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脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體在制備治療肥胖藥物中的應(yīng)用的制作方法

文檔序號(hào):12673118閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體在制備治療肥胖藥物中的應(yīng)用。

2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其特征在于,所述脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體由如下方法制備而成:

(1)將剝離的脂肪組織分散于消化液中,以產(chǎn)生細(xì)胞懸浮液;

(2)離心細(xì)胞懸浮液,以形成細(xì)胞沉淀,分離沉淀,洗滌,得到含有脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞的血管基質(zhì)成分;

(3)在體外培養(yǎng)體系中對(duì)ADSC進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng),收集擴(kuò)增培養(yǎng)后的上清液,濃縮,向濃縮后的上清液中加入外泌體提取試劑,即提取得到脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體。

3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于,步驟(1)中,所述消化液是由KRB緩沖液和Ⅰ型膠原酶組成;優(yōu)選的,KRB緩沖液和Ⅰ型膠原酶的組成比例為1ml:2mg。

4.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于,步驟(2)中,離心轉(zhuǎn)速為2000rpm,離心時(shí)間為5分鐘。

5.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于,步驟(3)中,擴(kuò)增培養(yǎng)的條件為:用含有bFGF的10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)ADSC;所述培養(yǎng)基中不含外泌體。

6.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于,步驟(3)中,所述外泌體提取試劑為Exoquick-TCTM外泌體提取試劑。

7.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其特征在于,所述脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體具有TSG101、CD9、CD63和HSP90標(biāo)志。

8.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其特征在于,所述脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體來源于小鼠附睪處脂肪組織。

9.包含權(quán)利要求1所述的脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體的組合物在制備治療肥胖藥物中的應(yīng)用。

10.脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體在制備促進(jìn)白色脂肪米色化的生物制劑中的應(yīng)用。

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