本發(fā)明涉及環(huán)狀糖肽用于增強骨替代物組合物對拉力、剪力和扭力中一種或多種的抵抗力的用途。骨替代物組合物在混合時形成可用于矯形外科手術(shù)的可注射和/或可模制以及可硬化的組合物，其中所述組合物與植入物組合使用以增強植入物的固定，從而增強植入物的穩(wěn)定所需的骨再生長。
背景技術(shù)：
：直到上世紀，醫(yī)生還依靠鑄件和夾板從身體外部支撐和穩(wěn)定骨骼。無菌手術(shù)的出現(xiàn)減低了感染風險，使醫(yī)生可以從內(nèi)部設置和穩(wěn)定骨折骨。植入物現(xiàn)在廣泛用于矯形外科手術(shù)，用于修復骨折骨，以及用于關(guān)節(jié)成形術(shù)。內(nèi)固定用于穩(wěn)定和支撐骨折骨，直至其足夠堅固以支撐身體的重量和運動。內(nèi)固定允許較短的住院時間，使患者能夠更早恢復功能，并減少骨折骨不愈合(不適當愈合)和畸形愈合(不適當位置的愈合)的發(fā)生率。設置骨折手術(shù)期間，骨片段首先被重新定位(復位)至其正常排列。然后用專門的植入物例如板、螺釘、銷(pin)、釘(nail)和線等將其固定就位。螺釘比其他任意類型的植入物更常用于內(nèi)固定。螺釘雖然是簡單裝置，但根據(jù)骨折類型和使用方式有不同的螺釘設計。不同的尺寸的螺釘用于不同尺寸的骨。螺釘可單獨用于穩(wěn)定骨折，也可以與板、桿或釘一起使用。板用作內(nèi)部夾板，其通過螺釘附接到骨并用于將骨的破碎片段保持在一起。骨愈合后，可將螺釘留在原處或者移走。一些長骨(例如股骨和脛骨)骨折時，可通過插入桿或釘?shù)焦堑闹锌涨恢袑⒐瞧伪３衷谝黄?。桿每個末端的螺釘用于防止骨折變短或旋轉(zhuǎn)，也可用于將桿保持在原位直到骨折愈合。桿和螺釘在愈合完成后可留在骨中。內(nèi)固定用的植入物通常是由不銹鋼和鈦制成，堅固耐用，然而如果插入略弱的骨中，其固有強度不能有助于實現(xiàn)強的初始固定。使用螺釘定位或穩(wěn)定骨折骨正確排列需要強的初始固定以減低過早裝置脫離和延遲骨折愈合的風險。尤其是使用螺釘來定位板或桿的情況下，其中在操作后螺釘將經(jīng)受拉出力，拉出力可由可能導致螺釘松動或完全脫離的拉力和/或剪力組成。手術(shù)后數(shù)周，骨生長和骨折愈合導致具有充分機械力量的骨的形成，如果認為必要可將插入的螺釘和板移除。聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)可用于增強螺釘固定，特別是椎弓根螺釘用于骨質(zhì)疏松病人脊椎重建手術(shù)時。將合成聚合物如PMMA用于骨重建特別是用于骨質(zhì)疏松病人時，有許多相關(guān)的缺點。首先，PMMA聚合過程中產(chǎn)生的熱破壞相鄰的骨組織，導致植入物和相鄰骨組織之間產(chǎn)生軟纖維界面，這會減弱植入物固定。其次，PMMA是剛性且不可壓縮的，并且當用于增強螺釘插入骨質(zhì)疏松患者脊椎時，會大大增加相鄰脊椎(支點)骨折的風險。此外，PMMA類合成聚合物不是生物可降解的，因而他們不能被鄰近植入物的骨組織隨后取代。由于插入的螺釘隨后可能需要被移除，當螺釘需要手術(shù)移除時，避免使用可導致更大骨損傷的不可降解接合劑是非常重要的。植入物也越來越多地用于治療需要初次關(guān)節(jié)假體手術(shù)以及通過關(guān)節(jié)置換翻修術(shù)替換假體的患者。如果初次假體已經(jīng)與聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)接合，則關(guān)節(jié)置換翻修術(shù)對外科醫(yī)師提出了實質(zhì)性挑戰(zhàn)。PMMA接合劑能夠與骨松質(zhì)接合，因此固化PMMA的移除必然會伴隨移除大量內(nèi)源骨。如果假體發(fā)生感染，則所有殘留的PMMA需要被移除，因為其可能容納細菌生長。因而，當進行修復手術(shù)時，移除PMMA接合的假體可在骨中產(chǎn)生另外的空隙和裂縫。因此，初次假體手術(shù)使用不含接合劑假體已經(jīng)日益成為共識。但是，使用不含接合劑假體本身也不是沒有問題。導致不含接合劑假體植入失敗的最普遍原因是無菌性松動和假體周圍骨溶解。Pijls等(2012)研究了初次全膝假體在手術(shù)一年內(nèi)無菌松動對假體存活率的直接影響。該研究顯示，假體每遷移1mm(使用放射立體測量分析測量假體表面任意點的3D遷移)，5年對修復手術(shù)的需求增加8％。在過去10年中，髖關(guān)節(jié)置換翻修術(shù)也越來越多的使用不含接合劑固定的假體。不含接合劑的修復假體的存活率難以預測，依賴于許多因素包括植入物尺寸的最佳選擇、股骨解剖學、骨損壞的程度。精確評估這些臨床參數(shù)需要高水平的外科經(jīng)驗，而這并不總是可提供的?？紤]到用于治療肌肉骨骼疾病的植入物(例如用于初次關(guān)節(jié)成形術(shù)和關(guān)節(jié)置換翻修術(shù)的非接合假體)以及用于骨折固定的植入物的直接強穩(wěn)定化的缺陷，需要與植入物組合使用時可在手術(shù)后立即增強其固定的新接合劑。植入物固定的改進可有利于具有肌肉骨骼疾病的哺乳動物，例如人、狗、馬或貓。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明涉及環(huán)狀糖肽用于增強組合物對拉力、剪力和扭力中一種或多種的抵抗力的用途，其中所述組合物包含粉末組分和水性液態(tài)組分及環(huán)狀糖肽組分，或基本上由其組成；其中所述粉末組分包含硫酸鈣組分和/或磷酸鈣組分，或基本上由其組成；并且其中所述粉末組分和水性液態(tài)組分及環(huán)狀糖肽組分混合時形成可體內(nèi)硬化的可注射或可模制組合物。本發(fā)明還涉及可用于在接受植入物的哺乳動物中治療肌肉骨骼疾病的組合物，用于增強骨再生長以穩(wěn)定所述植入物。其中所述組合物包含粉末組分和水性液態(tài)組分及環(huán)狀糖肽組分，或基本上由其組成；其中所述粉末組分包含硫酸鈣組分和/或磷酸鈣組分；且其中所述粉末組分和水性液態(tài)組分及環(huán)狀糖肽組分混合時形成可體內(nèi)硬化的組合物。在用于治療接受植入物的哺乳動物中的肌肉骨骼疾病的所述組合物的一個實施方案中，所述哺乳動物患有骨折或者可選擇地其需要關(guān)節(jié)成形術(shù)；或者所述哺乳動物需要骨片段切除術(shù)由于例如腫瘤或感染，或者所述哺乳動物需要進行由于先天缺限、骨關(guān)節(jié)炎、骨折錯位愈合等引起的骨變形校正手術(shù)。用于治療接受植入物的哺乳動物中肌肉骨骼疾病的所述組合物的另一個實施方案中，將所述粉末組分和水性液態(tài)組分及環(huán)狀糖肽組分混合并且所述組合物是可注射和/或可模制的。相應地，本發(fā)明還提供了糊劑，其包含硫酸鈣組分和/或磷酸鈣組分，以及水性液體(例如水或鹽)中的環(huán)狀糖肽組分。本發(fā)明環(huán)狀糖肽用途的實施方案或者用于治療接受植入物的哺乳動物中肌肉骨骼疾病的所述組合物的實施方案中，所述粉末組分包含硫酸鈣組分和磷酸鈣組分，其與水性液態(tài)組分和環(huán)狀糖肽組分混合后形成可注射和/或可模制的組合物。所述用途和用于治療肌肉骨骼疾病的所述組合物的一個實施方案中，環(huán)狀糖肽選自含萬古霉素、伊瑞霉素、瑞斯托菌素A、替考拉寧、特拉萬星(telavancin)、博萊霉素、雷莫拉寧和decaplanin的組；或者更優(yōu)選地選自含萬古霉素、伊瑞霉素、瑞斯托菌素A、替考拉寧、特拉萬星(televancin)的組。在一個實施方案中，所述哺乳動物是四足哺乳動物，例如選自人、狗、貓(例如家貓)和馬的哺乳動物。根據(jù)上述用途的環(huán)狀糖肽的陶制骨替代物組合物對應于用于哺乳動物中固定植入物的組合物，涉及對于上述組合物定義的每個特征。本發(fā)明還涉及用于固定植入物的方法，其包含(或主要由其組成)：a)將基本上由羥磷灰石30wt/wt％到50wt/wt％、硫酸鈣50wt/wt％到70wt/wt％和環(huán)狀糖肽組成的干粉組合物與水性液體混合，形成可注射和/或可模制組合物；其中環(huán)狀糖肽的含量為1-600mg/ml可注射和/或可模制組合物；b)將由步驟a)產(chǎn)生的組合物插入骨腔中；c)在步驟b)插入所述組合物之前或其后，將植入物導入骨腔中；和d)使所述可注射組合物在體內(nèi)硬化。在用于固定植入物的方法的另一個實施方案中，可注射和/或可模制組合物包含每克骨替代物粉末0.1ml到2ml，優(yōu)選0.2ml到0.7ml水性液體。另一個實施方案中，用于固定植入物的方法包括在步驟(a)之前制備骨腔以接受植入物的步驟。用于固定植入物的方法的另一個實施方案中，植入物選自螺釘、銷、釘、桿、線、板和假體的一種或多種。假體可用于選自髖、膝、肩、指、踝、腕、肘關(guān)節(jié)的關(guān)節(jié)成形術(shù)。此外，假體可以是初次假體或修復假體。假體可以包含鈦合金和/或鈷-鉻-鉬(CoCrMo)合金。另一個實施方案中，用于固定植入物的方法包括在步驟(a)之前移除初次或修復假體以提供骨腔的步驟。用于固定植入物的方法的另一個實施方案中，硫酸鈣組分包含α-硫酸鈣半水合物及選自硫酸鈣二水合物和氯化鈉的另外的加速劑。另外，在一個實施方案中，骨替代物粉末的顆粒尺寸小于100μm。用于固定植入物的方法的另一個實施方案中，水性液體可包含X-射線造影劑和/或一種或多種治療劑。附圖說明圖1[A]示出了從泡沫塊(1522－507塊：提供的開孔7.5#、0.12g/cc)切下的81cm3(4.5×4.5×4cm3)塊。開孔結(jié)構(gòu)和1.5mm－2.5mm孔尺寸與人的骨松質(zhì)類似。泡沫塊材料的密度是0.12g/cc、耐壓強度為0.28MPa、壓縮模量為18.6MPa。[B]圖示出了用于模擬骨皮質(zhì)的泡沫塊和一個2mm厚有機玻璃板，穿過板中央打了一個單孔；以及一個空心的(cannulated)、部分帶螺紋的5.0×60mm長的不銹鋼螺釘(AsnisTMIII)，由Stryker(Footandanklefixation.com)提供。在此基礎上，在泡沫塊中用3.5mm鉆頭鉆了一個2cm深的孔。[C]圖示出了通過預先鉆好的孔穿過有機玻璃板插入81cm3的泡沫塊中的螺釘。圖2示出通過有機玻璃板插入81cm3的塊中的螺釘，其中螺釘是用陶制骨替代物組合物增強的。有機玻璃板可模擬包圍骨松質(zhì)的骨皮質(zhì)層。有機玻璃板中的孔足夠大可使螺釘通過，不需要螺紋與有機玻璃接觸。圖3卡通示出了拉出試驗中施加在插入螺釘上的軸向力。圖4示出了安裝在MTSInsight5單柱材料測試工作站上的泡沫塊和插入螺釘，其用于測定將插入的螺釘從所述塊拔出所需要的力。圖5示出了保持潮濕狀態(tài)下插入模型泡沫塊的10個螺釘中每一個被撥出所需要的拉拔力曲線(牛頓)；其中(A)中插入的螺釘是未增強的(參照樣品)；(B)中插入的螺釘是用硫酸鈣和羥磷灰石組成的陶制骨替代物組合物增強的(“CSH/HA”)；(C)中插入的螺釘是補充了慶大霉素的陶制骨替代物組合物增強的(“CSH/HA+慶大霉素”)；(D)中插入的螺釘是補充了萬古霉素的陶制骨替代物組合物增強的(“CSH/HA+萬古霉素”)。標記*的曲線是指達到了MTS測力傳感器的最大限度(500N)。圖6示出了將螺釘從保持在潮濕狀態(tài)的泡沫板中拔出所需要的拉力(牛頓)；其中所述插入的螺釘是用陶制骨替代物組合物(“CSH/HA”)增強或者用補充了慶大霉素的陶制骨替代物組合物(“CSH/HA+慶大霉素”)增強或者用補充了萬古霉素的陶制骨替代物組合物(“CSH/HA+萬古霉素”)增強的。曲線中的每條誤差線代表指定條件下測定的10個樣本的平均峰值力(含標準差)。圖7卡通示出了誘導和測定對插入螺釘?shù)呐ち蚣袅Φ姆椒?。通過轉(zhuǎn)矩驅(qū)動工具將植入物從強化的泡沫旋出來測定扭力。具體實施方式術(shù)語定義：增強的：本文中用于植入物，是指與可硬化骨替代物接合劑一起植入以改善骨組織固定的植入物?；旧嫌?.....組成:該術(shù)語用于本發(fā)明的方法、組合物、粉末組分和可注射和/或可模制組合物的每一種，必要地包括其中所列的步驟和/或組分，并且其中每種還開放到不會實質(zhì)上影響本發(fā)明的基礎特性和新穎性的未列出步驟和/或組分。環(huán)狀糖肽：是非核糖體環(huán)狀糖肽，其特征在于具有有限構(gòu)象柔性的大的兩性有機結(jié)構(gòu)、水溶性和與酸和堿反應的能力，例如環(huán)狀糖肽抗生素，包括萬古霉素、伊瑞霉素、瑞斯托菌素A、替考拉寧、特拉萬星、博來霉素、雷莫拉寧和decaplanin。拔出力：是植入物植入后在受試者骨組織中的固定力，以及對植入過程中及植入后作用于植入物的多種應力導致的植入物從其植入位點脫離的相應的抵抗力。所述應力可以是拉力和/或剪力。每一種都可依據(jù)本發(fā)明的描述進行測量。本發(fā)明提供了組合物，其可用于治療接受植入物的哺乳動物的肌肉骨骼疾病以促進骨再生以穩(wěn)定植入物。與PMMA接合劑相比，本發(fā)明的組合物包由兩相陶制骨替代物組成，其包含硫酸鈣組分和/或磷酸鈣組分，其可被吸收并促進新骨的內(nèi)生長(Zampelisetal.)。組合物的組分混合后形成組合物或糊劑，可以通過注射或模制進入要插入植入物的骨腔。本發(fā)明的組合物在所述治療中的使用可提供所插入的植入物例如螺釘、銷、釘、桿、線、板或人工關(guān)節(jié)的柄的出乎意料地強的初始固定，可以保證手術(shù)過程中和手術(shù)后骨折骨或替換關(guān)節(jié)的精確排列，并使隨后的微移動最小化。植入物的微移動已知可干擾/擾亂植入手術(shù)后的骨再生，這對于哺乳動物中長期的植入物穩(wěn)定是重要的，并且如果不能將其最小化則最終可導致植入物脫離。因此，本發(fā)明的組合物具有可促進骨再生和預防微移動干擾這種骨再生的組合性質(zhì)，導致意料之外的促進植入物固定和穩(wěn)定，這對于長期治療接受植入物的哺乳動物的肌骨骨骼疾病是必需的。所述組合物意圖用于將植入物固定在患有肌肉骨骼疾病例如需要關(guān)節(jié)成形術(shù)的哺乳動物中的骨折或假體的哺乳動物中，其中所述組合物包含粉末組分、環(huán)狀糖肽組分和水性液態(tài)組分，或基本上由其組成，其中所述粉末組分、環(huán)狀糖肽組分和水性液態(tài)組分混合時形成可體內(nèi)硬化的組合物。所述粉末組分包含硫酸鈣組分和/或磷酸鈣組分，或基本上由其組成，特別適合用于陶制骨替代物組合物。環(huán)狀糖肽組分可以是干燥組分，或者所述液態(tài)組分可包含環(huán)狀糖肽。硫酸鈣組分可包含半水合硫酸鈣并且可以與促進劑組合，其中促進劑可以例如選自二水合硫酸鈣和合適的鹽例如氯化鈉，用于通過水合來體內(nèi)硬化半水合硫酸鈣。如果促進劑是氯化鈉，可適合在水性液態(tài)中以水性鹽溶液提供。半水合硫酸鈣可以是α-半水合硫酸鈣或β-半水合硫酸鈣，其中優(yōu)選α-半水合硫酸鈣，并且適合地粉末化半水合硫酸鈣粒度小于500μm，例如小于100μm或者99％顆粒的粒度小于80μm。當半水合硫酸鈣(CSH)與水性液體混合時，其會水合形成二水合硫酸鈣(CSD)，依據(jù)以下反應式(1)：CaSO4·0.5H2O+1.5H2O＝>CaSO4·2H2O+熱(1)骨替代物粉劑中的促進劑可促進CSH的水合及其重結(jié)晶形成CSD的速率。當促進劑是粉狀CSD時，其最適粒度是小于500μm，例如小于150μm，或者例如小于100μm。二水合硫酸鈣微粒的含量應介于骨替代物粉劑總重量的0.1wt/wt％和10wt/wt％之間，例如0.1wt/wt％和2wt/wt％之間。粉狀磷酸鈣組分可以是例如無定形磷酸鈣(ACP)、一水合磷酸二氫鈣(MCPM；Ca(H2PO4)·2H2O)、二水合磷酸二鈣DCPD(磷酸氫鈣，CaHPO4·2H2O)、磷酸八鈣(Ca8(HPO4)2(PO4)4·5H2O)、無鈣羥磷灰石(CDHA；Ca9(HPO4)(PO4)5(OH))、磷酸三鈣(TCP；Ca3(PO4)2)和羥磷灰石(HA；Ca10(PO4)6(OH)2)。優(yōu)選地，粉狀磷酸鈣組分為羥磷灰石或磷酸三鈣，其中羥磷灰石或α-磷酸三鈣的粒度小于100μm。優(yōu)選地，HA粉末是經(jīng)過燒結(jié)和微?；?，并且含有超過90％例如95％或更高，例如99％的結(jié)晶HA。HA粉末可在100－900℃另外熱處理10min到10h(例如500℃處理2h)，如PCT/EP2014/053330中所述。當所述粉狀磷酸鈣組分為磷酸三鈣時，加入促進劑例如硬化的磷酸鈣微粒是有利的。硬化的磷酸鈣微粒的粒度應小于100μm，適合地小于50μm，并且在骨替代物粉劑中包含介于0.1wt/wt％到10wt/wt％的磷酸鈣，例如介于0.5wt/wt％到5wt/wt％的磷酸鈣。磷酸鈣反應形成硬化的磷酸鈣也可通過加入磷酸鹽例如磷酸氫二鈉(Na2HPO4)來加速，其可以干顆粒形式加入或溶入水性液體中加入。此時，促進劑在水性液體中存在的濃度應是0.1-10wt％，例如1-5wt％。為賦予硬化的陶制骨替代物組合物初始強度，當使用待硬化的磷酸鈣時，半水合硫酸鈣可包含2-80wt％優(yōu)選10-30wt％的干粉以與水性液體混合。同樣地，當將磷酸鈣轉(zhuǎn)化成硬化磷酸鈣時，磷酸鈣應包含20-98wt％，優(yōu)選70-90wt％的干粉。當使用羥磷灰石作為磷酸鈣組分時，羥磷灰石適合地包含30wt％到50wt％，例如約40％的干粉，此時CSH+CSD將占干粉的50wt％到70wt％，例如約60％。本發(fā)明的組合物還包含非核糖體環(huán)狀糖肽，其中所述環(huán)狀糖肽可包含在水性液態(tài)組分中，或者可作為組合物的干組分提供。向組合物中加入環(huán)狀糖肽據(jù)發(fā)現(xiàn)可產(chǎn)生可注射的組合物，當其與植入物一起導入骨腔時，能顯著提高插入的植入物的固定強度。在組合物的體內(nèi)硬化后立即觀察到用含環(huán)狀糖肽組合物增強的植入物的加強固定，其中硬化發(fā)生在含環(huán)狀糖肽組合物開始混合起20分鐘內(nèi)。使用本發(fā)明的組合物提供增強的植入物的固定強度可通過測量植入物的拔出力來確定。拔出力包括增加的軸向拉力和剪力的組合。用本發(fā)明的組合物增強的植入物的拔出力和抗扭力的體外測量方法描述于實施例2。本發(fā)明的非核糖體環(huán)狀糖肽包括萬古霉素、伊瑞霉素、瑞斯托菌素A、替考拉寧、特拉萬星、博萊霉素、雷莫拉寧和decaplanin或其組合；優(yōu)選伊瑞霉素、瑞斯托菌素A、替考拉寧和特拉萬星或其組合中任一種。在一個優(yōu)選的實施方案中，環(huán)狀糖肽是萬古霉素，其與其他環(huán)狀糖肽一樣是水溶性的并且能夠與酸和堿反應，并且他們的特征在于其大的兩性有機結(jié)構(gòu)具有有限的構(gòu)象柔性(Liskampetal.2008)。組合物中的萬古霉素優(yōu)選以萬古霉素鹽酸鹽的形式提供。鑒于這些環(huán)狀糖肽例如萬古霉素的特征，理論上這些環(huán)狀糖肽的一種或多種官能團與組合物中的組分相互作用，例如以提高其硬化時拉力、剪力和扭力方面的結(jié)構(gòu)強度。重要地，當接合劑保持在濕潤條件且溫度(約35-42℃，例如37℃)時，硬化時可提高其拉力、剪力和扭力的環(huán)狀糖肽(例如萬古霉素)和組合物其他組分之間的相互作用發(fā)生，所述條件符合組合物插入的體內(nèi)骨腔內(nèi)的條件。使用本發(fā)明的組合物增強時，這些環(huán)狀糖肽的官能團與骨腔中的骨組織的官能團之間的相互作用(例如離子鍵和/或化學鍵)可有助于增強植入物的固定。當用于治療額外遭受骨質(zhì)減少或骨質(zhì)疏松的哺乳動物的肌肉骨骼疾病時，包含陶制骨替代物與環(huán)狀糖肽組合的本發(fā)明的組合物是特別有利的?？勺⑸浠蚩赡Ｖ七M入骨質(zhì)疏松哺乳動物的本發(fā)明的可注射和/或可模制組合物(糊劑)與基于丙烯酸鹽的接合劑例如PMMA相比不太可能損壞相鄰的骨組織，因為其材料強度和剛度與哺乳動物自身的骨組織更匹配。本發(fā)明的組合物可用于治療具有肌肉骨骼疾病的人、狗、貓或馬，特別適用于治療人。含環(huán)狀糖肽(例如萬古霉素)的適合的水性溶液是含2-1250mg萬古霉素鹽酸鹽/ml溶液，例如至少5mg、10mg、20mg、40mg、60mg、80mg、100mg、120mg、140mg、160mg、180mg、200mg、300mg、400mg、600mg、800mg、1000mg環(huán)狀糖肽(例如萬古霉素鹽酸鹽)/ml溶液的水性溶液。例如，適合的環(huán)狀糖肽(例如萬古霉素)水性溶液是含30-50mg、50-70mg、70-90mg、90-120mg、120-130mg、130-150mg、150-170mg、170-190mg、190-210mg、210-250mg、250-500mg、500-750mg、750-1000mg環(huán)狀糖肽(例如萬古霉素鹽酸鹽)/ml溶液的水性溶液。本發(fā)明的組合物包含的骨替代物粉末組分和水性液態(tài)組分混合形成環(huán)狀糖肽(例如萬古霉素)含量為1mg至600mg環(huán)狀糖肽(例如萬古霉素)/ml糊劑的可注射組合物(糊劑)，例如至少或不超過：5mg、10mg、15mg、20mg、40mg、60mg、80mg、100mg、120mg、140mg、160mg、180mg、250mg、275mg、300mg、325mg、350mg、375mg、400mg、425mg、450mg、500mg、525mg、550mg、575mg和600mg環(huán)狀糖肽(例如萬古霉素)/ml糊劑。例如，適合的糊劑是包含5-15mg、15-25mg、25-35mg、35-45mg、45-55mg、55-65mg、65-75mg、75-85mg、85-105mg、105-125mg、125-145mg、145-165mg、165-185mg、185-205mg、205-215mg、215-225mg、225-250mg、250-300mg、330-350mg、350-400mg、450-500mg、500-550mg、550-600mg環(huán)狀糖肽(例如萬古霉素)/ml糊劑的糊劑。當可注射骨替代物組合物(糊劑)由包含(或主要由其組成)50wt/wt％至70wt/wt％(例如60wt/wt％)硫酸鈣組分(CSH+CSD)和30wt/wt％至50wt/wt％(例如40wt/wt％)羥磷灰石的粉末及液態(tài)組分制備時，則糊劑包含5-15mg、15-25mg、25-35mg、35-45mg、45-55mg、55-65mg、65-75mg、75-85mg、85-105mg、105-125mg、125-145mg、145-165mg、165-185mg、185-205mg、205-215mg、215-225mg、225-45mg、55-65mg、65-75mg、75-85mg、250mg、250-300mg、330-350mg、350-400mg、450-500mg、500-550mg、550-600mg環(huán)狀糖肽(例如萬古霉素)/ml糊劑。優(yōu)選地，所述糊劑的環(huán)狀糖肽(例如萬古霉素)含量為20-150mg、20-140mg、20-120mg、20-100mg、20-80mg、20-60mg、30-150mg、30-140mg、30-130mg、30-120mg、30-110mg、30-100mg、30-80mg、40-150mg、40-140mg、40-130mg、40-120mg、40-110mg、40-100mg環(huán)狀糖肽(例如萬古霉素)/ml糊劑。含所述組合物的糊劑對于可注射骨替代物都顯示出可接受的凝固性能(settingperformance)，與通過使用糊劑固定植入物治療肌肉骨骼疾病的外科手術(shù)相容(實施例3)。水性液態(tài)組分還可以包括X射線造影劑，例如US8,586,101和US5,447,711中所述的試劑，包括碘曲侖、碘克酸、碘西醇和碘沙考。適合地，所述試劑是非離子、低摩爾滲透壓濃度、水溶性造影劑，例如含碘的水性液體例如碘海醇、碘克沙醇、碘佛醇、碘帕醇和碘曲侖。作為可選擇的水溶性非離子X射線造影劑，包含生物相容性和生物可降解的X射線造影劑的可生物降解顆粒例如WO2009/081169中所公開的，可用于在本發(fā)明的骨替代物中提供放射不透性。水性液體可包括氯化鈉例如0.9w/v％氯化鈉，用作促進劑。粉末和水性液態(tài)組分的混合比稱為液體粉末比(L/P)。陶制骨替代物組合物中的水性液體應包含0.1mL/g至2mL/g粉末，例如0.2mL/g至0.7mL/g或0.3mL/g至0.5mL/g?？墒褂幂^低的L/P比例如0.2mL/g至0.4mL/g以減少凝固時間，但較低的L/P比率可能影響組合物的可注射性。在一個實施方案中，粉末由60wt/wt％硫酸鈣組分和40wt/wt％羥磷灰石組成，其中硫酸鈣組分由59.6wt/wt％半水合硫酸鈣和0.4wt/wt％二水合硫酸鈣組成，并且液體組分包含100-250mg環(huán)狀糖肽(例如萬古霉素)/ml溶液。添加劑可通過添加到骨替代物粉末或水性液體中而包含在組合物中，其可包括一種或多種治療劑，例如抗微生物藥物、化學治療劑、維生素、激素、細胞抑制劑、二磷酸鹽、生長因子、蛋白質(zhì)、肽、骨髓抽出物、富含血小板的血漿和脫礦骨。適于包含在組合物中的抗生素是屬于含糖苷抗生素類的組、含青霉素類的組、含頭孢菌素類的組、含抗真菌藥的組中的一種或多種，或者所述抗生素試劑是利福平或克林霉素。優(yōu)選地，抗生素試劑選自由以下組成的列表：慶大霉素、妥布霉素、頭孢唑啉、利福平、克林霉素、制霉菌素、灰黃霉素、兩性霉素B、酮康唑和咪康唑。適合包含在組合物中的其他添加劑(組合物組分)包括一種或多種粘度改性劑。本發(fā)明包括使用非核糖體環(huán)狀糖肽來增強組合物對應力諸如拉力、剪力和扭力的抵抗力，其中所述組合物包含粉末組分和水性液態(tài)組分，還包含環(huán)狀糖肽組分；其中所述粉末組分包含硫酸鈣組分和磷酸鈣組分；并且其中所述粉末組分和水性液態(tài)組分和環(huán)狀糖肽組分混合后形成能夠在體內(nèi)硬化的可注射組合物。環(huán)狀糖肽組分可作為干組分提供，或者可作為水性液態(tài)組分的組分提供。環(huán)糖肽組分可選自萬古霉素、伊瑞霉素、瑞斯托菌素A、替考拉寧、特拉萬星、博萊霉素、雷莫拉寧和decaplanin；更優(yōu)選地選自萬古霉素、伊瑞霉素、瑞斯托菌素A、替考拉寧、特拉萬星。萬古霉素優(yōu)選以萬古霉素鹽酸鹽的形式提供。硫酸鈣組分可包含α-半水合硫酸鈣和另外的促進劑，其中促進劑選自二水合硫酸鈣和氯化鈉。磷酸鈣組分可以是羥磷灰石或可選地磷酸三鈣和磷酸鹽或硬化磷酸鈣。骨替代物粉末可基本上由50wt/wt％至70wt/wt％(例如60wt/wt％)硫酸鈣組分(CSH+CSD)和30wt/wt％至50wt/wt％(例如40wt/wt％)羥磷灰石組成，并且液體組分可包含2-1250mg萬古霉素鹽酸鹽/ml溶液。陶制骨替代物組合物可包含0.1-2ml、0.1-1.9ml、0.1-1.8ml、0.1-1.7ml、0.1-1.6ml、0.1-1.5ml、0.1-1.4ml、0.1-1.3ml、0.1-1.2ml、0.1-1.1ml、0.1-1.0ml、0.1-0.9ml、0.1-0.8ml、0.1-0.7ml、0.1-0.6ml、0.1-0.5ml、0.5-2.0ml、0.6-2.0ml、0.7-2.0ml、0.8-2.0ml、0.9-2.0ml、1.0-2.0ml、1.1-2.0ml或1.2-2.0ml水性液體，更優(yōu)選0.2-0.7ml水性液體每克陶制骨替代物粉末，并且水性液體中還可包含X-射線造影劑(例如碘海醇)。本發(fā)明還提供了固定植入物的方法，包括(或主要由其組成)：a)將主要由磷酸鈣組分(例如羥磷灰石)和/或硫酸鈣和環(huán)狀糖肽組成的干粉與水性液態(tài)組分混合形成可注射或可模制的組合物，其中可注射或可模制組合物中環(huán)狀糖肽的含量為1-600mg/ml組合物；b)將步驟a)所得的組合物插入骨腔；c)在步驟b)中的組合物插入之前或其后將植入物導入骨腔；和d)使所述組合物在體內(nèi)硬化。在一個實施方案中，干粉主要由30-50w/w％的磷酸鈣組分(例如羥磷灰石)和50-70w/w％的硫酸鈣組成。該方法還可以包括在步驟(a)之前，制備適于接納假體的骨腔的步驟，或者從需要關(guān)節(jié)置換翻修術(shù)的哺乳動物移除假體以提供骨腔的步驟。該方法適合對患有肌肉骨骼疾病的哺乳動物例如人、狗、馬或貓實施。粉末組分、環(huán)狀糖肽組分和水性液態(tài)組分以無菌形式提供，適用于需要無菌條件的本發(fā)明治療方法。環(huán)狀糖肽組分可以是環(huán)狀糖肽抗生素，例如選自萬古霉素、伊瑞霉素、瑞斯托菌素A、替考拉寧、特拉萬星、博萊霉素、雷莫拉寧和decaplanin的一種或多種；更優(yōu)選地選自萬古霉素、伊瑞霉素、瑞斯托菌素A、替考拉寧和特拉萬星。所述組合物包含通過混合步驟制備的陶制骨替代物粉末組分和水性液態(tài)及環(huán)狀糖肽組分的組合物。在無菌條件下的混合可以在無菌混合工具中手動進行。在一個實施方案中，然后可將無菌混合工具中的組合物導入一個或多個注射器中，其可用于將組合物導入骨腔中(WO2005/122971)。實施本發(fā)明時，發(fā)現(xiàn)初始混合時間15秒至1分鐘例如約30秒是適合的。將粉末組分、環(huán)狀糖肽組分和水性液體混合后，形成開始硬化的組合物。本文中，術(shù)語“硬化”和“硬化的”用于指當水凝接合劑例如骨替代物粉末與水反應時凝固反應的發(fā)生。當陶制骨替代物組合物包含HA時，優(yōu)選使用已經(jīng)歷另外加熱步驟的HA，如上(PCT/EP2014/053330)所述，以確保含環(huán)狀糖肽的混合組合物的硬化?？蛇x擇地，在第一步驟中將含HA的陶制骨替代物組合物的粉末組分與液體組分混合形成糊劑，然后在第二步驟中添加環(huán)狀糖肽組分并與糊劑混合，如WO2011098438A1所述，以確保糊劑的硬化。陶制骨替代物組合物允許足夠的工作時間用于在組合物硬化之前遞送組合物。可以通過任何合適的遞送工具例如使用注射器將陶制骨替代物組合物導入骨腔中。用于遞送組合物的注射器設置有具有合適規(guī)格例如16G的套管。當使用16G套管注射器時，遞送陶制骨替代物組合物的工作時間約為6分鐘。該時間窗口留下足夠?qū)挼臅r間跨度用于混合和注射骨替代物組合物，并且允許在手術(shù)期間經(jīng)常發(fā)生的輕微延遲。當在插入植入物之后將陶制骨替代物組合物導入骨腔中時，使用裝載有組合物的注射器可能是特別合適的。將插入的植入物(例如螺釘、銷、釘、線、板、桿以及初次或修復關(guān)節(jié)假體)導入骨腔中，其在此與注射或模制到腔中的陶制骨替代物組合物接觸。由于第一次混合的陶制骨替代物組合物的最終凝固時間為約8至20分鐘，這留下足夠的時間窗口，用于在組合物硬化之前將陶制骨替代物組合物和植入物導入骨腔中。本發(fā)明的組合物及使用該組合物的治療方法可用于治療具有骨折、重置骨骼的哺乳動物以及需要初次關(guān)節(jié)成形術(shù)或關(guān)節(jié)置換翻修術(shù)的哺乳動物。負重的初次或修復假體可用于髖關(guān)節(jié)、膝關(guān)節(jié)、肩關(guān)節(jié)、指關(guān)節(jié)、踝關(guān)節(jié)、腕關(guān)節(jié)和肘關(guān)節(jié)。關(guān)節(jié)置換翻修術(shù)包括替換失效的假體，其中失效的假體可以是初次假體或可以是修復假體。治療方法可包括產(chǎn)生用于接受骨替代物組合物和假體的骨腔的另外步驟，或者可包括去除預先存在的失效的假體的附加步驟。使用本發(fā)明組合物的治療方法可用于治療具有肌肉骨骼疾病的人、狗、貓或馬，特別是人。骨腔的制備可能需要去除損傷的骨，并且在去除預先存在的假體的情況下，這可包括去除PMMA接合劑以提供適于接受并固定假體的骨腔。適合地，直的盒(straightbox)或偏移鑿(offsetchisel)可以用于確定要植入假體的骨管的方向，并且清除管以接受起動擴孔器(starterreamer)。然后可以使用T形手柄上的單個起動擴孔器來開始進入骨管的遠端部分的開口，其中擴孔器被導入到適合于術(shù)前X射線模板化假體尺寸的水平。然后可以使用一個或多個增大尺寸的拉刀(broach)擴大骨管的近端部分，直到達到模板植入物尺寸，其被選擇以確保待植入的假體緊密配合。骨替代物組合物被導入到腔中之后，可通過壓配合將假體柄推進到位。導入骨腔中的初次假體或修復假體通常具有柄或突出的栓，其可以是有凹槽的和/或錐形的，并且選擇其尺寸以被推進到腔中時實現(xiàn)緊密配合。所選擇的假體本身通常是未涂覆的假體，并且通常具有由金屬例如鈦合金或鈷-鉻-鉬(CoCrMo)合金制成的柄。假體可具有拋光的表面，或者可選擇地至少部分表面是涂覆的，例如多孔鈦表面涂層可以通過多孔等離子體噴涂實現(xiàn)。如果假體是至少部分涂覆的，其他適合的涂覆材料包括磷酸鈣涂層例如羥磷灰石涂層。通常，假體的遠側(cè)柄區(qū)域具有拋光的表面。髖假體可以是模塊化假體或單體假體，并且可具有長柄或插入股骨骨腔中標準長度的柄。膝假體包括脛骨植入物，其具有模塊化柄和任選地插入切除的脛骨表面相應腔中的栓(peg)，用于將模塊化脛骨托固定到脛骨上。全膝假體還包括安裝在股骨上的髕骨部分，其可以通過從髕骨部分延伸的插入股骨腔中的栓固定到股骨。肩假體包括肱骨植入物，其具有插入到切除的肱骨表面相應腔中并且用于將模塊化肱骨托固定到肱骨的模塊化柄。相應的關(guān)節(jié)盂組件安裝在關(guān)節(jié)盂骨上，其可以通過從關(guān)節(jié)盂組件延伸并插入關(guān)節(jié)盂腔中的栓固定。用于骨折手術(shù)的假體例如螺釘、銷、釘、線、板或桿通常用鋼、鈦合金或鈷合金制成。治療骨折的哺乳動物或需要初次關(guān)節(jié)成形術(shù)或關(guān)節(jié)置換翻修術(shù)的哺乳動物需要解決由微動引起的問題，近期的研究已經(jīng)證明其是造成假體失效的主要原因(WazenRM1etal(2013))。植入物和骨之間界面的微動是與宿主骨接觸的植入物的量、與植入物直接接觸骨的強度和兩個表面之間摩擦系數(shù)的函數(shù)。在低截值水平以上，重復微動可抑制骨生長，并導致植入物隨后的松動。以螺釘、銷、線、板或釘形式將植入物有效固定在骨材料特別是骨松質(zhì)材料中需要在骨腔內(nèi)緊密配合，并且還依賴于所插入植入物的整個表面與骨腔壁之間的直接接觸。導入細胞樣結(jié)構(gòu)骨松質(zhì)的空腔不總是具有非常一致地允許骨材料和植入物之間實現(xiàn)直接接觸的壁。手術(shù)期間植入物固定不良可導致植入物立即松動或脫位，而固定不良是微動的原因，其將影響骨愈合并最終導致植入物松動和移位。本發(fā)明的可注射組合物具有流體性質(zhì)，使其能夠填充植入物表面和植入物插入其中的骨腔壁之間的空間。組合物在混合后約20分鐘內(nèi)硬化，使得外科醫(yī)生插入的每個植入物在手術(shù)過程中“實時”牢固地固定，并且可抵抗在排列骨折骨時發(fā)生的拉拔力(包括拉力和/或剪力)。一種或多種插入植入物增加的固定強度還可最小化手術(shù)后幾天內(nèi)抑制有效骨再生長的微動的風險。初次或修復假體柄的機械固定在大多數(shù)情況下依賴于朝向錐形柄尖端定位的短區(qū)域，其尺寸可確保與其插入其中的骨腔精確緊密配合。多達80％至90％的假體表面在植入后通常不立即與骨腔壁直接接觸，其被多達1mm或更大的間隙分開。微動的風險將降低，如果假體柄的較大部分能夠與骨腔壁緊密接觸。此處，本發(fā)明的可注射或可模制組合物將在硬化之前填充假體柄和骨腔之間的多達1mm或更大的間隙，并且在硬化之后將提供骨腔中全長錐形柄增強的固定。通過將組合物導入骨腔中類似地可增強修復假體的固定，其中修復假體和骨腔之間的直接接觸限于朝向假體柄的端部的短區(qū)域。關(guān)節(jié)置換翻修術(shù)需要移除初次或修復假體及任何剩余的PMMA型接合劑，并制備延伸的骨腔以接納修復假體，其通常會導致骨腔上部的裂縫和不規(guī)則。本發(fā)明的組合物由于其在硬化之前可填充這些裂縫和不規(guī)則的能力，可確保以增強拉拔力即時固定修復假體。實施例本發(fā)明提供了含環(huán)狀糖肽的可注射和可硬化硫酸鈣/羥磷灰石骨替代物組合物，可增強植入物在人工骨松質(zhì)組織中的固定，與單獨的骨替代物組合物相比具有更大的拔出強度。研究中使用的材料如下：粉末實施例中所用的合成半水合硫酸鈣(CSH)和二水合物硫酸鈣(CSD)的純度可滿足專著“二水合硫酸鈣”01/2002：0982，歐洲藥典和“硫酸鈣官方專著”美國藥典25/國家處方集20中所述的測試要求。CSH的粒度分布為0.1-80μm。促進劑CSD的粒度分布為0.1μm到100μm。實施例中使用的羥磷灰石(HA)粉末是通過沉淀反應、高溫(1275±50℃，4h)熱壓結(jié)并微粒化制備的。與環(huán)狀糖肽組分組合使用的粉末組分中的HA另外在500℃下進一步熱處理2小時(PCT/EP2014/053330)。HA粉末符合ASTMF1185-03“手術(shù)植入物羥磷灰石組合物的標準規(guī)范”和ISO13779-1“手術(shù)植入物-羥磷灰石-第1部分：陶制羥磷灰石”規(guī)范。HA的粒度分布為0.1μm至35μm，比表面積<10m2/g液相實施例中，將碘海醇溶液或鹽水用作液相。所用的碘海醇溶液包含注射用水(WFI)、碘海醇、緩沖劑氨丁三醇(Tris：三(羥甲基)氨基甲烷)和螯合劑乙二胺四乙酸鈣二鈉(EDTA鈣)。碘海醇溶液符合美國藥典中碘海醇注射液的要求。此外，碘海醇、氨丁三醇和乙二胺四乙酸鈣鈉的含量符合標準中的每個具體要求。鹽溶液包含注射用水(WFI)中0.9wt％NaCl。所用鹽水滿足PhEP0193氯化鈉中所述的要求。使用含碘海醇或類似X射線劑的溶液作為液相的原因是為了增加骨替代材料的射線不透性(見WO03/053488)。測試用于增強植入物固定的其他有機化合物：實施例中，已經(jīng)測試了兩種化合物的添加，硫酸慶大霉素和萬古霉素鹽酸鹽。硫酸慶大霉素[CAS1405-41-0]已知作為來自放線菌的廣譜氨基糖苷類抗生素，可用于治療由慶大霉素敏感的生物體特別是革蘭氏陰性生物體引起的多種感染。硫酸慶大霉素符合PhEPGentamicinSulfateRS中所述要求。萬古霉素鹽酸鹽[CAS1404-93-9]被認為是用于抗革蘭氏陽性菌包括金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、α和β溶血性鏈球菌、D組鏈球菌、棒桿菌和梭菌的環(huán)狀糖肽抗生素。萬古霉素鹽酸鹽符合PhEP萬古霉素鹽酸鹽中所述的要求。一般屬性通過HA和CSH組合，在合成骨替代物再吸收速率和骨內(nèi)生長速率之間實現(xiàn)了最佳平衡。CSH在凝固過程中轉(zhuǎn)換為CSD。CSD作為HA的可再吸收載體。HA具有緩慢的再吸收速率、高骨傳導性、促進骨生長，并為新形成的骨提供長期結(jié)構(gòu)支持。實施例1可注射雙相陶制骨替代物組合物的制備本實施例中，制備了3種不同類型的可硬化陶制骨替代物材料。所有3種樣品由59.6wt％的α-CSH、40.0wt％的HA、0.4wt％的CSD組成，并具有相同的液體粉末比(L/P＝0.43mL/g)，但是液相及所加入化合物的類型不同，見下表。樣本名稱液相加入的化合物CSH/HA碘海醇(180mgI/mL)-CSH/HA+慶大霉素鹽水硫酸慶大霉素CSH/HA+萬古霉素碘海醇(180mgI/mL)萬古霉素鹽酸鹽CSH/HA將11.6g陶制骨替代物與5.0mL含碘海醇(180mgI/mL)的液相混合，即得到0.43mL/g的L/P比。使用特別設計的混合及注射裝置(WO2005/122971)混合30秒。所得糊劑可以用16G針頭注射長達5分鐘，并在5分鐘和7分鐘之間手動模制。糊劑的初始凝固時間為8分鐘，最終凝固時間為15分鐘(用Gillmore針測定；ASTMC266)。最高凝固溫度為38℃(ASTMF451)。具有8mm高度和4mm直徑棒的抗?jié)駢簭姸?在林格溶液中24小時后)為6-11MPa。CSH/HA+慶大霉素將9.3g陶制骨替代物與4.0mL含有鹽水和200mg預溶解硫酸慶大霉素(相當于30mg慶大霉素/mL溶液)的液相混合；得到濃度為17.5mg慶大霉素/mL的糊劑。L/P比為0.43mL/g。使用特別設計的混合及注射裝置(WO2005/122971)混合30秒。所得糊劑可以用16G針頭注射長達6分鐘。糊劑的初始凝固時間為8分鐘，最終凝固時間為10分鐘(用Gillmore針測定；ASTMC266)。最高凝固溫度為37℃(ASTMF451)。具有8mm高度和4mm直徑棒的抗?jié)駢簭姸?在林格溶液中24小時后)為9-12MPa。CSH/HA+萬古霉素將9.3g陶制骨替代物與4.0mL含碘海醇溶液(180mgI/mL)和預溶解的萬古霉素鹽酸鹽(相當于125mg萬古霉素/mL溶液)的液相混合；得到濃度為66mg萬古霉素/mL的糊劑。L/P比為0.43mL/g。使用特別設計的混合及注射裝置(WO2005/122971)混合30秒。所得糊劑可以用16G針頭注射長達7分鐘，并在6分鐘和8分鐘之間手動模制。糊劑的初始凝固時間為7分鐘，最終凝固時間為12分鐘(用Gillmore針測定；ASTMC266)。最高凝固溫度為39℃(ASTMF451)。具有8mm高度和4mm直徑棒的抗?jié)駢簭姸?在林格溶液中24小時后)為4-7MPa。所有3種類型的CSH/HA骨替代物具有類似的性能，其中所有樣品的初始抗?jié)駢簭姸扰c骨松質(zhì)的抗壓強度(1-20MPa)在相同范圍內(nèi)。實施例2使用模型系統(tǒng)證明包含萬古霉素的可注射雙相陶制骨替代物組合物可增強植入物固定根據(jù)實施例1制備的可注射組合物對植入物固定的影響在模型系統(tǒng)中通過確定插入已使用可注射組合物增強的骨松質(zhì)模型中螺釘?shù)陌纬隽涂古ち泶_定。骨松質(zhì)模型包括由(Sawbones.com)提供的剛性開孔泡沫塊(產(chǎn)品編號No.1522-507)。泡沫塊具有超過95％開放的孔結(jié)構(gòu)，開孔尺寸為1.5-2.5mm，類似于人松質(zhì)骨，使其適合于動態(tài)測試或接合劑注射。泡沫塊的密度為0.12g/cc、抗壓強度為0.28MPa、壓縮模量為18.6MPa，其順序相對較低，其使用是因為可最接近地模擬骨質(zhì)疏松骨，其中植入物的固定特別困難。實驗裝置骨模型包括從泡沫塊切割的81cm3的塊(圖1A)和2mm厚的有機玻璃板，可模擬骨的致密皮質(zhì)層。板通過穿過板中心鉆出的單個孔穿孔，可允許螺釘穿過板但不附接到板(圖1B)。還使用3.5mm鉆頭在塊中預鉆了2cm深的孔。使用螺紋導絲(具有2.0×150mm尺寸)預定位在泡沫塊中的正確位置，用于隨后精確放置空心螺釘。螺釘，由鋼制成的局部帶螺紋的5.0×60mm長螺釘和導絲(AsnisTMIII)由Stryker(Footandanklefixation.com)提供。實驗裝置中泡沫塊中插入螺釘?shù)奈恢迷趫D1C中示出。實驗步驟如實施例1所述制備和混合兩相陶制骨替代物組合物(“CSH/HA”，“CSH/HA+慶大霉素”或“CSH/萬古霉素”)。將一定體積的混合組合物(～4mL)注射進入泡沫塊中預鉆的孔，所述泡沫塊安裝在有機玻璃板下。組合物組分開始混合后3分鐘，使用16G套管注射器將組合物注入所述塊中。然后在組合物組分開始混合后4分鐘內(nèi)將導絲插入泡沫塊中(與注射組合物相同的通道)，隨后放置螺釘(圖2)。使具有插入螺釘?shù)慕M合物硬化，相當于組合物組分開始混合后20分鐘。將其中插入螺釘?shù)呐菽瓑K在濕條件下保持在37℃，通過每塊施加300mL去離子水模擬體內(nèi)條件。對于4種測試的固定條件(+/-用3種測試的骨替代物組合物增強)的每一種，測試總共10個插入螺釘(插入泡沫塊中)的拔出力。使用配備由MTSSystemsCorporation，14000TechnologyDrive，EdenPrairie，MNUSA55344提供的500N測壓傳感器的“MTSInsight5單柱材料測試工作站”測定拔出力。該設備設計用于單軸拉力測試。通過以預設的拉出速度5mm/min使其經(jīng)受拉力(圖4)來測試插入螺釘?shù)妮S向固定強度，如圖3所示。還通過誘導剪力和扭力評價了插入螺釘?shù)墓潭?，如圖7所示?？墒褂门ぞ仳?qū)動器通過從增強的泡沫旋出植入物測定扭力。也可以在拉出試驗中通過與誘導拔出力的方向不同的角度(例如10-60°)放置植入物以測定剪力。實驗結(jié)果I.插入模型泡沫塊中螺釘?shù)陌纬隽η€取出插入模型泡沫塊中的螺釘所需的拔出力以牛頓(N)為單位測定，并記錄為距離(毫米)的函數(shù)。移除螺桿所需的拉力曲線顯示出當螺釘保持在模型泡沫塊內(nèi)時拉力初始增加，隨后一旦螺桿從所述樣本脫離則拉力下降(圖5A)。II.用骨替代物組合物增強插入的螺釘與不含骨替代物組合物情況下插入螺釘?shù)摹皩φ諛悠贰毕啾?，用骨替代物組合物增強螺釘插入在所有情況下可提高從模型泡沫塊中提升插入的螺釘所需的拉力(圖5B對比圖5A，及圖6)。向陶制骨替代物組合物中加入慶大霉素(“CSH/HA+慶大霉素”)進一步略微提高了從模型泡沫塊中提升插入的螺釘所需的拉力(圖5C對比圖5A)。經(jīng)比較，使用萬古霉素補充的陶制骨替代物組合物，與任意其他測試組合物相比在濕條件下的拉出力顯著提高(圖5D和圖6)。此外，圖5D中的拉力曲線顯示提升插入螺釘所需的力在較大距離上保持高水平。因此，當用萬古霉素補充的陶制骨替代物組合物增強插入螺釘時，螺釘在失去其拉力之前可以升高的距離大于單獨使用陶制骨替代物組合物的情況。所有實驗設置的平均值(±SD)概括于圖6(n＝10)。III.插入模型泡沫塊中的螺釘對剪力和扭力的抵抗力與使用任意其他測試組合物相比，還檢測到使用萬古霉素補充的陶制骨替代物組合物可產(chǎn)生對保持在濕條件下的模型泡沫塊中除去插入螺釘所需的剪力和扭力的顯著更高的抵抗力。對于剪力測定，將螺釘以相對于誘導拉出力方向10-60°的角度插入模型泡沫塊中。在此種情況下，從增強的泡沫中移除植入物所需的力包括傳遞到增強區(qū)的拉力和剪力的組合。此外，通過使用扭矩驅(qū)動器將植入物從從增強的泡沫塊中旋出評估了對扭力的抵抗力。實施例3含萬古霉素的可注射雙相陶制骨替代物組合物的凝固性能以下測試顯示，在33-132mg萬古霉素/mL糊劑的濃度范圍內(nèi)可注射陶制骨替代物的萬古霉素含量對其凝固性能的影響。這些測試中，陶制骨替代物包含59.6％CSH、40％HA和0.4％CSD，L/P比為0.43mL/g。研究了3種不同類型的液相。凝固時間用Gillmore針，ASTMC266測定。結(jié)果見表1。表1：包含不同量萬古霉素的陶制骨替代物的凝固性質(zhì)所述測試的結(jié)果表明，在33-132mg/mL糊劑范圍的萬古霉素濃度都獲得可接受的可注射骨替代物的凝固性能。參考文獻Liskampetal2008ModernSupramolecularChemistry:StrategiesforMacrocycleSynthesis.EditedbyDiederich,PeterJ.Stang,andRikR.TykwinskiWILEY-VCHVerlagGmbH&Co.KGaA,WeinheimProcterP.,HessB.,MurphyM.,PhelpsR.C.,MilesA.W.,GheduzziS.(2008)In-vitrostudyofscrewfixationinaugmentedcancellousbonemodels.54thAnnualMeetingoftheOrthopaedicResearchSociety,PosterNr.1720.Pijls,BJ.,Valstar,ER.,Nouta,K-A.,Plevier,JWM.,Fiocca,M.,Middeldorp,S.,andRGHHNelissen(2012)Earlymigrationoftibialcomponentsisassociatedwithlaterrevision.ActaOrthopaedica83(6):614-624.Weiss,RJ.,Stark,A.,J.,(2011)Amodularcementlessstemvs.cementedlong-stemprosthesesinrevisionsurgeryofthehip.ActaOrthopaedica82(2):136-142.WazenRM1,CurreyJA,GuoH,BrunskiJB,HelmsJA,NanciA.(2013)Micromotion-inducedstrainfieldsinfluenceearlystagesofrepairatbone-implantinterfaces.ActaBiomater.9(5):6663-74.ZampelisV.,M.L.Lidgren,H.Isaksson,I.Atroshi,andJ-SWang(2013)TheeffectofabiphasicinjectablebonesubstituteontheinterfacestrengthinarabbitkneeprosthesismodelJOrthopSurgRes.8:25.當前第1頁1 2 3