專利名稱：含2－喹啉酮的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含2-喹啉酮或其衍生物的藥物組合物。
癌癥屬于體內(nèi)基因出現(xiàn)紊亂，在此期間，隨著腫瘤突起由癌癥前期損傷進(jìn)展到惡性轉(zhuǎn)形變異，基因機(jī)能障礙加劇，癌瘤變?yōu)檗D(zhuǎn)移性的并常對細(xì)胞毒藥物產(chǎn)生抗性。
盡管在所有發(fā)達(dá)國家人們，特別是通過實驗和臨床研究作出了巨大努力，然而由于不同癌癥(實體瘤和血癌)造成的死亡率仍高達(dá)令人無法接受的程度。在很多國家，由癌癥引發(fā)的死亡率僅次于心血管疾病。
就新診斷的癌癥而言，實體瘤和血(骨髓、血液、淋巴系統(tǒng))癌的分布表明10例癌癥中有9例是實體瘤。與血液腫瘤學(xué)(血細(xì)胞癌癥的治療成功率為40％至90％)所觀察到情形的相反，化療僅對少數(shù)晚期或擴(kuò)散的實體瘤產(chǎn)生療效。這是1973至1992年間美國癌癥總死亡率升高的部分原因。
令人遺憾的是，還不能確定此趨勢會僅僅由于在已有的化療藥物基礎(chǔ)上出現(xiàn)新的抗腫瘤藥物而改變，新的抗腫瘤藥物如干擾微管形成的紫杉類化合物(taxoid)(紫杉醇和docetaxel)(W.P.McGuire等，Am.Intern.Med.,1989)，得自喜樹堿的拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ抑制劑(托泊替堪和伊立替康)，維諾利賓(得自小長春花的新生物堿)，吉西他濱(新的細(xì)胞毒抗代謝藥)，raltitrexed(胸苷酸合成酶抑制劑)和米替福星(烷基-溶血磷脂類的第一個代表性化合物)。在其特異活性現(xiàn)已熟知的藥物如阿霉素、順鉑、長春新堿、甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶基礎(chǔ)上，加入這些治療作為一線治療或二線治療。
在抗癌化療中目前最難以解決的問題之一是由于惡性細(xì)胞的很多集落對已有的細(xì)胞毒物質(zhì)表現(xiàn)出明顯的抗性。通常，此問題由多抗藥基因的存在或由某些類型腫瘤中基因突變的頻繁性導(dǎo)致。因此，癌癥的治療需要采用新方法，對常規(guī)治療進(jìn)行補(bǔ)充，用于更好地對腫瘤負(fù)荷的延伸和不均勻性及“細(xì)胞毒多抗藥性”的形成產(chǎn)生拮抗作用。
在這些新的研究中，有些已顯示出效果。誘導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡、抑制腫瘤血管生成和轉(zhuǎn)移就是這樣，更不必提及基因療法或免疫療法。
本發(fā)明人對另一種方法產(chǎn)生了興趣。要達(dá)到的目的是讓腫瘤細(xì)胞的集落對標(biāo)準(zhǔn)抗癌治療更敏感以便達(dá)到雙重的效益1)增加細(xì)胞毒活性并因此增大功效，及2)通過減少劑量來降低某些副作用的發(fā)生頻率和嚴(yán)重程度，這可能隨后引起抗腫瘤效果的增加。
這一構(gòu)想源于發(fā)現(xiàn)了能引起被測抗腫瘤藥物的細(xì)胞毒活性顯著增加的組合物。這些組合物具有刺激腫瘤中克隆形成細(xì)胞聚集的能力，因此使腫瘤對借助細(xì)胞毒試劑完成的常規(guī)治療更敏感，或者具有抑制克隆形成細(xì)胞增殖的能力，因此有利于腫瘤的退化。
因此，本發(fā)明的主題是對腫瘤中克隆形成細(xì)胞的增殖具有活性的化合物在用至少一種選自細(xì)胞毒試劑的抗腫瘤試劑治療癌癥方面的用途，該化合物選自下式化合物 其中X選自=O、=S和=N-NH-R7,R7是苯基或吡啶基，R1、R2、R3和R4彼此獨(dú)立地選自H、OH、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、-OCO-R8基團(tuán)，R8是C1-C4烷基、以及衍生自糖的基團(tuán)，取代基R1、R2、R3或R4中的至少一個不是H，而R2和R3一起可能形成亞甲二氧基，R5是苯基或被取代1至3次的苯基，取代基選自H、OH、C1-C4烷氧基、基團(tuán)-OCOR8、苯基(C1-C烷氧基)、其中R′8是C1-C4烷基或CF3的基團(tuán)-O-SO2-R8′以及衍生自糖的基團(tuán)，R6選自H、C1-C4烷基、基團(tuán)-CO-R9和基團(tuán)-A-R10，
R6a選自C1-C4烷基、基團(tuán)-CO-R9和基團(tuán)-A-R10，R9是C1-C4烷基，A是C1-C4亞烷基，R10選自含1至4個選自氧、硫和氮的雜原子的5或6元雜環(huán)基團(tuán)、基團(tuán)CN、基團(tuán)-COOR11、基團(tuán)-CONR12R13、基團(tuán)-NR14R15和基團(tuán)-COR16,R11、R12、R13、R14、R15和R16獨(dú)立地選自氫原子、C1-C4烷基和苯基(C1-C4烷基)，R4和R6還可能一起形成基團(tuán)-CO-CH2-CH2-。
這些細(xì)胞毒試劑以其常規(guī)劑量使用，而在其效果得以改善的情況下，或者以較低的劑量使用，得到增高的抗腫瘤效果。
在一個優(yōu)選的實施方案中，所用化合物是式(Ⅰ)的化合物，其中-R1是C1-C4烷氧基，-R2是氫原子，-R3是C1-C4烷氧基，-R4是氫原子，并特別是如下的式(Ⅰ)化合物，其中-R5是4-(C1-C4烷氧基)苯基，尤其是如下的式(Ⅰ)化合物，其中-R1是甲氧基，-R3是甲氧基，而-R5是4-甲氧基苯基。
還發(fā)現(xiàn)至少有些式(Ⅰ)的化合物本身具有抗腫瘤活性。
本發(fā)明的主題還包括通過干擾克隆形成細(xì)胞的產(chǎn)生對腫瘤中克隆形成細(xì)胞的增殖具有活性的組合物，這種干擾或者通過刺激增殖和聚集或者通過抑制增殖來實現(xiàn)，該組合物含有有效量下式化合物
其中X選自=O、=S和=N-NH-R7,R7是苯基或吡啶基，R1、R2、R3和R4彼此獨(dú)立地選自H、OH、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、其中R8是C1-C4烷基的-OCO-R8基團(tuán)以及衍生自糖的基團(tuán)，取代基R1、R2、R3或R4中的至少一個不是H，而R2和R3一起可能形成亞甲二氧基，R5是苯基或被取代1至3次的苯基，取代基選自H、OH、C1-C4烷氧基、基團(tuán)-OCOR8、苯基(C1-C4烷氧基)、其中R′8是C1-C4烷基或CF3的基團(tuán)-O-SO2-R8′以及衍生自糖的基團(tuán)，R6選自H、C1-C4烷基、基團(tuán)-CO-R9和基團(tuán)-A-R10，R6a選自基團(tuán)-CO-R9和基團(tuán)-A-R10，R9是C1-C4烷基，A是C1-C4亞烷基，R10選自含1至4個選自氧、硫和氮的雜原子的5或6元雜環(huán)基團(tuán)、基團(tuán)CN、基團(tuán)-COOR11、基團(tuán)-CONR12R13、基團(tuán)-NR14R15和基團(tuán)-COR16,R11、R12、R13、R14、R15和R16獨(dú)立地選自氫原子、C1-C4烷基和苯基(C1-C4烷基)，R4和R6還可以一起形成基團(tuán)-CO-CH2-CH2-。
本發(fā)明的主題還包括新的化合物，即下式的化合物 其中X選自=O、=S和=N-NH-R7,R7是苯基或吡啶基，R1、R2、R3和R4彼此獨(dú)立地選自H、OH、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、其中R8是C1-C4烷基的基團(tuán)-OCO-R8，以及衍生自糖的基團(tuán)，取代基R1、R2、R3或R4中的至少一個不是H，而R2和R3一起可能形成亞甲二氧基，R5是苯基或被取代1至3次的苯基，取代基選自H、OH、C1-C4烷氧基、基團(tuán)-OCOR8、苯基(C1-C4烷氧基)、其中R′8是C1-C4烷基或CF3的基團(tuán)-O-SO2-R8′以及衍生自糖的基團(tuán)，R6選自H、C1-C4烷基、基團(tuán)-CO-R9和基團(tuán)-A-R10,R6a選自基團(tuán)-CO-R9和基團(tuán)-A-R10，R9是C1-C4烷基，A是C1-C4亞烷基，R10選自含1至4個選自氧、硫和氮的雜原子的5或6元雜環(huán)基團(tuán)、基團(tuán)CN、基團(tuán)-COOR11、基團(tuán)-CONR12R13、基團(tuán)-NR14R15和基團(tuán)-COR16，R11、R12、R13、R14、R15和R16獨(dú)立地選自氫原子、C1-C4烷基和苯基(C1-C4烷基)，R4和R6還可以一起形成-CO-CH2-CH2-基團(tuán)，其中不包括其中X=O,R6=H而取代基R1、R2、R3和R4中的兩個是OH或OCH3的化合物。
在采用細(xì)胞毒試劑進(jìn)行的腫瘤化療過程中，化療開始時，式(Ⅰ)和(Ⅰa)的化合物可以一次性或分若干天(例如5至7天)給藥，并根據(jù)化療方案，在每個療程中的每個治療周期(例如2至5天)的開始時給藥。
式(Ⅰ)和(Ⅰa)的化合物以5至50mg/kg/天或200至2000mg/m2/天的劑量通過輸液(一般1至3小時)給藥是有利的。
為了對克隆形成細(xì)胞的生成產(chǎn)生最大的作用(抑制或刺激)，式(Ⅰ)和(Ⅰa)的化合物應(yīng)該以使所獲得的組織達(dá)到盡可能高的濃度的方式給藥。
在療程的急性期選用的治療方案中，優(yōu)選靜脈注射，使用-給藥即用輸液(袋、瓶等)，如采用輸液管并以推薦的速度靜脈輸液；-可借助本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的制藥溶液溶解以備靜脈輸液用的凍干物；-對于維持治療，當(dāng)化療有利于細(xì)胞生長抑制劑的口服給藥時，還可以包括口服途徑。為此，可以使用錠劑(口服或經(jīng)舌吸收)、即釋或緩釋片劑、口服溶液、混懸劑、顆粒劑、膠囊等。
細(xì)胞毒試劑可以選自ⅰ)嵌入試劑，特別是羥基紅比霉素(阿霉素)、柔紅霉素、表阿霉素、去甲氧柔紅霉素、柔紅霉素苯腙、阿克拉霉素、吡喃阿霉素、吖啶、米托蒽醌、放線菌素D、依利醋銨；ⅱ)烷化試劑，選自鉑衍生物(順鉑、卡鉑、奧沙利鉑)；ⅲ)選自其它烷化試劑的化合物-環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、氮芥、苯丙氨酸氮芥、苯丁酸氮芥、雌氮芥，-白消安、絲裂霉素C，-亞硝基脲類BCNU(卡氮芥)、CCNU(羅氮芥)、福替目丁、鏈脲霉素，-三嗪類或衍生物甲基芐肼、達(dá)卡巴嗪，-溴丙哌嗪，-氮丙定類六甲蜜胺、塞替派，ⅳ)選自其它抗代謝試劑的化合物-抗葉酸類甲氨蝶呤、raltitrexed，-抗嘧啶試劑5-氟尿嘧啶(5-FU)、阿糖孢苷(Ara-C)，-羥基脲，-抗嘌呤試劑巰基嘌呤、硫鳥嘌呤、噴司他汀、克拉屈濱，-細(xì)胞毒核苷合成誘導(dǎo)劑吉西他濱，ⅴ)選自其它微管蛋白-親和試劑的化合物，-能夠解體有絲分裂紡錘體的長春花屬生物堿長春新堿、長春堿、長春地辛、navelbine，-阻斷有絲分裂紡錘體的脫聚作用的試劑紫杉醇、docetaxel，-通過抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ來引起DNA裂解的試劑依托泊苷、替尼泊苷，-引起DNA裂解的拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ抑制劑托泊替堪、伊立替康，ⅵ)DNA裂解或碎片試劑，如博萊霉素，ⅶ)下列化合物之一普卡霉素、L-天冬酰胺酶、米托胍腙、達(dá)卡巴嗪，ⅷ)抗癌孕激素；甲羥孕酮、甲地孕酮，ⅸ)抗癌雌激素己烯雌酚；磷雌酚四鈉，ⅹ)抗雌激素試劑他莫昔芬、屈洛昔芬、雷洛昔芬、氨魯米特，ⅹⅰ)甾類抗雄激素試劑(如環(huán)丙孕酮)或非甾類抗雄激素試劑(氟他胺、尼魯米特)。
具體地講，式(Ⅰ)和(Ⅰa)的化合物可以與借助用于實體瘤綜合化療法的主要細(xì)胞毒試劑完成的治療相結(jié)合，這些試劑有如-阿霉素，-烷化試劑oxazophorines(環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、苯丁酸氮芥、苯丙氨酸氮芥)，-亞硝基脲，-絲裂霉素C，-抗代謝藥如甲氨喋呤、5-FU、Ara-C、Capecitabine，-干擾微管蛋白的試劑長春花屬生物堿(長春新堿、長春堿、長春地辛、navelbine)，紫杉類化合物(紫杉醇，docetaxel)，表鬼臼毒素衍生物(依托泊苷、替尼泊苷)，-博來霉素，-拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ抑制劑托泊替堪、伊立替康。
類似地，式(Ⅰ)和(Ⅰa)化合物可以與借助用于治療血癌的主要細(xì)胞毒試劑完成的治療結(jié)合-何杰金氏病環(huán)磷酰胺、氮芥、苯丁酸氮芥、苯丙氨酸氮芥、異環(huán)磷酰胺、依托泊苷、阿霉素、柔紅霉素；-急性白血病甲氨喋呤、6-巰基嘌呤、阿糖孢苷、長春新堿、長春堿、阿霉素、柔紅霉素、L-天冬酰胺酶；-非何杰金氏惡性淋巴瘤氮芥、苯丁酸氮芥、環(huán)磷酰胺、苯丙氨酸氮芥、異環(huán)磷酰胺、甲氨喋呤、阿糖孢苷、長春新堿、長春堿、依托泊苷、阿霉素、柔紅霉素、卡氮芥、羅氮芥、順鉑；-慢性淋巴性白血病氮芥、苯丁酸氮芥、環(huán)磷酰胺、苯丙氨酸氮芥、異環(huán)磷酰胺。
總的來說，式(Ⅰ)的化合物可以按照下列反應(yīng)方案制備方案Ⅰ 作為烷基化試劑，可以使用其中X=I、Br或Cl的XR6類型試劑。
作為變化形式，可以使用化合物CH2=CH-R連接基團(tuán)R6=-CH2-CH2-R(相應(yīng)于上述基團(tuán)-A-R10)。
方案Ⅲ 此外，按照已知方法，可以將一些或所有烷氧基轉(zhuǎn)變?yōu)榱u基。同樣，按照已知方法可以將羥基轉(zhuǎn)變?yōu)轷セ蚧撬狨ァ?br> 同樣，按照已知方法可以將基團(tuán)-A-COOR11(其中R11是烷基或苯基烷基)轉(zhuǎn)變?yōu)?A-COOH并將基團(tuán)-A-COOH轉(zhuǎn)變?yōu)榛鶊F(tuán)-A-CONR12R13。
通過將其中R4=H而R6=-CH2-CH2-COOH的化合物環(huán)合可以獲得R4和R6形成-CO-CH2-CH2-基團(tuán)的化合物。
實施例1:5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物1)a)N-(3,5-二甲氧基苯基)-2-(4-甲氧基苯基)乙酰胺(化合物2) 在0℃，在氮?dú)夥障?，?00mg(3.3mmol)3,5-二甲氧基苯胺溶解于甲苯(7ml)中。向此溶液中滴加4-甲氧基苯基乙酰氯(0.5ml,3.3mmol)在5ml甲苯中的溶液。將此反應(yīng)混合物室溫下攪拌1小時并用冷碳酸氫鈉溶液將此溶液水解。將此兩相系統(tǒng)劇烈攪拌30分鐘，然后收集有機(jī)相。用乙酸乙酯將水相萃取(兩次)。將有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后蒸發(fā)。將所得殘余物從石油醚中結(jié)晶得到810mg(82％)化合物2。
·m.p.135-137℃(甲苯)?！R(KBr)n3292,1658,1615cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d3.66(s,2H,CH2),3.74(s,6H,OCH3),3.82(s,3H,OCH3),6.20(t,1H,J=2.2Hz,HAr),6.62-6.66(m,2H,HAr),6.95(d,2H,J=7.5Hz,HAr),6.97(slarge,1H,NH),7.23(d,2H,J=7.5Hz,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d44.0,55.3,55.4(2),96.7,97.9(2),114.4(2),126.2,130.7(2),139.4,159.0,161.0(2),169.5.
·MS(離子噴霧)302(M+1)+b)2-氯-5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氫喹啉(化合物3) 在氮?dú)夥障?，?30℃下，將0.31ml(4.0mmol,1.5當(dāng)量)N,N-二甲基甲酰胺滴加到1.75ml(20.0mmol,7.5當(dāng)量)POCl3中。將其在-30℃下攪拌15分鐘，隨后加入810mg酰胺2(2.7mmol)。將此反應(yīng)混合物攪拌下升溫至室溫，然后在75℃下加熱2.5小時。反應(yīng)完畢，將此溶液倒入碎冰中，用30％氨水中和，然后用二氯甲烷萃取。將有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后蒸發(fā)。將所得殘余物通過在硅膠柱上進(jìn)行色譜提純(洗脫劑3/7乙酸乙酯/石油醚)得到270mg(30％)化合物3。
·m.D.156-157℃(甲苯)·1H RMN(250MHz,CDCl3):d3.87(s,3H,OCH3),3.93(s,3H,OCH3),3.95(s,3H,OCH3),6.52(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.97-7.01(m,3H,HAr),6.95(d,2H,J=8.7Hz,HAr),8.35(s,1H,HAr).·13C RMN(62.9MHz,CDCl3):d55.3,55.7,55.8,98.6,98.9,113.6(2),115.8,125.9,130.5,131.0(2),133.8,149.0,150.5,156.0,159.4,162.1.
·MS(離子噴霧)m/z 330(M+1)+,332(M+3)+C)5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物1) 將化合物3(250mg,0.76mmol)溶解于乙酸(1.2ml,26.25mmol每mmol化合物3)和水(0.04ml,2.77mmol每mmol化合物3)中，并將此溶液回流攪拌3小時。蒸發(fā)掉乙酸。將所得殘余物溶解于水中，用25％氫氧化鈉溶液中和，并最后用二氯甲烷萃取。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥并減壓蒸發(fā)。在乙酸乙酯中溶解此殘余物，此操作使終產(chǎn)物結(jié)晶。濾出所得結(jié)晶得到200mg(85％)化合物1。
合成化合物1的總收率為21％?！F 254-255℃(AcOEt)·IR(KBr)n1664,1628,1573,1518cm-1·1H RMN(250MHz,DMSO-d6):d3,78(s,3H,OCH3),3.81(s,3H,OCH3),3.89(s,3H,OCH3),6.35(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.45(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.95(d,2H,J=7.5Hz,HAr),7.66(d,2H,J=7.5Hz,HAr),7.96(s,1H,HAr),11.76(slarge,1H,NH).·13C RMN(62.90MHz,DMSO-d6):d55.1,55.4,55.9,90.0,93.0,104.6,113.3(2),126.5,129.0,129.6(2),130.2,140.5,156.6,158.7,161.5,161.9.
·MS(離子噴霧)m/z312(M+1)+·元素分析C18H17NO4的理論值C,69.44；H,5.50；N,4.50。實測值C,69.29；H,5.40；N,4.55。
實施例2:5,7-二甲氧基-3-(4-羥基苯基)-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物4) 在惰性氣氛下，將530mg(1.70mmol)化合物1溶解于15ml乙酸中。將商購的48％HBr水溶液(2.65ml)滴加(放熱反應(yīng))至此反應(yīng)混合物中。攪拌下將最終溶液回流5小時。冷卻后，通過加入水稀釋并用10％氫氧化鈉水溶液中和(pH=6-7)。用二氯甲烷萃取此產(chǎn)物(兩次)。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將獲得的殘余物在硅膠柱上進(jìn)行色譜純化(洗脫劑二氯甲烷/甲醇=9/1)得到175mg(35％)化合物4。
·PF 275-276℃(AcOEt)·IR(KBr)n1628,1604,1558,1518cm-1·1H RMN(250MHz,DMSO-d6):d3.80(s,3H,OCH3),3.89(s,3H,OCH3),6.35(d,1H,J=2.5Hz,HAr),6.43(d,1H,J=2.5Hz,HAr),6.78(d,2H,J=7.5Hz,HAr),7.55(d,2H,J=7.5Hz,HAr),7.92(s,1H,HAr),9.48(s,1H,OH),11.72(slarge,1H,NH)·13C RMN(62.90 MHz,DMSO-d6):d55.4,55.9,90.0,93.0,104.7,114.8(2),126.9,127.4,129.6,129.8(2),140.4,156.6,156.9,161.6,161.8.
·MS(離子噴霧)m/z298(M+1)+·元素分析C17H15NO4的理論值C,68.68；H,5.09；N,4.71。實測值C,68.90；H,5.09；N,4.90。
實施例3:5,7-二羥基-3-(4-羥基苯基)-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物5) 在惰性氣氛下，將1.0g(3.2mmol)化合物1溶解于15ml乙酸中。將商購的48％HBr水溶液(5ml)滴加(放熱反應(yīng))至此反應(yīng)混合物中。攪拌下將最終溶液回流3天。冷卻后，通過加入水稀釋并用10％氫氧化鈉水溶液中和(pH=6-7)。用二氯甲烷萃取此產(chǎn)物(兩次)。將獲得的有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將此殘余物在硅膠柱上進(jìn)行色譜純化(洗脫劑二氯甲烷/甲醇=9/1)得到320mg(37％)化合物5?！F＞280℃·1H RMN(250MHz,DMSO-d6):d6.11(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.18(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.76(d,2H,J=8.6Hz,HAr),7.52(d,2H,J=8.6Hz,HAr),7.89(s,1H,HAr),9.42(s,1H,OH),9.84(s,1H,OH),10.21(s,1H,OH),11.46(slarge,1H,NH).·13C RMN(62.90MHz,DMSO-d6):d91.3,96.4,103.5,114.7(2),125.1,127.8,129.4(2),130.4,140.7,155.3,156.6,160.1,161.8.
·MS(離子噴霧)m/z270(M+1)+·元素分析C15H11NO4的理論值C,66.91；H,4.12；N,5.20。實測值C,66.80；H,4.00；N,5.40。
實施例4:5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氫-2-喹啉硫酮(化合物6) 在惰性氣氛下，將100mg(0.32mmol)化合物1溶解于15ml甲苯中(熱溶解)。向此反應(yīng)混合物中加入260mg(0.64mmol,2當(dāng)量)Lawessons試劑。將最終溶液在攪拌下回流18小時。冷卻后，蒸發(fā)掉甲苯。將所得殘余物在硅膠柱上進(jìn)行色譜純化(洗脫劑二氯甲烷/乙酸乙酯=9/1)得到81mg(77％)化合物6。·PF 229-230℃(Et2O)·IR(KBr)1636,1610,1524cm-1·1H RMN(250MHz,DMSO-d6):d3,78(s,3H,OCH3),3.83(s,3H,OCH3),3.89(s,3H,OCH3),6.49(d,1H,J=1.9Hz,HAr),6.79(d,1H,J=1.9Hz,HAr),6.92(d,2H,J=8.7Hz,HAr),7.49(d,2H,J=8.7Hz,HAr),7.78(s,1H,HAr),13.50(slarge,1H,NH).·13C RMN(62.90 MHz,CDCl3):d55.1,55.6,56.1,90.2,95.2,108.9,112.9(2),128.2,130.7(2),132.0,136.3,140.9,156.4,158.5,162.5,180.5.
·MS(離子噴霧)m/z 328(M+1)+·元素分析C18H17NO3S的理論值C,66.03；H,5.23；N,4.28。實測值C,66.30；H,5.30；N,4.35。
實施例5:5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-1-甲基-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物7) 在氮?dú)夥障?，?00mg(1.93mmol)化合物1溶解于30ml無水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中。在0℃下，向此反應(yīng)溶液中分批加入預(yù)先經(jīng)過石油醚洗滌的93mg(3.86mmol,2當(dāng)量)氫化鈉(放熱反應(yīng))。向此反應(yīng)介質(zhì)中加入在5ml DMF中稀釋的碘代甲烷(0.48ml,7.72mmol,4當(dāng)量)溶液。將此反應(yīng)在90℃下加熱18小時。冷卻后，向此反應(yīng)混合物中加入水，然后將此溶液攪拌15分鐘。通過燒結(jié)漏斗過濾收集所得固體，然后用水清洗。將此固體溶解于二氯甲烷中并用水洗滌兩次。將所得有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將所得殘余物在硅膠柱上進(jìn)行色譜純化(二氯甲烷/乙酸乙酯8/2)得到408mg(68％)化合物7和157mg(25％)衍生物7a。
化合物7·PF 125℃(AcOEt/EP)·IR(KBr)n 1635,1596,1590,1514cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d3.73(s,3H,NCH3),3.83(s,3H,OCH3),3.91(s,6H,OCH3),6.30(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.37(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.94(d,2H,J=7.5Hz,HAr),7.67(d,2H,J=7.5Hz,HAr),8.12(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d30.3,55.3,55.5,55.8,90.2,92.6,106.1,113.5(2),127.0,130.0,130.1(2),130.2,141.7,157.6,159.1,162.2(2).
·MS(離子噴霧)m/z326(M+1)+·元素分析C19H19NO4的理論值C,70.14；H,5.89；N,4.30。實測值C,70.00；H,5.73；N,4.24。
化合物7a2,5,7-三甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)喹啉 ·PF 106-107℃(AcOEt/EP)·IR(KBr)n 1621,1515,1265cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d3.86(s,3H,OCH3),3.94(s,6H,OCH3),4.08(s,3H,OCH3),6.40(d,1H,J=1.8Hz,HAr),6.85(d,1H,J=1.8Hz,HAr),6.97(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.57(d,2H,J=8.8Hz,HAr),8.26(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d53.5,55.3,55.5,55.6,95.9,98.5,112.8,113.6(2),122.1,129.6,130.5(2),132.3,147.9,156.3,158.9,160.6,161.3.
·MS(離子噴霧)m/z326(M+1)+·元素分析C19H19NO4的理論值C,70.14；H,5.89；N,4.30。實測值C,69.89；H,5.81；N,4.10。
實施例6:5,7-二甲氧基-3-(4-羥基苯基)-1-甲基-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物8) 在惰性氣氛下，將408mg(1.3mmol)化合物7溶解于15ml乙酸中。將商購的48％HBr水溶液(2ml)滴加(放熱反應(yīng))至此反應(yīng)混合物中。攪拌下將最終溶液回流5小時。冷卻后，通過加入水稀釋并用10％氫氧化鈉水溶液中和(pH=6-7)。用二氯甲烷萃取此產(chǎn)物(兩次)。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將獲得的殘余物在硅膠柱上進(jìn)行色譜純化(洗脫劑二氯甲烷/乙酸乙酯=7/3)得到220mg(56％)化合物8。
·PF 204-205℃(AcOEt)·1H RMN(250MHz,DMSO-d6):d3.63(s,3H,NCH3),3,89(s,3H,OCH3),3.90(s,3H,OCH3),6.46(d,1H,J=1.9Hz,HAr),6.54(d,1H,J=1.9Hz,HAr),6.76(d,2H,J=8.5Hz,HAr),7.48(d,2H,J=8.5Hz,HAr),7.93(s,1H,HAr),9.47(s,1H,OH).·13C RMN(62.90MHz,DMSO-d6):d30.5,56.1,56.5,91.3,93.4,105.3,115.2(2),126.5,128.4,129.2,130.2(2),141.7,157.4(2),161.4,162.5.
·SM:m/z312(M+1)+·元素分析C18H17NO4的理論值C,69.44；H,5.50；N,4.50。實測值C,69.65；H,5.59；N,4.60。
實施例7:5,7-二羥基-3-(4-羥基苯基)-1-甲基-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物9)
1．方法A在惰性氣氛下，將200mg(0.61mmol)化合物7溶解于15ml乙酸中。將商購的48％HBr水溶液(1ml)滴加(放熱反應(yīng))至此反應(yīng)混合物中。攪拌下將最終溶液回流3天。冷卻后，通過加入水稀釋并用10％氫氧化鈉水溶液中和(pH=6-7)。用二氯甲烷萃取此產(chǎn)物(兩次)。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將獲得的殘余物在硅膠柱上進(jìn)行色譜純化(洗脫劑二氯甲烷/甲醇/9/1)得到61mg(35％)化合物9。
2．方法B在惰性氣氛下，將1.0g(3.1mmol)化合物7溶解于15ml二氯甲烷中。在0℃，向此反應(yīng)混合物中滴加1.81ml(19.0mmol,6當(dāng)量)三溴化硼(放熱反應(yīng))。室溫下將此最終溶液攪拌18小時。通過加入(滴加)水進(jìn)行水解，然后用10％氫氧化鈉溶液中和(pH=6-7)。用二氯甲烷萃取此產(chǎn)物(兩次)。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將所得殘余物在硅膠柱上純化(洗脫劑二氯甲烷/甲醇=9/1)得到688mg(76％)化合物9。
·PF＞280℃(AcOEt)·1H RMN(250MHz,DMSOd-6):d3,53(s,3H,CH3),6.25(s,2H,HAr),6.76(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.47(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.92(s,1H,HAr),9.42(s,1H,OH),10.00(s,1H,OH),10.35(s,1H,OH).·13C RMN(62.90MHz,DMSOd-6):d29.7,91.8,96.5,103.5,114.7(2),124.3,128.4,129.7(3),141.7,155.9,156.7,160.6,161.1.
·MS(離子噴霧)m/z284(M+1)+·元素分析C16H13NO4的理論值C,67.84；H,4.63；N,4.94。實測值C,67.68；H,4.46；N,4.78。
實施例8:5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-1-甲基-1,2-二氫-2-喹啉硫酮(化合物10) 在氮?dú)夥障?，?00mg(1.5mmol)化合物7溶解于30ml甲苯中。向此反應(yīng)混合物中加入870mg(2.1mmol,1.4當(dāng)量)Lawesson試劑。將此反應(yīng)回流12小時。冷卻后，蒸發(fā)掉溶劑。將所得殘余物在硅膠柱上進(jìn)行色譜純化(乙酸乙酯/石油醚=3/7)得到376mg(72％)化合物10。
·PF 176-177℃(AcOEt/EP)·IR(KBr)1613,1570,1512cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d3,84(s,3H,OCH3),3.91(s,3H,OCH3),3.95(s,3H,OCH3),4.39(s,3H,NCH3),6.39(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.56(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.93(d,2H,J=7.5Hz,HAr),7.43(d,2H,J=7.5Hz,HAr),7.97(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d39.5,55.2,55.6,55.9,91.1,94.6,109.9,113.1(2),126.6,130.8(2),134.3,138.6,142.7,157.6,158.8,162.7,184.5.
·MS(離子噴霧)m/z 342(M+1)+·元素分析C19H19NO3S的理論值C,66.84；H,5.61；N,4.10。實測值C,66.70；H,5.53；N,4.03。
實施例9:2-[5,7-二甲氧基-3-(4-羥基苯基)-2-氧代-1,2-二氫-1-喹啉基]乙酸乙酯(化合物11) 在氮?dú)夥障?，?.0g(3.2mmol)化合物1溶解于30ml無水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中。在0℃下，向此反應(yīng)溶液中分批加入預(yù)先用石油醚洗滌的115mg(4.8mmol,1.5當(dāng)量)氫化鈉(放熱反應(yīng))。向此反應(yīng)介質(zhì)中加入在5ml DMF中的溴代乙酸乙酯(0.72ml,6.4mmol,2當(dāng)量)的溶液。將此反應(yīng)在90℃下加熱2-3小時。冷卻后，向此反應(yīng)混合物中加入水，然后將此溶液攪拌15分鐘。將此溶液用乙酸乙酯萃取(兩次)。將有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將所得殘余物在硅膠柱上進(jìn)行色譜純化(二氯甲烷/乙酸乙酯=7/3)得到890mg(70％)化合物11和318mg(25％)衍生物11a。
化合物11·PF 160-161℃(AcOEt/EP)·IR(KBr)1735,1647,1609cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d1.6(t,3H,J=7.1Hz,COOCH2CH3),3.83(s,3H,OCH3),3.87(s,3H,OCH3),3.92(s,3H,OCH3),4.22(q,2H,J=7.1Hz,COOCH2CH3),5.10(s,2H,CH2CO),6.14(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.30(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.94(d,2H,J=7.5Hz,HAr),7.69(d,2H,J=7.5Hz,HAr),8.18(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90 MHz,CDCl3):d14.2,44.8,55.3,55.5,55.9,61.6,90.0,92.8,106.2,113.5(2),126.6,129.6,130.1(2),131.0,141.1,157.8,159.2,161.9,162.5,168.4.
·MS(離子噴霧)m/z398(M+1)+·元素分析C22H23NO6的理論值C,66.49；H,5.83；N,3.52。實測值C,66.60；H,6.03；N,3.75。
化合物11a2-([5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-喹啉基]氧基)乙酸乙酯 ·PF 95-96℃(AcOEt/EP)·IR(KBr)n 1754,1622,1516,1265cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d1.27(t,3H,J=7.1Hz,CH3),3,86(s,3H,OCH3),3.91(s,3H,OCH3),3.93(s,3H,OCH3),4.24(q,2H,J=7,1Hz,OCH2),5.05(s,2H,NCH2),6.40(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.76(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.98(d,2H,J=9.0Hz,HAr),7.68(d,2H,J=9.0Hz,HAr),8.30(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d14.2,55.3,55.5,55.7,60.9,62.7,96.2,98.6,113.4,113.7(2),121.7,129.2,130.6(2),132.8,147.3,156.3,158.8,159.1,161.4,169.5.
·MS(離子噴霧)m/z398(M+1)+·元素分析C22H23NO6的理論值C,66.49；H,5.83；N,3.52。實測值C,66.63；H,5.90；N,3.60。
實施例10:3-[5,7-二甲氧基-3-(4-羥基苯基)-2-氧代-1,2-二氫-1-喹啉基]丙酸甲酯(化合物12) 在氮?dú)夥障?，?.9ml丙烯酸甲酯(32.0mmol,10當(dāng)量)存在下，將1.0g(3.2mmol)化合物1溶解于20ml無水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中。在0℃下，向此反應(yīng)溶液中加入2-3滴氫氧化四烴銨。將此混合物室溫下攪拌4小時。減壓蒸發(fā)掉DMF和丙烯酸甲酯。將所得殘余物溶于乙酸乙酯中并用水洗滌兩次。將所得有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將此粗品在硅膠柱上進(jìn)行色譜純化(二氯甲烷/乙酸乙酯=8/2)得到1.06g(83％)化合物12。
·PF 100-101℃(AcOEt)·IR(KBr)1725,1638cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d2.78(t,2H,J=8.0Hz,CH2),3.68(s,3H,COOCH3),3.80(s,3H,OCH3),3.88(s,6H,OCH3),4.57(t,2H,J=8.0Hz,CH2),6.26(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.46(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.92(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.66(d,2H,J=8.8Hz,HAr),8.11(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d31.9,39.1,51.8,55.2,55.5,55.7,89.8,92.6,106.2,113.4(2),126.5,129.5,129.9(2),130.3,140.5,157.6,159.0,161.7,162.4,172.0.
·MS(離子噴霧)m/z398(M+1)+·元素分析C22H23NO6的理論值C,66.49；H,5.83；N,3.52。實測值C,66.55；H,5.70；N,3.50。
實施例11:2-[5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氫-1-喹啉基]乙酸芐基酯(化合物13) 在氮?dú)夥障?，?00mg(0.96mmol)化合物1溶解于10ml無水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中。在0℃下，向此反應(yīng)溶液中分批加入預(yù)先用石油醚洗滌的35mg(1.40mmol,1.5當(dāng)量)氫化鈉(放熱反應(yīng))。向此反應(yīng)介質(zhì)中加入在5ml DMF中稀釋的溴代乙酸芐基酯(0.31ml,1.90mmol,2當(dāng)量)的溶液。在90℃下加熱2小時。冷卻后，向此反應(yīng)混合物中加入水，然后將此溶液攪拌15分鐘。將此溶液用二氯甲烷萃取(兩次)。將有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將所得殘余物在硅膠柱上進(jìn)行色譜純化(洗脫劑二氯甲烷)得到317mg(72％)化合物13和88mg(20％)衍生物13a。
化合物13·m.p.199-200℃(乙醚洗滌)·IR(KBr)1748,1642,1617cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d3,68(s,3H,OCH3),3.84(s,3H,OCH3),3.92(s,3H,OCH3),5.16(s,2H,CH2),5.21(s,2H,CH2),6.03(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.27(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.94(d,2H,J=7.5Hz,HAr),7.25-7.32(m,5H,HAr),7.68(d,2H,J=7.5Hz,HAr),8.17(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d44.7,55.3,55.4,55.8,67.1,89.8,93.0,106.2,113.5(2),126.5,128.3(2),128.4,128.5(2),129.5,130.1(2),131.1,135.3,141.0,157.8,159.2,161.8,162.4,168.3.
·MS(離子噴霧)m/z 460(M+1)+化合物13a2-([5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-喹啉基]氧基)乙酸芐基酯 ·PF 114-115℃(乙醚)·IR(KBr)n 1761,1621,1517cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d3,87(s,3H,OCH3),3.91(s,3H,OCH3),3.95(s,3H,OCH3),5.17(s,2H,OCH2),5.27(s,2H,OCH2),6.44(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.76(d,2H,J=2.0Hz,HAr),7.00(d,2H,J=8.0Hz,HAr),7.26-7.38(m,5H,HAr),7.71(d,2H,J=8.0Hz,HAr),8.36(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d55.2,55.4,55.5,62.6,66.4,96.2,98.5,113.4,113.6(2),121.6,128.0(2),128.4(3),129.0,130.5(2),132.7,135.6,147.2,156.1,158.6,159.0,161.3,169.3.
·MS(離子噴霧)m/z 460(M+1)+實施例12:2-[5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氫-1-喹啉基]乙酸(化合物14) 在圓底燒瓶中，將1.0g(2.2mmol)芐基酯13溶解于二噁烷(30ml)中。向此反應(yīng)溶液中加入10％鈀碳(100mg)。室溫下，在40psi氫氣壓下，用Parr儀器進(jìn)行4小時的脫芐基化反應(yīng)。通過C鹽過濾此反應(yīng)介質(zhì)，并將此濾液減壓蒸發(fā)。所得結(jié)晶產(chǎn)物用乙醚洗滌得到764mg(95％)化合物14。
·m.p.179-180℃(乙醚洗滌)。
·IR(KBr)1732,1614,1583cm-1·1H RMN(250MHz,DMSO-d6):d3.77(s,3H,OCH3),3.85(s,3H,OCH3),3.91(s,3H,OCH3),5.02(s,2H,CH2),6.46(s,1H,HAr),6.47(s,1H,HAr),6.93(d,2H,J=9.0Hz,HAr),7.62(d,2H,J=9.0Hz,HAr),8.03(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,DMSO-d6):d:44.9,55.5,56.1,56.6,91.3,93.3,105.3,113.8(2),125.7,129.4,130.1(2),130.4,141.3,157.6,159.1,161.3,162.8,170.1.
·MS(離子噴霧)m/z370(M+1)+·元素分析C20H19NO6的理論值C,65.03；H,5.18；N,3.79。實測值C,65.00；H,5.25；N,3.85。
實施例13:3-[5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氫-1-喹啉基]丙酸芐基酯(化合物15) 在氮?dú)夥障?，?82mg(4.8mmol,10當(dāng)量)丙烯酸芐基酯存在下，將150mg(0.48mmol)化合物1溶解于10ml無水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中。在0℃下，向此反應(yīng)溶液中加入2-3滴氫氧化四烴銨。將此混合物室溫下攪拌18小時。減壓蒸發(fā)掉溶劑。將所得殘余物溶于乙酸乙酯中并用水洗滌兩次。將所得有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將此粗品在硅膠柱上進(jìn)行色譜純化(乙酸乙酯/石油醚=4/6)得到200mg(88％)化合物15?！F 124-125℃(Et2O/EP)·IR(KBr)1731,1635,1600cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d2.86(t,2H,J=8.0Hz,COCH2),3,84(s,3H,OCH3),3.85(s,3H,OCH3),3.92(s,3H,OCH3),4.63(t,2H,J=8.0Hz,NCH2),5.14(s,2H,CH2Ph),6.29(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.49(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.94(d,2H,J=7.5Hz,HAr),7.30-7.35(m,5H,HAr),7.68(d,2H,J=7.5Hz,HAr),8.13(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d32.2,39.1,55.2,55.4,55.7,66.5,89.7,92.6,106.2,113.4(2),126.5,128.1(2),128.2,128.4(2),129.5,129.9(2),130.4,135.5,140.5,157.6,159.0,161.7,162.4,171.3.
·MS(離子噴霧)m/z474 (M+1)+實施例14:3-[5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氫-1-喹啉基]丙酸(化合物16) 在圓底燒瓶中，將1.0g(2.1mmol)芐基酯15溶解于二噁烷(30ml)中。向此反應(yīng)溶液中加入10％鈀碳(100mg)。在40psi氫氣壓下，用Parr儀器進(jìn)行48小時的脫芐基化反應(yīng)。通過C鹽過濾此反應(yīng)介質(zhì)，并將此濾液減壓蒸發(fā)，用乙醚洗滌后，得到780mg(97％)化合物16。
·m.p.194-195℃(乙醚洗滌)?！R(KBr)1724,1637,1612,1604cm-1·1H RMN(250MHz,DMSO-d6):d2.60(t,2H,J=7.5Hz,COCH2),3.78(s,3H,OCH3),3.90(s,3H,OCH3),3.92(s,3H,OCH3),4.48(t,2H,J=7.5Hz,NCH2),6.48(d,1H,J=1.8Hz,HAr),6.62(slarge,1H,HAr),6.95(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.62(d,2H,J=8.8Hz,HAr),8.00(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,DMSO-d6):d:32.0,38.9,55.1,55.7,56.1,90.6,93.0,105.0,113.3(2),125.6,129.3,129.5,129.8(2),140.5,157.2,158.7,160.6,162.4,172.5.
·MS(離子噴霧)m/z 384(M+1)+·元素分析C21H21NO6的理論值C,65.79；H,5.52；N,3.65。實測值C,65.60；H,5.51；N,3.70。
實施例15:N,N-二乙基-3-[5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氫-1-喹啉基]丙酰胺(化合物17)
在氮?dú)夥障?，?.0g(2.6mmol)化合物16溶解于25ml無水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中。在0℃，向此反應(yīng)溶液中加入353mg(2.6mmol)羥基苯并三唑和540mg(2.6mmol)環(huán)己基碳二亞胺。在0℃下，將此反應(yīng)攪拌10分鐘，隨后加入0.26ml(2.6mmol)二乙胺。將最終溶液在0℃下攪拌2小時，然后室溫下攪拌24小時。通過過濾除去二環(huán)己基脲。將此濾液用乙酸乙酯萃取(兩次)。將收集的有機(jī)相用水洗滌若干次。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將所得殘余物在硅膠柱上進(jìn)行色譜純化(二氯甲烷/乙酸乙酯=7/3)得到680mg(60％)化合物17。
·m.p.137-138℃(乙酸乙酯洗滌)·IR(KBr)1636,1617cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d1.07-1.21(m,6H,CH3),2.78(t,2H,J=8.0Hz,COCH2),3.30(q,2H,J=7.0Hz,NCH2),3.39(q,2H,J=7.0Hz,NCH2),3.84(s,3H,OCH3),3.91(s,3H,OCH3),3.94(s,3H,OCH3),4.65(t,2H,J=8.0Hz,NCH2),6.29(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.73(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.94(d,2H,J=7.5Hz,HAr),7.67(d,2H,J=7.5Hz,HAr),8.15(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d；13.1,14.4,31.0,40.1,40.5,42.2,55.3,55.8(2),89.9,93.1,106.3,113.5(2),126.6,129.7,130.0(2),130.5,140.9,157.6,159.1,162.1,162.6,169.9.
·MS(離子噴霧)m/z 439(M+1)+·元素分析C25H30N2O5的理論值C,68.47；H,6.90；N,6.39。實測值C,68.27；H,6.80；N,6.40。
實施例16:N,N-二乙基-2-[5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氫-1-喹啉基]乙酰胺(化合物18)
在氮?dú)夥障?，?.0g(3.2mmol)化合物1溶解于30ml無水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中。在0℃，向此反應(yīng)溶液中分批加入事先在石油醚中經(jīng)過洗滌的115mg(4.8mmol,1.5當(dāng)量)氫化鈉(放熱反應(yīng))。向此反應(yīng)介質(zhì)中加入在5ml DMF中稀釋的2-氯-N,N-二乙基乙酰胺(0.88ml,6.4mmol,2當(dāng)量)溶液。在90℃下將此反應(yīng)加熱3小時。冷卻后，向此反應(yīng)混合物中加入水。用乙酸乙酯萃取此反應(yīng)溶液(兩次)。將所得有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將所得殘余物在硅膠柱上進(jìn)行色譜純化(二氯甲烷/乙酸乙酯=7/3)得到820mg(61％)化合物18和408mg(30％)衍生物18a。
化合物18·PF 178-179℃(AcOEt)·IR(KBr)1642,1617,1601cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d1.10-1.23(m,6H,CH3),3.38-3.49(m,4H,CH2),3.83(s,3H,OCH3),3.86(s,3H,OCH3),3.91(s,3H,OCH3),5.17(s,2H,NCH2CO),6.28(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.34(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.93(d,2H,J=7.0Hz,HAr),7.66(d,2H,J=7.0Hz,HAr),8.17(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d13.0,14.2,40.9,41.6,45.3,55.3,55.5,55.8,90.8,92.8,106.3,113.4(2),126.6,129.9,130.1(2),131.0,141.7,157.6,159.0,161.9,162.3,166.3.
·MS(離子噴霧)m/z 425(M+1)+·元素分析C24H28N2O5的理論值C,67.91；H,6.65；N,6.60。實測值C,67.62；H,6.44；N,6.50。
化合物18aN,N-二乙基-2-([5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-喹啉基]氧基)乙酰胺(18a) ·PF 146-147℃(AcOEt/EP)·IR(KBr)n1654,1624,1517cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d1.14(t,3H,J=7.5Hz,CH3),1.28(t,3H,J=7.5Hz,CH3),3.36-3.47(m,4H,NCH2),3,85(s,3H,OCH3),3.91(s,3H,OCH3),3.93(s,3H,OCH3),5.17(s,2H,NCH2),6.38(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.73(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.97(d,2H,J=9.0Hz,HAr),7.75(d,2H,J=9.0Hz,HAr),8.28(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d12.9,14.2,40.2,55.2,55.4,55.6,63.0,95.8,98.4,113.3,113.5(2),121.9,129.2,130.6(2),132.5,147.3,156.2,158.9,161.1,167.3.
·MS(離子噴霧)m/z 425(M+1)+·元素分析C24H28N2O5的理論值C,67.91；H,6.65；N,6.60。實測值C,67.85；H,6.70；N,6.51。
實施例17:[5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氫-1-喹啉基]乙腈(化合物19) 在氮?dú)夥障?，?.0g(3.2mmol)化合物1溶解于30ml無水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中。在0℃，向此反應(yīng)溶液中分批加入事先在石油醚中經(jīng)過洗滌的115mg(4.8mmol,1.5當(dāng)量)氫化鈉(放熱反應(yīng))。向此反應(yīng)介質(zhì)中加入在5ml DMF中稀釋的溴代乙腈(0.45ml,6.4mmol,2當(dāng)量)溶液。在90℃下將此反應(yīng)加熱3小時。冷卻后，向此反應(yīng)混合物中加入水。用乙酸乙酯萃取此反應(yīng)溶液(兩次)。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將所得殘余物在硅膠柱上進(jìn)行色譜純化(二氯甲烷/乙酸乙酯=7/3)得到683mg(61％)化合物19和336mg(30％)衍生物19a。
化合物19·PF 208-209℃(AcOEt)·IR(KBr)2216,1660,1607cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d3.84(s,3H,OCH3),3.94(s,3H,OCH3),3.95(s,3H,OCH3),5.29(s,2H,CH2),6.36(s,2H,HAr),6.95(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.65(d,2H,J=8.8Hz,HAr),8.17(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d30.4,55.3,55.8,56.0,90.0,93.5,106.2,113.6(2),114.8,126.3,129.0,130.0(2),131.7,139.8,158.1,159.4,161.1,163.0.
·MS(離子噴霧)m/z351(M+1)+·元素分析C20H18N2O4的理論值C,68.56；H,5.18；N,8.00。實測值C,68.30；H,5.00；N,7.90。
化合物19a2-([5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-喹啉基]氧基)乙腈(19a) ·PF 149-150℃(乙醚)·IR(KBr)n1623,1586,1516,1265cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d3.87(s,3H,OCH3),3.95(s,6H,OCH3),5.17(s,2H,OCH2),6.45(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.87(d,1H,J=2.0Hz,HAr),7.99(d,2H,J=9.0Hz,HAr),7.54(d,2H,J=9.0Hz,HAr),8.34(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d50.1,55.3,55.6,55.7,96.9,98.6,113.8(2),113.9,116.1,121.3,128.4,130.5(2),133.5,147.1,156.3,157.2,129.3,161.8.
·MS(離子噴霧)m/z351(M+1)+·元素分析C20H18N2O4的理論值C,68.56；H,5.18；N,8.00。實測值C,68.42；H,5.03；N,7.88。
實施例18:3-[5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氫-1-喹啉基]丙腈(化合物20) 在氮?dú)夥障拢瑢?00mg(1.6mmol)化合物1和0.8ml(12mmol)丙烯腈溶解于10ml無水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中。在0℃下，向此反應(yīng)溶液中加入2滴氫氧化四烴銨。通過TLC監(jiān)控此反應(yīng)。在反應(yīng)完畢時，蒸發(fā)掉溶劑。在乙酸乙酯中溶解此殘余物并用水洗滌幾次。將有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將所得殘余物在硅膠柱上進(jìn)行色譜純化(二氯甲烷/乙酸乙酯=7/3)得到365mg(63％)化合物20?！F 156-157℃(AcOEt/EP)·IR(KBr)2241,1639cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d2.88(t,2H,J=7.1Hz,CH2CN),3.84(s,3H,OCH3),3.93(s,3H,OCH3),3.94(s,3H,OCH3),4.59(t,2H,J=7.1Hz,NCH2),6.33(d,1H,J=1.8Hz,HAr),6.45(d,1H,J=1.8Hz,HAr),6.95(d,2H,J=9.0Hz,HAr),7.66(d,2H,J=9.0Hz,HAr),8.17(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d；15.9,39.4,55.3,55.7,55.9,89.9,93.0,106.4,113.6(2),117.7,126.6,129.2,130.0(2),131.1,140.5,158.0,159.3,161.8,162.7.
·MS(離子噴霧)m/z365(M+1)+·元素分析C21H20N2O4的理論值C,69.22；H,5.53；N,7.69。實測值C,69.40；H,5.40；N,7.80。
實施例19:1-[2-(1H-1,2,3,4-四唑-5-基)乙基]-5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物21) 在氫氣氛下，將350mg(0.90mmol)化合物20和0.42ml(1.53mmol)疊氮化三丁基錫溶解于20ml無水甲苯中。將此反應(yīng)溶液在105℃下攪拌65小時。冷卻后，減壓蒸發(fā)掉溶劑。將所得殘余物在硅膠柱上經(jīng)色譜純化(二氯甲烷/甲醇=9/1)得到333mg(85％)化合物21。
·m.p.234-235℃(乙醚洗滌)
·IR(KBr)1618,1594cm-1·1H RMN(250MHz,DMSO-d6):d3.33(t,2H,J=6.0Hz,CH2),3.79(s,3H,OCH3),3.89(s,3H,OCH3),3.93(s,3H,OCH3),4.67(t,2H,J=6.0Hz,CH2),6.48(s,1H,HAr),6.52(s,1H,HAr),6.96(d,2H,J=9.0Hz,HAr),7.59(d,2H,J=9.0Hz,HAr),8.01(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,DMSO-d6):d21.4,40.8,55.1,55.6,56.1,90.4,93.0,105.0,113.3(2),125.5,129.3,129.6,129.7(2),140.4,153.7,157.2,158.7,160.7,162.4.
·MS(離子噴霧)m/z408(M+1)+·元素分析C21H20N5O4的理論值C,61.91；H,5.20；N,17.19。實測值C,62.00；H,5.19；N,17.30。
實施例20:1-[3-(二甲基氨基)丙基]-5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物22) 在氮?dú)夥障?，?.0g(3.2mmol)化合物1溶解于20ml無水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中。在0℃，向此反應(yīng)溶液中分批加入事先在石油醚中經(jīng)過洗滌的115mg(4.8mmol,1.5當(dāng)量)氫化鈉(放熱反應(yīng))。向此反應(yīng)介質(zhì)中加入在5ml DMF中的3-二甲基氨基丙基氯(777mg,7.3mmol,2.25當(dāng)量)溶液。在90℃下將此反應(yīng)加熱2-3小時。冷卻后，向此反應(yīng)混合物中加入水，接著攪拌15分鐘。用乙酸乙酯萃取此溶液(兩次)。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將所得殘余物在硅膠柱上進(jìn)行色譜純化(8/2乙醚/甲醇，然后9/1二氯甲烷/甲醇)得到887mg(90％)化合物22和317mg(25％)衍生物22a。
化合物22·m.p.94-95℃(乙醚洗滌)。
·IR(KBr)1635,1617,1598cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d1.91-2.04(m,2H,CH2),2.28(s,6H,CH3),2.46(t,2H,J=7.2Hz,CH2),3.83(s,3H,OCH3),3.91(s,3H,OCH3),3.93(s,3H,OCH3),4.36(t,2H,J=7.2Hz,CH2),6.29(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.54(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.94(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.68(d,2H,J=8.8Hz,HAr),8.13(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d25.5,41.8,45.6(2),55.4,55.5,55.8,57.1,90.3,92.6,106.4,113.5(2),126.9,130.0,130.1(2),130.3,141.1,157.6,159.1,162.0,162.3.
·MS(離子噴霧)m/z397(M+1)+·元素分析C23H28N2O4的理論值C,69.68；H,7.12；N,7.07。實測值C,69.40；H,6.97；N,7.15。
化合物22aN,N-二甲基-2-[5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-喹啉基]氧基-1-丙胺(化合物22a) ·PF 54-55℃(乙醚)·IR(KBr)n1621,1584,1515cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d1.96-2.07(m,2H,CH2),2.26(s,6H,NCH3),2.47(t,2H,J=6.5Hz,NCH2),3,84(s,3H,OCH3),3.92(s,6H,OCH3),4.53(t,2H,J=6.5Hz,OCH2),6.39(d,1H,J=2.2Hz,HAr),6.82(d,1H,J=2.2Hz,HAr),6.96(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.57(d,2H,J=8.8Hz,HAr),8.26(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d27.0,45.4(2),55.2,55.5(2),56.6,64.2,95.8,98.5,112.7,113.4(2),121.9,129.6,130.5(2),132.1,147.9,156.2,158.8,160.2,161.2.
·MS(離子噴霧)m/z 397(M+1)+·元素分析C23H28N2O4的理論值C,69.68；H,7.12；N,7.07。實測值C,69.53；H,6.92；N,7.16。
實施例21:1-[2-(二甲基氨基)乙基]-5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物23) 在氮?dú)夥障拢瑢?50mg(0.8mmol)化合物1溶解于15ml無水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中。在0℃，向此反應(yīng)溶液中分批加入事先在石油醚中經(jīng)過洗滌的29mg(1.2mmol,1.5當(dāng)量)氫化鈉(放熱反應(yīng))。向此反應(yīng)介質(zhì)中加入在5ml DMF中的2-二甲基氨基乙基氯(230mg,2.5mmol,3當(dāng)量)溶液。在90℃下將此反應(yīng)加熱2-3小時。冷卻后，向此反應(yīng)混合物中加入水，接著攪拌15分鐘。用乙酸乙酯萃取此溶液(兩次)。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將所得殘余物在硅膠柱上進(jìn)行色譜純化(3/7乙醚/乙酸乙酯，然后9/1二氯甲烷/甲醇)得到205mg(67％)化合物23和92mg(30％)衍生物23a。
化合物23·m.p.113-114℃(乙醚洗滌)?！R(KBr)1645,1617,1604cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d2.39(s,6H,CH3),2.65(t,2H,J=7.8Hz,CH2),3.82(s,3H,OCH3),3.90(s,3H,OCH3),3.91(s,3H,OCH3),4.44(t,2H,J=7.8Hz,CH2),6.28(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.49(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.94(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.67(d,2H,J=8.8Hz,HAr),8.12(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d41.6,45.8(2),55.3,55.6,55.8(2),90.1,92.7,106.4,113.5(2),126.9,129.8,130.1(2),130.4,141.1,157.7,159.1,161.9,162.4.
·MS(離子噴霧)m/z383(M+1)+·元素分析C22H26N2O4的理論值C,69.09；H,6.85；N,7.32。實測值C,69.37；H,6.98；N,7.51。
化合物23aN,N-二甲基-2-[5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-喹啉基]氧基-1-乙胺
·PF49-50℃(乙醚洗滌)·IR (KBr)n1621,1584,1515cm-1·1HRMN(250MHz,CDCl3):d2.31(s,6H,NCH3),2.77(t,2H,J=6.0Hz,NCH2),3,85(s,3H,OCH3),3.93(s,6H,OCH3),4.62(t,2H,J=6.0Hz,OCH2),6.39(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.81(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.94(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.58(d,2H,J=8.8Hz,HAr),8.25(s,1H,HAr).·13CRMN(62.90MHz,CDCl3):d45.7(2),55.3,55.5(2),57.8,63.8,95.9,98.5,112.9,113.4(2),122.0,129.5,130.6(2),132.3,147.8,156.3,158.9,160.0,161.3.
·MS(離子噴霧)m/z383(M+1)+·元素分析C22H26NO4的理論值C,69.09；H,6.85；N,7.32。實測值C,69.30；H,6.70；N,7.29。
實施例22:8,10-二甲氧基-6-(4-甲氧基苯基)-2,3-二氫-1H,5H-吡啶并[3,2,1-ij]喹啉-1,5-二酮(化合物24) 在氮?dú)夥障?，?3mg五氧化二磷和500mg PPA加入到圓底燒瓶中，并在120℃將此混合物攪拌1小時。加入化合物16(100mg,0.26mmol)并在120℃再將此反應(yīng)攪拌45分鐘。冷卻后，加入2N氫氧化鈉溶液直到pH=6-7為止。用二氯甲烷萃取粗品(兩次)。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將所得殘余物在硅膠柱上經(jīng)色譜純化(98/2二氯甲烷/甲醇)得到62mg(65％)化合物24?！F240-241℃(CH2Cl2/EP)·IR(KBr)1678,1649,1634cm-1·1HRMN(250MHz,CDCl3):d2.83(t,2H,J=7.0Hz,COCH2),3.85(s,3H,OCH3),4.04(s,6H,OCH3),4.54(d,2H,J=7.0Hz,NCH2),6.32(s,1H,HAr),6.96(d,2H,J=7.5Hz,HAr),7.68(d,2H,J=7.5Hz,HAr),8.12(s,1H,HAr).·13CRMN(62.90MHz,CDCl3):d37.6,40.3,55.3,56.1,56.5,88.9,103.5,104.8,113.6(2),127.6,129.0,129.8,130.0(2),142.9,159.4,161.6,161.7,163.7,190.3.
·MS(離子噴霧)m/z366(M+1)+·元素分析C21H19NO5的理論值C,69.03；H,5.24；N,3.83。實測值C,68.80；H,5.34；N,4.00。
實施例23a)5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-1-甲基-2-(甲硫基)喹啉碘化鎓(化合物25) 在氮?dú)夥障?，?82mg(2.0mmol)化合物10溶解于30ml無水THF中。室溫下，加入在5ml THF中稀釋的3.5ml碘代甲烷(56mmol,28當(dāng)量)，然后在惰性氣氛下將此反應(yīng)攪拌18小時。在燒結(jié)漏斗上濾出反應(yīng)完畢時觀察到的沉淀(用THF洗滌)得到761mg(79％)化合物25。
·m.p.156-157℃(THF洗滌)·1H RMN(250MHz,CDCl3):d2.44(s,3H,SCH3),3.88(s,3H,OCH3),4.02(s,3H,OCH3),4.28(s,3H,OCH3),5.03(s,3H,NCH3),6.70(d,1H,J=1,5Hz,HAr),7.03(d,2H,J=8.5Hz,HAr),7.37(slarge,1H,HAr),7.46(d,2H,J=8.5Hz,HAr),8.71(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d20.8,46.5,55.4,56.7,58.5,92.9,101.0,114.4(2),117.6,125.8,128.9,130.7(2),135.9,138.8,144.2,157.4,160.3,167.7.
此化合物快速用于下步反應(yīng)。
b)5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-1-甲基-1,2-二氫-2-喹啉酮-2-苯基腙(化合物26) 在密閉試管中，將200mg(0.4mmol)化合物25和0.28ml(2.8mmol,7當(dāng)量)苯基肼溶解于5ml無水乙醇中。在90℃將此反應(yīng)混合物加熱18小時。冷卻后，減壓蒸發(fā)掉乙醇。在二氯甲烷中溶解此殘余物，然后用碳酸氫鈉溶液洗滌兩次。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。在甲醇中溶解此殘余物，在其中沉淀出最終產(chǎn)物。通過過濾分離此產(chǎn)物(甲醇洗滌)得到102mg(60％)化合物26。
·m.D.148-149℃(甲醇洗滌)·IR(KBr)3340,1602,1599cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d3.58(s,3H,CH3),3.85(s,3H,OCH3),3.86(s,3H,OCH3),3.88(s,3H,OCH3),6.04(s,1H,HAr),6.14(s,1H,HAr),6.48(slarge,1H,NH),6.56-6.67(m,3H,HAr),6.94(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.11(t,2H,J=7.7Hz,HAr),7.28(s,1H,HAr),7.28-7.34(m,2H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d33.3,55.4(2),55.6,89.6(2),111.6,113.8(2),117.8,125.9,128.3,128.9(3),129.5(2),130.5,146.2,157.2,159.2(2),162.3.
·MS(離子噴霧)m/z416(M+1)+·元素分析C25H25N3O3的理論值C,72.27；H,6.06；N,10.11。實測值C,72.01；H,5.86；N,10.02。
實施例24:5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-1-甲基-1,2-二氫-2-喹啉酮-2-(2-吡啶基)腙(化合物27) 在密閉試管中，將150mg(0.31mmol)化合物25和237mg(2.2mmol,7當(dāng)量)2-肼基吡啶溶解于5ml無水乙醇中。在90℃將此反應(yīng)混合物加熱18小時。冷卻后，減壓蒸發(fā)掉乙醇。在二氯甲烷中溶解此殘余物，然后用碳酸氫鈉溶液洗滌兩次。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。在甲醇中溶解此殘余物，在其中沉淀出最終產(chǎn)物。過濾此產(chǎn)物(甲醇洗滌)得到75mg(58％)橙色化合物27。
·m.p.182-183℃(甲醇洗滌)·IR(KBr)3353,1628,1593cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d3.61(s,3H,NCH3),3.87(s,6H,OCH3),3.90(s,3H,OCH3),6.07(s,1H,HAr),6.17(s,1H,HAr),6.51-6.55(m,1H,Hpyr),6.94-7.01(m,3H,HAr+Hpyr),7.14(slarge,1H,NH),7.32-7.36(m,3H,HAr)7.48(t,1H,J=7.3Hz,Hpyr),7.91(d,1H,J=4.3Hz,Hpyr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d33.2,55.3,55.4,55.6,89.7(2),104.7,105.7,113.4,114.1(2),122.9,129.0,129.2(2),130.1,137.5,140.7,143.7,147.8,157.3,157.4,159.2,162.4.
·MS(離子噴霧)m/z 417(M+1)+·元素分析C24H24N4O3的理論值C,69.21；H,5.81；N,13.45。實測值C,69.50；H,6.04；N,13.28。
實施例25a)N-(2-甲氧基苯基)-2-(4-甲氧基苯基)乙酰胺(化合物30) 在氮?dú)夥障拢?℃將0.46ml(4.1mmol)鄰甲氧基苯胺在甲苯(7ml)中稀釋。向此反應(yīng)介質(zhì)中滴加4-甲氧基苯基乙酰氯(0.63ml,4.1mmol)的5ml甲苯溶液。室溫下將此反應(yīng)混合物攪拌1小時，并用冷碳酸氫鈉溶液水解此反應(yīng)介質(zhì)。將此兩相系統(tǒng)劇烈攪拌30分鐘，然后收集有機(jī)相。用乙酸乙酯萃取水相(兩次)。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將所得殘余物在石油醚中溶解，這一操作引起所需產(chǎn)物沉淀。過濾收集如此形成的結(jié)晶得到1.0g(91％)化合物30。
·m.p.47-48℃(甲苯)·IR(KBr)n3375,1667,1597cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d3.68(s,2H,CH2),3.72(s,3H,OCH3),3.82(s,3H,OCH3),6.79(dd1H,J=1.5,8.0Hz,HAr),6.89-7.03(m,4H,HAr),7.25(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.79(slarge,1H,NH),8.33(dd,1H,J=1.5,8.0Hz,HAr).·13CRMN(62.90MHz,CDCl3):d44.2,55.3,55.7,109.9,114.4(2),119.5,121.0,123.6,126.6,127.6,130.7(2),147.8,158.9,169.3.
·MS(離子噴霧)m/z272(M+1)+b)8-甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物31) 在氮?dú)夥障拢?30℃下，將0.31ml(4.Ommol,1.5當(dāng)量)N,N-二甲基甲酰胺滴加到1.75ml(19mmol,7.5當(dāng)量)POCl3中。在-30℃將該反應(yīng)介質(zhì)攪拌15分鐘。然后加入723mg酰胺30(2.7mmol)。攪拌下，將此反應(yīng)混合物升溫至室溫，然后在75℃下將此反應(yīng)加熱1.5小時。在反應(yīng)完畢時，將此溶液倒入碎冰中，用30％氨水溶液中和，然后用二氯甲烷萃取。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后蒸發(fā)。將所得殘余物溶解于4.75ml冰醋酸和0.15ml水中，然后將最終溶液加熱回流3小時。蒸發(fā)掉乙酸。將此殘余物溶解于水中，用25％氫氧化鈉溶液中和，最后用二氯甲烷萃取。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將此殘余物在乙酸乙酯中溶解，這一操作引起終產(chǎn)物的沉淀。濾出這樣獲得的結(jié)晶得到75mg(10％)的化合物31。
進(jìn)行合成得到化合物31的總收率是9％?！F 148-149℃(AcOEt)·IR(KBr)n1652,1625,1606,1541cm-1·1H RMN(250MHz,DMSO-d6):d3,79(s,3H,OCH3),3.90(s,3H,OCH3),6.99(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.09-7.15(m,2H,HAr),7.29(dd,1H,J=3.2,6.0Hz,HAr),7.74(d,2H,J=8.8Hz,HAr),8.03(s,1H,HAr),10.90(slarge,1H,NH).·13C RMN(62.90MHz,DMSO-d6):d55.2,56.0,110.5,113.4(2),119.6,120.0,121.8,127.9,128.5,129.9(2),131.6,136.4,145.3,159.1,160.7.
·MS(離子噴霧)m/z282(M+1)+·元素分析C17H15NO3的理論值C,72.58；H,5.37；N,4.98。實測值C,72.50；H,5.50；N,4.83。
實施例26a)N-(2,5-甲氧基苯基)-2-(4-甲氧基苯基)乙酰胺(化合物32) 在氮?dú)夥障?，?℃將1.0g(6.5mmol)2,5-二甲氧基苯胺溶解于甲苯(7ml)中。向此反應(yīng)介質(zhì)中滴加4-甲氧基苯基乙酰氯(1.0ml,6.5mmol)的5ml甲苯溶液。室溫下將此反應(yīng)混合物攪拌1小時，并用冷碳酸氫鈉溶液水解此反應(yīng)介質(zhì)。將此兩相系統(tǒng)劇烈攪拌30分鐘，然后收集有機(jī)相。用乙酸乙酯萃取水相(兩次)。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將所得殘余物在最少量的石油醚中溶解，這一操作引起所需產(chǎn)物沉淀。在燒結(jié)漏斗上濾出形成的結(jié)晶得到1.83g(93％)化合物32。
·m.p.89-90℃(甲苯)·1H RMN(250MHz,CDCl3):d3.67(s,3H,OCH3),3.68(s,2H,CH2),3.75(s,3H,OCH3),3.81(s,3H,OCH3),6.53(dd,1H,J=3.0,9.0Hz,HAr),6.71(d,1H,J=9.0Hz,HAr),6.92(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.25(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.82(slarge,1H,NH),8.80(d,1H,J=3.0Hz,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d44.2,55.3,55.7,56.3,105.5,108.6,110.9,114.4(2),126.4,128.3,130.6(2),142.0,153.9,158.9,169.3.
·MS(離子噴霧)m/z302(M+1)+b)5,8-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物33) 在氮?dú)夥障?，?30℃下，將0.31ml(4.0mmol,1.5當(dāng)量)N,N-二甲基甲酰胺滴加到1.75ml(20mmol,7.5當(dāng)量)POCl3中。在-30℃下將此反應(yīng)介質(zhì)攪拌15分鐘，然后加入813mg酰胺32(2.7mmol)。攪拌下，將此反應(yīng)混合物升溫至室溫，然后在75℃下將此反應(yīng)加熱1.5小時。此后，將此溶液倒入碎冰中，用30％氨水溶液中和，然后用二氯甲烷萃取。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后蒸發(fā)。將所得殘余物溶解于4.75ml冰醋酸和0.15ml水中，然后將最終溶液加熱回流3小時。蒸發(fā)掉乙酸。將此殘余物溶解于水中，用25％氫氧化鈉溶液中和，再最后用二氯甲烷萃取。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將此殘余物在乙酸乙酯中溶解，這一操作引起終產(chǎn)物沉淀。濾出這樣獲得的結(jié)晶得到378mg(45％)化合物33。
進(jìn)行化學(xué)合成得到化合物33的總收率是42％。
·PF 186-187℃(AcOEt)·IR(KBr)n1639,1571,1515cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d3.85(s,3H,OCH3),3.90(s,3H,OCH3),3.92(s,3H,OCH3),6.49(d,1H,J=8.7Hz,HAr),6.84(d,1H,J=8.7Hz,HAr),6.97(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.74(d,J=8.8Hz,HAr),8.19(s,1H,HAr),9.25(slarge,1H,NH).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d55.2,55.8,56.2,101.1,109.7,111.4,113.6(2),128.7,128.8,130.0(2),131.4,131.7,139.4,149.8,159.5,161.3.
·MS(離子噴霧)m/z 312(M+1)+·元素分析C18H17NO4的理論值C,69.44；H,5.50；N,4.50。實測值C,69.71；H,5.59；N,4.70。
實施例27:5,7-二甲氧基-3-苯基-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物34)a)N-(3,5-二甲氧基苯基)-2-苯基乙酰胺(化合物35) 在氮?dú)夥障?，?℃，將1.0g(6.5mmol)3,5-二甲氧基苯胺溶解于甲苯(14ml)中。向此介質(zhì)中滴加苯乙?；?0.86ml,6.5mmol)的10ml甲苯溶液。室溫下將此反應(yīng)混合物攪拌1小時，然后用冷碳酸氫鈉溶液水解此反應(yīng)介質(zhì)。將此兩相系統(tǒng)劇烈攪拌30分鐘，然后收集有機(jī)相。將水相用乙酸乙酯萃取(兩次)。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后蒸發(fā)。將所得殘余物從甲苯中結(jié)晶得到1.55g(87％)化合物35。
·m.p.109-111℃(甲苯)·IR(KBr)n3286,1657,1616cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d3.70(s,2H,CH2),3.74(s,6H,OCH3),6.21(t,1H,J=2.2Hz,HAr),6.66(d,2H,J=2.2Hz,HAr),7.09(slarge,1H,NH),7.30-7.40(m,5H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d44.9,55.4(2),96.8,97.9(2),127.7,129.2(2),129.5(2),134.3,139.4,161.0(2),169.1.
·SM(ionspray):272(M+1)+b)2-氯-5,7-二甲氧基-3-苯基-1,2-二氫喹啉(化合物36) 在氮?dú)夥障?，?30℃，將0.64ml(8.3mmol,1.5當(dāng)量)N,N-二甲基甲酰胺滴加到3.8ml(41.0mmol,7.5當(dāng)量)POCl3中。將該反應(yīng)介質(zhì)在-30℃下攪拌15分鐘。然后加入1.5g酰胺35(5.5mmol)。攪拌下將此反應(yīng)混合物升溫至室溫，然后將此反應(yīng)在75℃下加熱2.5小時。反應(yīng)完畢時，將此溶液倒入碎冰中，用30％氨水溶液中和，然后用二氯甲烷萃取。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后蒸發(fā)。將所得殘余物在硅膠柱上經(jīng)色譜純化(洗脫劑3/7乙酸乙酯/石油醚)得到800mg(49％)化合物36。
·PF 148-150℃·1H RMN(250MHz,CDCl3):d3.93(s,6H,OCH3),6.51(d,1H,J=2.2Hz,HAr),6.97(d,1H,J=2.2Hz,HAr),7.40-7.54(m,5H,HAr),8.36(s,1H,HAr).·13C RMN(62.9MHz,CDCl3):d55.6,55.8,98.6,98.8,115.6,127.9,128.1(2),129.7(2),131.2,133.9,138.1,149.2,150.2,156.1,162.3.
·MS(離子噴霧)m/z301(M+1)+,303(M+1)+c)5,7-二甲氧基-3-苯基-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物34) 在氮?dú)夥障?，?.52g(9.9mmol)3,5-二甲氧基苯胺和2.30g(12mmol,1.2當(dāng)量)α-甲?；交宜嵋阴ピ趫A底燒瓶中混合。室溫下將此介質(zhì)攪拌1小時。加入由4.56g(0.03mol)五氧化二磷、10.9ml(0.17mol)六甲基二硅氧烷和50ml 1,2-二氯乙烷新制備的三甲基甲硅烷基縮聚磷酸酯(PPSE)。在100℃下將最終混合物維持2小時。停止加熱并向此反應(yīng)混合物中加入冰。然后通過加入飽和碳酸氫鈉溶液中和此混合物(分批加入，放熱反應(yīng))。將此產(chǎn)物用二氯甲烷(大量使用)萃取。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。在乙酸乙酯中溶解此殘余物，這一操作引起所需化合物沉淀。通過燒結(jié)漏斗過濾分離最終產(chǎn)物。將濾液部分濃縮后，再次出現(xiàn)終產(chǎn)物沉淀。再次通過過濾分離此固體，此操作重復(fù)幾次。得到化合物34(444mg)，收率16％。
·PF 257-258℃(AcOEt)·IR(KBr)n1668,1631,1569,1514cm-1·1H RMN(250MHz,DMSO-d6):d3.81(s,3H,OCH3),3.89(s,3H,OCH3),6.36(d,1H,J=1.8Hz,HAr),6.45(d,1H,J=1.8Hz,HAr),7.28-7.42(m,3H,HAr),7.69(d,2H,J=7.0Hz,HAr),8.00(s,1H,HAr),11.81(slarge,1H,NH).·13C RMN(62.90MHz,DMSO-d6):d55.5,56.0,90.0,93.1,104.5,126.9,127.3,127.9(2),128.4(2),131.4,136.7,140.8,156.8,161.4,162.2.
·MS(離子噴霧)m/z282(M+1)+·元素分析C17H15NO3的理論值C,72.58；H,5.37；N,4.98。實測值C,72.29；H,5.20；N,5.10。
實施例28a)N-(2-甲氧基苯基)-2-苯基乙酰胺(化合物37)
在氮?dú)夥障?，?℃將1.37ml(0.01mmol)鄰甲氧基苯胺在甲苯(14ml)中稀釋。向此反應(yīng)介質(zhì)中滴加苯基乙酰氯(1.62ml,0.01mmol)的5ml甲苯溶液。室溫下將此反應(yīng)混合物攪拌1小時，并用冷碳酸氫鈉溶液水解此反應(yīng)介質(zhì)。將此兩相系統(tǒng)劇烈攪拌30分鐘，然后收集有機(jī)相。用乙酸乙酯萃取水相(兩次)。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將所得殘余物在最少量甲苯中溶解，這一操作引起終產(chǎn)物沉淀。通過燒結(jié)漏斗過濾后，分離出2.7g(92％)化合物37。
m.p.80-81℃(甲苯)[m.p.85℃；C.Yamagami等，Chem.Pharm.Bull.1984,32,5003-5009]·IF(KBr)n3287,1652,1598cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3): d3.72(s,3H,CH3),3.76(s,2H,CH2),6.81(dd,1H,J=8.0,1.8Hz,HAr),6.91-7.05(m,2H,HAr),7.21-7.37(m,4H,HAr),7.80(slarge,1H,NH),8.35(dd,1H,J=8.0,1.8Hz,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d45.2,55.7,109.9,119.5,121.1,123.7,127.4,127.6,129.0(2),129.6(2),134.6,147.8,168.8.
·MS(離子噴霧)m/z242(M+1)+b)8-甲氧基-3-苯基-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物38) 在氮?dú)夥障?，?30℃下，將1.3ml(1.68mmol,1.5當(dāng)量)N,N-二甲基甲酰胺滴加到7.3ml(78mmol,7當(dāng)量)POCl3中。在-30℃將該反應(yīng)介質(zhì)攪拌15分鐘。然后加入2.7g酰胺37(0.01mmol)。攪拌下，將此反應(yīng)混合物升溫至室溫，然后在75℃下將此反應(yīng)加熱1.5小時。在反應(yīng)完畢時，將此溶液倒入碎冰中，用30％氨水溶液中和，然后用二氯甲烷萃取。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后蒸發(fā)。將此殘余物在硅膠柱上通過色譜純化(3/7乙酸乙酯/石油醚)得到650mg(21％)氯代衍生物。將此衍生物溶解于3.8ml冰醋酸和0.12ml水中后，然后將最終溶液加熱回流3小時。蒸發(fā)掉乙酸。將此殘余物溶解于水中，用25％氫氧化鈉溶液中和，最后用二氯甲烷萃取。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將此殘余物在乙酸乙酯中溶解，這一操作引起終產(chǎn)物結(jié)晶。濾出這樣獲得的結(jié)晶得到237mg(40％)化合物38。
進(jìn)行合成得到化合物38的總收率是8％。
·PF 188-189℃(AcOEt)·IR(KBr)n1646,1607,1569cm-1·1H RMN(250MHz,DMSO-d6):d3.92(s,3H,OCH3),7.13-7.16(m,2H,HAr),7.30-7.46(m,4H,HAr),7.74-7.77(m,2H,HAr),8.09(s,1H,HAr),10.98(slarge,1H,NH).·13C RMN(62.90MHz,DMSO-d6):d:56.5,111.3,120.3,120.4,122.4,128.3(2),128.4,128.7,129.2(2),132.6,136.7,138.2,145.9,161.1.
·MS(離子噴霧)m/z252(M+1)+·元素分析C16H13NO2的理論值C,76.48；H,5.21；N,5.57。實測值C,76.23；H,5.14；N,5.70。
實施例29:5,7-乙酰氧基-3-(4-乙酰氧基苯基)-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物39) 在0℃，氮?dú)夥障拢瑢?00mg(0.71mmol)化合物9(CRL8321)溶解于醋酸酐和吡啶(8ml,v/v)。將此反應(yīng)混合物室溫下攪拌18小時。通過加入水(10ml)水解此反應(yīng)介質(zhì)，然后用二氯甲烷萃取(兩次)。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后蒸發(fā)。將所得殘余物在硅膠柱上通過色譜純化(1/9乙酸乙酯/二氯甲烷)得到220mg(76％)化合物39。
·m.p.206-207℃(乙酸乙酯)·IR(KBr):n1769,1748,1638,1598,1576,1508cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d2.31(s,3H,CH3),2.33(s,3H,CH3),2.40(s,3H,CH3),3.72(s,3H,NCH3),6.92(d,1H,J=2.0Hz,HAr),7.03(d,1H,J=2.0Hz,HAr),7.14(d,2H,J=8.5Hz,HAr),7.67(d,2H,J=8.5Hz,HAr),7.78(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d20.8,21.0,21.2,30.5,105.2,110.2,111.8,121.4(2),129.7,130.3(2),131.5,134.2,141.0,148.8,150.7,151.9,161.2,168.6,168.8,169.6.
·MS(離子噴霧)m/z410(M++1)·元素分析C22H19NO7的理論值C,64.54；H,4.68；N,3.42。實測值C,64.83；H,4.85；N,3.57。
實施例30:3-[5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氫-1-喹啉基]丁腈(化合物40) 在氮?dú)夥障?，?00mg(1.28mmol)化合物1(CRL8246)溶解于10ml無水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中。在0℃下，向此反應(yīng)溶液中分批加入預(yù)先經(jīng)過石油醚洗滌的47mg(1.92mmol,1.5當(dāng)量)氫化鈉(放熱反應(yīng))。向此介質(zhì)中加入4-氯丁腈(0.23ml,2.57mmol,2當(dāng)量)和碘化鈉(20mg)。將此反應(yīng)在90℃下加熱3小時。冷卻后，并蒸發(fā)DMF，向此殘余物中加入水。用乙酸乙酯萃取此水溶液(兩次)。將有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將所得殘余物在硅膠柱上進(jìn)行色譜純化(9/1二氯甲烷/乙酸乙酯)得到151mg(31％)化合物40a和161mg(33％)衍生物40。
化合物40·PF 157-158℃(AcOEt)·IR(KBr)n1639,1609,1597,1575,1517cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d；2.10-2.21(m,2H,CH2),2.52(t,2H,J=7.2Hz,CH2CN),3.83(s,3H,OCH3),3.92(s,3H,OCH3),3.93(s,3H,OCH3),4.43(t,2H,J=7.2Hz,NCH2),6.31(d,1H,J=2.2Hz,HAr),6.42(d,1H,J=2.2Hz,HAr),6.94(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.66(d,2H,J=8.8Hz,HAr),8.15(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d15.3,23.6,41.8,55.4,55.9,56.0,89.6,93.1,106.4,113.6(2),119.5,126.7,129.6,130.1(2),130.8,140.7,157.9,159.3,161.2,162.8.
·MS(離子噴霧)m/z379(M++1)
·元素分析C22H22N2O4的理論值C,69.83；H,5.86；N,7.40。實測值C,69.61；H,5.97；N,7.32。
2-([5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-喹啉基]氧基)丁腈(化合物40a) 化合物40a)·PF 89-90℃(AcOEt)·IR(KBr)n1624,1607,1582,1515cm-1·1HRMN(250MHz,CDCl3):d2.12-2.22(m,2H,CH2),2.50(t,2H,J=7.5Hz,CH2),3.87(s,3H,OCH3),3.94(s,6H,OCH3),4.61(t,2H,J=7.5Hz,CH2),6.40(d,1H,J=2.2Hz,HAr),6.81(d,1H,J=2.2Hz,HAr),6.97(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.53(d,2H,J=8.8Hz,HAr),8.27(s,1H,HAr).·13C RMN(62.9MHz,CDCl3):d14.6,25.4,55.4,55.7,55.8,63.6,96.2,98.6,113.1,113.7(2),119.5,122.0,129.5,130.5(2),132.8,147.9,156.4,159.1,159.7,161.6.
·MS(離子噴霧)m/z 379(M++1)·元素分析C22H22N2O4的理論值C,69.83；H,5.86；N,7.40。實測值C,69.99；H,5.72；N,7.60。
實施例31a)N-(3,5-二甲氧基苯基)-2-(4-芐氧基苯基)乙酰胺(化合物41) 在氮?dú)夥障?，?℃將238mg(1.6mmol)3,5-二甲氧基苯胺溶解于甲苯(7ml)中。向此介質(zhì)中滴加4-芐基苯基乙酰氯(0.5ml,1.7mmol)的5ml甲苯溶液。室溫下將此反應(yīng)混合物攪拌2小時，并用冷碳酸氫鈉溶液水解此反應(yīng)介質(zhì)。將此兩相系統(tǒng)劇烈攪拌30分鐘，然后收集有機(jī)相。用乙酸乙酯萃取水相(兩次)。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后蒸發(fā)。將所得殘余物在硅膠柱上經(jīng)色譜純化(4/6乙酸乙酯/石油醚)得到300mg(81％)化合物41。
·PF 122-123℃(AcOEt/EP)·IR(KBr)n291,1659,1610,1595,1513cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d3.66(s,2H,CH2),3.74(s,3H,OCH3),3.75(s,3H,OCH3),5.08(s,2H,CH2),6.21(t,1H,J=2.2Hz,HAr),6.65-6.66(m,2H,J=2.2Hz,HAr),7.00(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.08(s,1H,NH),7.24(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.33--7.46(m,5H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d44.2,55.5(2),70.2,96.9,98.0(2),115.7(2),126.6,127.6(2),128.2,128.8(2),130.8(2),136.9,139.6,158.4,161.1(2),169.7.
·MS(離子噴霧)378(M++1)·元素分析C23H23NO4的理論值C,73.19；H,6.14；N,3.71。實測值C,72.87；H,5.97；N,3.85。
b)5,7-二甲氧基-3-(4-芐氧基苯基)-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物42) 在氮?dú)夥?，?30℃下，將0.31ml(4.0mmol,1.5當(dāng)量)N,N-二甲基甲酰胺滴加到1.75ml(19mmol,7.5當(dāng)量)POCl3中。在-30℃下將此反應(yīng)介質(zhì)攪拌15分鐘，然后加入1.02g酰胺41(2.7mmol)。攪拌下，將此反應(yīng)混合物升溫至室溫，然后在75℃下將此反應(yīng)加熱1.5小時。反應(yīng)完畢時，將此溶液倒入碎冰中，用30％氨水溶液中和，然后用二氯甲烷萃取。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后蒸發(fā)。將所得殘余物溶解于4.75ml冰醋酸和0.15ml水中，然后將最終溶液加熱回流3小時。蒸發(fā)掉乙酸。將此殘余物溶解于水中，用25％氫氧化鈉溶液中和，最后用二氯甲烷萃取。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將此殘余物在乙酸乙酯中溶解，這一操作引起終產(chǎn)物沉淀。濾出這樣獲得的結(jié)晶得到200mg(20％)化合物42?！F 234-235℃(AcOEt)·IR(KBr):n1629,1608,1569,1515cm-1·1H RMN(250MHz,DMSO-d6):d3.81(s,3H,OCH3),3.90(s,3H,OCH3),5.15(s,2H,CH2),6.37(s,1H,HAr),6.45(s,1H,HAr),7.04(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.31-7.49(m,5H,HAr),7.69(d,2H,J=7.5Hz,HAr),7.97(s,1H,HAr),11.76(slarge,1H,NH).·13C RMN(62.90MHz,DMSO-d6):d55.4,55.9,69.2,90.0,93.0,104.6,114.3(2),126.4,127.6(2),127.8,128.4(2)129.2,129.6(2),130.2,137.1,140.5,156.6,157.7,161.5,161.9.
·MS(離子噴霧)m/z388(M++1)·元素分析C24H21NO4的理論值C,74.40；H,5.46；N,3.62。實測值C,74.26；H,5.67；N,3.52。
實施例32a)N-(4-甲氧基苯基)-2-苯基乙酰胺(化合物43) 在氮?dú)夥障?，?℃將1.5g(12.0mmol)對甲氧基苯胺溶解于甲苯(7ml)中。向此介質(zhì)中滴加苯基乙酰氯(1.61ml,12.2mmol)的20ml甲苯溶液。室溫下將此反應(yīng)混合物攪拌2小時，并用冷碳酸氫鈉溶液水解此反應(yīng)介質(zhì)。將此兩相系統(tǒng)劇烈攪拌30分鐘，然后收集有機(jī)相。用乙酸乙酯萃取水相(兩次)。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后蒸發(fā)。將所得殘余物在硅膠柱上經(jīng)色譜純化(3/7乙酸乙酯/石油醚)得到2.6g(89％)化合物43?！F 118-119℃(AcOEt/EP)·IR(KBr):n3290,1650,1603,1545,1513cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d3.72(s,2H,CH2),3.77(s,3H,OCH3),6.81(d,2H,J=9.0Hz,HAr),7.00(larges,1H,NH),7.28-7.43(m,7H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):dδ.44.8,55.6,114.2(2),121.9(2),127.7,129.3(2),129.7(2),130.8,134.7,156.7,169.1.
·MS(離子噴霧)242(M++1)·元素分析C15H15NO2的理論值C,74.67；H,6.27；N,5.80。實測值C,74.79；H,6.14；N,5.95。
b)6-甲氧基-3-苯基-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物44)
在氮?dú)夥障拢?30℃下，將0.96ml(12.4mmol,1.5當(dāng)量)N,N-二甲基甲酰胺滴加到5.4ml(58mmol,7.5當(dāng)量)POCl3中。在-30℃下將此反應(yīng)介質(zhì)攪拌15分鐘，然后加入2.0g酰胺43(8.3mmol)。攪拌下，將此反應(yīng)混合物升溫至室溫，然后在75℃下將此反應(yīng)加熱1.5小時。反應(yīng)完畢時，將此溶液倒入碎冰中，用30％氨水溶液中和，然后用二氯甲烷萃取。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后蒸發(fā)。將所得殘余物溶解于12.2ml冰醋酸和0.4ml水中，然后將最終溶液加熱回流3小時。蒸發(fā)掉乙酸。將此殘余物溶解于水中，用25％氫氧化鈉溶液中和，再最后用二氯甲烷萃取。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將此殘余物在乙酸乙酯中溶解，這一操作引起終產(chǎn)物的沉淀。濾出這樣獲得的結(jié)晶得到585mg(28％)化合物44?！F 243-244℃(AcOEt)·IR(KBr)n1645,1618,1569,1503cm-1·1HRMN(250MHz,DMSO-d6):d3.80(s,3H,OCH3),7.16(dd,1H,J=2.5,8.9Hz,HAr),7.28(d,1H,J=8.9Hz,HAr),7.29(d,1H,J=2.5Hz,HAr),7.34-7.47(m,3H,HAr),7.76(d,2H,J=6.8Hz,HAr),8.06(s,1H,HAr),11.85(slarge,1H,NH).·13C RMN(62.90MHz,DMSO-d6):d55.4,109.4,116.0,119.5,120.1,127.8,127.9(2),128.7(2),131.9,132.9,136.4,137.2,154.2,160.6.
·MS(離子噴霧)m/z 252(M++1)·元素分析C16H13NO2的理論值C,76.48；H,5.21；N,5.57。實測值C,76.16；H,5.11；N,5.66。
實施例33:5,7-二甲氧基-3-(4-三氟甲磺酰基苯基)-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物45) 在0℃，氮?dú)夥障?，?70mg(0.55mmol)化合物8溶解于三氟甲磺酸酐和吡啶(8ml,v/v)。將此反應(yīng)混合物室溫下攪拌2小時。通過加入水(10ml)水解此反應(yīng)介質(zhì)，然后用二氯甲烷萃取(兩次)。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后蒸發(fā)。將所得殘余物在硅膠柱上通過色譜純化(1/9乙酸乙酯/二氯甲烷)得到194mg(80％)化合物45。
·PF 144-145℃(AcOEt)·IR(KBr):n1646,1618,1602,1504cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d3.75(s,3H,NCH3),3.94(s,6H,CH3),6.32(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.39(d,1H,J=2.0Hz,HAr),7.30(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.82(d,2H,J=8.8Hz,HAr),8.19(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d30.5,55.8,56.0,90.4,93.0,106.0,121.0(2),125.3,130.9(3),132.1,138.1,148.9,158.0,161.8,163.2.
·MS(離子噴霧)m/z 444(M++1)實施例34:5,7-二甲氧基-3-(4-乙?；交?-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物46) 在0℃，氮?dú)夥障拢瑢?00mg(0.64mmol)化合物8溶解于醋酸酐和吡啶(8ml,v/v)。將此反應(yīng)混合物室溫下攪拌18小時。通過加入水(10ml)水解此反應(yīng)介質(zhì)，然后用二氯甲烷萃取(兩次)。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后蒸發(fā)。將所得殘余物在硅膠柱上通過色譜純化(1/9乙酸乙酯/二氯甲烷)得到165mg(73％)化合物46。·PF 148-149℃(AcOEt/EP)·IR(KBr):n1751,1639,1601,1508cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d2.31(s,3H,CH3),3.72(s,3H,NCH3),3.90(s,6H,CH3),6.28(d,1H,J=2.0Hz,HAr),6.34(d,1H,J=2.0Hz,HAr),7.13(d,2H,J=8.8Hz,HAr),7.75(d,2H,J=8.8Hz,HAr),8.15(s,1H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d21.3,30.4,55.7,55.9,90.3,92.7,106.0,121.1(2),126.3,130.1(3),131.4,142.1,150.1,157.8,162.0,162.7,169.6.
·MS(離子噴霧)m/z354(M++1)·元素分析C20H19NO5的理論值C,67.98；H,5.42；N,3.96。實測值C,68.23；H,5.56；N,3.79。
實施例35a)N-(4-甲基苯基)-2-苯基乙酰胺(化合物47) 在氮?dú)夥障拢?℃將1.0g(9.3mmol)4-甲基苯胺溶解于甲苯(10ml)中。向此介質(zhì)中滴加苯基乙酰氯(1.25ml,9.4mmol)的20ml甲苯溶液。室溫下將此反應(yīng)混合物攪拌2小時，然后用冷碳酸氫鈉溶液水解此反應(yīng)介質(zhì)。將此兩相系統(tǒng)劇烈攪拌30分鐘，然后收集有機(jī)相。用乙酸乙酯萃取水相(兩次)。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后蒸發(fā)。將所得殘余物在硅膠柱上經(jīng)色譜純化(3/7乙酸乙酯/石油醚)得到1.9g(92％)化合物47?！F 119-120℃(AcOEt)·IR(KBr)n3310,1657,1604,1536,1514cm-1·1H RMN(250MHz,CDCl3):d2.28(s,3H,CH3),3.70(s,2H,CH2),7.06(d,1H,J=8.5Hz,HAr),7.25-7.38(m,9H,HAr).·13C RMN(62.90MHz,CDCl3):d21.0,44.9,120.1(2),127.7,129.3(2),129.5(2),129.6(2),134.2,134.7,135.2,169.2.
·MS(離子噴霧)226(M++1)·元素分析C15H15NO的理論值C,79.97；H,6.71；N,6.22。實測值C,80.23；H,6.87；N,6.11。
b)6-甲基-3-苯基-1,2-二氫-2-喹啉酮(化合物48) 在氮?dú)夥障?，?30℃下，將0.41ml(5.3mmol,1.5當(dāng)量)N,N-二甲基甲酰胺滴加到3.3ml(25mmol,7當(dāng)量)POCl3中。在-30℃下將此反應(yīng)介質(zhì)攪拌15分鐘，然后加入800mg酰胺47(3.5mmol)。攪拌下，將此反應(yīng)混合物升溫至室溫，然后在75℃下將此反應(yīng)加熱1.5小時。反應(yīng)完畢時，將此溶液倒入碎冰中，用30％氨水溶液中和，然后用二氯甲烷萃取。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后蒸發(fā)。將所得殘余物溶解于5.4ml冰醋酸和0.2ml水中，然后將最終溶液加熱回流3小時。蒸發(fā)掉乙酸。將此殘余物溶解于水中，用25％氫氧化鈉溶液中和，最后用二氯甲烷萃取。將此有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后減壓蒸發(fā)。將此殘余物在乙酸乙酯中溶解，這一操作引起終產(chǎn)物沉淀。濾出這樣獲得的結(jié)晶得到80mg(10％)化合物48。
·PF 212-213℃(AcOEt)·IR(KBr):n1657,1570cm-1·1H RMN(250MHz,DMSO-d6):d2.35(s,3H,CH3),7.25(d,1H,J=8.5Hz,HAr),7.33-7.48(m,5H,HAr),7.51(slarge,1H,HAr),7.76(d,2H,J=8.9Hz,HAr),8.02(s,1H,HAr),11.87(slarge,1H,NH).·13C RMN(62.90MHz,DMSO-d6):d20.5,114.6,119.5,127.6,127.8,127.9(2),128.7(2),130.8,131.5(2),136.4(2),137.4,160.9.
·MS(離子噴霧)m/z236(M++1)·元素分析C16H13NO的理論值C,81.68；H,5.57；N,5.95。實測值C,81.78；H,5.39；N,6.11。
下面給出顯示單獨(dú)存在或與細(xì)胞毒試劑結(jié)合的式Ⅰ和Ⅰa化合物的性質(zhì)的藥理實驗結(jié)果。
1-與克隆形成細(xì)胞產(chǎn)生(克隆實驗)的相互作用(刺激或抑制增殖)本實驗由Hamburger等(Science,1977；197,461-463)和Salmon等(New England J.Med.,298,1321-1327)描述。如果細(xì)胞具有增殖并產(chǎn)生細(xì)胞集落的能力，則該細(xì)胞被認(rèn)為是促克隆形成的。“人腫瘤干細(xì)胞”是構(gòu)成已知腫瘤的瘤細(xì)胞的來源。這些腫瘤干細(xì)胞與在原發(fā)性腫瘤切除術(shù)后可能觀察到的復(fù)發(fā)有關(guān)，還與轉(zhuǎn)移瘤的形成有關(guān)。在腫瘤或腫瘤細(xì)胞系中，這些克隆形成干細(xì)胞不同于腫瘤的其它細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞系，不同之處在于在不存在任何固體載體的情況下，它們保持了增殖能力。
在本實驗中，腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)于瓊脂組成的半固體載體上。只有不需要固體載體的細(xì)胞(即稱為“固著獨(dú)立細(xì)胞”的高度促腫瘤形成細(xì)胞，見M.I.Dawson等，Cancer Res.1995；55；4446-4451；根據(jù)“克隆性生長”還稱為克隆形成細(xì)胞)才能在這種以瓊脂為基質(zhì)的載體上生長。具體地講，在這樣的培養(yǎng)基中，正常細(xì)胞-其以“固著方式”生長(按照M.I.Dawson的術(shù)語為“固著依賴細(xì)胞”)-如成纖維細(xì)胞，未能存活。在此載體上培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞集落中，正是這些克隆形成細(xì)胞(伴有無限次數(shù)的細(xì)胞分裂，并且其增殖被M.I.Dawson稱為“固著獨(dú)立性[克隆性]生長)才能夠生長。在腫瘤或細(xì)胞系中這些克隆形成細(xì)胞的百分率為0.1％至0.001％。非克隆形成細(xì)胞(伴有有限次數(shù)的細(xì)胞分裂)在此實驗中不生長，因為它們需要賴以生長的固體載體，其必須以“固著方式”發(fā)生(“固著依賴性[固著]生長”，見M.I.Dawson等，Cancer Res.1995；55:4446-4451)。
檢測式(Ⅰ)和(Ⅰa)化合物對通過在稱為“軟瓊脂”的半液體培養(yǎng)基上培養(yǎng)如哺乳動物腫瘤細(xì)胞系MCF7和MXT及結(jié)直腸細(xì)胞系HT-29獲得的細(xì)胞集群的生長產(chǎn)生的影響。在這樣的培養(yǎng)基中，只有被M.I.Dawson稱為“固著獨(dú)立性(克隆性)細(xì)胞”的克隆形成細(xì)胞才存活并生長。這些細(xì)胞以“非固著”形式生長的見證是腫瘤發(fā)生程度。抑制其中已有更多克隆形成細(xì)胞成長的腫瘤體積增大就成為增強(qiáng)的細(xì)胞毒性的證據(jù)。
相反，該實驗也可顯示某種化合物能抑制克隆形成細(xì)胞的生成/增殖，因此使該腫瘤幾乎不能生長并因此降低腫瘤細(xì)胞的數(shù)量。
被研究的腫瘤細(xì)胞系培養(yǎng)于25平方厘米的Falcon皿培養(yǎng)基中。然后將它們胰蛋白酶化并將細(xì)胞彼此之間完全分離。用錐蟲藍(lán)染色后檢測存活細(xì)胞的百分率。在0.3％瓊脂溶液中制備濃度為5×104至15×104細(xì)胞/毫升(根據(jù)細(xì)胞類型)的細(xì)胞懸浮液。接著，將200μl此懸浮液接種于直徑為35mm的Petri培養(yǎng)皿中，其中放置3ml由0.5％瓊脂溶液組成的基礎(chǔ)層。將200μl細(xì)胞懸浮液依次用1.8ml由0.3％瓊脂溶液組成的上層覆蓋。然后，將這些培養(yǎng)皿置于37℃、具有5％二氧化碳且濕度為70％的孵育箱中直到進(jìn)行處理時為止。在接種后約1至2小時進(jìn)行處理。以比所需濃度高100倍的濃度來制備被測化合物，并將50μl這些處理溶液置于相應(yīng)培養(yǎng)皿中的上層瓊脂上。在本實驗中，被測產(chǎn)物的最終濃度為10-5、10-7和10-9M。然后，將這些培養(yǎng)皿在孵育箱中存放21天。在第21天，通過在上層加入100μl 1mg/mlMTT(3-(4,5-二甲基-噻唑-2-基)-2,5-二苯基溴化四唑鎓，用RPMI1640培養(yǎng)基制備)，將這些培養(yǎng)基在37℃下處理3小時。此后，每個培養(yǎng)皿中加入2ml福爾馬林將細(xì)胞集落固定。固定24小時后，將福爾馬林蒸發(fā)掉，并用倒置顯微鏡檢測染色細(xì)胞集落的數(shù)目，染色集落由代謝活性細(xì)胞組成，且其表面積大于100μm2。
每個實驗條件下測定的克隆形成細(xì)胞的克隆平均數(shù)以設(shè)為100％的對照條件下計數(shù)的克隆形成細(xì)胞的克隆平均數(shù)為基準(zhǔn)計的百分率表示。以對照條件為基準(zhǔn)計的百分?jǐn)?shù)表示的所有被測產(chǎn)物的這些數(shù)值見表Ⅰ。
表Ⅰ克隆形成實驗
-濃度以mol·l-1表示-表1中總結(jié)的結(jié)果表示平均值±平均值的標(biāo)準(zhǔn)誤差(SEM)，基于至少6組-對照條件=100％-(NS:p＞0.05；*:p＜0.05；**:p＜0.01；***:p＜0.001)。
因此，因為它們作用于腫瘤的克隆形成行為，式(Ⅰ)和(Ⅰa)的化合物·或者相對于對照條件[培養(yǎng)基中沒有添加式(Ⅰ)或(Ⅰa)化合物]增加(例如CRL 8315)克隆形成細(xì)胞的克隆平均數(shù)，于是使更多腫瘤細(xì)胞對細(xì)胞毒試劑敏感(因為這些克隆形成細(xì)胞在其增殖期對細(xì)胞毒試劑更敏感)，·或者通過直接的毒性降低(例如CRL 8283)克隆形成細(xì)胞的數(shù)目(也導(dǎo)致腫瘤退化)。
2-對非克隆形成細(xì)胞的細(xì)胞毒活性“MTT實驗”借助于MTT比色實驗評價式(Ⅰ)和(Ⅰa)化合物對非克隆形成細(xì)胞的影響。
MTT實驗的原理基于通過代謝活性存活細(xì)胞線粒體還原黃色產(chǎn)物MTT(3-(4,5-二甲基-噻唑-2-基)-2,5-二苯基溴化四唑鎓)為藍(lán)色產(chǎn)物甲。所得甲的量直接與培養(yǎng)孔中的存活細(xì)胞量成正比。甲的量由分光光度法檢測。
在37℃，在含MEM 25 MM兩性離子緩沖劑培養(yǎng)基(極限必需培養(yǎng)基)的封閉培養(yǎng)皿中將這些細(xì)胞系以單層培養(yǎng)物的形式維持。該培養(yǎng)基適于多種哺乳動物二倍體或原代細(xì)胞的生長。然后，此培養(yǎng)基再添加-5％FCS(胎牛血清)，該血清在56℃下滅活補(bǔ)體1小時，-0.6mg/ml L-谷酰胺，
-200UI/ml青霉素，-200μg/ml鏈霉素，-0.1mg/ml慶大霉素。
所用的12個人癌癥細(xì)胞系得自美國模式培養(yǎng)物保藏所(ATCC,Rockville,MD,USA)。這12個細(xì)胞系為-U-373MG(ATCC編碼HTB-17)和U-87MG(ATCC編碼HTB-14)，它們是兩個成膠質(zhì)細(xì)胞瘤，-SW1088(ATCC編碼HTB-12)，它是星形細(xì)胞瘤，-A549(ATCC編碼CCL-185)和A-427(ATCC編碼HTB-53)，它們是兩個非小細(xì)胞肺癌，-HTC-15(ATCC編碼CCL-225)和LoVo(ATCC編碼CCL-229)，它們是結(jié)直腸癌，-T-47D(ATCC編碼HTB-133)和MCF7(ATCC編碼HTB-22)，它們是兩種乳腺癌，-J82(ATCC編碼HTB-1)和T24(ATCC編碼HTB-4)，它們是兩種膀胱癌，-PC-3(ATCC編碼CRL-1435)，它是前列腺癌。
實驗將含20000至50000(根據(jù)使用細(xì)胞類型)細(xì)胞/毫升培養(yǎng)基的100μl細(xì)胞懸浮液接種于96孔平底多孔板中并在37℃下，在含5％二氧化碳和濕度為70％的氣氛中培養(yǎng)。培養(yǎng)24小時后，用含濃度為10-5至10-10M的不同被測化合物或用來溶解被測產(chǎn)物的溶劑(對照條件)的100μl新鮮培養(yǎng)基替換該培養(yǎng)基。在上述條件下，培養(yǎng)72小時后，用以1mg/ml濃度溶解于RPMI 1640中的MTT黃色溶液100μl代替此培養(yǎng)基。在37℃下再將微孔板培養(yǎng)3小時，然后以400g離心10分鐘。除去黃色MTT溶液并將細(xì)胞中形成的藍(lán)色甲結(jié)晶溶解于100μl DMSO中。然后，將此微量板搖動5分鐘。所得藍(lán)色著色的強(qiáng)度，及由在實驗結(jié)束時仍存活的細(xì)胞進(jìn)行的黃色產(chǎn)物MTT向藍(lán)色甲的轉(zhuǎn)化，通過分光光度法用Dynatech Immunoassay System儀器在波長570nm和630nm處檢測，這兩個波長分別對應(yīng)于甲的最大吸收波長和背景噪聲。用分光光度計中的軟件計算平均光密度值和標(biāo)準(zhǔn)偏差(SD)及平均標(biāo)準(zhǔn)誤差(SEM)。
作為實例，對上述12種腫瘤細(xì)胞系在濃度為10-5M時獲得的平均光密度值的結(jié)果，以相對于對照條件(設(shè)為100％)下檢測的平均光密度值的百分?jǐn)?shù)表示，見表Ⅱ。
表Ⅱa
X±Y=平均值±對照條件=100％(NS:p＞0.05；*:p＜0.05；平均標(biāo)準(zhǔn)誤差 **:p＜0.01；***:p＜0.001)
表Ⅱb
X±Y=平均值±對照條件=100％(NS:p＞0.05；*:p＜0.05；平均標(biāo)準(zhǔn)誤差 **:p＜0.01；***:p＜0.001)
看來有幾種化合物引起弱抑制，該抑制可以達(dá)到腫瘤細(xì)胞系的總細(xì)胞增殖的20-30％，且這些化合物似乎不具有任何組織特異性。
3-最大耐受量(MTD)的確定用4至6周齡的B6D2F1/Jico小鼠進(jìn)行最大耐受量的評價。以由2.5至160mg/kg漸增的劑量腹膜內(nèi)進(jìn)行這些化合物的給藥。MTD值(以mg/kg表示)由被測產(chǎn)物的一次給藥后14天的期間內(nèi)動物存活率的觀察確定。在此期間內(nèi)也監(jiān)控動物的體重變化。當(dāng)MTD值大于160mg/kg時，將MTD值視為近似于160mg/kg。
對最大耐受量(MTD)的評價結(jié)果整理于下表
表Ⅲ最大耐受量
此類產(chǎn)物未表現(xiàn)出直接毒性，并可以以高組織濃度因此可以以高劑量在體內(nèi)使用。
4-與細(xì)胞毒試劑結(jié)合的體內(nèi)抗腫瘤活性本實驗在以下模型中在存在或不存在細(xì)胞毒試劑如環(huán)磷酰胺、依托泊苷、阿霉素或長春新堿的情況下進(jìn)行-激素敏感的小鼠乳腺癌MXT(HS-MXT)，-淋巴瘤P 388。
當(dāng)檢測產(chǎn)物的MTD值時，其對小鼠乳腺癌HS-MXT和淋巴瘤P 388模型的體內(nèi)抗腫瘤活性在劑量MTD/2、MTD/4和MTD/8下表征。在與細(xì)胞毒試劑結(jié)合的治療情況下使用和研究的不同模型中該劑量表現(xiàn)出最佳抗腫瘤活性。
在以下的所有實施例中，不論是什么模型(乳腺癌HS-MXT或淋巴瘤P 388)，對照條件是9只小鼠為一組，給它們連續(xù)5周并以每周5次(周一、周二、周三、周四及周五)的頻率給藥0.2ml含有用來溶解所用式(Ⅰ)和(Ⅰa)的不同化合物的溶劑的生理鹽水。
在這些實驗中檢測下列參數(shù)ⅰ)小鼠的存活率此存活率以T/C之比的形式計算T=(被治療組中位數(shù)小鼠存活天數(shù))+[(被治療的中位數(shù)小鼠)-(先于被治療中位數(shù)小鼠死亡的小鼠數(shù)目)/(與被治療中位數(shù)小鼠同一天死亡的小鼠數(shù)目)]C=(對照組中位數(shù)小鼠存活天數(shù))+[(被治療的中位數(shù)小鼠)-(先于被治療中位數(shù)小鼠死亡的小鼠數(shù)目)/(與中位數(shù)對照小鼠同一天死亡的小鼠數(shù)目)]此比例表示被治療組中中位數(shù)小鼠平均存活時間與對照組小鼠中位數(shù)小鼠平均存活時間的比。因此，當(dāng)指數(shù)T/C超過130％時，化合物引起動物存活率顯著(P＜0.05)增加。相反，當(dāng)此T/C值小于70％時，其具有毒性作用。
ⅱ)腫瘤生長通過每周兩次(周一和周五)檢查移植HS-MXT或P 388腫瘤的區(qū)域。此區(qū)域通過腫瘤的兩個最大垂直軸數(shù)值的乘積計算。用游標(biāo)卡尺檢查這些軸的數(shù)值。
4．1．小鼠乳腺癌(HS-MXT)移植給4至6周齡的B6D2F1/JIco小鼠的激素敏感的MXT(HS-MXT)小鼠乳腺癌模型得自乳腺的輸乳管(Watson C.等，Cancer Res.1977；37:3344-48)。
采用單獨(dú)或者與細(xì)胞毒試劑結(jié)合的化合物1和20獲得實驗結(jié)果如下。
A-化合物1或CRL 8246治療1和1a化合物1單獨(dú)給藥。在移植后第7天(D7)連續(xù)4周以每周注射5次(周一、周二、周三、周四和周五)的頻率并以20mg/kg的劑量第一次注射該產(chǎn)物。
治療2單獨(dú)使用環(huán)磷酰胺(CPA)。在移植后第14天(D14)連續(xù)3周以每周3次(周一、周三和周五)的頻率并以10mg/kg的劑量進(jìn)行該產(chǎn)物的第一次注射。
治療3化合物1和環(huán)磷酰胺共同給藥。在此情況下，在移植后第7天(D7)連續(xù)4周以每周注射5次(周一、周二、周三、周四和周五)的頻率并以20mg/kg的劑量進(jìn)行化合物1的第一次注射，而在移植后第14天(D14)連續(xù)3周以每周3次(周一、周三和周五)的頻率并以10mg/kg的劑量進(jìn)行環(huán)磷酰胺的第一次注射。
治療4依托泊苷(ETO)單獨(dú)給藥。在移植后第14天(D14)連續(xù)3周以每周3次(周一、周三和周五)的頻率并以10mg/kg的劑量進(jìn)行該產(chǎn)物的第一次注射。
治療5阿霉素(DOX)單獨(dú)給藥。在移植后第14天(D14)連續(xù)3周以每周3次(周一、周三和周五)的頻率并以5mg/kg的劑量進(jìn)行該產(chǎn)物的第一次注射。
治療6化合物1和依托泊苷共同給藥。在此情況下，在移植后第7天(D7)連續(xù)4周以每周注射5次(周一、周二、周三、周四和周五)的頻率并以20mg/kg的劑量進(jìn)行化合物1的第一次注射，而在移植后第14天(D14)連續(xù)3周以每周3次(周一、周三和周五)的頻率并以10mg/kg的劑量進(jìn)行依托泊苷的第一次注射。
治療7化合物1和阿霉素共同給藥。在此情況下，在移植后第7天(D7)連續(xù)4周以每周注射5次(周一、周二、周三、周四和周五)的頻率并以20mg/kg的劑量進(jìn)行化合物1的第一次注射，而在移植后第14天(D14)連續(xù)3周以每周3次(周一、周三和周五)的頻率并以5mg/kg的劑量進(jìn)行阿霉素的第一次注射。
化合物1獲得的存活時間的結(jié)果示于表Ⅳ和Ⅴ表Ⅳ
表Ⅴ
這些結(jié)果表明化合物1與細(xì)胞毒試劑環(huán)磷酰胺、依托泊苷或阿霉素共同給藥，相對于對照組小鼠中中位數(shù)小鼠的平均存活時間而言，顯著增加了以此方式治療不同組小鼠中中位數(shù)小鼠的平均存活時間。此外，用這些共同給藥所治療小鼠的不同組中的中位數(shù)小鼠的平均存活時間的增加與單獨(dú)使用這些細(xì)胞毒試劑治療獲得的這一增加相比明顯地更長。
腫瘤生長的研究還揭示了化合物1的下列結(jié)果。下表Ⅵ表明以百分率表示的，在腫瘤移植后第31天，即化合物1給藥后第19天及環(huán)磷酰胺給藥后第8天(共同使用或不共同使用)，與對照條件比較，實施例1的不同治療1、2和3引起的HS-MXT腫瘤面積的降低(-)或增加(+)。在移植后第31天，89％對照動物(即9只動物中有8只)仍存活。
表Ⅵ
結(jié)果表明，化合物1與環(huán)磷酰胺的共同給藥引起了HS-MXT腫瘤生長的顯著降低，降低效果明顯大于單獨(dú)采用化合物1或環(huán)磷酰胺的治療效果。
B-化合物21或CRL 8256作為另一個實施例，涉及單獨(dú)使用或與依托泊苷結(jié)合使用的化合物21。
治療10化合物21單獨(dú)給藥。在移植后第7天(D7)連續(xù)5周以每周注射5次(周一、周二、周三、周四和周五)的頻率并以40mg/kg的劑量第一次注射該產(chǎn)物。
治療20依托泊苷(ETO)單獨(dú)給藥。在移植后第7天(D7)連續(xù)3周以每周3次(周一、周三和周五)的頻率并以10mg/kg的劑量進(jìn)行該產(chǎn)物的第一次注射。
治療30化合物21和依托泊苷共同給藥。在此情況下，在移植后第7天(D7)連續(xù)5周以每周注射5次(周一、周二、周三、周四和周五)的頻率并以40mg/kg的劑量進(jìn)行化合物21的第一次注射，而在移植后第7天(D7)連續(xù)3周以每周3次(周一、周三和周五)的頻率并以10mg/kg的劑量進(jìn)行依托泊苷的第一次注射。
采用化合物21獲得的存活時間結(jié)果示于表Ⅶ表Ⅶ
這些結(jié)果表明化合物21與依托泊苷共同給藥，相對于對照組小鼠中中位數(shù)小鼠的平均存活時間而言，顯著增加了以如此方式治療的組小鼠中中位數(shù)小鼠的平均存活時間。此外，通過共同給藥所治療的小鼠組中中位數(shù)小鼠的平均存活時間的增加與單獨(dú)使用此2-喹啉酮或此細(xì)胞毒試劑治療帶來的這一增加相比明顯地更長。
4．2．淋巴瘤P388在第0天(D0)，將P 388腫瘤片(得自實驗室內(nèi)維持的腫瘤庫)給4至6周齡CDF1小鼠皮下移植入右脅腹。為了使條件接近于臨床實際，我們等到移植后第5天(D5)才開始治療。其原因是，這個時期后，皮下p 388腫瘤可觸摸到。
作為實例，將采用單獨(dú)或者與長春新堿結(jié)合的化合物1(CRL8246)和20(CRL 8247)獲得的實驗結(jié)果報道如下。
治療1化合物1單獨(dú)給藥。在移植后第5天(D5)連續(xù)5周以每周注射5次(周一、周二、周三、周四和周五)的頻率并以40mg/kg的劑量第一次注射該產(chǎn)物。
治療2化合物20單獨(dú)給藥。在移植后第5天(D5)連續(xù)5周以每周注射5次(周一、周二、周三、周四和周五)的頻率并以40mg/kg的劑量第一次注射該產(chǎn)物。
治療3長春新堿(VCR)單獨(dú)給藥。在移植后第5天(D5)連續(xù)3周以每周3次(周一、周三和周五)的頻率并以0.63mg/kg的劑量進(jìn)行該產(chǎn)物的第一次注射。
治療4化合物1和長春新堿共同給藥。在此情況下，在移植后第5天(D5)連續(xù)5周以每周注射5次(周一、周二、周三、周四和周五)的頻率并以40mg/kg的劑量第一次注射化合物CRL8246，在移植后第5天(D5)連續(xù)3周以每周3次(周一、周三和周五)的頻率并以0.63mg/kg的劑量進(jìn)行長春新堿的第一次注射。
治療5化合物20和長春新堿共同給藥。在此情況下，在移植后第5天(D5)連續(xù)5周以每周注射5次(周一、周二、周三、周四和周五)的頻率并以40mg/kg的劑量第一次注射化合物CRL8247，在移植后第5天(D5)連續(xù)3周以每周3次(周一、周三和周五)的頻率并以0.63mg/kg的劑量進(jìn)行長春新堿的第一次注射。
上述治療1至5獲得的存活時間結(jié)果示于表Ⅸ
表Ⅸ
這些結(jié)果表明化合物1和20與長春新堿共同給藥，相對于對照組小鼠中中位數(shù)小鼠的平均存活時間而言，非常明顯地增加了以如此方式治療的不同組小鼠中中位數(shù)小鼠的平均存活時間。此外，通過共同給藥治療的不同小鼠組中的中位數(shù)小鼠的平均存活時間的增加與單獨(dú)使用化合物1和20或長春新堿帶來的這一增加相比明顯地更長。
在采用細(xì)胞毒試劑進(jìn)行的在單一或綜合化療方案中使用式(Ⅰ)和(Ⅰa)化合物的方法實例如下。在這些方案中，式(Ⅰ)和(Ⅰa)化合物被簡稱為“2-喹啉酮”。
A．實體瘤1/肺癌1．1．非小細(xì)胞肺癌(晚期)-在推薦方案(T.Le Chevalier等，J.Clin.Oncol.1994；12:360-367)中增加2-喹啉酮靜脈輸液
1．2．小細(xì)胞肺癌(晚期)
-在推薦方案CAV或VAC(B.J.Roth等，J.Clin.Oncol.1992；10:282-291)中增加2-喹啉酮輸液
此療程每21天重復(fù)6次。
-在推薦Pt-E方案(B.J.Roth等，J.Clin.Oncol.1992；10:282-291)中增加2-喹啉酮輸液
每個循環(huán)每隔21天重復(fù)一次且每個療程包括6個循環(huán)。
1．3．非小細(xì)胞支氣管癌，局部晚期或轉(zhuǎn)移·單獨(dú)化療
此療程可以包括此4周循環(huán)的重復(fù)。
·吉西他濱/順鉑結(jié)合
此療程包括每隔21天重復(fù)該循環(huán)。
2/乳腺癌-作為手術(shù)后乳腺癌的輔助治療的CMF方案(G.Bonnadonna等，N.Engl.J.Med.；1976；294:405-410)
每隔28天重復(fù)每個循環(huán)，且此療程包括6個循環(huán)。
-AC方案(B.Fisher等，J.Clin.Oncol.；1990；8:1483-1496)，作為輔助性治療
每隔21天重復(fù)每個循環(huán)，且此療程包括4個循環(huán)。
-轉(zhuǎn)移的乳腺癌
-在FAC方案(A.U.Buzdar等，Cancer 1981；47:2537-2542)及其不同的改變形式中，按照下列(非限制性)方案輸液2-喹啉酮
每隔3周重復(fù)每個循環(huán)直到診斷出該疾病出現(xiàn)新進(jìn)展時為止。
-CAF方案(G.Falkson等，Cancer 1985；56:219-224)
每隔28天重復(fù)每個循環(huán)直到診斷出該疾病出現(xiàn)新進(jìn)展時為止。
-CMF方案
每隔3至5周重復(fù)此循環(huán)，且每個療程包括6個循環(huán)。
-CMF-VP方案
每隔4周重復(fù)此療程。
-FEC方案
-在MMC-VBC方案(C.Brambilla等，Tumori,1989；75:141-144)中
每隔28天重復(fù)此療程直到診斷出此疾病出現(xiàn)新進(jìn)展時為止。
-在NFL方案(S.E.Jones等，J.Clin.Oncol.1991；9:1936-1739)中
此療程包括兩個循環(huán)，間隔為21天，然后需要進(jìn)行評價。
當(dāng)使用紫杉烷時，也可以結(jié)合2-喹啉酮的輸液來治療轉(zhuǎn)移的乳腺癌，例如-在可能對蒽環(huán)類具有抗藥性的伴有轉(zhuǎn)移的形式的治療中用paclitaxel(F.A.Holmes等，J.Natl Cancer Inst.1991；83:1797-1805)
每隔21天重復(fù)此循環(huán)直到診斷出此疾病出現(xiàn)新進(jìn)展時為止。
-在局部晚期或轉(zhuǎn)移性乳腺癌中，化療(包括蒽環(huán)類)后產(chǎn)生抗藥性或復(fù)發(fā)或在輔助治療期間復(fù)發(fā)的，用docetaxel
每隔21天重復(fù)此循環(huán)，每一療程包括2個循環(huán)或直到該疾病出現(xiàn)進(jìn)展時為止。
-在強(qiáng)化劑量方案中，結(jié)合自身骨髓細(xì)胞和外周血干細(xì)胞移植，在初期治療的鞏固階段，例如-CPB方案(W.P.Peters等，J.Clin.Oncol.1993；11:132-1143)，在D-1、D0和D1天進(jìn)行干細(xì)胞靜脈輸液
-CTCb方案(K.Antman等，J.Clin.Oncol.1992；10:102-110)，在D0天進(jìn)行干細(xì)胞的靜脈輸液
-CTM方案(L.E.Damon等，J.Clin.Oncol.1989；7:560-571和I.C.Henderson等，J.Cellular Biochem.1994(Suppl 18B):95)，其中在D0天進(jìn)行造血干細(xì)胞的靜脈內(nèi)輸注
3/婦科癌癥3．1．卵巢癌-為了治療特別是轉(zhuǎn)移的卵巢腫瘤ⅰ)PAC方案(G.A.Omura等，J.Clin.Oneol.1989；7:457-465)按照下列方案進(jìn)行2-喹啉酮輸液
每隔21至28天重復(fù)此循環(huán)，且此療程包括8個循環(huán)。
ⅱ)六甲蜜胺方案，按照A.Marietta等(Gynecol.Oncol.1990；36:93-96)
此療程包括兩個循環(huán)，間隔為28天。
ⅲ)Paclitaxel方案可以向W.P.McGuire等(Ann.Intern.Med.1989；111:273-279)描述的paclitaxel方案中加入2-喹啉酮
此療程包括兩個循環(huán)，間隔為28天(最后進(jìn)行評價)。
-為了治療轉(zhuǎn)移性且頑固性卵巢癌，可以在基于托泊替堪的第二方案中使用2-喹啉酮
按照A.P.Kudelka等(J.Clin.Oncol.1996；14:1552-1557)，此療程包括兩個循環(huán)，間隔為21天(最后進(jìn)行評價)。
3．2滋養(yǎng)層腫瘤-對于發(fā)病危險性低的患者，可以將2-喹啉酮與H.Takamizawa等(Semin.Surg.Oncol.1987；3:36-44)描述的方案組合使用
(MTX-DATC方案)。
3.3子宮癌-按照如下方案2-喹啉酮還可以與CAV(或VAC)方案結(jié)合
此療程包括每隔21天重復(fù)此循環(huán)。
-在FAP方案中
此療程包括每隔21或28天重復(fù)此循環(huán)。
4/睪丸癌-2-喹啉酮還可以與睪丸癌方案結(jié)合BEP方案
此療程包括3個循環(huán)，頻率為每21天一循環(huán)。
5/膀胱癌-2-喹啉酮也可以與CISCA2(也稱為PAC)方案結(jié)合使用
此循環(huán)每隔3周重復(fù)。
-MVAC方案(按照C.N.Sternberg等，J.Urol.1988；139:461-469)
此循環(huán)每隔4至5周重復(fù)，最少2個循環(huán)。
6/鼻咽癌/頭頸癌-2-喹啉酮可以與用于這些癌癥治療的綜合化療方案結(jié)合6．1鼻咽癌-ABVD方案
此療程包括1至6個循環(huán)，頻率為每4周一循環(huán)。
6．2轉(zhuǎn)移的頭頸癌-在Pt-FU方案(例如，對于咽癌)中按照DVAL研究組(NewEngl.J.M.1991；324:1685-1690)的方法
此療程包括2個循環(huán)，頻率為每3周一循環(huán)。
7/軟組織肉瘤-將2-喹啉酮引入方案如CYVADIC中-按照H.M.Pinedo等(Cancer 1984；53:1825)
此療程包括每4周重復(fù)此循環(huán)，先進(jìn)行2個循環(huán)。
8/轉(zhuǎn)移的耐激素前列腺癌-VBL-雌氮芥方案，按照G.R.Hudis等(J.Clin.Oncol.1992:10:1754-1761)
此治療循環(huán)持續(xù)6周，隨之是2周的間隔期。
9/胚細(xì)胞癌ⅰ)對于預(yù)后有利的腫瘤-Pt-E方案，按照G.J.Bosl等(J.Clin.Oncol.1988；6:1231-1238)
此療程包括4個循環(huán)，頻率為每21或28天1個循環(huán)。
ⅱ)對于轉(zhuǎn)移的腫瘤-PEB方案，按照S.D.Williams等(N.Eng.J.Med.1987；316:1435-1440)
此療程包括4個循環(huán)，頻率為每21天一個循環(huán)。
10/腎癌-轉(zhuǎn)移的腎癌2-喹啉酮可以引入到M.J.Wilkinson等(Cancer 1993；71:3601-3604)描述的方案中
此療程包括2個循環(huán)，間隔為28天。
-腎胚細(xì)胞瘤將2-喹啉酮引入DAVE方案
每3至4周一個循環(huán)。
11/消化道癌癥
11．1食道癌-可以將2-喹啉酮引入FAP方案，按照
每隔3至4周重復(fù)此循環(huán)。
11．2胃癌-在晚期和/或轉(zhuǎn)移的胃癌中-EAP方案(按照P.Preusser等，J.Clin.Oncol.1989；7:1310)
以每28天1個循環(huán)的頻率。
-FAMtx方案按照J(rèn).A.Wils等(J.Clin.Oncol.1991；89:827)
此療程先包括兩個循環(huán)，間隔28天。
-在某些患者體內(nèi)，此方案或其變化形式(用表阿霉素代替阿霉素)可以按照下列方式使用
12/結(jié)直腸癌-2-喹啉酮可以引入結(jié)直腸癌的FU-左旋咪唑輔助治療方案(按照C.G.Moertel等，N.Eng.J.Med.1990；322:352)
誘發(fā)期D1-D5后，52周內(nèi)每周重復(fù)用5-FU快速濃注治療；在5-FU快速濃注的當(dāng)天，接著在隨后的2天，以相同的頻率重復(fù)2-喹啉酮治療。
-為了治療對于5-尿嘧啶(5-FU)治療具有抗性并發(fā)生轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌-按照M.L.Rothenberg等(J.Clin.Oncol.1996；14:1128-1135):
此療程包括兩個循環(huán)，間隔42天。
13/卡波濟(jì)氏肉瘤-2-喹啉酮類可以與使用配制為脂質(zhì)體形式的蒽環(huán)類的兩種方案結(jié)合ⅰ)P.S.Gill等(J.Clin.Oncol.1995；13:996-1003)和C.A.Presant等(Lancet 1993；341:1242-1243)描述的方案
在評價作用前，此療程包括以28天為間隔的兩個重復(fù)的循環(huán)。
ⅱ)M.Harrison等(J.Clin.Oncol.1995；13:914-920)的方案
在評價作用前，此療程包括以28天為間隔的兩個重復(fù)的循環(huán)。
14/轉(zhuǎn)移性黑素瘤-2-喹啉酮還可以被加入治療轉(zhuǎn)移性惡性黑素瘤的結(jié)合方案中
-DTIC/TAM方案按照G.Cocconi等(N.Eng.J.Med.1992；327:516)，此療程包括重復(fù)的4個循環(huán)，頻率為每21天1循環(huán)，按照如下方案
此療程包括4個循環(huán)，頻率為每21天1個循環(huán)。
15/神經(jīng)內(nèi)分泌癌-2-喹啉酮可以與C.G.Moertel等(Cancer 1991；68:227)描述的方案結(jié)合-Pt-F方案
此療程包括每28天重復(fù)的兩個循環(huán)。
16/胰腺癌-晚期胰腺腺瘤2-喹啉酮可以與吉西他濱治療結(jié)合，按照M.Moore等(Proc.Am.Soc.Clin.Oncol.1995；14:473)的方案
B．血液腫瘤1/急性成人白血病1．1．急性成淋巴細(xì)胞性白血病1．1．1．Linker方案2-喹啉酮可以添加到Linker方案，即誘導(dǎo)化療和鞏固化療中(見C.A.Linker等，Blood 1987；69:1242-1248和C.A.Linker等，Blood 1991；78:2814-2822)，按照如下方案ⅰ)誘導(dǎo)化療
ⅱ)鞏固化療(方案A)
鞏固化療A包括4個連續(xù)的循環(huán)，如上所述=1,3,5和7。
ⅲ)鞏固化療(方案B和C)此方案描述如下，相應(yīng)于鞏固循環(huán)2、4、6和8(方案B)及9(方案C)，由C.A.Linker等描述方案B
方案C
1．1．2．Hoelzer方案所述產(chǎn)物可以加到此綜合化療方案的細(xì)胞毒試劑中(D.Hoelzer等，Blood 1984；64:38-47,D.Hoelzer等，Blood 1988；71:123-131)，按照如下方案ⅰ)誘導(dǎo)化療/1期
ⅱ)誘導(dǎo)化療/2期誘導(dǎo)化療的2期可以如下進(jìn)行
ⅲ)再誘導(dǎo)化療/1期
ⅳ)再誘導(dǎo)化療/2期
1．2．急性骨髓白血病1．2．1．任何年齡成人的治療按照如下方案，2-喹啉酮可以加到以前由R.O.Dilleman等(Blood,1991；78:2520-2526),Z.A.Arlin等(Leukemia 1990；4:177-183)和P.H.Wiernik等(Blood 1992；79:313-319)描述的阿糖胞苷的標(biāo)準(zhǔn)劑量中
1．2．2．年齡小于60歲的成人的治療ⅰ)誘導(dǎo)化療此誘導(dǎo)循環(huán)加入了高劑量阿糖胞苷的給藥，按照如下方案
(為了降低中樞神經(jīng)系統(tǒng)毒性，在腎功能不全的情況中，調(diào)整阿糖胞苷劑量至肌酸酐廓清)，按照L.E.Damon等(Leukemia 1994；8:535-541),G.L.Phillips等(Blood 1991；77:1492-1435)和G.Smith等(J.Clin.Oncol.1997；15:833-839)所述方法。
ⅱ)鞏固化療如下描述的此循環(huán)將重復(fù)8次，頻率為每4至6周1個循環(huán)(按照R.J.Mayer等，N.Engl J.Med.1994；331:896-903)
ⅲ)鞏固化療(用大劑量的阿糖胞苷)如下描述的此循環(huán)將重復(fù)2次，并適合按照G.L.Phillips等(Blood 1991；77:1429-1435)；S.N.Wolff等(J.Clin.Oncol.1989；7:1260-1267)；R.J.Mayer等(N.Engl J.Med.1994；331:896-903)所述方法進(jìn)行。
1.2.3．超過60歲成人的治療可以將所述物質(zhì)加到如下鞏固化療方案中ⅰ)按照R.O.Dilman等(Blood 1991；78:2520-2526),Z.A.Arlin等(Leukemia 1990；4:177-183),P.H.Wiernik等(1992；79:313-319)所述方法進(jìn)行
ⅱ)按照R.J.Mayer等(N.Engl.J.Med.194；331:896-903)所述方法進(jìn)行
ⅲ)按照C.A.Linker等(Blood,1993；81:311-318),N.Chao等(Blood 1993；81:319-323)和A.M.Yeager等(N.Eng.J.Med.1986；315:145-147)此方案包括自身骨髓移植(在D0天進(jìn)行)
或
ⅳ)在HLA相合同種異體骨髓移植的情況下，按照P.J.Tutscha等，Blood 1987；70:1382-1388,F.R.Applebaum等，Ann.Int.Med.1984；101:581-588:
2/慢性成人白血病2.1慢性骨髓白血病在成髓細(xì)胞期，2-喹啉酮可以加到由C.A.Koller等(N.Engl.J.Med.1986；315:1433-1438)描述的HU-Mith治療中
2.2．慢性淋巴細(xì)胞性白血病2.2.1 FCG-CLL方案2-喹啉酮可以加入到E.Kimby等(Leuk.Lymphoma 1991；5(suppl.)93-96)和FCGCLL(Blood 1990；75:1422-1425)描述的“脈沖式苯丁酸氮芥”聯(lián)合形式中
2.2.2氟達(dá)拉賓-CdA方案按照H.G.Chun等(J.Clin.Oncol.1991；9:175-188),M.J.Keating等(Blood 1989；74:19-25/J.Clin.Oncol.1991；9:44-49)和A.Saven等(J.Clin.Oncol.1995；13:570-574)
3/淋巴增殖性疾病3.1何杰金氏病2-喹啉酮可以加入到常規(guī)用于治療何杰金氏淋巴瘤的綜合化療方案中3.1.1 AVDB方案按照G.Bonnadonna等(Cancer Clin.Trials 1979；2:217-226)和G.P.Canellos等(N.Engl.J.Med.1993；327:1478-1484)
此療程包括6至8個循環(huán)，頻率為每28天1個循環(huán)。
3.1.2 MOPP/ABVD方案按照G.Bonnadonna等(Ann.Intern.Med.1986；104:739-746)和G.P.Canellos等(N.Engl.J.Med.1993；327:1478-1484)每28天MOPP方案應(yīng)與ABVD方案交替進(jìn)行(參見3．1．1)，且此療程包括6個循環(huán)MOPP方案
3.1.3 Stanford V方案按照N.L.Bartlett等(J.Clin.OnCol.1995；13:1080-1088)
此療程包括3個循環(huán)，頻率為每28天1個循環(huán)。
3.1.4 EVA方案按照G.P.Canellos等(Proc.Am.Soc.Clin.Oncol.1991；10:273)
此療程包括6個循環(huán)，頻率為每28天1個循環(huán)。
3.1.5 B-CAVe方案按照W.G.Harker等(Ann.Intern.Med.1984；101:440-446)
此療程包括8個循環(huán)，頻率為每28天1個循環(huán)。
3.2．非何杰金氏淋巴瘤3.2.1．惡化程度低ⅰ)-CVP方案-按照C.M.Bagley等(Ann.Intern.Med.1972；76:227-234)和C.S.Portlock等(Blood 1976；47:747-756)
此循環(huán)每21天重復(fù)至達(dá)到最大反應(yīng)為止。
ⅱ)-I-COPA方案-按照R.V.Smalley等(N.Eng.J.Med.1992；327:1336-1341)
此療程包括8至10個循環(huán)，頻率為每28天一個循環(huán)。
ⅲ)-氟達(dá)拉賓-CdA方案-按照P.Solol-Celigny等(Blood 1994；84(Supp.1):383a),H.Hoeschster等(Blood 1994；84(Supp.1):564a)和A.C.Kay(J.Clin.Oncol.1992；10:371-377)
對于氟達(dá)拉賓，每隔28天重復(fù)每個循環(huán)，對于克拉屈濱，每隔35天重復(fù)每個循環(huán)。
3.2.2．中度惡化ⅰ)-CHOP或CNOP方案-按照EM McKelvey等(Cancer 1976；38:1484-1493),J.O.Armitage等(J.Clin.Oncol.1984；2:898-902),S.Paulovsky等(Ann.Oncol.1992；3:205-209)
對于CHOP方案對于年齡超過60歲的患者，米托蒽醌(N)可以用來代替(CNOP方案)阿霉素(劑量12mg/m2，以每循環(huán)的D1天靜脈內(nèi)快速濃注)。
CHOP或CNOP方案的療程包括6至8個循環(huán)，頻率為每21天1個循環(huán)。
ⅱ)-MACOP-B方案-按照P.Klimo等(Ann.Intern.Med.1985；102:596-602)和I.A.Cooper等(J.Clin.Oncol.1994；12:769-778)
此治療方案延續(xù)12周并相應(yīng)于1個循環(huán)。
ⅲ)-VACOP-B方案按照J(rèn).M.Connors等(Proc.Am.Soc.Clin.Oncol.1990；9:254)
每個循環(huán)持續(xù)12周。
ⅳ)-m-BACOD/M-BACOD方案-按照M.A.Shipp等(Ann.Int.Med.1986；140:757-765)和A.T.Skarin等(J.Clin.Oncol.1983；1:91-98)
此療程包括10個循環(huán)，頻率為每21天1個循環(huán)。
ⅴ)-ProMACE/CytaBOM方案-按照D.L.LoBgo等(J.Clin.Oncol.1991；9:25-38)
此療程包括6至8個循環(huán)，頻率為每14天1個循環(huán)。
3.2.3．低或中度惡化ⅰ)-ESHAP搶救方案-在復(fù)發(fā)或一線治療失敗的情況下，按照W.S.Velasquez等(J.Clin.Oncol.1994；12:1169-1176)
此療程包括6個循環(huán)，頻率為每28天1個循環(huán)。
ⅱ)-MINE搶救方案-在復(fù)發(fā)或一線治療失敗的情況下，按照F.Cabanillas等(Semin.Oncol.1990；17(Suppl.10):28-33)
此循環(huán)每隔21天重復(fù)。
3.3．非何杰金氏淋巴瘤Burkitt淋巴瘤，小細(xì)胞淋巴瘤，成淋巴細(xì)胞淋巴瘤3.3.1．Magrath方案-所要求保護(hù)的產(chǎn)物可以按照如下方案與Magrath方案結(jié)合ⅰ)-循環(huán)1-按照I.T.Magrath等(Blood 1984；63:1102-1111)
ⅱ)-循環(huán)2至15-按照I.T.Magrath等(1984，同上)。
此療程包括14個循環(huán)，頻率為每28天1個循環(huán)。
3.4 Waldenstrom巨球蛋白血癥3.4.1 CVP方案按照M.A.Dimopoulous等(Blood 1994；83:1452-1459)和C.S.Portlock等(Blood 1976；47:747-756)描述的CVP方案
此療程無限期延長(每21天1個循環(huán))。
3.4.2氟達(dá)拉賓-CdA方案按照H.M.Kantarjian等(Blood 1990；75:1928-1931)和M.A.Dinopoulous等(Ann.Intern.Med.1993；118:195-198)
或
對于氟達(dá)拉賓，此療程包括6至12個循環(huán)，間隔28天，對于克拉屈濱，此療程包括2個循環(huán)，間隔期28天。
3.5多發(fā)性骨髓瘤3.5.1 MP方案按照R.Alexanian等(JAMA 1969；208:1680-1685),A.Belch等(Br.J.Cancer 1988；57:94-99)和F.Mandelli等(N.Engl.J.Med.1990；322:1430-1434)
或
此療程包括至少12個循環(huán)，每4至6周1個循環(huán)。
3.5.2 VAD方案按照B.Barlogie等(N.Engl.J.Med.1984:310:1353-1356)
3.5.3 MP-α干擾素方案按照O.Osterborg等(Blood 1993；81:1428-1434)
此療程包括此循環(huán)的無限重復(fù)，頻率為每42天1個循環(huán)。
3.5.4 VCAP或VBAP方案按照S.E.Salmon等(J.Clin.Oncol.1983；1:453-461):
VCAP方案
VBAP方案用卡氮芥(BCNU)代替環(huán)磷酰胺，其余相同
C．兒童患有的腫瘤-兒科腫瘤學(xué)異黃酮也可加入到兒科腫瘤的綜合化療方案中，以便借助對克隆形成細(xì)胞的募集和調(diào)動作用和降低活性劑量的可能性改善抗腫瘤效果，同時降低副作用的嚴(yán)重程度。
1/Ewing肉瘤/原發(fā)性神經(jīng)外胚層腫瘤2-喹啉酮可以引入VCR-Doxo-CY-Ifos-Mesna-E方案(E.D.Berger等，J.Clin.Oncol.1990；8:1514-1524；W.H.Meyer等，J.Clin.Oncol.1992；10:1737-1742)
根據(jù)肉瘤起初嚴(yán)重性以及反應(yīng)幅度，此療程包括6至10個這樣的循環(huán)。
2/急性兒科成淋巴細(xì)胞白血病2.1．誘導(dǎo)化療(D1-D30天)2-喹啉酮可以加入到推薦的方案中(P.S.Gaynon等，J.Clin.Oncol.,1993,11,2234-2242；J.Pullen等，J.Clin.Oncol.,1993,11:2234-2242；J.Pullen等，J.Clin.Oncol.,1993,11:839-849；V.J.Land等，J.Clin.Oncol.,1994,12:1939-1945)
根據(jù)骨髓檢查的結(jié)果，在治療方案的第28天向鞏固期過渡。
2.2．鞏固/維持化療2-喹啉酮可以引入維持方案(P.S.Gaynon等，J.Clin.Oncol.,1993,11,2234-2242；J.Pullen等，J.Clin.Oncol.,1993,11:839-849；V.J.Land等，J.Clin.Oncol.,1994,12:1939-1945),按照如下方案
3/急性兒科骨髓性白血病2-喹啉酮可以加入到誘導(dǎo)和鞏固/維持方案中，按照如下方案3.1．誘導(dǎo)化療按照Y.Ravindranath等，J.Clin.Oncol.1991,9:572-580；M.E.Nesbit等，J.Clin.Oncol.1994,12:127-135；R.J.Wells等，J.Clin.Oncol.1994,12:2367-2377
此循環(huán)從D28開始重復(fù)。
3.2．鞏固/維持化療按照Y.Ravindranath等，J.Clin.Oncol.1991,9:572-580；M.E.Nesbit等，J.Clin.Oncol.1994,12:127-135；R.J.Wells等，J.Clin.Oncol.1994,12:2367-2377
4/兒科何杰金氏病按照E.A.Gehan等描述，2-喹啉酮可以加入到MOPP-ABVD方案中(Cancer 1990；65:1429-1437),S.P.Huger等(J.Clin.Oncol.1994；12:2160-2166)和M.M.Hudson等(J.Clin.Oncol.1993；11:100-108)
此循環(huán)應(yīng)以每8周1個循環(huán)的頻率重復(fù)6次，此療程包括6個循環(huán)。
如果要進(jìn)行自體骨髓移植(自體組織移植物)，可以按照如下方案(其中同種異體移植在D0天發(fā)生)使用R.Chopra等(Blood 1993；81:1137-1145),C.Wheeler等(J.Clin.Oncol.1990；8:648-656)和R.J.Jones等(J.Clin.Oncol.1990,8:527-537)
5/兒科成淋巴細(xì)胞淋巴瘤所要求保護(hù)的化合物可以與誘導(dǎo)化療方案(A.T.Meadows等，J.Clin.Oncol.1989,7:92-99；C.Patte等，Med.Ped.Oncol.1992,20:105-113和A.Reiter等，J.Clin.Oncol.1995,13:359-372)及維持化療方案結(jié)合5.1誘導(dǎo)化療
5.2維持化療按照如下方案
此療程包括10個循環(huán)。
6/兒科成神經(jīng)細(xì)胞瘤采用R.P.Castleberry等(J.Clin.Oncol.1992；10:1299-1304)，A.Garaventa等(J.Clin.Oncol.1993；11:1770-1779)和D.C.West等(J.Clin.Oncol.1992；11:84-90)的推薦綜合化療方案Doxo-E-Cy-Pt
9周后進(jìn)行對治療反應(yīng)的評價，以便確定采取以下治療方式中的哪一種手術(shù)切除、放療或新的化療。
7/兒科骨肉瘤2-喹啉酮可以加入到如M.Hudson等(J.Clin.Oncol.1990；8:1988-1997),P.A.Meyers(J.Clin.Oncol.1992；10:5-15)和V.H.C.Bramwell等(J.Clin.Oncol.1992；10:1579-1591)描述的Doxo-Pt-Mtx-Lcv方案中
8/兒科橫紋肌肉瘤Vcr-Dact-CY-Mesna方案(H.Maurer等，Cancer 1993；71:1904-1922和L.R.Mandell等，Oncology 1993；7:71-83)可以包括所要求保護(hù)化合物的靜脈內(nèi)輸液，方案如下
在治療第9周的末期，應(yīng)評價效果以決定隨后的治療(手術(shù)、放療，繼續(xù)化療)。
9/兒童的Wilms腫瘤在G.J.D′Angio等(Cancer,1989；64:349-360)和D.M.Green等(J.Clin.Oncol.1993；11:91-95)描述的Vcr-Dact方案中
此方案在手術(shù)切除后開始。
在自體骨髓移植(自身組織移植)情況中，按照A.Garaventar等(Med.Pediatr.Oncol.1994；22:11-14),E-Thio-Cy方案可以修改如下
骨髓移植在D0天進(jìn)行。
權(quán)利要求
1．下式的化合物在制備用于在借助至少一種細(xì)胞毒試劑治療腫瘤期間干擾腫瘤中克隆形成細(xì)胞生成的藥物方面的用途 其中X選自=O、=S和=N-NH-R7,R7是苯基或吡啶基，R1、R2、R3和R4彼此獨(dú)立地選自H、OH、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、其中R8是C1-C4烷基的-OCO-R8基團(tuán)、以及衍生自糖的基團(tuán)，取代基R1、R2、R3或R4中的至少一個不是H，而R2和R3一起可能形成亞甲二氧基，R5是苯基或被取代1至3次的苯基，取代基選自H、OH、C1-C4烷氧基、基團(tuán)-OCOR8、苯基(C1-C烷氧基)、其中R′8是C1-C4烷基或CF3的基團(tuán)-O-SO2-R8′，以及衍生自糖的基團(tuán)，R6選自H、C1-C4烷基、基團(tuán)-CO-R9和基團(tuán)-A-R10，R6a選自C1-C4烷基、基團(tuán)-CO-R9和基團(tuán)-A-R10，R9是C1-C4烷基，A是C1-C4亞烷基，R10選自含1至4個選自氧、硫和氮的雜原子的5或6元雜環(huán)基團(tuán)、基團(tuán)CN、基團(tuán)-COOR11、基團(tuán)-CONR12R13、基團(tuán)-NR14R15和基團(tuán)-COR16,R11、R12、R13、R14、R15和R16獨(dú)立地選自氫原子、C1-C4烷基和苯基(C1-C4烷基)，R4和R6還可以一起形成-CO-CH2-CH2-基團(tuán)。
2．權(quán)利要求1的用途，其中化合物是式(Ⅰ)的化合物，其中-R1是C1-C4烷氧基，-R2是氫原子，-R4是C1-C4烷氧基，-R4是氫原子。
3．權(quán)利要求2的用途，其中化合物是式(Ⅰ)的化合物，其中-R5是4-(C1-C4烷氧基)苯基。
4．權(quán)利要求3的用途，其中-R1是甲氧基，-R3是甲氧基，而-R5是4-甲氧基苯基。
5．權(quán)利要求4的用途，其中化合物是5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氫-2-喹啉酮。
6．權(quán)利要求4的用途，其中化合物是3-[5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氫-1-喹啉基]丙腈。
7．權(quán)利要求4的用途，其中化合物是1-[2-(1H-1,2,3,4-四唑-5-基)乙基]-5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氫-2-喹啉酮。
8．權(quán)利要求4的用途，其中化合物是N,N-二乙基-3-[5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氫-1-喹啉基]丙酰胺。
9．對腫瘤中克隆形成細(xì)胞的增殖具有活性的藥物組合物，其中含有有效量的選自下式的化合物 其中X選自=O、=S和=N-NH-R7,R7是苯基或吡啶基，R1、R2、R3和R4彼此獨(dú)立地選自H、OH、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、其中R8是C1-C4烷基的-OCO-R8基團(tuán)、以及衍生自糖的基團(tuán)，取代基R1、R2、R3或R4中的至少一個不是H，而R2和R3一起可能形成亞甲二氧基，R5是苯基或被取代1至3次的苯基，取代基選自H、OH、C1-C4烷氧基、基團(tuán)-OCOR8、苯基(C1-C烷氧基)、其中R′8是C1-C4烷基或CF3的基團(tuán)-O-SO2-R8′以及衍生自糖的基團(tuán)，R6選自H、C1-C4烷基、基團(tuán)-CO-R9和基團(tuán)-A-R10，R6a選自基團(tuán)-CO-R9和基團(tuán)-A-R10，R9是C1-C4烷基，A是C1-C4亞烷基，R10選自含1至4個選自氧、硫和氮的雜原子的5或6元雜環(huán)基團(tuán)、基團(tuán)CN、基團(tuán)-COOR11、基團(tuán)-CONR12R13、基團(tuán)-NR14R15和基團(tuán)-COR16,R11、R12、R13、R14、R15和R16獨(dú)立地選自氫原子、C1-C4烷基和苯基(C1-C4烷基)，R4和R6還可以一起形成-CO-CH2-CH2-基團(tuán)。
10．權(quán)利要求9的組合物，其中化合物是式(Ⅰ)的化合物，其中-R1是C1-C4烷氧基，-R2是氫原子，-R3是C1-C4烷氧基，-R4是氫原子。
11．權(quán)利要求10的組合物，其中化合物是式(Ⅰ)的化合物，其中-R5是4-(C1-C4烷氧基)苯基。
12．權(quán)利要求11的組合物，其中化合物是式Ⅰ化合物，其中R1是甲氧基，R3是甲氧基，而R5是4-甲氧基苯基。
13．權(quán)利要求12的組合物，其中化合物是5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氫-2-喹啉酮。
14．權(quán)利要求12的組合物，其中化合物是3-[5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氫-1-喹啉基]丙腈。
15．權(quán)利要求12的組合物，其中化合物是1-[2-(1H-1,2,3,4-四唑-5-基)乙基]-5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氫-2-喹啉酮。
16．權(quán)利要求12的組合物，其中化合物是N,N-二乙基-3-[5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氫-1-喹啉基]丙酰胺。
17．下式的化合物 其中X選自=O、=S和=N-NH-R7,R7是苯基或吡啶基，R1、R2、R3和R4彼此獨(dú)立地選自H、OH、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、其中R8是C1-C4烷基的-OCO-R8基團(tuán)以及衍生自糖的基團(tuán)，取代基R1、R2、R3或R4中的至少一個不是H，而R2和R3一起可能形成亞甲二氧基，R5是苯基或被取代1至3次的苯基，取代基選自H、OH、C1-C4烷氧基、基團(tuán)-OCOR8、苯基(C1-C4烷氧基)、其中R′8是C1-C4烷基或CF3的基團(tuán)-O-SO2-R8′以及衍生自糖的基團(tuán)，R6選自H、C1-C4烷基、基團(tuán)-CO-R9和基團(tuán)-A-R10，R6a選自基團(tuán)-CO-R9和基團(tuán)-A-R10，R9是C1-C4烷基，A是C1-C4亞烷基，R10選自含1至4個選自氧、硫和氮的雜原子的5或6元雜環(huán)基團(tuán)、CN基團(tuán)、基團(tuán)-COOR11、基團(tuán)-CONR12R13、基團(tuán)-NR14R15和基團(tuán)-COR16,R11、R12、R13、R14、R15和R16獨(dú)立地選自氫原子、C1-C4烷基和苯基(C1-C4烷基)，R4和R6還可以一起形成-CO-CH2-CH2-基團(tuán)，其中不包括其中X=O,R6=H而取代基R1、R2、R3和R4中的兩個是OH或OCH3的化合物。
18．權(quán)利要求17的化合物，其中該化合物是3-[5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氫-1-喹啉基]丙腈。
19．權(quán)利要求17的化合物，其中該化合物是1-[2-(1H-1,2,3,4-四唑-5-基)乙基]-5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-1,2-二氫-2-喹啉酮。
20．權(quán)利要求17的化合物，其中該化合物是N,N-二乙基-3-[5,7-二甲氧基-3-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氫-1-喹啉基]丙酰胺。
全文摘要
本發(fā)明涉及對腫瘤中克隆形成細(xì)胞增殖具有活性的藥物組合物,其中含有有效量選自式(Ⅰ)和(Ⅰa)的化合物,其中X、R
文檔編號C07D405/06GK1309639SQ9980858
公開日2001年8月22日 申請日期1999年7月13日 優(yōu)先權(quán)日1998年7月15日
發(fā)明者B·約瑟夫, F·達(dá)羅, G·吉拉梅特, R·基斯, A·弗里德曼 申請人:L·拉峰試驗公司