專利名稱：還原型谷胱甘肽和依布硒啉的組合藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及還原型谷胱甘肽和依布硒啉的組合藥物。
背景技術(shù)：
還原型谷胱甘肽(GSH)是人類細(xì)胞質(zhì)中自然合成的一種肽，化學(xué)名稱為N-(N-L-γ-谷氨酰-L-半胱氨酰)甘氨酸，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下 由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸組成，分子結(jié)構(gòu)中含有巰基(-SH)，廣泛分布于機(jī)體各器官內(nèi)，為維持細(xì)胞生物功能有重要作用，還原型谷胱甘肽具較強(qiáng)的抗氧化、抗自由基、抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)等作用，臨床上主要用于肝臟疾病、眼部疾病、腎損傷、放化療保護(hù)、糖尿病、機(jī)體中毒和老年病等方面的治療應(yīng)用。在臨床使用中，還有還原型谷胱甘肽的鈉鹽-----還原型谷胱甘肽鈉，還原型谷胱甘肽鈉具有與還原型谷胱甘肽一樣的藥理作用。
還原型谷胱甘肽在機(jī)體內(nèi)發(fā)揮其藥用功效在很大程度上依賴于谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)，GSH-Px能催化還原型谷胱甘肽(GSH)變成氧化型谷胱甘肽(GSSG)，同時使有毒的過氧化物還原和分解為無毒物質(zhì)，達(dá)到保護(hù)細(xì)胞膜和機(jī)體的作用。
依布硒啉(ebselen)的化學(xué)名稱為2-苯基-1，2-苯并異硒唑-3(2H)-酮，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下 依布硒啉是一種人工合成的低毒性含硒有機(jī)化合物，具有谷胱甘肽過氧化物酶樣活性，是谷胱甘肽過氧化物酶的最佳模擬物，能清除機(jī)體內(nèi)過多的過氧化物，阻斷產(chǎn)生自由基的鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，避免自由基參與脂質(zhì)過氧化反應(yīng)而造成的損害，維持機(jī)體的正常生理功能。依布硒啉有多種藥理作用，對機(jī)體自由基引起的組織損害均有顯著的保護(hù)和拮抗作用，現(xiàn)代病理學(xué)研究表明，自由基是造成機(jī)體組織損傷的重要根源，尤其是機(jī)體發(fā)生某些疾病時產(chǎn)生大量的自由基以攻擊核酸、蛋白質(zhì)、酶等生物大分子、生物膜及其它亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，從而破壞細(xì)胞和組織，造成組織損傷。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在長時間使用還原型谷胱甘肽藥物后，動物體內(nèi)的硒元素含量和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活性會明顯下降，而硒元素是谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活性中心，且動物體內(nèi)不能自主合成硒元素，只能依靠外源性補(bǔ)充，因此硒元素含量的下降勢必會使得體內(nèi)與硒有關(guān)的酶代謝失去平衡；而且，還原型谷胱甘肽在機(jī)體內(nèi)發(fā)揮其藥用功效在很大程度上依賴于谷胱甘肽過氧化酶，簽于此，在用還原型谷胱甘肽治療疾病的同時，提高谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)的活性，對于發(fā)揮還原型谷胱甘肽的治療作用有著重要的促進(jìn)作用，有利于提高還原型谷胱甘肽(GSH)的藥效和與硒有關(guān)的酶代謝平衡。
本發(fā)明的目的是提供一種還原型谷胱甘肽和依布硒啉的組合藥物。
還原型谷胱甘肽和依布硒啉的組合藥物，還原型谷胱甘肽與依布硒啉的質(zhì)量配比范圍為1∶0.001～20，即每1毫克的還原型谷胱甘肽與0.001～20毫克的依布硒啉配比組合。
還原型谷胱甘肽與依布硒啉組合藥物的協(xié)同作用，可在一定的質(zhì)量配比范圍內(nèi)觀察到，例如1∶0.01～3，優(yōu)選1∶0.05～1。方便起見，可將每一種化合物分別以其單獨(dú)使用時表現(xiàn)出的最佳療效的劑量組合使用。
還原型谷胱甘肽與依布硒啉的質(zhì)量配比范圍，優(yōu)選1∶0.01～3。
還原型谷胱甘肽與依布硒啉的質(zhì)量配比范圍，更優(yōu)選1∶0.05～1。
必須理解，本發(fā)明組合藥物包括兩種組合方式一是將還原型谷胱甘肽和依布硒啉制成復(fù)方制劑，使用相應(yīng)的藥用輔料和制備工藝可制成不同的復(fù)方藥物劑型，如注射用還原型谷胱甘肽依布硒啉凍干粉針劑、復(fù)方還原型谷胱甘肽依布硒啉注射液、復(fù)方還原型谷胱甘肽依布硒啉膠囊等；二是將還原型谷胱甘肽和依布硒啉分別制成單獨(dú)的制劑，在使用時，患者可以先后依次用藥，也可以將分開的還原型谷胱甘肽的制劑和依布硒啉的制劑混合后同時用藥，以最終達(dá)到使用本發(fā)明所述的組合藥物的目的。必須的，為了方便患者用藥，應(yīng)當(dāng)將兩種單獨(dú)的制劑包裝在同一個藥盒中。
此外，還原型谷胱甘肽和依布硒啉是單獨(dú)制劑時，兩者的藥物劑型可以相同，也可以是不同的，如還原型谷胱甘肽粉針劑與依布硒啉注射液組合用藥物，還原型谷胱甘肽注射液與依布硒啉注射液組合用藥物，還原型谷胱甘肽注射液與依布硒啉粉針劑組合用藥物，還原型谷胱甘肽粉針劑與依布硒啉片組合用藥物，還原型谷胱甘肽腸溶片與依布硒啉胃溶片組合用藥物，等等。
本發(fā)明還原型谷胱甘肽和依布硒啉的組合藥物，可以是藥劑學(xué)上可以接受的任何藥物劑型，例如粉針劑、水針劑、片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液、舌下含服片劑、滴眼液、滴鼻液以及口服的速釋或緩釋或控釋等劑型。
雖然本發(fā)明組合藥物的活性組份可以作為未加工的化學(xué)品給藥，但事實(shí)上，簽于藥品在生產(chǎn)和使用上的必要性，本發(fā)明所述的組合用藥物還可以包含藥劑學(xué)上可以接受的藥用輔料，使用相應(yīng)的、不同的藥用輔料和制備工藝，可以將本發(fā)明組合藥物制成不同的藥物劑型。本領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)人員可以理解到的是，這些藥用輔料是為了便于生產(chǎn)加工成各種劑型、確保藥物的安全、有效與穩(wěn)定等因素，以及根據(jù)不同的藥物劑型和藥物的自身的理化性質(zhì)來選用的，如賦形劑可選用甘露醇、山梨醇、乳糖、氨基酸、水、聚乙二醇，等等；PH值調(diào)節(jié)劑可選用鹽酸、枸櫞酸、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、氫氧化鉀(鈉)，等等；抗氧劑可選用亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉、維生素C，等等；增溶劑可選用吐溫-80、硬脂酸聚烴氧酯、羥丙基-β環(huán)狀糊精、二甲亞砜，等等；金屬絡(luò)合劑選用乙二胺四乙酸及其鹽等。藥用輔料的選擇使用是本發(fā)明領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)人員熟知和顯而易見的。
特別的，還原型谷胱甘肽鈉具有與還原型谷胱甘肽一樣的藥理作用，因此，本發(fā)明還原型谷胱甘肽和依布硒啉的組合藥物，其中還原型谷胱甘肽還可以用還原型谷胱甘肽的鈉鹽-----還原型谷胱甘肽鈉來代替。
將還原型谷胱甘肽和依布硒啉組合用藥，能夠有效提高谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活性，克服了由于使用還原型谷胱甘肽而導(dǎo)致的與硒有關(guān)的酶代謝失衡，有利于維持體內(nèi)硒酶代謝的正常，也有利于提高還原型谷胱甘肽的藥效。
進(jìn)一步的，以動物實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證本發(fā)明組合藥物的療效優(yōu)勢。
實(shí)驗(yàn)一.給大鼠長時間注射還原型谷胱甘肽，測定其體內(nèi)血液中硒的含量和GSH-Px酶的活性。
實(shí)驗(yàn)方法(1)實(shí)驗(yàn)動物及分組SD大鼠32只，體重220～250g，將大鼠隨機(jī)分為四組，每組8只，分為對照組、還原型谷胱甘肽組、依布硒啉組、還原型谷胱甘肽+依布硒啉組。
(2)藥物施用方案從大鼠腹腔注射相應(yīng)藥物，對照組給予動物注射生理鹽水；還原型谷胱甘肽組給予動物注射300mg/kg體重的還原型谷胱甘肽；依布硒啉組給予動物注射30mg/kg體重的依布硒啉；還原型谷胱甘肽+依布硒啉組給予動物注射300mg/kg體重的還原型谷胱甘肽和30mg/kg體重的依布硒啉；(3)按以上藥物施用方案每天注射一次，連續(xù)注射，于注射后第1天、第2天、第5天、第10天、第15天，從股靜脈抽取其血液，測定其血硒含量和胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活性。
硒含量測定方法用熒光分光光度法；GSH-Px活性測定方法用分光光度計(jì)法直接測定。
(4)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，以SPSS10.0軟件包處理，得出結(jié)果如下表表一SD大鼠血硒含量測定(μg/ml)


表二SD大鼠血液GSH-Px酶的活力單位數(shù)測定(u/mg蛋白)

由表一數(shù)據(jù)可看出，給予大鼠還原型谷胱甘肽后，由于其代謝GSH要消硒元素，大鼠血硒含量隨使用時間而減少，至第10天時，與對照組相比已有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)；給予大鼠還原型谷胱甘肽+依布硒啉后，可使其血硒含量保持在相對穩(wěn)定的水平，且血硒含量與對照組和還原型谷胱甘肽組相比均有顯著差異(p＜0.01)。
由表二數(shù)據(jù)可看出，給予大鼠還原型谷胱甘肽后，大鼠血液GSH-Px酶的活力隨使用時間而減弱，而給予大鼠還原型谷胱甘肽+依布硒啉后，可使其血液GSH-Px酶的活力保持相對穩(wěn)定，且與對照組相比有顯著差異(p＜0.01)。
實(shí)驗(yàn)二.采用四氯化碳(CCl4)中毒性大鼠肝損害模型，觀察給予還原型谷胱甘肽+依布硒啉后對于大鼠肝損害的保護(hù)作用。
實(shí)驗(yàn)方法(1)實(shí)驗(yàn)動物及分組SD大鼠30只，體重220～250g，將大鼠隨機(jī)分為五組，每組6只，分為空白組、染毒對照組、還原型谷胱甘肽組、依布硒啉組、還原型谷胱甘肽+依布硒啉組；(2).大鼠肝損害模型除空白組外，其余各組動物按2.0ml/kg體重的CCl4進(jìn)行灌胃染毒；(3)藥物施用方案從大鼠腹腔注射相應(yīng)藥物，空白組不染毒，僅給予動物注射生理鹽水；染毒對照組僅CCl4進(jìn)行灌胃染毒；還原型谷胱甘肽組CCl4進(jìn)行灌胃染毒后給予動物注射300mg/kg體重的還原型谷胱甘肽；依布硒啉組CCl4進(jìn)行灌胃染毒后給予動物注射30mg/kg體重的依布硒啉；還原型谷胱甘肽+依布硒啉組CCl4進(jìn)行灌胃染毒后給予動物注射300mg/kg體重的還原型谷胱甘肽和30mg/kg體重的依布硒啉；(4)動物染毒后即給予各組動物施以相應(yīng)的藥物，連續(xù)至第四天時斷頭處死，分別取肝臟和血清，測定其肝臟勻漿和血清脂質(zhì)過氧化物L(fēng)PO的含量；LPO測定方法硫代巴比妥酸測定；(5)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，以SPSS10.0軟件包處理，得出結(jié)果如下表
表三大鼠肝臟勻漿和血清中LPO含量

由表三數(shù)據(jù)可看出，四氯化碳中毒大鼠的肝臟和血清中的LPO含量比空白組顯著增多，提示機(jī)體有脂質(zhì)過氧化損害；注射GSH和依布硒啉均可拮抗脂質(zhì)過氧化損害；注射還原型谷胱甘肽+依布硒啉對損害亦有拮抗作用，且優(yōu)于單獨(dú)注射GSH和依布硒啉，相對于還原型谷胱甘肽組和依布硒啉組，具有良好的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)，顯示出比單獨(dú)注射GSH和依布硒啉都好的療效。
具體實(shí)施例方式
以下面的幾個實(shí)施例，進(jìn)一步通過其制備過程來說明本發(fā)明還原型谷胱甘肽和依布硒啉的組合藥物，但并不表示實(shí)施例對本發(fā)明的限制。
實(shí)施例1.注射用還原型谷胱甘肽依布硒啉凍干粉針劑處方還原型谷胱甘肽300g依布硒啉 30g甘露醇100g亞硫酸氫鈉2.5g吐溫-80 適量PH值調(diào)節(jié)劑適量注射用水 1800ml取以上處方量的依布硒啉與吐溫-80混合后用適量注射用水溶解，再加入處方量的還原型谷胱甘肽、甘露醇和亞硫酸氫鈉，充分溶解后用pH值調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH＝5～6.5，再加入針用活性炭保溫脫色，濾除針用活性炭后，精濾，檢測含量合格后，將濾液分裝入1000支西林瓶中，按凍干粉針劑制備工藝進(jìn)行冷凍干燥，即可制備成1000瓶注射用的凍干粉復(fù)方針劑，每瓶藥中含藥物活性成份330mg，具中還原型谷胱甘肽300mg和依布硒啉30mg。還原型谷胱甘肽和依布硒啉的質(zhì)量配比為1∶0.1。
實(shí)施例2.注射用還原型谷胱甘肽鈉依布硒啉凍干粉針劑將實(shí)施例1中的還原型谷胱甘肽用還原型谷胱甘肽鈉代替，即可制得注射用還原型谷胱甘肽鈉依布硒啉凍干粉針劑。
實(shí)施例3.還原型谷胱甘肽凍干粉針和依布硒啉注射液的組合用藥物類似的，將還原型谷胱甘肽制成每支西林瓶含300mg還原型谷胱甘肽的凍干粉針，將依布硒啉制成每支安瓿瓶含20mg/2ml依布硒啉的注射液，貼標(biāo)簽后，將該凍干粉針與注射液包裝在同一個包裝盒中，即得還原型谷胱甘肽凍干粉針和依布硒啉注射液的組合用藥物，每盒組合用藥物中含藥物活性成份320mg，其中還原型谷胱甘肽300mg，依布硒啉20mg，兩者的質(zhì)量配比為1∶0.0667。使用時可以用依布硒啉注射液將還原型谷胱甘肽凍干粉針溶解后成為混合溶液一起使用，也可以用適量注射用水將還原型谷胱甘肽凍干粉針溶解后與依布硒啉注射液混合使用，或先后依次使用。
實(shí)施例4.還原型谷胱甘肽凍干粉針和依布硒啉凍干粉針的組合用藥物類似的，將還原型谷胱甘肽制成每支西林瓶含600mg還原型谷胱甘肽的凍干粉針，將依布硒啉制成每支西林瓶含依布硒啉40mg的凍干粉針，貼標(biāo)簽后，將該還原型谷胱甘肽的凍干粉針與依布硒啉凍干粉針包裝在同一個包裝盒中，即還原型谷胱甘肽凍干粉針和依布硒啉凍干粉針的組合用藥物，還原型谷胱甘肽與依布硒啉質(zhì)量配比為1∶0.0667。使用時用適量注射用水將將兩種凍干粉針溶解后混合使用，或先后依次使用。
實(shí)施例5.復(fù)方還原型谷胱甘肽依布硒啉片處方還原型谷胱甘肽 300g依布硒啉30g羧甲基纖維素35g淀粉15g微晶纖維素 40g硬脂酸鎂2g將上述物料粉末除硬脂酸鎂外充分混勻，用無水乙醇潤濕后，濕法制粒，烘干整粒后加入硬脂酸鎂，混勻，壓制成1000片，即得復(fù)方還原型谷胱甘肽依布硒啉片，每片含還原型谷胱甘肽300mg，依布硒啉30mg，還原型谷胱甘肽與依布硒啉質(zhì)量配比為1∶0.1。
實(shí)施例6.復(fù)方還原型谷胱甘肽依布硒啉腸溶片將實(shí)施例5所制備的片劑用包腸溶衣溶液包裹，即得復(fù)方還原型谷胱甘肽依布硒啉腸溶片。其中，包腸溶衣溶液可選用如下處方的包衣溶液鄰苯二甲酸醋酸纖維素10g，十八醇4.0g，苯二甲酸二乙酯1.0ml，異丙醇40ml，丙酮45ml。
實(shí)施例7.還原型谷胱甘肽依布硒啉滴眼液處方還原型谷胱甘肽10g依布硒啉 1g羥丙基β-環(huán)糊精 14g磷酸氫鈉鹽緩沖溶液適量氯化鈉適量注射用水 加至500ml將14g羥丙基β-環(huán)糊精作為助溶劑溶解于470ml注射用水中后加入1g依布硒啉充分?jǐn)嚢枋挂啦嘉芙?，再加?0g還原型谷胱甘肽溶解后用磷酸氫鈉鹽緩沖溶液調(diào)節(jié)pH至6.0～6.5，而后加入適量氯化鈉調(diào)節(jié)成等滲溶液后加注射用水加至500ml，攪勻，精濾后無菌分裝成5ml/瓶，即得每瓶滴眼液含還原型谷胱甘肽100mg，依布硒啉10mg，還原型谷胱甘肽與依布硒啉質(zhì)量配比為1∶0.1。
權(quán)利要求
1.還原型谷胱甘肽和依布硒啉的組合藥物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合藥物，其特征在于還原型谷胱甘肽與依布硒啉的質(zhì)量配比范圍為1∶0.001～20。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合藥物，其特征在于還原型谷胱甘肽與依布硒啉的質(zhì)量配比范圍為1∶0.01～3，優(yōu)選1∶0.05～1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任何一項(xiàng)所述，其特征在于將還原型谷胱甘肽和依布硒啉制成復(fù)方制劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任何一項(xiàng)所述，其特征在于將還原型谷胱甘肽和依布硒啉分別制成單獨(dú)的制劑，并且將兩種單獨(dú)的制劑包裝在同一個藥盒中。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任何一項(xiàng)所述，其特征在于藥物的劑型是藥劑學(xué)上可以接受的任何藥物劑型。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述，其特征在于組合藥物可以包含藥用輔料。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任何一項(xiàng)所述，其特征在于還原型谷胱甘肽可以用還原型谷胱甘肽鈉來代替。
全文摘要
還原型谷胱甘肽或其鈉鹽和依布硒啉的組合藥物，其中還原型谷胱甘肽或其鈉鹽與依布硒啉的質(zhì)量配比范圍為1∶0.001～20，優(yōu)選1∶0.01～3，更優(yōu)選1∶0.05～1。本發(fā)明組合藥物的組合方式包括兩種組合方式一是將還原型谷胱甘肽和依布硒啉制成復(fù)方制劑，二是將還原型谷胱甘肽和依布硒啉分別制成單獨(dú)的制劑并且將兩種單獨(dú)的制劑包裝在同一個藥盒中。該組合藥物能夠有效提高谷胱甘肽過氧化物酶(GSH－Px)的活性，克服了由于使用還原型谷胱甘肽而導(dǎo)致的與硒有關(guān)的酶代謝失衡，有利于維持體內(nèi)硒酶代謝的正常，也有利于提高還原型谷胱甘肽的藥效。
文檔編號A61P1/16GK1679914SQ20051000605
公開日2005年10月12日 申請日期2005年1月9日 優(yōu)先權(quán)日2005年1月9日
發(fā)明者楊喜鴻 申請人:楊喜鴻