用異丙醇洗，乙醚洗得產物，產率96％；

將上述得到的化合物懸浮于二苯醚中10ml/g，升溫至220℃攪拌反應1h后析出大量固體，冷卻到室溫，加入大量PE洗滌，過濾得產物，產率94％。¹H NMR(300MHz,DMSO)δ12.11(s,1H),7.93(dd,J＝7.7,5.5Hz,1H),7.48(s,1H),6.17(d,J＝7.5Hz,1H).

7-氯-1,6-萘啶-4(1H)-酮(52)

鋅的處理：稱取一定量的鋅粉加入稀鹽酸，加入稀鹽酸的量為使鋅粉緩慢冒出氣泡，室溫下攪拌30min，以除去鋅表面的氧化層，后將水倒掉，再用水洗兩次，丙酮洗兩次，乙醚洗兩次，減壓抽干備用。

將1eq的化合物51溶于干燥的MeOH溶液中，后加入4eq的鋅粉，室溫下攪拌加入10eq的醋酸，后迅速升溫至70℃，TLC跟蹤，反應完成后過濾，濃縮后加入水超聲的固體，過濾，1:1的EtOH/Et₂O洗滌得目標化合物，產率74％；¹H NMR(300MHz,DMSO)δ8.99(s,1H),8.00(d,J＝7.6Hz,1H),7.49(s,1H),6.17(d,J＝7.6Hz,1H).

4,7-二氯-1,6-萘啶(53)

將(340mg,1.89mmol)的化合物52溶于1,2-二氯乙烷中，加入(653μl,3.95mmol)DIEA，攪拌下滴入(345μl,3.78mmol)三氯氧磷，70℃攪拌反應30min，冷卻到室溫，后倒入冰水中，用2N的NaOH調節(jié)pH到8，EA萃取，飽和的NH₄Cl溶液洗滌，飽和NaCl洗滌，無水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮，柱層析得目標化合物，產率94％；¹H NMR(300MHz,DMSO)δ9.47(d,J＝0.6Hz,1H),9.10(d,J＝4.7Hz,1H),8.18(s,1H),7.94(d,J＝4.8Hz,1H).

N-(4-((7-氯-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(1S)

將(0.2g,1mmol)的化合物53溶于無水DMF中，加入1.1eq的酚，后加入1.1eq叔丁醇鉀，用N₂置換三次，110℃攪拌反應，TLC跟蹤，反應完成后加入EA沖稀，用飽和的NH₄Cl溶液洗滌，飽和NaCl洗滌，無水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮，柱層析得目標化合物，產率76％；¹H NMR(300MHz,DMSO)δ10.77(s,1H),9.92(s,1H),9.57(d,J＝0.7Hz,1H),8.95(d,J＝5.3Hz,1H),8.23–8.04(m,2H),7.62(dd,J＝9.2,5.1Hz,2H),7.51(dd,J＝11.2,2.6Hz,1H),7.36–7.13(m,3H),6.82(d,J＝5.3Hz,1H),1.68–1.52(m,4H).

實施例6 N-(4-((7-二甲氨基-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1，1-二酰胺(2S)的合成

7-(二甲氨基)-1,6-萘啶-4(1H)-酮(54)

將1eq的化合物52溶于干燥的DMF溶液中，后加入2eq的叔丁醇鉀(t-BuOK)， 升溫至110℃攪拌反應，TLC跟蹤，反應完成后加入EA沖稀，用飽和的NH₄Cl溶液洗滌，飽和NaCl洗滌，無水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮，柱層析得目標化合物；¹H NMR(400MHz,DMSO)δ11.28(s,1H),8.80(s,1H),7.70(dd,J＝7.5,5.8Hz,1H),6.22(s,1H),5.82(d,J＝7.6Hz,1H),3.08(s,6H).

4-氯-1,6-萘啶-7-二甲胺(55)

將1eq的化合物54溶于1,2-二氯乙烷溶液中，后加入3eq的DIEA，2eq的三氯氧磷，升溫至70℃攪拌反應，TLC跟蹤，反應完成后加入EA沖稀，用飽和的NH₄Cl溶液洗滌，飽和NaCl洗滌，無水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮，柱層析得目標化合物；¹H NMR(300MHz,CDCl3)δ9.23(s,1H),8.63(d,J＝4.7Hz,1H),7.07(d,J＝4.7Hz,1H),6.80(s,1H),3.20(d,J＝0.9Hz,6H).

N-(4-((7-二甲氨基-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(2S)

將(0.2g,0.97mmol)的化合物55溶于無水DMF中，加入1.1eq的酚，后加入1.1eq叔丁醇鉀，用N₂置換三次，110℃攪拌反應，TLC跟蹤，反應完成后加入EA沖稀，用飽和的NH₄Cl溶液洗滌，飽和NaCl洗滌，無水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮，柱層析得目標化合物，產率81％。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.74–7.61(m,1H),7.43–7.29(m,2H),7.14–7.05(m,1H),7.05–6.95(m,1H),6.95–6.82(m,2H),6.72–6.64(m,1H),6.63–6.53(m,1H),6.38(d,J＝2.4Hz,1H),6.20(d,J＝2.3Hz,1H),3.25(s,6H),1.49(m,4H)；EI MSm/z 503[M]⁺.

實施例7 N-(4-((7-甲氧基-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(3S)的合成

3-溴-2-甲氧基-4-氨基吡啶(56)

將(5g,40.3mmol)的2-甲氧基-4-氨基吡啶溶于MeCN中，0℃下分批加入(7.18g, 40.3mmol)的NBS，后慢慢回到室溫攪拌反應，TLC跟蹤，反應完成后加入EA沖稀，用飽和的NH₄Cl溶液洗滌，保險粉洗滌，飽和NaCl洗滌，無水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮，柱層析得目標化合物，產率77％。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.57(d,1H),6.36(d,1H),6.20(s,2H),3.7(s,3H).

7-甲氧基-1,6-萘啶-4(1H)-酮(59)

將1eq的3-溴-2-甲氧基-4-氨基吡啶溶于異丙醇中，后加入2eq化合物49，后升溫至110℃攪拌反應1h后析出大量固體，2h后冷卻到室溫，用異丙醇洗，乙醚洗得產物化合物57，產率92％；

將上述得到的化合物懸浮于二苯醚中10ml/g，升溫至220℃攪拌反應1h后析出大量固體，冷卻到室溫，加入大量石油醚洗滌，過濾得產物化合物58，產率96％。

將上述固體溶于甲醇中，加入2eq的甲酸銨，后加入10％重量的10％Pd/C，60℃下攪拌反應，TLC跟蹤，反應完成后，冷卻過濾，濾液濃縮，后用EA萃取，飽和和NaCl洗滌，無水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮得化合物59。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.89(s,1H),8.46(s,1H),7.87(d,J＝7.6Hz,1H),6.75(s,1H),5.97(d,J＝7.6Hz,1H),3.91(s,3H).

4-氯-7-甲氧基-1,6-萘啶(60)

將(332mg,1.89mmol)的化合物59溶于20ml乙腈中，加入(653μl,3.95mmol)DIEA，攪拌下滴入(345μl,3.78mmol)三氯氧磷，70℃攪拌反應30min，冷卻到室溫，后倒入冰水中，用2N的NaOH調節(jié)pH到8，EA萃取，飽和的NH₄Cl溶液洗滌，飽和NaCl洗滌，無水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮，柱層析得目標化合物，產率92％；¹H NMR(300MHz,CD₃OD)δ9.33(s,1H),8.85(d,J＝4.8Hz,1H),7.55(d,J＝4.8Hz,1H),7.23(s,1H),4.10(s,3H).

N-(4-((7-甲氧基-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(3S)

合成路線同2S，初始原料為化合物60。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ10.43(s,1H),10.02(s,1H),9.48(s,1H),8.79(d,J＝5.2Hz,1H),7.94(d,J＝13.3Hz,1H),7.66(dd,J＝9.2,5.1Hz,2H),7.58–7.46(m,2H),7.26(s,1H),7.17(t,J＝8.9Hz,2H),6.49(d,J＝5.1Hz,1H),4.04(s,3H),1.55–1.36(m,4H).

實施例8 4-((8-溴-7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯胺(4S)的合成

8-溴-4-氯-7-甲氧基-1,6-萘啶(61)

將(482mg,1.89mmol)的化合物58溶于10ml DMF中，攪拌下滴入(345μl,3.78mmol)三氯氧磷，室溫攪拌反應30min，TLC跟蹤，反應完成后倒入冰水中，用2N的NaOH調節(jié)pH到8，EA萃取，飽和的NH₄Cl溶液洗滌，飽和NaCl洗滌，無水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮，柱層析得目標化合物，產率83％；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ9.25(s,1H),8.94(d,J＝4.7Hz,1H),7.39(d,J＝4.7Hz,1H),4.18(s,3H).

8-溴-4-氯-7-羥基-1,6-萘啶(62)

取3ml三氟甲磺酸于圓底燒瓶中，冰浴下分批加入(516mg,1.89mmol)的化合物61，攪拌溶解后移入180℃油浴攪拌反應10min，TLC跟蹤，反應完成后冷卻到室溫，加入少量EA沖稀，加入大量的DCM，靜置得到大量固體，過濾。濾餅用MeCN溶解，用2N的NaOH調節(jié)pH到8，得到大量黃色固體。過濾，濾餅干燥后快速柱得目標化合物，黃色固體，產率84％；¹H NMR(300MHz,DMSO)δ8.86(s,1H),8.55(d,J＝4.6Hz,1H),7.00(d,J＝4.8Hz,1H).

7-(4-嗎啡啉乙氧基)-8-溴-4-氯-1,6-萘啶(63)

將(1.5g,5.79mmol)的化合物62溶于40ml THF中，攪拌下加入(1.14g,8.69mmol)4-羥乙基嗎啉，(1.58g,8.69mmol)無水硫酸鎂，室溫攪拌10min，后加入(2.28g,8.69mmol)三苯基膦，慢慢滴加(1.7ml,8.69mmol)DEAD，室溫攪拌6h，TLC跟蹤，反應完成后EA萃取，飽和NaHCO₃洗滌兩次取有機相，有機相用pH等于3的稀HCl洗滌兩次，取無機相，用2N的NaOH調節(jié)pH等于8，EA萃取，飽和NaCl洗滌，無水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮，柱層析得目標化合物，產率73％；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ9.23(s,1H),8.95(d,J＝4.7Hz,1H),7.62(d,J＝4.6Hz,1H),4.72(t,J＝5.7Hz,2H),3.77–3.62(m,4H),2.89(t,J＝5.8Hz,2H),2.70–2.56(m,4H).

4-((8-溴-7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯胺(4S)

合成路線同2S，初始原料為63和對羥基-3-氟苯胺。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ9.40(s,1H),8.87(d,J＝5.3Hz,1H),7.15(t,J＝9.0Hz,1H),6.63–6.53(m,2H),6.50(d,J＝8.6Hz,1H),5.58(s,2H),4.67(t,J＝5.7Hz,2H),3.63–3.52(m,4H),2.89–2.75(m,2H),2.63–2.53(m,4H).

實施例9 2-氟-N¹-(7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)苯基-1,4-二胺(5S)的合成

將(0.93g,2mmol)的化合物4S溶于40ml甲醇中，加入(0.18g,4mmol)的甲酸銨，后加入20mg的10％Pd/C，60℃下反應30min，TLC跟蹤，反應完成后，冷卻過濾，濾液濃縮，后用EA萃取，飽和和NaCl洗滌，無水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮柱層析得產物。 ¹H NMR(400MHz,DMSO)δ11.15(s,1H),9.38(s,1H),8.84(d,J＝5.1Hz,1H),7.83(d,J＝12.3Hz,1H),7.38–7.30(m,1H),7.29–7.17(m,1H),6.44(d,J＝5.3Hz,1H),4.74(t,J＝5.7Hz,2H),3.74(d,J＝5.2Hz,4H),2.91(t,J＝9.8Hz,2H),2.76–2.62(m,4H)。

實施例10 N-(4-((8-溴-7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(6S)的合成

合成路線同2S，初始原料為化合物63和化合物26。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ10.43(s,1H),10.02(s,1H),9.45(s,1H),8.77(d,J＝5.4Hz,1H),7.93(d,J＝13.0Hz,1H),7.68–7.59(m,2H),7.57–7.47(m,2H),7.22(s,1H),7.18–7.12(m,1H),6.47(d,J＝5.1Hz,1H),4.49(t,J＝5.8Hz,2H),2.75(t,J＝5.4Hz,2H),2.57–2.51(m,4H),2.41–2.26(m,4H),2.15(s,3H),1.55–1.43(m,4H).

實施例11 N-(3-氟-4-((7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(7S)的合成

合成路線同5S，初始原料為6S。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ10.43(s,1H),10.01(s,1H),9.45(s,1H),8.78(d,J＝5.2Hz,1H),7.93(d,J＝13.9Hz,1H),7.65(dd,J＝8.7,5.1Hz,2H),7.60–7.45(m,2H),7.24(s,1H),7.17(t,J＝8.8Hz,2H),6.48(d,J＝5.2Hz,1H),4.52(t,J＝5.6Hz,2H),3.65–3.53(m,4H),2.77(t,J＝5.6Hz,2H),2.56–2.50(m,4H),1.54–1.40(m,4H).

實施例12 N-(3-氟-4-((7-(2-嗎啡啉丙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(8S)的合成

4-氯-7-羥基-1,6-萘啶(64)

取3ml三氟甲磺酸于圓底燒瓶中，冰浴下分批加入(367mg,1.89mmol)的60，攪拌溶解后移入150℃油浴攪拌反應2h，TLC跟蹤，反應完成后冷卻到室溫，后倒入冰中，用2N的NaOH調節(jié)pH到8，EA多次萃取，濃縮。快速柱得目標化合物，黃色固體，由于化合物不穩(wěn)定，產率不穩(wěn)定，產率41％；¹H NMR(300MHz,DMSO)δ11.57(s,1H),9.16(s,1H),8.83(d,J＝4.7Hz,1H),7.52(d,J＝4.7Hz,1H),7.01(s,1H).

4-(3-((4-氯-1,6-萘啶-7-烷基)氧基)丙基)嗎啉(65)

合成路線同化合物63，初始原料為N-(3-羥丙基)嗎啉。¹H NMR(CDCl₃,300MHz):δ9.31(s,1H),8.80(d,J＝4.7Hz,1H),7.32(d,J＝4.6Hz,1H),7.25(s,1H),4.45(t,J＝6.3Hz,2H),3.73–3.65(m,4H),2.60–2.53(m,2H),2.52–2.43(m,4H),2.05(t,J＝7.0Hz,2H).

N-(3-氟-4-((7-(2-嗎啡啉丙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙 基-1,1-二酰胺(8S)

合成路線同化合物2S，初始原料為化合物65和化合物26。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ10.43(s,1H),10.01(s,1H),9.45(s,1H),8.77(d,J＝5.2Hz,1H),7.94(d,J＝12.3Hz,1H),7.73–7.61(m,2H),7.60–7.44(m,2H),7.27–7.11(m,3H),6.48(d,J＝5.1Hz,1H),4.43(t,J＝6.3Hz,2H),3.72–3.54(m,4H),2.49–2.21(m,5H),2.04–1.90(m,2H),1.55–1.36(m,4H).

實施例13 N-(3-氟-4-((7-((1-甲基哌啶-4-烷基)甲氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(9S)的合成

4-氯-7-((1-甲基哌啶-4-烷基)甲氧基)-1,6-萘啶(66)

化合物66的合成同化合物63，初始原料為4-哌啶甲醇，產率63％。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ9.27(s,1H),8.77(d,J＝4.7Hz,1H),7.28(d,J＝4.7Hz,1H),7.20(s,1H),4.21(d,J＝6.2Hz,2H),2.87(d,J＝11.4Hz,2H),2.33–2.21(s,3H),1.95–1.82(m,4H),1.54–1.34(m,2H),1.33–1.16(m,1H).

N-(3-氟-4-((7-((1-甲基哌啶-4-烷基)甲氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(9S)

合成路線同化合物2S，初始原料為化合物66和化合物26。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ10.48(s,1H),10.05(s,1H),9.46(s,1H),8.78(d,J＝5.3Hz,1H),7.95(d,J＝13.1Hz,1H),7.72–7.61(m,2H),7.61–7.43(m,2H),7.25(s,1H),7.16(t,J＝7.9Hz,2H),6.49(d,J＝5.2Hz,1H),4.32(d,J＝6.1Hz,2H),3.01–2.79(m,2H),2.69(s,3H),2.19–1.87(m,3H),1.77–1.57(m,2H),1.56–1.32(m,4H).

實施例14 N-(4-((8-溴-7-(2-(4-甲基哌嗪-1-烷基)乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3--氟苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(10S)的合成

8-溴-4-氯-7-(2-(4-甲基哌嗪-1-烷基)乙氧基)-1,6-萘啶(67)

合成路線同63，初始原料為化合物62和1-(2-羥乙基)-4-甲基哌嗪。¹H NMR(CDCl₃,300MHz):δ9.20(s,1H),8.92(d,J＝4.7Hz,1H),7.37(d,J＝4.7Hz,1H),4.69(t,J＝5.9Hz,2H),2.89(t,J＝5.9Hz,2H),2.79–2.61(m,4H),2.54–2.34(m,4H),2.26(s,3H).

N-(4-((8-溴-7-(2-(4-甲基哌嗪-1-烷基)乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3--氟苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(10S)

合成路線同化合物2S，初始原料為化合物67和化合物26。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ10.47(s,1H),10.02(s,1H),9.43(s,1H),8.89(d,J＝5.3Hz,1H),7.95(d,J＝12.4Hz,1H),7.77–7.44(m,3H),7.17(t,J＝8.2Hz,2H),6.62(d,J＝5.4Hz,1H),4.66(t,J＝5.1Hz,2H),3.41–3.24(m,4H),2.85(t,J＝5.4Hz,2H),2.78–2.57(m,4H),2.39(s,3H),1.56–1.32(m,4H).

實施例15 N-(3-氟-4-((7-(2-(4-甲基哌嗪-1-烷基)乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(11S)的合成

合成路線同化合物5S，初始原料為化合物10S。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ10.43(s,1H),10.02(s,1H),9.45(s,1H),8.77(d,J＝5.4Hz,1H),7.93(d,J＝13.0Hz,1H),7.68–7.59(m,2H),7.57–7.47(m,2H),7.22(s,1H),7.18–7.12(m,1H),6.47(d,J＝5.1Hz,1H),4.49(t,J＝5.8Hz,2H),2.75(t,J＝5.4Hz,2H),2.57–2.51(m,4H),2.41–2.26(m,4H),2.15(s,3H),1.55–1.43(m,4H).

實施例16 N-(4-氟苯基)-N-(4-((7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(12S)的合成

4-(2-((4-氯-1,6-萘啶-7-烷基)氧基)乙基)嗎啉(68)

合成路線同化合物63，初始原料為化合物64和4-羥乙基嗎啉。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ9.27(s,1H),8.77(d,J＝4.7Hz,1H),7.29(d,J＝4.7Hz,1H),7.24(s,1H),4.54(t,J＝5.8Hz,2H),3.72–3.66(m,4H),2.83(t,J＝5.8Hz,2H),2.61–2.53(m,4H).

N-(4-氟苯基)-N-(4-((7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(12S)

合成路線同化合物2S，初始原料為化合物68和化合物31。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ10.24(s,1H),10.06(s,1H),9.42(s,1H),8.75(d,J＝5.2Hz,1H),7.80(d,J＝9.1Hz,2H),7.71–7.57(m,2H),7.31(d,J＝9.0Hz,2H),7.23–7.10(m,3H),6.43(d,J＝5.2Hz,1H),4.52(t,J＝7.2Hz,2H),3.58(d,J＝4.9Hz,4H),2.77(t,J＝7.1Hz,2H),2.52(m,4H),1.63–1.38(m,2H).

實施例17 N-(4-氟苯基)-N-(4-((7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氨基)苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(13S)的合成

將1eq的化合物68溶于干燥的DMF溶液中，后加入1.2eq的68，升溫至130℃攪拌反應，TLC跟蹤，反應完成后加入EA沖稀，用飽和的NH₄Cl溶液洗滌，飽和NaCl洗滌，無水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮，柱層析得目標化合物；產率72％。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ10.16(s,1H),10.07(s,1H),9.47(s,1H),8.42(s,1H),7.84–7.59(m,5H),7.33(d,J＝8.6Hz,2H),7.17(t,J＝8.8Hz,2H),6.98(s,1H),6.61(d,J＝5.6Hz,1H),4.47(t,J＝5.9Hz,2H),3.66–3.55(m,4H),2.76(t,J＝5.7Hz,2H),2.51–2.48(m,4H),1.55–1.39(m,4H).

實施例18 N-(3-氟-4-((7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)-N-(4-氟苯基)-N-甲基環(huán)丙基-1,1-二酰胺(14S)的合成

合成路線同化合物2S，初始原料為化合物68和化合物27。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ10.00(s,1H),9.45(s,1H),8.79(d,J＝5.0Hz,1H),7.60–7.39(m,3H),7.37–7.27(m,2H),7.24(s,1H),7.21–7.05(m,2H),6.46(d,J＝5.1Hz,1H),4.52(t,J＝6.3Hz,2H),3.66–3.51(m,4H),3.25(s,3H),2.77(t,J＝6.0Hz,2H),2.56–2.49(m,4H),1.51–1.38(m,2H),1.30– 1.20(m,2H).

實施例22 N-(3-氟-4-((7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氫吡啶-3-碳酰胺(15S)的合成

合成路線同化合物2S，初始原料為化合物68和化合物36。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ12.18(s,1H),9.52(s,1H),8.83(d,J＝5.3Hz,1H),8.61(d,J＝7.2Hz,1H),8.22–8.06(m,2H),7.71–7.47(m,4H),7.53–7.23(m,3H),6.76(t,J＝7.5Hz,1H),6.61(d,J＝5.1Hz,1H),4.90–4.75(m,2H),4.02–3.76(m,4H),3.69–3.60(m,2H),2.53–2.43(m,4H).

實施例23 1-(3-氟-4-((7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)-N-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氫吡啶-3-碳酰胺(16S)的合成

合成路線同化合物2S，初始原料為化合物68和化合物42。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ11.65(s,1H),9.46(s,1H),8.74(s,2H),7.74–7.60(m,3H),7.56–7.40(m,2H),7.38–7.30(m,1H),7.28(s,1H),7.02(t,J＝8.7Hz,2H),6.65(t,J＝7.1Hz,1H),6.48(d,J＝5.3Hz,1H),4.58(t,J＝5.3Hz,2H),3.82–3.66(m,4H),2.88(t,J＝5.6Hz,2H),2.71–2.54(m,4H).

實施例24 1-(3-氟-4-((7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)-2-氧代-1,2-二氫吡啶-3-甲酸甲酯(17S)的合成

1-(3-氟-4-羥基苯基)-2-氧代-1,2-二氫吡啶-3-甲酸甲酯(69)的合成

將(400mg,1.13mmol)25溶液3ml的TFA中，加入3％的三氟甲磺酸，室溫攪拌反應，TLC跟蹤，反應完成后加入EA沖稀，用飽和的NH₄Cl溶液洗滌，飽和NaCl洗滌，無水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮，柱層析得目標化合物。¹H NMR(DMSO,300MHz):δ10.31 (s,1H),8.11(d,J＝7.1Hz,1H),7.93(d,J＝4.6Hz,1H),7.34(d,J＝11.5Hz,1H),7.05(s,2H),6.39(t,J＝6.3Hz,1H),3.76(s,3H).

1-(3-氟-4-((7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)-2-氧代-1,2-二氫吡啶-3-甲酸甲酯(17S)的合成

合成路線同化合物2S，初始原料為化合物68和化合物69。¹H NMR(CDCl₃,300MHz):δ9.45(s,1H),8.72(d,J＝5.2Hz,1H),8.27(d,J＝4.9Hz,1H),7.61(d,J＝4.7Hz,2H),7.49–7.37(m,2H),7.29(d,J＝9.2Hz,1H),6.47–6.32(m,2H),4.57(t,J＝5.8Hz,2H),3.91(s,3H),3.79–3.65(m,4H),2.88(t,J＝5.7Hz,2H),2.71–2.56(m,4H).

實施例25 N-(4-((8-溴-7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3--氟苯基)-2-苯乙酰胺(18S)的合成

將(100mg,0.22mmol)4S溶于10ml THF中，加入3eq的DIEA，冷卻到0℃。將1.5eq苯乙酰氯慢慢加入，繼續(xù)保持溫度攪拌反應1h。反應完全后，加入EA沖稀，用飽和的NH₄Cl溶液洗滌，飽和NaCl洗滌，無水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮，柱層析得目標化合物。產率86％。¹H NMR(CDCl₃,300MHz):δ10.58(s,1H),9.43(s,1H),8.87(d,J＝5.3Hz,1H),7.92(d,J＝13.3Hz,1H),7.64–7.20(m,6H),6.64(d,J＝5.2Hz,1H),4.67(t,J＝5.7Hz,2H),3.70(s,2H),3.63–3.49(m,4H),2.82(t,J＝6.0Hz,2H),2.60–2.50(m,4H).

實施例26 N-(4-((8-溴-7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-4-氧代-5-苯基-1,4-二氫吡啶-3-碳酰胺(19S)的合成

將(100mg,0.22mmol)化合物4S、(71mg,0.33mmol)化合物47溶于10ml DCM中，室溫下加入(130mg，0.66mmol)HOBt、(89mg，0.66mmol)EDC，室溫攪拌，TLC跟蹤反應，反應完成后蒸去大部分的DCM，加入EA萃取，飽和NaHCO₃洗，pH＝3的水洗，飽和鹽水洗滌，加無水Na₂SO₄干燥，濃縮得到粗品，柱層析得目標化合物。產 率63％。¹H NMR(DMSO,300MHz)：δ13.60(s,1H),9.44(s,1H),8.89(s,1H),8.65(s,1H),8.26–8.04(m,2H),7.74–7.63(m,2H),7.63–7.30(m,5H),6.69(d,J＝5.4Hz,1H),4.68(t,J＝5.7Hz,2H),3.64–3.53(m,4H),2.81(t,J＝5.8Hz,2H),2.60–2.52(m,4H).

實施例27 N-(3-氟-4-((7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)-4-氧代-5-苯基-1,4-二氫吡啶-3-碳酰胺(20S)的合成

合成路線同化合物5S，初始原料為化合物19S。¹H NMR(DMSO,300MHz)：δ13.31(s,1H),9.47(s,1H),8.78(d,J＝5.2Hz,1H),8.65(s,1H),8.17–8.04(m,2H),7.67(d,J＝6.8Hz,2H),7.61–7.53(m,2H),7.50–7.32(m,4H),7.25(s,1H),6.56(d,J＝5.2Hz,1H),4.54(t,J＝5.7Hz,2H),3.65–3.54(m,4H),2.81(t,J＝6.8Hz,2H),2.58–2.52(m,4H).

實施例28 N-(4-((8-溴-7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-5-(4-氟苯基)-4-氧代-1,4-二氫吡啶-3-碳酰胺(21S)的合成

合成路線同化合物19S，初始原料為化合物4S和化合物48。¹H NMR(DMSO,300MHz)：δ13.39(s,1H),9.44(s,1H),8.89(d,J＝5.3Hz,1H),8.65(s,1H),8.18–8.03(m,2H),7.81–7.65(m,2H),7.55(s,2H),7.34–7.20(m,2H),6.68(d,J＝4.3Hz,1H),4.68(t,J＝5.6Hz,2H),3.61–3.54(m,4H),2.81(t,J＝5.7Hz,2H),2.61–2.53(m,4H).

實施例29 N-(3-氟-4-((7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)-5-(4-氟苯基)-4-氧代-1,4-二氫吡啶-3-碳酰胺(22S)的合成

合成路線同化合物5S，初始原料為化合物21S。¹H NMR(DMSO,300MHz)：δ13.26(s,1H),9.46(s,1H),8.78(d,J＝5.3Hz,1H),8.64(s,1H),8.16–8.07(m,2H),7.76–7.67(m,3H),7.55–7.48(m,2H),7.30–7.24(m,3H),6.55(d,J＝5.4Hz,1H),4.54(t,J＝5.6Hz,2H),3.63–3.57(m,4H),2.82(t,J＝7.3Hz,2H),2.61–2.52(m,4H).

實施例30 N-(3,4-二氟苯基)-N-(3-氟-4-((7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(23S)的合成

N-(4-((8-溴-7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-N-(3,4-二氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(70)

合成路線同化合物2S，初始原料為化合物63和化合物28。¹H NMR(DMSO,300MHz)：δ10.40(s,1H),10.21(s,1H),9.43(s,1H),8.89(d,J＝5.4Hz,1H),7.94(d,J＝13.6Hz,1H),7.89–7.75(m,1H),7.64–7.48(m,2H),7.46–7.32(m,2H),6.62(d,J＝5.3Hz,1H),4.68(t,J＝5.7Hz,2H),3.67–3.52(m,4H),2.83(t,J＝6.0Hz,2H),2.68–2.54(m,4H),1.57–1.41(m,4H).

N-(3,4-二氟苯基)-N-(3-氟-4-((7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(23S)

合成路線同化合物5S，初始原料為化合物70。¹H NMR(CD₃OD,300MHz)：δ9.48(d,J＝0.6Hz,1H),8.71(d,J＝5.4Hz,1H),7.86(d,J＝12.7Hz,1H),7.71(dd,J＝11.7,6.3Hz,1H),7.46–7.36(m,2H),7.28–7.15(m,3H),6.52(d,J＝5.4Hz,1H),4.70–4.64(m,2H),3.80–3.71(m,4H),3.08–3.01(m,2H),2.85–2.75(m,4H),1.64(m,4H).

實施例31 N-(4-氟-3-甲氧基)-N-(3-氟-4-((7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(24S)的合成

N-(4-((8-溴-7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-N-(3-甲氧基-4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(71)

合成路線同化合物2S，初始原料為化合物63和化合物29。¹H NMR(DMSO,300MHz)：δ10.40(s,1H),10.00(s,1H),9.43(s,1H),8.88(d,J＝7.4Hz,1H),7.94(d,J＝12.9Hz,1H),7.64–7.50(m,3H),7.25–7.14(m,2H),6.60(d,J＝8.2Hz,1H),4.66(t,J＝6.1Hz,2H),3.81(s,3H),3.64–3.55(m,4H),2.80(t,J＝8.4Hz,2H),2.65–2.55(m,4H),1.54–1.44(m,4H).

N-(4-氟-3-甲氧基)-N-(3-氟-4-((7-(2-嗎啡啉乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(24S)

合成路線同化合物5S，初始原料為化合物71。¹H NMR(DMSO,300MHz)：δ9.97(s,1H),9.44(s,1H),9.32(s,1H),8.68(d,J＝5.1Hz,1H),8.30(s,1H),7.80(t,J＝12.8Hz,1H),7.45–7.29(m,2H),7.23–7.19(m,1H),7.06–6.83(m,2H),6.32(t,J＝4.9Hz,1H),4.56(t,J＝5.7Hz,2H),3.89(s,3H),3.79–3.69(m,4H),2.88(t,J＝5.8Hz,2H),2.68–2.57(m,4H),1.83–1.75(m,2H),1.68–1.57(m,2H).

實施例32 N-(3-氟-4-((7-(2-(吡啶-4-烷基)乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(25S)的合成

8-溴-4-氯-7-(2-(吡啶-4-烷基)乙氧基)-1,6-二氮雜萘(72)

合成路線同化合物63，初始原料為化合物62和1-(2-羥乙基)吡啶。¹H NMR(CDCl₃,300MHz)：δ9.21(s,1H),8.94(d,J＝4.7Hz,1H),8.52(d,J＝5.9Hz,2H),7.40(d,J＝4.7Hz, 1H),7.30(d,J＝5.9Hz,2H),4.77(t,J＝6.5Hz,2H),3.18(t,J＝6.5Hz,2H).

N-(4-((8-溴-7-(2-(吡啶-4-烷基)乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(73)

合成路線同化合物2S，初始原料為化合物72和化合物26。¹H NMR(DMSO,300MHz)：δ10.44(s,1H),10.01(s,1H),9.44(s,1H),8.89(d,J＝5.3Hz,1H),8.51(d,J＝7.6Hz,2H),7.94(d,J＝13.9Hz,1H),7.69–7.62(m,2H),7.58–7.48(m,2H),7.49–7.37(m,2H),7.17(t,J＝8.9Hz,2H),6.62(d,J＝6.2Hz,1H),4.80(t,J＝7.2Hz,2H),3.16(t,J＝7.2Hz,2H),1.54–1.43(m,4H).

N-(3-氟-4-((7-(2-(吡啶-4-烷基)乙氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(25S)

合成路線同化合物5S，初始原料為化合物73。¹H NMR(CDCl₃,300MHz)：δ10.19(s,1H),9.44(s,1H),8.68(d,J＝5.2Hz,1H),8.52(d,J＝6.0Hz,2H),8.10(s,1H),7.78(dd,J＝12.1,2.3Hz,1H),7.48–7.38(m,2H),7.29–7.25(m,3H),7.21(m,2H),7.10–6.99(m,2H),6.33(d,J＝5.4Hz,1H),4.67(t,J＝6.7Hz,2H),3.17(t,J＝6.6Hz,2H),1.86–1.76(m,2H),1.61–1.57(m,2H).

實施例33 N-(3-氟-4-((7-((1-嗎啡啉丙基-2-烷基)氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(26S)的合成

4-(2-((8-溴-4-氯-1,6-二氮雜萘-7-烷基)氧代)丙基)嗎啡啉(74)

合成路線同化合物63，初始原料為化合物62和N-(2-羥丙基)嗎啉。¹H NMR(CDCl₃,300MHz)：δ9.21(s,1H),8.93(d,J＝4.7Hz,1H),7.38(d,J＝4.7Hz,1H),5.68–5.57(m,1H),3.57(t,J＝4.6Hz,4H),2.65–2.50(m,4H),1.81–1.66(m,2H),1.43(d,J＝6.2Hz,3H).

N-(4-((8-溴-7-((1-嗎啉丙基-2-烷基)氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(75)

合成路線同化合物2S，初始原料為化合物74和化合物26。¹H NMR(CDCl₃,300MHz)：δ110.20(s,1H),9.35(s,1H),8.81(d,J＝5.3Hz,1H),8.00(s,1H),7.78(d,J＝12.4Hz,1H),7.48–7.38(m,2H),7.28–7.25(m),7.06(t,J＝8.6Hz,2H),6.40(d,J＝5.4Hz,1H),5.72–5.59(m,1H),3.60(t,J＝4.4Hz,4H),2.63–2.53(m,4H),1.86–1.78(m,2H),1.63–1.58(m,4H),1.45(d,J＝6.3Hz,3H).

N-(3-氟-4-((7-((1-嗎啡啉丙基-2-烷基)氧基)-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(26S)

合成路線同化合物5S，初始原料為化合物75。¹H NMR(DMSO,300MHz)：δ10.43(s,1H),10.01(s,1H),9.44(s,1H),8.75(d,J＝5.2Hz,1H),7.93(dd,J＝13.1,2.3Hz,1H),7.64(dd,J＝9.1,5.0Hz,2H),7.59–7.45(m,2H),7.22–7.10(m,3H),6.46(d,J＝5.2Hz,1H),5.58–5.46(m,1H),3.55–3.48(m,4H),2.78–2.56(m,2H),2.50–2.43(m,4H),1.52–1.44(m,4H),1.34(d,J＝6.2Hz,3H).

實施例34 N-(3-氟-4-((7-嗎啡啉-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(27S)的合成

7-嗎啡啉-1,6-二氮雜萘-4(1H)-酮(76)

將(340mg,1.89mmol)的化合物52溶于嗎啡啉中，190℃下反應1h，TLC跟蹤，反應完成后冷卻到室溫，加入乙醚沉淀，過濾，乙醚洗得粗品。¹H NMR(DMSO,400MHz):δ8.83(s,1H),7.74(d,J＝7.6Hz,1H),6.45(s,1H),5.87(d,J＝7.6Hz,1H),3.75–3.65(m,4H),3.54–3.45(m,4H).

N-(3-氟-4-((7-嗎啡啉-1,6-二氮雜萘-4-烷基)氧基)苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰 胺(27S)

合成路線同化合物2S，初始原料為化合物76。¹H NMR(DMSO,400MHz):δ10.54(s,1H),10.02(s,1H),9.55(s,1H),8.84(d,J＝6.0Hz,1H),7.99(d,J＝12.8Hz,1H),7.72–7.62(m,2H),7.62–7.51(m,2H),7.17(t,J＝8.5Hz,2H),7.03(s,1H),6.63(d,J＝7.1Hz,1H),3.84–3.76(m,4H),3.75–3.69(m,4H),1.57–1.43(m,4H).

實施例35 N-(3-氟-4-((7-(4-嗎啡啉哌啶-1-基)-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(28S)的合成

合成路線同化合物27S，初始原料為4-(4-哌啶基)嗎啉。¹H NMR(CDCl₃,300MHz):δ10.05(s,1H),9.39(s,1H),8.55(d,J＝5.3Hz,1H),8.15(s,1H),7.75(d,J＝12.5Hz,1H),7.43(dd,J＝9.3,4.4Hz,2H),7.23–7.16(m,1H),7.05(t,J＝8.8Hz,2H),6.96(s,1H),6.17(d,J＝4.7Hz,1H),4.50(d,J＝12.3Hz,2H),3.84–3.63(m,4H),3.04–2.85(m,2H),2.67–2.54(m,4H),2.52–2.41(m,1H),2.04–1.92(m,2H),1.87–1.75(m,2H),1.69–1.54(m,4H).

實施例36 (S)-N-(3-氟-4-((7-(2-(3-甲基嗎啡啉)乙氧基)-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(29S)的合成

合成路線同化合物26S，初始原料為化合物62和(S)-2-(3-甲基嗎啉)乙醇。¹H NMR(CDCl₃,300MHz):δ10.17(s,1H),9.45(s,1H),8.68(d,J＝5.2Hz,1H),8.10(s,1H),7.77(d,J＝12.3Hz,1H),7.43(dd,J＝9.0,4.8Hz,2H),7.30–7.22(m,3H),7.05(t,J＝8.6Hz,2H),6.32(d,J＝4.9Hz,1H),4.53(t,J＝6.0Hz,2H),3.80(d,J＝11.5Hz,1H),3.72–3.60(m,2H),3.31–3.15(m,2H),2.95–2.74(m,2H),2.65–2.51(m,2H),1.85–1.77(m,2H),1.63–1.56(m,2H),1.04(d,J＝6.3Hz,3H).

實施例37 (R)-N-(3-氟-4-((7-(2-(3-甲基嗎啡啉)乙氧基)-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(30S)的合成

合成路線同化合物26S，初始原料為化合物62和(R)-2-(3-甲基嗎啉)乙醇。¹H NMR(CDCl₃,300MHz):δ10.19(s,1H),9.45(s,1H),8.68(d,J＝5.2Hz,1H),8.13(s,1H),7.77(d,J＝12.5Hz,1H),7.55–7.35(m,2H),7.27–7.19(m,2H),7.05(t,J＝8.6Hz,2H),6.33(d,J＝5.2Hz,1H),4.55(t,J＝4.5Hz,2H),3.86–3.74(m,1H),3.75–3.60(m,2H),3.37–3.14(m,2H),3.01–2.76(m,2H),2.70–2.51(m,2H),1.87–1.74(m,2H),1.68–1.53(m,2H),1.05(d,J＝6.1Hz,3H).

實施例38 N-(4-((7-(2-(1H-咪唑-1-基)乙氧基)-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-N- (4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(31S)的合成

合成路線同化合物26S，初始原料為化合物62和2-(1H-咪唑-1-烷基)乙醇。¹H NMR(CDCl₃,300MHz):δ10.40(s,1H),9.41(s,1H),8.68(d,J＝5.3Hz,1H),8.55(s,1H),7.78(d,J＝12.1Hz,1H),7.65(s,1H),7.43(dd,J＝9.0,4.7Hz,2H),7.33–7.26(m,1H),7.24–7.15(m,2H),7.11–6.97(m,4H),6.34(d,J＝5.2Hz,1H),4.72(t,J＝5.3Hz,2H),4.41(t,J＝5.2Hz,2H),1.86–1.75(m,2H),1.67–1.55(m,2H).

實施例39 N-(4-((7-(4-芐基哌嗪基-1-基)-二氮雜萘-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(32S)的合成

合成路線同化合物27S，初始原料為4-芐基嗎啉。¹H NMR(CDCl₃,300MHz):δ10.03(s,1H),9.39(s,1H),8.55(d,J＝5.3Hz,1H),8.18(s,1H),7.74(d,J＝12.1Hz,1H),7.49–7.39(m,2H),7.39–7.26(m,5H),7.23–7.15(m,1H),7.05(t,J＝8.5Hz,2H),6.92(s,1H),6.18(d,J＝5.1Hz,1H),3.74–3.63(m,4H),3.57(s,2H),2.69–2.54(m,4H),1.84–1.75(m,2H),1.61–1.54(m,2H).

實施例40 N-(3-氟-4-((3-氧代-3,4-二氫吡啶酮[2,3-b]二氮雜苯-8-烷基)氧基)苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(33S)的合成

N-(3-氟-4-((2-氧代-1,2-二氫吡啶酮[2,3-b]二氮雜苯-8-烷基)氧基)苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(34S)的合成

N-(4-((2-氨基-3-硝基吡啶-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(88)

將(1g,5.8mmol)的2-氨基-3-硝基-4-氯吡啶溶于無水DMF中，加入1.1eq的26，后加入1.1eq叔丁醇鉀，用N₂置換三次，80℃攪拌反應1h，TLC跟蹤，反應完成后加入EA沖稀，用飽和的NH₄Cl溶液洗滌，飽和NaCl洗滌，無水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮，柱層析得目標化合物，81％。¹H NMR(300MHz,DMSO)δ10.64(s,1H),9.94(s,1H),8.05(d,J＝5.7Hz,1H),7.97(t,J＝8.6Hz,1H),7.62(dd,J＝9.0,5.0Hz,2H),7.32(d,J＝11.2Hz,1H),7.25(s,2H),7.18(t,J＝8.9Hz,2H),7.06(d,J＝8.4Hz,1H),6.06(d,J＝5.6Hz,1H),1.58(t,J＝10.6Hz,4H).

N-(4-((2,3-二氨基吡啶-4-烷基)氧基)-3-氟苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(89)

將1eq的化合物88溶于20ml THF/MeOH(V:V＝1:1)溶液中，后加入4eq的NiCl₂·6H₂O，0℃下攪拌下分批加入2eq的NaBH₄，繼續(xù)攪拌反應10min，TLC跟蹤，反應完成后加入EA沖稀，用飽和的NH₄Cl溶液洗滌，飽和NaCl洗滌，無水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮，柱層析得目標化合物。¹H NMR(300MHz,CD₃OD)δ8.02(d,J＝5.7Hz,1H),7.87(dd,J＝13.2,2.3Hz,1H),7.68–7.58(m,2H),7.48(d,J＝9.0Hz,1H),7.36(t,J＝9.0Hz,1H),7.24(s,1H),7.20–7.07(m,2H),5.97(d,J＝5.7Hz,1H),1.52–1.40(m,4H).

N-(3-氟-4-((3-氧代-3,4-二氫吡啶酮[2,3-b]二氮雜苯-8-烷基)氧基)苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基-1,1-二酰胺(33S)的合成

N-(3-氟-4-((2-氧代-1,2-二氫吡啶酮[2,3-b]二氮雜苯-8-烷基)氧基)苯基)-N-(4-氟苯基)環(huán)丙基 -1,1-二酰胺(34S)的合成

將(100mg,0.23mmol)化合物89溶于乙醇中，60℃攪拌下，加入2eq的醛基乙酸乙酯的甲苯溶液，繼續(xù)攪拌反應3h，TLC跟蹤，反應完成后加入EA沖稀，用飽和的NH₄Cl溶液洗滌，飽和NaCl洗滌，無水Na₂SO₄干燥，減壓濃縮，柱層析得目標化合物。產率：33S：31％,34S：48％。33S:¹H NMR(DMSO,300MHz)：δ12.96(s,1H),10.40(s,1H),10.01(s,1H),8.37(d,J＝5.7Hz,1H),8.20(s,1H),7.91(d,J＝13.3Hz,1H),7.65(dd,J＝9.1,5.1Hz,2H),7.51(d,J＝8.0Hz,1H),7.39(t,J＝9.0Hz,1H),7.16(t,J＝8.9Hz,2H),6.56(d,J＝5.6Hz,1H),1.58–1.36(m,4H).34S：¹H NMR(DMSO,300MHz)：δ12.67(s,1H),10.41(s,1H),10.00(s,1H),8.43(s,1H),8.35(d,J＝5.4Hz,1H),7.89(d,J＝13.7Hz,1H),7.64(dd,J＝8.7,5.0Hz,2H),7.50(d,J＝9.2Hz,1H),7.40(t,J＝8.9Hz,1H),7.16(t,J＝8.9Hz,2H),6.81(d,J＝5.5Hz,1H),1.49–1.44(m,4H).

實施例41 N-(4-((7-((1-乙基-3-氟哌啶-4-基)氨基)-1,6-萘啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-2-(4-氟苯基)-3-氧-2,3-二氫噠嗪-4-碳酰胺(35S)的合成

合成路線同27S，初始原料為N-乙基-4-氨基-3-氟哌啶。¹H NMR(DMSO,300MHz)：δ9.06(d,J＝15.0Hz,1H),8.93(s,1H),8.82(d,J＝12.5Hz,1H),8.59(d,J＝12.3Hz,1H),7.55(dd,J＝16.0,3.0Hz,1H),7.50–7.41(m,2H),7.41–7.31(m,2H),7.25(d,J＝14.8Hz,1H),7.16(s,1H),7.12(dd,J＝14.9,3.0Hz,1H),6.83(dd,J＝14.9,10.0Hz,1H),5.23–4.91(m,1H),4.06–3.80(m,1H),3.23–2.98(m,1H),2.83–2.69(m,1H),2.57–2.28(m,4H),2.19–2.02(m,1H),1.86–1.68(m,1H),1.09(t,J＝12.6Hz,3H).

實驗實施例

實驗實施例1：吡啶并氮雜環(huán)化合物對c-Met激酶的抑制作用

受體酪氨酸激酶c-Met分子水平酶活抑制初步評價實驗

1、試驗方法

將酶反應底物Poly(Glu,Tyr)_4:1用無鉀離子的PBS(10mM磷酸鈉緩沖液，150mM NaCl,pH7.2-7.4)稀釋成20μg/ml，125μL/孔包被酶標板，置37℃反應12-16小時。棄去孔中液體后洗板，用200μL/孔的T-PBS(含0.1％Tween-20的PBS)洗板三次，每次5分鐘。于37℃烘箱中干燥酶標板1-2小時。

每孔加入用反應緩沖液(50mM 4-羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)pH 7.4,50mM MgCl₂,0.5mM MnCl₂,0.2mM Na₃VO₄,1mM二硫蘇糖醇(DTT))稀釋的三磷酸腺苷(ATP)溶液50μL，終濃度5μM?；衔镉枚谆鶃嗧?DMSO)稀釋成合適的濃度，1μL/孔或者或含相應濃度的DMSO(陰性對照孔)，再加入用49μL反應緩沖液稀釋的c-Met激酶域重組蛋白啟動反應，每次實驗需設無ATP對照孔兩孔。置37℃搖床(100rpm)反應1小時。T-PBS洗板三次。加入一抗PY99稀釋液100μL/孔，37℃搖床反應0.5小時。T-PBS洗板三次。加入二抗辣根過氧化物酶標記羊抗鼠的IgG稀釋液100μL/孔，37℃搖床反應0.5小時。T-PBS洗板三次。加入2mg/ml的鄰苯二胺(OPD)顯色液100μL/孔(用含有0.03％H₂O₂的0.1M檸檬酸－檸檬酸鈉緩沖液(pH＝5.4)稀釋)，25℃避光反應1-10分鐘。(OPD溶解時需用超聲，顯色液需現配現用)。加入2M H₂SO₄ 50μL/孔中止反應，用可調波長式微孔板酶標儀SPECTRA MAX 190讀數，波長為490nm。

樣品的抑制率通過下列公式求得：

將上述篩選得到的具有有效抑制c-Met激酶活性的化合物(化合物在10^-5M對受體酪氨酸激酶c-Met的抑制率>50％)配成梯度濃度，進行IC₅₀評價。用四參數法計算各化合物分子水平抑制蛋白酪氨酸激酶的IC₅₀值，按照其濃度范圍將所得結果分類列入下表1中：

表1 本發(fā)明的化合物對c-Met激酶的抑制活性及其對c-Met介導的EBC-1細胞增殖的抑制活性

^a被測化合物抑制c-Met激酶活性。A:1nM<IC₅₀<10nM；B:10nM<IC₅₀<100nM；C:100nM<IC₅₀<1μM；D:1μM<IC₅₀<10μM；ND:未測試。

結果：研究發(fā)現多個本發(fā)明化合物對c-Met激酶有不同程度的抑制活性，部分化合物在10nM濃度下對c-Met激酶抑制率高達100％。提示本發(fā)明的化合物具有高效作用于c-Met激酶，是結構新穎的c-Met激酶抑制劑。

實驗實施例2：本發(fā)明化合物對c-Met介導的細胞株增殖能力的影響

化合物對非小細胞癌細胞EBC-1細胞(MET基因擴增導致Met持續(xù)活化細胞株，為Met依賴性腫瘤細胞株)的生長抑制檢測采用磺酰羅單明B(sulforhodamine B，SRB)染色法。接種一定數量處于對數生長期的EBC-1細胞于96孔培養(yǎng)板中，每孔90μL，培養(yǎng)過夜后分別加入10μL不同濃度的化合物或者溶劑對照，每個濃度3復孔?；衔镒饔?2小時后，作用結束后，貼壁細胞去培養(yǎng)液，加入10％(w/v)三氯乙酸(100μL/孔)于4℃固定1hr，隨后用蒸餾水沖洗五次，待在室溫下干燥后，每孔加入SRB溶液(4mg/mL，溶于1％冰乙酸)100μL，室溫下孵育染色15min后，用1％冰乙酸沖洗五次洗去未結合的SRB，室溫下干燥后，每孔加入10mM Tris溶液100μL,VERSMax酶標儀測定515nm波長下的光密度(OD值)。按以下列公式計算化合物對腫瘤細胞生長的抑制率：抑制率(％)＝(OD對照孔-OD給藥孔)/OD對照孔×100％。實驗重復兩次。IC₅₀數據根據初篩設置濃度的測試結果推算出范圍。

結果：本發(fā)明的多個化合物對EBC-1細胞增殖有明顯的抑制作用，表明該化合物能夠抑制由c-Met活化介導的細胞增殖活性。具體數據見上表1,表中ND表示未進行相關測試，無相關數據。

實驗實施例3：化合物7S對多個蛋白激酶的抑制作用

實驗方法同實驗實施例1，實驗結果如表2所示。

表2.化合物7S對酪氨酸激酶活性的抑制率(％)

由上表可以看出，本發(fā)明的化合物7S表現出對c-Met、Flt-1、PDGFR-α、PDGFR-β、RET、c-Src、EPH-A2等多種激酶的抑制活性，是一個新結構的多重激酶抑制劑。

實驗實施例4：化合物7S和8S對大鼠藥代藥動學試驗

1.給藥方案

SD大鼠14只，雄性，體重200-220g，隨機分成4組，每組4/3只，分別灌胃和靜脈給予7S和8S，化合物溶于5％的DMSO的生理鹽水中，加入5％的tween-80(吐溫80)助溶，最終樣品濃度為1mg/ml。具體安排見下表3：

表3 化合物7S和8S大鼠藥代藥動學試驗給藥方案

試驗前禁食12h，自由飲水。給藥后2h統(tǒng)一進食。

2.采血時間點及樣品處理：

灌胃給藥：給藥后0.25、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、6.0、8.0和24h；

靜脈給藥：給藥后5min、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0和24h；

在以上設定時間點經大鼠眼球后靜脈叢取靜脈血0.3ml，置肝素化試管中，11000rpm離心5min，分離血漿，于–20℃冰箱中冷凍。

3.樣品測試和數據分析

采用LC/MS/MS法測定大鼠血漿中化合物的濃度。

采用Phoenix 1.3軟件(美國Pharsight公司)的非房室模型計算給藥后的藥代動力學參數。

達峰濃度C_max和達峰時間T_max為實測值；

藥時曲線下面積AUC0-t值：采用梯形法計算；AUC_0-∞＝AUC_0-t+C_t/ke，Ct為最后一個可測得時間點的血藥濃度，k_e為消除速率常數；

消除半衰期t_1/2＝0.693/ke；

平均滯留時間MRT＝AUMC/AUC。

清除率CL＝D/AUC_0-∞；

穩(wěn)態(tài)分布容積V_ss＝CL×MRT

絕對生物利用度F＝(AUC灌胃×D靜脈)/(AUC靜脈×D灌胃)×100％

實驗數據詳見表4和表5。

表4、大鼠靜脈注射5mg/kg化合物7S和8S的藥動學參數

表5、大鼠灌胃10mg/kg化合物7S和8S的藥動學參數

結果顯示，化合物7S表現出良好的藥代性質：生物利用度F＝51.8％，平均滯留時間MRT＝2.6h，半衰期t_1/2＝1.66h,藥時面積AUC＝16652h*ng/ml。

實驗實施例5：化合物7S對人肺癌EBC-1裸小鼠皮下移植瘤的生長抑制作用

實驗方法

EBC-1細胞按5×10⁶/只分別皮下接種于裸小鼠右側腋窩，形成移植瘤后再在裸小鼠體內傳三代后使用。取生長旺盛期的腫瘤組織，無菌條件下剪切成1.5mm³左右，接種于裸小鼠右側腋窩皮下。用游標卡尺測定移植瘤直徑，裸小鼠皮下移植瘤用游標卡尺測量移植瘤直徑，待腫瘤平均體積生長至120-130mm³左右將動物隨機分組。7S，100mg/kg和10mg/kg組，每天口服給藥一次，連續(xù)給藥21天(qd/21，po)。陽性對照藥物PF234106650mg/kg，每天口服給藥一次，連續(xù)給藥21天。溶劑對照給等量溶劑。整個實驗過程中，每周2次測量移植瘤直徑，同時稱量小鼠體重。腫瘤體積(tumor volume,TV)的計算公式為：TV＝1/2×a×b²，其中a、b分別表示長、寬。根據測量的結果計算出相對腫瘤體積(relative tumor volume，RTV)，計算公式為：RTV＝V_t/V₀。其中V₀為分籠給藥時(即d₀)測量所得腫瘤體積，V_t為每一次測量時的腫瘤體積。抗腫瘤活性的評價指標為1)相對腫瘤增殖率T/C(％)，計算公式如下：T/C(％)＝(T_RTV/C_RTV)×100％，T_RTV：治療組RTV；C_RTV：陰性對照組RTV；2)腫瘤體積增長抑制率GI％，計算公式如下： GI％＝[1-(TVt-TV₀)/(CVt-CV₀)]×100％，TVt為治療組每次測量的瘤體積；TV₀為治療組分籠給藥時所得瘤體積；CVt為對照組每次測量的瘤體積；CV₀為對照組分籠給藥時所得瘤體積；3)瘤重抑制率，計算公式如下：瘤重抑制率％＝(Wc-W_T)/Wc×100％，Wc：對照組瘤重，W_T：治療組瘤重。

實驗結果：如圖1和表6所示，化合物7S 100mg/kg組，每天口服給藥一次，連續(xù)給藥21天，對人肺癌EBC-1裸小鼠皮下移植瘤的生長有極其顯著的抑制作用，在第21天所得T/C百分數為9.58％?；衔?S 10mg/kg組，每天口服給藥一次，連續(xù)給藥21天，對人肺癌EBC-1裸小鼠皮下移植瘤的生長有一定的抑制作用，在第21天所得T/C百分數為46.24％。陽性對照藥物PF2341066 50mg/kg組，每天口服給藥一次，連續(xù)給藥21天，對EBC-1裸小鼠皮下移植瘤有極其顯著的抑制作用，第21天所有小鼠腫瘤均完全消退，所得T/C百分數為0.00％。給藥期間各給藥組小鼠狀態(tài)均良好，無小鼠死亡。

表6.7S對人肺癌EBC-1裸小鼠皮下移植瘤的實驗治療作用

*p<0.001，“()”內為腫瘤消退小鼠數。