專利名稱：：白樺酸類似物、其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，更確切地說，是涉及一類經(jīng)化學(xué)合成得到的白樺酸類似物、這些白樺酸類似物的制備方法、含有這些白樺酸類似物的藥物組合物及這些白樺酸類似物用于抗腫瘤的用途。
背景技術(shù)：
：惡性腫瘤是一種嚴(yán)重威脅人類健康的疾病，其死亡率居所有疾病死亡率的第二位，僅次于心腦血管疾病。由于生存環(huán)境和生活習(xí)性的改變，在不良環(huán)境和一些不利因素的作用下，腫瘤的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)。全世界60億人口中，每年約新增800萬癌癥患者，600多萬人死于癌癥，幾乎每6秒鐘就有一名癌癥患者死亡。衛(wèi)生部統(tǒng)計(jì)，近年來，我國(guó)每年新增腫瘤患者達(dá)200萬人，死亡130萬人，腫瘤死亡已成為我國(guó)高死亡的病種之一，(王宇皎.世界臨床藥物，2003，24(6):382.)，腫瘤的治療已成為全球熱門課題。目前，腫瘤的治療主要是綜合治療、手術(shù)、放療、化療等治療相結(jié)合，以提高治愈率和改善患者生活質(zhì)量。其中，藥物治療是癌癥治療的三大法寶之一，故理選用抗腫瘤藥物是一個(gè)重要的臨床問題。目前，抗腫瘤藥物主要分為六大類烷化劑、抗代謝藥、抗腫瘤抗生素、植物藥、激素類和其它類(謝峻等.中草藥，2007，38(2):285)。天然產(chǎn)物經(jīng)過自然選擇而具有特定的生物學(xué)功能。19812002年全世界發(fā)現(xiàn)的877種藥用小分子新化學(xué)實(shí)體中，來源于天然產(chǎn)物的占61%。至1994年全世界批準(zhǔn)廣泛使用的92種抗腫瘤藥中，約62種來源于天然產(chǎn)物；19951999年，3個(gè)天然產(chǎn)物的衍生物作為新抗腫瘤藥上市，由此可見，天然產(chǎn)物是結(jié)構(gòu)新穎和作用獨(dú)特的抗腫瘤化合物的重要來源，而植物源抗腫瘤藥物是其中最主要的一類。在人類治療癌的過程中，植物的藥用歷史悠久，植物來源的抗腫瘤藥物是當(dāng)今抗腫瘤藥物市場(chǎng)上增長(zhǎng)快，銷量大，倍受關(guān)注的一類藥物，是當(dāng)今乃至今后抗腫瘤藥物研究的主要途經(jīng)?？鼓[瘤植物藥和輔助化療的中藥主要包括紫杉醇、喜樹堿、長(zhǎng)春花堿、白藜蘆醇、人參、鬼臼毒素、青蒿素、紫杉醇以及它們的一些衍生物等。它們?cè)谀[瘤治療中療效確切、不良反應(yīng)小，成為抗腫瘤藥物市場(chǎng)上的主角。在長(zhǎng)期的應(yīng)用中，這類藥物同樣出現(xiàn)了資源有限，毒副作用和耐藥性的問題。如紫杉醇的需求造成了紅豆杉資源的毀滅性破壞，紅豆杉已經(jīng)被列為我國(guó)一級(jí)保護(hù)珍稀瀕危植物；其衍生物多西他塞有造成體液儲(chǔ)留的副作用及劑量依賴性的骨髓抑制和神經(jīng)毒性(NagarS等.DrugMetabMev，2006,38(3):393);鬼臼毒素的兩個(gè)衍生物替尼泊苷和依托泊苷有骨髓抑制，胃腸道副作用；長(zhǎng)春新堿周圍神經(jīng)毒性大等等。開發(fā)新型的抗腫瘤藥物是藥學(xué)工作者面臨的緊迫任務(wù)。白樺酸(betulinicacid)，也稱樺木酸，屬五環(huán)三砲類化合物，化學(xué)名稱hydroxy-lup-20(29)-en-28-oicacid，在自然界中分布非常廣泛，它在白樺樹皮中(樺木科植物)含量最為豐富，也存在于黃杞屬、棗屬(鼠李科)、蒲桃屬(桃金娘科)、條紋烏木(柿科)、牡丹(牡丹科)和夾竹桃(夾竹桃屬)等植物中。白樺酸的結(jié)構(gòu)如下所示已有的研究結(jié)果表明，天然產(chǎn)物白樺酸具有抗HIV和抗腫瘤活性等生物活性，且具有新型結(jié)構(gòu)和新穎作用機(jī)制的化合物，其天然來源廣泛，半合成方法成熟，雖然白樺酸存在水溶性差，生物利用度低等問題，仍是尋找抗HIV和抗腫瘤藥物的優(yōu)秀的先導(dǎo)物。通過對(duì)白樺酸的結(jié)構(gòu)修飾，一些白樺酸衍生物已被合成，活性已被測(cè)試，取得了一些研究成果，但抗腫瘤活性仍有待提高，尚存在疏水性強(qiáng)、吸收差、生物利用度低等問題，致使多年來還沒有這類化合物進(jìn)入臨床研究結(jié)段，這就需要深入研究，繼續(xù)尋找更好的抗腫瘤藥物。發(fā)明人在研究白樺酸類似物的過程中，發(fā)現(xiàn)了抗腫瘤活性強(qiáng)，毒性低的白樺酸類化合物，部分化合物還具有良好的水溶性，適合制備藥物制劑。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的一個(gè)目的在于，公開了白樺酸類似物或其溶劑合物。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于，公開了白樺酸類似物或其溶劑合物的合成方法。本發(fā)明的再一個(gè)目的在于，公幵了以白樺酸類似物或其溶劑合物為活性成分的藥物組合物。本發(fā)明還有一個(gè)目的在于，公開了白樺酸類似物或其溶劑合物，作為抗腫瘤藥物方面的應(yīng)用，特別是在用于制備治療肺癌，前列腺癌，結(jié)腸癌，白血病，乳腺癌，肝癌，胃癌，胰腺癌，人惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤，腦瘤等藥物方面的用途。本發(fā)明涉及通式(I)結(jié)構(gòu)的化合物或其溶劑合物(I)其中n:2-10;X:0，NH;R,為一C(二CH2)CH3、—CH(CH3)2;&為-船2或其中R3,R4為氫，鈉，鉀具有代表性的化合物為3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-硝酸酯)丙基酯(HK-101)3-脫氧-3-氧代-白樺酸(4-硝酸酯)丁基酯(HK-102)3-脫氧-3-氧代-白樺酸(6-硝酸酯)己基酯(HK-103)3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-磷酸酯)丙基酯(HK-104)3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-磷酸酯)丙基酯單鉀鹽(HK-105)3-脫氧-3-氧代-白樺酸(4-磷酸酯)丁基酯(HK-106)3-脫氧-3-氧代-白樺酸(4-磷酸酯)丁基酯單鈉鹽(服-107)3-脫氧-3-氧代-白樺酸(10-磷酸酯)癸基酯(HK-108)3-脫氧-3-氧代-白樺酸(10-磷酸酯)癸基酯單鉀鹽(HK-109)3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(3-硝酸酯)丙基酯(服-110)3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(4-硝酸酯)丁基酯(服-111)3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(8-硝酸酯)辛基酯(HK-112)3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(3-磷酸酯)丙基酯(HK-113)3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(3-磷酸酯)丙基酯鈉鉀鹽(服-114)3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(4-磷酸酯)丁基酯(服-115)3-脫氧_3-氧代-二氫白樺酸(4-磷酸酯)丁基酯二鈉鹽(服-116)3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(9-磷酸酯)壬基酯(HK-117)3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(9-磷酸酯)壬基酯二鉀鹽(HK-118)N-(3-硝酸酯丙基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺(HK-119)N-(5-硝酸酯戊基)_3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺(服-120)N-(3-磷酸酯丙基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺(HK-121)N-(3-磷酸酯丙基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺單鈉鹽(HK-122)N-(5-磷酸酯戊基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺(HK-123)N-(5-磷酸酯戊基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺單鉀鹽(HK-124)N-(4-硝酸酯丁基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺(HK-125)N-(6-硝酸酯己基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺(HK-126)N-(4-磷酸酯丁基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺(HK-127)N-(4-磷酸酯丁基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺二鈉鹽(服-128)N-(6-磷酸酯己基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺(服-129)N-(6-磷酸酯己基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺鈉鉀鹽(HK-130)HK-101—HK-130的化學(xué)結(jié)構(gòu)<table>tableseeoriginaldocumentpage0</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>本發(fā)明的具有式I結(jié)構(gòu)的化合物的溶劑合物指本發(fā)明化合物與水、有機(jī)溶劑成化合物，特別優(yōu)選的溶劑合物是水合物，甲醇合物，乙醇合物，丙酮合物，乙酸乙酯合物。這些溶劑合物是具有式I結(jié)構(gòu)的化合物在水及有機(jī)溶劑中經(jīng)重結(jié)晶純化時(shí)形成的，有機(jī)溶劑為甲醇，乙醇，丙醇，丙酮，乙酸乙酯，乙腈，四氫呋喃。重結(jié)晶時(shí)水及有機(jī)溶劑單獨(dú)使用或混合使用。本發(fā)明所述的式(I)化合物通過以下步驟合成<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula><image>imageseeoriginaldocumentpage16</image>其中R1、R3、R4、n的定義同上文所述；Y為氯，溴。結(jié)合上述制備式(I)化合物的反應(yīng)式，詳述式(I)化合物的制備方法。本發(fā)明參考文獻(xiàn)(Bioorganic&MedicinalChemistryLetters，14(2004):4087-4091)方法，以白樺酸為起始原料，經(jīng)瓊斯氧化劑(Jonesreagent)氧化為白樺酮酸(3-脫氧_3-氧代-白樺酸,化合物A);以白樺酸為起始原料，在鈀碳存在下，經(jīng)氫氣還原為20，29-二氫白樺酸，再經(jīng)瓊斯氧化劑(J0nesreagent)氧化為20，29-二氫白樺酮酸(3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸，化合物B)。這是制備本發(fā)明式I化合物的兩個(gè)關(guān)鍵原料。白樺酸化合物A本發(fā)明式I化合物(X:0)的制備方法(參見反應(yīng)式-l):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>a.將化合物A或化合物B溶于醇中，加入等摩爾醇鈉，在(TC-5(TC反應(yīng)1-3小時(shí)，生成化合物A或化合物B的鈉鹽(C)。所述醇為甲醇，乙醇，丙醇，異丙醇，正丁醇，叔丁醇，優(yōu)選甲醇，乙醇；所述醇鈉甲醇鈉，乙醇鈉，丙醇鈉，異丙醇鈉，正丁醇鈉，叔丁醇鈉，優(yōu)選甲醇鈉，乙醇鈉。b.化合物A或化合物B的鈉鹽(C)與二鹵代烷(摩爾比1:l-2.5)在二甲基甲酰胺中，1(TC-50。C反應(yīng)15-20小時(shí)，經(jīng)硅膠柱色譜純化，生成其鹵代烷基酯(D)。上述二鹵代垸Z"^HTY(Z:Br，Y:Cl，Br)為1，2-二溴乙烷，1，3-二溴丙烷，1，3-溴氯丙垸，1，4-二溴丁烷，1,4-溴氯丁烷，1，5-二溴戊烷，1，5-溴氯戊烷，1,6-二溴己垸，1，6-溴氯己烷，1，7-二溴庚烷，1，8-二溴辛垸，1，9-二溴壬烷，1，10-二溴癸烷。c.鹵代烷基酯(D)與硝酸銀(摩爾比1:l-1.5)在乙腈中，4(rC-8(TC反應(yīng)3—8小時(shí)，經(jīng)硅膠柱色譜純化，得到其硝基酯(E)。d.鹵代烷基酯(D)與二芐基磷酸酯銀鹽(摩爾比1:1-1.3)在苯或甲苯中，60°C-10(TC反應(yīng)1—3小時(shí)，生成其二芐基磷酸酯物(F)。二芐基磷酸酯銀鹽由二芐基磷酸酯鈉鹽與硝酸銀在水中(PH4-5)反應(yīng)制得。e.二芐基磷酸酯物(F)于有機(jī)溶劑中，在鈀碳存在下，與氫氣室溫反應(yīng)至不吸氫為至，生成其磷酸酯(G)，有機(jī)溶劑為甲醇，乙醇，丙酮，乙酸乙酯，可單獨(dú)或混合使用；f.其磷酸酯物(G)與堿金屬的氫氧化物(如氫氧化鈉，氫氧化鉀)，碳酸鹽(碳酸鈉，碳酸鉀)反應(yīng)，生成單鈉鹽，單鉀鹽，鈉鉀鹽，二鈉鹽。本發(fā)明式I化合物(X:NH)的制備方法(參見反應(yīng)式-2):a.化合物A或化合物B與草酰氯(摩爾比1:1-5)在二氯甲烷中，室溫反應(yīng)1-2小時(shí)，生成酰氯(J);b.酰氯(J)與鹵代烷基胺(摩爾比1:1-1。5)在堿性條件下，于二氯甲垸中0。C-1(TC反應(yīng)1-4小時(shí)，并經(jīng)硅膠柱色譜(石油醚-丙酮，體積比19:1)純化，得到鹵代垸基酰胺物(K);鹵代烷基胺(Y為氯，溴)，當(dāng)n為2，3時(shí)，有市售原料，而當(dāng)n》4時(shí)，雖無市售原料,以氨基烷基醇^^^為原料，按下述方法制得c.鹵代烷基酰胺物(K)與硝酸銀(摩爾比1:l-1.8)在乙腈中，50。C-7(rC反應(yīng)5—7小時(shí)，經(jīng)硅膠柱色譜(石油醚-乙酸乙酯，體積比7:3)純化，得到其硝基酯(L);d.鹵代垸基酰胺(K)與二芐基磷酸酯銀鹽(摩爾比1:1-1.6)在苯或甲苯中，80°C-10(TC反應(yīng)2—5小時(shí)，經(jīng)硅膠柱色譜(石油醚-甲醇，體積比10:1)純化，生成其二芐基磷酸酯物(M);二芐基磷酸酯銀鹽的制備方法前面已提及。e.二芐基磷酸酯物(M)溶于有機(jī)溶劑中，在鈀碳存在下，與氫氣反應(yīng)，生成其磷酸酯物(N);f.其磷酸酯物(N))與堿金屬的氫氧化物(如氫氧化鈉，氫氧化鈉)，碳酸鹽(碳酸鈉，碳酸鉀)反應(yīng)，生成單鈉鹽，單鉀鹽，鈉鉀鹽，二鈉鹽。此類化合物對(duì)于治療人類腫瘤是有效的。盡管本發(fā)明的化合物可以不經(jīng)任何配制直接給藥，但所述的各種化合物優(yōu)選以與藥劑學(xué)可接受的藥用輔料制備藥物組合物使用。藥劑學(xué)可接受的藥用輔料包括稀釋劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑、崩解劑、穩(wěn)定劑、溶劑等。本發(fā)明所述稀釋劑包括但不限于淀粉、微晶纖維素、蔗糖、糊精、乳糖、糖粉、葡萄糖、低分子右旋糖苷等；所述潤(rùn)滑劑包括但不限于硬脂酸鎂、硬脂酸、氯化鈉、油酸鈉、DL-亮氨酸、月桂醇硫酸鈉、聚乙二醇4000-6000、泊洛沙母等；所述粘合劑包括但不限于水、乙醇、淀粉槳、糖漿、明膠、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮等；所述崩解劑包括但不限于淀粉、羧甲基淀粉鈉、泡騰混合物即碳酸氫鈉和枸櫞酸、酒石酸、低取代羥丙基纖維素等；所述穩(wěn)定劑包括但不限于多糖如金合歡膠、瓊脂、藻酸、丙烯酸酸樹脂、纖維素醚和羧甲基甲殼酯等；所述溶劑包括但不限于水、磷酸鹽緩沖液、平衡的鹽溶液等；所述的組合物根據(jù)治療需要的不同，可以制成各種不同的制劑，包括各種固體口服制劑、液體口服制劑、注射劑等。藥劑學(xué)可接受的口服劑固體制劑有普通片劑、分散片、腸溶片、顆粒、膠囊、滴丸、散劑等，口服液體制劑有口服液、乳劑；注射劑有小水針、輸液、凍干粉針等。各制劑可以根據(jù)常規(guī)的工藝制備而成。藥物組合物以及單元?jiǎng)┬椭泻械幕钚猿煞?本發(fā)明化合物)的量可以根據(jù)患者的病情、醫(yī)生診斷的情況特定的加以應(yīng)用，所用的化合物的量或濃度在一個(gè)較寬的范圍內(nèi)調(diào)節(jié)，通常，活性化合物的量范圍為組合物的1%90%(重本發(fā)明白樺酸類似物溶解度的測(cè)定本發(fā)明提供的白樺酸類似物有良好的水溶性，有利于制備更適合臨床應(yīng)用的注射劑，代表性化合物的溶解度測(cè)定結(jié)果如下樣品的溶解度測(cè)定表<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>本發(fā)明的具有式I結(jié)構(gòu)的化合物或其溶劑合物，對(duì)多種腫瘤在體內(nèi)、體外有明顯的抑制作用。下面通過體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步說明本發(fā)明化合物對(duì)多種腫瘤抑制作用。體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)采用經(jīng)典的細(xì)胞毒活性體外檢測(cè)法MTT法，測(cè)試樣品對(duì)體外培養(yǎng)的人腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞增殖毒性。實(shí)驗(yàn)樣品實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品加入DMSO，用RPMI1640培養(yǎng)基稀釋到所需濃度，超聲，部分溶解，部分樣品溶液呈懸浮狀，用營(yíng)養(yǎng)液依次倍比稀釋。陽(yáng)性對(duì)照品白樺酸(BA)，杭州天草科技有限公司，批號(hào)200803181。主要試劑MTT，北京欣經(jīng)科生物技術(shù)有限公司，批號(hào)T15051/15181。RPMI1640培養(yǎng)基，GIBCO公司，批號(hào)1279327。胎牛血清，GIBCO公司，批號(hào):348555。DMSO，批號(hào)0080821，天津市威晨化學(xué)試劑科貿(mào)有限公司實(shí)驗(yàn)儀器C02孵育箱REVC0美國(guó)產(chǎn)倒置顯微鏡OLYMPUS日本產(chǎn)酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀LabsystemsDragon芬蘭產(chǎn)96孑L板Greinerbio-one德國(guó)產(chǎn)細(xì)胞株肺癌A-549細(xì)胞；前列腺PC3細(xì)胞；結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞；早幼粒細(xì)胞白血病HL-60細(xì)胞；乳腺癌MCF-7細(xì)胞；肝癌SMMC-7721細(xì)胞；胃腺癌SGC-7901細(xì)胞；黑色素G-361;惡性膠質(zhì)瘤U-251。由市醫(yī)藥科學(xué)研究所提供。實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)采用常規(guī)MTT檢測(cè)方法。(l)接種細(xì)胞取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，經(jīng)0.25%的胰酶消化后加入含有10%胚牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液，將細(xì)胞稀釋成單細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞數(shù)，接種于96孔板，每孔100叱。將接種后的細(xì)胞置37。C、5%二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24小時(shí)。(2)加藥將受試藥物從濃度為5Pg/ml開始用RPMI-1640培養(yǎng)液進(jìn)行倍比稀釋，共配置6個(gè)濃度。于96孔板中加入不同濃度待測(cè)品液，ioowy孔，每個(gè)樣品濃度設(shè)4個(gè)復(fù)孔，對(duì)照組設(shè)5個(gè)復(fù)孔。對(duì)200910068147.3照組用含10%胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液補(bǔ)足剩余體積，使反應(yīng)體積為200)47孔。加樣后將細(xì)胞置37。C、5%二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)68小時(shí)。(3)加MTT:棄上清，加MTT5mg/ml，以PBS溶解，每孔加10叱。置37"C繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)后取出。(4)測(cè)0D值棄除96孔板內(nèi)的上清液，每孔加入DMS0150叱。在酶標(biāo)儀570nm測(cè)定OD值，用下式計(jì)算細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率抑制率=[(l-用藥組平均OD值/對(duì)照組平均OD值)]X100%以直線回歸方法計(jì)算ICS。。實(shí)驗(yàn)結(jié)果.-對(duì)體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞的IC5。(tig/ml)樣品A-549PC3HT-29HL-60MCF-7S醒C-7721SGC-7901G-361U-251HK-1011.011.221.261.371.301.362.432.061.39服-1021.101.131.181.311.261.272.361.931.32HK--1031.111.071.171.251.341.312.292.011.30服--1041,061.181.221.331.291.202.192.041.24HK-1051.011.121.281.361.201.322.231.981.29服--1061.031.161.261.281.261.242.211.891.20HK--1071.121.011.361.181.191.302.301.911.25服-1081.171.141.321.201.201.282.261.881.27服--1091.190.981.121.151.281.262.201.901.30HK-1100.560.690.880.941.020.741.401.161.01服--1110.410.550.820.980.970.721.311.200.86.HK--1120.490.610.810,860.670.691.261,140.98HK-1130.340.520.620.800.880.761.321.180.91HK-1140.360.440.680.740.760.821.291.220.95服-1150.320.510.540.650.720.771.261.150,87HK-1160.220.260.540.420.700.701.201.100.82服-1170.280.340.600.560.780.831.271.240.90服-1180.310.360.620.480.820.881.241.290.88HK-1191.191.181.231.161.261.181.632.201.34HK-1201.231.161.261.201.201.181.562.101.29HK-1211.121.131.181.261.241.161.662.401.26服-1221.021.081.141.271.321.261.512.361.30HK-1231.091.141.221.121.361.221.592.181.22服-1241.061.121.261.3。1.321.191.682.051.20HK-1251.031.121.161.281.281.201.702.161.16服-1260.990.881.021.131.101.181.652.011.08服-1270.870.981.081.091.121.151.691.981.12HK-1281.001.021.141.071.141.171.732.081.20HK-1290.810.951.011.131.081.201.781.891.11HK-1300.881.111.181.201.211.231.422.041.18BA1.761.891.551.812.663.313.23〉54.59根據(jù)以上體外試驗(yàn)結(jié)果，具有通式(I)結(jié)構(gòu)的化合物對(duì)上述9種人類腫瘤細(xì)胞具有較強(qiáng)的抑制作用，均對(duì)7種以上腫瘤細(xì)胞的ICs。值小于2Pg/ml。其中9個(gè)樣品對(duì)4種以上腫瘤細(xì)胞的ICw值小于1iig/ml，具有非常強(qiáng)的細(xì)胞毒性作用。體內(nèi)抗腫瘤實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)材料細(xì)胞株小鼠肺癌Lewis,小鼠肉瘤S,小鼠肝癌H22，來自中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞研究所。陽(yáng)性對(duì)照藥5-氟尿嘧啶(5-Fu)，南通海爾斯藥業(yè)有限公司。儀器PB303-N型千分之一電子天平，梅特勒-托利多公司生產(chǎn)。動(dòng)物昆明種小鼠，SPF級(jí)，雌雄各半，體重18-22g，來自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所，合格證號(hào)SCXK(津)2005-0001。實(shí)驗(yàn)方法選用小鼠肉瘤S^瘤株、肝癌H22瘤株和Lewis肺癌實(shí)體瘤3種瘤株為指標(biāo)，以5-Fu為陽(yáng)性對(duì)照，對(duì)樣品HK-111的抑瘤活性進(jìn)行考察。分別體外復(fù)蘇小鼠肉瘤S^。瘤株、肝癌H22瘤株和Lewis肺癌瘤株，在細(xì)胞的指數(shù)生長(zhǎng)期收集細(xì)胞，1000"min—'離心，用無菌生理鹽水稀釋，調(diào)整到2X1(T個(gè)/L。隨機(jī)選取健康小鼠，每只用上述細(xì)胞懸液O.2mL腹腔注射，觀察接種小鼠的腹水生長(zhǎng)情況，約l周后接種小鼠腹部明顯漲大、凸出，抽取腹水，腹水呈乳白色，在無菌試管中用無齒生理鹽水以l:2稀釋[瘤細(xì)胞數(shù)為2X1(T個(gè)/L(S則、H22)或4X10"個(gè)/L(Lewis),得到腹水稀釋液。用上述腹水稀釋液對(duì)動(dòng)物進(jìn)行接種，于腋窩處消毒皮膚后每只皮下接種O.2mL，建立肝癌H22瘤株腋皮下接種模型、小鼠肉瘤S，腋皮下接種模型和Lewis肺癌腋皮下接種模型。每種瘤株動(dòng)物實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，分別計(jì)算抑瘤率。將荷瘤昆明種小鼠隨機(jī)分為5組，每組20只，組內(nèi)編號(hào)。分別為荷瘤模型對(duì)照組，樣品服-lll低、中、高劑量組，5-Fu組(每日一次，共7次)，造模第2天開始灌胃給予樣品HK-111，每日1次，連續(xù)給藥10d;模型對(duì)照組每日給予相當(dāng)容積體積分?jǐn)?shù)為1%的羧甲基纖維素鈉溶液，給藥前及停藥后記錄每組每只小鼠質(zhì)量。末次給藥24h后，頸椎脫臼法處死動(dòng)物，解剖剝離瘤塊，電子天平稱瘤重。根據(jù)公式計(jì)算抑瘤率。抑瘤率=[(空白對(duì)照組平均瘤質(zhì)量一給藥組平均瘤質(zhì)量)/空白對(duì)照組平均瘤質(zhì)量]X100X。結(jié)果對(duì)S⑧荷瘤小鼠瘤重及抑制率的影響(r±s)組別劑量動(dòng)物數(shù)體重(g)瘤重抑制(mg/kg)(n)用藥前用藥后(g)率(％)對(duì)照組一—2019.9826.611.61±1.21±3.32±0.335-Fu2020SO-1124.130.6261.5il.27±2,69±0.15HK-111402019.4824.060.4870.2±1.16±1.89±0.13202019.2525.050.8050.3±1.29±2.04±0.22102019.6225.601.1031.4±1.58±2.37±0.2826<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>202020.2226.39±0.95±51.9±1.351.880.39102019.3526.52±1.17±40.5±1.462.280.41毒性實(shí)驗(yàn)樣品具有結(jié)構(gòu)代表性的5個(gè)樣品，HK-102，HK-111,服-116，服-122，HK-126含量98.5%以上。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物上述提及的小鼠。實(shí)驗(yàn)室條件溫度22士2i:，相對(duì)溫度50-70%。方法和結(jié)果取小鼠60只，按體重隨機(jī)分成6組，每組10只，雌雄各半。以800mg/kg為最高劑量，按l:0.75比例，分別給6組小鼠一次性灌胃給予服-102(給藥量分別為800.Omg/kg'600.Omg/kg，450.Omg/kg，337.5mg/kg,253.lmg/kg，189.8mg/kg)，供試藥液以O(shè).5XCMC""Na配制成不同濃度，給藥容量為0.25ml/10g，給藥前禁食不禁水12h，給藥后3h內(nèi)禁食，飼養(yǎng)觀察15天，記錄小鼠毒性反應(yīng)及死亡情況。各組小鼠給藥后15天內(nèi)未出現(xiàn)明顯毒性反應(yīng)，小鼠生長(zhǎng)良好，無死亡現(xiàn)象。自第3天后，個(gè)別小鼠出現(xiàn)輕微腹瀉現(xiàn)象，第5天起小鼠腹瀉癥狀消失。剩余4個(gè)樣品HK-111，服-116，服-122，服-126，按上述方法進(jìn)行急性毒性實(shí)驗(yàn)，與服-102結(jié)果基本一致。結(jié)論急性毒性實(shí)驗(yàn)顯示，5個(gè)樣品的毒性很低。圖l為白樺酸類似物的結(jié)構(gòu)式。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說明，實(shí)施例僅為解釋性的，決不意味著它以任何方式限制本發(fā)明的范圍。發(fā)明的化合物經(jīng)高效液相色譜(HPLC),或薄層色譜(TLC)，或熔點(diǎn)(m.p.)進(jìn)行檢測(cè)，采用質(zhì)譜(MS)，元素分析，或鈉原子吸收光譜確證其結(jié)構(gòu)。參考實(shí)例h4-溴代-卜丁胺氫溴酸鹽在反應(yīng)瓶中加入90克氫溴酸，冷卻，攪拌下滴加10克4-胺基-l-丁醇，于30分鐘內(nèi)滴加完畢，然后蒸出約75克氫溴酸，約需10小時(shí)。濃縮液冷卻至708(TC，將其方入預(yù)先冷卻的10ml丙酮中。再冷卻至5'C以下結(jié)晶，過濾，用冷丙酮洗滌，干燥，得4-溴代-1-丁胺氫溴酸鹽18.8g。收率為72%，HPLC:97.06%。元素分析理論值/實(shí)測(cè)值，C(20.62/20.49)，H(4.76/4.71)，N(6.01/5.93)。參考實(shí)例2:6-氯代-1-己胺鹽酸鹽在反應(yīng)瓶中加入20克氯化亞砜，冷卻，攪拌下滴加8克6-胺基-l-己醇，于50分鐘內(nèi)滴加完畢，然后回流反應(yīng)8小時(shí)。減壓濃縮，蒸盡溶媒，加入預(yù)先冷卻的15ml丙酮。10r以下冷卻2小時(shí)結(jié)晶，過濾，用冷丙酮洗滌，干燥，得6-溴代-1-己胺鹽酸鹽IO.lg。收率為85%，HPLC:98.13%。元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(4L87/41.77)，H(8.79/8.71)，N(8.14/8.03)。參考實(shí)例3:3-脫氧-3-氧代-白樺酸(化合物A)白樺酸IOg溶于250ml三氯甲垸/丙酮(體積比l:1)的混合液中，冰浴冷卻，攪拌下滴加瓊斯試劑20ml，滴加過程保持溫度在2'C-8'C，于50分鐘內(nèi)滴加完畢，然后保溫反應(yīng)1小時(shí)。減壓濃縮，蒸盡溶媒，加入150ml水和140ml二氯甲烷，攪拌30分鐘，分出有機(jī)層，干燥，減壓濃縮，剩余物用乙醇重結(jié)晶，得8.6g，m.p.247-248.2。C，HPLC:99.1%。ESI-MS:453.3(M-H)。參考實(shí)例4:3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(化合物B)a.二氫白樺酸白樺酸6g溶于500ml乙酸乙酯/丙酮(體積比1:1)的混合液中，加入10%的鈀碳lg，攪拌下，在室溫通入氫氣至反應(yīng)完全，約吸氫350ml。過濾，濾液減壓濃縮，剩余物用甲醇重結(jié)晶，得5.lg。ESI-MS:457.4(M-H)，m.p.大于300°C，與文獻(xiàn)相符。b.按參考實(shí)施例3提供的制備過程,制得3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(化合物B)，HPLC:99.26%,m.p.266.0。C267.0°C,元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(78.9/78.82)，H(IO.59/10.51)。ESI—MS:455.4(M—H)實(shí)例l:3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-硝酸酯)丙基酯(HK-lOl)a.在反應(yīng)瓶中，加入18.2g3-脫氧-3-氧代-白樺酸(化合物A)、無水甲醇250ml，攪拌下緩緩加入2.2g甲醇鈉，室溫下，保溫反應(yīng)1.5小時(shí)。然后減壓蒸盡溶媒，干燥，得灰白色鈉鹽。鈉鹽不需純化，就可以用于下步制備。b.在反應(yīng)瓶中，加入3-脫氧-3-氧代-白拌酸鈉9.5g，100ml二甲基甲酰胺(DMF)，攪拌下滴加6.3gl，3-溴氯丙垸，于30分鐘內(nèi)滴加完畢，然后在4(TC保溫反應(yīng)18小時(shí)。停止反應(yīng)，過濾，除去生成的溴化鈉。減壓蒸盡DMF,加入85ml二氯甲烷，過濾，除去不溶物。減壓蒸盡二氯甲烷，殘余物經(jīng)硅膠柱色譜(正己烷/乙酸乙酯，9:1)純化，得7.6g3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-氯代)丙基酯。HPLC:98.7%，元素分析:(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(74.61/74.5)，H(9.68/9.51)，Cl(6.67/6.58)。按上述方法，用1，3-二溴丙烷代替1，3-溴氯丙烷，1，3-二溴丙烷的加入量為8.lg，得8.7g3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-溴代)丙基酯。HPLC:98.9%，元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(68.85/68.70)，H(8.93/8.85)。按上述方法，用1，4-二溴丁烷代替1，3-溴氯丙烷，得3-脫氧-3-氧代-白樺酸(4-溴代)丁基酯。HPLC:99.17%，元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(69.25/69.09)，H(9.06/8.98)。按上述方法，用1，6-溴氯己烷代替1，3-溴氯丙烷，得3-脫氧-3-氧代-白樺酸(6-氯代)己基酯。HPLC:98.59%，元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(75.42/75.25)，H(10.02/9.95)，Cl(6.18/6,10)。按上述方法，用l，10-二溴癸烷代替l，3-溴氯丙垸，得3-脫氧-3-氧代-白樺酸(10-溴代)癸基酯。HPLC:98.0%，元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(71.30/71.13)，H(9.72/9.65)。c.在反應(yīng)瓶中，加入3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-氯代)丙基酯5.3g，32ml乙腈，攪拌下加熱至40。C，再加入2.2g硝酸銀(溶于20ml乙腈)，8(TC保溫反應(yīng)8小時(shí)。停止反應(yīng)，過濾，除去生成的氯化銀。減壓蒸除乙腈，加入55ml二氯甲烷，攪拌30分鐘，靜置1小時(shí)，過濾。濾液減壓濃縮，殘余物經(jīng)硅膠柱色譜(石油醚/乙酸乙酯，7:3)純化，得3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-硝酸酯)丙基酯(HK-lOl)2.8g，HPLC:99.01%，元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(71.06/70.92)，H(9.22/9.15),N(2.51/2.38)。按上述方法，用3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-溴代)丙基酯代替3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-氯代)丙基酯，反應(yīng)縮短到6小時(shí)，收率提高。實(shí)施例2:3-脫氧-3-氧代-白樺酸(4-硝酸酯)丁基酯(HK-102)按實(shí)施例1提供的制備方法和過程，將實(shí)施例l(b)中得到的3-脫氧-3-氧代-白樺酸(4-溴代)丁基酯代替實(shí)施例1(c)中的3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-氯代)丙基酯，即可制得3-脫氧-3-氧代-白樺酸(4-硝酸酯)丁基酯(HK-102)。HPLC:99.180/。，ESI-MS:594.4(M+Na)。實(shí)施例3:3-脫氧-3-氧代-白樺酸(6-硝酸酯)己基酯(HK-103)按實(shí)施例1提供的制備方法和過程，將實(shí)施例l(b)中得到的3-脫氧-3-氧代-白樺酸(6-氯代)丁己基酯代替實(shí)施例l(c)中的3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-氯代)丙基酯，即可制得3-脫氧-3-氧代-白樺酸(6-硝酸酯)己基酯(HK-103)，HPLC:99.26%，ESI-MS:622.4(M+Na)。實(shí)施例4:3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-磷酸酯)丙基酯(服-104)a.將實(shí)施例l(b)中得到的3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-溴代)丙基酯5.8g加入反應(yīng)瓶中，加入IIOml甲苯中，攪拌升溫至約90。C，加入4.5g二芐基磷酸酯銀鹽，保溫反應(yīng)3小時(shí)。停止反應(yīng)，過濾，除去生成的溴化銀。減壓蒸除甲苯，殘余物經(jīng)硅膠柱色譜(石油醚/乙酸乙酯，8:2)純化，得3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-二芐基磷酸酯)丙基酯7.8g。HPLC:97.7%，元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(73.03/72.9)，H(8.48/8.4)。b.3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-二芐基磷酸酯)丙基酯7g溶于100ml乙醇/丙酮(體積比l:1)的混合液中，加入10%的鈀碳0.5g，攪拌下，在室溫通入氫氣至反應(yīng)完全。過濾，濾液減壓濃縮，剩余物用甲醇重結(jié)晶，得3.lg3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-磷酸酯)丙基酯(服-104)。HPLC:98.7%，元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(66.87/66.71),H(9.01/8.93)，ESI-MS:591.4(M-H)。將上述得到的化合物(HK-104)溶于甲醇中，滴加等摩爾的氫氧化鉀乙醇溶液，減壓蒸除溶劑，得其鉀鹽(服-105)，HPLC:98.3%，m.p.〉250°C。實(shí)施例5:3_脫氧-3_氧代-白樺酸(4-磷酸酯)丁基酯(HK-106)按實(shí)施例4提供的制備方法和過程，用實(shí)施例1(b)中得到3-脫氧-3-氧代-白樺酸(4-溴代)丁基酯代替實(shí)施例4(a)中的3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-溴代)丙基酯，得到3-脫氧-3-氧代-白樺酸(4-磷酸酯)丁基酯(HK-106)。HPLC:99.27%，ESI-MS:605.4(M-H)。將上述得到的化合物(HK-i06)溶于乙醇中，滴加等摩爾的氫氧化鈉水溶液，減壓蒸除溶劑，得其鈉鹽(服-107)，HPLC:99.5%，m.p.〉230°C。經(jīng)鈉原子吸收光譜測(cè)定，鈉的含量為3.59%(理論值3.66%)。實(shí)施例6:3-脫氧-3-氧代-白樺酸(10-磷酸酯)癸基酯(HK-108)按實(shí)施例4提供的制備方法和過程，用實(shí)施例1(b)中得到3-脫氧-3-氧代-白樺酸(10-溴代)癸基酯代替實(shí)施例4(a)中的3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-溴代)丙基酯，得到3-脫氧-3-氧代-白樺酸(10-磷酸酯)癸基酯(服-108)。HPLC:98.7%，ESI-MS:689.4(M-H)。將上述得到的化合物(HK-108)溶于乙醇中，滴加等摩爾的氫氧化鈉水溶液，減壓蒸除溶劑，得其單鈉鹽(HK-109)，HPLC:99.35%,m.p.〉25(TC。經(jīng)鈉原子吸收光譜測(cè)定，鈉的含量為3.14%(理論值3.22%)。實(shí)施例7:3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(3-硝酸酯)丙基酯(HK-110)a.在反應(yīng)瓶中，加入13.7g3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(化合物B)、無水乙醇130ml,攪拌下緩緩加入2,04g乙醇鈉，室溫下，保溫反應(yīng)2小時(shí)。然后減壓蒸盡溶媒，干燥，得灰白色鈉鹽。鈉鹽不需純化，就可以用于下步制備。b.在反應(yīng)瓶中，加入3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸鈉11.5g，100ml二甲基甲酰胺(DMF)，攪拌下滴加3.9gl，3-溴氯丙烷，于30分鐘內(nèi)滴加完畢，然后在50。C保溫反應(yīng)15小時(shí)。停止反應(yīng)，過濾，除去生成的溴化鈉。減壓蒸盡DMF，加入80ml二氯甲烷，過濾，除去不溶物。減壓蒸盡二氯甲烷，殘余物經(jīng)硅膠柱色譜(正己烷/乙酸乙酯，9:1)純化，得9.lg3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(3-氯代)丙基酯。HPLC:98.36%,元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(74.33/74.18)，H(10.02/9.93)，Cl(6.65/6.60)。按上述方法，用1，4-二溴丁垸代替1，3-溴氯丙垸，得3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(4-溴代)丁基酯。HPLC:99.11%,元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(69.02/68.91)，H(9.37/9.27)。按上述方法，用1，8-溴氯辛垸代替1，3-溴氯丙垸，得3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(8-氯代)辛基酯。HPLC:98.59%，元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(75.64/75.45)，H(IO.52/10.41)，Cl(5.88/5.79)。按上述方法，用1，9-二溴壬烷代替1，3-溴氯丙烷，得3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(9-溴代)壬基酯。HPLC:98.1%，元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(70.78/70.63)，H(9.90/9.81)。c.在反應(yīng)瓶中，加入3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(3-氯代)丙基酯5.3g，32ml乙腈，攪拌下加熱至4(TC，再加入2.2g硝酸銀(溶于20ml乙腈)，80"C保溫反應(yīng)8小時(shí)。停止反應(yīng)，過濾，除去生成的氯化銀。減壓蒸除乙腈，加入55ml二氯甲烷，攪拌30分鐘，靜置1小時(shí)，過濾。濾液減壓濃縮，殘余物經(jīng)硅膠柱色譜(石油醚/乙酸乙酯，7:3)純化，得3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(3-硝酸酯)丙基酯(服-110)2.8g，HPLC:99.01%，元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(70.81/70.62),H(9.54/9.40)，N(2.50/2.37)。按上述方法，用3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(4-溴代)丁基酯代替3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(3-氯代)丙基酯，得3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(4-硝酸酯)丁基酯(HK-111)。HPLC:99.17%，元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(71.17/71.08),H(9.66/9.58),N(2.44/2.34)，ESI-MS:596.4(M+Na)。按上述方法，用3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(8-氯代)辛基酯代替3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(3-氯代)丙基酯，得3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(8-硝酸酯)辛基酯(HK-112)。HPLC:98.59%，ESI-MS:652.4(M+Na)。34實(shí)施例8:3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(4-磷酸酯)丁基酯(HK-U5)a-將實(shí)施例7(b)中得到的3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(4-溴代)丁基酯5.8g加入反應(yīng)瓶中，加入110ml甲苯中，攪拌升溫至約9(TC，加入4.5g二芐基磷酸酯銀鹽，保溫反應(yīng)3小時(shí)。停止反應(yīng)，過濾，除去生成的溴化銀。減壓蒸除甲苯，殘余物經(jīng)硅膠柱色譜(石油醚/甲醇，10:1)純化，得3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(4-二芐基磷酸酯)丁基酯7.8g。HPLC:97.7%，元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(73.07/72.89)，H(8.81/8.74)。b.3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(4-二芐基磷酸酯)丁基酯7g溶于100ml乙醇/丙酮(體積比l:1)的混合液中，加入10呢的鈀碳0.5g,攪拌下，在室溫通入氫氣至反應(yīng)完全。過濾，濾液減壓濃縮，剩余物用甲醇重結(jié)晶，得3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(4-磷酸酯)丁基酯(HK-115)3.1g。HPLC:99.34%，元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(67.08/66.91)，H(9.44/9.29)，ESI-MS:607.4(M-H)。將上述得到的化合物(HK-115)溶于甲醇中，滴加兩倍摩爾的氫氧化鈉水溶液，減壓蒸除水，得其二鈉鹽(服-116)，HPLC:99.5%，m.p.〉200°C。經(jīng)鈉原子吸收光譜測(cè)定，鈉的含量為6.96%(理論值7.04%)。實(shí)施例9:3_脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(3-磷酸酯)丙基酯(HK-113)按實(shí)施例8提供的制備方法和過程，用實(shí)施例7(b)中得到3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(3-溴代)丙基酯代替實(shí)施例8(a)中的3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(4-溴代)丁基酯，得到3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-二芐基磷酸酯)丙基酯，再按實(shí)施例8(b)的方法，得到3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(3-磷酸酯)丙基酯(服-115)。HPLC:98.7%，元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(66.64/66.43)，H(9.32/9.22)，ESI—MS:593.4(M-H)。將上述得到的化合物(HK-113)溶于甲醇中，滴加等摩爾的氫氧化鉀乙醇溶35液，攪拌30分鐘后，再滴加等摩爾的氫氧化鈉水溶液，減壓蒸除溶劑，得其鉀鈉鹽(HK-114)，HPLC:99.5%，m.p.〉200。C。經(jīng)鈉原子吸收光譜測(cè)定，鈉的含量為3.44%(理論值3.51%)。實(shí)施例10:3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(9-磷酸酯)壬基酯(HK-117)按實(shí)施例8提供的制備方法和過程，用實(shí)施例7(b)中得到3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(9-溴代)壬基酯代替實(shí)施例8(a)中的3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(4-溴代)丁基酯，得到3-脫氧-3-氧代-白樺酸(9-二芐基磷酸酯)壬基酯，再按實(shí)施例8(b)的方法，得到3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(9-磷酸酯)壬基酯(HK-117)，ESI-MS:667.4(M-H)。將上述得到的化合物(HK-117)溶于甲醇中，滴加等摩爾的碳酸鉀水溶液，減壓蒸除水，得其二鉀鹽(服-118)，HPLC:99.5%,m.p.>200。C。實(shí)施例11:N-(3-硝酸酯丙基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺(服-119)a.在反應(yīng)瓶中，加入3-脫氧-3-氧代-白樺酸(化合物A)9.lg，干燥的二氯甲烷300ml，冷卻至(TC，滴加草酰氯ll.lg，約需20分鐘，然后升溫至25°C，保溫反應(yīng)1.5小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束，減壓蒸除二氯甲烷和剩余的草酰氯，得8.lg白色固體，即3-脫氧-3-氧代-白樺酰氯。Rf^0.47(展開劑石油醚(60-90°C)乙酸乙酯=1:1)。不需純化，就可以用于下步制備。b.將3-脫氧-3-氧代-白樺酰氯4.7g，干燥的二氯甲烷160ml，冷卻至0°C，加入3-氯-1-丙胺鹽酸鹽1.55g和3.0g三乙胺，5。C反應(yīng)3小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束，加入60nil二氯甲垸和150ml水，充分?jǐn)嚢?，分出有機(jī)層，有機(jī)層用飽和氯化鈉水溶液3X60ml洗滌，合并有機(jī)層，用無水硫酸鈉充分干燥。減壓蒸盡二氯甲烷，經(jīng)硅膠柱色譜(石油醚-丙酮，體積比19:1)純化，得到N-(3-氯丙基)-3-脫氧_3-氧代-白樺酰胺的白色固體5.lg，HPLC:98.11%，Rf二0.32(展開劑石油醚(30-60°C):乙酸乙酯=1:1)。按上述方法，用5-溴-l-戊胺氫溴酸鹽代替3-氯-l-丙胺鹽酸鹽，得N-(5-溴戊基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺的白色固體，HPLC:98.43%，Rf=0.38(展開劑石油醚(30-60°C):乙酸乙酯=1:1)。c.在反應(yīng)瓶中，加入N-(3-氯丙基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺10.6g，100ml乙腈，攪拌下加熱至4(TC，再加入3.9g硝酸銀(溶于36ml乙腈)，60。C保溫反應(yīng)6小時(shí)。停止反應(yīng)，過濾，除去生成的氯化銀。減壓蒸除乙腈，加入130ml二氯甲垸，攪拌30分鐘，靜置l小時(shí)，過濾。濾液減壓濃縮，殘余物經(jīng)硅膠柱色譜(石油醚/乙酸乙酯，7:3)純化，得N-(3-硝酸酯丙基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺(服-118)6.7g，HPLC:98.89%，元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(71.19/71.05)，H(9.41/9.32),N(5.03/4.90)。ESI-MS:579.4(M+Na)。實(shí)施例12:N-(5-硝酸酯戊基)-3-脫氧_3-氧代-白樺酰胺(HK-120)按實(shí)施例11提供的制備方法和過程，用5_溴-1-戊胺氫溴酸鹽代替實(shí)施例11(b)中的3-氯-l-丙胺鹽酸鹽，得到N-(5-硝酸酯戊基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺(HK-119)。HPLC:98.47%,ESI-MS:607.4(M+Na)。實(shí)施例13:N-(3-磷酸酯丙基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺(服-120)按實(shí)施例8提供的制備方法和過程，將實(shí)施例8(a)中的3_脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(4-溴代)丁基酯用實(shí)施例11(b)得到的N-(3-氯丙基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺代替，得到N-(3-磷酸酯丙基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺(服-121)。HPLC:98.6ESI-MS:590.4(M-H)。將上述得到的化合物(HK-121)溶于甲醇中，滴加等摩爾的氫氧化鈉水溶液，減壓蒸除水，得其單鈉鹽(HK-122)，HPLC:99.5%，m.p.〉20(TC。經(jīng)鈉原子吸收光譜測(cè)定，鈉的含量為3.91%(理論值3.83%)。實(shí)施例14:N-(5-磷酸酯戊基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺(HK-123)按實(shí)施例8提供的制備方法和過程，將實(shí)施例8(a)中的3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(4-溴代)丁基酯用實(shí)施例11(b)得到的N-(5-溴戊基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺代替，得到N-(5-磷酸酯戊基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺(服-123)，ESI-MS:618.4(M-H)。將上述得到的化合物(HK-123)溶于甲醇中，滴加等摩爾的氫氧化鉀乙醇溶液，減壓蒸除乙醇，得其單鉀鹽(HK-124)，HPLC:99.28%，m.p.>200°C。實(shí)施例15:N-(4-硝酸酯丁基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺(HK-125)按實(shí)施例11提供的制備方法和過程，將實(shí)施例11(a)中的3-脫氧-3-氧代-白樺酸(化合物A)用3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(化合物B)代替，得3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰氯；Rfi.41(展開劑石油醚(60-9(TC):乙酸乙酯=1:1)。將實(shí)施例ll(b)中的3-氯-1-丙胺鹽酸鹽用4-溴-1-丁胺氫溴酸鹽代替，得到N-(4-溴丁基)-3-脫氧-3_氧代-二氫白樺酰胺。按此方法，用6-溴-1-己胺氫溴酸鹽代替3-氯-1-丙胺鹽酸鹽，得N-(6-溴己基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺。將實(shí)施例11(c)中的N-(3-氯丙基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺用N-(4-溴丁基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺代替，得到N-(4-硝酸酯丁基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺(HK-125)，HPLC:98.78%，元素分析(理論值/實(shí)測(cè)值)，C(71.29/71.12),H(9.85/9.66),N(4.89/4.71)，ESI-MS:595.4(M+Na)。實(shí)施例16:N-(6-硝酸酯己基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺(HK-126)按實(shí)施例15提供的制備方法和過程，將N-(4-溴丁基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺用N-(6-溴己基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺代替，得到N-(6-硝酸38酯己基)-3_脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺(HK-126)，HPLC:99.04%,ESI-MS:623.4(M+Na)。實(shí)施例17:N-(4-磷酸酯丁基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺(HK-127)按實(shí)施例8提供的制備方法和過程，實(shí)施例8(a)中的3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(4-溴代)丁基酯用N-(4-溴丁基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺(實(shí)施例15得到)代替，得到N-(4-二芐基磷酸酯丁基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺。再按實(shí)施例8(b)提供的方法，制的N-(4-磷酸酯丁基)-3-脫氧_3-氧代-二氫白樺酰胺(HK-127)，HPLC:99.39%，ESI-MS:606.4(M-H)。將上述得到的化合物(HK-127)溶于甲醇中，滴加等摩爾的碳酸鈉水溶液，減壓蒸除水，得其二鈉鹽(服-128)，HPLC:98.81%，m.p.>200°C。經(jīng)鈉原子吸收光譜測(cè)定，鈉的含量為7.14%(理論值7.05%)。將上述得到的化合物(服-128)用乙醇-水(hl)重結(jié)晶，得其二鈉鹽(服-128)的二水合物，HPLC:99.51%，用卡氏法測(cè)定含水5.15%(理論值5.23%)。實(shí)施例18:N-(6-磷酸酯己基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺(HK-129)按實(shí)施例8提供的制備方法和過程，實(shí)施例8(a)中的3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(4-溴代)丁基酯用N-(6-溴己基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺(實(shí)施例15得到)代替，得到N-(6-二芐基磷酸酯己基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺。再按實(shí)施例8(b)提供的方法，制的N-(6-磷酸酯己基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺(服-129)，HPLC:99.42%，ESI-MS:634.4(M-H)。將上述得到的化合物(HK-129)溶于甲醇中，滴加等摩爾的氫氧化鉀乙醇溶液，減壓蒸除溶劑，得其單鉀鹽(HK-130)，HPLC:99.45%，m.p.>200°C。將上述得到的化合物(HK-130)用水重結(jié)晶，得單鉀鹽(HK-130)的一水合物，HPLC:99.59%，用卡氏法測(cè)定含水2.60%(理論值2.77%)。為了更充分的說明本發(fā)明的白樺酸類似物的藥物組合物，提供下列制劑實(shí)施例，所述實(shí)施例僅用于說明，而不是用于限制本發(fā)明的范圍。所述制劑可以使用本發(fā)明化合物中的任何化合物。實(shí)施例19:實(shí)施例1中制備的化合物(服-101)20g，加糊精20g，乳糖60g，用60%乙醇制粒、干燥、裝膠囊，制得1000粒膠囊劑。規(guī)格100mg/粒，每粒含化合物(HK-lOl)不少于19.5mg。實(shí)施例20:實(shí)施例7中制備的化合物(服-111)10g，加40g(乳糖-微晶纖維5:1)、硬脂酸1%，用70%乙醇制粒、壓片即得1000片片劑。規(guī)格10mg/片。實(shí)施例14中制備的化合物(HK-124)10g，加1000ml注射用水溶解，補(bǔ)足注射用水至4000ml，加適量活性炭除熱源，0.2um微孔濾膜濾過，灌裝，制得2000支小水針。規(guī)格2ml/支，每支含化合物不少于4.9mg。實(shí)施例22:實(shí)施例8中制備的化合物(HK-116)20g，甘露醇60g，加1000ml注射用水溶解，補(bǔ)足注射用水至2000ml,加適量活性炭除熱源，0.2um微孔濾膜濾過，灌裝，冷凍干燥，制得2000支凍干粉針。規(guī)格80mg/支，每支含化合物不少于9.8mg，供靜脈注射用。權(quán)利要求1.具有式I結(jié)構(gòu)的化合物或其溶劑合物。其中n2-10；XO，NH；R1為-C(＝CH2)CH3、-CH(CH3)2；R2為-NO2或其中R3，R4為氫，鈉，鉀；2.如權(quán)利要求1中所述的化合物，具有代表性的化合物為3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-硝酸酯)丙基酯(HK-101)3-脫氧-3-氧代-白樺酸(4-硝酸酯)丁基酯(HK-102)3-脫氧-3-氧代-白樺酸(6-硝酸酯)己基酯(HK-103)3_脫氧-3-氧代-白樺酸(3-磷酸酯)丙基酯(HK-104)3-脫氧-3-氧代-白樺酸(3-磷酸酯)丙基酯單鉀鹽(HK-105)3-脫氧-3-氧代-白樺酸(4-磷酸酯)丁基酯(HK-106)3_脫氧-3-氧代-白樺酸(4-磷酸酯)丁基酯單鈉鹽(HK-107)3-脫氧-3-氧代-白樺酸(10-磷酸酯)癸基酯(服-108)3_脫氧-3-氧代-白樺酸(10-磷酸酯)癸基酯單鉀鹽(HK-109)3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(3-硝酸酯)丙基酯(HK-llO)3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(4-硝酸酯)丁基酯(HK-lll)3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(8-硝酸酯)辛基酯(HK-112)3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(3-磷酸酯)丙基酯(HK-113)3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(3-磷酸酯)丙基酯鈉鉀鹽(HK-114)3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(4-磷酸酯)丁基酯(HK-115)3_脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(4-磷酸酯)丁基酯二鈉鹽(HK-116)3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(9-磷酸酯)壬基酯(HK-117)3_脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(9-磷酸酯)壬基酯二鉀鹽(HK-118)N-(3-硝酸酯丙基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺(HK-119)N-(5-硝酸酯戊基)_3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺(HK-120)N-(3-磷酸酯丙基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺(HK-121)N-(3-磷酸酯丙基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺單鈉鹽(HK-122)N-(5-磷酸酯戊基)_3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺(HK-123)N-(5-磷酸酯戊基)-3-脫氧-3-氧代-白樺酰胺單鉀鹽(HK-124)N-(4-硝酸酯丁基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺(HK-125)N-(6-硝酸酯己基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺(HK-126)N-(4-磷酸酯丁基)_3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺(HK-127)N-(4-磷酸酯丁基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺二鈉鹽(HK-128)N-(6-磷酸酯己基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺(HK-129)N-(6-磷酸酯己基)-3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰胺鈉鉀鹽(HK-130)3.本發(fā)明式I化合物的制備方法；(1)當(dāng)X為O，其特征在于a.3-脫氧-3-氧代-白樺酸(A，R1:-C(=CH2)CH3)或3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(B，R1:-CH(CH3)2)與醇鈉反應(yīng)，生成3-脫氧-3-氧代-白樺酸的鈉鹽或3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸的鈉鹽(C);b.鈉鹽(C)與二鹵代烷反應(yīng)，生成3-脫氧-3-氧代-白樺酸的鹵代烷基酯或3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸的鹵代烷基酯(D);c.鹵代垸基酯(D)與硝酸銀反應(yīng)，生成目標(biāo)產(chǎn)物(E);d.鹵代垸基酯(D)與二芐基磷酸銀反應(yīng)，生成二芐基酯化合物(F);e.二芐基酯化合物(F)在鈀碳存在下經(jīng)氫解得到產(chǎn)物(G)。f.化合物G與堿金屬鈉，鉀的氫氧化物，碳酸鹽反應(yīng)，得到產(chǎn)物(H)。用反應(yīng)式表示如反應(yīng)式-1(2)當(dāng)X為NH，其特征在于a-3-脫氧-3-氧代-白樺酸(A，)或3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酸(B，)與草酰氯反應(yīng)，生成3-脫氧-3-氧代-白樺酰氯或3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰氯(J);b.3-脫氧-3-氧代-白樺酰氯或3-脫氧-3-氧代-二氫白樺酰氯(J)在有機(jī)堿存在下與鹵代烷基胺反應(yīng)得鹵代烷基酰胺(K);c.鹵代烷基酰胺(K)與硝酸銀反應(yīng)，生成目標(biāo)產(chǎn)物(L);d.鹵代垸基酰胺(K)與二芐基磷酸銀反應(yīng)，生成二節(jié)基酯化合物(M);e.二芐基酯化合物(M)在鈀碳存在下經(jīng)氫解得到產(chǎn)物(N)。f.化合物N與堿金屬鈉，鉀的氫氧化物，碳酸鹽反應(yīng)，得到產(chǎn)物(P)。用反應(yīng)式表示如反應(yīng)式-2反應(yīng)式-1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>3.4.一種抗腫瘤的藥物組合物，它包含治療有效量的權(quán)利要求l，2的式I化合物及一種或多種藥用賦形劑。5.權(quán)利要求4所述的藥物組合物，包括各種固體口服制劑、液體口服制劑、注射劑。6.權(quán)利要求1，2中式I化合物在用于制備抗腫瘤藥物方面的應(yīng)用。7.如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，在用于制備治療肺癌，前列腺癌，結(jié)腸癌，白血病，乳腺癌，肝癌，胃癌，胰腺癌，人惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤，腦瘤等藥物方面的用途。全文摘要本發(fā)明涉及抗腫瘤相關(guān)的藥物領(lǐng)域，提供了具有式(I)結(jié)構(gòu)的白樺酸類似物或其溶劑合物，R₁，R₂，X，n的定義見說明書。本發(fā)明還提供了具有式(I)結(jié)構(gòu)的白樺酸類似物或其溶劑合物的制備方法、含有這些白樺酸類似物或其溶劑合物的藥物組合物及這些白樺酸類似物或其溶劑合物作為有效成分在制備治療肺癌，前列腺癌，結(jié)腸癌，白血病，乳腺癌，肝癌，胃癌，胰腺癌，人惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤，腦瘤等抗腫瘤藥物方面的應(yīng)用。文檔編號(hào)C07J63/00GK101519423SQ20091006814公開日2009年9月2日申請(qǐng)日期2009年3月17日優(yōu)先權(quán)日2009年3月17日發(fā)明者潔嚴(yán)申請(qǐng)人:潔嚴(yán)