本發(fā)明涉及一種化合物的新用途，尤其涉及一種化合物在制備治療發(fā)作性睡病藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
1980年Gelinau首先用“發(fā)作性睡?。╪arcolepsy）”一詞來(lái)完整描述了一個(gè)白天過(guò)度睡眠（excessive daytimes leepiness，EDS）。發(fā)作性睡眠和情緒誘發(fā)的發(fā)作性肌肉無(wú)力的患者。中國(guó)香港的一項(xiàng)研究報(bào)道其患病率為0.034%。發(fā)作性睡病一碎倒可能在日本較常見(jiàn)，一項(xiàng)基于日本的人群的研究得出患病率0.16%。
發(fā)病年齡可以從幼童時(shí)期到五十多歲各異，其中大約90%在25歲左右發(fā)病，期間存在兩個(gè)高峰，較大的一個(gè)是在15歲左右，而另一個(gè)則在36歲左右。亦有報(bào)道稱本病起病年齡10-30歲較多，5歲前發(fā)病少見(jiàn)。且根據(jù)本病發(fā)于青春期前后的不同，可將發(fā)作性睡病分為早發(fā)型與遲發(fā)型。
H3受體拮抗劑不產(chǎn)生過(guò)度行為興奮，并在清醒作用結(jié)束后不導(dǎo)致明顯的睡眠反彈。H3受體拮抗劑在動(dòng)物模型上具有促認(rèn)知療效，并且均未發(fā)現(xiàn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)過(guò)度興奮等副作用。此外，H3受體反向激動(dòng)劑用于增加覺(jué)醒的劑量往往高于用來(lái)改善認(rèn)知的劑量。這表明，相對(duì)于改善認(rèn)知，維持和促進(jìn)覺(jué)醒狀態(tài)需要藥物占領(lǐng)更多的H3受體。目前，H3受體拮抗劑主要有BF-2649、ABT-239、GSK-189254、S41150、JNJ-10181457和 JNJ-5207852，其中BF-2649已獲得批準(zhǔn)上市，用于治療發(fā)作性睡病。
WO2014164767中公開了本發(fā)明涉及的化合物式（Ⅰ）的結(jié)構(gòu)及制備方法，并且公開了這些新化合物作為FASN抑制劑的應(yīng)用，未公開本發(fā)明中所要求保護(hù)的化合物式（Ⅰ）在制備治療發(fā)作性睡病藥物中的應(yīng)用，也未公開作為H3受體拮抗劑的活性。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種化合物在制備治療發(fā)作性睡病藥物中的應(yīng)用。
化合物結(jié)構(gòu)為式（Ⅰ）表示的化合物、其鹽或其溶劑化合物，
（Ⅰ），
其中R為、或、或。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種化合物式（Ⅰ）在制備促覺(jué)醒藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明沒(méi)有對(duì)化合物式（Ⅰ）或包含化合物式（Ⅰ）的組合物的施用方式進(jìn)行特別限制，代表性的施用方式包括（但并不限于）：口服、腸胃外（靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)或皮下）、和局部給藥。用于口服給藥的固體劑型包括膠囊劑、片劑、丸劑、散劑和顆粒劑。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)化合物式（Ⅰ）的物理化學(xué)性質(zhì)，結(jié)合現(xiàn)代制劑技術(shù)和病患的實(shí)際需要，將其制備成注射劑、頭皮吸收制劑、植入制劑等多種制劑，從而擴(kuò)大其給藥途徑，并提高藥物靶向性或有效避免不必要的毒副作用。用于局部給藥的本發(fā)明化合物的劑型包括軟膏劑、散劑、貼劑、噴射劑和吸入劑。本發(fā)明化合物可以單獨(dú)給藥，或者與其他藥學(xué)上可接受的其他藥物聯(lián)合給藥。
顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識(shí)和手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其他多種形式的修改、替換或變更。
本發(fā)明的有益效果：化合物式（Ⅰ）具有維持短期睡眠剝奪大鼠覺(jué)醒的作用；并且能夠顯著改善orexin基因敲除小鼠的睡眠情況，尤其是能夠延長(zhǎng)REM潛伏期，可用于制備治療發(fā)作性睡眠藥物。
具體實(shí)施方式
在實(shí)施例中，式（Ⅰ）的三個(gè)結(jié)構(gòu)分別用結(jié)構(gòu)一、結(jié)構(gòu)二和結(jié)構(gòu)三表示，其中結(jié)構(gòu)一為；
結(jié)構(gòu)二為；
結(jié)構(gòu)三為。
實(shí)施例一：式（Ⅰ）對(duì)短期睡眠剝奪的大鼠的影響
SD系雄性鍵康大鼠，6-8周齡，體重200±20g。Morris水迷宮篩除學(xué)習(xí)和記憶能力很差的大鼠，實(shí)驗(yàn)前對(duì)大鼠進(jìn)行3天適應(yīng)性飼養(yǎng)，隨機(jī)分為四組，每組6只，分別為對(duì)照組、結(jié)構(gòu)一組、結(jié)構(gòu)二組和結(jié)構(gòu)三組。采用DB036型睡眠剝奪儀（利用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物所站立的平臺(tái)隨機(jī)移動(dòng)使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物無(wú)法進(jìn)入睡眠）對(duì)所有分組大鼠進(jìn)行睡眠剝奪24小時(shí)，起始時(shí)間為第一天19點(diǎn)，結(jié)束時(shí)間為第二天19點(diǎn)，然后將用藥物溶解液配制的結(jié)構(gòu)一、結(jié)構(gòu)二、結(jié)構(gòu)三5mg/ml的溶液，以10mg/kg的劑量分別對(duì)應(yīng)腹腔注射到結(jié)構(gòu)一組、結(jié)構(gòu)二組和結(jié)構(gòu)三組，對(duì)照組注射藥物溶解液，藥物溶解液為10%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的DMSO、2%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的Tween-80的PBS溶液。注射后大鼠移入新環(huán)境中，并記錄給藥后覺(jué)醒時(shí)間，見(jiàn)表1。
由表1可知，結(jié)構(gòu)一、結(jié)構(gòu)二和結(jié)構(gòu)三均具有維持短期睡眠剝奪大鼠覺(jué)醒的作用。說(shuō)明結(jié)構(gòu)一、結(jié)構(gòu)二和結(jié)構(gòu)三均可以用于制備促覺(jué)醒藥物。
實(shí)施例二：式（Ⅰ）與H3受體的體外親和力
1、實(shí)驗(yàn)方法：
(1)在冷凍下取大鼠前沿腦部，放入20倍含有2mM MgCl2和50mM Tris HCl 中勻漿，pH調(diào)至7.4，勻漿在45,000g下離心10分鐘。去上清液，通過(guò)Polytron，使細(xì)胞膜顆粒再懸浮于含有2mM MgCl2和50mM Tris HCl中，pH調(diào)至7.4，再次離心。使最終顆粒在12mg/ml的濃度下，再懸浮于含有2mM MgCl2和50mM Tris HCl中，pH調(diào)至7.4，溫度調(diào)至25℃；
(2)結(jié)構(gòu)一、結(jié)構(gòu)二和結(jié)構(gòu)三分別稀釋在10%DMSO/50mM Tris（pH7.4）中分別制成系列濃度測(cè)試液。將測(cè)試系列濃度測(cè)試液25微升、放射配體（1nM最終濃度3H-N-甲基-組胺）25微升和細(xì)胞膜（200微升）放入48孔V型底聚丙烯板中培養(yǎng)1小時(shí)，以不加藥溶液作為陰性對(duì)照，以噻普酰胺作為陽(yáng)性對(duì)照；
(3)將檢測(cè)試樣迅速經(jīng)過(guò) Whatman GF/B濾器過(guò)濾，用冰冷 50mM Tris 緩沖液 （pH 7.4）沖洗，使用Skatron細(xì)胞采集器。放射活性用BetaPlate閃爍計(jì)數(shù)器定量，計(jì)算結(jié)合率。
2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
由表2可知，結(jié)構(gòu)一、結(jié)構(gòu)二和結(jié)構(gòu)三與大鼠組胺H3受體結(jié)合率均高于公認(rèn)的H3受體拮抗劑噻普酰胺，說(shuō)明結(jié)構(gòu)一、結(jié)構(gòu)二和結(jié)構(gòu)三可以用于制備組胺H3受體拮抗劑或者反向激動(dòng)劑的藥物。
實(shí)施例三：式（Ⅰ）對(duì)orexin基因敲除小鼠的影響
純和的Orexin基因敲除小鼠的制備方法參見(jiàn)Richard M. Chemelli,et al.Narcolepsy in orexin Knockout Mice:Molecular Genetics of Sleep Regulation. Cell, 1999 ，Vol. 98, 437–451.Orexin基因敲除小鼠模型為發(fā)作性睡眠的常用生物模型，可以用來(lái)證明本發(fā)明的結(jié)構(gòu)用于治療發(fā)作性睡眠的有效性。
1、試驗(yàn)方法
將純合的Orexin基因敲除小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3天，分為結(jié)構(gòu)一組、結(jié)構(gòu)二組和結(jié)構(gòu)三組，每組3只，第4天早上7點(diǎn)到第5天早上7點(diǎn)，24小時(shí)腦電圖/肌電圖記錄。第6天早上6點(diǎn)半進(jìn)行腹腔注射，連續(xù)進(jìn)行5天，末次注射后早上7點(diǎn)開始記錄24小時(shí)腦電圖/肌電圖。腹腔注射的劑量為1mg/kg（以待測(cè)結(jié)構(gòu)計(jì)），結(jié)構(gòu)一、結(jié)構(gòu)二、結(jié)構(gòu)三用10%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的DMSO、2%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的Tween-80的PBS溶液溶解為5mg/ml，分別對(duì)應(yīng)結(jié)構(gòu)一組、結(jié)構(gòu)二組、結(jié)構(gòu)三組腹腔注射。從早上7點(diǎn)到晚上7點(diǎn)為光周期（Light period，LP），晚上7點(diǎn)到第二天早上7點(diǎn)為暗周期（Dark period，DP）。
2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
表3中給藥前后各數(shù)據(jù)經(jīng)T檢驗(yàn)均具有顯著性差異。由表3可知，結(jié)構(gòu)一、結(jié)構(gòu)二、結(jié)構(gòu)三對(duì)24h、光周期、暗周期的REM Sleep、Non-REM Sleep、Awake的時(shí)間均具有不同程度的影響。結(jié)構(gòu)一、結(jié)構(gòu)二、結(jié)構(gòu)三能夠延長(zhǎng)REM潛伏期。說(shuō)明結(jié)構(gòu)一、結(jié)構(gòu)二、結(jié)構(gòu)三可以用于制備治療發(fā)作性睡眠的藥物，并能夠延長(zhǎng)REM潛伏期時(shí)間。
實(shí)施例四：式（Ⅰ）急性毒性試驗(yàn)
1、試驗(yàn)方法
清潔級(jí)健康昆明小鼠，體重為18ｇ～22ｇ，平均分為四組，每組10只雌雄各半，給藥前禁食12h，正常給水。0.5%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的CMC-Na懸浮藥物，第一組、第二組、第三組分別灌胃1000mg/kg的結(jié)構(gòu)一、結(jié)構(gòu)二或結(jié)構(gòu)三，對(duì)照組0.5%的CMC-Na灌胃，連續(xù)觀察2周。
2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
四組小鼠均未出現(xiàn)死亡。第一組、第二組、第三組與對(duì)照組相比在給藥后兩天內(nèi)覺(jué)醒時(shí)間明顯延長(zhǎng)，而且精神狀態(tài)較好，活動(dòng)增多，進(jìn)食量和飲水量增加，從第四天開始覺(jué)醒-睡眠時(shí)間無(wú)顯著差異，除第三組在第四天出現(xiàn)精神萎靡現(xiàn)象外，其余各組精神狀態(tài)、活動(dòng)狀態(tài)、進(jìn)食量和飲水量無(wú)顯著區(qū)別。說(shuō)明昆明小鼠能夠耐受式（Ⅰ）1000mg/kg的單次給藥劑量。