專利名稱：：巰基氮雜環(huán)烷酰胺醇取代的培南衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及巰基氮雜環(huán)烷酰胺醇取代的培南衍生物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯或其異構(gòu)體，這些化合物的制備方法，含有這些化合物的藥物組合物，以及這些化合物在用于制備治療和/或預(yù)防感染性疾病的藥物中的用途。2
背景技術(shù)：
：培南類抗菌素是七十年代發(fā)展起來(lái)的一類P-內(nèi)酰胺類抗生素。因其抗菌譜廣，抗菌活性強(qiáng)，并對(duì)卩-內(nèi)酰胺酶穩(wěn)定，而備受關(guān)注。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是，青霉烷母核1位的硫被碳取代，2位具有雙鍵，復(fù)合了青霉素的五元環(huán)和頭孢菌素的共軛雙鍵的結(jié)構(gòu)。目前上市的該類藥品有亞胺培南、帕尼培南、美羅培南、厄他培南、比阿培南、多尼培南等。亞胺培南是由Merck開發(fā)的，單獨(dú)用藥時(shí)，在體內(nèi)易受腎脫氫肽酶(DHP-I)的降解而失去抗菌活性，需和DHP-I抑制劑西司他丁聯(lián)用，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌有較好的抗菌活性；帕尼培南是第二個(gè)上市的培南類抗生素，對(duì)DHP-I亦不穩(wěn)定，需聯(lián)用倍他米??；美羅培南是第一個(gè)可單獨(dú)用藥的1|3-甲基培南類抗生素，對(duì)革蘭氏陰性菌具有較好的抗菌活性；厄他培南鈉是由Merck開發(fā)的長(zhǎng)效注射用培南類抗生素，對(duì)青霉素結(jié)合蛋白(PBP-2和PBP-3)具有高親和力，抗革蘭氏陽(yáng)性菌的活性略低于亞胺培南，抗革蘭陰性菌的活性強(qiáng)于亞胺培南；比阿培南是由惠氏開發(fā)的1P-甲基培南類抗生素，對(duì)P-內(nèi)酰胺酶穩(wěn)定，對(duì)革蘭陽(yáng)性菌的活性與亞胺培南相似，對(duì)革蘭陰性菌的活性強(qiáng)于亞胺培南；多尼培南對(duì)革蘭陽(yáng)性菌的抑菌作用高于美羅培南，對(duì)革蘭陰性菌的作用優(yōu)于亞胺培南，對(duì)亞胺培南耐藥菌也有效，對(duì)含絲氨酸位點(diǎn)的DHP-I穩(wěn)定，主要用于泌尿系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)嚴(yán)重感染。培南類抗生素由于臨床應(yīng)用的增加，其細(xì)菌耐藥性不斷增加，且目前上市的培南類抗生素臨床上只能注射給藥，不能滿足臨床需要。因此，急需研發(fā)具有較好的抗菌活性，并且具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性和DHP-I穩(wěn)定性的培南類抗生素。3
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明人對(duì)培南類抗生素進(jìn)行大量的研究發(fā)現(xiàn)，與以往的抗生素相比，本發(fā)明化合物抗菌活性更強(qiáng)，用于治療和/或預(yù)防感染性疾病十分有效。本發(fā)明提供了通式(I)所示的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯或其異構(gòu)體<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中，W代表氫原子或低級(jí)烷基；W代表羧基，一COOW或易水解的酯，所述的RJ代表羧基保護(hù)基;R3、R4、RS分別獨(dú)立的代表氫原子或低級(jí)烷基；RM戈表氫原子或羥基保護(hù)基；n代表O、1或2。優(yōu)選的化合物為其中，R'代表氫原子，甲基或乙基；f代表羧基，一COO^或易水解的酯，所述的W代表羧基保護(hù)基;R3、R4、RS分別獨(dú)立的代表氫原子，甲基，乙基或丙基；R6代表氫原子或羥基保護(hù)基；n代表0或1。進(jìn)一步優(yōu)選的化合物為其中，111代表氫原子或甲基；W代表羧基，一COOI^或易水解的酯，所述的W代表羧基保護(hù)基;R3、R4、RS分別獨(dú)立的代表氫原子，甲基或乙基；RS代表氫原子或羥基保護(hù)基；n代表0或1。更進(jìn)一步優(yōu)選的化合物為其中，W代表甲基；W代表羧基，一COOW或易水解的酯，所述的W代表羧基保護(hù)基;R3、R4、RS分別獨(dú)立的代表氫原子或甲基；RS代表氫原子或羥基保護(hù)基；n代表0或1。表l本發(fā)明的部分化合物<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>更進(jìn)一步優(yōu)選的化合物化學(xué)名稱(4i,5&65)-3-[l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基]-氮雜環(huán)丁烷-3-基]硫基-6-[(li)-l-羥乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸，簡(jiǎn)稱化合物1，結(jié)構(gòu)式如下化學(xué)名稱(4凡5&65)-3-[(35)-l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基]-吡咯烷-3-基]硫基-6-[(liH-羥乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸，簡(jiǎn)稱化合物2，結(jié)構(gòu)式如下本發(fā)明所述"低級(jí)垸基"為CL6直鏈或支鏈的烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、新戊基、己基等。本發(fā)明所述"羧基保護(hù)基"指常規(guī)用于取代羧酸酸性質(zhì)子的保護(hù)基團(tuán)。此基團(tuán)的實(shí)例包括甲基、甲氧基甲基、甲硫甲基、四氫吡喃基、四氫呋喃基、甲氧乙基甲基、烯丙基、節(jié)氧甲基、苯甲酰甲基、對(duì)溴苯甲酰甲基、a-甲基苯甲酰甲基、對(duì)甲氧基苯甲酰甲基、二?；谆?、N-鄰苯二甲酰亞胺基甲基、乙基、2,2,2-三氯乙基、2-鹵代乙基、①-氯代烷基、2-(三甲基甲硅烷基)乙基、2-甲硫基乙基、2-(對(duì)硝基苯硫基)乙基、2-(對(duì)甲苯硫基)乙基、l-甲基-l-苯乙基、叔丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、二(鄰硝基苯基)甲基、9-芴基甲基、2-(9,10-二氧代)芴基甲基、5-二苯硫基、芐基、2,4,6-三甲基芐基、對(duì)溴芐基、鄰硝基芐基、對(duì)硝基芐基、對(duì)甲氧基芐基、胡椒基、4-吡啶甲基、三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、異丙基二甲基甲硅烷基、二苯基甲基、苯基二甲基甲硅烷基、S-叔丁基、S-苯基、S-2-吡據(jù)基、N-羥基哌啶基、N-琥珀酰亞胺基、N-鄰苯二甲酰亞胺基、N-苯并三唑基、O-?；?、2,4-二硝基苯硫基、2-烷基-l,3-噁唑啉、4-烷基-5-氧代-l,3-噁哇烷、5-垸基-4-氧代-l,3-二噁烷、三乙基錫垸基、三正丁基錫烷基；N,N'-二異丙基酰肼等。本發(fā)明所述"羥基保護(hù)基"選自?；Ⅴヮ?、醚類等。?；貏e選自低級(jí)烷酰基，如甲酰基、乙?；?、異丁?；?、苯甲酰基甲?；⒙纫阴；?、二氯乙?；?、三氯乙?；⑷阴；?、甲氧基乙?；⒈窖趸阴；⒈交阴；?、對(duì)苯基乙?；⒍交阴；?、4-戊烯?；?-氧代戊?；⑿挛祯；?、丁烯?；午牾；?、苯甲?；?、對(duì)苯基苯甲酰基等；酯類即垸氧基羰基，如甲氧基羰基、乙氧基羰基、異丁氧基羰基、甲氧基甲基羰基、9-芴基甲氧基羰基、乙烯氧基羰基、烯丙氧基羰基、對(duì)硝基苯氧基羰基、芐氧基羰基、對(duì)甲氧基芐氧基羰基、對(duì)硝基芐氧基羰基、磺酰基、甲磺?；⒈交酋；?、甲苯磺酰基等；醚類保護(hù)基，如甲基、取代甲基，優(yōu)選為低級(jí)烷氧基甲基、特別是甲氧基甲基(MOM)、甲硫基甲基、對(duì)硝基芐氧基甲基、愈創(chuàng)木酚甲基，低級(jí)垸氧基-低級(jí)烷氧基甲基，特別優(yōu)選為2-甲氧基乙氧基甲基(MEM)、2,2,2-三氟乙氧基甲基、四氫吡喃類、3-溴四氫吡喃類，取代乙基，如1-乙氧基乙基、l-(2-氯乙氧基)乙基、l-[2-(三甲基甲硅垸基)乙氧基]乙基，取代苯基醚類，如對(duì)氯苯基、對(duì)甲氧基苯基、對(duì)硝基苯基等，甲硅烷基醚類，如三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅垸基、三異丙基甲硅垸基、二甲基異丙基甲硅烷基等。本發(fā)明還提供了上述化合物的制備方法，但不僅限于以下方法，反應(yīng)方程式如下AcS式5化合物反應(yīng)步驟步驟l式l化合物的制備于干燥的反應(yīng)瓶中，加入原料1，二氯甲烷，然后滴加三乙胺，攪拌溶解后，加氯乙酰氯的二氯甲垸溶液，攪拌反應(yīng)，反應(yīng)畢，停止反應(yīng)，過濾除掉固體，濾液分別用稀堿液、稀酸液、水洗滌，干燥后減壓濃縮，得式1化合物。步驟2式2化合物的制備于干燥反應(yīng)瓶中將式1化合物溶于干燥DMF(二甲基甲酰胺)中，然后加入原料2，加畢，低溫加入氫化鈉，保溫反應(yīng)，然后升溫?cái)嚢璺磻?yīng)，停止反應(yīng)，冷至室溫后加入乙酸乙酯和水萃取，水層用乙酸乙酯提取兩次，合并有機(jī)層，用飽和的NaCl水溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉7干燥，減壓回收溶劑，得式2化合物。步驟3式3化合物的制備于干燥的反應(yīng)瓶中加入式2化合物，用四氫呋喃溶解，加入甲醇鈉/甲醇溶液，升溫，攪拌反應(yīng)，分出有機(jī)相，經(jīng)水洗、干燥、濃縮，剩余物用乙酸乙酯-乙醇重結(jié)晶，得式3化合物。步驟4式4化合物的制備于干燥反應(yīng)瓶中，加入原料3的乙腈溶液冷卻，加入二異丙基乙胺和式3化合物的乙腈溶液，低溫?cái)嚢?，反?yīng)完畢后，加乙酸乙酯稀釋，依次用水、飽和鹽水洗，有機(jī)層干燥、濃縮，得式4化合物。步驟5式5化合物的制備將式4化合物溶于THF和水的混合液中，加入鈀-炭(Pd-C)，升溫氫壓下攪拌反應(yīng)，濾除鈀炭，濾液中加入THF(四氫呋喃)，分層，收集水層，再向THF中加入水溶液，靜置，分出水層，重復(fù)操作，水相合并，低溫慢慢滴入乙醇，降溫?cái)嚢?，過濾，濾餅用水-乙醇重結(jié)晶，得白色晶體，即式5化合物。以上反應(yīng)方程式中的R1、R3、R4、R5、R6、R7、n如前文所述。本發(fā)明上述任一化合物藥學(xué)上可接受的鹽包括乙酸鹽、甲磺酸鹽、馬來(lái)酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、富馬酸鹽，鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽，鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽、鋅鹽；優(yōu)選甲磺酸鹽、鹽酸鹽和鈉鹽。本發(fā)明要求保護(hù)的化合物易水解的酯，包括垸酰氧垸基酯，例如乙酰氧甲酯、丙酰氧甲酯、丁酰氧甲酯、異丙基甲酰氧甲酯、叔丁基甲酰氧甲酯、新戊基甲酰氧甲酯、異丁基甲酰氧甲酯、新戊乙酰氧甲酯、辛酰氧甲酯、癸酰氧甲酯等；垸氧羰氧基烷基酯，例如甲氧基甲酰氧甲酯、乙氧基甲酰氧甲酯、異丙氧基甲酰氧-l-乙酯、己氧基甲酰氧-l-乙酯、辛氧基甲酰氧-l-乙酯、癸氧基甲酰氧-l-乙酯、十二垸氧基甲酰氧-卜乙酯等；垸氧基甲酯，例如甲氧甲酯、l-異丙氧甲酯等；烷酰氨基甲酯，例如甲酰氨基甲酯、乙酰氨基甲酯等；環(huán)烷酰氧烷基酯，例如環(huán)己垸基甲酰氧甲酯、環(huán)己垸基甲酰氧-l-乙酯、l-甲基-環(huán)己垸基甲酰氧-l-乙酯、4-甲基-環(huán)己垸基甲酰氧甲酯等；環(huán)垸氧基酰氧烷基酯，例如環(huán)戊烷氧基甲酰氧-l-乙酯、環(huán)己垸氧基甲酰氧-1-乙酯等;(5-甲基-2-氧代-1,3-間二氧雜環(huán)戊烯-4-萄甲基酯，2-[(2-甲基丙氧基滯基]-2-戊烯酯等。優(yōu)選為新戊基甲酰氧甲酯、丙酰氧甲基酯、丁酰氧甲基酯、叔丁基甲酰氧甲基酯、異丙氧甲酰氧甲基酯、異丙氧甲酰氧-l-乙基酯、環(huán)己垸氧甲酰氧-1-乙基酯、(5-甲基-2-氧代-1，3-間二氧雜環(huán)戊烯-4-基)甲基酯等。本發(fā)明所述異構(gòu)體是指其所有差向立體異構(gòu)、非對(duì)映異構(gòu)。當(dāng)一個(gè)鍵用一個(gè)楔表示時(shí)，這表明在三維上該鍵將從紙面出來(lái)，而當(dāng)一個(gè)鍵是陰影時(shí)，這表明在三維上該鍵將返入紙面中。式(I)化合物具有許多立體中心，例如在4-位上、在5-位上、在6-位上等。本發(fā)明進(jìn)一歩要求保護(hù)包括上面所述的任一化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯或其異構(gòu)體與其它藥用活性成分的藥物組合物，如西司他丁及其鈉鹽、倍他米隆等。本發(fā)明進(jìn)一步要求保護(hù)包括上面所述的任一化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯或其異構(gòu)體與一種或多種藥用載體和/或稀釋劑的藥物組合物，為臨床上或藥學(xué)上可接受的任一劑型，優(yōu)選為口服制劑或注射劑。其中含有生理有效量的通式(I)所示的化合物0.05g5g，可以為0.05g、0.1g、0.125g、0.2g、0.25g、0.3g、0.4g、0.5g、0.6g、0.75g、1g、1.25g、1.5g、1.75g、2g、2.5g、3g、4g、5g等。本發(fā)明任一化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯或其異構(gòu)體，可以口服或腸胃外給藥等方式施用于需要這種治療的患者。用于腸胃外給藥時(shí)，可制成注射劑。注射劑系指藥物制成的供注入體內(nèi)的溶液、乳液或混懸液及供臨用前配制或稀釋成溶液或混懸液的粉末或濃溶液的無(wú)菌制劑，注射劑可分為注射液、注射用無(wú)菌粉末與注射用濃溶液。注射液系指藥物制成的供注射入體內(nèi)用的無(wú)菌溶液型注射液、乳液型注射液或混懸型注射液，可用于肌內(nèi)注射、靜脈注射、靜脈滴注等；其規(guī)格有l(wèi)mL、2mL、5mL、10mL、20mL、50mL、脂mL、200mL、250mL、500mL等，其中供靜脈滴注用的大體積(一般不小于100mL)注射液也稱靜脈輸液。注射用無(wú)菌粉末系指藥物制成的供臨用前用適宜的無(wú)菌溶液配制成澄清溶液或均勻混懸液的無(wú)菌粉末或無(wú)菌塊狀物，可用適宜的注射用溶劑配制后注射，也可用靜脈輸液配制后靜脈滴注；無(wú)菌粉末用溶媒結(jié)晶法、噴霧干燥法或冷凍干燥法等制得。注射用濃溶液系指藥物制成的供臨用前稀釋供靜脈滴注用的無(wú)菌濃溶液。制成注射劑時(shí)，可采用現(xiàn)有制藥領(lǐng)域中的常規(guī)方法生產(chǎn)，可選用水性溶劑或非水性溶劑。最常用的水性溶劑為注射用水，也可用0.9%氯化鈉溶液或其他適宜的水溶液；常用的非水性溶劑為植物油，主要為供注射用大豆油，其他還有乙醇、丙二醇、聚乙二醇等的水溶液。配制注射劑時(shí)，可以不加入附加劑，也可根據(jù)藥物的性質(zhì)加入適宜的附加劑，如滲透壓調(diào)節(jié)劑、pH值調(diào)節(jié)劑、增溶劑、填充劑、抗氧劑、抑菌劑、乳化劑、助懸劑等。常用的滲透壓調(diào)節(jié)劑包括氯化鈉、葡萄糖、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、山梨醇等，優(yōu)選氯化鈉或葡萄糖；常用的pH值調(diào)節(jié)劑包括醋酸-醋酸鈉、乳酸、枸櫞酸-枸櫞酸鈉、碳酸氫鈉-碳酸鈉等；常用的增溶劑包括聚山梨酯80、丙二醇、卵磷脂、聚氧乙烯蓖麻油等；常用的填充劑包括乳糖、甘露醇、山梨醇、右旋糖酐等；常用的抗氧劑有亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉等；常用抑菌劑為苯酚、甲酚、三氯叔丁醇等。注射劑常用容器有玻璃安瓿、玻璃瓶、塑料安瓿、塑料瓶等。用于口服時(shí)，可制成常規(guī)的固體制劑，如片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑等；也可制成口服液體制劑，如口服溶液劑、口服混懸劑、糖漿劑等。片劑系指藥物與適宜的輔料混勻壓制而成的圓片狀或異形片狀的固體制劑，以口服普通片為主，另有含片、舌下片、口腔貼片、咀嚼片、分散片、可溶片、泡騰片、緩釋片、控釋片與腸溶片等。膠囊劑系指藥物或加有輔料充填于空心膠囊或密封于軟質(zhì)囊材中的固體制劑，依據(jù)其溶解與釋放特性，可分為硬膠囊(通稱為膠囊)、軟膠囊(膠丸)、緩釋膠囊、控釋膠囊和腸溶膠囊等。丸劑系指藥物與適宜的輔料均勻混合，以適當(dāng)方法制成的球狀或類球狀固體制劑，包括滴丸、糖丸、小丸等。顆粒劑系指藥物與適宜的輔料制成具有一定粒度的干燥顆粒狀制劑，可分為可溶顆粒(通稱為顆粒)、混懸顆粒、泡騰顆粒、腸溶顆粒、緩釋顆粒和控釋顆粒等?？诜芤簞┫抵杆幬锶芙庥谶m宜溶劑中制成供口服的澄清液體制劑?？诜鞈覄┫抵鸽y溶性固體藥物，分散在液體介質(zhì)中，制成供口服的混懸液體制劑，也包括干混懸劑或濃混懸液。糖漿劑系指含有藥物的濃蔗糖水溶液。制成口服制劑時(shí)，可以加入適宜的填充劑、粘合劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑等。常用填充劑包括淀粉、糖粉、磷酸鈣、硫酸鈣二水物、糊精、微晶纖維素、乳糖、預(yù)膠化淀粉、甘露醇等；常用粘合劑包括羧甲基纖維素鈉、PVP-K30、羥丙基纖維素、淀粉漿、甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙甲纖維素、膠化淀粉等；常用崩解劑包括干淀粉、交聯(lián)聚維酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、低取代羥丙基纖維素等；常用潤(rùn)滑劑包括硬脂酸鎂、滑石粉、十二烷基硫酸鈉、微粉硅膠等。本發(fā)明還提供了巰基氮雜環(huán)烷酰胺醇取代的培南衍生物在制備用于治療和/或預(yù)防感染性疾病的藥物中的用途。本發(fā)明培南類抗菌素對(duì)革蘭陽(yáng)性和陰性、需氧和厭氧菌以及醫(yī)院臨床病原菌均有較好的抗菌活性，可用于治療和/或預(yù)防由病原微生物引起的各種疾病。通常，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)培南類抗菌素對(duì)溫血?jiǎng)游飦?lái)說是無(wú)毒的，而這個(gè)通則也適用于本發(fā)明化合物。將本發(fā)明的優(yōu)選化合物以能預(yù)防細(xì)菌感染所需要的過量劑量對(duì)小鼠給藥，未觀察到由本發(fā)明化合物所引起的明顯的中毒病兆或副作用。本發(fā)明的巰基氮雜環(huán)烷酰胺醇取代的培南衍生物與最接近的現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)(1)本發(fā)明化合物對(duì)PBPS親和力強(qiáng)，抗菌譜廣，抗菌活性高，對(duì)革蘭陽(yáng)性和陰性、需氧和厭氧菌以及醫(yī)院臨床病原菌均有較好的抗菌活性；(2)本發(fā)明化合物低毒性，能被安全的用于治療和/或預(yù)防各種哺乳動(dòng)物(包括人類)由敏感菌所引起的各種疾病；(3)本發(fā)明化合物對(duì)P-內(nèi)酰胺酶和人腎DHP-I穩(wěn)定，可以單藥給藥；(4)本發(fā)明化合物制備工藝簡(jiǎn)單，藥品純度高、收率高、質(zhì)量穩(wěn)定，易于進(jìn)行大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)。以下通過體外抗菌實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步闡述本發(fā)明的巰基氮雜環(huán)烷酰胺醇取代的培南衍生物的有益效果，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明的培南類抗菌素僅具有下列有益效果。實(shí)驗(yàn)例本發(fā)明化合物的體外抗菌活性供試菌種以下均為臨床分離菌株，購(gòu)于公眾機(jī)構(gòu)。革蘭陽(yáng)性菌甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(MSSA)、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)、甲氧西林敏感表皮葡萄球菌(MSSE)、耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)、青霉素敏感腫炎鏈球菌(PSSP)、青霉素耐藥肺炎鏈球菌(PRSP)、化膿鏈球菌、糞腸球菌;革蘭陰性菌流感嗜血桿菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯氏桿菌、奇異變形桿菌、陰溝腸桿菌、銅綠假單胞菌；革蘭陰性厭氧菌脆弱擬桿菌。供試品本發(fā)明優(yōu)選化合物1和化合物2，自制，其化學(xué)名稱和結(jié)構(gòu)式如前文所述；亞胺培南、注射用美羅培南市購(gòu)。實(shí)驗(yàn)方法瓊脂稀釋法，參考《藥理試驗(yàn)方法學(xué)》P1659-1660，人民衛(wèi)生出版社，主編徐叔云等，版次1982年8月第1版2002年1月第3版第5次印刷。實(shí)驗(yàn)結(jié)果和結(jié)論表2本發(fā)明化合物對(duì)臨床分離革蘭陽(yáng)性菌的抗菌活性苗性_抗菌活性MIC90(嗎/mL)_B*亞胺培南美羅培南化合物l化合物2~~MSSA0.0630.1250,063MRSA646488MSSE0.0310.250扁0.063MRSE12864168PSSP0.0160.0310.0080.008PRSP0.510扁0.063化膿鏈球菌0.0160.0630.0160.016糞腸球菌41622由表2實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見，與亞胺培南和美羅培南相比，本發(fā)明優(yōu)選化合物1和化合物2對(duì)臨床分離的供試革蘭陽(yáng)性菌均有很好的抗菌活性。_表3本發(fā)明化合物對(duì)臨床分離革蘭陰性菌的抗菌活性_^抗菌活性MIC卯(嗎/mL),_亞胺培南美羅培南化合物l化合物2流感嗜血桿菌§^^T^0.25大腸埃希菌0.250.0310.0160.016肺炎克雷伯氏桿菌10.0630.0310.031奇異變形桿菌40.250.250.125陰溝腸桿菌10.0630.0630.031銅綠假單胞菌8424脆弱擬桿菌8421由表3實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見，與亞胺培南和美羅培南相比，本發(fā)明優(yōu)選化合物1和化合物2對(duì)臨床分離的供試革蘭陰性菌，包括革蘭陰性厭氧菌具有很好的抗菌活性。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明化合物對(duì)革蘭陽(yáng)性菌、陰性菌及其耐藥菌和厭氧菌均具有強(qiáng)效抗菌作用，同最接近的現(xiàn)有技術(shù)相比，抗菌活性相當(dāng)或更好，且抗菌譜廣，具有很好的臨床應(yīng)用潛力。具體實(shí)施例方式以下通過實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下實(shí)施例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。以下實(shí)施例中各劑型的輔料可以用藥學(xué)上可接受的輔料替換，或者減少、增加。實(shí)施例12-氯-N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺的制備于干燥的反應(yīng)瓶中，加入l,3-二氨基-2-丙醇9.1g(lOOmmol)，二氯甲垸100mL，然后滴加三乙胺10mL，攪拌5min溶解后，加5.6g(50mmol)氯乙酰氯的50mL二氯甲垸溶液，攪拌反應(yīng)1h，反應(yīng)畢，停止反應(yīng)，過濾除掉固體，濾液分別用稀堿液、稀酸液、水洗滌，干燥后減壓濃縮，得產(chǎn)物6.9g，收率83.1%。實(shí)施例2(^-3-乙酰硫基-l-N-G-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基卜吡咯烷的制備于干燥反應(yīng)瓶中將8.3g(50mmol)2-氯-N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺溶于100mL干燥DMF中，然后加入(5>3-乙酰硫基-吡咯烷7.3g(50mmol)，加畢，再于0。C下加入氫化鈉1.5g(60mmol)，保溫反應(yīng)2h，然后升溫至40'C攪拌反應(yīng)1h，停止反應(yīng)，冷至室溫后加入100mL乙酸乙酯和100mL水萃取，水層用乙酸乙酯提取兩次(50mLx2),合并有機(jī)層，用飽和的NaCl水溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓回收溶劑，得產(chǎn)物9.0g，收率65.6%。實(shí)施例33-乙酰硫基-l-N"3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基l-氮雜環(huán)丁烷的制備制備方法參考實(shí)施例2，投3-乙酰硫基-氮雜環(huán)丁垸6.6g(50mmo1)，8.3g(5Ommo1)2-氯-N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺，得產(chǎn)物8.2§，收率62.4°/0。實(shí)施例4(5)-3-巰基-l-N-(3-氨基-2-丙醇-l-基、-乙酰胺-l-基1-吡咯烷的制備于干燥的反應(yīng)瓶中加入(5)-3-乙酰硫基-l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基]-吡咯烷ll.Og(40mmo1)，用200mL四氫呋喃溶解，加入30%的甲醇鈉/甲醇溶液8.0g，升溫至40'C，攪拌反應(yīng)2h，分出有機(jī)相，經(jīng)水洗、干燥、濃縮，剩余物用乙酸乙酯-乙醇重結(jié)晶，得產(chǎn)物7.4g，收率78.9%。實(shí)施例53-巰基-l-N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基卜氮雜環(huán)丁烷的制備制備方法參考實(shí)施例4，投3-乙酰硫基-l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基]-氮雜環(huán)丁烷10.5g(40mmo1)，得產(chǎn)物6.5g，收率74.3%。實(shí)施例6(4及,5&65V3-qy)-l-nV-G-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基l-吡咯烷-3-基l硫基-6-(1/)-1-羥乙基1-4-甲基-7-氧-1-氮雜雙環(huán)3.2.01庚-2-烯-2-羧酸對(duì)硝基芐酯的制備于干燥反應(yīng)瓶中，加入(4凡5&65)-3-二苯氧磷酰氧基-6-[(li)-l-羥乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸對(duì)硝基芐酯11.9§(20mmo1)的乙腈120mL溶液冷至-lO。C以下，加入二異丙基乙胺5mL和(5)-3-巰基-l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基]-吡咯烷5.1g(22mmol)的乙腈80mL溶液，0"C攪拌15h，反應(yīng)完畢后，加乙酸乙酯300mL稀釋，依次用水、12飽和鹽水洗，有機(jī)層干燥、濃縮，得產(chǎn)物7.0g，收率60.4%。實(shí)施例7(4R,5&6S)-3-14N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基l-氮雜環(huán)丁烷-3-基l硫基-6-『(11)-1-羥乙基1-4-甲基-7-氧-1-氮雜雙環(huán)3.2.01庚-2-烯-2-羧酸對(duì)硝基芐酯的制備制備方法參考實(shí)施例6，投(4i,5&65)-3-二苯氧磷酰氧基-6-[(l及)-l-羥乙基]-4-甲基-7-氧-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸對(duì)硝基芐酯11.9g(20mmo1)，3-巰基-l-[N-(3-氨基-2-丙醇小基)-乙酰胺-l-基]-氮雜環(huán)丁垸4.8g(22mmo1)，得產(chǎn)物6.4g，收率56.5%。實(shí)施例8(4J,5&6^-3-aSM-N-G-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基l-吡咯烷-3-基l硫基-6-1(1及)-1-羥乙基1-4-甲基-7-氧-1-氮雜雙環(huán)3.2.01庚-2-烯-2-羧酸(化合物2)的制備將5.8g(10mmol)的(4/,5&65)-3-[(35)-l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基]-吡咯烷-3-基]硫基-6-[(1^)-1-羥乙基]-4-甲基-7-氧小氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸對(duì)硝基芐酯溶于100mLTHF和水50mL的混合液中，加入10%鈀-炭2g，于40°C、3MPa氫壓下攪拌反應(yīng)2h，濾除鈀炭，濾液中加入THF150mL，分層，收集水層，再向THF中加入水溶液20mL，靜置，分出水層，重復(fù)操作1次，水相合并，0。C慢慢滴入乙醇300mL，-l(TC攪拌lh，過濾，濾餅用水-乙醇重結(jié)晶，得白色晶體2.2g，收率48.7%。分子式C19H3QN406S分子量442.53元素分析實(shí)測(cè)值C,51.33%;H,7.09%;N，12.35%;S,7.67%理論值C,51.57%;H，6.83%;N，12,66%;S，7.25%氫譜(S/ppm，DMSO-d6):S11.25(lH，brs),8.14(1H，brs),5.24(2H,brs),4.11(1H,m),3.70(1H,m),3.60陽(yáng)3.52(4H,m),3.41(1H,t),3.26(2H,m),3.12(1H,t),3.00-2.92(3H,m),2.75-2.60(3H,m),2.35-2.10(4H,m),1.24(3H，d),U3(3H,d)實(shí)施例9f4及,5&65)-3-fl-N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基l-氮雜環(huán)丁烷-3-基l硫基-6^1及)-1-羥乙基1-4-甲基-7-氧-1-氮雜雙環(huán)3.2.01庚-2-烯-2-羧酸(化合物l)的制備制備方法參考實(shí)施例8，投(4凡5&65)-3-[l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基]-氮雜環(huán)丁垸-3-基]硫基-6-[(1及)-1-羥乙基]-4-甲基-7-氧-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸對(duì)硝基芐酯5.6g(lOmmol)。得產(chǎn)物1.9g，收率44.5%。分子式C1SH28N406S分子量428.5元素分析實(shí)測(cè)值C，50.12%;H,6.90%;N，12.79%;S，7.71%理論值C,50.45%;H,6.59%;N,13.08°/。；S，7.48%氫譜(S/ppm，DMSOd6):SlU2(lH,bre),8.09(1H,brs),5.25(2H，brs),4.07(3H,m),3.79(2H,q)，3.62隱3.50(4H^m),3.41(1H,t)，326(4H,m),3.16(1H,t),2鄰-2.90(2H^),2.69(1H,q)，1.21(3H,d)，U2(3H，d)實(shí)施例10f4及,5S，65V3-ayM-N-f3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基l-吡咯烷-3-基l硫基-6-(1們-1-羥乙基1-4-甲基-7-氧-1-氮雜雙環(huán)3.2.01庚-2-烯-2-羧酸鈉(化合物2鈉鹽)的制備將(4/,5&65)-3-[(35)-1-|^-(3-氨基-2-丙醇-1-基)-乙酰胺-1-基]-吡咯垸-3-基]硫基-6-[(17)-1-羥乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸0.88g(2mmo1)，碳酸氫鈉0.25g(2.4mmol)和水5mL，加熱到50。C，依次加入碘化鈉、吡啶，調(diào)pH6.5-7.5，攪拌加熱到80。C,冷卻至室溫，再加入適量的丙酮，析出固體，過濾洗滌得白色晶體0.63g，收率67.5%。實(shí)施例11(4及,5&65V3-f(3^-14N-(3-氨基-2-丙醇-l-基V乙酰胺-l-基卜吡咯烷-3-基l硫基-6-[(110-1-羥乙基1-4-甲基-7-氧-1-氮雜雙環(huán)[3.2.01庚-2-烯-2-羧酸新戊酰氧甲酯(化合物2新戊酰氧甲酯)的制備將(4/，5&6S)-3-[(3S)-l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基]-吡咯烷-3-基]硫基-6-[(li)-l-羥乙基]-4-甲基-7-氧-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸4.42g(lOmmol)加入60mLN,N-二甲基甲酰胺中，降溫至O'C，加入三乙胺lg，攪拌溶解后，加入碘代甲基新戊酸酯2.6g(11mmol)，攪拌lh，反應(yīng)畢，將反應(yīng)液倒入150mL水和150mL乙酸乙酯的混合液中，加入碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH至7.5，過濾，分離有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鎂干燥，旋干后溶于乙酸乙酯，冰浴下滴加入含有氯化氫的乙醚溶于，析晶過濾，用氯仿重結(jié)晶，得產(chǎn)物3.28g，收率58.9%。本發(fā)明要求保護(hù)的其他化合物參照上述制備方法制備。實(shí)施例12本發(fā)明化合物無(wú)菌粉針的制備處方處方1:化合物1500g右旋糖酐500g_共制備1000支處方2:化合物2鈉鹽1000g(以化合物2計(jì))共制備薩支制備工藝將制備所用的抗生素玻璃瓶、膠塞等進(jìn)行無(wú)菌處理；按處方稱取原料，將無(wú)菌粉末置于分裝機(jī)中分裝，隨時(shí)檢測(cè)裝量；加塞，壓蓋，成品全檢，包裝入庫(kù)。實(shí)施例13本發(fā)明化合物凍干劑的制備處方化合物2鈉鹽500g(以化合物2計(jì))甘露醇300g注射用水2000mL_共制備1000支制備工藝將原料與輔料加處方量90%注射用水溶解，調(diào)節(jié)pH值，補(bǔ)加注射用水至全量，加入配液量0.02%針用活性炭吸附30分鐘，過濾脫炭，精濾，半成品化驗(yàn)，灌裝，凍干、壓塞軋蓋。凍干步驟為-35至-45。C預(yù)凍5小時(shí)，平均每小時(shí)1.5。C升溫至0'C低溫真空干燥，快速升溫到30'C高溫真空干燥，真空度控制在0.1mm汞柱以下。實(shí)施例14本發(fā)明化合物片劑的制備處方化合物1500g預(yù)膠化淀粉50g低取代羥丙基纖維素40g微晶纖維素40g2%HPMC水溶液適量微粉硅膠4.0g硬脂酸鎂4.0g羧甲淀粉鈉__共制備畫片制備工藝將原料粉碎過100目篩，其余輔料分別過100目篩，備用；按照處方量稱取原料和輔料；將羥丙甲纖維素溶于水中制成2%的水溶液備用；將化合物l、預(yù)膠化淀粉、低取代羥丙基纖維素、微晶纖維素混合均勻，加入2%HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材；過20目篩制顆粒；顆粒在60'C的條件下烘干；干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂、微粉硅膠和羧甲淀粉鈉，過18目篩整粒，混合均勻；取樣，半成品化驗(yàn)；按照化驗(yàn)確定的片重壓片；成品全檢，包裝入庫(kù)。實(shí)施例15本發(fā)明化合物腸溶片的制備處方1)片芯化合物2新戊酰氧甲酯預(yù)膠化淀粉微晶纖維素1%HPMC的50%乙醇水溶液微粉硅膠硬脂酸鎂250g(以化合物2計(jì))80g50g4.0g4.0g1000片20g2g4g4g350g共制備2)腸溶層羥丙甲纖維素酞酸酯鄰苯二甲酸二丁酯二氧化鈦滑石粉80%乙醇水溶液制備方法1)片芯的制備按片芯處方稱取原料和輔料，將原料、輔料分別粉碎過IOO目篩將原料、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入混合制粒機(jī)，加入1%HPMC的50°/。乙醇水溶液適量，攪拌15min，制粒；顆粒在低于6(TC的條件下烘干；干燥好的顆粒加入微粉硅膠和硬脂酸鎂，整粒，混合均勻；取樣，半成品化驗(yàn)；按照化驗(yàn)確定的片重壓片；2)腸溶層的制備將羥丙甲纖維素酞酸酯加入攪拌中的80%乙醇水溶液中，攪拌至溶解，在攪拌狀態(tài)下加入鄰苯二甲酸二丁酯、二氧化鈦、滑石粉，攪拌15min，勻漿20分鐘，過尼龍篩，得腸溶包衣液；3)包衣用配制的腸溶包衣液在連續(xù)攪拌下對(duì)片芯進(jìn)行噴霧包衣，包衣增重為片芯的8-10%，包衣時(shí)進(jìn)風(fēng)溫度控制在45°C，片床溫度控制在3(TC，霧化壓力為0.2MPa。實(shí)施例16本發(fā)明化合物凝膠劑的制備<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>制備工藝在攪拌下，向水中攪拌加入卡波普940，向甘油和吐溫80中加入化合物1，攪拌溶解，加入上述分散體系中；將尼泊金乙酯用乙醇溶解，加入上述溶液中，攪勻，即成水溶性基質(zhì)的凝膠劑。權(quán)利要求1、通式(I)所示的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯或其異構(gòu)體其中，R1代表氫原子或低級(jí)烷基；R2代表羧基，-COOR7或易水解的酯，所述的R7代表羧基保護(hù)基；R3、R4、R5分別獨(dú)立的代表氫原子或低級(jí)烷基；R6代表氫原子或羥基保護(hù)基；n代表0、1或2。2、如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯或其異構(gòu)體其中，RM戈表氫原子，甲基或乙基；W代表羧基，一COOR或易水解的酯，所述的W代表羧基保護(hù)基；R3、R4、RS分別獨(dú)立的代表氫原子，甲基，乙基或丙基；116代表氫原子或羥基保護(hù)基；n代表O或1。3、如權(quán)利要求2所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯或其異構(gòu)體其中，W代表氫原子或甲基；f代表羧基，一COOR卩或易水解的酯，所述的117代表羧基保護(hù)基；R3、R4、RS分別獨(dú)立的代表氫原子，甲基或乙基；116代表氫原子或羥基保護(hù)基；n代表O或1。4、如權(quán)利要求3所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯或其異構(gòu)體其中，Ri代表甲基；f代表羧基，一COOW或易水解的酯，所述的W代表羧基保護(hù)基；R3、R4、RS分別獨(dú)立的代表氫原子或甲基；R6代表氫原子或羥基保護(hù)基；n代表O或1。5、如權(quán)利要求4所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯或其異構(gòu)體，所述化合物選自(4i，5&65>3-[l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基]-氮雜環(huán)丁垸-3-基]硫基-6-[(l及)-l-羥乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸，和(4i,5&6S)-3-[(35)-l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺小基]-吡咯烷-3-基]硫基-6-[(li)-l-羥乙蜀-4-甲基-7-氧-l-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。6、如權(quán)利要求15任一權(quán)利要求所述的化合物，其藥學(xué)上可接受的鹽包括乙酸鹽、甲磺酸鹽、馬來(lái)酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、富馬酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽、鋅鹽。7、如權(quán)利要求15任一權(quán)利要求所述的化合物，其易水解的酯包括烷酰氧烷基酯，烷氧羰氧基烷基酯，垸氧基甲酯，垸酰氨基甲酯，環(huán)烷酰氧垸基酯，環(huán)垸氧基酰氧烷基酯，(5-甲基-2-氧代-l,3-間二氧雜環(huán)戊烯-4-基)甲基酯，或2-[(2-甲基丙氧基)羰基]-2-戊烯酯。8、包括權(quán)利要求15任一權(quán)利要求所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯或其異構(gòu)體與一種或多種藥用載體和/或稀釋劑的藥物組合物。9、如權(quán)利要求8所述的藥物組合物，為藥學(xué)上可接受的任一劑型。10、如權(quán)利要求15任一權(quán)利要求所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯或其異構(gòu)體，在用于制備治療和/或預(yù)防感染性疾病的藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及通式(I)所示的巰基氮雜環(huán)烷酰胺醇取代的培南衍生物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其易水解的酯、其異構(gòu)體，其中R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、n如說明書中所定義；本發(fā)明還涉及這些化合物的制備方法，含有這些化合物的藥物組合物，以及這些化合物在用于制備治療和/或預(yù)防感染性疾病的藥物中的用途。文檔編號(hào)A61P31/04GK101550138SQ20091013409公開日2009年10月7日申請(qǐng)日期2009年4月2日優(yōu)先權(quán)日2008年4月3日發(fā)明者黃振華申請(qǐng)人:山東軒竹醫(yī)藥科技有限公司