技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種抗體復(fù)合制劑，特別是涉及一種靈芝多糖與卵黃抗體的復(fù)合產(chǎn)品。
背景技術(shù)：
：靈芝，是我國中醫(yī)藥寶庫中的珍品，具有防病治病、延年益壽之功效，素有"仙草"之譽。東漢時期的《神農(nóng)本草經(jīng)》、明代著名醫(yī)藥學(xué)家李時珍的《本草綱目》，都對靈芝的功效有詳細(xì)的記載。如今，靈芝已作為藥物正式被國家藥典收載，同時它又是國家批準(zhǔn)的新資源食品，無毒副作用，可以藥食兩用。靈芝多糖是靈芝中最有效的成分之一，因此，也特別受到醫(yī)藥科技工作者的重視，研究報道也最多?，F(xiàn)知靈芝多糖有廣泛的藥理活性，能提高機體免疫力，提高機體耐缺氧能力，消除自由基，抑制腫瘤、抗輻射，提高肝臟、骨髓、血液合成DNA、RNA、蛋白質(zhì)能力，延長壽命，靈芝多糖還具有刺激宿主非特異性抗性、免疫特異反應(yīng)以及抑制移植腫瘤生理活性的特性。卵黃抗體是用特定抗原多次免疫產(chǎn)蛋母雞，使機體產(chǎn)生相應(yīng)的特異性抗體，并轉(zhuǎn)移、貯存在卵黃中，經(jīng)提取純化的免疫球蛋白。卵黃抗體化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、對于動物福利政策的提倡、制備成本低、產(chǎn)量高、可制作口服免疫球蛋白、制備提取純化過程簡單、純度較高、相對于哺乳動物抗體交叉反應(yīng)少和實驗動物來源廣泛等優(yōu)點。血清抗體在母雞體內(nèi)形成過程中，由于其具有繼續(xù)合成和轉(zhuǎn)移能力，濃度可以保持平衡穩(wěn)定。另一方面，雞產(chǎn)生的抗體相比于系統(tǒng)發(fā)育高度保守的哺乳動物產(chǎn)生的抗體在對抗蛋白質(zhì)和肽方面往往更有效。卵黃抗體作為一種高效的生物制劑已被開發(fā)，并被廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)實踐。綜上研究，靈芝多糖本身屬于保健品，需要長期服用方能發(fā)揮提高免疫力效果，卵黃抗體治療效果明顯，二者復(fù)配可以兼顧預(yù)防與治療。而現(xiàn)有技術(shù)尚未有關(guān)于靈芝多糖與卵黃抗體復(fù)配的相關(guān)報道。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的，提供一種將靈芝多糖與新城疫卵黃抗體復(fù)配，得到對新城疫預(yù)防與治療雙重效果的口服液。本發(fā)明的技術(shù)方案是：一種靈芝多糖與卵黃抗體的復(fù)合產(chǎn)品的制備方法，步驟如下：（1）靈芝多糖液的制備：配制靈芝固體發(fā)酵培養(yǎng)基，裝袋，于116-126℃高壓滅菌1.2-2.8小時，接種靈芝麥粒菌種，25℃培養(yǎng)至長滿菌袋底部，于100℃熱水浸提0.5-1.5小時，離心，取上清液；（2）卵黃抗體的制備：按照常規(guī)方法制取抗雞新城疫病毒高免雞蛋，消毒，打碎雞蛋，分離卵黃，加入6-14倍體積純化水，組織勻漿機中勻漿，加入體積比為8.5%-11.5%的辛酸，于4℃靜置過夜，3000r離心15-45分鐘，取下層清液，甲醛消毒；（3）將步驟（1）所得靈芝多糖液與步驟（2）所得精制卵黃抗體按照3:1比例復(fù)配，即得。上述一種靈芝多糖與卵黃抗體的復(fù)合產(chǎn)品的制備方法，優(yōu)選的方案是，步驟（1）于119-123℃高壓滅菌（優(yōu)選于121℃高壓滅菌）。上述一種靈芝多糖與卵黃抗體的復(fù)合產(chǎn)品的制備方法，優(yōu)選的方案是，步驟（1）高壓滅菌1.6-2.4小時（優(yōu)選高壓滅菌2.0小時）。上述一種靈芝多糖與卵黃抗體的復(fù)合產(chǎn)品的制備方法，優(yōu)選的方案是，步驟（1）于100℃熱水浸提0.7-1.3小時（優(yōu)選于100℃熱水浸提1.0小時）。上述一種靈芝多糖與卵黃抗體的復(fù)合產(chǎn)品的制備方法，優(yōu)選的方案是，步驟（2）加入8-12倍體積純化水（優(yōu)選加入10倍體積純化水）。上述一種靈芝多糖與卵黃抗體的復(fù)合產(chǎn)品的制備方法，優(yōu)選的方案是，步驟（2）加入體積比為9.5%-10.5%的辛酸（優(yōu)選加入體積比為10%的辛酸）上述一種靈芝多糖與卵黃抗體的復(fù)合產(chǎn)品的制備方法，優(yōu)選的方案是，步驟（2）3000r離心25-35分鐘（優(yōu)選3000r離心30分鐘）。本發(fā)明的優(yōu)良效果還表現(xiàn)在：1、本發(fā)明采用適合大批量生產(chǎn)的現(xiàn)代卵黃抗體提取技術(shù)及優(yōu)化的靈芝多糖提取工藝，將新城疫卵黃抗體與靈芝多糖作用相結(jié)合，對新城疫既能起到治療作用，又有良好的預(yù)防效果；2、本發(fā)明的復(fù)配工藝簡單，成熟，所用原料易購，成本低廉，既能保證抗體的活性，同時二者復(fù)合后作用效果增強，服用安全，無副作用，具有較大的市場推廣價值。具體實施方式下面結(jié)合實施例和實驗例詳細(xì)說明本發(fā)明的技術(shù)方案，但保護范圍不限于此。實施例1：一種靈芝多糖與卵黃抗體的復(fù)合產(chǎn)品的制備方法，步驟如下：（1）靈芝多糖液的制備：配制靈芝固體發(fā)酵培養(yǎng)基，裝袋，于116℃高壓滅菌1.2小時，接種靈芝麥粒菌種，25℃培養(yǎng)至長滿菌袋底部，于100℃熱水浸提0.5小時，離心，取上清液；（2）卵黃抗體的制備：按照常規(guī)方法制取抗雞新城疫病毒高免雞蛋，消毒，打碎雞蛋，分離卵黃，加入6倍體積純化水，組織勻漿機中勻漿，加入體積比為8.5%的辛酸，于4℃靜置過夜，3000r離心15分鐘，取下層清液，甲醛消毒；（3）將步驟（1）所得靈芝多糖液與步驟（2）所得精制卵黃抗體按照3:1比例復(fù)配，即得。實施例2：一種靈芝多糖與卵黃抗體的復(fù)合產(chǎn)品的制備方法，步驟如下：（1）靈芝多糖液的制備：配制靈芝固體發(fā)酵培養(yǎng)基，裝袋，于126℃高壓滅菌2.8小時，接種靈芝麥粒菌種，25℃培養(yǎng)至長滿菌袋底部，于100℃熱水浸提1.5小時，離心，取上清液；（2）卵黃抗體的制備：按照常規(guī)方法制取抗雞新城疫病毒高免雞蛋，消毒，打碎雞蛋，分離卵黃，加入14倍體積純化水，組織勻漿機中勻漿，加入體積比為11.5%的辛酸，于4℃靜置過夜，3000r離心45分鐘，取下層清液，甲醛消毒；（3）將步驟（1）所得靈芝多糖液與步驟（2）所得精制卵黃抗體按照3:1比例復(fù)配，即得。實施例3：一種靈芝多糖與卵黃抗體的復(fù)合產(chǎn)品的制備方法，步驟如下：（1）靈芝多糖液的制備：配制靈芝固體發(fā)酵培養(yǎng)基，裝袋，于119℃高壓滅菌1.6小時，接種靈芝麥粒菌種，25℃培養(yǎng)至長滿菌袋底部，于100℃熱水浸提0.7小時，離心，取上清液；（2）卵黃抗體的制備：按照常規(guī)方法制取抗雞新城疫病毒高免雞蛋，消毒，打碎雞蛋，分離卵黃，加入8倍體積純化水，組織勻漿機中勻漿，加入體積比為9.5%的辛酸，于4℃靜置過夜，3000r離心25分鐘，取下層清液，甲醛消毒；（3）將步驟（1）所得靈芝多糖液與步驟（2）所得精制卵黃抗體按照3:1比例復(fù)配，即得。實施例4：一種靈芝多糖與卵黃抗體的復(fù)合產(chǎn)品的制備方法，步驟如下：（1）靈芝多糖液的制備：配制靈芝固體發(fā)酵培養(yǎng)基，裝袋，于123℃高壓滅菌2.4小時，接種靈芝麥粒菌種，25℃培養(yǎng)至長滿菌袋底部，于100℃熱水浸提1.3小時，離心，取上清液；（2）卵黃抗體的制備：按照常規(guī)方法制取抗雞新城疫病毒高免雞蛋，消毒，打碎雞蛋，分離卵黃，加入12倍體積純化水，組織勻漿機中勻漿，加入體積比為10.5%的辛酸，于4℃靜置過夜，3000r離心35分鐘，取下層清液，甲醛消毒；（3）將步驟（1）所得靈芝多糖液與步驟（2）所得精制卵黃抗體按照3:1比例復(fù)配，即得。實施例5：一種靈芝多糖與卵黃抗體的復(fù)合產(chǎn)品的制備方法，步驟如下：（1）靈芝多糖液的制備：配制靈芝固體發(fā)酵培養(yǎng)基，裝袋，于121℃高壓滅菌2.0小時，接種靈芝麥粒菌種，25℃培養(yǎng)至長滿菌袋底部，于100℃熱水浸提1.0小時，離心，取上清液；（2）卵黃抗體的制備：按照常規(guī)方法制取抗雞新城疫病毒高免雞蛋，消毒，打碎雞蛋，分離卵黃，加入10倍體積純化水，組織勻漿機中勻漿，加入體積比為10%的辛酸，于4℃靜置過夜，3000r離心30分鐘，取下層清液，甲醛消毒；（3）將步驟（1）所得靈芝多糖液與步驟（2）所得精制卵黃抗體按照3:1比例復(fù)配，即得。試驗例本發(fā)明所得一種靈芝多糖與卵黃抗體的復(fù)合產(chǎn)品（實施例5）的應(yīng)用研究：1.血凝抑制試驗選取50周齡母雞共80羽，隨機分成實驗組和對照組，兩組母雞在健康狀況、體重等方面經(jīng)統(tǒng)計學(xué)檢驗，無顯著性差異（P＞0.05），具有可比性。其中實驗組每只口服2羽份本發(fā)明產(chǎn)品；對照組不加藥。5天后兩組均攻擊NDV強毒，10-9稀釋，每羽雞1.0mL胸肌注射。并分別在加藥前3天和攻毒后10天采血，按常規(guī)方法測總效價。結(jié)果如表1所示。表1本發(fā)明產(chǎn)品對ND-HI效價的影響（Log2x±SD）組別加藥前3天攻毒后10天實驗組3.17±1.3911.24±1.38對照組3.18±1.246.12±1.01由表1數(shù)據(jù)可知，實驗組和對照組母雞在加藥前3天，其ND-HI效價均較低，一旦受到NDV強毒攻擊極易發(fā)生新城疫病。但是由于實驗組服用了本發(fā)明所得產(chǎn)品，在受到NDV強毒攻擊后10天，其ND-HI效價由之前的明顯提高，且遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對照組（P＜0.05）。由此說明本發(fā)明提供的復(fù)合產(chǎn)品能顯著增強機體的體液免疫機能，能夠有效預(yù)防和治療新城疫。2.治療試驗選取100只患有新城疫的病雞，隨機分為實驗組和對照組，兩組病雞在病情、體質(zhì)方面等方面經(jīng)統(tǒng)計學(xué)檢驗，無顯著性差異（P＞0.05），具有可比性。其中實驗組每只口服2羽份本發(fā)明產(chǎn)品；對照組服用市售乳酸環(huán)丙沙星可溶性粉（購置于甘肅牧遠(yuǎn)動物藥業(yè)有限公司），服用方法：按0.05%比例添加至飼料中。共觀察治療7天。結(jié)果如表2所示。表2實驗組和對照組治療結(jié)果對比組別病雞數(shù)治愈數(shù)治愈率實驗組50羽48羽96.0%對照組50羽40羽80.0%由表2數(shù)據(jù)可知，服用本發(fā)明所得產(chǎn)品的實驗組治愈率為96.0%，而服用市售乳酸環(huán)丙沙星可溶性粉的對照組治愈率為80.0%。由此表明，本發(fā)明所得產(chǎn)品對新城疫病毒具有更高的治療效果。應(yīng)當(dāng)指出的是，具體實施方式只是本發(fā)明比較有代表性的例子，顯然本發(fā)明的技術(shù)方案不限于上述實施例，還可以有很多變形。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員，以本發(fā)明所明確公開的或根據(jù)文件的書面描述毫無異議的得到的，均應(yīng)認(rèn)為是本專利所要保護的范圍。當(dāng)前第1頁1 2 3