專利名稱：腔腸素衍生物及其使用方法
技術領域：
本發(fā)明提供用于測定酶的存在和活性的化合物和方法。背景
酶的存在和活性可用于確定細胞的健康狀況和代謝狀態(tài)。酶還可以是特定細胞類型的標記物，因為某些酶的存在和活性通常是特定細胞的特征。例如，某些酶的活性通常可用于區(qū)分細菌、植物或動物來源的細胞或區(qū)分產生這種酶的組織的身份。糖苷酶(也稱為糖苷水解酶)催化糖苷鍵水解以產生兩種更小的糖。糖苷酶是十分常見的酶，其在自然界中的作用包括在抗細菌防御策略中(例如，溶菌酶)、在發(fā)病機理中(例如，病毒神經氨酸酶)和在正常細胞功能中(例如，參與N-連接糖蛋白生物合成的修剪甘露糖苷酶)使諸如 纖維素和半纖維素的生物質降解。在細菌和原核生物中，發(fā)現(xiàn)糖苷酶同時作為細胞內和細胞外酶，其主要參與營養(yǎng)獲取。糖苷酶在細菌中的一種重要形式是半乳糖苷酶(LacZ)，其參與在大腸桿菌(疋co7i)中的操縱子的表達的調控。在高等生物中，糖苷酶被發(fā)現(xiàn)存在于內質網和高爾基體中，糖苷酶在這些位置參與N-連接糖蛋白的加工，并且在溶菌酶中作為參與碳水化合物結構的降解的酶。缺乏特殊溶酶體糖苷酶可導致許多的溶酶體貯積癥，造成發(fā)育問題或死亡。糖苷酶在體內參與糖原的生物合成和降解。糖苷酶與糖基轉移酶一起形成用于糖苷鍵合成和斷裂的主要催化機器。黃遞酶是一種普遍存在的黃素結合酶，其催化用作氫受體的各種化合物從二 -和三-磷基吡啶核苷酸(即，NADH、NADPH)的還原形式發(fā)生還原。細胞能量代謝是一個復雜的過程，其允許細胞通過一系列酶催化和化學反應來儲存能量。細胞能量代謝的一個必需方面是細胞的還原-氧化態(tài)?；罴毎拇x狀態(tài)以及酶活性和/或代謝物濃度的測定可以通過測定氧化還原定義輔助因子NAD (P) /NAD (P)H來確定。
發(fā)明概要在一個方面，本發(fā)明提供式(I)的化合物:
權利要求
1.一種式(II)的化合物:
2.一種式(I)的化合物:
3.一種式(III)的化合物:
4.一種式(IV)的化合物:
5.根據(jù)權利要求1、2和4中任一項所述的化合物， 其中R2為
6.根據(jù)權利要求5所述的化合物，其中 r2為
7.根據(jù)權利要求5所述的化合物，其中R2為C2_5直鏈烷基。
8.根據(jù)權利要求1-7中任一項所述的化合物，其中R8為、
9.根據(jù)權利要求1-7中任一項所述的化合物，其中R8是芐基。
10.根據(jù)權利要求1-9中任一項所述的化合物，其中V是S。
11.一種檢測酶的存在或量的方法，其包括: 使預計含有所述酶的樣品與根據(jù)權利要求ι- ο中任一項所述的化合物接觸；和 檢測所述樣品的發(fā)光度。
12.根據(jù)權利要求11所述的方法，其中將所述發(fā)光度量化。
13.根據(jù)權利要求11所述的方法，其中預計所述樣品含有第二種酶，包括 使所述樣品與根據(jù)權利要求1-10中任一項所述的第二種化合物接觸，其中所述第二種化合物含有所述第二種酶的底物；和檢測所述樣品的發(fā)光度。
14.一種在體內檢測酶的存在的方法，其包括: 將根據(jù)權利要求ι- ο中任一項所述的化合物施用于轉基因動物；和 檢測發(fā)光度。
15.—種檢測酶的存在的方法，其包括: 將根據(jù)權利要求ι- ο中任一項所述的化合物施用于動物； 從所述動物獲得樣品；和 檢測所述樣品的發(fā)光度。
16.一種化合物，其選自由以下組成的組:
全文摘要
本發(fā)明提供作為非發(fā)光酶的底物和發(fā)光酶的前底物的腔腸素衍生物。本發(fā)明還提供一種使用所述衍生物的方法。
文檔編號C07D487/04GK103180324SQ201180052806
公開日2013年6月26日 申請日期2011年11月2日 優(yōu)先權日2010年11月2日
發(fā)明者D.H.克勞伯特, P.梅森黑默, J.安奇, W.周 申請人:普羅美加公司