本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種橫根費(fèi)菜提取物及其制備方法和在制備治療皮膚瘙癢藥物方面的用途。
背景技術(shù)：
皮膚瘙癢癥是一種僅有皮膚瘙癢而無原發(fā)性皮膚損害的皮膚科常見病、多發(fā)病之一。近年來該病呈上升趨勢(shì)，主要是大量化學(xué)用品的應(yīng)用，以及環(huán)境污染，或是內(nèi)在疾病的表皮反應(yīng)，主要表現(xiàn)為局部性或全身性，呈陣發(fā)性，每次可持續(xù)數(shù)小時(shí)，尤以夜間為甚，嚴(yán)重影響患者的工作和生活。皮膚瘙癢時(shí)如果用手撓，常常會(huì)出血，易造成感染。部分患者服用口服藥物，長(zhǎng)期使用又會(huì)給其它臟器造成損害。目前治療皮膚瘙癢的藥物大多以西藥為主，如組胺受體拮抗劑、糖皮質(zhì)激素、免疫調(diào)節(jié)劑等，這些西藥雖能緩解瘙癢的癥狀，但較容易耐受，復(fù)發(fā)率高，且常伴有一定副作用。因此，研制一種療效好、不易復(fù)發(fā)、副作用少的藥物具有迫切的臨床需求。
橫根費(fèi)菜(sedumkamtschaticumfish)為景天科景天屬多年生草本，又名堪察加景天、石板菜、黃菜子、費(fèi)菜、金不換、北景天，分布于產(chǎn)山西、河北、內(nèi)蒙古、吉林等地。具有活血、止血、寧心、利濕、消腫、解毒的功效，用于治療蚊蟲叮咬、跌打損傷、咳血、吐血、便血、心悸、癰腫，具有很好的食用、藥用價(jià)值。但有關(guān)橫根費(fèi)菜的基礎(chǔ)研究尚十分有限，使該藥材的后續(xù)推廣和應(yīng)用受到限制，且未見有關(guān)止癢方面的文獻(xiàn)和專利報(bào)道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，本發(fā)明的目的在于提供一種橫根費(fèi)菜提取物及其制備方法和用途，將中藥橫根費(fèi)菜藥材加乙醇提取，合并提取液，使濾液濃縮、干燥得到橫根費(fèi)菜提取物，能夠用于制備治療皮膚瘙癢的藥物。
為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：
一種橫根費(fèi)菜提取物的制備方法，將橫根費(fèi)菜藥材，粉碎，按重量體積比(g/ml)加入5～15倍原料重的乙醇溶液，提取1～3次，每次提取時(shí)間1～4小時(shí)，過濾，合并濾液，回收乙醇，濾液濃縮至浸膏，干燥，即得。
本發(fā)明所用原料橫根費(fèi)菜為景天科植物橫根費(fèi)菜(sedumkamtschaticumfish)的全草。
其中，乙醇溶液用量?jī)?yōu)選5～13倍原料重，更優(yōu)選8～10倍原料重；乙醇溶液質(zhì)量濃度65％～85％，優(yōu)選70％～80％；使用乙醇溶液在回流處理的條件或者超聲波處理的條件下進(jìn)行提取，每次提取時(shí)間優(yōu)選1～3小時(shí)，更優(yōu)選1～2小時(shí)，濾液濃縮后經(jīng)噴霧干燥或減壓干燥或鼓風(fēng)干燥的方式干燥。
本發(fā)明要求保護(hù)由所述制備方法制備得到的橫根費(fèi)菜提取物。
本發(fā)明橫根費(fèi)菜提取物可應(yīng)用于制備治療皮膚瘙癢的藥物。
具體地，將所述橫根費(fèi)菜提取物加入藥劑學(xué)允許的輔料制成藥劑學(xué)上的外用劑型。
所述外用劑型可以為膏劑、膜劑、酊劑、凝膠劑或噴霧劑等其他臨床上可接受的劑型。
為進(jìn)一步說明本發(fā)明橫根費(fèi)菜提取物在制備治療皮膚瘙癢藥物中的應(yīng)用，對(duì)本發(fā)明提取物進(jìn)行了止癢、抗炎藥理作用實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，橫根費(fèi)菜提取物具有明顯的抑制右旋糖酐致瘙癢作用和抑制二甲苯引起的耳腫脹作用，且橫根費(fèi)菜提取物高劑量組抑制右旋糖酐致瘙癢作用優(yōu)于所選的陽性對(duì)照品。經(jīng)急性毒性試驗(yàn)，結(jié)果表明橫根費(fèi)菜提取物無明顯毒性。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：從中藥橫根費(fèi)菜制備的提取物具有明顯的止癢、消炎作用，無明顯毒副作用，且制備方法簡(jiǎn)便，原料藥的來源廣泛，而且成本低，表明其可以進(jìn)一步作為新的治療皮膚瘙癢藥物進(jìn)行研究開發(fā)。可望緩解目前臨床常用治療皮膚瘙癢藥物存在不同程度的不良反應(yīng)、易產(chǎn)生耐藥性和復(fù)發(fā)率高等問題。
具體實(shí)施方式
下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行詳細(xì)描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)理解，下列實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市購(gòu)獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
實(shí)施例1：橫根費(fèi)菜提取物樣品1的制備
將橫根費(fèi)菜新鮮全草1kg，粉碎，加8000ml質(zhì)量濃度75％的乙醇溶液回流提取2次，每次提取時(shí)間1小時(shí)，過濾，合并濾液，于-0.07～-0.08mpa，溫度為50～60℃下減壓回收乙醇，濃縮至浸膏，再在60℃下真空干燥，即得橫根費(fèi)菜提取物。
實(shí)施例2：橫根費(fèi)菜提取物樣品2的制備
將橫根費(fèi)菜全草1kg，粉碎，加8000ml質(zhì)量濃度70％的乙醇溶液超聲提取2次，每次提取時(shí)間2小時(shí)，過濾，合并濾液，于-0.07～-0.08mpa，溫度為50～60℃下減壓回收乙醇，濃縮至浸膏，再在60℃下鼓風(fēng)干燥，即得橫根費(fèi)菜提取物。
實(shí)施例3：橫根費(fèi)菜提取物樣品3的制備
將橫根費(fèi)菜根2kg，粉碎，加5000ml質(zhì)量濃度75％的乙醇溶液回流提取3次，每次提取時(shí)間1小時(shí)，過濾，合并濾液，于-0.07～-0.08mpa，溫度為50～60℃下減壓回收乙醇，濃縮至浸膏，噴霧干燥，即得橫根費(fèi)菜提取物。
實(shí)施例4：橫根費(fèi)菜提取物樣品4的制備
將橫根費(fèi)菜根2kg，粉碎，加30000ml質(zhì)量濃度85％的乙醇溶液回流提取次1，每次提取時(shí)間3小時(shí)，過濾，合并濾液，于-0.07～-0.08mpa，溫度為50～60℃下減壓回收乙醇，濃縮至浸膏，噴霧干燥，即得橫根費(fèi)菜提取物。
實(shí)施例5：橫根費(fèi)菜提取物樣品5的制備
將橫根費(fèi)菜新鮮全草1kg，粉碎，加10000ml質(zhì)量濃度65％的乙醇溶液超聲提取2次，每次提取時(shí)間2小時(shí)，過濾，合并濾液，于-0.07～-0.08mpa，溫度為50～60℃下減壓回收乙醇，濃縮至浸膏，再在60℃下真空干燥，即得橫根費(fèi)菜提取物。
實(shí)施例6：本發(fā)明藥效學(xué)試驗(yàn)：
本發(fā)明止癢、抗炎作用試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)研究：
以實(shí)施例1制備的藥物進(jìn)行試驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)一對(duì)右旋糖酐誘發(fā)小鼠皮膚瘙癢的影響
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：昆明種小鼠50只，體重18～22g，雌雄各半，由第四軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物中心提供。
實(shí)驗(yàn)方法：小鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，設(shè)模型組(生理鹽水)、低劑量組(0.5g生藥/ml)、中(1g生藥/ml)、高劑量組(2g生藥/ml)和陽性對(duì)照組(膚得安)。各組小鼠右后足背部剃毛2cm×2cm，分別將藥物組或生理鹽水組按0.1ml/cm2均勻涂于剃毛區(qū)，涂抹膚得安藥膏厚度為2mm(相當(dāng)于0.3g/cm2)，末次給藥30分鐘后，向各組小鼠尾靜脈注射0.16％右旋糖酐0.1ml/10g，以小鼠前爪搔抓頭部，后抓搔抓軀干，嘴咬全身各部位作為瘙癢指標(biāo)。觀察記錄30min內(nèi)小鼠搔癢次數(shù)及搔癢持續(xù)時(shí)間。結(jié)果見表1。
表1右旋糖酐誘發(fā)小鼠皮膚瘙癢的影響(
注：與模型組比較*p<0.05，**p<0.01；與陽性對(duì)照組比較△p<0.05。
試驗(yàn)結(jié)果：與模型組比較，本發(fā)明提取物低、中、高劑量組均能顯著減少右旋糖酐致小鼠瘙癢次數(shù)(p<0.01)，縮短搔癢持續(xù)時(shí)間(p<0.05,p<0.01)。與陽性對(duì)照組比較，本發(fā)明提取物高劑量組比陽性對(duì)照組降低右旋糖酐致小鼠皮膚瘙癢的效果更好，提示本發(fā)明提取物外用具有明顯的止癢作用，且高劑量組的止癢效果優(yōu)于陽性對(duì)照藥膚得安。
實(shí)驗(yàn)二對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響
試驗(yàn)動(dòng)物：昆明種小鼠50只，體重18～22g，雌雄各半，由第四軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物中心提供。
試驗(yàn)方法：小鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，體重均勻。分為模型組(生理鹽水)、低劑量組(0.5g生藥/ml)、中(1g生藥/ml)、高劑量組(2g生藥/ml)和陽性對(duì)照組(曲安奈德)。實(shí)驗(yàn)當(dāng)日各組動(dòng)物右側(cè)耳廓涂藥1次，模型組涂以等容量的生理鹽水溶液，陽性對(duì)照組涂抹曲安奈德藥膏厚度為2mm(相當(dāng)于0.003g/cm2)。1h后各組用蒸餾水洗去藥液，棉球擦凈；給小鼠右耳涂二甲苯20μl/只，左耳作對(duì)照。15min后斷頸處死動(dòng)物，沿耳廓基線剪下雙耳，用6mm角膜環(huán)鉆在左右耳相同位置沖下耳片，在電子分析天平上稱重(精確到0.1mg)，右耳重量減去左耳重量之差值即為腫脹度，計(jì)算腫脹度，并求出腫脹抑制率，結(jié)果見下表2。
表2二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響(
注：與生理鹽水組比較*p<0.05，**p<0.01
腫脹度(mg)＝右耳耳片重(mg)-左耳耳片重(mg)
腫脹抑制率＝(對(duì)照組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度)/對(duì)照組平均腫脹度×100％
試驗(yàn)結(jié)果：與模型組比較，本發(fā)明提取物低、中、高劑量組均能顯著抑制二甲苯引起的腫脹，與模型組相比差異顯著(p<0.01)，提示本發(fā)明提取物外用具有明顯的抗炎作用。
藥物的制備
實(shí)施例7：橫根費(fèi)菜提取物噴霧劑的制備
稱取橫根費(fèi)菜提取物50g，聚山梨酯-8020g，苯甲酸鈉3g，甘油20ml，加入適量乙醇，緩緩分次加入蒸餾水550ml攪拌，使之溶解，無菌過濾，自濾器上補(bǔ)加蒸餾水至1000ml分裝，即得。
實(shí)施例8：橫根費(fèi)菜提取物凝膠劑的制備
稱取6g卡波姆940溶于250ml蒸餾水中，輕微攪拌，放置過夜，得ⅰ相；稱取丙二醇120g、甘油80g，磁力攪拌器攪拌條件下加入ⅰ相，得ⅱ相；稱取橫根費(fèi)菜提取物50g，溶于250ml蒸餾水中，加入ⅱ相，攪拌均勻，得ⅲ相；稱取15g氮酮加入ⅲ相，攪拌均勻，用適量三乙醇胺調(diào)ph值為6～7，加蒸餾水至1000g，充分?jǐn)噭?，脫氣、滅菌，灌封，即得?/p>
實(shí)施例9：橫根費(fèi)菜提取物酊劑的制備
取橫根費(fèi)菜提取物50g，加入700ml質(zhì)量濃度70％的乙醇中，攪拌溶解，并加入月桂氮卓酮混勻。另取甘油及適量蒸餾水?dāng)噭?，緩緩加入上述醇溶液中，邊加邊攪拌，最后加蒸餾水至1000ml，攪勻，分裝，即得。
急性毒性試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)方法：選擇健康wistar大鼠80只,雌雄兼用，于實(shí)驗(yàn)前24h用8％硫化鈉脫掉大鼠背部?jī)蓚?cè)毛約40cm2，其中40只大鼠保持皮膚完整不受損，隨機(jī)分成4組，每組8只，即空白基質(zhì)對(duì)照組、低劑量組(70g鮮生藥/kg)、中劑量組(140g鮮生藥/kg)、高劑量組(280g鮮生藥/kg)。試驗(yàn)時(shí)將橫根費(fèi)菜提取物噴霧劑均勻涂抹于脫毛區(qū)。另40只大鼠實(shí)驗(yàn)時(shí)用細(xì)砂紙?jiān)谏鲜龃笫竺撁课辉斐刹羵?，使皮膚出現(xiàn)密集出血點(diǎn)后，立即在擦傷部位給藥，分組與劑量同完整皮膚急性毒性試驗(yàn)。24h內(nèi)，動(dòng)物涂藥次數(shù)為2次，給藥后敷以透氣薄膜、紗布，并用膠布包扎固定，分籠飼養(yǎng)。24h后，用溫水除去殘留的受試物，連續(xù)觀察14天，記錄實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體重，觀察動(dòng)物飲食、皮膚、毛發(fā)、眼睛和粘膜的變化及呼吸、中樞神經(jīng)系統(tǒng)，四肢活動(dòng)等有否中毒表現(xiàn)記錄有無死亡，若有死亡應(yīng)立即進(jìn)行尸檢，若肉眼檢查有明顯異常時(shí)，進(jìn)一步進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：在去除受試物lh開始觀察，直至第14天，完整皮膚組和破損皮膚組大鼠均活動(dòng)自如，覓食正常，涂藥處皮膚毛發(fā)光澤正常，眼與粘膜無變化，呼吸無異常，未見中樞神經(jīng)系統(tǒng)異常，未見大鼠全身中毒反應(yīng),無大鼠死亡，表明橫根費(fèi)菜提取物外用時(shí)無急性毒性反應(yīng)。
以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。