專利名稱：：3,3-螺吲哚滿酮衍生物的制作方法3，3-螺吲哚滿酮衍生物本發(fā)明涉及羥吲哚衍生物，其起到mdm2相互作用的拮抗劑作用，因此可以作為有效和選擇性的抗癌劑。本發(fā)明的化合物是下列通式的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>g巾X選自氫，鹵素，氰基，硝基，乙炔基和環(huán)丙基，Y是氫，RpR2，R3和R4選自氫，低級(jí)垸基，低級(jí)垸氧基，取代的低級(jí)烷基，低級(jí)烯基，低級(jí)炔基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，環(huán)烷基，取代的環(huán)烷基，環(huán)烯基和取代的環(huán)烯基，條件是R,/R2或R3/R4中的一個(gè)是氫，而另一個(gè)不是氫，并且Rs是氫，低級(jí)垸基或取代的低級(jí)烷基，及其藥用鹽和酯。p53是在防止癌癥發(fā)生中起關(guān)鍵作用的腫瘤抑制蛋白。它保護(hù)細(xì)胞的完整性并通過(guò)誘導(dǎo)生長(zhǎng)抑制或編程性細(xì)胞死亡預(yù)防細(xì)胞永久性損害的克隆的增殖。在分子水平上，p53是可以激活一組涉及調(diào)節(jié)細(xì)胞周期和編程性細(xì)胞死亡的基因的轉(zhuǎn)錄因子。p53是在細(xì)胞水平上受MDM2緊密調(diào)節(jié)的有效細(xì)胞周期抑制劑。MDM2與p53形成反饋控制環(huán)。MDM2可以結(jié)合p53并抑制其反式激活p53-調(diào)節(jié)基因的能力。此外，MDM2介導(dǎo)依賴遍在蛋白的p53降解。p53可以激活MDM2基因表達(dá)，由此增加MDM2蛋白的細(xì)胞水平。這種反饋控制環(huán)確保了MDM2與p53在正常增殖細(xì)胞中均保持在低水平上。MDM2也是E2F的輔因子，它在細(xì)胞周期調(diào)節(jié)中起關(guān)鍵作用。MDM2與p53(E2F)之比在許多癌癥中受到異常調(diào)節(jié)。例如，已經(jīng)證實(shí)pl6INK4/pl9ARF基因座上通常發(fā)生分子缺損影響了MDM2蛋白降解。抑制MDM2-p53在腫瘤細(xì)胞中與野生型p53的相互作用應(yīng)導(dǎo)致p53累積、細(xì)胞周期抑制和/或編程性細(xì)胞死亡。因此，MDM2拮抗劑作為單一活性劑可以為癌癥療法提供新手段或與廣泛的其它抗腫瘤療法聯(lián)用。已經(jīng)通過(guò)使用用于抑制MDM2-p53相互作用的不同大分子工具(例如抗體、反義寡核苷酸、肽類)證實(shí)了這種策略的可行性。MDM2還通過(guò)作為p53的保守結(jié)合區(qū)結(jié)合E2F并激活細(xì)胞周期蛋白A的E2F-依賴性轉(zhuǎn)錄，由此提示MDM2拮抗劑可能在p53突變體細(xì)胞中具有作用。由本發(fā)明的化合物包含的是式I化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>其中X選自氫，鹵素，氰基，硝基，乙炔基和環(huán)丙基，Y是氫或氟，R,，R2，R3和R4選自氫，低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基，取代的低級(jí)垸基，低級(jí)烯基，低級(jí)炔基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，環(huán)烷基，取代的環(huán)烷基，環(huán)烯基，和取代的環(huán)烯基，條件是R,/R2或R3/R4中的一個(gè)是氫，而另一個(gè)不是氫，Rs選自氫，低級(jí)烷基或取代的低級(jí)烷基，及其藥用鹽。優(yōu)選的是式I化合物，其中X是鹵素，Y是氫，R2是氫，R4是氧，R,和R;選自氫，低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基，取代的低級(jí)烷基，低級(jí)烯基，低級(jí)炔基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，環(huán)烷基，取代的環(huán)烷基，環(huán)烯基，和取代的環(huán)烯基，條件是R,/R3中的一個(gè)是間-鹵素取代的苯基，所述的苯基被進(jìn)一步取代或不被進(jìn)一步取代，并且Rs是氫，低級(jí)垸基或取代的低級(jí)垸基。進(jìn)一步優(yōu)選的是式I化合物，其中X是F，Cl或Br,Y是氫，R2是氫，R4是氫，R,/R3中的一個(gè)是間-鹵素取代的苯基，所述的苯基被進(jìn)一步取代或不被進(jìn)一步取代，并且R,/R3中的另一個(gè)選自低級(jí)烷基，低級(jí)烯基，芳基和取代的芳基，并且Rs是氫，低級(jí)垸基或取代的低級(jí)烷基。在上述所有實(shí)施方案中，當(dāng)R,至R4中的一個(gè)或多個(gè)是取代的芳基時(shí)，取代基可以選自鹵素(優(yōu)選Cl或F)或低級(jí)垸基。特別優(yōu)選的是選自由下列各項(xiàng)組成的組中的化合物外消旋-(3S,4R,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1,1',2,2'，3,5,6,7-八氫-5-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮外消旋-(3R，4R,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1,1',2,2',3,5，6，7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮(3R,4S,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-U',2，2'，3,5,6,7-八氫-3-(l-甲基乙烯基螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮(3S,4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-U',2,2',3，5，6,7-八氫-5-(1-甲基乙烯基螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮外消旋-(3S,4R，5R)-6'-氯-3,5-雙-(3-氯苯基)-U',2，2',3,5,6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮(3R，4S,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-U'，2,2',3,5,6,7-八氫-3(EH1-甲基-l-丙烯基)-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮(3S,4R，5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-U'，2，2',3，5,6,7-八氫-5(EHl-甲基-l-丙烯基)-螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]-卩引哚]-2'，7-二酮外消旋-(3S,4R，5S)-6'-氯-3-(4-氯苯基)-1,1'，2,2'，3,5,6，7-八氫-5-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4,343H]-吲哚]-2',7-二酮外消旋-(3R,4R，5S)-6'-氯-5-(4-氯苯基)-1，1',2,2',3，5,6,7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮(3R，4R,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-l,l',2，2'，3，5,6，7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮(3S,4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-U',2,2',3,5,6,7-八氫-5-(3-甲基苯基)-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮(3R,4S,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1，1',2,2'，3,5,6，7-八氫-3-(3-甲基苯基)-螺[411-氮雜罩—4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮(3R,4S,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1,1',2,2',3,5，6,7-八氫-3-(2-甲基苯基)-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮(38,411，511)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1,1',2,2',3,5,6,7-八氫-5-(2-甲基苯基)-螺[411-氮雜罩—4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮(3R,4S,5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-l，r,2,2',3,5,6,7-八氫-3-(2-甲基丙基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮(3S，4R,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1，1',2,2'，3,5,6，7-八氫-5-(2-甲基丙基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮(3R,4S，5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-環(huán)丙基-l,r,2，2'，3，5,6,7-八氫螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮(3S,4R,5R)-6'扁氯-3-(3-氯苯基)-5-環(huán)丙基-1,1'，2,2',3,5,6，7-八氫螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮(3R,4S,5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-U',2,2',3，5，6,7-八氫-3-(l-甲基乙基)-螺[4H-氮雜萆一4,3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮(3S，4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-U',2，2',3，5，6,7-八氫-5-(l-甲基乙基)-螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮(3R,4S，5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-(5-氟-2-甲基苯基)-l,r,2，2',3,5,6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮(3S，4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-(5-氟-2-甲基苯基)-l，r,2,2',3,5，6，7-八氫螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮(3R,4S,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1，1',2,2'，3,5，6，7-八氫-3-苯基-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-fl引哚]-2'，7-二酮(3S,4R，5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1,1'，2,2'，3,5，6,7-八氫-3-苯基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-卩引哚]-2'，7-二酮外消旋-(3S,4R，5S)-6，-溴-3-(3-氯苯基)-l，l',2，2'，3，5,6，7-八氫-5-甲氧基-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮外消旋-(3R,4R,5S)-6'-溴-5-(3-氯苯基)-l，l'，2,2',3,5,6,7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H〗』引哚]-2',7-二酮(311,48,58)-6'-溴-5-(3-氯苯基)-1,1',2,2'，3,5,6,7-八氫-3-(1-甲基乙烯基螺[411-氮雜萆-4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮(3S,4R,5R)-6'-溴-3-(3-氯苯基)-U'，2,2'，3,5,6,7-八氫-5-(l-甲基乙烯基螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮外消旋-(3S,4R,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l,r,2，2',3,5,6，7-八氫-5-甲氧基-l-甲基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮外消旋-(3R,4R,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-U',2,2'，3,5,6,7-八氫-3-甲氧基-l-甲基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮外消旋-(3S，4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l-乙基-U'，2，2',3,5，6，7-八氫-5-甲氧基-螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮外消旋-(3R,4R，5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-l-乙基-1,1',2，2',3，5,6，7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮(3R,4R,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-乙氧基-l，r,2,2',3,5,6,7-八氫螺[4H-氮雜罩陽(yáng)4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮(3S，4R,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-乙氧基-U'，2，2',3,5，6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮(3R，4R,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1,1'，2,2',3,5,6,7-八氫-3-(1-甲基乙氧基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮(3S,4R,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l,r,2,2',3,5，6,7-八氫-5-(l-甲基乙氧基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮3S,4R,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-(2，2-二甲基丙氧基)-U',2，2',3,5，6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮(3R,4R,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-(2,2-二甲基丙氧基)-l,l'，2，2',3,5，6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮術(shù)語(yǔ)"烷基"是指具有1至約20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基，包括具有1至約7個(gè)碳原子的基團(tuán)。在一些實(shí)施方案中，烷基取代基可以是低級(jí)烷基取代基。術(shù)語(yǔ)"低級(jí)垸基"是指具有1至6個(gè)碳原子的垸基，并且在一些實(shí)施方案中，是指具有1至4個(gè)碳原子的烷基。烷基的實(shí)例包括但不限于甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，仲丁基，叔丁基，正戊基和仲戊基。如本文所用的，"環(huán)垸基"意欲表示任何穩(wěn)定的、只由碳原子組成的單環(huán)或多環(huán)體系，它的任何一個(gè)環(huán)都是飽和的，并且術(shù)語(yǔ)"環(huán)烯基"意欲表示任何穩(wěn)定的、只由碳原子組成的單環(huán)或多環(huán)體系，其中它的至少一個(gè)環(huán)是部分未飽和的。環(huán)烷基的實(shí)例包括但不限于環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基，環(huán)庚基，金剛烷基，環(huán)辛基，雙環(huán)烷基，包括雙環(huán)辛烷如[2.2.2]雙環(huán)辛烷或[3.3.0]雙環(huán)辛烷，雙環(huán)壬烷如[4.3.0]雙環(huán)壬垸和雙環(huán)癸垸如[4.4.0]雙環(huán)癸垸(萘烷)，或螺環(huán)化合物。優(yōu)選的環(huán)烷基是C3-C6環(huán)垸基。環(huán)烯基的實(shí)例包括但不限于環(huán)戊烯基或環(huán)己烯基。如本文所用的術(shù)語(yǔ)"烯基"是指未飽和的直鏈或支鏈脂肪族烴基，其含有一個(gè)雙鍵并且具有2至6，優(yōu)選2至4個(gè)碳原子。這樣的"烯基"的實(shí)例是乙烯基(vinyl)，乙烯基(ethenyl)，烯丙基，異丙烯基，l-丙烯基，2-甲基-l-丙烯基，l-丁烯基，2-丁烯基，3-丁烯基，2-乙基-1-丁烯基，3-甲基-2-丁烯基，l-戊烯基，2-戊烯基，3-戊烯基，4-戊烯基，4-甲基-3-戊烯基，1-己烯基，2-己烯基，3-己烯基，4-己烯基和5-己烯基。如本文所用的術(shù)語(yǔ)"炔基"是指未飽和的直鏈或支鏈脂肪族烴基，其含有一個(gè)叁鍵并且具有2至6，優(yōu)選2至4個(gè)碳原子。這樣的"炔基"的實(shí)例是乙炔基，l-丙炔基，2-丙炔基，l-丁炔基，2-丁炔基，3-丁炔基，1-戊炔基，2-戊炔基，3-戊炔基，4-戊炔基，l-己炔基，2-己炔基，3-己炔基，4-己炔基和5-己炔基。如在定義中所用的術(shù)語(yǔ)"鹵素"是指氟、氯、溴或碘，優(yōu)選氟和氯。"芳基"是指一價(jià)單環(huán)或雙環(huán)的芳香族碳環(huán)烴基，優(yōu)選6-10元芳香族環(huán)系統(tǒng)。優(yōu)選的芳基包括但不限于苯基，萘基，甲苯基和二甲苯基。"雜芳基"是指含有至多兩個(gè)環(huán)的芳香族雜環(huán)系統(tǒng)。優(yōu)選的雜芳基包括但不限于噻吩基，呋喃基，吲哚基，吡咯基，吡啶基，吡嗪基，瞎、唑基，噻唑基，喹啉基，嘧啶基，咪唑和四唑基。在作為雙環(huán)的芳基或雜芳基的情況下，應(yīng)當(dāng)理解一個(gè)環(huán)可以是芳基，而另一個(gè)是雜芳基，并且兩個(gè)都是取代或未取代的。"雜環(huán)"是指取代或未取代的5至8元單或雙環(huán)的非芳香族烴，其中1至3個(gè)碳原子被選自氮、氧或硫原子的雜原子代替。實(shí)例包括吡咯垸-2-基；吡咯烷-3-基；哌啶基；嗎啉-4-基等。"雜原子"是指選自N，O和S中的原子。"烷氧，垸氧基或低級(jí)垸氧基"是指連接到氧原子上的任何上述低級(jí)烷基。典型的低級(jí)垸氧基包括甲氧基，乙氧基，異丙氧基或丙氧基，丁氧基等。在烷氧基的含義內(nèi)進(jìn)一步包括的是多個(gè)烷氧基側(cè)鏈，例如乙氧基乙氧基，甲氧基乙氧基，甲氧基乙氧基乙氧基等；和取代的烷氧基側(cè)鏈，例如二甲基氨基乙氧基，二乙基氨基乙氧基，二甲氧基-磷?；籽趸?。在本說(shuō)明書中，在指示時(shí)，各種基團(tuán)可以被l-5個(gè)或優(yōu)選l-3個(gè)取代基取代，所述的取代基獨(dú)立地選自低級(jí)烷基，低級(jí)-烯基，低級(jí)-炔基，二氧代-低級(jí)-亞垸基(形成例如苯并二氧基)，鹵素，羥基，CN，CF3，NH2，N(H，低級(jí)-烷基)，N(低級(jí)-垸基)2，氨基羰基，羧基，N02，低級(jí)-烷氧基，硫代-低級(jí)-垸氧基，低級(jí)-烷基磺?；?，氨基磺?；?，低級(jí)-垸基羰基，低級(jí)-垸基羰基氧基，低級(jí)-垸氧基羰基，低級(jí)-垸基-羰基-NH，氟-低級(jí)-烷基，氟-低級(jí)-烷氧基，低級(jí)-垸氧基-羰基-低級(jí)-烷氧基，羧基-低級(jí)-烷氧基，氨基甲?；?低級(jí)-烷氧基，羥基-低級(jí)-烷氧基，NH2-低級(jí)-烷氧基，N(H，低級(jí)-烷基)-低級(jí)-烷氧基，N(低級(jí)-烷基)2-低級(jí)-烷氧基，芐基氧基-低級(jí)-垸氧基，單-或二-低級(jí)烷基取代的氨基-磺?；涂梢匀芜x被鹵素，羥基，NH2，N(H，低級(jí)-烷基)或N(低級(jí)-烷基)2取代的低級(jí)-垸基。對(duì)于所述環(huán)垸基，環(huán)烯基，芳基，雜芳基和雜環(huán)優(yōu)選的取代基是鹵素，低級(jí)垸氧基，低級(jí)垸基，羧基，羧基低級(jí)浣氧基和CN。對(duì)于烷基優(yōu)選的取代基是烷氧基和N(低級(jí)烷基)2°"藥用的"如藥用載體、賦形劑等是指對(duì)給予特定化合物的受試者而言是藥理上可接受的且基本上無(wú)毒性的。"藥用鹽"是指保留本發(fā)明化合物的生物有效性和特性且由適宜的無(wú)毒性有機(jī)酸或無(wú)機(jī)酸或有機(jī)堿或無(wú)機(jī)堿形成的常規(guī)酸加成鹽或堿加成鹽。酸加成鹽的實(shí)例包括那些來(lái)源于無(wú)機(jī)酸、諸如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸的鹽以及那些來(lái)源于有機(jī)酸、諸如對(duì)甲苯磺酸、水楊酸、甲磺酸、草酸、琥珀酸、檸檬酸、蘋果酸、乳酸、富馬酸、三氟乙酸等的鹽。堿加成鹽的實(shí)例包括那些來(lái)源于銨、鉀、鈉和季銨氫氧化物的鹽、諸如氫氫氧化四甲銨。將藥物化合物(即藥物)化學(xué)修飾成鹽是藥物師眾所周知的獲得化合物改善的物理和化學(xué)穩(wěn)定性、吸濕性、流動(dòng)性和溶解性的技術(shù)。例如，參見(jiàn)Ansd等《藥物劑型和藥物轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)》(PharmaceuticalDosageFormsandDrugDeliverySystems)(第6版1995)196和1456-1457頁(yè)。具有至少一個(gè)不對(duì)稱碳原子的式la和lb化合物及它們的鹽可以作為外消旋混合物或不同的立體異構(gòu)體存在?？梢杂梢阎姆蛛x方法如色譜分離各種異構(gòu)體。本文公開(kāi)且由式la和lb所涵蓋的化合物可以顯示出互變異構(gòu)現(xiàn)象或結(jié)構(gòu)異構(gòu)現(xiàn)象。認(rèn)為本發(fā)明包括這些化合物的任何互變異構(gòu)或結(jié)構(gòu)異構(gòu)形式，這些形式的混合物，并且不限于上面的式Ia和Ib中描述的任一互變異構(gòu)或結(jié)構(gòu)異構(gòu)形式。本發(fā)明的化合物用于治療或控制細(xì)胞增殖性疾病，特別是腫瘤疾病。這些化合物和含有這些化合物的制劑可以用于治療或控制實(shí)體瘤，諸如乳腺、結(jié)腸、肺和前列腺腫瘤。根據(jù)本發(fā)明的化合物的治療有效量指的是有效預(yù)防、緩解或改善疾病癥狀或延長(zhǎng)所治療受試者存活的用量。治療有效量的測(cè)定屬于本領(lǐng)域技術(shù)的范圍。本發(fā)明化合物的治療有效量或劑量可以在寬限內(nèi)改變并可以按照本領(lǐng)域公知的方式測(cè)定?？梢栽诿糠N特定情況中根據(jù)個(gè)體需要調(diào)整這類劑量，包括所給予的具體化合物、給藥途徑、所治療的疾病和所治療的患者。一般來(lái)說(shuō)，就對(duì)體重約為70Kg的成年人的口服或非腸道給藥而言，約10mg至約10,000mg，優(yōu)選約200mg至約1,000mg的每日劑量應(yīng)是合適的，不過(guò)，當(dāng)需要時(shí)，可以超過(guò)上限?？梢詫⒚咳談┝孔鳛閱蝿┝炕蚍謩┝拷o藥，或就非腸道給藥而言，可以作為連續(xù)輸注給藥。本發(fā)明的制劑包括適宜于以下的那些口服、鼻、局部(包括口腔和舌下)、直腸、陰道和/或胃腸外給藥。該制劑可以方便地以單位劑量形式存在，并且可以由制藥學(xué)領(lǐng)域中周知的方法制備?？梢耘c載體材料組合以產(chǎn)生單一劑量形式的活性成分的量將根據(jù)將治療的主體以及給藥的特殊方式而變化。可以與載體材料組合以產(chǎn)生單一劑量形式的活性成分的量通常將是產(chǎn)生治療效果的式I化合物的量。通常，在100百分比中，該量的范圍為約1百分比至約99百分比活性成分，優(yōu)選約5百分比至約70百分比，最優(yōu)選約10百分比至約30百分比。制備這些制劑或組合物的方法包括以下步驟將本發(fā)明的化合物與載體，以及任選的一種或多種輔助成分組合。通常，通過(guò)將本發(fā)明的化合物與液體載體或細(xì)碎的固體載體，或它們兩者，均勻并且密切地組合，然后，如果需要，成型為產(chǎn)品。本發(fā)明適宜于口服給藥的制劑可以是以下形式膠囊劑、扁囊劑、小藥囊、丸劑、片劑、錠劑(使用矯味的基質(zhì)(flavoredbasis),通常是蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠)、粉劑、顆粒劑或作為在水性或非水性液體中的溶液劑或懸浮劑，或作為水包油或油包水液體乳劑，或作為酏劑或糖漿劑，或作為軟錠齊l」(使用惰性基質(zhì)(inertbase),如明膠和甘油，或蔗糖和阿拉伯膠)和/或漱口劑等，各自含有預(yù)定量的本發(fā)明化合物作為活性成分。還可以將本發(fā)明的化合物作為大丸劑(bolus)、藥糖劑或糊劑給藥。"有效量"是指對(duì)于預(yù)防、減輕或消除疾病的癥狀或延長(zhǎng)被治療的患者生存有效的量。"ICM)"是指對(duì)于抑制具體測(cè)量活性的50%所需要的特定化合物的濃度。IQ。尤其可以如后面所述測(cè)量。本發(fā)明提供用于合成螺吲哚滿酮的方法。本發(fā)明的化合物可以由本領(lǐng)域中已知的方法制備。用于合成這些化合物的適宜方法提供于實(shí)施例中。通常，本發(fā)明的化合物可以根據(jù)下面提供的合成方案制備。下面的合成方案提供用于制備本發(fā)明的化合物，即式I化合物的三種通用方法。在方案1中所示的方法A中，將式II化合物通過(guò)與NaN3—起在酸催化劑存在下加熱而轉(zhuǎn)化成式I化合物。方案l在方案2中所示的方法B中，將式II化合物通過(guò)與NH20H-HC1和p-TsCl反應(yīng)，以形成肟中間體III和IV，接著在微波輻照下，在酸催化劑存在下加熱而轉(zhuǎn)化成式I化合物。方案2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>l)THF-H20/加熱2)手性分離<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>在方法C中，將式II的保護(hù)形式IIa通過(guò)與NH20H-HC1和p-TsCl反應(yīng)，以形成肟中伺體III和IV,在微波輻照下，在酸催化劑存在下加熱以形成Ic，接著脫保護(hù)而化成式Id化合物(方案3)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>式II的原料由吲哚酮V和醛VI通過(guò)縮合，接著與甲硅垸基烯醇醚VIII進(jìn)行第爾斯-阿爾德反應(yīng)來(lái)制備。方案4<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>備選地，如方案5中所示，式n化合物可以由式ix化合物通過(guò)與格利雅試劑的1，4-加成反應(yīng)來(lái)制備。方案5實(shí)施例本發(fā)明的化合物可以根據(jù)已知技術(shù)合成。提供下面的實(shí)施例和參考文獻(xiàn)以幫助本發(fā)明的理解，本發(fā)明的真實(shí)范圍在后附權(quán)利要求中陳述。實(shí)施例1通用合成步驟和原料實(shí)施例la中間體E/Z-取代的-亞甲基]-l,3-二氫』引哚-2-酮VII的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>VII向適宜的羥吲哚(92mmol)和醛(92mmol)在甲醇(100mL)中的混合物中，滴加吡咯垸(92mmo1)。然后將混合物于70。C加熱3h。在冷卻至4。C后，將混合物過(guò)濾，并且收集得到的沉淀物，將其干燥得到E/Z-取代的-亞甲基]-l,3-二氫』引哚-2-酮VII的混合物(>90%)。實(shí)施例lb外消旋-(6-烷氧基螺[環(huán)己烷-l，3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮II和外消旋-螺[5-環(huán)己烯-l,3，-[3H]吲哚]-2'，4(l，H)-二酮IX的制備(方案4)。19<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>(R3=OR)向在密封管中的E/Z-取代的-亞甲基]-l，3-二氫』引哚-2-酮VII(15.0mmol)在甲苯(50mL)中的懸浮液中，加入(3-甲氧基-l-亞甲基-烯丙基氧基)-三甲基-硅垸(3.44g，20.0mmol)。將反應(yīng)混合物于140。C攪拌24hrs。通過(guò)濃縮除去溶劑。將剩余物溶解于MeOH(50mL)中，并且用4NNaOH(5mL)于rt處理2hrs。然后將反應(yīng)混合物用AcOEt稀釋，并且用水和鹽水洗滌。在濃縮后，將剩余物由快速柱純化，得到外消旋-(6-烷氧基螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮II和外消旋-螺[5-環(huán)己烯-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮IX實(shí)施例lc由外消旋-螺[5-環(huán)己烯-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮IX制備外消旋-(6-取代的-螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]-2，，4(l，H)-二酮H(方案5)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>在配備有隔膜和攪拌棒的燒瓶中，CuCl(17.6mg，0.18mmol)和Ph3P(76.1mg，0.21mmol)的混合物懸浮在THF(2mL)中。于氬氣下，于rt攪拌30min之后，將外消旋-螺[5-環(huán)己烯-l，3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮IX(0.28mmol)以一份加入。在另外攪拌10min后，在5min期間，于0°C，將R3MgX(0.84mmol)滴加到得到的混合物中。于氬氣下，于0。C至-10。C攪拌lh之后，使用冰浴將反應(yīng)混合物攪拌過(guò)夜。然后，將飽和NH4C1加入到反應(yīng)混合物中。分離有機(jī)相。然后將混合物通過(guò)快速柱分離，得到外消旋-(6-取代的-螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]-2，，4(l，H)-二酮II*實(shí)施例2用于制備化合物I的通用程序方法A<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>由外消旋-(6-取代的)-螺[環(huán)己垸-l，3，-[3H]吲哚]-2，,4(rH)-二酮II經(jīng)由氯化鈦介導(dǎo)的環(huán)擴(kuò)張制備化合物I向外消旋-(6-取代的)-螺[環(huán)己垸-l，3，-[3H]吲哚]-2，，4(l，H)-二酮II(0.29毫摩爾)和NaN3(0.72毫摩爾)在MeCN(10mL)中的懸浮液中，加入TiCU(0.29毫摩爾)，并且將反應(yīng)混合物回流6-8hrs。在冷卻至rt后，通過(guò)加入飽和NaHC03，猝滅反應(yīng)。將反應(yīng)混合物用AcOEt萃取，并且通過(guò)濃縮除去溶劑。將剩余物由快速柱(15%-100%AcOEt在Hex中的溶液)純化，得到Ia和Ib的混合物。將混合物進(jìn)一步或者由常規(guī)快速柱分離，得到外消旋形式的化合物Ia和Ib，或者由手性柱分離，得到化合物Ia和Ib的純對(duì)映異構(gòu)體。方法B由外消旋-(6-取代的)-螺[環(huán)己垸-l,3，-[3H]吲哚]-2，，4(l，H)-二酮II經(jīng)由氯化鈦介導(dǎo)的環(huán)擴(kuò)張制備化合物I(方案4)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>步驟1將外消旋-(6-取代的)-螺[環(huán)己垸-1,3，-[3H]吲哚]-2，，4(l，H)-二酮II(0.52mmol)，NaOH(0.52毫摩爾)和NH20H-HC1(0.52mmol)在EtOH-水(3/2，20mL)中的懸浮液回流l-3hrs。將反應(yīng)物冷卻至室溫，并且加入水。將混合物用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層分離，用MgS04干燥，并且濃縮。將剩余物由色譜純化，得到相應(yīng)的肟，為白色固體。步驟2向上面得到的外消旋-E/Z-螺[環(huán)己烷-l，3，-[3H]吲哚]-2，，4(l'H)-二酮-4-月虧(0.39mmol)和DMAP(0.78mmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液中，于室溫加入對(duì)-甲苯磺酰氯(0.39mmol)在二氯甲垸(2mL)中的溶液。將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢?h。然后濃縮反應(yīng)物，并且將剩余物由色譜純化，得到螺[環(huán)己垸-l，3'-[3H]吲哚]-2，，4(rH)-二酮-4-(0-對(duì)-甲苯磺酰基)-肟的相應(yīng)E和Z異構(gòu)體，為白色固體。步驟3在步驟2中制備的外消旋-Z或E螺[環(huán)己烷-l，3，-[3H]吲哚]-2，，4(rH)-二酮_4-(0-對(duì)-甲苯磺?；?-月虧(1mmol)溶解于THF/H20(10/5mL)，并且在密封管中，在微波輻照下于100。C加熱30min。在用AcOEt稀釋后，將混合物用水洗滌，用Na2S04干燥并且濃縮。將剩余物由色譜純化，得到相應(yīng)的外消旋-螺[3H-吲哚-3,f-氮雜萆(azopane)]J,7，(rH)-二酮Ia或Ib，其可以進(jìn)一步由手性柱色譜分離，得到化合物Ia和Ib的純對(duì)映異構(gòu)體。實(shí)施例3制備外消旋-(3S,4R,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1，1',2,2'，3,5，6，7-八氫-5-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-卩引哚]-2'，7-二酮，禾B外消旋-(311,411,58)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-U',2,2',3,5,6,7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>以與實(shí)施例2(方法A)中所述的方法類似的方式，外消旋-(1R,2S,6S)-6，-氯-2-(3-氯苯基)-6-甲氧基螺[環(huán)己烷-1,3,-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮(156mg，0.4mmol)與NaN3(52mg，0.8毫摩爾)在TiC14(1.0M在CH2C12中的溶液，0.8mL)(Aldrich)存在下，在乙腈(10mL)中反應(yīng)，得到外消旋-(3S，4R,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基H，l'，2，2',3,5，6,7-八氫-5-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮(25.3mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C2oH,8Cl2N203+H[(M+H)+]計(jì)算值405.0767，實(shí)測(cè)值405.0765和外消旋-(3R，4R，5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-l,l',2，2'，3,5,6,7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮HRMS(ES+)m/z對(duì)于C2()H18C12N203十H[(M+H)+]計(jì)算值405.0767，實(shí)測(cè)值405.0768。制備(3S,4R,5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-U',2,2',3,5,6,7-八氫-3-(1-甲基乙烯基)-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮，(3R,4S,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基))-1，1',2,2',3,5,6,7-八氫-3-(1-甲基乙烯基螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮，(3S，4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基))-l,l'，2,2'，3，5，6，7-八氫-5-(l-甲基乙烯基螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮，禾Q(3R,4S，5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1,l'，2,2',3,5,6,7-八氫-5-(l-甲基乙烯基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-口引M.W.405.3C20H18Cl2N2O3實(shí)施例4哚]-2',7-二酮MW.415.3C22H20Cl2N2O2以與實(shí)施例2(方法A)中所述的方法類似的方式，外消旋-(lR，2S,6R)-6，-氯-2-(3-氯苯基)-6-異-丙烯基螺[環(huán)己烷-1，3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮(120mg，0.3mmol)與NaN3(39mg，0.6毫摩爾)在TiC14(1.0M在CH2C12中的溶液，0.3mL)(Aldrich)存在下，在乙腈(10mL)中反應(yīng)，隨后手性色譜分離，得到(3S,4R,5R)-6'_氯-5-(3-氯苯基)-l,l',2，2',3，5,6,7-八氫-3-(1-甲基乙烯基)-螺[411-氮雜罩-4,3'-[3司-吲哚]-2'，7-二酮(25.9mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C22H2。C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值415.0975，實(shí)測(cè)值415.0974;(3R，4S,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基))-l，1',2,2',3,5,6,7-八氫-3-(1-甲基乙烯基螺[4H-氮雜罩-4,3'-岡-吲哚]-2',7-二酮(28.8mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C22H2。C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值415.0975，實(shí)測(cè)值415.0975;(3S，4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基))-l,r,2,2',3,5，6，7-八氫-5-(1-甲基乙烯基螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮(20.7mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C22H2。C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值415.0975，實(shí)測(cè)值415.0974;和(3R，4S,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1，1',2,2',3,5,6,7-八氫-5-(1-甲基乙烯基)-螺[4^氮雜萆-4，3'-[3司-卩引哚]-2',7-二酮(21.6mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C22H2。C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值415.0975.，實(shí)測(cè)值415.0974。實(shí)施例5制備外消旋-(3S,4R，5R)-6'-氯-3,5-雙-(3-氯苯基)-1，1'，2,2',3，5，6，7-八氫螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮M.W.485.8C25H19C13N202以與實(shí)施例2(方法A)中所述的方法類似的方式，外消旋-(lR，2S,6S)-6，-氯-2-(3-氯苯基)-6-(3-氯苯基)-螺[環(huán)己烷-1,3，-[3H]吲哚]-2，,4(1，H)-二酮(141mg，0.3mmol)與NaN3(39mg，0,6毫摩爾)在TiC14(1.0M在CH2C12中的溶液，0.3mL)(Aldrich)存在下，在乙腈(10mL)中反應(yīng)，得到外消旋-(38，411,511)-6'-氯-3，5-雙-(3-氯苯基)-U',2，2',3，5,6，7-八氫螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮:HRMS(ES+)m/z對(duì)于C25H,9Cl3N202+H[(M+H)+]計(jì)算值:485.0585，實(shí)測(cè)值485.0585。實(shí)施例6制備(311,48，58)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1，l',2,2'，3，5,6,7-八氫-5(E)-(l-甲基-l-丙烯基)-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮；(3R,4S,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1,l',2,2'，3，5，6,7-八氫-3(E)-(l-甲基-l-丙烯基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮；(3S，4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l，r,2,2'，3，5,6,7-八氫-5(E)-(1-甲基-l-丙烯基)-螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮，禾卩(3S,4R,5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-U',2，2'，3,5,6,7-八氫-3(E)-(l-甲基-l-丙烯基)-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮M.W.429.3C23H22C12N20以與實(shí)施例2(方法A)中所述的方法類似的方式，外消旋-(1R,2S，6R)-6，-氯-2-(3-氯苯基)-6-(l-甲基-丙烯基)螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮(120mg，0.29mmol)與NaN3(47.1mg，0.72毫摩爾)在TiC14(1.0M在CH2C12中的溶液，0.29mL)(Aldrich)存在下，在乙腈(10mL)中反應(yīng)，隨后手性色譜分離，得到3R，4S,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-U'，2，2',3,5,6,7-八氫-5(E)-(l-甲基-l-丙烯基)-螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮(13.5mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C23H22C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值429.1131。實(shí)測(cè)值429.1131;(3R，4S，5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1,1'，2,2',3,5,6,7-八氫陽(yáng)3(E)-(1-甲基-1-丙烯基)-螺[4H-氮雜罩-4，3'-,-吲哚]-2',7-二酮(15.8mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C23H22C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值429.1131。實(shí)測(cè)值429.1131;(3S,4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1,1',2,2',3，5，6，7-八氫-5(E)-(l-甲基-l-丙烯基)-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮(13.7mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C23H22C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值429.1131。實(shí)測(cè)值429.1131;禾口(3S,4R,5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-l,l'，2，2',3，5,6,7-八氫-3(E)-(l-甲基-l-丙烯基)-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮(14.5mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C23H22C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值429.1131。實(shí)測(cè)值429.1131。制備外消旋-(3S,4R,5S)-6'-氯-3-(4-氯苯基)-l,^,2,2'，3,5，6，7-八氫-5-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮，禾Q外消旋-(3R，4R,5S)-6'-氯-5-(4-氯苯基)-U',2,2'，3,5,6,7-八氫-3-甲氧基-螺[41-氮雜萆-4，3'-[311]』引哚]-2',7-二酮實(shí)施例7<formula>formulaseeoriginaldocumentpage26</formula>以與實(shí)施例2(方法A)中所述的方法類似的方式，外消旋-(lR,2S,6S)-6'-氯-2-(4-氯苯基)-6-甲氧基螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮(312mg，0.8mmol)與NaN3(104mg，1.6毫摩爾)在TiC14(1.0M在CH2C12中的溶液，0.8mL)(Aldrich)存在下，在乙腈(20mL)中反應(yīng)，得到外消旋-(38,411,58)-6'-氯-3-(4-氯苯基)-1，1',2,2'，3,5，6,7-八氫-5-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮(18.6mg):HRMS(ES+)11^對(duì)于(:201118(:12:^203+H[(M+H)+]計(jì)算值405.0767。實(shí)測(cè)值405.0768;和外消旋-(311,411,58)-6'-氯_5—(4-氯苯基)-1，1',2，2',3,5，6，7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮(19.7mg):H畫S(ES+)111^對(duì)于(:20:180:12&03+H[(M+H)+]計(jì)算值405.0767。實(shí)測(cè)值405.0768。實(shí)施例8制備(3R,4R,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1，r，2,2',3，5,6,7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮，和(3S,4S，5R)-6，-氯-5-(3-氯苯基H,r,2，2'，3,5，6，7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-卩引哚]-2'，7-二酮<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>以與實(shí)施例2(方法A)中所述的方法類似的方式，外消旋-(1R,2S，6S)-6，-氯-2-(3-氯苯基)-6陽(yáng)甲氧基螺[環(huán)己垸-1,3，-網(wǎng)吲哚]-2，,4(l，H)-二酮(156mg，(X4mmol)與NaN3(52mg，0.8毫摩爾)在TiC14(1.0M在CH2C12中的溶液，0.8mL)(Aldrich)存在下，在乙腈(10mL)中反應(yīng)，隨后進(jìn)行手性色譜，得到(3民411，58)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1，1',2,2',3,5,6，7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮(17.6mg)和(3S，4S,5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1,1',2,2',3，5，6，7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮。實(shí)施例9制備(3S,4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l，l',2,2',3,5,6,7-八氫-5-(3-甲基苯基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-,-吲哚]-2'，7-二酮，(3S,4R，5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1,1'，2，2'，3,5，6,7-八氫-3-(3-甲基苯基)-螺[41€-氮雜萆-4,3'-[3司』引哚]-2'，7-二酮，(311,48，58)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1，1',2，2'，3,5，6，7-八氫-5-(3-甲基苯基)-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮，禾Q(3R,4S,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1,1'，2，2',3,5,6,7-八氫-3-(3-甲基苯基)-螺[411-氮雜萆-4,3'-[3司-吲哚]-2',7-二酮。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage28</formula>以與實(shí)施例2(方法八)中所述的方法類似的方式，外消旋-(111，28,611)-6'-氯-2-(3-氯苯基)-6-(3-甲基苯基)螺[環(huán)己垸-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮(140mg，0.31mmol)與NaN3(50.1mg，0.78亳摩爾)在TiCW(1.0M在CH2C12中的溶液，0.31mL)(Aldrich)存在下，在乙腈(10mL)中反應(yīng)，接著進(jìn)行手性色譜，得到(3S，4R，5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l,l',2,2'，3，5,6,7-八氫-5-(3-甲基苯基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮(11.2mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C26H22Cl2N202+H[(M+H)+]計(jì)算值465.1131。實(shí)測(cè)值465.1132;(3S，4R，5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1，1'，2,2'，3,5,6,7-八氫-3-(3-甲基苯基)-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮(10.7mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)fC26H22Cl2N202+H[(M+H)+]計(jì)算值465.1131。實(shí)測(cè)值465.1131;(3R,4S,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-U'，2,2',3,5，6,7-八氫-5-(3-甲基苯基)-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮(10.3mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C26H22C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值465.1131。實(shí)測(cè)值465.1131;和(3R,4S,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1，1'，2,2',3,5，6,7-八氫-3-(3-甲基苯基)-螺[41€-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮(10.1mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C26H22Cl2N202+H[(M+H)+]計(jì)算值465.1131。實(shí)測(cè)值465.1131。實(shí)施例10制備(3R，4S,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1,1'，2,2',3,5，6，7-八氫-3-(2-甲基苯基)-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮，(3R，4S,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l，^，2,2',3,5,6，7-八氫-5-(2-甲基苯基)-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮，(38,411,511)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1,1',2,2'，3,5,6，7-八氫-3-(2-甲基苯基)-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮，和(3S,4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1,1'，2,2',3,5,6，7-八氫-5-(2-甲基苯基)-螺[411-氮雜萆-4，3'-[3司』引哚]-2',7-二酮。M.W.465.4C26H22C12N202以與實(shí)施例2(方法A)中所述的方法類似的方式，外消旋-(lS,2S,6R)-6,-氯鄰-氯苯基)-6-(2_甲基苯基)螺[環(huán)己烷-1,3，-,吲哚]-2，,4(l，H)-二酮(115.0mg，0.26毫摩爾)與NaN3(42.3mg，0.65毫摩爾)在TiC14(1.0M在CH2C12中的溶液，0.26mL)(Aldrich)存在下，在乙腈(10mL)中反應(yīng)，接著進(jìn)行手性色譜，得到(3R，4S,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-U'，2,2'，3,5,6，7-八氫-3-(2-甲基苯基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮(11.0mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C26H22C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值465.1131。實(shí)測(cè)值465,1131;(3R，4S，5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l,r，2，2',3,5，6,7-八氫-5-(2-甲基苯基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮(10.6mg);HRMS(ES+)m/z對(duì)于C26H22C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值465.1131。實(shí)測(cè)值465.1130。(3S,4R,5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-l，r,2，2',3,5,6,7-八氫-3-(2-甲基苯基)-螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮(10,1mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C26H22Cl2N202+H[(M+H)+]計(jì)算值465.1131。實(shí)測(cè)值465.1131。(3S，4R，5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l,^，2,2'，3,5，6，7-八氫-5-(2-甲基苯基)-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮(10.2mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C26H22Cl2N202+H[(M+H)+]計(jì)算值465.1131。實(shí)測(cè)值465.1131。實(shí)施例11制備外消旋-(lR，2S，6S)-6，-氯-2-(3-氯苯基)-6-(2-甲基丙基)-螺[環(huán)己垸-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(rH)-二酮(方案2)在配備有隔膜和攪拌棒的燒瓶中，將CuCl(49.0mg，0.50mmol)和Ph3P(181.1mg，0.50mmol)的混合物懸浮在THF(10mL)中。在氬氣下，于rt攪拌30min后，將外消旋-(lR，2S)-6，-氯-2-(3-氯苯基)螺[5-環(huán)己烯-1，3，-[3H]吲哚]-2，，4(l'H)-二酮(179mg，0.50mmol)以一份加入。在另外攪拌10min后，于0。C，在5min的期間，將2-甲基丙基鎂化溴(2.0M在乙醚中的溶液，1.25mL，2.5mmol)滴加到得到的混合物中。在氬氣下，于0°C至-10。C將反應(yīng)混合物攪拌2.5h。然后加入飽和NH4C1，以猝滅反應(yīng)。分離有機(jī)相。TLC/MS(AcOEt/Hex=1/2)顯示所需要產(chǎn)物的兩種異構(gòu)體的混合物并且沒(méi)有SM。然后，將混合物用快速柱分離，得到外消旋-(lR,2S,6S)-6'-氯-2-(3-氯苯基)-6-(2-甲基丙基)-螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮(165.1mg，80.3%):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C23H23C12N02+H[(M+H)+]計(jì)算值416.1179，實(shí)測(cè)值416.1179。制備(3R，4S,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l,l',2,2',3,5,6,7-八氫-5-(2-甲基丙基)陽(yáng)螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮，(3R,4S,5R)-6，-氯-5-(3-氯苯M.W.416.4C23H23Cl2NO實(shí)施例12基)-U',2，2'，3,5,6,7-八氫-3-(2-甲基丙基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮，(3S,4R，5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基H,^,2，2',3,5,6,7-八氫-5-(2-甲基丙基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮，和(3S,4R,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1，1',2,2',3,5,6，7-八氫-3-(2-甲基丙基)-螺[41^氮雜萆-4，3'-[3司-卩引哚]-2',7-二酮。M.W.431.4C23H24C12N202步驟1將外消旋-(lR,2S,6S)-6，-氯-2-(3-氯苯基)-6-(2-甲基丙基)-螺[環(huán)己垸-1，3，-[3H]吲哚]-2，,4(rH)-二酮(135.0mg，0.32mmol)，NaOH(100.0mg，2.5毫摩爾)和NH20H-HC1(173.8mg，2.5mmol)在EtOH-7夂(3/2，5mL)中的懸浮液回流3hrs。將反應(yīng)物冷卻至室溫，并且加入水。將混合物用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層分離，用MgS04干燥，并且濃縮。將剩余物由色譜純化，得到相應(yīng)的肟(136.2mg，97.4%)，為白色固體，其在沒(méi)有進(jìn)一步純化的情況下用于下一步驟。步驟2向上面得到的外消旋-E/Z-螺[環(huán)己垸-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(rH)-二酮-4-月虧(130.0mg，0.30mmol)禾卩DMAP(80.5mg，0.66mmol)在二氯甲烷(2mL)中的溶液中，于室溫，加入對(duì)-甲苯磺酰氯(125.9mg，0.66mmol)在二氯甲垸(lmL)中的溶液。將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢?h。然后將反應(yīng)物濃縮，并且將剩余物由色譜純化，得到螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]-2，，4(rH)-二酮—4-(0-對(duì)-甲苯磺?；?-肟(135.9mg，77.3%)的相應(yīng)E和Z異構(gòu)體，為白色固體。其在沒(méi)有進(jìn)一步純化的情況下用于下一步驟。步驟3將在步驟2中制備的外消旋-Z-或-E-螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]-2，，4(l，H)-二酮-4-(0-對(duì)-甲苯磺酰基)-肟(120.0mg，0.21mmol)溶解于THF/H20(3/1.5mL)，并且在密封管中，在微波輻照下于100°C加熱20min。在用AcOEt稀釋后，將混合物用水洗滌，用Na2S04干燥并且濃縮。將剩余物由手性柱色譜純化，得到(3R,4S,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l,r,2，2',3,5，6，7-八氫-5-(2-甲基丙基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮(13.8mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C23H24C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值431.1288。實(shí)測(cè)值431.1287;(3R,4S,5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-l,r，2,2',3，5，6,7-八氫-3-(2-甲基丙基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮(15.1mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C23H24Cl2N202+H[(M+H)+]計(jì)算值431.1288。實(shí)測(cè)值431.1287;(3S,4R,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l,l',2，2'，3，5,6,7-八氫-5-(2-甲基丙基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮(14.1mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C23H24C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值431.128&。實(shí)測(cè)值431.1287;(38,411,58)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1，1'，2,2',3，5,6,7-八氫-3-(2-甲基丙基)-螺[4:-氮雜萆-4,3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮(15.2mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C23H24C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值431.1288。實(shí)測(cè)值431.1288。制備(3R,4S,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-環(huán)丙基-l，r，2,2',3,5,6,7-八氫螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮，(3R,4S，5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-環(huán)丙基-1，r,2,2',3,5,6，7-八氫螺[4H-氮雜草-4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮，(3S，4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-環(huán)丙基-U',2,2',3，5，6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]陽(yáng)2',7-二酮，和(38,411，511)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-環(huán)丙基-1,1'，2，2',3,5,6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮。實(shí)施例13<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>以與實(shí)施例2(方法B)中所述的方法類似的方式，將外消旋-(lR,2S，6R)-6，-氯-2-(3-氯苯基)陽(yáng)6-環(huán)丙基螺[環(huán)己垸-1,3，-[3H]吲哚]-2，，4(l,H)-二酮(148.1mg，0.37毫摩爾)與NH2OH-HCl(128.6mg，1.85mmol)，NaOH(74.0mg，1.85毫摩爾)在EtOH-水(3/2，10mL)中，在回流下反應(yīng)2hrs，接著與對(duì)-甲苯磺酰氯(141.1mg，0.74mmol)在二氯甲烷(1mL)中于室溫反應(yīng)30min，并且在微波輻照下于90°C加熱20min。在用AcOEt稀釋后，將混合物用水洗滌，用Na2S04干燥并且濃縮。將剩余物由手性柱色譜純化，得到(3R,4S,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-環(huán)丙基-1,1',2,2',3,5,6,7-八氫螺[4^氮雜萆-4,3'-[3印-吲哚]-2',7-二酮(22.5mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C22H2。Cl2N202+H[(M+H)+]計(jì)算值415.0975，實(shí)測(cè)值415.0974;(3R,4S,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-環(huán)丙基-l,l',2,2'，3,5，6,7-八氫螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮(25.8mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C22H2。C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值415.0975，實(shí)測(cè)值415.0974;(3S,4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-環(huán)丙基-U',2,2',3,5,6,7-八氫螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮(14.1mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C22H20Cl2N2O2+H[(M+H)+]計(jì)算值415.0975，實(shí)測(cè)值415.0975;禾卩(3S,4R,5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-環(huán)丙基-1，1',2,2',3,5,6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮(15.2mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C22H2。C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值415.0975，實(shí)測(cè)值415.0975。實(shí)施例14制備(3R,4S，5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l,l',2，2',3，5,6,7-八氫-5-(l-甲基乙基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-,-吲哚]-2',7-二酮，(3R，4S，5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1，1',2,2',3,5，6,7-八氫-3-(1-甲基乙基)-螺[411-氮雜萆-4,3'-[3司』引哚]-2',7-二酮，(38,411,511)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1,1',2，2'，3，5，6,7-八氫-5-(l-甲基乙基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-,-吲哚]-2',7-二酮，(3S，4R，5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1,r，2，2',3，5,6,7-八氫-3-(l-甲基乙基)-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮。M.W.417.3C22H22C12N20以與實(shí)施例2(方法B)中所述的方法類似的方式，外消旋-(lR，2S,6R)-6，-氯-2-(3-氯苯基)-6-(1-甲基乙基)-螺[環(huán)己烷-1，3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮(402.3mg，1.00毫摩爾)與NH2OH-HCl(347.5mg，5.00mmol)，NaOH(200.0mg，5.00毫摩爾)在EtOH-水(3/2，15mL)中，在回流下反應(yīng)3hrs，接著與對(duì)-甲苯磺酰氯(762.8mg，4.00mmol)在二氯甲垸(20mL)中，于室溫反應(yīng)2hrs，并且在微波輻照下于100。C加熱20min。在用AcOEt稀釋后，將混合物用水洗滌，用Na2S04干燥并且濃縮。將剩余物由手性柱色譜純化，得到(311，48,58)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1,1',2,2'，3,5,6，7-八氫-5-(l-甲基乙基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮(18.9mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C22H22C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值417.1131。實(shí)測(cè)值417.1132;(3R，4S,5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-l，l'，2,2'，3,5,6,7-八氫-3-(l-甲基乙基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮(18.2mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C22H22C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值417.1131。實(shí)測(cè)值417.1132;(3S,4R，5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1,1'，2,2'，3，5，6,7-八氫-5-(1—甲基乙基)-螺[4H-氮雜罩—4,3'-[3H]-n引哚]-2',7-二酮(17.6mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C22H22C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值:417.1131。實(shí)測(cè)值417.1132;和(3S，4R,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1，r,2，2',3，5,6,7-八氫-3-(l-甲基乙基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-n引哚]-2',7-二酮(15.1mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C22H22Cl2N202+H[(M+H)+]計(jì)算值417.1131，實(shí)測(cè)值417.1132。實(shí)施例15制備(3R,4S,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-(5-氟-2-甲基苯基)-U',2，2'，3,5，6，7-八氫螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮，(3R，4S,5S)-6，-氯-5-(3-氯苯基)-3-(5-氟-2-甲基苯基)-1,1',2,2',3,5,6,7-八氫螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮，(3S,4R,5R)-6，-氯-3-(3-氯苯基)-5-(5-氟-2-甲基苯基)-l，l',2,2'，3，5,6，7-八氫螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮(3S,4R,5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-(5-氟-2-甲基苯基)-l,r,2，2',3,5，6,7-八氫螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮。M.W.483.4C26H21C12FN202以與實(shí)施例2(方法B)中所述的方法類似的方式，外消旋-(1S，2S，6R)-6，-氯-2-(3-氯苯基)-6-(5-氟-2-甲基苯基)-螺[環(huán)己垸-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮(130.0mg，0.28毫摩爾)與NH20H-HC1(97.3mg，1.40mmol)，NaOH(56.0mg，1.40毫摩爾)在EtOH-水(3/2，5mL)中，在回流下反應(yīng)3hrs，接著與對(duì)-甲苯磺酰氯(114.4mg，0.60mmol)在二氯甲垸(10mL)中，于室溫反應(yīng)2hrs，并且在微波輻照下于100。C加熱20min。在用AcOEt稀釋后，將混合物用水洗滌，用Na2S04干燥并且濃縮。將剩余物由手性柱色譜純化，得到(3R,4S，5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-(5-氟-2-甲基苯基)-U'，2,2',3,5，6,7-八氫螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮(15.9mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C26H2,Cl2FN202+H[(M+H)+]計(jì)算值483.1037，實(shí)測(cè)值483.1036;(3R,4S，5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-(5-氟-2-甲基苯基)-U'，2，2'，3,5,6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮(11.3mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C26H21C12FN202+H[(M+H)+]計(jì)算值483.1037，實(shí)測(cè)值483.1037;(3S，4R，5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-(5-氟-2-甲基苯基)-l,r,2，2',3,5,6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮(8.3mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C26H21C12FN202+H[(M+H)+]計(jì)算值483.1037，實(shí)測(cè)值483.1036;(3S,4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-(5-氟-2-甲基苯基)-U'，2，2'，3,5,6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮(12.5mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C26H"Cl2FN202+H[(M+H)+]計(jì)算值483.1037，實(shí)測(cè)值483.1038。實(shí)施例16制備(3R，4S,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-U',2，2'，3，5，6，7-八氫-5-苯基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮，(3民48,58)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1，1'，2,2',3,5,6,7-八氫-3-苯基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮，(38,411,511)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-U',2,2',3，5,6,7-八氫-3-苯基-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮，(3S,4R,5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-U',2，2',3,5,6,7-八氫-3-苯基-螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]-卩引哚〗-2',7-二酮。M.W.451.4C25H20Cl2N2O2以與實(shí)施例2(方法B)中所述的方法類似的方式，外消旋-(1R，2S,6R)-6，-氯-2-(3-氯苯基)-6-苯基螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(rH)-二酮(150.0mg，0.34毫摩爾)與NH2OH-HCl(119.5mg，1.72mmol)，NaOH(68.8mg，1.72毫摩爾)在EtOH-水(3/2，10mL)中，在回流下反應(yīng)2hrs，接著與對(duì)-甲苯磺酰氯(133.1mg，0.70mmol)在二氯甲垸(10mL)中，于室溫反應(yīng)2hrs，并且在微波輻照下于90°C加熱20min。在用AcOEt稀釋后，將混合物用水洗滌，用Na2S04干燥并且濃縮。將剩余物由手性柱色譜純化，得到(3R,4S,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l,r,2,2',3,5,6,7-八氫-5-苯基-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-B引哚]-2'，7-二酮(19.4mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C25H2。C12N202+H[(M+H)+]計(jì)算值451.0975，實(shí)測(cè)值451.0974;(3R，4S,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1,1'，2,2',3,5,6，7-八氫-3-苯基-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]隱吲哚]-2',7-二酮(20.1mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C25H2()C12N202十H[(M+H)+]計(jì)算值451.0975，實(shí)測(cè)值451.0974;(3S,4R，5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-U',2,2',3，5,6,7-八氫-3-苯基-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮(20.5mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C25H2oCl2N202+H[(M+H)+]計(jì)算值451.0975。實(shí)測(cè)值451.0974;(3S，4R,5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1，1',2,2',3,5，6,7-八氫-3-苯基-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H〗-卩引哚]-2'，7-二酮(21.6mg):HRMS(ES+)111^對(duì)于(3251120(:12:^202+H[(M+H)+]計(jì)算值451.0975。實(shí)測(cè)值451.0974。實(shí)施例17制備外消旋-(3S,4R,5S)-6'-溴-3-(3-氯苯基)-l，l'，2,2',3,5,6，7-八氫-5-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-卩引哚]-2'，7-二酮，外消旋-(3R,4R,5S)-6'-溴-5-(3-氯苯基)-l，r,2,2',3,5，6,7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮<formula>formulaseeoriginaldocumentpage37</formula>步驟1制備中間體E/Z-6-溴-3-(3-氯-苯亞甲基)-1，3-二氫-卩引哚-2-酮<formula>formulaseeoriginaldocumentpage37</formula>M.W,334.60C15H9BrClNO向6-溴羥吲哚(5g，23.6mmol)(Combi-blocks)和3-氯-苯甲醛(3.3g，23.6mmol)(Aldrich)在甲醇(50mL)中的混合物中，滴加吡咯烷(1.7g，23.6mmol)(Aldrich)。然后，將混合物于卯。C加熱4h。在冷卻至0。C之后，將混合物過(guò)濾，并且將得到的沉淀物收集，干燥，得到E/Z-6-溴-3-(3-氯-苯亞甲基)-l，3-二氫-卩引哚-2-酮物混合物，為亮黃色固體(收率5g，63%)。步驟2制備外消旋-(lR，2R)-6，-溴-2-(3-氯苯基)螺[5-環(huán)己烯-1,3，-[3H]吲哚]-2，，4(l，H)-二酮，外消旋-(lR，2S)-6，-溴-2-(3-氯苯基)螺[5-環(huán)己烯-1,3，-[3印吲哚]-2，,4(1，印-二酮，和外消旋-(lR,2S,6S)-6，-溴-2-(3-氯苯基)-6-甲氧基螺[環(huán)己垸-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮。向在密封管中的E/Z-6-溴-3-(3-氯-苯亞甲基)-l，3-二氫-卩引哚-2-酮(4.3g，12.9mmol)在甲苯(50mL)中的懸浮液中，加入(3-甲氧基-l-亞甲基-烯丙基氧基)-三甲基-硅垸(5g，29mmol)。將反應(yīng)混合物于150。C攪拌24h。通過(guò)濃縮除去溶劑。將剩余物溶解于MeOH(80mL)，并且用1NNaOH(20mL)于室溫處理2h。然后將反應(yīng)混合物用AcOEt稀釋，并且用水和鹽水洗滌。在濃縮后，將剩余物由快速柱(11。/。-25。/。AcOEt在Hex中的溶液)純化，得到外消旋-(lR，2R)-6，-溴-2-(3-氯苯基)-螺[5-環(huán)己烯-l,3'-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮(0.4g，7.7%)，為白色固體。HRMS(ES+)m/z對(duì)于C19H13BrClN02+H[(M+H)+]計(jì)算值401.9891。實(shí)測(cè)值401.9891;外消旋-(lR，2S)-6，-溴-2-(3-氯苯基)螺[5-環(huán)己烯-l，3，-[3H]吲哚]-2，，4(l，H)-二酮(1.2g，23%),為白色固體。HRMS(ES+)m/z對(duì)于C19H13BrClN02+H[(M+H)+]計(jì)算值:401.9891。實(shí)測(cè)值401.9891;和外消旋-(lR,2S,6S)-6，-溴-2-(3-氯苯基)-6-甲氧基螺[環(huán)己烷-l，3'-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮(2.1g，39.8%)，為灰白色固體。HRMS(ES+)柳/z對(duì)于C20H17BrClNO3+H[(M+H)+]計(jì)算值434.0153，實(shí)測(cè)值434.0153。步驟3制備外消旋-E-(lS，2S,6S)-6，-溴-2-(3-氯苯基)-6-甲氧基-螺[環(huán)己烷-l，3，-[3H]吲哚]—2，，4(l，H)-二酮-4-肟和外消旋-Z-(lS,2S，6S)-6，-溴-2-(3-氯苯基)-6-甲氧基-螺[環(huán)己烷-1,3，-[3司吲哚]-2，,4(1，印-二酮-4-肟<formula>formulaseeoriginaldocumentpage39</formula>向外消旋-(lR,2S,6S)-6，-溴-2-(3-氯苯基)-6-甲氧基螺[環(huán)己垸-l,3，-[3H]口引哚]-2，,4(l，H)-二酮(1.69g，3.89mmol)禾口NH4OH-HCl(0.27g，3.89mmol)在EtOH(40mL)中的懸浮液中，加入NaOH水溶液(1N，4mL，4mmol)。將反應(yīng)混合物加熱回流lh。TLC分析指示形成了需要的產(chǎn)物并且原料完全消耗。將反應(yīng)物冷卻至室溫，并且加入水。將混合物用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層分離，用MgS04干燥，并且濃縮。將剩余物由色譜(EtOAc:己垸=1;3，l:2，然后1:l)純化，得到極性較低的產(chǎn)物外消旋-E-(lR,2S,6S)-6，-溴-2-(3-氯苯基)-6-甲氧基螺[環(huán)己烷-1,3，-[3司吲哚]-2，,4(1，11)-二酮-4-月虧，為白色固體(0.8g，46%):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C22H18BrClN203+H[(M+H)+]計(jì)算值449.0262，實(shí)測(cè)值449.0260;外消旋7-(1!1,28，68)-6，-溴-2-(3-氯苯基)-6-甲氧基螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮-4-肟，為白色固體(0.8g，46%):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C22H18BrClN203+H[(M+H)+]計(jì)算值449.0262，實(shí)測(cè)值449.0261。步驟4制備外消旋-E-(lR,2S,6S)-6'-溴-2-(3-氯苯基)-6-甲氧基l-螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]U(rH)-二酮4-(0-對(duì)-甲苯磺?；?-肟和外消旋-Z-(lR^S，6S)-6，-溴-2-(3-氯苯基)-6-甲氧基1-螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]-2，，4(l，H)-二酮-4-(0-對(duì)-甲苯磺酰基)-月虧向外消旋-E-(1R,2S,6S)-6，-溴-2-(3-氯苯基)-6-甲氧基螺[環(huán)己垸-1,3，-[3H]B引哚]-2，，4(rH)-二酮-4-肟(0.7g，1.56mmol)和DMAP(0.19g，1.56mmol)在二氯甲烷(35mL)中的溶液中，于室溫加入對(duì)-甲苯磺酰氯(0.3g,1.56mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液。將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢?h。然后將混合物濃縮，并且將剩余物由色譜(20%-40%AcOEt在己垸中的溶液)純化，得到外消旋-E-(lR，2S,6S)-6'-溴-2-(3-氯苯基)-6-甲氧基螺[環(huán)己烷-l,3'-[3H]吲哚]-2'，4(l'H)-二酮-4-(0-對(duì)-甲苯磺?；?月虧)，為白色固體(0.72g，77%):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C27H24BrClSN205+H[(M+H)+]計(jì)算值603.0351，實(shí)測(cè)值603.0352。向外消旋-Z-(lR,2S,6S)-6，-溴-2-(3-氯苯基)-6-甲氧基螺[環(huán)己垸陽(yáng)1,3，-[3H]口引哚]-2，，4(1，H)-二酮-4-月虧(0.67g，1.49mmol)禾口DMAP(0.18g，1.49mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液中，于室溫加入對(duì)-甲苯磺酰氯(0.28g，1.49mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液。將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢?h。然后將混合物濃縮，并且將剩余物由色譜(20%-40%AcOEt在己烷中的溶液)純化，得到外消旋-E-(lR,2S,6S)-6，-溴-2-(3-氯苯基)-6-甲氧基螺[環(huán)己烷-1,3，-[3H]吲哚]-2，，4(l，H)-二酮-4-(0-對(duì)-甲苯磺酰基)-月虧，為白色固體(0.7g，78%):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C27H24BrClSN205+H[(M+H)+]計(jì)算值603.0351，實(shí)測(cè)值..603.0351。步驟5制備外消旋-(3'S，3S，5'S)-6-溴-3，-(3-氯苯基)-5，-甲氧基螺[3H-吲哚-3，4，-氮雜萆(azopane)]-2,7，(l，H)-二酮，和外消旋-(3，R，3S，5,S)陽(yáng)6-溴-5，-(3-氯苯基)-3，-甲氧基螺[3H-吲哚-3，4，-氮雜罩(azopane)]-2,7，(l，H)-二酮將在步驟4中制備的外消旋-Z-(lR,2S,6S)-6'-溴-2-(3-氯苯基)-6-甲氧基螺[環(huán)己烷-1,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮-4-(0-對(duì)-甲苯磺?；?-肟(0.6g，1mmol)溶解于THF/H2O(10/5mL)中，并且在密封管中，在微波輻照下于100。C加熱30min。在用AcOEt稀釋后，將混合物用水洗滌，用Na2S04干燥并且濃縮。將剩余物由色譜(5。/。MeOH在EtOAc中的溶液)純化，得到外消旋-(3，S，3S，5'S)-6-溴-3，-(3-氯苯基)-5'-甲氧基螺[3H-吲哚-3,4，-氮雜萆(azopane)]-2,7，(l，H)-二酮，為白色固體(0.25g，56%):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C2。H!sBrClN203+H[(M+H)+]計(jì)算值449.0262，實(shí)測(cè)值449.0261。將在步驟4中制備的外消旋-E-(lR,2S,6S)-6'-溴-2-(3-氯苯基)-6-甲氧基螺[環(huán)己院-1,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮-4-(0-對(duì)-甲苯磺?；?-肟(0.4g，0.66mmol)溶解于THF/H20(10/5mL)，并且在密封管中，在微波輻照下于100。C加熱30min。在用AcOEt稀釋后，將混合物用水洗滌，用Na2S04干燥并且濃縮。將剩余物由色譜(5。/。MeOH在EtOAc中的溶液)純化，得到外消旋-(3，R，3S，5'S)-6-溴-5'-(3-氯苯基)-3'-甲氧基螺[3H-吲哚-3,4'-氮雜罩(azopane)]-2,7，(l，H)-二酮，為白色固體(0.15g，51%):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C2oH,8BrClN203+H[(M+H)+]計(jì)算值449.0262，實(shí)測(cè)值449.0262。實(shí)施例18制備(3S,4R,5R)-6'-溴-5-(3-氯苯基)-l，l'，2,2',3，5，6，7-八氫-3-(1-甲基乙烯基)-螺[4H-氮雜罩-4，3'-,-口引哚]-2',7-二酮，(3R，4S,5S)-6'-溴-5-(3-氯苯基))-1，1',2,2',3,5,6,7-八氫-3-(1-甲基乙烯基螺[4H-氮雜萆-4,3'-,-吲哚]-2',7-二酮，(3S，4R，5R)-6'-溴-3-(3-氯苯基))-1,1',2,2',3，5,6,7-八氫-5-(1-甲基乙烯基螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮，和(3R,4S,5S)-6'-溴-3-(3-氯苯基)-U',2,2',3,5,6,7-八氫-5-(l-甲基乙烯基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮M.W.459.8C22H20BrClN2O<formula>formulaseeoriginaldocumentpage41</formula>步驟1制備外消旋-(lS^S,6S)-6，-溴-2-(3-氯苯基)-6-(l-甲基乙烯基)-螺[環(huán)己垸-1,3，-[3H]吲哚]-2，，4(l，H)-二酮<formula>formulaseeoriginaldocumentpage42</formula>在配備有隔膜和攪拌棒的燒瓶中，將CuCl(0.11g，1.1mmol)和Ph3P(0.41g，l.lmmol)的混合物懸浮在THF(20mL)中。在氬氣下，于rt攪拌30min后，將在實(shí)施例17的步驟2中制備的外消旋-(1R，2S)-6'-溴-2-(3-氯苯基)-螺[5-環(huán)己烯-1,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮(0.45g，1,1mmol)的THF溶液以一份加入。在另外攪拌10min后，在5min的期間，于0。C將異丙烯基鎂化溴(0.5M在乙醚中的溶液，llmL，5.6mmol)滴加到得到的混合物中。在氬氣下，于0。C至-10。C攪拌1h后，將反應(yīng)混合物慢慢地溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?h。然后將飽和NH4C1加入到反應(yīng)混合物。分離有機(jī)相。TLC和LC-MS分析指示形成了需要的產(chǎn)物并且原料完全消耗。然后將混合物由快速柱分離，得到外消旋-(lS，2S，6R)-6，-溴-2-(3-氯苯基)-6-(l-甲基乙烯基)-螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮(0.24g，49%),為白色固體HRMS(ES+)11^對(duì)于(:221119;6《11^02+H[(M+H)+]計(jì)算值444.0361，實(shí)測(cè)值444.0361。步驟2制備外消旋-E/Z-(lS^S,6S)-6，-溴ip-氯苯基)-6-(l-甲基乙烯基)-螺[環(huán)己垸-l，3'-[3H]吲哚]-2',4(l'H)-二酮-4-肟38253-157將外消旋-(lS，2S，6R)-6，-溴-2-(3-氯苯基)-6-異丙烯基螺[環(huán)己烷-1,3，-[3司卩引哚]-2，,4(1，11)-二酮(0.23g，0.52mmol)和麗40H-HCl(0.1g，0.52mmol)在EtOH-水(3/2，20mL)中的懸浮液回流lh。TLC分析指示形成了需要的產(chǎn)物并且原料完全消耗。將反應(yīng)物冷卻至室溫，并且加入水。將混合物用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層分離，用MgS04干燥，并且濃縮。將剩余物由色譜(EtOAc:己烷=1:2，然后l:l)純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(0.18g，75%):H脂S(ES+)m/z對(duì)于C22H2oBrClN202十H[(M+H)+]計(jì)算值459.0470，實(shí)測(cè)值459.0470。步驟3制備外消旋-E/Z-(1S，2S,6S)-6，-溴-2-(3-氯苯基)-6-異-丙烯基螺[環(huán)己烷-1,3，-[3H]吲哚]-2',4(rH)-二酮-4-(0-對(duì)-甲苯磺?；?-肟<formula>formulaseeoriginaldocumentpage43</formula>向外消旋-E/Z-(lS^S,6S)-6，-溴-2-(3_氯苯基)-6-異-丙烯基螺[環(huán)己烷-1,3，-[3H]n引哚]-2，,4(rH)-二酮-4-月虧(0.18g，0.39mmol)和DMAP(0.1g，0.78mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液中，于室溫加入對(duì)-甲苯磺酰氯(74mg，0.39mmol)在二氯甲垸(10mL)中的溶液。將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢鑜h。然后將反應(yīng)物濃縮，并且將剩余物由色譜(20%-40。/。AcOEt在己烷中的溶液)純化，得到外消旋-E/Z-(lS,2S,6S)-6'-溴-2-(3-氯苯基)-6-異-丙烯基螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮-4-(O-對(duì)-甲苯磺酰基)-肟，為白色固體(0.12g，50%):HRMS(ES+)11^對(duì)于(:29112681"(:18^04+H[(M+H)+]計(jì)算值613.0558，實(shí)測(cè)值613.0558。步驟4將外消旋-E/Z-(lS,2S,6S)-6，-溴-2-(3-氯苯基)-6-異-丙烯基螺[環(huán)己烷-1,3，-[3司吲哚]-2，，4(1，印-二酮-4-(O-對(duì)-甲苯磺酰基-月虧)(0.1g，0.16mmol)溶解于THF/H2O(10/5mL)，并且在密封管中，在微波輻照下于IOO。C加熱25min。在用AcOEt稀釋后，將混合物用水洗滌，用Na2S04干燥并且濃縮。將剩余物由色譜(EtOAc)純化，得到外消旋-(3，S，3R，5'R)-6-溴-3，-(3-氯苯基)-5，-異-丙烯基螺口H-吲哚-3^-氮雜萆(az叩ane)]J,7，(l，H)-二酮和外消旋-(3，R，3R，5，S)-6-溴-5'-(3-氯苯基)-3，-異-丙烯基螺[3H-吲哚-3，4，-氮雜萆(azopane)]-W(l，H)-二酮的混合物，為白色固體(81mg)。將混合物進(jìn)一步由手性SFC分離，得到(3S,4R,5R)-6'-溴-5-(3-氯苯基)-U',2,2',3,5,6,7-八氫-3-(l-甲基乙烯基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮(HRMS(ES+)m/z對(duì)于C22H2。BrClN202+H[(M+H)+]計(jì)算值459.0470，實(shí)測(cè)值459.0470;(3R,4S，5S)-6'-溴-5-(3-氯苯基))-1，1',2,2',3,5，6,7-八氫-3-(1-甲基乙烯基螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮HRMS(ES+)m/z對(duì)于C22H2。BrClN202+11[(]^+11)+]計(jì)算值:459.0470，實(shí)測(cè)值459.0468;(3S,4R,5R)-6'-溴-3-(3-氯苯基))-1,1'，2，2',3，5,6,7-八氫-5-(l-甲基乙烯基螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮HRMS(ES+)m/z對(duì)于C22H2。BrClN202+H[(M+H)+]計(jì)算值459.0470，實(shí)測(cè)值:459.0470;和(3R,4S,5S)-6'-溴-3-(3-氯苯基)-1,1',2,2'，3,5,6，7-八氫-5-(1-甲基乙烯基)-螺[411-氮雜罩-4,3'-[3司-吲哚]-2'，7-二酮HRMS(ES+)11^對(duì)于(:22112。81€11^202+H[(M+H)+]計(jì)算值459.0470，實(shí)測(cè)值459.0468。實(shí)施例19制備外消旋-(3S,4R,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1，1'，2，2',3,5，6,7-八氫-5-甲氧基-l-甲基-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮(方案3)44M.W.419.3C21H20Cl2N2O3步驟1向外消旋-(lR，2S,6S)-6，-氯-2-(3-氯苯基)-6-甲氧基-螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]口引哚]-2，，4(l，H)-二酮(500mg，1.28毫摩爾)的溶液中，于室溫加入NaH(60%，52mg，1.28毫摩爾)。在攪拌30min后，加入無(wú)水THF(3mL)，并且將反應(yīng)混合物攪拌另外20min。然后將反應(yīng)混合物冷卻至0。C，并且加入2-三甲代甲硅垸基)乙氧基甲基氯(213.0mg，1.28毫摩爾)在無(wú)水THF(2mL)中的溶液。于相同的溫度攪拌30min后，將反應(yīng)混合物用飽和NH4C1猝滅，并且用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層分離，用MgS04干燥，并且濃縮。將剩余物由色譜純化，得到外消旋-(lR，2S，6S)-6'-氯-2-(3-氯苯基)-6-甲氧基-1，-(2-三甲基甲硅垸基-乙氧基甲基)-螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(^H)-二酮(370.0mg，57.0%)。步驟2將外消旋-(lR,2S，6S)-6，-氯-2-(3-氯苯基)-6-甲氧基-l，-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-螺[環(huán)己垸-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮(360.0mg，0.69mmol)，NaOH(55.2mg，1.38毫摩爾)和NH20H-HC1(95.9mg，1.38mmo1)在EtOH-水(3/2，15mL)中的懸浮液回流1.5hrs。將反應(yīng)物冷卻至室溫，并且加入水。將混合物用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層分離，用MgS04干燥，并且濃縮。將剩余物由色譜純化，得到相應(yīng)的肟，其在沒(méi)有進(jìn)一步純化的情況下用于下一步驟。步驟3向上面得到的外消旋-E/Z-螺[環(huán)己垸-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l'H)-二酮-4-肟和DMAP(127.1mg，1.04mmol)在二氯甲垸(15mL)中的溶液中，于室溫加入對(duì)-甲苯磺酰氯(197.4mg，1.04mmol)在二氯甲烷(lmL)中的溶液。將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢鑜h。然后將反應(yīng)物濃縮，并且將剩余物由柱色譜純化，得到螺[環(huán)己烷-l，3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮-4-(0-對(duì)-甲苯磺?；?-肟的相應(yīng)E異構(gòu)體(110.5mg，兩個(gè)步驟中22.7%)，其在沒(méi)有進(jìn)一步純化的情況下用于下一步驟。步驟4將在步驟3中制備的外消旋-E-螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮_4-(0-對(duì)-甲苯磺?；?-肟(110.0mg，0.16mmol)溶解于THF/H20(5/5mL)中，并且在密封管中，在微波輻照下于90。C加熱20min。在用AcOEt稀釋后，將混合物用水洗滌，用Na2S04干燥并且濃縮。將剩余物由柱色譜純化，得到外消旋-(3S，4R,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1,1'，2，2',3,5,6，7-八氫-5-甲氧基-l，-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮(58.3mg，69.7%)步驟5將外消旋-(38，411,58)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1,1'，2，2',3,5,6，7-八氫-5-甲氧基-l，-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮(54mg，1.0毫摩爾)溶解于DMF(2mL)中，并且于0。C加入NaH(600/0，8.0mg，0.2毫摩爾)。于相同的溫度攪拌10min后，通過(guò)注射加入MeI(71.0mg，0.5毫摩爾)。將反應(yīng)混合物于0。C至rt攪拌2hrs。在用AcOEt稀釋后，將混合物用水洗滌，用Na2S04干燥并且濃縮。將剩余物在沒(méi)有進(jìn)一步純化的情況下用于下一步驟。步驟6將上面得到的剩余物溶解于THF(10mL)中，并且于rt加入TBAF(1.0M，0.4mL)。將反應(yīng)混合物在回流下加熱16hrs。在用AcOEt稀釋后，將混合物用水洗滌，用Na2S04干燥并且濃縮。將剩余物由柱色譜純化，得到外消旋-(3S,4R，5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-U',2，2',3,5,6,7-八氫-5-甲氧基-l-甲基-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮。HRMS(ES+)m/z對(duì)于C2,H2oCl2N203+H[(M+H)+]計(jì)算值419.0924。實(shí)測(cè)值419.0925。實(shí)施例20制備外消旋-(3R，4R,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-l，l'，2，2'，3，5，6,7-八氫-3-甲氧基小甲基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮o、M.W.419.3C21H20Cl2N2O以與實(shí)施例18，步驟4-6中所述的方法類似的方式，將在上面的步驟3中制備的外消旋-Z螺[環(huán)己垸-l,3，-[3H]吲哚]-2，，4(l，H)-二酮-4-(O-對(duì)-甲苯磺?；?-肟(150.0mg，0.21mmol)在密封管中，在微波輻照下于90。C加熱20min，隨后甲基化，脫保護(hù)和由柱色譜純化，得到外消旋-(3R,4R,5S)-6，-氯-5-(3-氯苯基)-1,1',2，2'，3,5,6,7-八氫-3-甲氧基-1-甲基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮(48.0mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C2,H2。Cl2N203+H[(M+H)+]計(jì)算值:419.0924。實(shí)測(cè)值419.0923。實(shí)施例21制備外消旋-(3S,4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l-乙基-l,r,2,2',3，5,6,7-八氫-5-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮以與實(shí)施例18，步驟4-6中所述的方法類似的方式，將在上面的步驟3中制備的外消旋-E螺[環(huán)己烷-l，3，-[3H]吲哚]-2，，4(l，H)-二酮-4-(0-對(duì)-甲苯磺?；?-肟(100.0mg，0.14mmol)在密封管中，在微波輻照下于90。C加熱20min，隨后乙基化，脫保護(hù)(50%TFA/CH2C12)和由柱色譜純化，得M.W.433.3C22H22C12N20到外消旋-(3S，4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l-乙基-l，l',2,2'，3,5,6，7-八氫-5-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚〗-2',7-二酮(26.0mg，3個(gè)步驟中60%):HRMS(ES+)111/2對(duì)于(:221122(:12^[203+H[(M+H)+]計(jì)算值433.1080。實(shí)測(cè)值433.1081。實(shí)施例22制備外消旋-(3R，4R,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-l-乙基-l，r，2，2',3,5,6，7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮以與實(shí)施例18，步驟4-6中所述的方法類似的方式，將在上面的步驟3中制備的外消旋-Z螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮-4-(0-對(duì)-甲苯磺酰基)-躬(225mg，0.32mmol)在密封管中，在微波輻照下于90。C加熱20min，隨后乙基化，脫保護(hù)(50。/。TFA/CH2C12)和由柱色譜純化，得到外消旋-(3R，4R，5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-l-乙基-l,l',2,2'，3，5,6,7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮(36.0mg，3個(gè)步驟中42%):HRMS(ES+)111/2對(duì)于(:221122(:12:^203+H[(M+H)+]計(jì)算值433.1080。實(shí)測(cè)值433.1080。制備(3S,4S,5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-乙氧基-U'，2,2'，3，5，6，7-八氫螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮，(3R,4R，5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-乙氧基-1,r,2,2'，3,5，6,7-八氫螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮，(3S,4R，5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-乙氧基-U'，2,2',3,5,6，7-八氫螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮，和(3R,4S,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-乙氧基-1，1',2,2'，3，5,6,7-八氫螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-卩引哚]-2'，7-二酮M.W.433.3C22H22C12N20實(shí)施例23M.W.419.3C21H20Cl2N2O制備(3-乙氧基-l-亞甲基-烯丙基氧基)-三甲基-硅烷步驟1和步驟2在裝配有由潤(rùn)滑橡膠套密封的Hershberg攪拌器、滴液漏斗和連接到氯化鈣干燥管的回流冷凝器的三頸燒瓶中，放入46.5g的甲醇鈉(0.86毫摩爾，l.Oeq)和lL的乙醚。將燒瓶在冰浴中冷卻，并且通過(guò)滴液漏斗，以約2滴/秒的速率，在攪拌的情況下，在約1小時(shí)的期間加入46.2§的丙酮(0.8毫摩爾，1eq)和59.2g的甲酸乙酯(0.8毫摩爾，1eq)的混合物。在冰浴在場(chǎng)的情況下，繼續(xù)攪拌15分鐘，然后在將其移走之后攪拌l小時(shí)。在通過(guò)NMR檢査形成產(chǎn)物l之后，除去乙醚。然后將固體溶解于lL的EtOH中，將其在冰浴中冷卻，并且在攪拌的情況下，通過(guò)滴液漏斗加入在500ml的EtOH中的40ml的H2S04。在加入后將混合物于rt.攪拌過(guò)夜。然后，用3MKOH的EtOH溶液中和，并且將鹽濾出。在常壓下除去溶劑，然后在減壓下得到33g產(chǎn)物2(收率26%)Bp:60~80°C/<1毫巴。(實(shí)際上，申請(qǐng)人得到43g產(chǎn)物，49其包括10g的乙醇!由NMR檢査)步驟3在100mL的燒瓶中，將24g的4，4-二乙氧基-丁-2-酮(15Ommo1，1eq)(實(shí)際上包括5.5g的乙醇)與25ml的甲苯混合。將混合物加熱以蒸餾溶劑，直到蒸出物的沸點(diǎn)高于107。C。冷卻之后，將混合物分配到10個(gè)管。每個(gè)管中，加入1.3g的二乙酸鈉(15mmo1，l叫)和2g的丙酮，然后將管密封，并且將混合物于180。C由微波加熱1小時(shí)。由NMR檢查，反應(yīng)平穩(wěn)地進(jìn)行，只有約低于10%原料余下。過(guò)濾后，在常壓下除去大部分溶劑。在減壓下蒸餾剩余物，得到7.9g純產(chǎn)物3(收率60%)，其Bp:6080。C/〈l毫巴。(實(shí)際上申請(qǐng)人得到15.8g粗產(chǎn)物，其包括7.9的甲苯！由NMR檢査)步驟4在N2氣氛下，在250mL三頸燒瓶中，向7.2g的4-乙氧基-丁-3-烯-2-酮(63mmol，1叫)和12.7g的TEA(126mmol，2叫)在THF中的于-78。C的溶液中，在40mins滴加21g的TMSOTf(95mmo1，1.5叫)。于0~-30。C繼續(xù)攪拌60mins。在轉(zhuǎn)化完全(由NMR檢査)后，將反應(yīng)用5%NaHC03猝滅，用己烷萃取，并且用Na2S04干燥。在除去溶劑后，將粗制產(chǎn)物通過(guò)再蒸餾(油泵，《1毫毫巴Bp，40。C，甲苯；Bp，115。C，產(chǎn)物)純化，得到9.1g純產(chǎn)物。收率72.2°/。。制備外消旋-(lR，2S，6R)-6，-氯-2-(3-氯苯基)-6-乙氧基-螺[環(huán)己垸-l，3，-[3H]吲哚]-2'，4(1'H)-二酮向在密封管中的E/Z-6-氯-3-(3-氯-苯亞甲基)-1，3-二氫』引哚-2-酮(1.45g，15.0mmol)在甲苯(20mL)中的懸浮液中，加入(3-乙氧基-l-亞甲基-烯丙基氧基)-三甲基-硅烷(1.24g，7.5mmo1)。將反應(yīng)混合物于140。C攪拌16hrs。通過(guò)濃縮除去溶劑。將剩余物溶解于MeOH(50mL)中，并且用4NNaOH(5mL)于rt處理0.5h。然后將反應(yīng)混合物用AcOEt稀釋，并且用水和鹽水洗滌。在濃縮之后，將剩余物由快速柱(5。/。-30。/。AcOEt在Hex中的溶液)純化，得到(1.2g)的外消旋-(lR,2R)-6，-氯-2-(3-氯苯基)螺[5-環(huán)己烯-1,3，-[3H]吲哚]-2',4(l，H)-二酮和外消旋-(lR,2S,6R)-6，-氯-2-(3-氯苯基)-6-乙氧基-螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮(0.46g，18.6%)的混合物，為白色無(wú)定形物，將其在沒(méi)有進(jìn)一步純化的情況下用于下面的步驟。少量的混合物由正相HPLC分離，得到外消旋-(lR，2S，6R)-6'-氯-2-(3-氯苯基)-6-乙氧基-螺[環(huán)己垸-1，3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮。MS+:358(M+l)。以與實(shí)施例2(方法B)中所述的方法類似的方式，將外消旋-(lR,2S,6R)-6，-氯-2-(3-氯苯基)-6-乙氧基-螺[環(huán)己垸-1,3，-[3H]吲哚]陽(yáng)2，，4(l，H)-二酮(150.0mg，0.34毫摩爾)與NH2OH-HCl(119.5mg，1.72mmol)，NaOH(68.8mg，1.72毫摩爾)在EtOH-水(3/2，10mL)中，在回流下反應(yīng)2hrs，隨后與對(duì)-甲苯磺酰氯(133.1mg，0.70mmol)在二氯甲烷(10mL)中，于室溫反應(yīng)2hrs，并且在微波輻照下于90。C加熱20min。在用AcOEt稀釋后，將混合物用水洗滌，用Na2S04干燥并且濃縮。將剩余物由手性柱色譜純化，得到(3S，4S,5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-乙氧基-1,1',2，2',3,5,6,7-八氫螺[411-氮雜萆-4,3'-[3司-吲哚]-2',7-二酮(10.2mg)，(3R,4R，5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-乙氧基-U',2,2',3，5，6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮(10.8mg)，(3S,4R,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-乙氧基-l,l',2,2'，3,5，6，7-八氫螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮(3.8mg)和(3R，4S,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-乙氧基-l,l'，2，2',3，5，6，7-八氫螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮(3.6mg)。實(shí)施例24制備3R,4S,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-(2，2-二甲基丙氧基)-l,l',2，2',3,5,6,7-八氫螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮，(3S,4R,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-(2,2-二甲基丙氧基)-1,1'，2，2',3,5，6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮，(3R,4R,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-(2,2-二甲基丙氧基)-1,r，2,2',3,5,6，7-八氫螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮，禾口(38，48，511)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-5-(2，2-二甲基丙氧基)-1,1',2,2'，3，5，6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮<formula>formulaseeoriginaldocumentpage52</formula>步驟1制備中間體(E)-4-(2,2-二甲基丙氧基)丁-3-烯-2-酮(38192-200-1)oP將家用真空(Housevacuum)應(yīng)用到4-甲氧基-3-丁烯-2-酮(14.0g，140mmol)(FisherScientific),新戊醇(18.0g.200mmol)，對(duì)-甲苯磺酸嘧啶錯(cuò)(0.45g，1mmol)和甲苯(50mL)的混合物中。將其于25-30。C攪拌14h。通過(guò)真空除去所有溶劑和揮發(fā)物，并且將剩余物溶解于己烷(75mL)中。將其由色譜(30%乙酸乙酯/己烷)純化，得到(E)-4-(2,2-二甲基丙氧基)丁-3-烯-2-酮。步驟2制備[(E)-3-(2,2-二甲基丙氧基)-l-亞甲基烯丙基氧基]三甲基硅烷(38192-200-2)將(E)-4-(2，2-二甲基丙氧基)丁-3-烯-2-酮(14g，90mmol)和三乙胺(10g，101mmol)合并在乙醚(200mL)中。于-5。C，在0.5hr內(nèi)，加入在四氯化碳(30mL)中的三甲代甲硅烷基三氟甲磺酸酯(20g，90mmol)(Aldrich)。將其于0。C攪拌0.5hr。將其傾倒入冷的5%碳酸氫鈉(50mL)52中，并且將有機(jī)物萃取入己烷中。將其用飽和氯化鈉水溶液洗滌，干燥(MgS04)，并且蒸發(fā)，得到21g的[(E)-3-(2,2-二甲基丙氧基)-l-亞甲基-烯丙基氧基]三甲基硅烷。步驟3制備外消旋-(lR，2S,6R)-6，-氯-2-(3-氯苯基)-6-(2,2-二甲基丙氧基)-螺[環(huán)己垸-1,3，-[3H]吲哚]-2'，4(l'H)-二酮將在密封管中的E/Z-6-氯-3-(3-氯-苯亞甲基)-l，3-二氫-吲哚-2-酮(0.50g，1.72mmo1)和[(E)-3-(2,2-二甲基丙氧基)-l-亞甲基烯丙基氧基]三甲基硅垸(1.1g，5.5毫摩爾)的混合物加熱至150°C1.5hrs。將反應(yīng)混合物用MeOH(10mL)稀釋，并且用2.0mL的4NNaOH于rt處理1h。然后將混合物用AcOEt然釋，并且用飽和NH4C1，鹽水洗滌，用Na2S04干燥。在濃縮之后，將剩余物由快速柱(2。/。-25。/。AcOEt在Hex中的溶液)純化，得到外消旋-(111,28,611)-6'-氯-2-(3-氯苯基)-6-(2，2-二甲基丙氧基)-螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮(310.4mg，43.1%)和外消旋-(1R,2S)-6，-氯-2-(3-氯苯基)螺[5-環(huán)己烯-l,3，-[3H]吲哚]-2，，4(rH)-二酮(201.2mg，32.3%)。步驟4以與實(shí)施例2(方法B)中所述的方法類似的方式，將外消旋-(1R,2S,6R)-6，-氯-2-(3-氯苯基)-6-(2,2-二甲基丙氧基)-螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]B引哚]-2，,4(l，H)-二酮(167.0mg，0.37毫摩爾)與NH20H-HC1(52.0mg，0.74mmo1)，NaOH(30.0mg，0.74毫摩爾)在EtOH-水(3/2，7.5mL)中，在回流下反應(yīng)1h，隨后與對(duì)-甲苯磺酰氯(102.0mg，0.51mmol)在二氯甲烷(10mL)中，于室溫反應(yīng)2hrs，并且在微波輻照于100°C加熱30min。在用AcOEt稀釋后，將混合物用水洗滌，用Na2S04干燥并且濃縮。將剩余物由手性柱色譜純化，得到(3R,4S，5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-(2,2-二甲基丙氧基)-1,1',2,2',3,5,6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H〗-吲哚]-2',7-二酮(11.0mg):H腿S(ES+)m/z對(duì)于C24H26C12N203+H[(M+H)+]計(jì)算值:461.1393，實(shí)測(cè)值461.1393;(38,411,58)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-(2，2-二甲基丙氧基)-1,l',2,2'，3，5,6，7-八氫螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮(7.0mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C24H26C12N203+H[(M+H)+]計(jì)算值461.1393，實(shí)測(cè)值461.1393;(311,411,58)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-(2,2-二甲基丙氧基)-1，1',2,2',3,5,6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮(7.0mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C24H26C12N203+H[(M+H)+]計(jì)算值461.1393，實(shí)測(cè)值461.1394;(3S，4S，5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-5-(2,2-二甲基丙氧基)-U',2,2',3,5,6，7-八氫螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮(7.0mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C24H26C12N203+H[(M+H)+]計(jì)算值461.1393，實(shí)測(cè)值461.1394。實(shí)施例25制備(3S，4S,5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-l，l'，2，2'，3,5,6,7-八氫-3-(1-甲基乙氧基)-螺[4H-氮雜罩-4，3'-,-吲哚]-2'，7-二酮，(3R,4R,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1,1'，2,2',3,5,6,7-八氫-3-(1-甲基乙氧基)-螺[4H-氮雜萆-4,3'-,-B引哚]-2',7-二酮，(3S,4R,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l,r,2,2',3,5,6,7-八氫-5-(l-甲基乙氧基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮，禾卩(311,43,510-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l,l',2,2'，3,5,6，7-八氫-5-(l-甲基乙氧基)-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-口引哚]-2',7-二酮M.W.433.3C22H22C12N20<formula>formulaseeoriginaldocumentpage54</formula>(E)-4-異丙氧基-丁-3-烯-2-酮是以與實(shí)施例24，步驟1的相同方式制備的(38192-201陽(yáng)1)((E)-3-異丙氧基-l-亞甲基-烯丙基氧基)-三甲基硅烷是以與實(shí)施例24，步驟2的相同方式制備的(38192-201-1)外消旋-(lR,2S,6R)-6，-氯-2-(3-氯苯基)-6-(l-甲基乙氧基)-螺[環(huán)己垸-1,3，-[3司吲哚]-2',4(1，印-二酮是以與實(shí)施例24，步驟3的相同方式制備的。以與實(shí)施例2(方法A)中所述的方法類似的方式，外消旋-(1R,2S,6R)-6'-氯-2-(3-氯苯基)-6-(l-甲基乙氧基)-螺[環(huán)己烷-l,3，-[3H]吲哚]-2，,4(l，H)-二酮(138.0mg，0.33毫摩爾)用NaN3(54.0mg，0.83毫摩爾)在TiC14(1.0M在CH2C12中的溶液，0.33mL)(Aldrich)存在下，在乙腈(10mL)中，于回流處理6hrs，隨后進(jìn)行手性色譜，得到(3S，4S,5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1,1',2，2'，3,5,6,7-八氫-3-(1-甲基乙氧基)-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮(14.0mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C22H22C12N203+H[(M+H)+]計(jì)算值:433.1080，實(shí)測(cè)值433.1080;(311,4仗,58)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1，1',2,2',3，5，6，7-八氫-3-(1-甲基乙氧基)-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮(14.0mg):HRMS(ES+)m/z對(duì)于C22H22C12N203+H[(M+H)+]計(jì)算值433.1080，實(shí)測(cè)值433.1080;(3S，4R，5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l,^,2，2',3，5,6,7-八氫-5-(l-甲基乙氧基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮(9.0mg):H謹(jǐn)S(ES+)m/z對(duì)于C22H22C12N203+H[(M+H)+]計(jì)算值:433.1080，實(shí)測(cè)值433.1081;和(3R,4S,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-U',2,2'，3,5，6,7-八氫-5-(l-甲基乙氧基)-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮(12.0mg):H腿S(ES+)m/z對(duì)于C22H22Cl2N203+H[(M+H)+]計(jì)算值:433.1080。實(shí)測(cè)值433.1081。實(shí)施例26體外活性試驗(yàn)由HTRF(均相時(shí)間分辨熒光)試驗(yàn)，測(cè)量化合物抑制p53和MDM2蛋白之間相互作用的能力，在HTRF(均相時(shí)間分辨熒光)試驗(yàn)中，重組GST-標(biāo)記的MDM2結(jié)合到肽上，所述的肽類似于p53的MDM2-相互作用區(qū)(Lane等)。GST-MDM2蛋白和p53-肽(在其N-末端上生物素?；?的結(jié)合是由在銪(Eu)-標(biāo)記的抗-GST抗體和鏈酶抗生物素-結(jié)合的別藻藍(lán)蛋白(APC)之間的FRET(熒光共振能量傳遞)記錄的。在總?cè)莘e為40uL，容納有90nM生物素?；?，160ng/mlGST-MDM2，20nM鏈酶抗生物素-APC(PerkinElmerWallac)，2nMEu-標(biāo)記的抗-GST-抗體(PerkinElmerWallac),0.2%牛血清清蛋白(BSA)，1mM二硫蘇糖醇(DTT)和20mMTris-硼酸鹽鹽水(TBS)緩沖液的黑色平底384-孔板(Costar)中，如下進(jìn)行測(cè)試將10uL在反應(yīng)緩沖液中的GST-MDM2(640ng/ml工作溶液)加入到每個(gè)孔中。將10uL稀釋的化合物(在反應(yīng)緩沖液中以1:5稀釋)加入到每個(gè)孔中，通過(guò)振動(dòng)混合。將20uL在反應(yīng)緩沖液中的生物素?；痯53肽(180nM工作溶液)加入到每個(gè)孔中，并且在振動(dòng)器上混合。于37°C溫育1h。加入20uL在含有0.2%BSA的TBS緩沖液中的鏈酶抗生物素-APC和Eu-抗-GST抗體混合物(6nMEu-抗-GST和60nM鏈酶抗生物素-APC工作溶液)，于室溫振動(dòng)30分鐘，并且使用能夠TRF的板讀數(shù)器于665禾0615nm(Victor5，PerkinElmerWallac)讀數(shù)。如果沒(méi)有指定，試劑購(gòu)自SigmaChemicalCo.。顯示本發(fā)化合物的生物活性的各個(gè)IC^顯示低于約lOiiM的活性。<table>tableseeoriginaldocumentpage56</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage57</column></row><table>權(quán)利要求1.下式的化合物其中X選自氫，鹵素，氰基，硝基，乙炔基和環(huán)丙基，Y是氫或氟，R1，R2，R3和R4選自氫，低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基，取代的低級(jí)烷基，低級(jí)烯基，低級(jí)炔基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，環(huán)烷基，取代的環(huán)烷基，環(huán)烯基，和取代的環(huán)烯基，條件是R1/R2或R3/R4中的一個(gè)是氫，而另一個(gè)不是氫，R5選自氫，低級(jí)烷基或取代的低級(jí)烷基，及其藥用鹽。2.下式的化合物-<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>X選自氫，鹵素，氰基，硝基，乙炔基和環(huán)丙基，Y是氫或氟，RpR2，R3和R4選自氫，低級(jí)垸基，低級(jí)垸氧基，取代的低級(jí)烷基，低級(jí)烯基，低級(jí)炔基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，環(huán)烷基，取代的環(huán)垸基，環(huán)烯基，和取代的環(huán)烯基，條件是R,/R2或R3/R4中的一個(gè)是氫，而另一個(gè)不是氫，R5選自氫，低級(jí)烷基或取代的低級(jí)烷基，及其藥用鹽。3.下式的化合物.-射x是鹵素，Y是氫，R2是氫，R4是氫，并且R,和R3選自氫，低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基，取代的低級(jí)烷基，低級(jí)烯基，低級(jí)炔基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，環(huán)烷基，取代的環(huán)垸基，環(huán)烯基，和取代的環(huán)烯基，條件是R,/R3中的一個(gè)是間-鹵素取代的苯基，所述的苯基被進(jìn)一步取代或不被進(jìn)一步取代，Rs選自氫，低級(jí)垸基或取代的低級(jí)烷基，及其藥用鹽。4.下式的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中x是鹵素，Y是氫，R2是氫，R4是氫，并且R,/R3中的一個(gè)是間-鹵素取代的苯基，所述的苯基被進(jìn)一步取代或不被進(jìn)一步取代，并且R,/R3中的另一個(gè)選自低級(jí)垸基，取代的低級(jí)烷基，低級(jí)烯基，取代的低級(jí)烯基，芳基和取代的芳基，Rs選自氫，低級(jí)烷基和取代的低級(jí)烷基，及其藥用鹽。5.權(quán)利要求1的化合物，所述的化合物選自外消旋-(3S,4R,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l,l',2，2'，3，5，6,7-八氫-5-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮，外消旋-(3R，4R，5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-U',2,2',3,5,6，7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮，(311,48,58)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1，1',2,2'，3,5，6，7-八氫-3-(1-甲基乙烯基螺[41^-氮雜罩-4，3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮，(3S,4R，5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l，r,2,2',3，5,6，7-八氫-5-(l-甲基乙烯基螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-卩引哚]-2'，7-二酮，外消旋-(3S,4R,5R)-6'-氯-3,5-雙-(3-氯苯基)-U',2,2',3,5，6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮，(3R,4S,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-l，r，2，2',3,5，6,7-八氫-3(E)-(l-甲基-l-丙烯基)-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮，(3S,4R，5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基H，r,2,2',3，5,6,7-八氫-5(EHl-甲基-l-丙烯基)-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮，外消旋-(3S，4R，5S)-6'-氯-3-(4-氯苯基)-1,1',2,2',3,5,6,7-八氫-5-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮，外消旋-(3R,4R,5S)陽(yáng)6'-氯-5-(4-氯苯基)-1，1'，2,2',3,5，6,7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮，禾口(3R,4R，5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-l,l'，2，2'，3，5,6，7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H〗』引哚]-2'，7-二酮。5.權(quán)利要求1的化合物，所述的化合物選自(38,411，511)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1,1'，2,2',3,5,6，7-八氫-5-(3-甲基苯基)-螺[41^氮雜罩-4,3'-[3H]-卩引哚]-2'，7-二酮，(3R，4S,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1，1'，2,2'，3,5,6，7-八氫-3-(3-甲基苯基)-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮，(3R,4S,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1,1',2，2',3，5,6,7-八氫-3-(2-甲基苯基)-螺[411-氮雜萆-4，3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮，(38，4民511)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1，1',2,2',3,5,6,7-八氫-5-(2-甲基苯基)-螺[411-氮雜罩-4,3'-[3司』引哚]-2',7-二酮，(3R,4S，5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-U',2,2',3,5,6,7-八氫-3-(2-甲基丙基)-螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮，(38,411，58)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-1,1',2,2',3，5,6,7-八氫-5-(2-甲基丙基)-螺[4&氮雜罩-4，3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮，(3R,4S，5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-環(huán)丙基-l，l',2,2',3,5,6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮，(3S，4R，5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-環(huán)丙基-U'，2，2'，3，5，6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮，(3R，4S,5R)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-l，r,2，2',3,5,6，7-八氫-3-(l-甲基乙基)-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮，禾口(3S,4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l,r,2，2',3,5,6,7-八氫-5-(1-甲基乙基)-螺[4&氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮。6.權(quán)利要求1的化合物，所述的化合物選自(3R,4S,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-(5-氟-2-甲基苯基)-l,l',2,2',3,5，6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮，(3S,4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-(5-氟-2-甲基苯基)-U'，2,2',3,5,6，7-八氫螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮，(3R,4S,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-l，1'，2,2',3,5,6，7-八氫-3-苯基-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮，(3S,4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l,1'，2,2'，3,5,6，7-八氫-3-苯基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮，外消旋-(3S，4R，5S)-6'-溴-3-(3-氯苯基)-U',2，2'，3，5,6,7-八氫-5-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮，外消旋-(3R,4R,5S)-6'-溴-5-(3-氯苯基)-U'，2,2'，3,5，6,7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮，(3R，4S，5S)-6'-溴-5-(3-氯苯基)-1，1'，2,2',3,5,6,7-八氫-3-(1-甲基乙烯基螺[4&氮雜罩-4,3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮，(3S，4R，5R)-6'-溴-3-(3-氯苯基)-l，^,2，2'，3,5,6,7-八氫-5-(l-甲基乙烯基螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-卩引哚]-2'，7-二酮，外消旋-pS,収,SS)-6'-氯-:3-(3-氯苯基)-UWW,6,7-八氫-5-甲氧基-l-甲基-螺[4H-氮雜草-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮，禾口外消旋-(3R，4R,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-l,l',2,2'，3,5,6，7-八氫-3-甲氧基-l-甲基-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]』引哚]-2',7-二酮。7.權(quán)利要求1的化合物，所述的化合物選自外消旋-(3S,4R,5R)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-l-乙基-l，l',2,2'，3,5,6,7-八氫-5-甲氧基-螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]-卩引哚]-2',7-二酮，外消旋-(3R,4R,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-l-乙基-U'，2,2',3，5,6，7-八氫-3-甲氧基-螺[4H-氮雜萆-4,3'-[3H]-卩引哚]-2'，7-二酮，(3R，4R，5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-乙氧基-U',2，2',3，5,6，7-八氫螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮，(3S,4R,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-乙氧基-l,l',2，2',3,5,6,7-八氫螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]』引哚]-2'，7-二酮，(3R，4R，5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-1,1',2，2',3,5，6,7-八氫-3-(1-甲基乙氧基)-螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-吲哚]-2'，7-二酮，(3S,4R,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-U',2,2'，3,5，6，7-八氫-5-(l-甲基乙氧基)-螺[4H-氮雜萆-4，3'-[3H]-吲哚]-2',7-二酮，(3S,4R,5S)-6'-氯-3-(3-氯苯基)-5-(2,2-二甲基丙氧基)-l,r，2，2',3，5，6,7-八氫螺[4H-氮雜罩-4,3'-[3H〗』引哚]-2'，7-二酮，和(3R，4R,5S)-6'-氯-5-(3-氯苯基)-3-(2,2-二甲基丙氧基)-U',2,2',3,5,6，7-八氫螺[4H-氮雜罩-4，3'-[3H]-fJ引哚]-2',7-二酮。8.—種用于治療癌癥的藥物制劑，其包含權(quán)利要求1中任何一項(xiàng)的化合物。9.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任何一項(xiàng)的化合物在制備用于治療癌癥的藥劑中的應(yīng)用。10.如上所述的本發(fā)明。全文摘要本發(fā)明提供通式(Ia)，(Ib)的化合物，其中X，Y，R<sub>1</sub>，R<sub>2</sub>，R<sub>3</sub>，R<sub>4</sub>和R<sub>5</sub>如本文中所述。該化合物顯示抗癌活性。文檔編號(hào)A61P35/00GK101679446SQ200880016425公開(kāi)日2010年3月24日申請(qǐng)日期2008年5月6日優(yōu)先權(quán)日2007年5月17日發(fā)明者劉進(jìn)軍,張筑明,杰斐遜·賴特·蒂利申請(qǐng)人:霍夫曼-拉羅奇有限公司