專利名稱：作為酪氨酸激酶抑制劑的咪唑衍生物的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明的目的是發(fā)現(xiàn)具有寶貴性質(zhì)的新化合物，特別是能夠用于制備藥品的那些。
本發(fā)明涉及化合物和化合物的用途，其中激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、特別是酪氨酸激酶和/或絲氨酸/蘇氨酸激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的抑制、調(diào)節(jié)和/或調(diào)控在其中扮演角色，此外涉及包含這些化合物的藥物組合物，和這些化合物治療激酶-誘發(fā)的疾病的用途。
具體而言，本發(fā)明涉及抑制、調(diào)節(jié)和/或調(diào)控酪氨酸激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的式I化合物、包含這些化合物的組合物和使用它們治療哺乳動(dòng)物酪氨酸激酶-誘發(fā)的疾病和病癥的方法，例如血管生成、癌癥、腫瘤形成、生長(zhǎng)與繁殖、動(dòng)脈硬化、眼部疾病(例如衰老-誘發(fā)的黃斑變性、脈絡(luò)膜新血管化和糖尿病性視網(wǎng)膜病)、炎性疾病、關(guān)節(jié)炎、血栓形成、纖維化、腎小球性腎炎、神經(jīng)變性、銀屑病、再狹窄、傷口愈合、移植排斥、代謝性疾病和免疫系統(tǒng)疾病，以及自體免疫疾病、硬變(cirrhosis)、糖尿病和血管疾病，包括不穩(wěn)定性和滲透性等。
酪氨酸激酶是一類具有至少400種成員的酶，它們催化蛋白質(zhì)底物中腺苷三磷酸的末端磷酸(γ-磷酸)向酪氨酸殘基的轉(zhuǎn)移。酪氨酸激酶被認(rèn)為通過底物磷酸化作用在各種細(xì)胞功能中的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中扮演關(guān)鍵角色。盡管信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的確切機(jī)理尚不清楚，不過酪氨酸激酶已被顯示是細(xì)胞增殖、致癌作用和細(xì)胞分化中的重要因素。
酪氨酸激酶可以分為受體型酪氨酸激酶和非受體型酪氨酸激酶。受體型酪氨酸激酶具有細(xì)胞外部分、跨膜部分和細(xì)胞內(nèi)部分，而非受體型酪氨酸激酶完全是細(xì)胞內(nèi)的(參見Schlessinger and Ullrich，Neuron 9，383-391(1992)和1-20(1992)的評(píng)論)。
受體型酪氨酸激酶由大量具有不同生物活性的跨膜受體組成。因而，已經(jīng)確認(rèn)了約20種不同的受體型酪氨酸激酶子家族。一種酪氨酸激酶子家族被稱為HER子家族，由EGFR、HER2、HER3和HER4組成。來自這種受體子家族的配體包括表皮生長(zhǎng)因子、TGF-α、雙調(diào)蛋白、HB-EGF、β動(dòng)物纖維素和heregulin。這些受體型酪氨酸激酶的另一子家族是胰島素子家族，它包括INS-R、IGF-IR和IR-R。PDGF子家族包括PDGF-α與-β受體、CSFIR、c-kit和FLK-II。另外，還有FLK家族，它由激酶插入結(jié)構(gòu)域受體(KDR)、胎肝激酶-1(FLK-1)、胎肝激酶-4(FLK-4)和fms酪氨酸激酶-1(flt-1)組成。由于兩組之間的相似性，PDGF和FLK家族通常是被一起討論的。關(guān)于受體性酪氨酸激酶的詳細(xì)討論，參見Plowman等人，DN& P 7(6)334-339，1994的文章，引用在此作為參考。
RTK(受體型酪氨酸激酶)也包括TIE2及其配體血管生成素(angiopoietin)1和2。現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)越來越多的這些配體的同系物，它們的作用尚未得到清楚詳細(xì)的證明。TIE1已知是TIE2的同系物。TIE RTK在內(nèi)皮細(xì)胞上被選擇性表達(dá)，參與血管生成和血管成熟的過程。所以，它們尤其可能是血管系統(tǒng)疾病和其中利用血管或者甚至重新生成血管的病變中的寶貴目標(biāo)。除了新血管化和成熟的防止以外，新血管化的刺激也可能是活性成分的寶貴目標(biāo)。參考下列關(guān)于血管生成、腫瘤發(fā)育和激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的文章G.Breier Placenta(2000)21，增刊A，Trophoblasr Res 14，S11-S15F.Bussolino等人，TIBS 22，251-256(1997)G.Bergers & L-E.Benjamin Nature Rev Cancer 3，401-410(2003)P.Blume-Jensen &.Hunter Nature 411，355-365(2001)M.Ramsauer & P.D’Amore J.Clin.Invest.110，1615-1617(2002)S.Tsogkos等人，Expert Opin.Investig.Drugs 12，933-941(2003)在L.K.Shawyer等人，Cancer Cell 1，117-123(2002)和D.Fabbro & C.Garcia-Echeverria Current Opin.Drug Discovery & Development 5.701-712(2002)中給出了已經(jīng)試用于癌癥療法的激酶抑制劑的實(shí)例。
非受體型酪氨酸激酶同樣由大量子家族組成，包括Src、Frk、Btk、Csk、Abl、Zap70、Fes/Fps、Fak、Jak、Ack和LIMK。每一這些子家族進(jìn)一步細(xì)分為不同的受體。例如，Src子家族是最大的子家族之一。它包括Src、Yes、Fyn、Lyn、Lck、Blk、Hck、Fgr和Yrk。Src子家族酶與瘤形成有聯(lián)系。關(guān)于非受體型酪氨酸激酶的更多詳細(xì)討論，參見BolenOncogene，82025-2031(1993)的文章，引用在此作為參考。
受體型酪氨酸激酶和非受體型酪氨酸激酶都參與引起各種病理?xiàng)l件的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，包括癌癥、銀屑病和免疫應(yīng)答過高。
已經(jīng)有人提出，各種受體型酪氨酸激酶和與它們結(jié)合的生長(zhǎng)因子在血管生成中扮演角色，盡管可能有些間接促進(jìn)血管生成(Mustonen和Alitalo，J.Cell Biol.129895-898，1995)。這些受體型酪氨酸激酶之一是胎肝激酶1，也稱為FLK-1。人FLK-1的類似物是含有激酶插入結(jié)構(gòu)域的受體KDR，也稱為血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2或VEGFR-2，因?yàn)樗愿哂H和性結(jié)合VEGF。最后，這種受體的鼠類版本也稱為NYK(Oelrichs等人，Oncogene 8(1)11-15，1993)。VEGF和KDR是一個(gè)配體-受體對(duì)，它在血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和血管的形成與萌芽中扮演重要角色，它們分別被稱為血管發(fā)生和血管生成。
血管生成以血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(UEGF)的過度活性為特征。VEGF實(shí)際上由配體家族組成(Klagsburn和D’Amore，Cytokine & Growth FactorReviews 7259-270，1996)。VEGF結(jié)合高親和性跨膜酪氨酸激酶受體KDR和相關(guān)的fms酪氨酸激酶-1，也稱為Flt-1或血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1)。細(xì)胞培養(yǎng)和基因剔除實(shí)驗(yàn)表明，每一受體對(duì)血管生成的不同方面有貢獻(xiàn)。KDR介導(dǎo)VEGF的致有絲分裂功能，而Flt-1似乎調(diào)控非致有絲分裂功能，例如與細(xì)胞粘連有關(guān)的那些。抑制KDR因而可調(diào)控致有絲分裂VEGF活性的水平。事實(shí)上，腫瘤生長(zhǎng)已顯示敏感于VEGF受體拮抗劑的抗血管生成效應(yīng)(Kim等人，Nature 362，841-844，1993)。
已經(jīng)確認(rèn)了VEGFR的三種PTK(蛋白酪氨酸激酶)受體VEGFR-1(Flt-1)、VEGFR-2(Flk-1或KDR)和VEGFR-3(Flt-4)。VEGFR-2是特別受關(guān)注的。
實(shí)體腫瘤因此可以用酪氨酸激酶抑制劑治療，因?yàn)檫@些腫瘤依賴于血管生成來生成支持它們生長(zhǎng)所必需的血管。這些實(shí)體腫瘤包括單核細(xì)胞性白血病、腦、泌尿生殖、淋巴系統(tǒng)、胃、喉和肺癌，包括肺腺癌和小細(xì)胞性肺癌。進(jìn)一步的實(shí)例包括其中觀察到Raf-激活性致癌基因(例如K-ras、erb-B)的過渡表達(dá)或活化的癌癥。這些癌癥包括胰腺和乳腺癌。這些酪氨酸激酶的抑制劑因此適合于預(yù)防和治療由這些酶導(dǎo)致的增殖性疾病。
VEGF的血管生成活性不局限于腫瘤。VEGF解釋了在糖尿病性視網(wǎng)膜病的視網(wǎng)膜之中或附近所產(chǎn)生的血管生成活動(dòng)。視網(wǎng)膜中的這種血管生長(zhǎng)引起視力退化，最終失明。靈長(zhǎng)動(dòng)物中如視網(wǎng)膜靜脈阻塞等病癥和小鼠pO2水平降低都升高眼部VEGF mRNA和蛋白質(zhì)水平，引起新血管化?？?VEGF單克隆抗體或VEGF受體免疫融合蛋白的眼內(nèi)注射抑制靈長(zhǎng)動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物模型中的眼部新血管化。與人糖尿病性視網(wǎng)膜病中VEGF的誘導(dǎo)原因無關(guān)，眼部VEGF的抑制適合于治療這種疾病。
VEGF的表達(dá)在動(dòng)物和人類腫瘤鄰近壞死區(qū)域的低氧區(qū)也顯著增加。另外，VEGF被ras、raf、src和p53突變型致癌基因(在對(duì)抗癌癥中都是很重要的)的表達(dá)增量調(diào)節(jié)?？?VEGF單克隆抗體抑制裸鼠中的人腫瘤生長(zhǎng)。盡管相同的腫瘤細(xì)胞在培養(yǎng)物中繼續(xù)表達(dá)VEGF，不過這些抗體沒有降低它們的有絲分裂比率。因而，從腫瘤衍生的VEGF不會(huì)充當(dāng)自分泌致有絲分裂因子。VEGF因此通過它的旁分泌血管內(nèi)皮細(xì)胞趨化性與致有絲分裂活性，通過促進(jìn)血管生成而在體內(nèi)對(duì)腫瘤生長(zhǎng)有貢獻(xiàn)。這些單克隆抗體也抑制無胸腺小鼠中通常不太完全血管化的人結(jié)腸癌的生長(zhǎng)，降低來自經(jīng)接種細(xì)胞的腫瘤的數(shù)量。
Flk-1的VEGF-結(jié)合性構(gòu)件Flt-1、即經(jīng)截短以消除胞質(zhì)酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域但是保留膜錨的小鼠KDR受體同系物在病毒中的表達(dá)事實(shí)上終止了可移植成膠質(zhì)細(xì)胞瘤在小鼠中的生長(zhǎng)，可能是通過與跨膜內(nèi)皮細(xì)胞VEGF受體生成雜二聚物的顯性失活機(jī)理。如果兩種VEGF等位基因都被剔除，在正常情況下隨著實(shí)體腫瘤一起在裸鼠中生長(zhǎng)的胚胎干細(xì)胞沒有產(chǎn)生可檢測(cè)的腫瘤。總之，這些數(shù)據(jù)表明了VEGF在實(shí)體腫瘤生長(zhǎng)中的角色。在病理性血管生成中牽涉有KDR或Flt-1的抑制，這些受體適合于治療其中血管生成是總病理學(xué)一部分的疾病，例如炎癥、糖尿病性視網(wǎng)膜血管化以及各種形式的癌癥，因?yàn)槟[瘤生長(zhǎng)已知依賴于血管生成(Weidner等人，N.Engl.J.Med.，324，1-8，1991)。
血管生成素1(Ang1)是內(nèi)皮-特異性受體型酪氨酸激酶TIE-2的配體，是一種新的血管生成因子(Davis等人，Cell，1996，871161-1169；Partanen等人，Mol.Cell Biol.，121698-1707(1992)；美國專利No.5,521,073；5,879,672；5,877,020；6,030,831)。首字母縮寫TIE代表“具有Ig和EGF同源性結(jié)構(gòu)域的酪氨酸激酶”。TIE用于確認(rèn)一類受體型酪氨酸激酶，它們完全在血管內(nèi)皮細(xì)胞和早期造血細(xì)胞中表達(dá)。TIE受體激酶通常以EGF樣結(jié)構(gòu)域和免疫球蛋白(IG)樣結(jié)構(gòu)域的存在為特征，后者結(jié)構(gòu)域由被鏈之間二硫橋鍵所穩(wěn)定的細(xì)胞外折疊單元組成(Partanen等人，Curr. TopicsMicrobiol.Immunol.，1999，237159-172)。與在血管發(fā)育的早期階段發(fā)揮其功能的VEGF相反，Ang1及其受體TIE-2在血管發(fā)育的晚期階段發(fā)揮作用，也就是在血管轉(zhuǎn)化(轉(zhuǎn)化涉及血管腔的生成)和成熟期間(Yancopoulos等人，Cell，1998，93661-664；Peters，K.G，Circ.Res.，1998，83(3)342-3；Suri等人，Cell 87，1171-1180(1996))。
因此，預(yù)期TIE-2的抑制應(yīng)當(dāng)干擾由血管生成引發(fā)的新血管系統(tǒng)的轉(zhuǎn)化和成熟，并且應(yīng)當(dāng)從而干擾血管生成過程。此外，VEGFR-2激酶結(jié)構(gòu)域結(jié)合位點(diǎn)的抑制將阻滯酪氨酸殘基的磷酸化，起到干擾血管生成引發(fā)的作用。因此必須假定，TIE-2和/或VEGFR-2的抑制應(yīng)當(dāng)防止腫瘤的血管生成，并且起到延緩或者完全消除腫瘤生長(zhǎng)的作用。因此，有可能提供對(duì)于癌癥和其他與不適當(dāng)血管生成有關(guān)的疾病的治療。
本發(fā)明涉及調(diào)節(jié)、調(diào)控或抑制TIE-2的方法，用于預(yù)防和/或治療與不規(guī)則的或紊亂的TIE-2活性有關(guān)的疾病。確切而言，式I化合物也能夠用于治療某些形式的癌癥。此外，式I化合物能夠用于在某些現(xiàn)有癌癥化療中提供附加或協(xié)同效應(yīng)，和/或能夠用于恢復(fù)某些現(xiàn)有癌癥化療和放療的功效。
式I化合物此外能夠用于分離和研究TIE-2的活性或表達(dá)。另外，它們特別適合用在與不規(guī)則的或紊亂的TIE-2活性有關(guān)的疾病的診斷方法中。
本發(fā)明此外涉及調(diào)節(jié)、調(diào)控或抑制VEGFR-2的方法，用于預(yù)防和/或治療與不規(guī)則的或紊亂的VEGFR-2活性有關(guān)的疾病。
本發(fā)明此外涉及作為Raf激酶抑制劑的式I化合物。
蛋白質(zhì)磷酸化是細(xì)胞功能調(diào)節(jié)的基礎(chǔ)過程。蛋白激酶與磷酸酶的協(xié)調(diào)作用控制磷酸化的程度，因此控制特異性靶蛋白的活性。蛋白質(zhì)磷酸化的主要角色之一是在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中，其中細(xì)胞外信號(hào)被蛋白質(zhì)磷酸化和去磷酸化事件級(jí)聯(lián)所擴(kuò)增和傳播，例如在p21ras/raf途徑中。
p21ras基因被發(fā)現(xiàn)是Harvey(H-Ras)和Kirsten(K-Ras)大鼠肉瘤病毒的致癌基因。在人類中，細(xì)胞Ras基因(c-Ras)的特征性突變已經(jīng)與很多不同的癌癥類型有關(guān)。這些突變型等位基因賦予Ras組成活性，已經(jīng)顯示可轉(zhuǎn)化培養(yǎng)物中的細(xì)胞，例如鼠細(xì)胞系NIH 3T3。
p21ras致癌基因是人實(shí)體癌發(fā)育和進(jìn)展的主要貢獻(xiàn)者，在所有人類癌的30％中發(fā)生突變(Bolton等人(1994)Ann.Rep.Med.Chem.，29，165-74；Bos.(1989)Cancer Res.，49，4682-9)。在其正常的、未突變的形式中，Ras蛋白是幾乎所有組織中由生長(zhǎng)因子受體引導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)級(jí)聯(lián)的關(guān)鍵要素(Avruch等人(1994)Trends Biochem.Sci.，19，279-83)。
在生物化學(xué)中，Ras是一種鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白，GTP-結(jié)合的活化形式與GDP-結(jié)合的靜息形式之間的循環(huán)受到Ras內(nèi)源性GTP酶活性和其他調(diào)節(jié)性蛋白質(zhì)的嚴(yán)格控制。Ras基因產(chǎn)物與鳥嘌呤三磷酸(GTP)和鳥嘌呤二磷酸(GDP)結(jié)合，并且水解GTP為GDP。Ras在GTP-結(jié)合的狀態(tài)下是有活性的。在癌癥細(xì)胞中的Ras突變體中，內(nèi)源性GTP酶活性被降低，蛋白質(zhì)因此傳送組成型生長(zhǎng)信號(hào)至下游效應(yīng)器，例如Raf激酶。這引起攜帶這些突變體的細(xì)胞的癌性生長(zhǎng)(Magnuson等人，(1994)Semin.CancerBiol.，5，247-53)。Ras原致癌基因需要功能上完整的C-Raf-1原致癌基因，目的是轉(zhuǎn)導(dǎo)高級(jí)真核生物中由受體型和非受體型酪氨酸激酶引發(fā)的生長(zhǎng)和分化信號(hào)。
活化的Ras是C-Raf-1原致癌基因的活化所必需的，但是Ras激活Raf-1蛋白(Ser/Thr)激酶的生物化學(xué)步驟現(xiàn)在已被充分鑒定。已經(jīng)顯示，向Raf激酶給予失活性抗體或者共同表達(dá)顯性失活Raf激酶或顯性失活MEK(MAPKK)、即Raf激酶的底物，通過抑制Raf激酶信號(hào)發(fā)送途徑來抑制活性Ras的效應(yīng)，引起已轉(zhuǎn)化細(xì)胞向正常生長(zhǎng)表型的逆轉(zhuǎn)，參見Daum等人(1994)Trends Biochem.Sci.，19，474-80；Fridman等人(1994)J Biol.Chem.，269，30105-8；Kolch等人，(1991)Nature，349，426-28和Weinstein-Oppenheimer等人，Pharm.& Therap.(2000)，88，229-279。
與之相似，Raf激酶的抑制(借助反義寡脫氧核苷酸)已經(jīng)在體外和體內(nèi)與多種人腫瘤類型生長(zhǎng)的抑制有關(guān)聯(lián)(Monia等人，Nat.Med.1996，2，668-75)。
Raf絲氨酸-與蘇氨酸-特異性蛋白激酶是胞質(zhì)酶，它們刺激多種細(xì)胞系統(tǒng)中的細(xì)胞生長(zhǎng)(Rapp，U.R.，等人(1988)，The Oncogene Handbook；T.Curran，E.P.Reddy and A.Skalka(eds.)Elsevier Science Publishers；TheNetherlands，213-253頁；Rapp，U.R.，等人(1988)Cold Spring Harbor Sym.Quant.Biol.53173-184；Rapp，U.R.，等人(1990)Inv.Curr.Top.Microbiol.lmmunol.Potter and Melchers(eds.)，Berlin，Springer-Verlag 166129-139)。
已經(jīng)鑒定了三種同工酶C-Raf(Raf-1)(Bonner，T.I.，等人(1986)Nucleic Acids Res.141009-1015)、A-Raf(Beck，T.W.，等人(1987)NucleicAcids Res.15595-609)和B-Raf(Qkawa，S.，等人(1998)Mol.Cell.Biol.82651-2654；Sithan-andam，G等人(1990)Oncogene1775)。這些酶在它們?cè)诟鞣N組織中的表達(dá)上有所不同。Raf-1在所有器官中和在所有已被檢查的細(xì)胞系中被表達(dá)，A-與B-Raf分別在泌尿生殖和腦組織中被表達(dá)(Storm，S.M.(1990)Oncogene 5345-351)。
Raf基因是原致癌基因當(dāng)以特定改變的方式表達(dá)時(shí)，它們能夠引發(fā)細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化。引起致癌性活化的基因改變通過除去或干擾蛋白質(zhì)的N-末端負(fù)性調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域而生成組成活性蛋白激酶(Heidecker，G，等人(1990)Mol.Cell Biol.102503-2512；Rapp，U.R.等人(1987)Oncogenes andCancer；S.A.Aaronson，J.Bishop，T.Sugimura，M.Terada，K.Toyoshima和P.K.Vogt(eds.)Japan Scientific Press，Tokyo)。向NIH 3T3細(xì)胞微量注射致癌性活化的而非野生型版本的、用大腸桿菌表達(dá)載體制備的Raf蛋白，導(dǎo)致形態(tài)學(xué)轉(zhuǎn)化，并且刺激DNA合成(Rapp，U.R.，等人(1987)Oncogenesand Cancer；S.A.Aaronson，J.Bishop，T.Sugimura，M.Terada，K.Toyoshima和P.K.Vogt(eds.)Japan Scientific Press，Tokyo；Smith，M.R.，等人(1990)Mol.Cell Biol.103828-2833)。
所以，活化的Raf-1是細(xì)胞生長(zhǎng)的細(xì)胞內(nèi)激活物。Raf-1蛋白絲氨酸激酶是有絲分裂原信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的下游效應(yīng)器的候選，因?yàn)镽af致癌基因克服了由細(xì)胞突變(Ras回復(fù)細(xì)胞)或微量注射抗-Ras抗體所致細(xì)胞Ras活性阻滯所導(dǎo)致的生長(zhǎng)抑制(Rapp，U.R.，等人(1988)，The Oncogene Hahdbook；T.Curran，E.P.Reddy and A.Skalka(eds.)Elsevier Science Publishers；TheNetherlands，213-253頁；Smith，M.R.，等人(1986)Nature(倫敦)320540-543)。
C-Raf功能是通過多種膜-結(jié)合性致癌基因的轉(zhuǎn)化和通過血清所含有絲分裂原的生長(zhǎng)刺激所需要的(Smith，M.R.，等人(1986)Nature(倫敦)320540-543)。有絲分裂原經(jīng)由磷酸化作用調(diào)節(jié)Raf-1蛋白絲氨酸激酶活性(Morrison，D.K.，等人(1989)Cell 58648-657)，這也影響亞細(xì)胞分步(Olah，Z.，等人(1991)Exp.Brain Res.84403；Rapp，U.R.等人(1988)Cold SpringHarbor Sym.Quant.Biol.53173-184)。Raf-1激活性生長(zhǎng)因子包括血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)(Morrison，D.K.，等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 858855-8859)、集落刺激因子(Baccarini，M.，等人(1990)EMBO J.93649-3657)、胰島素(Blackshear，P.J.，等人(1990)J.Biol.Chem.26512115-12118)、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)(Morrison，R.K.，等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 858855-8859)、白介素-2(Turner，B.C，等人(19911)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 881227)與白介素-3和粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(Carroll，M.P.，等人(1990)J.Biol.Chem.26519812-19817)。
用有絲分裂原處理細(xì)胞后，瞬時(shí)活化的Raf-1蛋白絲氨酸激酶易位于核周區(qū)和核(Olah，Z.，等人(1991)Exp.Brain Res.84403；Rapp，U.R.，等人(1988)Cold Spring Harbor Sym.Quant.Biol.53173-184)。含有活化Raf的細(xì)胞的基因表達(dá)模式被改變(Heidecker，G，等人(1989)Genes and signaltransduction in multistage carcinogenesis，N.Colburn(ed.)，Marcel Dekker，Inc.，New York，339-374頁)，Raf致癌基因在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染測(cè)定法中激活來自Ap-I/PEA3-依賴性啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄(Jamal，S.等人(1990)Science 344463-466；Kaibuchi，K.，等人(1989)J.Biol.Chem.26420855-20858；Wasylyk，C.，等人(1989)Mol.Cell Biol.92247-2250)。
細(xì)胞外有絲分裂原激活Raf-1存在至少兩種獨(dú)立的途徑一種牽涉蛋白激酶C(KC)，第二種由蛋白酪氨酸激酶引發(fā)(Blackshear，P.J.，等人(1990)J.Biol.Chem.26512131-12134；Kovacina，K.S.，等人(1990)J.Biol.Chem.26512115-12118；Morrison，D.K.，等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA858855-8859；Siegel，J.N.等人(1990)J.Biol.Chem.26518472-18480；Turner，B.C.，等人(1991)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 881227)。在每種情況下，活化都牽涉Raf-1蛋白質(zhì)磷酸化。Raf-1磷酸化可以是由自主磷酸化擴(kuò)增的激酶級(jí)聯(lián)的后果，或者可以完全是由自主磷酸化所導(dǎo)致，自主磷酸化是由公認(rèn)的激活性配體與Raf-1調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域的結(jié)合所引發(fā)，與二酰基甘油激活PKC相類似(Nishizuka，Y.(1986)Science 233305-312)。
細(xì)胞調(diào)節(jié)的主要機(jī)制之一是通過細(xì)胞外信號(hào)跨越膜的轉(zhuǎn)導(dǎo)作用，這繼而調(diào)控細(xì)胞內(nèi)的生物化學(xué)途徑。蛋白質(zhì)磷酸化代表了細(xì)胞內(nèi)信號(hào)從分子到分子傳播的一種過程，最終導(dǎo)致細(xì)胞應(yīng)答。這些信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)級(jí)聯(lián)受到高度調(diào)節(jié)，并且經(jīng)常是重疊的，這顯然是因?yàn)榇嬖诤芏嗟鞍准っ敢约傲姿崦?。蛋白質(zhì)的磷酸化主要發(fā)生在絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸殘上，蛋白激酶因此根據(jù)它們磷酸化位點(diǎn)的特異性加以分類，也就是絲氨酸/蘇氨酸激酶和酪氨酸激酶。由于磷酸化是細(xì)胞內(nèi)無所不在的過程，并且由于細(xì)胞表型大大受到這些途徑活性的影響，目前相信大量疾病狀態(tài)和/或疾病可歸因于激酶級(jí)聯(lián)的分子組分中的異?；罨蚬δ芡蛔儭Ｋ?，已經(jīng)相當(dāng)多地關(guān)注于這些蛋白質(zhì)和能夠調(diào)控它們活性的化合物的鑒別。關(guān)于評(píng)論，參見Weinstein-Oppenheimer等人，Pharma.& Therap.，2000，88，229-279。
因此需要合成特異性抑制、調(diào)節(jié)和/或調(diào)控酪氨酸激酶和/或Raf激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的小化合物，這也是本發(fā)明的目標(biāo)。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，根據(jù)本發(fā)明的化合物及其鹽具有非常寶貴的藥理性質(zhì)，同時(shí)被良好耐受。
確切而言，它們表現(xiàn)酪氨酸激酶抑制性質(zhì)。
此外已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，根據(jù)本發(fā)明的化合物是Raf激酶的抑制劑。由于該酶是p21ras的下游效應(yīng)器，這些抑制劑證實(shí)適合于用在藥物組合物中，用于其中適用Raf激酶途徑抑制的人類或獸醫(yī)學(xué)，例如治療由Raf激酶介導(dǎo)的腫瘤和/或癌性細(xì)胞生長(zhǎng)。確切而言，這些化合物適合于治療人和動(dòng)物實(shí)體癌癥，例如鼠類癌癥，因?yàn)檫@些癌癥的進(jìn)展依賴于Ras蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)級(jí)聯(lián)，因此敏感于通過中斷該級(jí)聯(lián)、即抑制Raf激酶的治療。因此，給予根據(jù)本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受鹽以治療由Raf激酶途徑介導(dǎo)的疾病，尤其癌癥，包括實(shí)體癌癥，例如癌(例如肺、胰腺、甲狀腺、膀胱或結(jié)腸)、骨髓疾病(例如髓性白血病)或腺瘤(例如絨毛狀結(jié)腸腺瘤)、病理性血管生成和轉(zhuǎn)移性細(xì)胞遷移。這些化合物此外適合于治療補(bǔ)體激活依賴性慢性炎癥(Niculescu等人，(2002)Immunol.Res.，24191-199)和HIV-1(人免疫缺陷病毒1型)誘發(fā)的免疫缺陷(Popik等人，(1998)J.Virol.726406-6413)。
已經(jīng)驚人地發(fā)現(xiàn)，根據(jù)本發(fā)明的化合物能夠與信號(hào)發(fā)送途徑相互作用，尤其本文所述信號(hào)發(fā)送途徑，優(yōu)選Raf激酶信號(hào)發(fā)送途徑。根據(jù)本發(fā)明的化合物優(yōu)選地表現(xiàn)有利的生物活性，容易在酶類測(cè)定法中加以證明，例如本文所述測(cè)定法。在這樣的酶類測(cè)定法中，根據(jù)本發(fā)明的化合物優(yōu)選地表現(xiàn)和導(dǎo)致抑制效應(yīng)，這通常為合適范圍、優(yōu)選微摩爾范圍、更優(yōu)選納摩爾范圍的IC50值所證實(shí)。
正如本文所討論的，這些信號(hào)發(fā)送途徑與多種疾病相關(guān)。因此，根據(jù)本發(fā)明的化合物通過與一種或多種所述信號(hào)發(fā)送途徑相互作用而適合于預(yù)防和/或治療依賴于所述信號(hào)發(fā)送途徑的疾病。
本發(fā)明因此涉及作為本文所述信號(hào)發(fā)送途徑的促進(jìn)劑或抑制劑、優(yōu)選抑制劑的根據(jù)本發(fā)明的化合物。本發(fā)明因此優(yōu)選地涉及作為Raf激酶途徑的促進(jìn)劑或抑制劑、優(yōu)選抑制劑的根據(jù)本發(fā)明的化合物。本發(fā)明因此優(yōu)選地涉及作為Raf激酶的促進(jìn)劑或抑制劑、優(yōu)選抑制劑的根據(jù)本發(fā)明的化合物。本發(fā)明進(jìn)而更優(yōu)選地涉及作為一種或多種選自如下的Raf激酶的促進(jìn)劑或抑制劑、優(yōu)選抑制劑的根據(jù)本發(fā)明的化合物A-Raf、B-Raf和C-Raf-1。本發(fā)明特別優(yōu)選地涉及作為C-Raf-1的促進(jìn)劑或抑制劑、優(yōu)選抑制劑的根據(jù)本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明此外涉及一種或多種根據(jù)本發(fā)明的化合物的用途，用于治療和/或預(yù)防由Raf激酶所導(dǎo)致、介導(dǎo)和/或傳播的疾病，優(yōu)選本文所述疾病，特別是由選自如下的Raf激酶所導(dǎo)致、介導(dǎo)和/或傳播的疾病A-Raf、B-Raf和C-Raf-1。本文所討論的疾病通常分為兩組，過度增殖性和非過度增殖性疾病。在這一點(diǎn)上，銀屑病、關(guān)節(jié)炎、炎癥、子宮內(nèi)膜異位、瘢痕形成、良性前列腺增生、免疫學(xué)疾病、自體免疫疾病和免疫缺陷疾病被視為非癌性疾病，其中關(guān)節(jié)炎、炎癥、免疫學(xué)疾病、自體免疫疾病和免疫缺陷疾病通常被視為非過度增殖性疾病。在這一點(diǎn)上，腦癌、肺癌、鱗狀細(xì)胞癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、腎癌、結(jié)腸直腸癌、乳腺癌、頭癌、頸癌、食道癌、婦科癌癥、甲狀腺癌、淋巴瘤、慢性白血病和急性白血病被視為癌性疾病，所有它們通常被視為過度增殖性疾病。尤其是癌性細(xì)胞生長(zhǎng)、尤其是由Raf激酶介導(dǎo)的癌性細(xì)胞生長(zhǎng)是作為本發(fā)明目標(biāo)的疾病。本發(fā)明因此涉及作為治療和/或預(yù)防所述疾病的藥品和/或藥品活性成分的根據(jù)本發(fā)明的化合物，涉及根據(jù)本發(fā)明的化合物在制備用于治療和/或預(yù)防所述疾病的藥物中的用途，以及涉及治療所述疾病的方法，包括將一種或多種根據(jù)本發(fā)明的化合物施用于需要這種施用的患者。
可以顯示，根據(jù)本發(fā)明的化合物在異種移植腫瘤模型中具有體內(nèi)抗增殖作用。將根據(jù)本發(fā)明的化合物對(duì)患有過度增殖性疾病的患者給藥，例如以抑制腫瘤生長(zhǎng)、減少與淋巴增殖性疾病有關(guān)的炎癥、抑制移植排斥或由組織修復(fù)引起的神經(jīng)病學(xué)傷害等。本發(fā)明化合物適合于預(yù)防或治療目的。本文所用的術(shù)語“治療”用于表示疾病的預(yù)防和現(xiàn)有病癥的治療。通過在明顯的疾病形成之前給予根據(jù)本發(fā)明的化合物來實(shí)現(xiàn)對(duì)增殖的預(yù)防，例如預(yù)防腫瘤的生長(zhǎng)、預(yù)防轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)、減少與心血管手術(shù)有關(guān)的再狹窄等。作為替代選擇，這些化合物通過穩(wěn)定或改善患者的臨床癥狀，用于治療進(jìn)行中的疾病。
宿主或患者可以屬于任何哺乳動(dòng)物種類，例如靈長(zhǎng)類，特別是人類；嚙齒動(dòng)物，包括小鼠、大鼠和倉鼠；兔；馬、牛、狗、貓等。動(dòng)物模型是實(shí)驗(yàn)研究用的，提供治療人類疾病的模型。
特定細(xì)胞對(duì)用根據(jù)本發(fā)明的化合物治療的敏感性可以借助體外試驗(yàn)加以測(cè)定。通常，將細(xì)胞的培養(yǎng)物與不同濃度根據(jù)本發(fā)明的化合物合并一段時(shí)間，足以允許活性成分誘導(dǎo)細(xì)胞死亡或者抑制遷移，通常在約一小時(shí)與一周之間。體外試驗(yàn)可以使用來自活組織檢查樣品的培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行。然后統(tǒng)計(jì)處理后剩余的存活細(xì)胞。
劑量因所用具體化合物、具體疾病、患者狀態(tài)等而異。治療劑量通常足以減少靶組織中的不可取細(xì)胞群，同時(shí)維持患者的生存能力。治療一般持續(xù)直至已經(jīng)發(fā)生相當(dāng)程度的減少，例如細(xì)胞負(fù)載減少至少約50％，并且可以持續(xù)直至基本上在機(jī)體中不再檢測(cè)到不可取的細(xì)胞。
關(guān)于信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的確認(rèn)和多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑之間相互作用的檢測(cè)，多位科學(xué)家已經(jīng)開發(fā)了適合的模型或模型系統(tǒng)，例如細(xì)胞培養(yǎng)物模型(例如Khwaja等人，EMBO，1997，16，2783-93)和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型(例如White等人，Oncogene，2001，20，7064-7072)。關(guān)于信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)級(jí)聯(lián)中某些階段的確定，可以利用相互作用的化合物來調(diào)控信號(hào)(例如Stephens等人，BiochemicalJ.，2000，351，95-105)。根據(jù)本發(fā)明的化合物也可以用作在動(dòng)物和/或細(xì)胞培養(yǎng)物模型中或者在本申請(qǐng)?zhí)岬降呐R床疾病中測(cè)試激酶-依賴性信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的試劑。
激酶活性的測(cè)量是一項(xiàng)本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的技術(shù)。采用底物、例如組蛋白(例如Alessi等人，F(xiàn)EBS Lett.1996，399，3，33-338頁)或堿性髓磷脂蛋白的測(cè)定激酶活性的基因試驗(yàn)系統(tǒng)如文獻(xiàn)所述(例如Campos-Gonzalez，R.和Glenney，Jr.，J.R.1992，J.Biol.Chem.267，14535頁)。
關(guān)于激酶抑制劑的確認(rèn)，可用多種測(cè)定系統(tǒng)。在閃爍近似測(cè)定法中(Sorg等人，J.of Biomolecular Screening，2002，7，11-19)和快速平板測(cè)定法中，測(cè)量蛋白質(zhì)或肽底物被γATP的放射性磷酸化。在抑制性化合物的存在下，可檢測(cè)到放射性信號(hào)降低或完全沒有。此外，均相時(shí)間-分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移(HTR-FRET)和熒光極化(FP)技術(shù)適合作為測(cè)定方法(Sills等人，J.of Biomolecular Screening，2002，191-214)。
其他非放射性ELISA測(cè)定方法使用特異性磷酸抗體(phospho-AB)。phospho-AB僅結(jié)合磷酸化的底物。這種結(jié)合可以借助化學(xué)發(fā)光檢測(cè)，使用二抗過氧化物酶-綴合的抗-綿羊抗體(Ross等人，2002，Biochem.J.，即將公布，原稿BJ20020786)。
有很多疾病都與細(xì)胞增殖和細(xì)胞死亡(細(xì)胞程序死亡)失調(diào)有關(guān)。有關(guān)病癥包括但不限于如下。根據(jù)本發(fā)明的化合物適合于治療多種病癥，其中存在平滑肌細(xì)胞和/或炎性細(xì)胞向血管內(nèi)膜層的增殖和/或遷移，導(dǎo)致通過該血管的血流受限，例如在新生內(nèi)膜阻塞性損傷的情況下。有關(guān)阻塞性移植物血管疾病包括動(dòng)脈粥樣硬化、移植術(shù)后冠狀血管疾病、靜脈移植物狹窄、吻合修復(fù)術(shù)周再狹窄、血管成形術(shù)或支架(stent)放置之后的再狹窄等。
根據(jù)本發(fā)明的化合物也適合作為p38激酶抑制劑。
抑制p38激酶的雜芳基脲描述于WO 02/82859中。
現(xiàn)有技術(shù)在WO 2003032989中描述了治療Bechcet綜合征和葡萄膜炎的苯并稠合脲。在WO 200296876中公開了氨基甲酸酯和草酰胺化合物是腫瘤壞死因子抑制劑，用于治療哮喘、阿爾茨海默氏病和疼痛。WO 200104115公開了芳基-與雜芳基-取代的脲，它們可以用作細(xì)胞分裂素抑制劑，治療炎性和自體免疫疾病。在WO 200055139中描述了其他芳基-與雜芳基-取代的脲，它們可以用作細(xì)胞分裂素抑制劑，治療骨關(guān)節(jié)炎或潰瘍性結(jié)腸炎。在WO 00/43384中描述了治療炎性疾病的雜環(huán)-取代的脲。EP 0 286 979公開了芳基-與雜芳基-取代的脲，它們可以用作抗心律失常劑。WO200006550描述了苯基-取代的脲是脂質(zhì)過氧化物酶抑制劑。Madsen等人在WO 03/000245中公開了取代的芳基與雜芳基化合物，尤其用于治療變應(yīng)性鼻炎、動(dòng)脈粥樣硬化、哮喘或癌癥。在WO 00/76515中描述了芳基-與雜芳基-取代的脲衍生物是IL-8受體拮抗劑。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及式I化合物
其中R1、R2、R3R4、R5各自彼此獨(dú)立地表示H、A、OH、OA、鏈烯基、炔基、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、COOH、COOA、-OHet、-O-亞烷基-Het、-O-亞烷基-NR10R11或CONR10R11，選自R1、R2、R3、R4、R5的兩個(gè)相鄰基團(tuán)一起也表示-O-CH2-CH2-、-O-CH2-O-或-O-CH2-CH2-O-，R6、R7各自彼此獨(dú)立地表示H、A、Hal、OH、OA或CN，R8表示CN、COOH、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，R9表示H或A，R10、R11各自彼此獨(dú)立地表示H或A，Het表示單環(huán)或二環(huán)的飽和、不飽和或芳族雜環(huán)，具有1至4個(gè)N、O和/或S原子，該環(huán)可以是未取代的或者被Hal、A、OA、COOA、CN和/或羰基氧(＝O)單-、二-或三-取代，A表示具有1至10個(gè)C原子的烷基，另外，其中1-7個(gè)H原子可以被F和/或氯代替，X、X’各自彼此獨(dú)立地表示NH或者不存在，Hal表示F、Cl、Br或I，及其藥學(xué)可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構(gòu)體，包括其任意比例的混合物。
本發(fā)明也涉及這些化合物的旋光活性形式(立體異構(gòu)體)、對(duì)映體、外消旋物、非對(duì)映體、水合物和溶劑合物。術(shù)語化合物的溶劑合物用來表示惰性溶劑分子向化合物的加合，由于它們相互的吸引力而生成。溶劑合物例如是一或二水合物或醇化物。
術(shù)語“藥學(xué)可用衍生物”用來表示例如根據(jù)本發(fā)明的化合物的鹽和所謂的前體藥物化合物。
術(shù)語“前體藥物衍生物”用來表示這樣的式I化合物，它們已經(jīng)借助例如烷基或?；⑻腔蚬央谋恍揎棧⑶以谏矬w內(nèi)迅速裂解生成根據(jù)本發(fā)明的有效化合物。
它們也包括根據(jù)本發(fā)明的化合物的生物可降解的聚合物衍生物，例如Int.J.Pharm.115，61-67(1995)所述。
措辭“有效量”表示藥品或藥物活性成分在組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或人體中導(dǎo)致例如研究人員或醫(yī)師所尋求或需要的生物學(xué)或醫(yī)學(xué)反應(yīng)的量。
另外，措辭“治療有效量”表示與沒有接受該量的相應(yīng)受治療者相比，具有下列后果的量改善了的疾病、綜合征、病癥、主訴、障礙或副作用的治療、愈合、預(yù)防或消除，或者疾病、主訴或障礙的進(jìn)展的減少。
措辭“治療有效量”也涵蓋有效增加正常生理功能的量。
本發(fā)明也涉及式I化合物的混合物、例如兩種非對(duì)映體的混合物的用途，例如比例為1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶10、1∶100或1∶1000。它們特別優(yōu)選地是立體異構(gòu)化合物的混合物。
根據(jù)本發(fā)明的化合物也可以是各種多晶型，例如無定形和結(jié)晶性多晶型。根據(jù)本發(fā)明的化合物的所有多晶型都為本發(fā)明所覆蓋，是發(fā)明的另一方面。
本發(fā)明涉及式I化合物及其鹽和制備根據(jù)權(quán)利要求1-10的式I化合物及其藥學(xué)可用衍生物、鹽、溶劑合物和立體異構(gòu)體的方法，其特征在于a)關(guān)于制備其中X、X’表示NH的式I化合物，使式II化合物 其中R6、R7、R8、R9、R10和R11具有如權(quán)利要求1所示含義，與式III化合物反應(yīng)，
其中R1、R2、R3、R4和R5具有如權(quán)利要求1所示含義，或者b)關(guān)于制備其中X、X’表示NH的式I化合物，使式IV化合物 其中R1、R2、R3、R4和R5具有如權(quán)利要求1所示含義，與氯甲酸酯衍生物反應(yīng)，得到中間體氨基甲酸酯衍生物，隨后使其與式II化合物反應(yīng)，或者c)關(guān)于制備式I化合物，其中R8表示CN、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，R10、R11表示H，使式V化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X和X’具有如權(quán)利要求1所示含義，與式VI化合物反應(yīng)，R8-CH(NH2)-CN VI其中R8表示CN、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，并與式VII化合物反應(yīng)，
CR9(OA’)3VII其中R9具有如權(quán)利要求1所示含義，A’表示具有1、2、3、4、5或6個(gè)C原子的烷基，或者d)關(guān)于制備其中X不存在、X’表示NH的式I化合物，使式II化合物與式VIII化合物反應(yīng)， 其中R1、R2、R3、R4和R5具有如權(quán)利要求1所示含義，L表示Cl、Br、I或者游離或經(jīng)過反應(yīng)性官能修飾的OH基團(tuán)，或者e)將其中R10、R11表示H的式I化合物通過烷基化轉(zhuǎn)化為其中R10、R11表示A的式I化合物，和/或?qū)⑹絀的堿或酸轉(zhuǎn)化為它的鹽之一。
上下文中的基團(tuán)R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、X和X’具有如權(quán)利要求1所示含義，另有明確規(guī)定除外。
A表示烷基，它是未分支(線性)或分支的，具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個(gè)C原子。A優(yōu)選地表示甲基，此外乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基，此外還有戊基、1-、2-或3-甲基丁基、1，1-、1，2-或2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、己基、1-、2-、3-或4-甲基戊基、1，1-、1，2-、1，3-、2，2-、2，3-或3，3-二甲基丁基、1-或2-乙基丁基、1-乙基-1-甲基丙基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-或1，2，2-三甲基丙基，此外例如優(yōu)選三氟甲基。
A非常特別優(yōu)選地表示具有1、2、3、4、5或6個(gè)C原子的烷基，優(yōu)選甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、三氟甲基、五氟乙基或1，1，1-三氟乙基。A也表示環(huán)烷基。環(huán)烷基優(yōu)選地表示環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基或環(huán)庚基。
A’優(yōu)選地表示甲基、乙基、丙基或丁基。
亞烷基優(yōu)選地是未分支的，優(yōu)選地表示亞甲基、亞乙基、亞丙基、亞丁基或亞戊基。
在優(yōu)選的實(shí)施方式中，R1、R2、R3、R4、R5在每種情況下彼此獨(dú)立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR8R9。
在特別優(yōu)選的實(shí)施方式中，R1、R2、R3、R4、R5在每種情況下彼此獨(dú)立地表示H、A、OH、OA、Hal、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR10R11。
R1、R2、R3、R4、R5優(yōu)選地在每種情況下彼此獨(dú)立地表示例如H；A，例如甲基或乙基；OH；OA，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基或三氟甲氧基；NO2；NH2；NHA，例如甲基氨基；NA2，例如二甲氨基或二乙氨基；Hal；CN；COOA，例如甲氧羰基或叔丁氧羰基；-OHet，例如1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基氧基或哌啶-4-基氧基；-O-亞烷基-Het，例如2-(哌啶-1-基)乙氧基或2-(嗎啉-4-基)乙氧基；-O-亞烷基-NR8R9，例如2-氨基乙氧基、2-(二甲氨基)乙氧基、2-(二乙氨基)乙氧基或2-(N，N-乙基，甲基氨基)乙氧基；或CONR8R9，例如氨基羰基。
R6和R7優(yōu)選地表示H。
R8優(yōu)選地表示CONH2或CN。
R10和R11優(yōu)選地表示H。
Het優(yōu)選地表示單環(huán)的飽和、不飽和或芳族雜環(huán)，具有1至4個(gè)N、O和/或S原子，該環(huán)可以是未取代的或者被Hal、A、OA、COOA、CN或羰基氧(＝O)單-、二-或三-取代。
與進(jìn)一步的取代基無關(guān)，Het例如表示2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基，1-、2-或3-吡咯基，1-、2-、4-或5-咪唑基，1-、3-、4-或5-吡唑基，2-、4-或5-唑基，3-、4-或5-異唑基，2-、4-或5-噻唑基，3-、4-或5-異噻唑基，2-、3-或4-吡啶基，2-、4-、5-或6-嘧啶基，此外優(yōu)選1，2，3-三唑-1-、-4-或-5-基，1，2，4-三唑-1-、-3-或-5-基，1-或5-四唑基，1，2，3-二唑-4-或-5-基，1，2，4-二唑-3-或-5-基，1，3，4-噻二唑-2-或-5-基，1，2，4-噻二唑-3-或-5-基，1，2，3-噻二唑-4-或-5-基，3-或4-噠嗪基，吡嗪基，1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基，4-或5-異吲哚基，1-、2-、4-或5-苯并咪唑基，1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基，2-、4-、5-、6-或7-苯并唑基，3-、4-、5-、6-或7-苯并異唑基，2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基，2-、4-、5-、6-或7-苯并異噻唑基，4-、5-、6-或7-苯并-2，1，3-二唑基，2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基，1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-異喹啉基，3-、4-、5-、6-、7-或8-噌啉基，2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑啉基，5-或6-喹喔啉基，2-、3-、5-、6-、7-或8-2H-苯并[1，4]嗪基，此外優(yōu)選1，3-苯并二氧雜環(huán)戊烯-5-基，1，4-苯并二烷-6-基，2，1，3-苯并噻二唑-4-或-5-基或2，1，3-苯并二唑-5-基。
雜環(huán)基團(tuán)也可以是部分或完全氫化的。Het因而也可以表示例如2，3-二氫-2-、-3-、-4-或-5-呋喃基，2，5-二氫-2-、-3-、-4-或-5-呋喃基，四氫-2-或-3-呋喃基，1，3-二氧雜環(huán)戊烷-4-基，四氫-2-或-3-噻吩基，2，3-二氫-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基，2，5-二氫-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基，1-、2-或3-吡咯烷基，四氫-1-、-2-或-4-咪唑基，2，3-二氫-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡唑基，四氫-1-、-3-或-4-吡唑基，1，4-二氫-1-、-2-、-3-或-4-比啶基，1，2，3，4-四氫-1-、-2-、-3-、-4-、-5-或-6-吡啶基，1-、2-、3-或4-哌啶基，2-、3-或4-嗎啉基，四氫-2-、-3-或-4-吡喃基，1，4-二烷基，1，3-二烷-2-、-4-或-5-基，六氫-1-、-3-或-4噠嗪基，六氫-1-、-2-、-4-或-5-嘧啶基，1-、2-或3-哌嗪基，1，2，3，4-四氫-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8-喹啉基，1，2，3，4-四氫-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8-異喹啉基，2-、3-、5-、6-、7-或8-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]嗪基，此外優(yōu)選2，3-亞甲二氧基苯基，3，4-亞甲二氧基苯基，2，3-亞乙二氧基苯基，3，4-亞乙二氧基苯基，3，4-(二氟亞甲二氧基)苯基，2，3-二氫苯并呋喃-5-或-6-基，2，3-(2-氧代亞甲二氧基)苯基或者3，4-二氫-2H-1，5-苯并二氧雜-6-或-7-基，此外優(yōu)選2，3-二氫苯并呋喃基或者2，3-二氫-2-氧代呋喃基。
在進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方式中，Het表示單環(huán)的飽和雜環(huán)，具有1至3個(gè)N、O和/或S原子，它是未取代的或者可以被COOA單取代。本文的單環(huán)飽和雜環(huán)特別優(yōu)選地表示哌啶基、吡咯烷基、嗎啉基或哌嗪基。
Het非常特別優(yōu)選地表示1-、2-、3-或4-哌啶基或者2-、3-或4-嗎啉基，其中Het可以被COOA取代。
Hal優(yōu)選地表示F、Cl或Br，以及I，特別優(yōu)選F或Cl。
鏈烯基優(yōu)選地代表乙烯基、1-或2-丙烯基、1-丁烯基、異丁烯基、仲丁烯基，此外優(yōu)選1-戊烯基、異戊二烯基或1-己烯基。
炔基優(yōu)選地代表乙炔基、丙炔-1-基，此外丁炔-1-基、丁炔-2-基、戊炔-1-基、戊炔-2-基或戊炔-3-基。
遍及本發(fā)明的所有出現(xiàn)一次以上的基團(tuán)都可以是相同或不同的，也就是彼此獨(dú)立的。
式I化合物可能具有一個(gè)或多個(gè)手性中心，因此可以存在多種立體異構(gòu)形式。式I涵蓋所有這些形式。
因此，本發(fā)明特別涉及這樣的式I化合物，其中至少一個(gè)所述基團(tuán)具有如上所示優(yōu)選的含義之一。一些優(yōu)選的化合物組可以用下列子式Ia至Ih表示，它們符合式I，并且其中沒有詳細(xì)表征的基團(tuán)具有如式I所示含義，但是其中在Ia中，X不存在或者表示NH，X’表示NH；在Ib中，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此獨(dú)立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR8R9；在Ic中，Het表示單環(huán)的飽和雜環(huán)，具有1至3個(gè)N、O和/或S原子，該環(huán)是未取代的或者可以被COOA單取代；在Id中，R6、R7表示H；在Ie中，R8表示CONH2或CN；在If中，X不存在或者表示NH，X’表示NH，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此獨(dú)立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR10R11，Het表示單環(huán)的飽和雜環(huán)，具有1至3個(gè)N、O和/或S原子，該環(huán)是未取代的或者可以被COOA單取代，R6、R7表示H，R8表示CONH2或CN；在Ig中，X不存在或者表示NH，X，表示NH，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此獨(dú)立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR10R11，R6、R7表示H，R8表示CONH2或CN，Het表示哌啶基、吡咯烷基、嗎啉基或哌嗪基，它們各自是未取代的或者被COOA單取代；在Ih中，X、X’各自彼此獨(dú)立地表示NH或者不存在，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此獨(dú)立地表示H、A、OH、OA、Hal、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR10R11，R6、R7表示H，R8表示CONH2或CN，R9表示H或A，R10、R11各自彼此獨(dú)立地表示H或A，Het表示哌啶基、吡咯烷基、嗎啉基或哌嗪基，它們各自是未取代的或者被COOA單取代，A表示具有1至10個(gè)C原子的烷基，另外，其中1-7個(gè)H原子可以被F和/或氯代替，Hal表示F、Cl、Br或I，及其藥學(xué)可用衍生物、鹽、溶劑合物和立體異構(gòu)體，包括其任意比例的混合物。
式I化合物以及它們的制備原料另外借助本身已知的方法制備，如文獻(xiàn)所述(例如標(biāo)準(zhǔn)著作，例如Houben-Weyl，Methoden der organischenChemie[Methods of Organic Chemistry]，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart)，確切而言在已知的和適合于所述反應(yīng)的反應(yīng)條件下。這里也可以使用本身已知的變通方式，這里沒有詳細(xì)描述。
如果需要的話，原料也可以就地生成，以便它們不從反應(yīng)混合物中分離，而是立即進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為式I化合物。
其中X和X’表示NH的式I化合物可以優(yōu)選地通過使式II化合物與式III化合物反應(yīng)而得。
式II化合物和式III化合物是公知的。
反應(yīng)一般在惰性溶劑中、在有機(jī)堿如三乙胺、二甲基苯胺、吡啶或喹啉的存在進(jìn)行。依賴于所用條件，反應(yīng)時(shí)間在幾分鐘與14天之間，反應(yīng)溫度在約0℃與150℃之間，通常在15℃與90℃之間，特別優(yōu)選在15℃與30℃之間。
適合的惰性溶劑例如是烴類，例如己烷、石油醚、苯、甲苯或二甲苯；氯代烴，例如三氯乙烯、1，2-二氯乙烷、四氯化碳、氯仿或二氯甲烷；醇類，例如甲醇、乙醇、異丙醇、正丙醇、正丁醇或叔丁醇；醚類，例如二乙醚、二異丙醚、四氫呋喃(THF)或二烷；二醇醚類，例如乙二醇一甲醚或一乙醚、乙二醇二甲醚(二甘醇二甲醚)；酮類，例如丙酮或丁酮；酰胺類，例如乙酰胺、二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺(DMF)；腈類，例如乙腈；亞砜類，例如二甲基亞砜(DMSO)；二硫化碳；羧酸類，例如甲酸或乙酸；硝基化合物，例如硝基甲烷或硝基苯；酯類，例如乙酸乙酯，或者所述溶劑的混合物。
其中X和X’表示NH的式I化合物此外可以優(yōu)選地通過使式IV化合物與氯甲酸酯衍生物反應(yīng)而得，例如氯甲酸4-硝基苯基酯，得到中間體氨基甲酸酯，隨后使其與式II化合物反應(yīng)。
反應(yīng)一般在惰性溶劑中，在酸結(jié)合劑的存在下進(jìn)行，優(yōu)選堿金屬或堿土金屬的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽，或者堿金屬或堿土金屬、優(yōu)選鉀、鈉、鈣或銫的另一種弱酸鹽。有機(jī)堿的加入也是適合的，例如三乙胺、二甲基苯胺、N，N’-二亞甲基二胺、吡啶或喹啉。依賴于所用條件，反應(yīng)時(shí)間在幾分鐘與14天之間，反應(yīng)溫度在約0℃與150℃之間，通常在20℃與130℃之間，特別優(yōu)選在60℃與90℃之間。
適合的惰性溶劑例如是烴類，例如己烷、石油醚、苯、甲苯或二甲苯；氯代烴，例如三氯乙烯、1，2-二氯乙烷、四氯化碳、氯仿或二氯甲烷；醇類，例如甲醇、乙醇、異丙醇、正丙醇、正丁醇或叔丁醇；醚類，例如二乙醚、二異丙醚、四氫呋喃(THF)或二烷；二醇醚，例如乙二醇一甲醚或一乙醚、乙二醇二甲醚(二甘醇二甲醚)；酮類，例如丙酮或丁酮；酰胺類，例如乙酰胺、二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺(DMF)；腈類，例如乙腈；亞砜類，例如二甲基亞砜(DMSO)；二硫化碳；羧酸類，例如甲酸或乙酸；硝基化合物，例如硝基甲烷或硝基苯；酯類，例如乙酸乙酯，或者所述溶劑的混合物。
式IV原料是公知的。
式I化合物，其中R8表示CN、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，R10、R11表示H，可以優(yōu)選地通過使式U化合物與式UI化合物和式VII化合物反應(yīng)而得。
式V、VI和VII化合物是公知的。
反應(yīng)一般在惰性溶劑中進(jìn)行，如上所示。依賴于所用條件，反應(yīng)時(shí)間在幾分鐘與14天之間，反應(yīng)溫度在約0℃與150℃之間，通常在20℃與130℃之間，特別優(yōu)選在60℃與90℃之間。
其中X不存在、X’表示NH的式I化合物此外可以優(yōu)選地通過使式II化合物與式VIII化合物反應(yīng)而得。
式VIII化合物是公知的。
在式VIII化合物中，L優(yōu)選地表示Cl、Br、I或者游離或經(jīng)過反應(yīng)性修飾的OH基團(tuán)，例如活化酯、咪唑酰胺(imidazolide)或具有1-6個(gè)C原子的烷基磺酰氧基(優(yōu)選甲磺酰氧基或三氟甲磺酰氧基)或具有6-10個(gè)C原子的芳基磺酰氧基(優(yōu)選苯磺酰氧基或?qū)?甲苯磺酰氧基)。
這種在典型的?；磻?yīng)中活化羧基的基團(tuán)類型如文獻(xiàn)所述(例如標(biāo)準(zhǔn)著作，例如Houben-Weyl，Methoden der organischen Chemie[Methods ofOrganic Chemistry]，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart)。
活化的酯有利地就地生成，例如加入HOBt或N-羥基琥珀酰亞胺。
優(yōu)選使用其中L表示OH的式VIII化合物。
反應(yīng)一般在惰性溶劑中、在以下物質(zhì)存在下進(jìn)行酸結(jié)合劑，優(yōu)選有機(jī)堿，例如DIPEA、三乙胺、二甲基苯胺、吡啶或喹啉，或者過量的式VIII羧基組分。
堿金屬或堿土金屬的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽或者堿金屬或堿土金屬、優(yōu)選鉀、鈉、鈣或銫的另一種弱酸鹽的加入也可能是可取的。
依賴于所用條件，反應(yīng)時(shí)間在幾分鐘與14天之間，反應(yīng)溫度在約-30℃與140℃之間，通常在-10℃與90℃之間，特別優(yōu)選在約0℃與約70℃之間。
適合的惰性溶劑是上文提到的那些。
游離氨基的烷基化在有機(jī)化學(xué)的常規(guī)條件下進(jìn)行的(例如標(biāo)準(zhǔn)著作所述，例如Houben-Weyl，Methoden der organischen Chemie [Methods ofOrganic Chemistry]，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart)。
藥用鹽和其他形式所述根據(jù)本發(fā)明的化合物可以使用它們最終的非鹽形式。另一方面，本發(fā)明也涵蓋以它們藥學(xué)可接受鹽形式使用這些化合物，這可以借助本領(lǐng)域已知的工藝從各種有機(jī)和無機(jī)酸和堿衍生而來。式I化合物的藥學(xué)可接受鹽形式大部分是借助常規(guī)方法制備的。如果式I化合物含有羧基，其適合的鹽之一可以通過使該化合物與適合的堿反應(yīng)而成，得到相應(yīng)的堿加成鹽。這類堿例如是堿金屬氫氧化物，包括氫氧化鉀、氫氧化鈉和氫氧化鋰；堿土金屬氫氧化物，例如氫氧化鋇和氫氧化鈣；堿金屬醇化物，例如乙醇鉀和丙醇鈉；和各種有機(jī)堿，例如哌啶、二乙醇胺和N-甲基葡糖胺。同樣包括式I化合物的鋁鹽。在某些式I化合物的情況下，酸加成鹽可以通過將這些化合物用藥學(xué)可接受有機(jī)與無機(jī)酸處理而成，例如鹵化氫，例如氯化氫、溴化氫或碘化氫；其他礦物酸及其相應(yīng)的鹽，例如硫酸鹽、硝酸鹽或磷酸鹽等；和烷基-與單芳基-磺酸鹽，例如乙磺酸鹽、甲苯磺酸鹽和苯磺酸鹽；和其他有機(jī)酸及其相應(yīng)的鹽，例如乙酸鹽、三氟乙酸鹽、酒石酸鹽、馬來酸鹽、琥珀酸鹽、檸檬酸鹽、苯甲酸鹽、水楊酸鹽、抗壞血酸鹽等。因此，式I化合物的藥學(xué)可接受酸加成鹽包括如下乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、精氨酸鹽(arginate)、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸氫鹽、溴化物、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、辛酸鹽、氯化物、氯苯甲酸鹽、檸檬酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、磷酸二氫鹽、二硝基苯甲酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、富馬酸鹽、半乳糖酸鹽(來自粘酸)、半乳糖醛酸鹽、葡庚酸鹽、葡糖酸鹽、谷氨酸鹽、甘油磷酸鹽、半琥珀酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、馬尿酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、碘化物、羥乙磺酸鹽、異丁酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、扁桃酸鹽、偏磷酸鹽、甲磺酸鹽、甲基苯甲酸鹽、磷酸一氫鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、苯乙酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、膦酸鹽、鄰苯二甲酸鹽，但是這不代表限制。
此外，根據(jù)本發(fā)明的化合物的堿鹽包括鋁、銨、鈣、銅、鐵(III)、鐵(II)、鋰、鎂、錳(III)、錳(II)、鉀、鈉和鋅鹽，但是這不打算代表限制。上述鹽中，優(yōu)選銨鹽；堿金屬鹽鈉和鉀鹽；和堿土金屬鹽鈣和鎂鹽。從藥學(xué)可接受有機(jī)無毒性堿衍生的式I化合物的鹽包括下列堿的鹽伯胺、仲胺與叔胺、取代的胺、也包括天然存在的取代的胺、環(huán)狀胺，和堿性離子交換樹脂，例如精氨酸、甜菜堿、咖啡因、氯普魯卡因、膽堿、N，N’-二芐基乙二胺(苯乍生)、二環(huán)己胺、二乙醇胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基嗎啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡糖、組氨酸、hydrabamine、異丙胺、利多卡因、賴氨酸、葡甲胺、N-甲基-D-葡糖胺、嗎啉、哌嗪、哌啶、聚胺樹脂、普魯卡因、嘌呤類、可可堿、三乙醇胺、三乙胺、三甲胺、三丙胺和三(羥甲基)甲胺(氨丁三醇)，但是這不打算代表限制。
含有堿性含氮基團(tuán)的本發(fā)明化合物可以用下列試劑季銨化，例如(C1-C4)烷基鹵化物，例如甲基、乙基、異丙基和叔丁基的氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二(C1-C4)烷基酯，例如硫酸的二甲基、二乙基和二戊基酯；(C10-C18)烷基鹵化物，例如癸基、十二烷基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基的氯化物、溴化物和碘化物；和芳基(C1-C4)烷基鹵化物，例如芐基氯和苯乙基溴。使用這類鹽可以制備根據(jù)本發(fā)明的水溶性和油溶性化合物。
上述藥用鹽中優(yōu)選的包括乙酸鹽、三氟乙酸鹽、苯磺酸鹽、檸檬酸鹽、富馬酸鹽、葡糖酸鹽、半琥珀酸鹽、馬尿酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、羥乙磺酸鹽、扁桃酸鹽、葡甲胺、硝酸鹽、油酸鹽、膦酸鹽、新戊酸鹽、磷酸鈉、硬脂酸鹽、硫酸鹽、磺基水楊酸鹽、酒石酸鹽、硫代蘋果酸鹽、甲苯磺酸鹽和氨丁三醇，但是這不打算代表限制。
堿性式I化合物的酸加成鹽如下制備使游離堿形式與足量所需的酸接觸，按照常規(guī)方式導(dǎo)致鹽的生成。游離堿可以再生，通過使鹽形式與堿接觸，按照常規(guī)方式分離游離堿。關(guān)于某些物理性質(zhì)，例如在極性溶劑中的溶解性，游離堿形式在某些方面不同于其相應(yīng)的鹽形式；不過出于本發(fā)明的目的，鹽相當(dāng)于其各自的游離堿形式。
正如所提到的，式I化合物的藥學(xué)可接受堿加成鹽是與金屬或胺生成的，例如堿金屬和堿土金屬或有機(jī)胺。優(yōu)選的金屬是鈉、鉀、鎂和鈣。優(yōu)選的有機(jī)胺是N，N’-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基-D-葡糖胺和普魯卡因。
根據(jù)本發(fā)明的酸性化合物的堿加成鹽如下制備使游離酸形式與足量的所需堿接觸，按照常規(guī)方式導(dǎo)致鹽的生成。游離酸可以再生，通過使鹽形式與酸接觸，按照常規(guī)方式分離游離酸。關(guān)于某些物理性質(zhì)，例如在極性溶劑中的溶解性，游離酸形式在某些方面不同于其相應(yīng)的鹽形式；不過出于本發(fā)明的目的，鹽相當(dāng)于其各自的游離酸形式。
如果根據(jù)本發(fā)明的化合物含有一個(gè)以上能夠生成這種類型藥學(xué)可接受鹽的基團(tuán)，本發(fā)明也涵蓋多元鹽。典型的多元鹽形式例如包括酒石酸氫鹽、二乙酸鹽、二富馬酸鹽、二葡甲胺、二磷酸鹽、二鈉鹽和三鹽酸鹽，但是這不打算代表限制。
關(guān)于上述，可以看到措辭“藥學(xué)可接受鹽”在這一點(diǎn)上用來表示包含式I化合物的一種鹽形式的活性成分，特別是如果這種鹽形式賦予該活性成分以優(yōu)于活性成分游離形式或以前使用的任何其他活性成分鹽形式的藥動(dòng)學(xué)性質(zhì)。活性成分的藥學(xué)可接受鹽形式也能第一次為這種活性成分提供前所未有的所需藥動(dòng)學(xué)性質(zhì)，甚至就其在機(jī)體中的治療功效而言能夠?qū)@種活性成分的藥效學(xué)具有積極的影響。
本發(fā)明此外涉及藥品，包含至少一種式I化合物和/或其藥學(xué)可用衍生物、溶劑合物和立體異構(gòu)體，包括其任意比例的混合物，以及可選地賦形劑和/或助劑。
藥物制劑可以以劑量單元的形式給藥，每劑量單元包含預(yù)定量的活性成分。這樣一種單元例如可以包含0.5mg至1g、優(yōu)選1mg至700mg、特別優(yōu)選5mg至100mg根據(jù)本發(fā)明的化合物，這依賴于所治療的病癥、給藥的方法和患者的年齡、體重和條件，或者藥物制劑可以以劑量單元的形式給藥，每劑量單元包含預(yù)定量的活性成分。優(yōu)選的劑量單元制劑包含如上所示的每日劑量或部分劑量或者其相應(yīng)比例的活性成分。此外，這種類型的藥物制劑可以利用藥學(xué)領(lǐng)域公知的方法加以制備。
藥物制劑能夠適用于經(jīng)由任何所需適合方法的給藥，例如口服(包括口腔或舌下)、直腸、鼻、局部(包括口腔、舌下或透皮)、陰道或腸胃外(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)或真皮內(nèi))方法。這類制劑可以利用藥學(xué)領(lǐng)域已知的所有方法加以制備，例如合并活性成分與一種或多種賦形劑或一種或多種助劑。
適用于口服給藥的藥物制劑可以作為獨(dú)立的單元給藥，例如膠囊劑或片劑；粉劑或顆粒劑；在水性或非水性液體中的溶液或懸液；可食用泡沫或泡沫食品；或者水包油型液體乳劑或油包水型液體乳劑。
因而例如，在以片劑或膠囊劑形式口服給藥的情況下，可以將活性成分組分與口服無毒性和藥學(xué)可接受惰性賦形劑合并，例如乙醇、甘油、水等。粉劑如下制備將化合物粉碎成適合的微小尺寸，將其與以相似方式粉碎的藥物賦形劑混合，例如可食用碳水化合物，例如淀粉或甘露糖醇。同樣可以存在矯味劑、防腐劑、分散劑和染劑。
膠囊劑如下制備如上所述制備粉末混合物，再填充到成形明膠外殼中。在填充操作之前，可以向粉末混合物加入助流劑和潤(rùn)滑劑，例如高分散性硅酸、滑石、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或聚乙二醇的固體形式。同樣可以加入崩解劑或增溶劑，例如瓊脂、碳酸鈣或碳酸鈉，目的是提高服用膠囊后藥品的可利用性。
另外，如果需要或必要的話，同樣可以向混合物摻入適合的粘合劑、潤(rùn)滑劑和崩解劑以及染劑。適合的粘合劑包括淀粉、明膠、天然糖類(例如葡萄糖或β-乳糖)、從玉米制成的甜味劑、天然與合成橡膠(例如阿拉伯膠、黃蓍膠或藻酸鈉)、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟類等。用在這些劑型中的潤(rùn)滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等。崩解劑不受限制地包括淀粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤(rùn)土、黃原膠等。片劑如下配制例如制備粉末混合物，造?；蚋煞▔褐圃摶旌衔铮尤霛?rùn)滑劑和崩解劑，壓制全部混合物得到片劑。粉末混合物如下制備將以適合方式粉碎的化合物與稀釋劑或基質(zhì)混合，如上所述，可選地與粘合劑例如羧甲基纖維素、藻酸鹽、明膠或聚乙烯吡咯烷酮，溶解延遲劑例如石蠟，吸收加速劑例如季鹽，和/或吸收劑例如膨潤(rùn)土、高嶺土或磷酸二鈣。粉末混合物可以如下造粒將其用粘合劑濕潤(rùn)，例如糖漿、淀粉糊、acadiamucilage或者纖維素或聚合物材料的溶液，再壓制過篩。作為造粒的替代選擇，可以使粉末混合物通過壓片機(jī)，得到不均勻形狀的團(tuán)決，打碎形成顆粒。加入硬脂酸、硬脂酸鹽、滑石或礦物油可以潤(rùn)滑顆粒，目的是防止黏附于片劑沖模。然后壓制已潤(rùn)滑的混合物得到片劑。也可以將根據(jù)本發(fā)明的化合物與自由流動(dòng)性情性賦形劑合并，然后直接壓制得到片劑，不進(jìn)行造?；蚋煞▔褐撇襟E?？梢源嬖谕该骰虿煌该鞯谋Ｗo(hù)層，由蟲膠密封層、糖或聚合物材料層和蠟光層組成?？梢韵蜻@些包衣加入染劑，目的是區(qū)分不同的劑量單元。
口服液、例如溶液、糖漿和酏劑可以被制成劑量單元的形式，以便給定量包含預(yù)定量的化合物。糖漿可以通過將化合物溶于含有適合矯味劑的水溶液而制備，而酏劑是使用無毒性醇性載體制備。懸液可以通過將化合物分散在無毒性載體中配制。同樣可以加入增溶劑和乳化劑例如乙氧基化異硬脂醇和聚氧乙烯山梨糖醇醚、防腐劑、口味添加劑例如薄荷油或天然甜味劑或糖精，或者其他人工甜味劑等。
如果需要的話，口服給藥用劑量單元制劑可以被包封在微囊中。制劑也可以以這樣一種方式制備，以便釋放被延長(zhǎng)或延遲，例如將粒狀材料包裹或包埋在聚合物、蠟等中。
式I化合物及其鹽、溶劑合物和生理功能衍生物也可以以脂質(zhì)體遞送系統(tǒng)的形式給藥，例如小型單層囊、大型單層囊和多層囊。脂質(zhì)體可以從各種磷脂生成，例如膽固醇、硬脂胺或磷脂酰膽堿。
式I化合物及其鹽、溶劑合物和生理功能衍生物也可以使用化合物分子與之偶聯(lián)的作為個(gè)別載體的單克隆抗體而遞送。類胰蛋白酶抑制劑還可以與作為可定向藥物載體的可溶性聚合物偶聯(lián)?；衔镆部梢耘c作為靶向藥物載體的可溶性聚合物偶聯(lián)。這類聚合物可以包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羥丙基甲基丙烯酸酰胺苯酚、聚羥乙基天冬酰胺苯酚或聚氧乙烯-聚賴氨酸，被棕櫚酰殘基取代。此外，化合物可以與一類適合于實(shí)現(xiàn)藥物控制釋放的生物可降解聚合物偶聯(lián)，例如聚乳酸、聚ε已內(nèi)酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二羥基吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝膠的交聯(lián)或兩親嵌段共聚物。
適用于透皮給藥的藥物制劑可以作為獨(dú)立的硬膏劑給藥，用于與接受者表皮進(jìn)行延長(zhǎng)的、緊密接觸。因而例如，活性成分可以借助離子電滲作用從硬膏劑中遞送，離子電滲如Pharmaceutical Research，3(6)，318(1986)的一般術(shù)語所述。
適用于局部給藥的藥物化合物可以被配制成軟膏劑、霜?jiǎng)?、懸液、洗劑、粉劑、溶液、糊劑、凝膠、噴霧劑、氣霧劑或油劑。
關(guān)于眼睛或其他外部組織的治療，例如口腔和皮膚，制劑優(yōu)選地作為局部軟膏劑或霜?jiǎng)┦┯谩Ｔ诮o予軟膏劑的制劑情況下，可以采用活性成分與石蠟類或水可混溶性霜?jiǎng)┗|(zhì)。作為替代選擇，活性成分可以被配制成含有水包油型基質(zhì)或油包水型基質(zhì)的霜?jiǎng)?br> 適用于局部施用于眼睛的藥物制劑包括滴眼劑，其中活性成分溶解或懸浮在適合的載體中，特別是水性溶劑。
適用于局部施用在口腔中的藥物制劑涵蓋錠劑、含片(pastille)和漱口劑。
適用于直腸給藥的藥物制劑可以以栓劑或灌腸劑的形式給藥。
其中載體物質(zhì)是固體的適用于鼻給藥的藥物制劑包含粒徑例如在20-500微米范圍內(nèi)的粗粉，以鼻嗅的方式給藥，也就是從靠近鼻放置的含粉末容器中經(jīng)由鼻孔迅速吸入。適合于作為鼻噴霧劑或滴鼻劑給藥、以液體作為載體物質(zhì)的制劑涵蓋活性成分在水或油中的溶液。
適用于吸入給藥的藥物制劑涵蓋微細(xì)的粒狀粉塵或煙霧，其可以借助各種類型的加壓氣霧劑分配器、噴霧器或吹入器生成。
適用于陰道給藥的藥物制劑可以作為陰道栓、棉塞、霜?jiǎng)?、凝膠、糊劑、泡沫或噴霧制劑給藥。
適用于腸胃外給藥的藥物制劑包括水性與非水性無菌注射溶液，包含抗氧化劑、緩沖劑、制菌劑和溶質(zhì)，借此它們制劑被賦予與所治療接受者的血液等滲；和水性與非水性無菌懸液，可以包含懸浮介質(zhì)和增稠劑。制劑可以在單劑量或多劑量容器中給藥，例如密封的安瓿和小瓶，并且貯存在冷凍干燥(凍干)狀態(tài)下，以便僅在使用前不久才有必要加入無菌載體液體，例如注射用水。按照處方制備的注射溶液和懸液可以從無菌粉劑、顆粒劑和片劑制備。
不言而喻，除了上述特別提到的成分以外，制劑還可以包含本領(lǐng)域關(guān)于特定制劑類型常用的其他成分；因而例如，適合于口服給藥的制劑可以包含矯味劑。
式I化合物的治療有效量依賴于大量因素，例如包括動(dòng)物的年齡與體重、需要治療的確切病癥及其嚴(yán)重性、制劑的屬性和給藥的方法，最終取決于主治醫(yī)生或獸醫(yī)。不過，根據(jù)本發(fā)明的化合物就腫瘤生長(zhǎng)、例如結(jié)腸或乳腺癌治療而言的有效量一般在0.1至100mg/kg接受者(哺乳動(dòng)物)體重每天的范圍內(nèi)，特別通常在1至10mg/kg體重每天的范圍內(nèi)。因而，體重70kg的成年哺乳動(dòng)物的實(shí)際每天用量通常在70與700mg之間，該量可以作為每天單一劑量給予，或者通常在每天一系列部分劑量中給予(例如兩次、三次、四次、五次或六次)，以便總的每日劑量是相同的。鹽或溶劑合物或者其生理功能衍生物的有效量可以隨根據(jù)本發(fā)明的化合物本身的有效量來確定。可以假定，相似的劑量適合于上述其他病癥的治療。
本發(fā)明此外涉及藥品，包含至少一種式I化合物和/或其藥學(xué)可用衍生物、溶劑合物和立體異構(gòu)體，包括其任意比例的混合物，和至少一種另外的藥品活性成分。
本發(fā)明也涉及套件(藥盒)，由獨(dú)立包裝的(a)有效量的式I化合物和/或其藥學(xué)可用衍生物、溶劑合物和立體異構(gòu)體，包括其任意比例的混合物，和(b)有效量的另外的藥品活性成分組成。
套件包含適合的容器，例如盒子、單個(gè)的瓶子、袋子或安瓿。套件例如可以包含獨(dú)立的安瓿，各自含有有效量的式I化合物和/或其藥學(xué)可用衍生物、溶劑合物和立體異構(gòu)體，包括其任意比例的混合物，和有效量的另外的藥品活性成分的溶解或凍干形式。
用途本發(fā)明化合物適合作為哺乳動(dòng)物、尤其人類的藥物活性成分，治療酪氨酸激酶-誘發(fā)的疾病。這些疾病包括腫瘤細(xì)胞的增殖、促進(jìn)實(shí)體腫瘤生長(zhǎng)的病理性新血管化(或血管生成)、眼部新血管化(糖尿病性視網(wǎng)膜病、衰老-誘發(fā)的黃斑變性等)和炎癥(銀屑病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等)。
本發(fā)明涵蓋式I化合物和/或其生理學(xué)可接受鹽和溶劑合物的用途，用于制備治療或預(yù)防癌癥的藥品。優(yōu)選治療的癌發(fā)源于腦癌、泌尿生殖道癌、淋巴系統(tǒng)癌、胃癌、喉癌和肺癌。另一組優(yōu)選的癌癥形式是單核細(xì)胞性白血病、肺腺癌、小細(xì)胞性肺癌、胰腺癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤和乳腺癌(breastcarcinoma)。
本發(fā)明也涵蓋根據(jù)本發(fā)明權(quán)利要求1的化合物和/或其生理可接受鹽和溶劑合物的用途，用于制備治療或預(yù)防其中牽連有血管生成的疾病的藥品。
這樣一種其中牽連有血管生成的疾病是眼部疾病，例如視網(wǎng)膜血管化、糖尿病性視網(wǎng)膜病、衰老-誘發(fā)的黃斑變性等。
式I化合物和/或其生理學(xué)可接受鹽和溶劑合物在制備用于治療或預(yù)防炎性疾病的藥品中的用途也落入本發(fā)明的范圍。這類炎性疾病的實(shí)例包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病、接觸性皮炎、遲發(fā)型過敏反應(yīng)等。
本發(fā)明也涵蓋式I化合物和/或其生理學(xué)可接受鹽和溶劑合物的用途，用于制備治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物酪氨酸激酶-誘發(fā)的疾病或酪氨酸激酶-誘發(fā)的病癥的藥品，其中關(guān)于這種方法，向需要這類治療的患病哺乳動(dòng)物給予治療有效量的根據(jù)本發(fā)明的化合物。治療量因具體疾病而異，本領(lǐng)域技術(shù)人員無需額外努力即可確定。
本發(fā)明也涵蓋式I化合物和/或其生理學(xué)可接受鹽和溶劑合物的用途，用于制備治療或預(yù)防視網(wǎng)膜血管化的藥品。
治療或預(yù)防眼部疾病如糖尿病性視網(wǎng)膜病和衰老-誘發(fā)的黃斑變性的方法同樣是本發(fā)明的一部分。治療或預(yù)防炎性疾病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病、接觸性皮炎和遲發(fā)型過敏反應(yīng)以及治療或預(yù)防選自骨肉瘤、骨關(guān)節(jié)炎和佝僂病的骨病變的用途同樣落入本發(fā)明的范圍。
措辭“酪氨酸激酶-誘發(fā)的疾病或病癥”表示依賴于一種或多種酪氨酸激酶活性的病理?xiàng)l件。酪氨酸激酶直接或間接參與多種細(xì)胞活動(dòng)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，包括增殖、粘連、遷移和分化。與酪氨酸激酶活性有關(guān)的疾病包括腫瘤細(xì)胞的增殖、促進(jìn)實(shí)體腫瘤生長(zhǎng)的病理性新血管化、眼部新血管化(糖尿病性視網(wǎng)膜病、衰老-誘發(fā)的黃斑變性等)和炎癥(銀屑病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等)。
可以將式I化合物對(duì)患者給藥以治療癌癥。本發(fā)明化合物抑制腫瘤血管生成，從而影響腫瘤的生長(zhǎng)(J.Rak等人，Cancer Research，554575-4580，1995)。式I化合物的血管生成-抑制性質(zhì)也適合于治療某些形式的涉及視網(wǎng)膜新血管化的失明。
式I化合物也適合于治療某些骨病變，例如骨肉瘤、骨關(guān)節(jié)炎和佝僂病，也稱為致癌性骨軟化(Hasegawa等人，Skeletal Radiol.28，41-45頁，1999；Gerber等人，Nature Medicine，Vol.5，No.6，623-628頁，1999年6月)。由于VEGF通過在成熟破骨細(xì)胞中表達(dá)的KDR/Flk-1直接促進(jìn)破骨性骨吸收(FEBS Let.473161-164(2000)；Endocrinology，1411667(2000))，本發(fā)明化合物也適合于治療和預(yù)防涉及骨吸收的病癥，例如骨質(zhì)疏松和佩吉特氏病。這些化合物也可以通過減少局部缺血后的腦水腫、組織傷害和再灌注損傷，用于減少或預(yù)防發(fā)生在腦缺血事件后的組織傷害，例如中風(fēng)(Drug News Perspect 11265-270(1998)；J.Clin.Invest.1041613-1620(1999))。
本發(fā)明因而涉及式I化合物及其藥學(xué)可用衍生物、溶劑合物和立體異構(gòu)體、包括其任意比例的混合物的用途，用于制備治療激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的抑制、調(diào)節(jié)和/或調(diào)控在其中扮演角色的疾病的藥品。
這里優(yōu)選的激酶選自酪氨酸激酶和Raf激酶。
酪氨酸激酶優(yōu)選地是TIE-2、VEGFR、PDGFR、FGFR和/或FLT/KDR。
優(yōu)選式I化合物及其藥學(xué)可用衍生物、溶劑合物和立體異構(gòu)體、包括其任意比例的混合物的用途，用于制備治療受到根據(jù)權(quán)利要求1的化合物抑制酪氨酸激酶的影響的疾病的藥品。
特別優(yōu)選制備藥品的用途，所述藥品用于治療受到根據(jù)權(quán)利要求1的化合物抑制TIE-2、VEGFR、PDGFR、FGFR和/或FLT/KDR的影響的疾病。
尤其優(yōu)選治療疾病的用途，其中該疾病是實(shí)體腫瘤。
實(shí)體腫瘤優(yōu)選地選自鱗狀上皮、膀胱、胃、腎、頭頸、食道、子宮頸、甲狀腺、腸、肝、腦、前列腺、泌尿生殖道、淋巴系統(tǒng)、胃、喉和/或肺的腫瘤。
實(shí)體腫瘤此外優(yōu)選地選自肺腺癌、小細(xì)胞性肺癌、胰腺癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、結(jié)腸癌和乳腺癌。
此外優(yōu)選治療血液和免疫系統(tǒng)腫瘤的用途，優(yōu)選地治療選自如下的腫瘤急性髓性白血病、慢性髓性白血病、急性淋巴性白血病和/或慢性淋巴性白血病。
本發(fā)明此外涉及式I化合物治療其中牽連有血管生成的疾病的用途。
該疾病優(yōu)選地是眼部疾病。
本發(fā)明此外涉及治療視網(wǎng)膜血管化、糖尿病性視網(wǎng)膜病、衰老-誘發(fā)的黃斑變性和/或炎性疾病的用途。
炎性疾病優(yōu)選地選自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病、接觸性皮炎和遲發(fā)型過敏反應(yīng)。
本發(fā)明此外涉及根據(jù)本發(fā)明的化合物治療骨病變的用途，其中骨病變發(fā)源于骨肉瘤、骨關(guān)節(jié)炎和佝僂病。
式I化合物適合于制備治療由Raf激酶所導(dǎo)致、介導(dǎo)和/或傳播的疾病的藥品，其中該Raf激酶選自A-Raf、B-Raf和Raf-1。
優(yōu)選治療疾病的用途，所述疾病優(yōu)選選自過度增殖性和非過度增殖性。
它們是癌性疾病或非癌性疾病。
非癌性疾病選自銀屑病、關(guān)節(jié)炎、炎癥、子宮內(nèi)膜異位、瘢痕形成、良性前列腺增生、免疫疾病、自體免疫疾病和免疫缺陷疾病。
癌性疾病選自腦癌、肺癌、鱗狀細(xì)胞癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、腎癌、結(jié)腸直腸癌、乳腺癌、頭癌、頸癌、食道癌、婦科癌癥、甲狀腺癌、淋巴瘤、慢性白血病和急性白血病。
式I化合物也可以與其他熟知的治療劑同時(shí)給藥，根據(jù)它們對(duì)抗所治療的病癥的特定有用性加以選擇。例如，在骨病癥的情況下，可取的組合包括抗吸收性雙膦酸類，例如阿侖膦酸和利塞膦酸；整聯(lián)蛋白阻滯劑(如下進(jìn)一步所定義)，例如αvβ3拮抗劑；用在激素替代療法中的綴合雌激素，例如Prempro、Premarin和Endometrion；選擇性雌激素受體調(diào)控劑(SERM)，例如雷洛昔芬、屈洛昔芬、CP-336，156(Pfizer)和拉索昔芬；組織蛋白酶K抑制劑；和ATP質(zhì)子泵抑制劑。
本發(fā)明化合物也適合于與已知的抗癌劑組合。這些已知的抗癌劑包括如下雌激素受體調(diào)控劑、雄激素受體調(diào)控劑、類視色素受體調(diào)控劑、細(xì)胞毒性劑、抗增殖劑、異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑和另外的血管生成抑制劑。本發(fā)明化合物特別適合于與放療同時(shí)給藥。本領(lǐng)域已經(jīng)描述過抑制VEGF與放療聯(lián)合的協(xié)同效應(yīng)(WO 00/61186)。
“雌激素受體調(diào)控劑”表示干擾或抑制雌激素與受體結(jié)合的化合物，與機(jī)理無關(guān)。雌激素受體調(diào)控劑的實(shí)例包括但不限于他莫昔芬、雷洛昔芬、艾多昔芬、LY353381、LY117081、托瑞米芬、fulvestrant、2，2-二甲基-丙酸4-[7-(2，2-二甲基-1-氧代丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-2H-1-苯并吡喃-3-基)苯基酯、4，4’-二羥基二苯酮-2，4-二硝基苯基腙和SH646。
“雄激素受體調(diào)控劑”表示干擾或抑制雄激素與受體結(jié)合的化合物，與機(jī)理無關(guān)。雄激素受體調(diào)控劑的實(shí)例包括非那雄胺與其他5α-還原酶抑制劑、尼魯米特、氟他胺、比卡魯胺、利阿唑和乙酸abiraterone。
“類視色素受體調(diào)控劑”表示干擾或抑制類視色素與受體結(jié)合的化合物，與機(jī)理無關(guān)。這類類視色素受體調(diào)控劑的實(shí)例包括bexarotene、維甲酸、13-順式-視黃酸、9-順式-視黃酸、α-二氟甲基鳥氨酸、ILX23-7553、反式-N-(4’-羥基苯基)視黃胺(retinamide)和N-4-羧基苯基視黃胺。
“細(xì)胞毒性劑”表示主要通過直接作用于細(xì)胞功能或者抑制或干擾細(xì)胞減數(shù)分裂而導(dǎo)致細(xì)胞死亡的化合物，包括烷基化劑、腫瘤壞死因子、插層劑、微管蛋白抑制劑和拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑。細(xì)胞毒性劑的實(shí)例包括但不限于tirapazimine、sertenef、腫瘤壞死因子、異環(huán)膦酰胺、tasonermin、氯尼達(dá)明、碳鉑、六甲密胺、松龍苯芥、二溴衛(wèi)矛醇、雷諾氮芥、福泰氮芥、nedaplatin、奧沙利鉑、泰莫佐羅、heptaplatin、雌莫司汀、二丙胺磺酯、三芥環(huán)膦酰胺、尼莫司汀、螺溴丙酰胺、嘌米舌泊、洛巴鉑、satraplatin、profiromycin、順鉑、irofulven、dexifosfamide、順式-胺二氯(2-甲基吡啶)鉑、芐基胍、glufosfamide、GPX100、(反式，反式，反式)雙-μ-(己烷-1，6-二胺)-μ-[二胺-鉑(II)]雙[二胺(氯)鉑(II)]四氯化物、diarizidinyl-精胺、三氧化砷、1-(11-十二烷氨基-10-羥基十一烷基)-3，7-二甲基黃嘌呤、佐柔比星、伊達(dá)比星、柔紅霉素、必桑郡、米托蒽醌、吡柔比星、pinafide、戊柔比星、amrubicin、抗瘤酮、3’-去氨基-3’-嗎啉代-13-脫氧-10-羥基去甲柔紅霉素、安那霉素、galarubicin、elinafide、MEN10755和4-去甲氧基-3-去氨基-3-氮丙啶基-4-甲磺?；峒t霉素(參見WO 00/50032)。
微管蛋白抑制劑的實(shí)例包括紫杉醇、硫酸長(zhǎng)春地辛、3’，4’-二脫氫-4’-脫氧-8’-降長(zhǎng)春花堿、多西他賽、根霉素、dolastatin、mivobulin isethionate、auristatin、cemadotin、RPR109881、BMS184476、vinflunine、cryptophycin、2，3，4，5，6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯磺酰胺、脫水長(zhǎng)春花堿、N，N-二甲基-L-纈氨酰-L-纈氨酰-N-甲基-L-纈氨酰-L-脯氨酰-L-脯氨酸叔丁基酰胺、TDX258和BMS188797。
拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑例如是拓?fù)涮婵怠ycaptamine、伊立替康、rubitecan、6-乙氧基丙酰基-3’，4’-O-外亞芐基教酒菌素、9-甲氧基-N，N-二甲基-5-硝基吡唑并[3，4，5-kl]吖啶-2-(6H)丙胺、1-氨基-9-乙基-5-氟-2，3-二氫-9-羥基-4-甲基-1H，12H-苯并[de]吡喃并[3’，4’b，7]中氮茚并[1，2b]喹啉-10，13(9H，15H)-二酮、lurtotecan、7-[2-(N-異丙氨基)乙基]-(20S)喜樹堿、BNP1350、BNPI1100、BN80915、BN80942、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、索布佐山、2’-二甲氨基-2’-脫氧依托泊苷、GL331、N-[2-(二甲氨基)乙基]-9-羥基-5，6-二甲基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑-1-酰胺、asulacrine、(5a，5aB，8aa，9b)-9-[2-[N-[2-(二甲氨基)乙基]-N-甲基氨基]乙基]-5-[4-羥基-3，5-二甲氧基苯基]-5，5a，6，8，8a，9-六氫呋喃并(3’，4’6，7)萘并(2，3-d)-1，3-二氧雜環(huán)戊二烯(dioxol)-6-酮、2，3-(亞甲二氧基)-5-甲基-7-羥基-8-甲氧基苯并[c]菲啶、6，9-雙[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]異喹啉-5，10-二酮、5-(3-氨基丙基氨基)-7，10-二羥基-2-(2-羥基乙氨基甲基)-6H-吡唑并[4，5，1-de]吖啶-6-酮、N-[1-[2-(二乙氨基)乙基氨基]-7-甲氧基-9-氧代-9H-噻噸-4-基甲基]甲酰胺、N-(2-(二甲氨基)乙基)吖啶-4-甲酰胺、6-[[2-(二甲氨基)乙基]氨基]-3-羥基-7H-茚并[2，1-c]喹啉-7-酮和地美司鈉。
“抗增殖劑”包括反義RNA和DNA寡核苷酸，例如G3139、ODN698、RVASKRAS、GEM231和INX3001，和抗代謝物，例如山萮阿糖啶、卡莫氟、呋氟啶、噴托他丁、多西氟尿啶、曲麥克特、氟達(dá)拉濱、卡培他濱、galocitabine、阿糖胞苷酯、fosteabine鈉水合物、雷替曲塞、paltitrexid、emitefur、噻唑呋林、脫氧氮雜胞苷、nolatrexed、pemetrexed、nelzarabine、2’-脫氧-2’-亞甲基胞苷、2’-氟亞甲基-2’-脫氧胞苷、N-[5-(2，3-二氫苯并呋喃基)磺?；鵠-N’-(3，4-二氯苯基)脲、N6-[4-脫氧-4-[N2-[2(E)，4(E)-十四碳二烯?；鵠甘氨酰氨基]-L-甘油-B-L-甘露吡喃庚糖基(mannoheptopyranosyl)]腺嘌呤、aplidine、ecteinascidin、troxacitabine、4-[2-氨基-4-氧代-4，6，7，8-四氫-3H-嘧啶并[5，4-b]-1，4-噻嗪-6-基-(S)-乙基]-2，5-噻吩?；?thienoyl)-L-谷氨酸、氨嘌呤、5-氟尿嘧啶、丙胺菌素、11-乙酰基-8-(氨甲酰氧基甲基)-4-甲?；?6-甲氧基-14-氧雜-1，11-二氮雜四環(huán)(7.4.1.0.0)十四碳-2，4，6-三烯-9-基乙酸酯、swainsonine、洛美曲索、右丙亞胺、methioninase、2’-氰基-2’-脫氧-N4-棕櫚?；?1-B-D-呋喃阿拉伯糖基(arabinofuranosyl)胞嘧啶和3-氨基吡啶-2-甲醛縮氨基硫脲?！翱乖鲋硠币舶ǔ把苌梢种苿毕滤心切┮酝獾纳L(zhǎng)因子單克隆抗體，例如司徒曼布，和腫瘤抑制基因，例如p53，它可以經(jīng)由重組病毒-介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移而遞送(參見例如美國專利No.6069134)。
本發(fā)明此外涉及式I化合物制備治療疾病的藥品的用途，其中該疾病是以紊亂的血管生成為特征。該疾病優(yōu)選地是癌癥疾病。
紊亂的血管生成優(yōu)選地由紊亂的VEGFR-1、VEGFR-2和/或VEGFR-3活性所導(dǎo)致。
因此也特別優(yōu)選根據(jù)本發(fā)明的化合物制備用于抑制VEGFR-2活性的藥品的用途。
測(cè)定法借助下述測(cè)定法測(cè)試實(shí)施例所述式I化合物，發(fā)現(xiàn)具有激酶抑制活性。其他測(cè)定法可從文獻(xiàn)獲知，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠容易地實(shí)施(例如參見Dhanabal等人，Cancer Res.59189-197；Xin等人，J.Biol.Chem.2749116-9121；Sheu等人，Anticancer Res.184435-4441；Ausprunk等人，Dev.Biol.38237-248；Gimbrone等人，J.Natl.Cancer Inst.52413-427；Nicosia等人，In Vitro 18538-549)。
VEGF受體激酶測(cè)定法向4∶1聚谷氨酸/酪氨酸底物(pEY)摻入放射性標(biāo)記的磷酸鹽，測(cè)量VEGF受體激酶活性。在濾膜上捕集磷酸化的pEY產(chǎn)物，借助閃爍計(jì)數(shù)法量化放射性標(biāo)記磷酸鹽的摻入。
材料VEGF受體激酶將人KDR(Terman，B.I.等人，Oncogene(1991)Vol.6，1677-1683頁)和Flt-1(Shibuya，M.等人，Oncogene(1990)Vol.5，519-524頁)的細(xì)胞內(nèi)酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域作為谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)基因融合蛋白克隆。這通過將KDR激酶的胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域以與GST基因羧基末端的框內(nèi)融合方式克隆來實(shí)現(xiàn)。使用桿狀病毒表達(dá)載體(pAcG2T，Pharmingen)，在Spodopterafrugiperda(Sf21)昆蟲細(xì)胞(Invitrogen)中表達(dá)可溶性重組GST-激酶結(jié)構(gòu)域融合蛋白。
溶解緩沖液50mM Tris pH7.4，0.5M NaCl，5mM DTT，1mM EDTA，0.5％ TritonX-100，10％甘油，各10mg/ml亮抑酶肽、抑胃酶肽與抑酶肽和1mM苯甲磺酰氟(均來自Sigma)。
洗滌緩沖液50mM Tris pH 7.4，0.5M NaCl，5mM DTT，1mM EDTA，0.05％ TritonX-100，10％甘油，各10mg/ml亮抑酶肽、抑胃酶肽與抑酶肽和1mM苯甲磺酰氟。
透析緩沖液50mM Tris pH7.4，0.5M NaCl，5mM DTT，1mM EDTA，0.05％ TritonX-100，50％甘油，各10mg/ml亮抑酶肽、抑胃酶肽與抑酶肽和1mM苯甲磺酰氟。
10x反應(yīng)緩沖液200mM Tris pH7.4，1.0M NaCl，50mM MnCl2，10mM DTT和5mg/ml牛血清白蛋白[BSA](Sigma)。
酶稀釋緩沖液50mM Tris pH7.4，0.1M NaCl，1mM DTT，10％甘油，100mg/ml BSA。
10x底物750μg/ml聚(谷氨酸/酪氨酸4∶1)(Sigma)。
終止溶液30％三氯乙酸，0.2M焦磷酸鈉(均來自Fisher)。
洗滌溶液15％三氯乙酸，0.2M焦磷酸鈉。
過濾平板Millipore #MAFC NOB，GF/C玻璃纖維96孔平板。
方法A-蛋白質(zhì)純化1、將Sf21細(xì)胞用重組病毒感染，感染復(fù)數(shù)為5個(gè)病毒顆粒/細(xì)胞，在27℃生長(zhǎng)48小時(shí)。
2、所有步驟都在4℃進(jìn)行。在1000xg離心收獲已感染的細(xì)胞，用1/10體積的溶解緩沖液在4℃溶解30分鐘，繼之以在100000xg離心1小時(shí)。然后使上清液通過用溶解緩沖液平衡過的谷胱甘肽瓊脂糖酸(Pharmacia)，用5體積的同一緩沖液繼之以5體積的洗滌緩沖液洗滌。將重組GST-KDR蛋白用洗滌緩沖液/10mM還原型谷胱甘肽(Sigma)洗脫，對(duì)透析緩沖液透析。
方法B-VEGF受體激酶測(cè)定1、在50％DMSO中的測(cè)定溶液中加入5μl抑制劑或?qū)φ铡?br> 2、加入35μl反應(yīng)混合物，其中含有5μl 10x反應(yīng)緩沖液、5μl 25mMATP/10μCi[33p]ATP(Amersham)和5μl 10x底物。
3、加入10μl KDR(25nM)的酶稀釋緩沖溶液開始反應(yīng)。
4、在室溫混合并溫育15分鐘。
5、加入50μl終止溶液終止反應(yīng)。
6、在4℃溫育15分鐘。
7、轉(zhuǎn)移90μl等分試樣至過濾平板。
8、抽吸，用洗滌溶液洗滌3次。
9、加入30μl閃爍合劑，密封平板，在Wallace Microbeta閃爍計(jì)數(shù)器中計(jì)數(shù)。
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞致有絲分裂作用測(cè)定介導(dǎo)對(duì)生長(zhǎng)因子的致有絲分裂反應(yīng)的VEGF受體的表達(dá)在很大程度上受限于血管內(nèi)皮細(xì)胞。人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)在培養(yǎng)物中響應(yīng)于VEGF處理而增殖，可以用作測(cè)定系統(tǒng)以量化KDR激酶抑制劑對(duì)VEGF刺激的效應(yīng)。在所述測(cè)定法中，將靜息HUVEC單層用載體或供試化合物處理，2小時(shí)后加入VEGF或堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)。通過測(cè)量[3H]胸苷向細(xì)胞DNA的摻入，測(cè)定對(duì)VEGF或bFGF的致有絲分裂反應(yīng)。
材料HUVEC從Clonetics Corp.獲得作為原代培養(yǎng)分離株冷凍的HUVEC。在內(nèi)皮生長(zhǎng)培養(yǎng)基(EGM；Clonetics)中獲得細(xì)胞，第3-7代用于致有絲分裂測(cè)定。
培養(yǎng)平板NUNCLON 96-孔聚苯乙烯組織培養(yǎng)平板(NUNC #167008)。
測(cè)定培養(yǎng)基Dulbecco改性Eagle培養(yǎng)基，其中含有1g/ml葡萄糖(低葡萄糖DMEM；Mediatech)加10％(v/v)胎牛血清(Clonetics)。
供試化合物將供試化合物的儲(chǔ)備溶液系列稀釋在100％二甲基亞砜(DMSO)中，直到400倍于它們的所需最終濃度。在向細(xì)胞加入前不久，在測(cè)定培養(yǎng)基中進(jìn)行最終稀釋至1x濃度。
10x生長(zhǎng)因子在測(cè)定培養(yǎng)基中制備人VEGF 165溶液(500ng/ml；R & D Systems)和bFGF溶液(10ng/ml；R & D Systems)。
10x[3H]胸苷
將[甲基-3H]胸苷(20Ci/mmol；Dupont-NEN)在低葡萄糖DMEM培養(yǎng)基中稀釋至80μCi/ml。
細(xì)胞洗滌培養(yǎng)基Hank平衡鹽溶液(Mediatech)，其中含有1mg/ml牛血清白蛋白(Boehringer-Mannheim)。
細(xì)胞溶解溶液1N NaOH，2％(w/v)Na2CO3。
方法1通過胰蛋白酶化作用收獲在EGM中供養(yǎng)的HUVEC單層，平板接種在96-孔平板中，密度為4000細(xì)胞每100μl測(cè)定培養(yǎng)基每孔。在37℃和含有5％CO2的潮濕氣氛中，阻止細(xì)胞生長(zhǎng)達(dá)24小時(shí)。
方法2將生長(zhǎng)阻止培養(yǎng)基用100μl測(cè)定培養(yǎng)基代替，所述測(cè)定培養(yǎng)基含有載體(0.25％[v/v]DMSO)或所需最終濃度的供試化合物。所有測(cè)定都進(jìn)行一式三份。然后將細(xì)胞在37℃/5％CO2下溫育2小時(shí)，以允許供試化合物進(jìn)入細(xì)胞。
方法32小時(shí)預(yù)處理階段后，加入10μl/孔測(cè)定培養(yǎng)基、10x VEGF溶液或10xbFGF溶液刺激細(xì)胞。然后在37℃/5％ CO2下溫育細(xì)胞。
方法4在生長(zhǎng)因子的存在下24小時(shí)后，加入10x[3H]胸苷(10μl/孔)。
方法5加入[3H]胸苷后三天，抽吸除去培養(yǎng)基，將細(xì)胞用細(xì)胞洗滌培養(yǎng)基洗滌兩次(400μl/孔繼之以200μl/孔)。然后加入細(xì)胞溶解溶液(100μl/孔)，在37℃加熱30分鐘，使經(jīng)洗滌的粘附細(xì)胞增溶。將細(xì)胞溶解產(chǎn)物轉(zhuǎn)移至含有150μl水的7ml玻璃閃爍小瓶。加入閃爍合劑(5ml/瓶)，借助液體閃爍分光術(shù)測(cè)定與細(xì)胞締合的放射性。
根據(jù)這些測(cè)定法，式I化合物是VEGF的抑制劑，因而適合于抑制血管生成，例如治療眼部疾病，例如糖尿病性視網(wǎng)膜病，和用于治療癌，例如實(shí)體腫瘤。本發(fā)明化合物抑制培養(yǎng)物中VEGF-刺激的人血管內(nèi)皮細(xì)胞致有絲分裂作用，IC50值為0.01-5.0μM。這些化合物也顯示相對(duì)于相關(guān)酪氨酸激酶的選擇性(例如FGFR1和Src家族；關(guān)于Src激酶與VEGFR激酶之間的關(guān)系，參見Eliceiri等人，Molecular Cell，Vol.4，915-924頁，1999年12月)。
TIE-2試驗(yàn)例如可以類似于WO 02/44156所示方法進(jìn)行。
該測(cè)定法測(cè)定在放射性33P-ATP的存在下，供試物質(zhì)對(duì)底物聚(Glu，Tyr)被TIE-2激酶磷酸化的抑制活性。在溫育期間，磷酸化的底物與“快速平板(flashplate)”微量滴定平板的表面結(jié)合。除去反應(yīng)混合物后，將微量滴定平板洗滌數(shù)次，隨后測(cè)量其表面上的放射性。供試物質(zhì)的抑制效應(yīng)導(dǎo)致放射性低于未受干擾的酶反應(yīng)。
上下文中的所有溫度均以℃表示。下列實(shí)施例中，“常規(guī)操作”表示如果必要的話加入水，如果必要的話調(diào)節(jié)pH至2與10之間的數(shù)值，這依賴于終產(chǎn)物的構(gòu)成，將混合物用乙酸乙酯或二氯甲烷萃取，分離各相，有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，產(chǎn)物經(jīng)過硅膠色譜和/或結(jié)晶純化。硅膠上的Rf值；洗脫劑乙酸乙酯/甲醇9∶1。
質(zhì)譜(MS) EI(電子撞擊電離)M+FAB(快速原子轟擊)(M+H)+ESI(電子噴射電離)(M+H)+APCI-MS(大氣壓化學(xué)電離-質(zhì)譜)(M+H)+實(shí)施例11-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基苯基)脲(A1)的制備類似于下列流程進(jìn)行。
1.1 1-[4-(叔丁氧羰基氨基)苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基苯基)脲的制備將0.597g 2-甲氧基-5-三氟甲基苯胺溶于10ml二氯甲烷，加入0.665g氯甲酸4-硝基苯基酯，然后滴加0.27ml吡啶。將全部混合物在室溫?cái)嚢?.5h。然后加入0.625g N-Boc-苯二胺，將混合物用10ml二氯甲烷沖洗，滴加1.02ml N-乙基二異丙基胺。將澄清的暗色溶液在室溫?cái)嚢?h。抽吸濾出所沉積的沉淀，用CH2Cl2然后用石油醚充分洗滌，得到610mg白色固體物質(zhì)；HPLC-MS[M+H]+426。
1.2 1-(4-氨基苯基)-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基苯基)脲的制備向0.61g上述化合物加入14ml 2M HCl的二烷溶液。生成實(shí)際上澄清的溶液。約20min后，生成沉淀。將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。抽吸濾出固體，用石油醚沖洗，得到500mg所需化合物。
1.3 1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基苯基)脲的制備將0.139g 2-氨基氰基乙酰胺與20ml乙腈和0.25ml原甲酸三乙酯合并，使混合物回流2h。將澄清的溶液冷卻至室溫，加入在1.2下制備的0.571g化合物和0.21ml三乙胺。使混合物回流過夜。除去溶劑，得到0.91g粗產(chǎn)物。使殘余物從CH2Cl2和少量MeOH中結(jié)晶，再次用石油醚洗滌，最終得到510mg所需化合物“A1”；APCI-MS[M+H]+435。
類似合成所有下列化合物。
如果必要的話借助色譜或制備型HPLC進(jìn)行純化，條件是色譜柱RP18(7μm)Lichrosorb 250x25洗脫劑A98H2O，2 CH3CN，0.1％TFAB10H2O，90CH3CN，0.1％TFAUV225nm流速 10ml/min經(jīng)過制備型HPLC純化得到化合物，一般為TFA鹽。
實(shí)施例2類似地得到下列化合物1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氟-3-三氟甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+369；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+436；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氯-3-三氟甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+439；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-三氟甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+405；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+351；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氯-6-甲氧基-3-甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+415；
1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(5-氟-3-三氟甲基苯基)脲，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-乙基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-叔丁基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-二甲氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-[6-(2-二甲氨基乙氧基)-3-三氟甲基苯基]脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-{6-[2-(嗎啉-4-基)乙氧基]-3-三氟甲基苯基}脲；5-氨基-1-[4-(2-氟-5-三氟甲基苯甲酰氨基)苯基]-1H-咪唑-4-甲酰胺 5-氨基-1-[4-(2-氟-5-三氟甲基苯基氨甲?；?苯基]-1H-咪唑-4-甲酰胺 實(shí)施例35-氨基-1-[4-(2-氟-5-三氟甲基苯甲酰氨基)苯基]-1H-咪唑-4-甲酰胺的制備類似于下列流程進(jìn)行
1、將1.60g N-Boc-1，4-苯二胺與100ml DMF和1-97g 2-氯-1-甲基吡啶碘化物合并，在50℃加熱2h。生成澄清的黃-褐色溶液，向其中加入1.76g 2-氟-5-(三氟甲基)苯甲酸和13ml N-乙基二異丙基胺。將全部混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中蒸發(fā)溶劑至干。向剩余的油加入70ml乙酸乙酯和70ml水。水相再次用50ml乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)相，用100ml飽和NaCl溶液萃取。將溶液用Na2SO4干燥，隨后過濾，蒸發(fā)，得到2.64g[4-(2-氟-5-三氟甲基苯甲酰氨基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯。該物質(zhì)經(jīng)過快速色譜純化，用CH2Cl2/MeOH 97∶3洗脫(30ml級(jí)分)，得到0.54g純化產(chǎn)物。
2、將0.54g上述產(chǎn)物溶于25ml 2M HCl/二烷。將全部混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。抽吸濾出沉淀產(chǎn)物，用石油醚沖洗，風(fēng)干，得到0.3g N-(4-氨基苯基)-2-氟-5-三氟甲基苯甲酰胺。
3、將0.089g 2-氨基氰基乙酰胺與20ml乙腈和0.18ml原甲酸三乙酯合并，回流2h。使澄清的溶液冷卻至室溫。加入0.3g上述苯甲酰胺和0.15ml三乙胺，使混合物回流過夜。將混合物冷卻至室溫，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中蒸發(fā)至干，得到0.49g粗產(chǎn)物。該粗產(chǎn)物借助制備型HPLC純化
色譜柱RP18(7μm)Lichrosorb 250x25(Art.No.151494)洗脫劑A98H2O，2CH3CN，0.1％TFAB10H2O，90CH3CN，0.1％TFAUV225nm；1個(gè)量程流速 10ml/min(1個(gè)級(jí)分＝1分鐘)梯度 0min 25％ B5min 25％ B50min 90％ B70min 95％ B合并所需級(jí)分，蒸發(fā)，冷凍干燥，得到58mg所需化合物 APCI-MS[M+H]+408。
實(shí)施例4類似于實(shí)施例1，隨后使游離氨基咪唑化合物與當(dāng)量的酸反應(yīng)，得到下列鹽形式1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲對(duì)甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氟-3-三氟甲基苯基)脲對(duì)甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-甲基苯基)脲對(duì)甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+369；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基苯基)脲對(duì)甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+435；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-三氟甲基苯基)脲對(duì)甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+405；
1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲甲磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲樟腦磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲檸檬酸鹽，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲硫酸鹽，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(5-氟-3-三氟甲基苯基)脲對(duì)甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+423；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲對(duì)甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+437；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-叔丁基苯基)脲對(duì)甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+393；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-三氟甲氧基苯基)脲對(duì)甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+421；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-三氟甲氧基苯基)脲對(duì)甲苯磺酸鹽，APCI-MS(M+H)+435。
下列實(shí)施例涉及藥品實(shí)施例A注射小瓶將100g式I活性成分與5g磷酸氫二鈉的3L重蒸餾水溶液用2N鹽酸調(diào)至pH6.5，無菌過濾，轉(zhuǎn)移至注射小瓶，在無菌條件下凍干，在無菌條件下密封。每支注射小瓶含有5mg活性成分。
實(shí)施例B栓劑將20g式I活性成分與100g大豆卵磷脂和1400g可可脂的混合物熔化，倒入模具內(nèi)，冷卻。每支栓劑含有20mg活性成分。
實(shí)施例C溶液制備1g式I活性成分、9.38g NaH2PO42H2O、28.48g Na2HPO412H2O與0.1g苯扎氯銨在940ml重蒸餾水中的溶液。調(diào)節(jié)pH至6.8，將溶液加至1L，照射滅菌。該溶液可以用作滴眼劑。
實(shí)施例D軟膏劑將500mg式I活性成分與99.5g凡士林在無菌條件下混合。
實(shí)施例E片劑將1kg式I活性成分、4kg乳糖、1.2kg馬鈴薯淀粉、0.2kg滑石與0.1kg硬脂酸鎂的混合物按常規(guī)方式壓制成片，以便每片含有10mg活性成分。
實(shí)施例F糖衣丸(dragee)類似于實(shí)施例E壓制片劑，隨后按常規(guī)方式用蔗糖、馬鈴薯淀粉、滑石、黃蓍膠與染劑的包衣料包衣。
實(shí)施例G膠囊劑將2kg式I活性成分按常規(guī)方式裝入硬明膠膠囊內(nèi)，以便每粒膠囊含有20mg活性成分。
實(shí)施例H安瓿劑將1kg式I活性成分在60L重蒸餾水中的溶液無菌過濾，轉(zhuǎn)移至安瓿內(nèi)，在無菌條件下冷凍干燥，在無菌條件下密封。每支安瓿含有10mg活性成分。
權(quán)利要求
1.式I化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5各自彼此獨(dú)立地表示H、A、OH、OA、鏈烯基、炔基、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、COOH、COOA、-OHet、-O-亞烷基-Het、-O-亞烷基-NR10R11或CONR10R11，選自R1、R2、R3、R4、R5的兩個(gè)相鄰基團(tuán)一起也表示-O-CH2-CH2-、-O-CH2-O-或-O-CH2-CH2-O-，R6、R7各自彼此獨(dú)立地表示H、A、Hal、OH、OA或CN，R8表示CN、COOH、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，R9表示H或A，R10、R11各自彼此獨(dú)立地表示H或A，Het表示單環(huán)或二環(huán)的飽和、不飽和或芳族雜環(huán)，具有1至4個(gè)N、O和/或S原子，該環(huán)可以是未取代的或者被Hal、A、OA、COOA、CN和/或羰基氧(＝O)單-、二-或三-取代，A表示具有1至10個(gè)C原子的烷基，另外，其中1-7個(gè)H原子可以被F和/或氯代替，X、X’各自彼此獨(dú)立地表示NH或者不存在，Hal表示F、Cl、Br或I，及其藥學(xué)可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構(gòu)體，包括其任意比例的混合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X不存在或者表示NH，X’表示NH，及其藥學(xué)可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構(gòu)體，包括其任意比例的混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中R1、R2、R3、R4、R5各自彼此獨(dú)立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR10R11，及其藥學(xué)可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構(gòu)體，包括其任意比例的混合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3一項(xiàng)或多項(xiàng)的化合物，其中Het表示單環(huán)的飽和雜環(huán)，具有1至3個(gè)N、O和/或S原子，該環(huán)是未取代的或者可以被COOA單取代，及其藥學(xué)可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構(gòu)體，包括其任意比例的混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4一項(xiàng)或多項(xiàng)的化合物，其中R6、R7表示H，及其藥學(xué)可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構(gòu)體，包括其任意比例的混合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5一項(xiàng)或多項(xiàng)的化合物，其中R8表示CONH2或CN，及其藥學(xué)可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構(gòu)體，包括其任意比例的混合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6一項(xiàng)或多項(xiàng)的化合物，其中X不存在或者表示NH，X’表示NH，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此獨(dú)立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR10R11，Het表示單環(huán)的飽和雜環(huán)，具有1至3個(gè)N、O和/或S原子，該環(huán)是未取代的或者可以被COOA單取代，R6、R7表示H，R8表示CONH2或CN，及其藥學(xué)可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構(gòu)體，包括其任意比例的混合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7一項(xiàng)或多項(xiàng)的化合物，其中X不存在或者表示NH，X’表示NH，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此獨(dú)立地表示H、A、OH、OA、NO2、NH2、NHA、NA2、Hal、CN、-OHet、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR10R11，R6、R7表示H，R8表示CONH2或CN，Het表示哌啶基、吡咯烷基、嗎啉基或哌嗪基，它們各自是未取代的或者被COOA單取代，及其藥學(xué)可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構(gòu)體，包括其任意比例的混合物。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8一項(xiàng)或多項(xiàng)的化合物，其中X、X’各自彼此獨(dú)立地表示NH或者不存在，R1、R2、R3、R4、R5各自彼此獨(dú)立地表示H、A、OH、OA、Hal、-O-亞烷基-Het或-O-亞烷基-NR10R11，R6、R7表示H，R8表示CONH2或CN，R9表示H或A，R10、R11各自彼此獨(dú)立地表示H或A，Het表示哌啶基、吡咯烷基、嗎啉基或哌嗪基，它們各自是未取代的或者被COOA單取代，A表示具有1至10個(gè)C原子的烷基，另外，其中1-7個(gè)H原子可以被F和/或氯代替，Hal表示F、Cl、Br或I，及其藥學(xué)可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構(gòu)體，包括其任意比例的混合物。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，選自下組1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(2-甲氧基-5-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氯-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(3-甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(4-氯-6-甲氧基-3-甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(5-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-乙基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-2-叔丁基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-二甲氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-(6-氟-3-三氟甲基苯基)脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-[6-(2-二甲氨基乙氧基)-3-三氟甲基苯基]脲；1-[4-(5-氨基-4-氨基羰基-1H-咪唑-1-基)苯基]-3-{6-[2-(嗎啉-4-基)乙氧基]-3-三氟甲基苯基}脲；5-氨基-1-[4-(2-氟-5-三氟甲基苯甲酰氨基)苯基]-1H-咪唑-4-甲酰胺；5-氨基-1-[4-(2-氟-5-三氟甲基苯基氨甲?；?苯基]-1H-咪唑-4-甲酰胺；5-氨基-1-[4-(2-氟-5-三氟甲基苯甲酰氨基)苯基]-1H-咪唑-4-酰胺，及其藥學(xué)可用衍生物、溶劑合物、鹽和立體異構(gòu)體，包括其任意比例的混合物。
11.制備根據(jù)權(quán)利要求1-10的式I化合物及其藥學(xué)可用衍生物、鹽、溶劑合物和立體異構(gòu)體的方法，其特征在于a)關(guān)于制備其中X、X’表示NH的式I化合物，使式II化合物 其中R6、R7、R8、R9、R10和R11具有如權(quán)利要求1所示含義，與式III化合物反應(yīng)， 其中R1、R2、R3、R4和R5具有如權(quán)利要求1所示含義，或者b)關(guān)于制備其中X、X’表示NH的式I化合物，使式IV化合物 其中R1、R2、R3、R4和R5具有如權(quán)利要求1所示含義，與氯甲酸酯衍生物反應(yīng)，得到中間體氨基甲酸酯衍生物，隨后使其與式II化合物反應(yīng)，或者c)關(guān)于制備式I化合物，其中R8表示CN、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，R10、R11表示H，使式V化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X和X’具有如權(quán)利要求1所示含義，與式VI化合物反應(yīng)，R8-CH(NH2)-CNVI其中R8表示CN、COOA、CONH2、CONHA或CONA2，并與式VII化合物反應(yīng)，CR9(OA’)3VII其中R9具有如權(quán)利要求1所示含義，A’表示具有1、2、3、4、5或6個(gè)C原子的烷基，或者d)關(guān)于制備其中X不存在、X’表示NH的式I化合物，使式II化合物與式VIII化合物反應(yīng)， 其中R1、R2、R3、R4和R5具有如權(quán)利要求1所示含義，L表示Cl、Br、I或者游離或經(jīng)過反應(yīng)性官能修飾的OH基團(tuán)，或者e)將其中R10、R11表示H的式I化合物通過烷基化轉(zhuǎn)化為其中R10、R11表示A的式I化合物，和/或?qū)⑹絀的堿或酸轉(zhuǎn)化為它的鹽之一。
12.藥品，包含至少一種根據(jù)權(quán)利要求1的式I化合物和/或其藥學(xué)可用衍生物、鹽、溶劑合物和立體異構(gòu)體、包括其任意比例的混合物，以及可選地賦形劑和/或助劑。
13.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物及其藥學(xué)可用衍生物、鹽、溶劑合物和立體異構(gòu)體、包括其任意比例的混合物的用途，用于制備治療激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的抑制、調(diào)節(jié)和/或調(diào)控在其中扮演角色的疾病的藥品。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的用途，其中該激酶選自酪氨酸激酶和Raf激酶。
15.根據(jù)權(quán)利要求14的用途，其中該酪氨酸激酶是TIE-2、VEGFR、PDGFR、FGFR和/或FLT/KDR。
16.根據(jù)權(quán)利要求14的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物及其藥學(xué)可用衍生物、鹽、溶劑合物和立體異構(gòu)體、包括其任意比例的混合物的用途，用于制備治療受到根據(jù)權(quán)利要求1的化合物抑制酪氨酸激酶的影響的疾病的藥品。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的用途，用于制備治療受到根據(jù)權(quán)利要求1的化合物抑制TIE-2、VEGFR、PDGFR、FGFR和/或FLT/KDR的影響的疾病的藥品。
18.根據(jù)權(quán)利要求16或17的用途，其中所要治療的疾病是實(shí)體腫瘤。
19.根據(jù)權(quán)利要求18的用途，其中該實(shí)體腫瘤發(fā)源于鱗狀上皮、膀胱、胃、腎、頭頸、食道、子宮頸、甲狀腺、腸、肝、腦、前列腺、泌尿生殖道、淋巴系統(tǒng)、胃、喉和/或肺的腫瘤。
20.根據(jù)權(quán)利要求18的用途，其中該實(shí)體腫瘤發(fā)源于單核細(xì)胞性白血病、肺腺癌、小細(xì)胞性肺癌、胰腺癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤和乳腺癌。
21.根據(jù)權(quán)利要求18的用途，其中該實(shí)體腫瘤發(fā)源于肺腺癌、小細(xì)胞性肺癌、胰腺癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、結(jié)腸癌和乳腺癌。
22.根據(jù)權(quán)利要求16或17的用途，其中所要治療的疾病是血液和免疫系統(tǒng)的腫瘤。
23.根據(jù)權(quán)利要求22的用途，其中該腫瘤發(fā)源于急性髓性白血病、慢性髓性白血病、急性淋巴性白血病和/或慢性淋巴性白血病。
24.根據(jù)權(quán)利要求16或17的用途，用于治療其中牽連有血管生成的疾病。
25.根據(jù)權(quán)利要求24的用途，其中該疾病是眼部疾病。
26.根據(jù)權(quán)利要求16或17的用途，用于治療視網(wǎng)膜血管化、糖尿病性視網(wǎng)膜病、衰老-誘發(fā)的黃斑變性和/或炎性疾病。
27.根據(jù)權(quán)利要求26的用途，其中該炎性疾病發(fā)源于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病、接觸性皮炎和遲發(fā)型過敏反應(yīng)。
28.根據(jù)權(quán)利要求16或17的用途，用于治療骨病變，其中該骨病變發(fā)源于骨肉瘤、骨關(guān)節(jié)炎和佝僂病。
29.根據(jù)權(quán)利要求1的式I化合物和/或其生理學(xué)可接受鹽和溶劑合物的用途，用于制備治療實(shí)體腫瘤的藥品，其中治療有效量的式I化合物與選自如下的化合物聯(lián)合給予1)雌激素受體調(diào)控劑，2)雄激素受體調(diào)控劑，3)類視色素受體調(diào)控劑，4)細(xì)胞毒性劑，5)抗增殖劑，6)異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑，7)HMG-CoA還原酶抑制劑，8)HIV蛋白酶抑制劑，9)逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑和10)另外的血管生成抑制劑。
30.根據(jù)權(quán)利要求1的式I化合物和/或其生理學(xué)可接受鹽和溶劑合物的用途，用于制備治療實(shí)體腫瘤的藥品，其中治療有效量的式I化合物與放療和選自如下的化合物聯(lián)合給予1)雌激素受體調(diào)控劑，2)雄激素受體調(diào)控劑，3)類視色素受體調(diào)控劑，4)細(xì)胞毒性劑，5)抗增殖劑，6)異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑，7)HMG-CoA還原酶抑制劑，8)HIV蛋白酶抑制劑，9)逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑和10)另外的血管生成抑制劑。
31.根據(jù)權(quán)利要求16或17的用途，用于制備治療基于TIE-2活性紊亂的疾病的藥品，其中聯(lián)合給予治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物與生長(zhǎng)因子受體抑制劑。
32.根據(jù)權(quán)利要求13或14的式I化合物的用途，用于制備治療由Raf激酶所導(dǎo)致、介導(dǎo)和/或傳播的疾病的藥品。
33.根據(jù)權(quán)利要求32的用途，其中該Raf激酶選自A-Raf、B-Raf和Raf-1。
34.根據(jù)權(quán)利要求32的用途，其中該疾病選自過度增殖性和非過度增殖性疾病。
35.根據(jù)權(quán)利要求32或34的用途，其中該疾病是癌癥。
36.根據(jù)權(quán)利要求32或34的用途，其中該疾病是非癌性的。
37.根據(jù)權(quán)利要求32、34或36的用途，其中該非癌性疾病選自銀屑病、關(guān)節(jié)炎、炎癥、子宮內(nèi)膜異位、瘢痕形成、良性前列腺增生、免疫學(xué)疾病、自體免疫疾病和免疫缺陷疾病。
38.根據(jù)權(quán)利要求32、34或35的用途，其中該疾病選自腦癌、肺癌、鱗狀細(xì)胞癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、腎癌、結(jié)腸直腸癌、乳腺癌、頭癌、頸癌、食道癌、婦科癌癥、甲狀腺癌、淋巴瘤、慢性白血病和急性白血病。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)化合物，其中R
文檔編號(hào)A61K31/4164GK1938282SQ200580010619
公開日2007年3月28日 申請(qǐng)日期2005年3月15日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月29日
發(fā)明者G·赫爾策曼, H·格拉西爾, A·約恩齊克, W·施特勒, A·蘇特, W·勞滕貝格, F·米蒂亞斯, E·羅澤爾－維韋斯, J·阿丹, M·索萊爾列拉 申請(qǐng)人:默克專利有限公司