專利名稱：制備9-氨基喜樹堿的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及制備式I9-氨基-20(s)-喜樹堿的新方法， 式I喜樹堿是已知抗腫瘤劑Wani等人，J.Med.Chem.1987，30，1774-1779；Hsiang等人，Cancer Res.49，4385-4389，Augurt15，1889；Cncer Rse.49，1465-1469，Mavch15，1989。
9-氨基喜樹堿的總合成方法已有廣泛記載(US-記載4,894,456和US-A-5,053,512)。但由于該產(chǎn)物的總合成包括了太多步驟使合成路線太長且尤其太昂貴，使其既不能也不適宜大規(guī)模被制備。
9-氨基喜樹堿的半合成記載于1984年公開的JP-A-59-51288和JP-A-59-51289，其是由已知天然產(chǎn)物喜樹堿超始Cancer Chemotherapy Rcports，Pavt I，Vol，54，No-6，Dec-1970，461-470；J.Med.Chem.，1980，23，554-560；Seience Vol.246.Nov.1989，1046-1048。天然20(s)-喜樹堿具有下式(II) 該半合成方法包括該天然存在的喜樹堿的硝化，隨后還原該9-硝基衍生物。但該硝化一開始就產(chǎn)生了不希望的12-硝基喜樹堿衍生物(70％)和所要的9-硝基喜樹堿衍生物(30％)的70/30混合物。因此，9-硝基衍生物僅以少量形成。
分離開該兩種硝化產(chǎn)物后，本身無生物活性的12-硝基衍生物(見，Wani C.，Nicholas A.W.Wall M.E.，J Med.Chem.，1986，29，2358)，必須排掉，這就帶來許多廢處理問題。除去不需要的12-硝基衍生物副產(chǎn)物帶來的很大缺點與大規(guī)模生產(chǎn)十分有關(guān)，因為要收集大量沒用的12-硝基衍生物并要除去它們。
更具體講，采用該合成方法，十分昂貴的大量天然喜樹堿被用來生產(chǎn)小量的所要抗腫瘤劑-9-氨基喜樹堿。該方法的低生產(chǎn)率和產(chǎn)率使制備相當(dāng)量的所要化合物是困難的。因此，與上述9-氨基喜樹堿的半合成方法相比，需要一種能增加生產(chǎn)率和產(chǎn)率的方法。
本發(fā)明提供了一種制備式(I)9-氨基喜樹堿的新方法，其由式(III)10-或12-羥基-20(s)-喜樹堿起始，按如下面路線I描述進行路線I 其中XO為可還原除去的基團。還原除去意指XO基團可通過用均相或非均相催化劑還原除去。由此XO基團被氫原子取代。
該方法使9-氨基-20(s)喜樹堿以高產(chǎn)率和高生產(chǎn)率合成。該方法特征在于簡便溫和的反應(yīng)條件，確保高產(chǎn)率和反應(yīng)產(chǎn)物清楚。尤其是在最后一步。其氧和內(nèi)酯部分(它們對于生物活性是重要的)在XO基團的整個還原除去中不被破壞。更具體講，由于羥基部分的存在，硝化反應(yīng)在簡便溫和條件(比常規(guī)硝化反應(yīng)條件更安全)下以高區(qū)域選擇性進行。正確的20(s)一構(gòu)型在整個過程中都被保持。
本發(fā)明提供了制備式(I)9-氨基喜樹堿的新方法，
其包括(1)將式(III)化合物 其中環(huán)A中羥基位于10-或12-位，與硝化劑反應(yīng)，得到相應(yīng)的式(IV)化合物 (2)將式(IV)化合物轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)式(V)化合物
其中XO為可還原除去的基團；和(3)還原除去該XO基團并還原式(V)化合物的硝基，從而得到式(I)9-氨基喜樹堿。
該方法以前從沒被探討過，尤其是同時進行的脫氧和硝基還原的雙還原步驟是未知的。在J.Med Chem.34，98，1991中，記載了在四重(tetrakis)三苯基膦Pd(o)存在下，喜樹堿的10-三氟甲磺酸鹽-9-N，N-二甲氨基甲基衍生物的脫氧。但該反應(yīng)的產(chǎn)率非常低(20％)。更具體講，該三氟甲磺酸鹽的制備在選擇性和穩(wěn)定性上是一大問題，這大大限制了其應(yīng)用(見Subramanian，L.R.，等人，Syn-thesis 293，1973)。
雖然在四重三苯基膦Pd(O)存在下的還原脫氧在有機化學(xué)是已知的(見Cacchi，S.，等人，Tetrahedron Letters，27，5541，1986)，但我們已表明在這些條件下，其它許多更適宜的磺酸鹽是非反應(yīng)活性的(見Cabri.W.，等人，J.Org Chem.55，350，1990)。將不同的膦或磺酸鹽用于喜樹堿從沒有報道過并且它們的用途基于現(xiàn)有文獻是不能預(yù)測的。此外，在硝基存在于磺酸硝的鄰或?qū)σ晃豢杀扔糜贖eck類反應(yīng)引起更低的產(chǎn)率是已知的(見J.Org.Chem.57，1481，1992和Echavarren.A.M.，Stille J.K.，；J Am.Chem.Suc 109，5478，1987)出人意料的是，本方法中的脫氧反應(yīng)可在溫和條件下，用以前沒記載過的低反應(yīng)活性磺酸酯進行，且盡管有硝基存在仍提供了高產(chǎn)率的所要產(chǎn)物。硝基本身可出人意料地在反應(yīng)介質(zhì)中進行還原。所要9-硝基衍生物可一步得到而不需進一步的反應(yīng)。硝基的這種伴隨反應(yīng)是未知的且按目前文獻是不能預(yù)測的(見Cacchi，S.，等人，Tetrahedron Letters27，5541，1986)。
本發(fā)明超始化合物是式(III)化合物。其20(s)一構(gòu)型在整個過程中一直保留。式(III)化合物一般無相應(yīng)的20(R)一異構(gòu)體。但本發(fā)明也可用式(III)化合物的外消旋混合物和相應(yīng)的20(R)-異構(gòu)體。在該情況中，可得到式(I)9-氨基-20(S)-喜樹堿和9-氨基-20(R)-喜樹堿的混合物。式(III)化合物可通過已知方法由20(S)-喜樹堿得到(見JP-A-59-51288；JP-A-59-51299；J.Med.chem，34，98，1991；和Chem.Pharm.Bull，1991，39，3183，1991)。
進一步講，12-羥基-20(S)-喜樹堿可由已知12-硝基20(S)-喜樹堿制備。12-硝基-20(S)-喜樹堿首先還原為12-氨基-20(S)-喜樹堿。該還原在適宜還原劑存在下，可用適宜還原劑或通過用適宜催化劑的催化還原進行。例如如下述文獻所述進行J.March，Advanced Orgamc Chemistry，Third Editon，1103。
該反應(yīng)例如可在下面條件下進行還原劑如SnCl2，或其它金屬或金屬鹽如Zn或Fe和它們的鹽，在適宜溶劑如稀HCl水溶液，稀質(zhì)子傳遞(protic)酸水溶液，水，乙醇，甲醇或其混合物；于溫度-20℃至60℃，反應(yīng)時間幾分鐘-幾天如5分鐘-3天，例如4小時-24小時。
另外該還原也按下列條件進行用可使硝基還原的催化量金屬，如鈀，氧化鉑，鉑，銠或釕；在分子氫或氫源存在下，如三乙銨甲酸鹽，甲酸，氫化三丁基錫，環(huán)己二烯等；在適宜溶劑，如二甲基甲酰胺(DMF)，MeOH，乙酸，CHCl3，二噁烷，或它們的混合物；在0℃-100℃；反應(yīng)時間1小時-3天；壓力1大氣壓-100大氣壓。
12-氨基20(S)喜樹堿可用適宜試劑如氧化銅(I)，通過形成不需從反應(yīng)混合物分離的重氮衍生物，轉(zhuǎn)變?yōu)?2-羥基-20(S)-喜樹堿。
重氮化反應(yīng)可按下面條件進行用適宜重氮化試劑，如NaNO2，在稀質(zhì)子傳遞酸(如HCl或H2SO4)水溶液或有機溶劑中的有機亞硝酸酯；于溫度-20℃至100℃；反應(yīng)時間幾分鐘-數(shù)小時，如5分鐘-24小時；然后所得溶液與從化學(xué)計量至大大超出化學(xué)計量，如達到10倍摩爾量的氧化銅(I)，任選擇地在硝酸銅(I)水溶液存在下，于0°-100℃反應(yīng)幾分鐘-1天如5分鐘-1天。
式(III)化合物可與適宜常規(guī)硝化劑反應(yīng)得到式(IV)化合物。式(III)化合物的硝化可用硝化劑，如硝酸，硝酸和硫酸的混合物，或其它硝化劑，如硝酸鉀或硝酸和三氟化硼如三氟化硼單水合物(見Olah，G.A.等人，Synthesis1085，1992)，或硝酸/三氟甲磺酸酐(ibid，1087，1992)，于溫度-20℃至100℃，進行幾分鐘-數(shù)天，如5分鐘-3天，例如4小時-24小時。
式(IV)化合物接著轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)式(V)化合物。這可通過將式(IV)化合物與式(VI)磺化劑反應(yīng)達到X-R″(VI)其中X為R-SO2-，其中R為(i)未取代或由一個或多個，例如一，二或三個取代基取代的苯環(huán)或萘環(huán)，取代基選自C1-5直鏈或支鏈烷基，C1-5直鏈或支鏈烷氧基，鹵素，羥基，氨基和硝基；或
(ii)未取代或由一或多個取代基如一、二或三個鹵原子取代的直鏈或支鏈烷基；和R″為鹵原子，咪唑基，-OSO2R或-N(C6H5)(RSO2)，其中R如上定義或為能與苯酚反應(yīng)得到磺酸酯的另一基團。
C1-9烷基優(yōu)選為C1-5烷基，如甲基，乙基，正丙基或異丙基。C1-5烷氧基可為C1-4烷氧基，如甲氧基，乙氧基，正丙氧基或異丙氧基。
鹵原子可為氟，氯或溴。由一或多個鹵原子取代的C1-5烷基可是C1-5全鹵烷基，如C1-5全氯烷基或全氟烷基；如三氟甲基。當(dāng)X基團在本發(fā)明化合物中存在時，優(yōu)選定義選自上式R-SO2-的選擇性取代的磺酸酯，其中R是(i)未取代或由一個選自C1-5直鏈或支鏈烷基，C1-5直鏈或支鏈烷氧基，鹵原子，羥基，氨基和硝基的一個取代基取代的苯環(huán)或萘環(huán)；或(ii)未取代或由一或多個取代基，如一、二或三個鹵原子(優(yōu)選氟或氯)取代的直鏈或支鏈C1-5烷基。
更優(yōu)選的X基團是R-SO2-，其中R為(i)未取代或由選自C1-5直鏈烷基，C1-5直鏈烷氧基，氟或氯的一個取代基取代的苯環(huán)或萘環(huán)；或(ii)未取代或由一或優(yōu)選多個取代基，如二或三個氟原子取代的直鏈C1-5烷基。
在X基團存在于本發(fā)明化合物中時，其優(yōu)選定義選自下面基團對甲氧苯磺?；瑢妆交酋；?，對氟苯磺?；?，甲磺?；?，三氟甲磺?；?，苯磺酰基，對硝基苯磺?；?-或2-萘磺?；?。
式(VI)化合物的優(yōu)選定義包括對甲氧苯磺酰氯，對甲苯磺酰氯，對氟苯磺酰氯，甲磺酰氯，三氟甲磺酸酐，苯磺酰氯，對-硝基苯磺酰氯，N-苯基三氟甲磺酰亞胺或1-或2-萘橫酰氯。
為得到式(V)化合物而進行的式(IV)化合物與式(VI)化合物反應(yīng)可在溫度-50℃至100℃，如0℃-50℃進行。反應(yīng)時間為5分鐘-3天，如4小時-24小時。反應(yīng)一般在無水有機溶劑中進行，如CHCl3，CH2Cl2，四氫呋喃(THF)，二噁烷，二甲基甲酰胺(DMF)，二甲基乙酰胺(DMA)等。有機堿可選擇性地存在，如吡啶，三乙胺或位陽堿，如二異丙胺，2，6-二甲基吡啶等。
XO官能團的還原除去和硝基還原可將式(V)化合物轉(zhuǎn)變?yōu)槭?I)化合物。這可在適宜催化劑存在下用適宜還原劑來達到。XO基團的除去和將硝基還原為氨基可在一步或兩步中進行。在后一種情況中，XO基團的除去和硝基的還原可按任何順序進行。
因此還原可在兩步中進行，首先將式(V)化合物(其中X為基團R-SO2-，R如上定義)中的硝基官能團)用適宜還原劑還原，得到式(VII)化合物，其中X如上定義， 然后用適宜還原劑進行式(VII)化合物的脫氧還原，得到所要的9-氨基衍生物(I)。
如需要，兩步還原也可如下進行首先將式(V)化合物脫氧，得到式(VIII)化合物，然后式 (VIII)化合物再用適宜還原劑還原，得所要的式(I)化合物。
適宜還原劑在適宜催化劑存在下，如鈀，氧化鉑，鉑，銠或釕，或催化劑載到適宜介質(zhì)上，如碳上，CaCO3上，BaSO4上，氧化鋁上等，催化劑包括分子氫，甲酸銨，三乙銨甲酸鹽，甲酸，氫化三丁基錫，環(huán)己二烯，聚甲基羥基硅烷等。另外，反應(yīng)可在均相條件下進行。然后還原在式(IX)化合物存在下(其中M為過渡金屬原子；L和L′可相同或不同，為陰離子如Cl-或CH3COO-或中性分子或溶劑分子，單或二膦，亞磷酸鹽或二胺；n和m為0-4，一般men至少為1，例如為1，2，3或4)通過用還原劑如甲酸銨，甲酸，氫化三丁基錫，環(huán)己二烯或聚甲基羥基硅烷來完成。
優(yōu)選的過渡金屬原子M是鈀，鎳和鉑。優(yōu)選的L和或L′基團是螯合的二膦，如雙(二苯基膦基)甲烷，1，2-和1，3-雙(二苯基膦基)丙烷，1，4-雙(二苯基膦基)丁烷，1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵或三苯基膦。過渡金屬原子∶螯合二膦的摩爾化一般為1∶1-1∶4。用于該還原的適宜溶劑為有機溶劑，如DMF，MeOH，乙酸，CHCl3，二噁烷，THF或它們的混合物，反應(yīng)溫度為0°-200℃，反應(yīng)時間為1小時-3天如4小時-24小時。
當(dāng)還原分兩步進行時，第一步進行的時間短，如幾分鐘-數(shù)小時，如5分鐘-12小時。如需要可分離出中間體衍生物。然后第二步還原進行幾分鐘-數(shù)小時，如5分鐘-12小時。用于這兩步的適宜溶劑是苯，甲苯，CHCl3，乙腈，DMF，二噁烷等，或它們的混合物。適宜的溫度為室溫-溶劑回流溫度。
用于將式(III)化合物轉(zhuǎn)變?yōu)槭?IV)化合物的優(yōu)選試劑是硝酸，硝酸和硫酸的混合物，或硝酸鉀或硝酸與三氟化硼單水合物或硝酸/三氟甲磺酸酐的混合物，溫度為-20℃-60℃，反應(yīng)時間為幾分鐘-數(shù)小時如5分鐘-12小時。
用于將式(IV)化合物轉(zhuǎn)變?yōu)槭?V)化合物的優(yōu)選試劑是磺?；瘎?，如對-甲苯磺酰氯，對-氟苯磺酰氯，甲磺酰氯，三氟甲磺酸酐，苯磺酰氯，對-硝基苯磺酰氯，N-苯基三氟甲磺酰亞胺或1-或2-萘磺酰氯，它們于無水有機溶劑中如CHCl3，CH2Cl2，THF，二噁烷，DMF，DMA等，反應(yīng)溫度為-20-80℃，反應(yīng)時間為幾分鐘如5分鐘，至2天。可選擇性地存在有機堿，如吡啶，三乙胺或位阻堿如二異丙基乙胺或2，6-二甲基吡啶。
最優(yōu)選的試劑是磺酰化劑，如對甲苯磺酰氯，對氟苯磺酰氯或甲磺酰氯，其溶于有機溶劑如CHCl3，CH2Cl2，THF，二噁烷，DMF或DMA中，溫度為-20-60℃，時間為幾分數(shù)如5分鐘，至1天。最優(yōu)選的選擇性有機堿是吡啶，三乙胺或位阻堿如二異丙基乙胺。
用于將式(V)化合物轉(zhuǎn)變?yōu)槭?VII)，(VIII)和(I)的化合物的優(yōu)選還原劑是
—分子氫；—當(dāng)適宜催化劑如鈀，氧化鉑或鉑(其或直接使用或載于適當(dāng)介質(zhì)如碳，CaCO3，BaSO4，氧化鋁上)存在時，甲酸銨，甲酸三乙銨，甲酸，氫化三丁基錫，環(huán)己二烯，聚甲基羥基硅烷等；或—當(dāng)上述通式為(IX)的催化劑(其中M，L，L′，m和n如上定義)存在時，甲酸銨，甲酸三乙銨，甲酸，聚甲基羥基硅烷或氫化三丁基錫。
磷配位體L和L′的最佳定義是1，3-雙(二苯基膦)丙烷，1，4-雙(二苯基膦)丁烷，1，1′-雙(二苯基膦)二茂鐵或三苯基膦。
用于還原步驟的適宜溶劑是有機溶劑。如DMF，CHCl3二噁烷，THE，DMSO，DMA或其混合物。優(yōu)選的溫度為20℃-120℃，優(yōu)選的反應(yīng)時間為1小時-2天。
最優(yōu)選的還原劑是分子氫，甲酸三乙銨，甲酸和氫化三丁基錫。用于該反應(yīng)步驟的最優(yōu)選溶劑是DMF，二噁烷，THF，DMSO，DMA或其混合物。
式(I)9-氨基喜樹堿是部位異構(gòu)酶I(topoisomeraseI)的抑制劑。其可用于治療癌癥，尤其是白血病，結(jié)腸和直腸腫瘤。因此該化合物可用于改善癌癥患者癥狀。其也可用于緩解癌癥。
因此有效量的9-氨基喜樹堿可給藥于所需宿主，一般為人類。該活性化合物可通過任何途徑給藥，如口服或非腸道如靜脈。通過這些途徑給予人類患者的活性化合物劑量為0.1-60mg/kg體重，優(yōu)選的劑量范圍為1-40mg/kg體重。
為了給藥目的，式(I)9-氨基喜樹堿可與藥用載體或稀釋劑配成藥物組合物。根據(jù)給藥途徑，可用任何適宜的載體或稀釋劑。適宜類型的配方見US-A-5106742和WO91/05566。
在本發(fā)明的范圍中也包括上述式(V)和(VII)化合物及其藥用鹽，其中X如上定義。
式(V)和(VII)化合物也具有抗腫瘤活性；例如，它們對白血病和固體腫瘤如結(jié)腸和直腸腫瘤是有效的。
當(dāng)本發(fā)明化合物在體外于L1210鼠白血病細胞上進行試驗時，用每分子的梯度濃度連續(xù)治療48小時后，它們被發(fā)現(xiàn)具有細胞毒活性(用對細胞生長產(chǎn)生50％抑制的濃度-IC50-表達)，從而顯示本發(fā)明化合物的抗腫瘤活性。每分子IC50是由劑量一反應(yīng)曲線，用Coueter計數(shù)器計出細胞總數(shù)來測定的。
例如本發(fā)明化合物9-氨基-10(對-甲苯磺酰氧基)-20(S)-喜樹堿(內(nèi)部編號FCE28948)和9-硝基-10-(對-甲苯磺酰氧基)-20(S)-喜樹堿(內(nèi)部編號FCE28899)的IC50值分別為10.6和43.0ng/ml。
因此可通過將藥用有效量的式(V)或(VII)化合物或其鹽給藥于人體或動物體的方法來治療人體或動物體。由此可改善人類或動物的癥狀。
本發(fā)明化合物可以各種劑型給藥，如口服劑型，如片劑、膠囊、錠劑、液體溶液或懸浮液；直腸劑型如栓劑；非腸道途徑，如肌內(nèi)，靜脈，皮內(nèi)或皮下。
劑量取決于患者年齡，體重，狀況和給藥途徑。例如，給予成人的適宜劑量為約0.1-60mg/kg體重，優(yōu)選約1-40mg/kg體重。
本發(fā)明藥物組合物含有作為活性物質(zhì)的式(V)式((VII)化合物及一種或多種藥用賦形劑。
本發(fā)明藥物組合物一般按下面常規(guī)方法制備并以適宜藥用劑型給藥。例如，用于靜脈注射或滴注的溶液可含有例如無菌水作載體，或者它們優(yōu)選以以無菌水性等滲鹽溶液形式使用。
用于肌內(nèi)注射的混懸液或溶液除含有活性化合物外，還含有藥用載體，如無菌水，橄欖油，油酸乙酯，二醇，如丙二醇，和如需要，合適量利多卡因鹽酸鹽。固體口服劑型，如片劑和膠囊，除含活性化合物外，還含有稀釋劑，例如乳糖，葡萄糖，蔗糖，纖維素，玉米淀粉和馬鈴薯淀粉；潤滑劑，如二氧化硅，滑石，硬脂酸，硬脂酸鎂或鈣，和/或聚乙二醇；粘合劑，例如淀粉，阿拉伯樹膠，明膠，甲基纖維素，羧甲基纖維素，聚乙烯吡咯烷酮；解聚劑，如淀粉，藻酸，藻酸鹽，淀粉乙醇酸鈉；泡騰劑混合物；著色劑；甜味劑；潤濕劑，例如，卵磷脂，多乙氧基醚，硫酸月桂基酯；和制藥配方中常用的無毒非藥理活性物質(zhì)。所述藥物制劑可按已知方法制備，例如通過混合，造粒壓片，糖包衣或膜包衣等方法。
下面的實施例說明了本發(fā)明的中間體和化合物的制備，但并不限制本發(fā)明的范圍。實施例19-硝基-10-羥基-20(S)-喜樹堿(方法A)將50ml的35％H2O2滴入2.8g 20(S)-喜樹堿在乙酸中的懸浮液中。將溶液的溫度升至80℃并保溫3.5小時。冷卻后，將溶劑蒸發(fā)直至剩下大約20ml。再將混合物倒入200ml水和冰中。將沉淀物過濾，并用水和乙醚洗滌，干燥。產(chǎn)物結(jié)晶(CHCl3/己烷)得到1.9g 20(S)-喜樹堿1-氧化物。
將0.65g 20(S)-喜樹堿1-氧化物溶于600ml的二惡烷中，再加入8.8ml的1M H2SO4，溶液被輻照50分鐘(帶有派熱克斯濾光片的高壓水銀燈)。蒸發(fā)溶劑后，將得到的10-羥基喜樹堿不作任何提純而直接用于下面的步驟(硝化)。
將10-羥基-20(S)-喜樹堿溶于40ml的HNO3(30％)中；1小時后再加入4ml的HNO3(65％)。將反應(yīng)混合物在室溫下放置18小時，然后用CH2Cl2萃取。用水洗滌有機相直至中性，用NaSO4干燥，蒸發(fā)后得到0.250g 9-硝基-10-羥基-20(S)-喜樹堿。H1NMR(DMSO-d6)，δppm0.86(3H，t，J＝7.3Hz)；1.84(2H，m)；5.23(2H，s)； 5.40(2H，s)；6.51(1H，s)；7.26(1H，s)；7.6-8.2(2H，m)；8.42(1H，s).方法B使20(S)-喜樹堿(1g)和預(yù)制的PtO2(0.2g)在1∶1的乙酸-二惡烷混合物(200ml)中的懸浮液在室溫和常壓下氫化，直至混合物吸附了2當(dāng)量的H2。將懸浮液過濾，在真空中蒸發(fā)得到的溶液，從而獲得0.6g四氫衍生物混合物。
向在三氟乙酸(15ml)中的粗四氫衍生物混合物(0.5g)中加入四乙酸鉛(2.1g)。在室溫下攪拌混合物15分鐘，再在真空中蒸發(fā)。將得到的粗10-羥基-20(S)-喜樹堿不作進一步的提純就用于后續(xù)的步驟。
將10-羥基-20(S)-喜樹堿溶于40ml的HNO3中(30％)；1小時后再加入4ml的HNO3(65％)。用水洗滌反應(yīng)混合物直至中性，用Na2SO4干燥，蒸發(fā)后得到0.250g標題化合物，它與用方法A得到的產(chǎn)物相同。實施例29-硝基-10-(對-氟苯磺酰氧基)-20(S)-喜樹堿向0.3g 9-硝基-10-羥基-20(S)-喜樹堿在20mlCH2Cl2的溶液中加入0.17g對-氟苯磺酰氯和0.12ml Et3N。1小時后，用10％HCl處理反應(yīng)混合物，然后用水洗滌有機相直至中性；并用NasO4干燥。蒸發(fā)溶劑，用柱色譜提純得到0.24g標題所示的產(chǎn)物。H1NMR 2H，m)；5.26(2H，s)；5.42(2H，Abq)；7.37(1H，s)；7.5-8.1(5H，m)；8.53(1H，d，J＝9.9Hz)；8.60(1H，s).實施例39-硝基-10-(三氟甲磺酰氧基)-20(S)-喜樹堿在氬氣氛中，將0.2g 9-硝基-10-羥基-20(S)-喜樹堿和0.08ml的Et3N在10ml CH2Cl2中的溶液冷至0℃。將溶于1mlCH2Cl2中的0.1ml三氟甲磺酸酐在5分鐘內(nèi)滴入溶液中。經(jīng)過0.5小時后，如實施例2對反應(yīng)混合物進行處理。經(jīng)柱色譜后得到0.18g9-硝基-10(三氟甲磺酰氧基)-20(S)-喜樹堿。H1NMR(DMSO-d6)，δppm0.86(3H，t，J＝7.3Hz)；1.86(2H，m)；5.31(2H，s)；5.44(2H，ABq)；6.58(1H，s)；7.41(1H，s)；8.2-8.7(2H，m)；8.82(1H，s).實施例49-硝基-10-(甲磺酰氧基)-20(S)-喜樹堿在氬氣氛下，在5分鐘內(nèi)向0.3g 9-硝基-10-羥基-20(S)-喜樹堿在15ml CH2Cl2中，并含0.122ml Et3N的溶液中，滴入溶于1ml CH2Cl2中的0.07ml甲磺酰氯，并冷至0-5℃。0.5小時后、如實施例2處理反應(yīng)混合物。經(jīng)柱色譜后得到0.3g 9-硝基-10-(甲磺酰氧基)-20(S)-喜樹堿。H1NMR H，m)；3.70(3H，s)；5.29(2H，s)；5.43(2H，s)；7.39(1H，s)；8.1-8.6(2H，m)；8.69(1H，s).實施例59-氨基-20(S)-喜樹堿向0.1g 9-硝基-10(對-氟苯磺酰氧基)-20(S)-喜樹堿在2ml DMF中的溶液，加入0.1ml三乙基胺，0.028ml(甲酸，0.005g，1，1′-雙(二苯基膦)二茂鐵和0.002g Pd(OAc)2。然后，將混合物加熱至80℃并保持4小時。在真空中蒸發(fā)溶劑，用柱色譜提純粗的反應(yīng)混合物。獲得黃色固體即為標題產(chǎn)物(0.03g)。H1NMR(DMSO-d6)，δppm0.87(3H，t，J＝7.3Hz)；1.85(2H，m)；5.26(2H，s)；5.41(2H，s)；6.11(2H，s)；6.50(1H，s)；6.79(1H，m)；7.28(1H，s)；7.3-7.5(2H，m)；8.83(1H，s).實施例69-氨基-20(S)-喜樹堿向0.1g 9-硝基-10-甲磺酰氧基-20(S)-喜樹堿在3ml(二惡烷的溶液/懸浮液中，加入0.04ml三乙基胺，0.011ml甲酸，0.007g 1，1′-雙(二苯基膦)-二茂鐵和0.003g Pd(OAc)2。然后，將混合物在90℃下加熱1小時。1小時后再加入0.35ml(1.8M的甲酸溶液。1小時后，在真空中蒸發(fā)溶劑，并用柱色譜提純粗的反應(yīng)混合物。得到0.06g黃色固體，為標題產(chǎn)物。H1NMR(DMSO-d6)，δppm0.87(3H，t，J＝7.3Hz)；1.85(2H，m)；5.26(2H，s)；5.41(2H，s)；6.11(2H，s)；6.50(1H，s)；6.79(1H，m)；7.28(1H，s)；7.3-7.5(2H，m)；8.83(1H，s).實施例79-氨基-20(S)-喜樹堿向0.1g 9-硝基-10-三氟甲磺酰氧基-20(S)-喜樹堿在4ml二惡烷的溶液中，加入25ml聚甲基羥基硅烷，0.004g 1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵和0.002g Pd(OAc)20。再將混合物在40℃下加熱3小時。在真空中蒸發(fā)溶劑，用柱色譜提純粗的反應(yīng)混合物。得到0.036g黃色固體，為標題產(chǎn)物。H1NMR(DMSO-d6)，δppm0.87(3H，t，J＝7.3Hz)；1.85(2H，m)；5.26(2H，s)；5.41(2H，s)；6.11(2H，s)；6.50(1H，s)；6.79(1H，m)；7.28(1H，s)；7.3-7.5(2H，m)；8.83(1H，s).實施例89-硝基-12-羥基-20(S)-喜樹堿在0-5℃下，向攪拌的12-硝基-20(S)-喜樹堿(20g)在濃HCl(20ml)的溶液/懸浮液中，加入41.g無水SnCl2，將得到的混合物在室溫下攪拌過夜。過濾得到的固體，用少量的濃HCl洗滌固體。水中懸浮有黃色固體，并分批加入固體碳酸氫鈉調(diào)ph值至約2。過濾收集固體，并用水洗滌至中性，然后用乙醇和乙醚洗滌。干燥后，得到10.5g 12-氨基-20(S)-喜樹堿。
攪拌下，于0-5℃下，向12-氨基-20(S)-喜樹堿(1g)在35％ H2SO4(100ml)的溶液中加入溶于30ml水中的亞硝酸鈉(2g)。10分鐘后，加入1g尿素，再將反應(yīng)混合物攪拌10分鐘。將混合物滴入含有CuNO3(20g)水溶液的燒瓶中，再向溶液中加入3gCu2O。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物30分鐘。然后用二氯甲烷萃取反應(yīng)混合物。在真空中蒸發(fā)溶劑，再用柱色譜提純殘余物，得到0.65g12-羥基喜樹堿。
再如實施例1方法A和B所述，對由上述制得的產(chǎn)物進行硝化。實施例99-硝基-12(對-氟苯磺酰氧基)-20(S)-喜樹堿如上面實施例2所述進行反應(yīng)，只是使用9-硝基-12-羥基-20(S)-喜樹堿作為原料，獲得標題產(chǎn)物。實施例109-硝基-12-三氟甲磺酰氧基-20(S)-喜樹堿如前面實施例3所述進行反應(yīng)，只是使用9-硝基-12-羥基-20(S)-喜樹堿作為原料，獲得了標題產(chǎn)物。實施例119-硝基-12-(甲磺酰氧基)-20(S)-喜樹堿如前面實施例4所述進行反應(yīng)，只是使用9-硝基-12-羥基-20(S)-喜樹堿作為原料，獲得了標題產(chǎn)物。實施例129-氨基-20(S)-喜樹堿如前面實施例5所示進行反應(yīng)，只是使用9-硝基-12-(對氟苯磺酰氧基)-20(S)-喜樹堿作為原料，獲得了標題產(chǎn)物，它與真實樣品相同。實施例139-氨基-20(S)-喜樹堿如前面實施例6所述進行反應(yīng)，只是使用9-硝基-12-甲磺酰氧基-20(S)-喜樹堿作為原料，獲得標題產(chǎn)物，它與真實樣品相同。實施例149-氨基-20(S)-喜樹堿如前面實施例7所示進行反應(yīng)，只是使用9-硝基-12-三氟甲磺酰氧基-20(S)-喜樹堿作為原料，獲得了標題產(chǎn)物，它與真實樣品相同。實施例159-氨基-10-(對-氟苯磺酰氧基)-20(S)-喜樹堿在0.02g 10％的Pd/c存在下，使0.25g 9-硝基-10-(對-氟苯磺酰氧基)-20(S)-喜樹堿溶于10ml二惡烷的溶液在室溫和大氣壓力下氫化4小時。濾除催化劑并在真空中除去溶劑。用柱色譜提純粗產(chǎn)物，得到0.2g標題產(chǎn)物。H1NMR(DMSO-d6)，δppm0.86(3H，t，J＝7.3Hz)；1.84(2H，m)；5.23(2H，s)；5.40(2H，s)；6.00(2H，s)；6.52(1H，s)；7.28(1H，s)；7.3-7.8(6H，m)；8.83(1H，s).實施例169-硝基-20(S)-喜樹堿向0.1g 9-硝基-10-(對-氟苯磺酰氧基)-20(S)-喜樹堿在2ml(二惡烷中的溶液里，加入0.1ml的三乙基胺，0.028ml的甲酸，0.0055g的1，1′-雙(二苯基膦)二茂鐵和0.002g(Pd(OAc)2。然后將混合物在80℃下加熱30分鐘。在真空中蒸發(fā)溶劑，用柱色譜提純粗的反應(yīng)混合物。得到黃色固體，為題目所指的化合物。H1NMR(DMSO-d6)，δppm0.87(3H，t，J＝7.3Hz)；1.86(2H，m)；5.33(2H，s)；5.43(2H，s)；6.56(1H，s)；7.38(1H，s)；8.0-8.6(3H，m)；9.15(1H，s).實施例179-氨基-20(S)-喜樹堿在0.02g 10％的Pd/c存在下，使在7.5ml的DMF中溶有0.6g 9-硝基-20(S)-喜樹堿的溶液在室溫和大氣壓力下氫化四小時。濾除催化劑，用溫DMF反復(fù)洗滌。在真空中蒸發(fā)溶液，并用柱色譜提純粗的反應(yīng)混合物，得到題目所指的產(chǎn)物。實施例189-硝基-10-(對-甲苯磺酰氧基)-20(S)-喜樹堿如實施例2所示進行操作，但是使用P-甲苯磺酰氯(0.16g)，得到題目所指的化合物(0.36g)。H1NMR(DMSO-d6)，δppm0.86(3H，t，J＝7.3Hz)；1.86(2H，m)；2.44(3H，s)；5.26(2H，s)；5.42(2H，ABq)； 6.56(1H，s)；7.37(1H，s)；7.5-8.0(5H，m)；8.51(1H，d，J＝9.8Hz)；8.59(1H，s).實施例199-氨基-20(S)-喜樹堿如實施例5所述進行反應(yīng)，只是使用9-硝基-10-(對-甲苯磺酰氧基)-20(S)-喜樹堿作為原料獲得題目所指的產(chǎn)物，它與在實施例5中獲得的產(chǎn)物相同。實施例209-硝基-20(S)-喜樹堿如實施例16所述進行反應(yīng)，只是用9-硝基-10-(對-甲苯磺酰氧基)-20(S)-喜樹堿作為原料獲得了題目所指的產(chǎn)物，它與由實施例16所獲產(chǎn)物相同。實施例219-氨基-10-(對-甲苯磺酰氧基)-20(S)-喜樹堿在0.025g預(yù)制的PtO2存在下，使0.1g 9-硝基-10-(對-甲苯磺酰氧基)-20(S)-喜樹堿于5ml的DMF中的溶液在定溫和大氣壓力下氫化24小時。通過過濾除去催化劑，在真空中濃縮溶液。用柱色譜提純粗的反應(yīng)混合物，獲得0.05g題目所示的產(chǎn)物。H1NMR(DMSO-d6)，δppm0.87(3H，t，J＝7.3Hz)；1.84(2H，m)；2.37(3H，s)；5.23(2H，s)；5.40(2H，s)；5.98(2H，s)；6.50(1H，s)；7.2-7.5(5H，m)；7.83(2H，m)；8.85(1H，s).
權(quán)利要求
1.一種制備式(I)所示的9-氨基喜樹堿的方法， 所說的方法包括(1)使式(III)所示的化合物(其中環(huán)A上的羥基位于10-或12-位)與硝化劑反應(yīng)，以得 到對應(yīng)于式(IV)的化合物 (2)將式(IV)的化合物轉(zhuǎn)變成對應(yīng)于式(V)的化合物 其中XO是一個可以通過還原除去的基團；和(3)還原除去上述的XO基團，并還原式(V)化合物上的硝基，得到式(I)的9-氨基喜樹堿。
2.根據(jù)權(quán)利要求的1的方法，其中步驟(2)為將式(IV)的化合物與式(VI)的磺?；瘎┓磻?yīng)，X-R″(VI)其中X為R-SO2-，R為(i)未取代的或被1個或多個取代基取代的苯基或萘基環(huán)，取代基可以是例如一個、二個或三個選自C1-C5直鏈或支鏈的烷基，C1-C5直鏈或支鏈的烷氧基，鹵素，羥基，氨基和硝基的基團；或(ii)未取代的或被一個或多個，例如一個、兩個或三個鹵原子取代的直鏈的或支鏈的C1-C9烷基；以及R″是鹵原子、咪唑基，-OSO2R或-N(C6H6)(RSO2)基，其中R如前面所定義，或為另一個可與酚反應(yīng)得到磺酸酯的基團。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中式(V)的化合物在步驟(3)中一步還原為式(I)的化合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中步驟(3)為將式(V)的化合物還原成下面式(VII)的化合物 其中XO如權(quán)利要求1中所定義，再將式(VII)的化合物還原，得到式(I)的化合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中步驟(3)為將式(V)的化合物還原得到對應(yīng)于式(VIII)的化合物 并還原式(VIII)的化合物得到式(I)的化合物。
6.一種制備式(I)的化合物的方法，該方法包括還原除去權(quán)利要求1定義的式(V)化合物中的XO基團，并還原其上的硝基。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中式(V)的化合物一步被還原成式(I)的化合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中式(V)的化合物在這種條件下被還原，以得到一種如權(quán)利要求4所定義的式(VII)的化合物，然后式(VII)的化合物被還原為式(I)的化合物。
9.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中式(V)的化合物在這種條件下被還原，以得到一種如權(quán)利要求5中所定義的式(VIII)的化合物，然后式(VIII)的化合物進一步被還原為式(I)的化合物。
10.根據(jù)權(quán)利要求6-9的任一項的方法，其中式(V)的化合物是通過將權(quán)利要求1中定義的式(IV)的化合物轉(zhuǎn)變而制得的。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中式(IV)的化合物是通過將權(quán)利要求1中定義的式(III)的化合物與硝化劑反應(yīng)而制得的。
12.一種如權(quán)利要求1中定義的式(V)的化合物物及其藥用鹽。
13.一種制備權(quán)利要求1中的式(V)的化合物的方法，已包括將式(IV)的化合物轉(zhuǎn)變?yōu)樯鲜鍪?V)的化合物。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的方法，其中式(IV)的化合物是通過將權(quán)利要求1中的式(III)的化合物與一個硝化劑反應(yīng)而制得。
15.一種權(quán)利要求4中定義的式(VII)的化合物及其藥用鹽。
16.一種如權(quán)利要求4中定義的式(VII)的化合物，它為9-氨基-10-(對-甲苯磺酰氧基)-20(s)-喜樹堿和其藥用鹽。
17.一種制備權(quán)利要求4中定義的式(VII)的化合物的方法，它包括將式(V)的化合物還原為式(VII)的化合物。
18.一種藥物組合物，它包括如權(quán)利要求1定義的式(V)的化合物或權(quán)利要求4定義的式(VII)的化合物或其藥用鹽作為活性組分和一種藥用載體和/或稀釋劑。
19.如權(quán)利要求1定義的式(V)的化合物或如權(quán)利要求4中定義的式(VII)的化合物，或一種其藥用鹽用于治療人體或動物體。
20.權(quán)利要求19要求的化合物用作抗腫瘤劑。
全文摘要
制備作為已知抗腫瘤劑的式I9-氨基喜樹堿的方法，該方法詳細描述見說明。
文檔編號C07DGK1115181SQ94190731
公開日1996年1月17日 申請日期1994年9月15日 優(yōu)先權(quán)日1993年9月28日
發(fā)明者W·卡布里, I·坎迪尼, F·沙里尼, A·比德西, S·苯考 申請人:藥制品公司