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一種豬瘟口服弱毒凍干疫苗、其制備方法及凍干保護劑與流程

文檔序號:12540096閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種豬瘟口服弱毒凍干疫苗,其特征在于,其包括抗原豬瘟病毒、黏膜佐劑和凍干保護劑;其中,所述凍干保護劑包括:1~3wt.%明膠,1~3wt.%甘氨酸,余量為水,所述黏膜佐劑為大腸桿菌熱敏性腸毒素突變體蛋白。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的豬瘟口服弱毒凍干疫苗,其特征在于,所述黏膜佐劑為大腸桿菌熱敏性腸毒素突變體LTR72/G192蛋白。

3.一種如權(quán)利要求1所述的豬瘟口服弱毒凍干疫苗的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:

1)獲得豬瘟病毒

設(shè)計并合成豬瘟病毒的PCR常規(guī)檢測引物,增殖豬瘟病毒,分離并測定豬瘟病毒的半數(shù)組織培養(yǎng)感染劑量TCID50;

2)配制凍干保護劑和豬瘟口服弱毒疫苗

按1~3wt.%明膠,2~5wt.%甘氨酸,余量為水配制成凍干保護劑,除菌;然后將凍干保護劑與豬瘟病毒、黏膜佐劑混合配制成豬瘟口服弱毒疫苗,并分裝;其中,豬瘟病毒和黏膜佐劑的體積比為25:2~5:6,凍干保護劑中的明膠和甘氨酸總質(zhì)量與疫苗總體積的比值為0.02~0.04g/ml;

3)凍干豬瘟口服弱毒疫苗

將步驟2)配制好的樣品于-80~-40℃進行預(yù)凍,預(yù)凍時間為24~48h,再進行凍干,獲得由豬瘟病毒、黏膜佐劑和凍干保護劑組成的豬瘟口服弱毒凍干疫苗。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的豬瘟口服弱毒凍干疫苗的制備方法,其特征在于,步驟1)中,利用PK15細胞增殖豬瘟病毒。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的豬瘟口服弱毒凍干疫苗的制備方法,其特征在于,步驟1)中,所述豬瘟病毒的半數(shù)組織培養(yǎng)感染劑量為105~106TCID50/0.1ml。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的豬瘟口服弱毒凍干疫苗的制備方法,其特征在于,步驟2)中配制的豬瘟口服弱毒疫苗中黏膜佐劑的濃度為4~6μg/0.1ml。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的豬瘟口服弱毒凍干疫苗的制備方法,其特征在于,步驟2)中配制的豬瘟口服弱毒疫苗中黏膜佐劑的濃度為400~600μg/0.1ml。

8.一種用于豬瘟口服弱毒凍干疫苗的凍干保護劑,其特征在于,其包括:1~3wt.%明膠,1~3wt.%甘氨酸,余量為水。

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