專利名稱：作為激酶抑制劑的噻吩并吡啶酮衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一系列噻吩并吡啶酮衍生物、含有它們的組合物、它們的制備方法和它們在醫(yī)藥中的用途。
免疫與炎性應(yīng)答牽涉多種細胞類型，控制和協(xié)調(diào)經(jīng)由細胞-細胞接觸(例如整聯(lián)蛋白與它們的受體之間的相互作用)和借助細胞內(nèi)信號發(fā)送分子發(fā)生的各種相互作用。大量不同的信號發(fā)送分子都牽涉其中，包括細胞因子、淋巴細胞、趨化因子和生長因子。
細胞借助細胞內(nèi)信號發(fā)送機理對這類細胞內(nèi)信號發(fā)送分子產(chǎn)生反應(yīng)，它們包括蛋白激酶、磷酸酶和磷脂酶。蛋白激酶有五類，主要是酪氨酸激酶和絲氨酸/蘇氨酸激酶[Hunter，T.，Methods inEnzymology(Protein Kinase Classification)p.3，Hunter，T.andSefton，B.M.；eds.Vol.200，Academic Press；San Diego，1991]。
一個絲氨酸/蘇氨酸激酶亞類是有絲分裂原活化蛋白(MAP)激酶，它有至少三個在活化環(huán)的序列和大小上各不相同的家族[Adams，J.L.et al.，Progress in Medicinal Chemistry，pp.1-60，King，F(xiàn).D.and Oxford，A.W.eds.，vol.38，Elsevier Science，2001](i)細胞外調(diào)節(jié)激酶(ERK)；(ii)c-Jun NH2末端激酶或應(yīng)力活化激酶(JNK或SAP激酶)；和(iii)p38激酶，它們具有蘇氨酸-甘氨酸-酪氨酸(TGY)活化基序。JNK和p38 MAP激酶都主要受應(yīng)力刺激物的活化，包括但不限于促炎性細胞因子，例如腫瘤壞死因子(TNF)和白介素-1(IL-1)；紫外光；內(nèi)毒素；和化學(xué)或滲透壓休克。
p38已有四種同工型被描述過(p38α/β/γ/δ)。人p38α酶最初被鑒定為細胞因子抑制性抗炎藥(CSAID)的靶，所發(fā)現(xiàn)的兩種同工酶最初被稱為CSAID結(jié)合蛋白-1(CSBP-1)和CSBP-2[Lee，J.C.et al.，Nature(London)，1994，372，739-46]。CSBP-2現(xiàn)在被普遍稱為p38α，其與CSBP-1在25個氨基酸的內(nèi)部序列方面有所不同，這是由于兩個在小鼠和人類中都保守的外顯子的區(qū)別剪接所致[McDonnell，P.C.et al.，Genomics，1995，29，301-2]。CSBP-1和p38α被遍在地表達，兩種同工型之間在組織分布、活化行為、底物偏好性或CSAID結(jié)合方面是沒有區(qū)別的。第二種同工型是p38β，它與p38α具有70％的同一性。p38β的第二種形式被稱為p38β2，也是已知的，在二者中它被相信是主要的形式。p38α和p38β2在很多不同的組織中被表達。不過，在單核細胞和巨噬細胞中，p38α是主要的激酶活性[Lee，J.C.，bid；Jing，Y.et al，J.Biol.Chem.，1996，271，10531-34；Hale，K.K.et al.，J.Immun.，1999，162，4246-52]。p38γ和p38δ(分別也被稱為SAP激酶-3和SAP激酶-4)對p38α而言分別具有～63％和～61％同源性。p38γ主要在骨骼肌中被表達，而p38δ見于睪丸、胰腺、前列腺、小腸和某些內(nèi)分泌組織中。
所有p38同系物和剪接變體都含有12個氨基酸的活化環(huán)，它包括Thr-Gly-Tyr基序。TGY基序中Thr-180和Tyr-182二者被雙重特異性上游激酶所雙重磷酸化是p38的活化所必需的，導(dǎo)致這些酶的比活性增加＞1000倍[Doza，Y.N.et al.，F(xiàn)EBS Lett.，1995，364，7095-8012]。這種雙重磷酸化受到MKK6的影響，在某些條件下受到相關(guān)酶MKK 3的影響[Enslen，H.et al.，J.Biol.Chem.，1998，273，1741-48]。MKK3和MKK6屬于被稱為MAPKK(有絲分裂原活化蛋白激酶激酶)的酶家族，它們繼而被MAPKKK(有絲分裂原活化激酶激酶激酶)所活化，后者也稱為MAP3K。
有若干MAP3K已被鑒定，它們被多種刺激物所活化，包括環(huán)境應(yīng)力、炎性細胞因子和其他因素。MEKK4/MTK1(MAP或ERK激酶激酶/MAP三激酶-1)、ASK1(細胞程序死亡刺激的激酶)和TAK1(TGF-β-活化的激酶)是一些被鑒別為MAPKK上游活化物的酶。MEKK4/MTK1被認為被若干GADD-45-樣基因所活化，它們響應(yīng)于環(huán)境刺激物而被誘導(dǎo)，最終引起p38活化[Takekawa，M.and Saito，H.，Cell，1998，95，521-30]。已經(jīng)顯示TAK1響應(yīng)于轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)而活化MKK6。TNF-刺激的p38活化被相信受到TRAF2(與TNF受體有關(guān)的因子)和Fas適配蛋白(adaptor protein)Daxx募集的介導(dǎo)，這導(dǎo)致ASK1、繼而p38的活化。
有若干p38底物已被鑒別，包括其他激酶(例如MAPK活化的蛋白激酶2/3/5(MAPKAP2/3/5)、p38調(diào)節(jié)的/活化的蛋白激酶(PRAK)、MAP激酶-相互作用性激酶1/2(MNK1/2)、有絲分裂原-與應(yīng)力-活化的蛋白激酶1(MSK1/RLPK)和核糖體S6激酶-B(RSK-B))；轉(zhuǎn)錄因子(例如活化轉(zhuǎn)錄因子2/6(ATF2/6)、單核細胞-增強因子-2A/C(MEF2A/C)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、E1k1和Sap-1a1)；以及其他底物(例如cPLA2、p47phox)。
MAPKAP K2響應(yīng)于環(huán)境應(yīng)力而被p38活化。經(jīng)過工程化加工而缺乏MAPKAP K2的小鼠不會響應(yīng)于脂多糖(LPS)而產(chǎn)生TNF。若干其他細胞因子、例如IL-1、IL-6、IFN-g和IL-10的產(chǎn)生也受到部分抑制[Kotlyarov，A.et al.，Nature Cell Biol.，1999，1，94-7]。此外，來自p38α無效小鼠的胚胎干細胞的MAPKAP K2沒有響應(yīng)于應(yīng)力而被活化，這些細胞也沒有響應(yīng)于IL-1而產(chǎn)生IL-6[Allen，M.et al.，J.Exp.Med.，2000，191，859-69]。這些結(jié)果表明，MAPKAP K2不僅是TNF和IL-1產(chǎn)生所必需的，而且是由細胞因子誘導(dǎo)的信號發(fā)送所必需的。另外，MAPKAP K2/3對熱休克蛋白HSP25和HSP27進行磷酸化，從而調(diào)節(jié)它們，而這二者參與細胞骨架的再組織。
有若干p38小分子抑制劑已被報道，它們在低μM范圍內(nèi)的濃度下抑制人單核細胞中的IL-1和TNF合成[Lee，J.C.et al.，Int.J.Immunopharm.，1988，10，835]，在耐受環(huán)加氧酶抑制劑的動物模型中表現(xiàn)活性[Lee，J.C.et al.，Annals N.Y.Acad.Sci.，1993，696，149]。另外，已知這些小分子抑制劑會減少多種促炎性蛋白的合成，包括IL-6、IL-8、粒細胞/巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)和環(huán)加氧酶-2(COX-2)。TNF-誘導(dǎo)的胞質(zhì)PLA2磷酸化與活化、TNF-誘導(dǎo)的VCAM-1在內(nèi)皮細胞上的表達和IL-1刺激的膠原酶與溶基質(zhì)素的合成也受到p38小分子抑制劑的抑制[Cohen，P.，Trends Cell Biol.，1997，7，353-61]。
包括單核細胞和巨噬細胞在內(nèi)的各種細胞產(chǎn)生TNF和IL-1。過度或未受調(diào)控的TNF產(chǎn)生與大量疾病狀態(tài)有關(guān)，包括克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎、pyresis、類風濕性關(guān)節(jié)炎、類風濕性脊椎炎、骨關(guān)節(jié)炎、痛風性關(guān)節(jié)炎與其他關(guān)節(jié)炎病癥、中毒性休克綜合征、內(nèi)毒素性休克、膿毒病、膿毒性休克、革蘭氏陰性膿毒病、骨吸收疾病、再灌注損傷、移植物對抗宿主反應(yīng)、同種異體移植物排斥、成人呼吸窘迫綜合征、慢性肺炎性疾病、矽肺病、肺肉樣瘤病、腦型瘧、瘢痕組織生成、瘢痕瘤生成、由感染(例如流感)引起的發(fā)熱與肌痛、繼發(fā)于獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)的惡病質(zhì)、繼發(fā)于感染或惡性腫瘤的惡病質(zhì)、AIDS或AIDS相關(guān)性復(fù)合征。
過度或失調(diào)的IL-1產(chǎn)生在下列疾病中有牽連類風濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎、風疹性關(guān)節(jié)炎、急性滑膜炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、惡病質(zhì)、萊特爾氏綜合征、內(nèi)毒素血、中毒性休克綜合征、結(jié)核、動脈粥樣硬化、肌肉退化、和其他急性或慢性炎性疾病(例如由內(nèi)毒素誘發(fā)的炎性反應(yīng)或炎性腸疾病)。另外，IL-1與糖尿病和胰腺β細胞破壞也有聯(lián)系[Dinarello，C.A.J.Clinical Immunology，1985，5，287-97]。
IL-8是一種趨化因子，它由多種細胞類型產(chǎn)生，包括內(nèi)皮細胞、單核細胞、成纖維細胞和角質(zhì)細胞。IL-1、TNF和LPS都誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞產(chǎn)生IL-8。已經(jīng)顯示體外IL-8具有大量功能，包括是嗜中性粒細胞、T-淋巴細胞和嗜堿性粒細胞的化學(xué)誘引劑。也已顯示IL-8可增加Mac-1(CD11b/CD18)在嗜中性粒細胞上的表達，而無從頭蛋白質(zhì)合成，這可能有助于增加嗜中性粒細胞與血管內(nèi)皮細胞的粘附。很多疾病都是以大量嗜中性粒細胞浸潤為特征的。嗜堿性粒細胞的組胺釋放(特應(yīng)性和正常個體二者中)受到IL-8的誘導(dǎo)，嗜中性粒細胞的溶菌酶釋放和呼吸性爆發(fā)也是如此。
IL-1和TNF以及其他白細胞衍生細胞因子作為重要而關(guān)鍵的炎性介質(zhì)的中心角色有詳細的文獻記載。已經(jīng)顯示或者可以預(yù)期，抑制這些細胞因子將會有益于控制、緩和或減少這些疾病狀態(tài)中的許多類型。
p38在信號發(fā)送分子-介導(dǎo)的細胞外向細胞內(nèi)信號傳導(dǎo)級聯(lián)內(nèi)所占據(jù)的中心位置和其不僅對IL-1、TNF與IL-8的產(chǎn)生、而且對其他促炎性蛋白(例如IL-6、GM-CSF、COX-2、膠原酶和溶基質(zhì)素)的合成和/或作用的影響使其成為被小分子抑制劑抑制的目標，預(yù)期這類抑制作用將是一種非常有效的調(diào)節(jié)過度與破壞性免疫系統(tǒng)活化的機理。針對p38激酶抑制劑所述的有力的多樣化抗炎活性支持了這種預(yù)期[Adams，ibid；Badger，et al，J.Pharm.Exp.Ther.1996，279，1453-61；Griswold，et al，Pharmacol.Comm.，1996，7，323-29]。
我們現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)一組化合物，它們是p38激酶(p38α/β/δ/γ)和其同種型與剪接變體(尤其是p38α、p38β和p38β2)的有力的選擇性的抑制劑。這些化合物因而可供醫(yī)用，例如預(yù)防和治療如本文所述的免疫或炎性障礙。
因而，按照本發(fā)明的一個方面，我們提供式(1)化合物 其中Y是連接基團-C(O)-或-S(O)2-；n是零或整數(shù)1；m是整數(shù)1、2、3或4；p是整數(shù)1、2、3或4；Rd是-OH、-(Alk2)OH(其中Alk2是直鏈或支鏈C1-4亞烷基鏈)、-OR1(其中R1是直鏈或支鏈C1-6烷基)、-(Alk2)OR1、-NR2R3(其中R2和R3可以相同或不同，各自獨立地是氫原子或者直鏈或支鏈C1-6烷基)、-(Alk2)NR2R3或者直鏈或支鏈C1-6烷基；Alk1是直鏈或支鏈C1-4亞烷基鏈；
Cy1是可選被取代的環(huán)脂族、芳族或雜芳族基團；Ar是可選被取代的芳族或雜芳族基團；及其鹽、溶劑化物、水合物和N-氧化物。
將被領(lǐng)會到的是，式(1)化合物可以具有一個或多個手性中心，并以對映體或非對映體形式存在。本發(fā)明被理解為延及所有這類對映體、非對映體及其任意比例的混合物，包括外消旋物。式(1)和下文各式打算代表所有各種異構(gòu)體及其混合物，另有規(guī)定或指示者除外。另外，式(1)化合物可以互變體存在，例如酮(CH2C＝O)-烯醇(CH＝CHOH)互變體。式(1)和下文各式打算代表所有各種互變體及其混合物，另有規(guī)定者除外。
本文關(guān)于本發(fā)明化合物及其中間體所用的下列通用術(shù)語具有下列所規(guī)定的含義，另有具體定義者除外。
因而，本文所用的術(shù)語“烷基”無論作為基團還是作為基團的一部分都包括直鏈或支鏈C1-6烷基，例如C1-4烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、異丁基或叔丁基。類似地，術(shù)語“烯基”或“炔基”打算表示直鏈或支鏈C2-6烯基或C2-6炔基，例如C2-4烯基或C2-4炔基?？赡艽嬖谟谶@些基團上的可選取代基包括一個、兩個、三個或更多取代基，其中每個取代基可以相同或不同，并選自鹵原子，例如氟、氯、溴或碘原子；-OH；-CO2H；-CO2R4(其中R4是可選被取代的直鏈或支鏈C1-6烷基，特別是直鏈或支鏈C1-4烷基)，例如-CO2CH3或-CO2C(CH3)3；-CONHR4，例如-CONHCH3；-CON(R4)2，例如-CON(CH3)2；-COR4，例如-COCH3；C1-6烷氧基，例如甲氧基或乙氧基；鹵代C1-6烷氧基，例如三氟甲氧基或二氟甲氧基；巰基(-SH)；-S(O)R4，例如-S(O)CH3；-S(O)2R4，例如-S(O)2CH3；C1-6烷硫基，例如甲硫基或乙硫基；氨基；-NHR4，例如-NHCH3；或者-N(R4)2，例如-N(CH3)2。若兩個R4基團存在于任意上述取代基中，則它們可以相同或不同。
另外，當兩個R4烷基存在于任意上述可選取代基中時，這些基團可以與它們所附著的N原子一起連接構(gòu)成雜環(huán)。這類雜環(huán)可以可選地被另一雜原子或含雜原子的基團所中斷，它們選自-O-、-S-、-N(R4)-、-C(O)-或-C(S)-基團。這類雜環(huán)的具體實例包括哌啶基、吡唑烷基、嗎啉基、硫嗎啉基、吡咯烷基、咪唑烷基和哌嗪基環(huán)。
術(shù)語“鹵素”打算包括氟、氯、溴或碘原子。
術(shù)語“鹵代烷基”打算包括，被一個、兩個或三個上述鹵原子所取代的如上剛提及的那些烷基。這類基團的具體實例包括-CF3、-CCl3、-CHF2、-CHCl2、-CH2F和-CH2Cl基團。
本文所用的術(shù)語“烷氧基”打算包括直鏈或支鏈C1-6烷氧基，例如C1-4烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、異丁氧基和叔丁氧基。本文所用的“鹵代烷氧基”包括被一個、兩個或三個上述鹵原子所取代的任意這些烷氧基。具體實例包括-OCF3、-OCCl3、-OCHF2、-OCHCl2、-OCH2F和-OCH2Cl基團。
本文所用的術(shù)語“烷硫基”打算包括直鏈或支鏈C1-6烷硫基，例如C1-4烷硫基，例如甲硫基或乙硫基。
本文所用的術(shù)語“烷基氨基”或“二烷基氨基”打算包括基團-NHR1a和-N(R1a)(R1b)，其中R1a和R1b各自獨立地是可選被取代的直鏈或支鏈烷基，或者二者與它們所附著的N原子一起構(gòu)成可選被取代的雜環(huán)烷基，它可以含有另一雜原子或含雜原子基團，例如-O-或-S-原子或者-N(R1a)-基團。這類可選被取代的雜環(huán)烷基的具體實例包括可選被取代的吡咯烷基、哌啶基、嗎啉基、硫嗎啉基和N’-C1-6烷基-哌嗪基。可能存在于這類雜環(huán)烷基上的可選取代基包括上文關(guān)于術(shù)語“烷基”所述的那些可選取代基。
當各自存在于本發(fā)明的化合物中時，由Alk1和/或Alk2代表的亞烷基鏈的具體實例包括-CH2-、-CH2CH2-、-CH(CH3)CH2-、-(CH2)2CH2-、-C(CH3)2-、-(CH2)3CH2-、-CH2CH(CH3)CH2-、-C(CH3)2CH2-或-CH(CH3)CH2CH2-鏈。
本發(fā)明化合物中由基團Cy1代表的可選被取代的環(huán)脂族基團包括可選被取代的C3-10環(huán)脂族基團。具體實例包括可選被取代的C3-10環(huán)烷基，例如C3-7環(huán)烷基；或者C3-10環(huán)烯基，例如C3-7環(huán)烯基。
由基團Cy1代表的環(huán)脂族基團的具體實例包括可選被取代的環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、2-環(huán)丁烯-1-基、2-環(huán)戊烯-1-基和3-環(huán)戊烯-1-基，尤其是環(huán)丙基。
可能存在于由基團Cy1代表的環(huán)脂族基團上的可選取代基包括一個、兩個、三個或更多取代基，其選自鹵原子；C1-6烷基，例如甲基或乙基；鹵代C1-6烷基，例如鹵代甲基或鹵代乙基，例如二氟甲基或三氟甲基，其可選地被羥基取代，例如-C(OH)(CF3)2；C1-6烷氧基，例如甲氧基或乙氧基；鹵代C1-6烷氧基，例如鹵代甲氧基或鹵代乙氧基，例如二氟甲氧基或三氟甲氧基；巰基；C1-6烷硫基，例如甲硫基或乙硫基；羰基(＝O)；硫代羰基(＝S)；亞氨基(＝NR4a)(其中R4a是-OH基團或C1-6烷基)；或者-(Alk3)vR5基團，其中Alk3是直鏈或支鏈C1-3亞烷基鏈，v是零或整數(shù)1，R5是C3-8環(huán)烷基、-OH、-SH、-N(R6)(R7)(其中R6和R7各自獨立地選自氫原子或者可選被取代的烷基或C3-8環(huán)烷基)、-OR6、-SR6、-CN、-NO2、-CO2R6、-SOR6、-SO2R6、-SO3R6、-OCO2R6、-C(O)R6、-OC(O)R6、-C(S)R6、-C(O)N(R6)(R7)、-OC(O)N(R6)(R7)、-N(R6)C(O)R7、-C(S)N(R6)(R7)、-N(R6)C(S)R7、-SO2N(R6)(R7)、-N(R6)SO2R7、-N(R6)C(O)N(R7)(R8)(其中R8是如R6所定義的)、-N(R6)C(S)N(R7)(R8)、-N(R6)SO2N(R7)(R8)或者可選被取代的芳族或雜芳族基團。
Alk3鏈的具體實例包括-CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-和-CH(CH3)CH2-鏈。
當R5、R6、R7和/或R8作為C3-8環(huán)烷基存在時，它例如可以是環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基?？赡艽嬖谟谶@類基團上的可選取代基包括例如一個、兩個或三個取代基，它們可以相同或不同，并選自鹵原子，例如氟、氯、溴或碘原子；或者羥基或C1-6烷氧基，例如甲氧基、乙氧基或異丙氧基。
當基團R6和R7或者R7和R8都是烷基時，這些基團可以與它們所附著的N原子一起連接構(gòu)成雜環(huán)。這類雜環(huán)可以可選地被選自下述的另一雜原子或含雜原子基團所中斷-O-、-S-、-N(R7)-、-C(O)-或-C(S)-基團。這炎雜環(huán)的具體實例包括哌啶基、吡唑烷基、嗎啉基、硫嗎啉基、吡咯烷基、咪唑烷基和哌嗪基環(huán)。
當R5是可選被取代的芳族或雜芳族基團時，它可以是下文關(guān)于Cy1所述的任意這類基團。
一般而言，由基團Cy1代表的可選被取代的芳族基團例如包括單環(huán)或二環(huán)稠合的環(huán)狀C6-12芳族基團，例如苯基、1-或2-萘基、1-或2-四氫萘基、二氫茚基或茚基，尤其是苯基。
由基團Cy1代表的雜芳族基團例如包括C1-9雜芳族基團，其中含有例如一個、兩個、三個或四個選自氧、硫或氮原子的雜原子。一般而言，雜芳族基團例如可以是單環(huán)或二環(huán)稠合的環(huán)狀雜芳族基團。單環(huán)雜芳族基團例如包括五-或六-元雜芳族基團，其中含有一個、兩個、三個或四個選自氧、硫或氮原子的雜原子。二環(huán)雜芳族基團例如包括八-至十三-元稠合的環(huán)狀雜芳族基團，其中含有一個、兩個或更多個選自氧、硫或氮原子的雜原子。
這些類型的雜芳族基團的具體實例包括吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、N-C1-6烷基咪唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、異噻唑基、吡唑基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、1，3，4-噻二唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、1，3，5-三嗪基、1，2，4-三嗪基、1，2，3-三嗪基、苯并呋喃基、(2，3-二氫)苯并呋喃基、苯并噻吩基、(2，3-二氫)苯并噻吩基、苯并三唑基、吲哚基、二氫吲哚基、吲唑啉基(indazolinyl)、苯并咪唑基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并異噁唑基、苯并吡喃基、(3，4-二氫)苯并吡喃基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基(naphthyridinyl)、咪唑并[1，5-a]吡啶基、咪唑并[1，5-a]吡嗪基、咪唑并[1，5-c]嘧啶基、吡啶并[3，4-b]吡啶基、吡啶并[3，2-b]吡啶基、吡啶并[4，3-b]吡啶基、喹啉基、異喹啉基、酞嗪基、四唑基、5，6，7，8-四氫喹啉基、5，6，7，8-四氫異喹啉基、酰亞氨基(例如琥珀酰亞氨基、苯二酰亞氨基或萘二酰亞氨基(例如1，8-萘二酰亞氨基))、吡唑并[4，3-d]嘧啶基、呋喃并[3，2-d]嘧啶基、噻吩并[3，2-d]嘧啶基、吡咯并[3，2-d]嘧啶基、吡唑并[3，2-b]吡啶基、呋喃并[3，2-b]吡啶基、噻吩并[3，2-b]吡啶基、吡咯并[3，2-b]吡啶基、噻唑并[3，2-a]吡啶基、吡啶并[1，2-a]嘧啶基、四氫咪唑并[1，2-a]嘧啶基和二氫咪唑并[1，2-a]嘧啶基。
可能存在于由基團Cy1代表的芳族或雜芳族基團上的可選取代基包括一個、兩個、三個或更多取代基，其各自選自原子或基團R10，其中R10是R10a或-L6Alk5(R10a)r，其中R10a是鹵原子或者氨基(-NH2)、取代的氨基、硝基、氰基、羥基(-OH)、取代的羥基、甲?；?、羧基(-CO2H)、酯化的羧基、巰基(-SH)、取代的巰基、-COR11(其中R11是-L6Alk3(R10a)r、芳基或雜芳基)、-CSR11、-SO3H、-SOR11、-SO2R11、-SO3R11、-SO2NH2、-SO2NHR11、-SO2N(R11)2、-CONH2、-CSNH2、-CONHR11、-CSNHR11、-CON(R11)2、-CSN(R11)2、-N(R12)SO2R11(其中R12是氫原子或者直鏈或支鏈烷基)、-N(SO2R11)2、-N(R12)SO2NH2、-N(R12)SO2NHR11、-N(R12)SO2N(R11)2、-N(R12)COR11、-N(R12)CONH2、-N(R12)CONHR11、-N(R12)CON(R11)2、-N(R12)CSNH2、-N(R12)CSNHR11、-N(R12)CSN(R11)2、-N(R12)CSR11、-N(R12)C(O)OR11、-C＝NR12(NR12)、-SO2NHet1(其中-NHet1是可選被取代的C3-7環(huán)氨基，其可選地含有一個或多個其他-O-或-S-原子或者-N(R12)-、-C(O)-或-C(S)-基團)、-CONHet1、-CSNHet1、-N(R12)SO2NHet1、-N(R12)CONHet1、-N(R12)CSNHet1、-SO2N(R12)Het(其中-Het是可選被取代的單環(huán)C3-7碳環(huán)基團，其可選地含有一個或多個其他-O-或-S-原子或者-N(R12)-、-C(O)-、-S(O)-或-S(O)2-基團)、-Het、-CON(R12)Het、-CSN(R12)Het、-N(R12)CON(R12)Het、-N(R12)CSN(R12)Het、-N(R12)SO2N(R12)Het、芳基或雜芳基；L6是共價鍵或者連接原子或基團；Alk5是可選被取代的直鏈或支鏈C1-6亞烷基、C2-6亞烯基或C2-6亞炔基鏈，其可選地被一個、兩個或三個-O-或-S-原子或者-S(O)k-(其中k是整數(shù)1或2)或-N(R12)-(例如-N(CH3)-)基團所中斷；r是零或整數(shù)1、2或3。將被領(lǐng)會到的是，當兩個R11或R12基團存在于一個上述取代基中時，R11和R12基團可以相同或不同。
當基團-L6Alk5(R10a)r中的L6是連接原子或基團時，它例如可以是任意二價連接原子或基團。具體實例包括-O-或-S-原子或者-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-C(S)-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(R3)-(其中R3是氫原子或者直鏈或支鏈烷基)、-N(R3)O-、-N(R3)N-、-CON(R3)-、-OC(O)N(R3)-、-CSN(R3)-、-N(R3)CO-、-N(R3)C(O)O-、-N(R3)CS-、-S(O)2N(R3)-、-N(R3)S(O)2-、-N(R3)CON(R3)-、-N(R3)CSN(R3)-或-N(R3)SO2N(R3)-基團。若L6含有兩個R3基團，則它們可以相同或不同。
當基團-L6Alk5(R10a)r中的r是整數(shù)1、2或3時，所要理解的是取代基R10a可能存在于-Alk5中任意適合的碳原子上。當存在一個以上R10a取代基時，它們可以相同或不同，并可能存在于-Alk5中相同或不同的原子上。顯然，當r是零且沒有取代基R10a存在時，由Alk5代表的亞烷基、亞烯基或亞炔基鏈變?yōu)橥榛?、烯基或炔基?br> 當R10a是取代的氨基時，它例如可以是基團-NHR11(其中R11是如上所定義的)或基團-N(R11)2，其中每一R11基團是相同或不同的。
當R10a是鹵原子時，它例如可以是氟、氯、溴或碘原子。
當R10a是取代的羥基或取代的巰基時，它例如可以分別是基團-OR11或-SR12。
由基團R10a代表的酯化的羧基包括式-CO2Alk6基團，其中Alk6是可選被取代的直鏈或支鏈C1-8烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基；C6-12芳基C1-8烷基，例如可選被取代的芐基、苯乙基、苯丙基、1-萘甲基或2-萘甲基；C6-12芳基，例如可選被取代的苯基、1-萘基或2-萘基；C6-12芳氧基C1-8烷基，例如可選被取代的苯氧基甲基、苯氧基乙基、1-萘氧基甲基或2-萘氧基甲基；可選被取代的C1-8烷酰氧基C1-8烷基，例如新戊酰氧基甲基、丙酰氧基乙基或丙酰氧基丙基；或者C6-12芳酰氧基C1-8烷基，例如可選被取代的苯甲酰氧基乙基或苯甲酰氧基丙基。存在于Alk6基團上的可選取代基包括如上所述的R10a原子和基團。
當Alk5存在于取代基中或者作為取代基時，它例如可以是-CH2-、-CH(CH3)-、-C(CH3)2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH(CH3)CH2-、-CH2CH2CH2CH2-、-CH2CH(CH3)CH2-、-CH(CH3)CH2CH2-、-C(CH3)2CH2-、-CH＝CH-、-CH＝CHCH2-、-CH2CH＝CH-、-CH＝CHCH2CH2-、-CH2CH＝CHCH2-、-CH2CH2CH＝CH2-、-C≡C-、-C≡CCH2-、-CH2C≡C-、-C≡CCH2CH2-、-CH2C≡CCH2-或-CH2CH2C≡C-鏈，其可選地被一個、兩個或三個-O-或-S-原子或者-S(O)-、-S(O)2-或-N(R12)-(例如-N(CH3)-)基團所中斷。除了任意可能存在的R10a基團以外，由Alk5代表的脂族鏈還可以可選地被一個、兩個或三個鹵原子取代。
由基團R10a或R11代表的芳基或雜芳基包括可選被取代的單-或二-環(huán)C6-12芳族或C1-9雜芳族基團，如上關(guān)于基團Cy1所述。芳族和雜芳族基團可以酌情通過任意碳原子或雜原子(例如氮原子)附著于式(1)化合物中的基團Cy1上。
將被領(lǐng)會到的是，當-NHet1或-Het構(gòu)成取代基R10的一部分時，可能存在于環(huán)-NHet1或-Het內(nèi)的雜原子或含雜原子基團代替了母體碳環(huán)內(nèi)的碳原子。
因而，當-NHet1或-Het構(gòu)成取代基R10的一部分時，它們各自例如可以是可選被取代的吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌嗪基、嗎啉基、硫嗎啉基、哌啶基或噻唑烷基。另外，Het例如可以代表可選被取代的環(huán)戊基或環(huán)己基?？赡艽嬖谟?NHet1上的可選取代基包括上文針對Cy1是雜環(huán)脂族基團時所述的那些取代基。
特別有用的由R10代表的原子或基團包括氟、氯、溴或碘原子；或者C1-6烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基或叔丁基；可選被取代的苯基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、呋喃基、噻唑基或噻吩基；羥基C1-6烷基，例如羥甲基或羥乙基；羧基C1-6烷基，例如羧乙基；C1-6烷硫基，例如甲硫基或乙硫基；羧基C1-6烷硫基，例如羧甲硫基、2-羧基乙硫基或3-羧基丙硫基；C1-6烷氧基，例如甲氧基或乙氧基；羥基C1-6烷氧基，例如2-羥基乙氧基；可選被取代的苯氧基、吡啶氧基、噻唑氧基、苯硫基或吡啶硫基；C3-7環(huán)烷基，例如環(huán)丁基、環(huán)戊基；C3-7環(huán)烷氧基，例如環(huán)戊氧基；鹵代C1-6烷基，例如三氟甲基；鹵代C1-6烷氧基，例如三氟甲氧基；C1-6烷基氨基，例如甲氨基、乙氨基、-CH(CH3)NH2或-C(CH3)2NH2；鹵代C1-6烷基氨基，例如氟代C1-6烷基氨基，例如-CH(CF3)NH2或-C(CF3)2NH2；氨基(-NH2)；氨基C1-6烷基，例如氨甲基或氨乙基；C1-6二烷基氨基，例如二甲氨基或二乙氨基；C1-6烷基氨基C1-6烷基，例如乙氨基乙基；C1-6二烷基氨基C1-6烷基，例如二乙氨基乙基；氨基C1-6烷氧基，例如氨基乙氧基；C1-6烷基氨基C1-6烷氧基，例如甲氨基乙氧基；C1-6二烷基氨基C1-6烷氧基，例如二甲氨基乙氧基、二乙氨基乙氧基、二異丙氨基乙氧基或二甲氨基丙氧基；酰亞氨基，例如苯二酰亞氨基或萘二酰亞氨基，例如1，8-萘二酰亞氨基；硝基；氰基；羥基(-OH)；甲酰基(HC(O)-)；羧基(-CO2H)；-CO2Alk6(其中Alk6是如上所定義的)；C1-6烷?；?，例如乙?；?；可選被取代的苯甲?；粠€基(-SH)；硫代C1-6烷基，例如硫甲基或硫乙基；磺?；?-SO3H)；C1-6烷基磺酰基，例如甲磺?；?；氨基磺?；?-SO2NH2)；C1-6烷基氨基磺酰基，例如甲氨基磺?；蛞野被酋；?；C1-6二烷基氨基磺?；?，例如二甲氨基磺?；蚨野被酋；?；苯氨基磺?；?；酰氨基(-CONH2)；C1-6烷基氨基羰基，例如甲氨基羰基或乙氨基羰基；C1-6二烷基氨基羰基，例如二甲氨基羰基或二乙氨基羰基；氨基C1-6烷基氨基羰基，例如氨基乙氨基羰基；C1-6二烷基氨基C1-6烷基氨基羰基，例如二乙氨基乙氨基羰基；氨基碳酰氨基；C1-6烷基氨基碳酰氨基，例如甲氨基碳酰氨基或乙氨基碳酰氨基；C1-6二烷基氨基碳酰氨基，例如二甲氨基碳酰氨基或二乙氨基碳酰氨基；C1-6烷基氨基羰基C1-6烷基氨基，例如甲氨基羰基甲氨基；氨基硫代碳酰氨基；C1-6烷基氨基硫代碳酰氨基，例如甲氨基硫代碳酰氨基或乙氨基硫代碳酰氨基；C1-6二烷基氨基硫代碳酰氨基，例如二甲氨基硫代碳酰氨基或二乙氨基硫代碳酰氨基；C1-6烷基氨基硫代羰基C1-6烷基氨基，例如乙氨基硫代羰基甲氨基；-CONHC(＝NH)NH2；C1-6烷基磺酰氨基，例如甲磺酰氨基或乙磺酰氨基；C1-6二烷基磺酰氨基，例如二甲磺酰氨基或二乙磺酰氨基；可選被取代的苯磺酰氨基；氨基磺酰氨基(-NHSO2NH2)；C1-6烷基氨基磺酰氨基，例如甲氨基磺酰氨基或乙氨基磺酰氨基；C1-6二烷基氨基磺酰氨基，例如二甲氨基磺酰氨基或二乙氨基磺酰氨基；可選被取代的嗎啉磺酰氨基或嗎啉磺?；鵆1-6烷基氨基；可選被取代的苯氨基磺酰氨基；C1-6烷酰氨基，例如乙酰氨基；氨基C1-6烷酰氨基，例如氨基乙酰氨基；C1-6二烷基氨基C1-6烷酰氨基，例如二甲氨基乙酰氨基；C1-6烷酰氨基C1-6烷基，例如乙酰氨甲基；C1-6烷酰氨基C1-6烷基氨基，例如乙酰氨基乙氨基；C1-6烷氧基碳酰氨基，例如甲氧基碳酰氨基、乙氧基碳酰氨基或叔丁氧基羰基氨基；或者可選被取代的芐氧基、吡啶基甲氧基、噻唑基甲氧基、芐氧基羰基氨基、芐氧基羰基氨基C1-6烷基(例如芐氧基羰基氨基乙基)、芐硫基、吡啶基甲硫基或噻唑基甲硫基。
當存在于芳族或雜芳族基團上時，進一步特別有用的由R10代表的取代基包括式-L6Alk5R10a取代基，其中L6優(yōu)選地是共價鍵或者-O-或-S-原子或者-N(R3)-、-C(O)-、-C(O)O-、-O-C(O)-、-N(R3)CO-、-CON(R3)-或-N(R3)S(O)2-基團，Alk5是可選被取代的C1-6烷基，其可選地被一個或兩個-O-或-S-原子或者-N(R12)-、-C(O)-、-C(S)-、-CON(R12)-或-N(R12)CO-基團所中斷，R10a是如本文所定義的可選被取代的Het基團或者如上關(guān)于Cy1所述的可選被取代的雜芳族基團。
若需要的話，兩個R10取代基可以一起連接構(gòu)成環(huán)狀基團，例如環(huán)狀醚，例如C1-6亞烷二氧基，例如亞甲二氧基或亞乙二氧基。
將被領(lǐng)會到的是，若存在兩個或更多R10取代基，則它們不必是相同的原子和/或基團。一般而言，取代基可能存在于由Cy1代表的芳族或雜芳族基團上任意可供利用的環(huán)位置處。
本發(fā)明化合物中由Ar代表的取代的芳族或雜芳族基團可以是上文關(guān)于Cy1所述的任意芳族或雜芳族基團?？赡艽嬖诘目蛇x取代基包括關(guān)于Cy1芳族與雜芳族基團所一般或確切描述的那些R10原子和基團。
式(1)化合物中某些取代基的存在可以使化合物能夠生成鹽。適合的鹽包括藥學(xué)上可接受的鹽，例如從無機或有機酸衍生的酸加成鹽和從無機與有機堿衍生的鹽。
酸加成鹽包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、烷基磺酸鹽(例如甲磺酸鹽、乙磺酸鹽或異硫羰酸鹽(isothionates))、芳基磺酸鹽(例如對-甲苯磺酸鹽、苯磺酸鹽或萘磺酸鹽)、磷酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、丙酸鹽、檸檬酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、乳酸鹽、草酸鹽、酒石酸鹽和苯甲酸鹽。
從無機或有機堿衍生的鹽包括堿金屬鹽，例如鈉或鉀鹽；堿土金屬鹽，例如鎂或鈣鹽；和有機胺鹽，例如嗎啉、哌啶、二甲胺或二乙胺的鹽。
特別有用的根據(jù)本發(fā)明的化合物的鹽包括藥學(xué)上可接受的鹽，尤其是藥學(xué)上可接受的酸加成鹽。
在一種實施方式中，Y是-C(O)-。在另一種實施方式中，Y是-S(O)2-。
在一類式(1)化合物中，n是整數(shù)1。當式(1)化合物中的n是整數(shù)1時，Alk1優(yōu)選地是-CH2CH2-鏈，或者尤其是-CH2-。
在一類式(1)化合物中，n是零。
特別優(yōu)選的Cy1可選被取代的環(huán)脂族基團包括可選被取代的C3-7環(huán)烷基，尤其是環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基。Cy1特別地是環(huán)丙基。
每一這些優(yōu)選的Cy1環(huán)烷基都可以是未取代的。當存在取代基時，它們可以確切地包括鹵原子(尤其是氟、氯或溴原子)或者C1-6烷基(尤其是C1-3烷基，特別是甲基)或鹵代C1-6烷基(尤其是氟代C1-6烷基，更特別地是-CF3基團)或C1-6烷氧基(尤其是甲氧基、乙氧基、丙氧基或異丙氧基)或鹵代C1-6烷氧基(尤其是氟代C1-6烷氧基，更特別地是-OCF3基團)或者氰基(-CN)、酯化的羧基(尤其是-CO2CH3或-CO2C(CH3)3)、硝基(-NO2)、氨基(-NH2)、取代的氨基(尤其是-NHCH3或-N(CH3)2)、-COR6(尤其是-C(O)CH3)或-N(R6)C(O)R7(尤其是-NHCOCH3)基團。
特別優(yōu)選的Cy1芳族基團包括可選被取代的苯基。特別優(yōu)選的雜芳族基團包括可選被取代的單環(huán)雜芳族基團，尤其是可選被取代的五-或六-元雜芳族基團，其中含有一個、兩個、三個或四個選自氧、硫或氮原子的雜原子。特別優(yōu)選的可選被取代的單環(huán)雜芳族基團包括可選被取代的呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基和三嗪基。在進一步的優(yōu)選方案中，雜芳族基團可以是八至十三元二環(huán)稠合的環(huán)，其中含有一個或兩個氧、硫或氮原子。特別有用的這種類型基團包括可選被取代的吲哚基。
特別優(yōu)選的可能存在于Cy1芳族或雜芳族基團上的可選取代基包括一個、兩個或三個如上所定義的原子或基團-R10a或-L6Alk5(R10a)r。特別有用的可選取代基包括鹵原子(尤其是氟、氯或溴原子)或者C1-6烷基(尤其是C1-3烷基，更特別地是甲基)或鹵代C1-6烷基(尤其是氟代C1-6烷基，更特別地是-CF3基團)或C1-6烷氧基(尤其是甲氧基、乙氧基、丙氧基或異丙氧基)或鹵代C1-6烷氧基(尤其是氟代C1-6烷氧基，更特別地是-OCF3基團)或者氰基(-CN)、羧基(-CO2H)、酯化的羧基(-CO2Alk6)(尤其是-CO2CH3、-CO2CH2CH3或-CO2C(CH3)3)、硝基(-NO2)、氨基(-NH2)、取代的氨基(尤其是-NHCH3或-N(CH3)2)、-COR11(尤其是-COCH3)或-N(R12)COR11(尤其是-NHCOCH3)基團。
進一步優(yōu)選的可能存在于Cy1芳族或雜芳族基團上的可選取代基包括式-L6Alk5(R10a)r基團，其中r是整數(shù)1或2，L6是共價鍵或者-O-或-S-原子或者-N(R3)-(尤其是-NH-或-N(CH3)-)、-C(O)-、-C(S)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-N(R3)CO-(尤其是-NHCO-)或-CON(R3)-(尤其是-CHNH-)基團，Alk5是C1-6亞烷基鏈，尤其是-CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-或-CH2CH2CH2CH2-鏈，R10a是羥基或取代的羥基(尤其是-OCH3、-OCH2CH3或-OCH(CH3)2)或者-NH2或取代的氨基(尤其是-N(CH3)2或-N(CH2CH3)2)或者-Het基團，尤其是如前文所述的可選被取代的單環(huán)C5-7碳環(huán)基團，其在環(huán)結(jié)構(gòu)內(nèi)含有一個、兩個或三個-O-、-S-、-N(R12)-(尤其是-NH-或-N(CH3)-)或-C(O)-基團，更特別地是可選被取代的吡咯烷基、咪唑烷基、哌啶基(例如N-甲基哌啶基)、嗎啉基、硫嗎啉基或哌嗪基，或者R10a是可選被取代的雜芳族基團，尤其是五-或六-元單環(huán)雜芳族基團，其中含有一個、兩個、三個或四個選自氧、硫或氮原子的雜原子，例如可選被取代的吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、三唑基、吡啶基、嘧啶基、三嗪基、噠嗪基或吡嗪基。特別優(yōu)選的就在此前所述的-Het基團上的可選取代基包括羥基(-OH)和羧基(-CO2H)或者剛才關(guān)于基團Cy1所述的那些優(yōu)選的可選取代基，尤其是當Cy1是環(huán)烷基時。
在一組特別優(yōu)選的式(1)化合物中，Cy1是可選被取代的苯基，尤其是可選地被一個、兩個或三個取代基取代的苯基，其中至少一個、優(yōu)選兩個取代基位于連接Cy1與式(1)化合物其余部分的鍵的鄰位。特別優(yōu)選的鄰位取代基包括鹵原子(尤其是氟或氯原子)或者C1-3烷基(尤其是甲基)、C1-3烷氧基(尤其是甲氧基)、鹵代C1-3烷基(尤其是-CF3)、鹵代C1-3烷氧基(尤其是-OCF3)或氰基(-CN)。在這類化合物中，第二或第三可選取代基當存在于除環(huán)Cy1鄰位以外的其他位置時，可以優(yōu)選地是原子或基團-R10a或-L6Alk5(R10a)r，正如本文所一般和確切描述的。在另一種優(yōu)選方案中，Cy1苯基可以具有連接Cy1與式(1)化合物其余部分的鍵的對位取代基。具體的對位取代基包括剛才所述的那些特別優(yōu)選的鄰位取代基。若需要的話，對位取代基可以與剛才提到的其他鄰位或間位取代基共存。
Cy1上具體取代基的實例包括鹵素(尤其是氟或氯)和C1-4烷基(尤其是甲基)。
具體Cy1基團包括苯基、氟苯基、氯苯基、甲基苯基和環(huán)丙基。
式(1)化合物中特別優(yōu)選的Ar芳族基團包括可選被取代的苯基。特別優(yōu)選的雜芳族基團包括可選被取代的單環(huán)雜芳族基團，尤其是可選被取代的五-或六-元雜芳族基團，其中含有一個、兩個、三個或四個選自氧、硫或氮原子的雜原子。特別優(yōu)選的可選被取代的單環(huán)雜芳族基團包括可選被取代的呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基和三嗪基。
特別優(yōu)選的可能存在于Ar芳族或雜芳族基團上的可選取代基包括如上所定義的原子或基團-R10a或-L6Alk5(R10a)r。特別有用的可選取代基包括鹵原子(尤其是氟、氯或溴原子)或者C1-6烷基(尤其是C1-3烷基，更特別地是甲基)或鹵代C1-6烷基(尤其是氟代C1-6烷基，更特別地是-CF3基團)或C1-6烷氧基(尤其是甲氧基、乙氧基、丙氧基或異丙氧基)或鹵代C1-6烷氧基(尤其是氟代C1-6烷氧基，更特別地是-OCF3基團)或者氰基(-CN)、酯化的羧基(尤其是-CO2CH3或-CO2C(CH3)3)、硝基(-NO2)、氨基(-NH2)、取代的氨基(尤其是-NHCH3或-N(CH3)2)、-COR11(尤其是-COCH3)或-N(R12)COR11(尤其是-NHCOCH3)基團。
式(1)化合物中特別有用的Ar基團包括苯基和單-或二-取代的苯基，其中每一取代基具體地是剛才所定義的-R10a或-L6Alk5(R10a)r原子或基團，尤其是鹵原子或者C1-3烷基、C1-3烷氧基或-CN基團。
Ar上具體取代基的實例包括鹵素(尤其是氟或氯)、氰基和C1-4烷基(尤其是甲基)。
具體Ar基團包括苯基、二氟苯基、(氯)(氟)苯基、(氟)(甲基)苯基、氯苯基、氰基苯基和甲基苯基。
當存在于本發(fā)明化合物中時，Alk2的具體實例包括-CH2-、-CH2CH2-、-C(CH3)2-和-CH(CH3)CH2-。在一種實施方式中，Alk2是-CH2-。在另一種實施方式中，Alk2是-C(CH3)2-。
適宜地，R1是甲基。
適宜地，R2是氫或甲基。適宜地，R3是氫或甲基。在一種實施方式中，R2和R3都是氫。在另一種實施方式中，R2和R3都是甲基。
本發(fā)明化合物中，可以選擇m以改變環(huán)的大小，其中除了氮原子以外，環(huán)中還具有最少3個碳原子至多達6個碳原子。特別有利的環(huán)是其中m是整數(shù)1或2的那些。
在優(yōu)選的實施方式中，m是整數(shù)2。在另一種實施方式中，m是整數(shù)1。在進一步的實施方式中，m是整數(shù)3。
在確切的實施方式中，p是整數(shù)1。在另一種實施方式中，p是整數(shù)2。
每一取代基Rd可以存在于任意環(huán)碳原子上。在一類確切的本發(fā)明化合物中，存在一個或兩個Rd取代基。
適合的Rd值包括-OH、-(Alk2)OH、-(Alk2)OR1、-NR2R3和-(Alk2)NR2R3。
詳細的Rd值包括-OH、-CH2OH、-C(CH3)2OH、-CH2OCH3、-NH2、-N(CH3)2和-CH2NH2。
代表性Rd值包括-OH、-(Alk2)OH和-(Alk2)OR1。
說明性Rd值包括-OH、-CH2OH、-C(CH3)2OH和-CH2OCH3。
確切的Rd取代基包括-OH、-CH2OH、-CH(CH3)OH和-C(CH3)2OH基團。
特別有用的本發(fā)明化合物包括下文實施例所述每一化合物及其鹽、溶劑化物、水合物和N-氧化物。
根據(jù)本發(fā)明的化合物是p38激酶、包括其所有同種型和剪接變體的有力的選擇性抑制劑。更具體地，本發(fā)明化合物是p38α、p38β和p38β2的抑制劑。采用試驗可以簡單地測定化合物以這種方式發(fā)揮作用的能力，例如下文實施例所述那些試驗。
式(1)化合物可用于調(diào)控p38激酶的活性，尤其是可用于預(yù)防和治療人類或其他哺乳動物中p38激酶-介導(dǎo)的任意疾病或障礙。本發(fā)明延及這樣一種用途和這些化合物用于制造治療這類疾病或障礙的藥物的用途。進一步地，本發(fā)明延及對人給予有效量的p38抑制劑，用于治療任意這類疾病或障礙。
本發(fā)明還延及預(yù)防或治療人類或其他哺乳動物中p38激酶在其中扮演角色的任意疾病或障礙，包括由過度或未受調(diào)控的促炎性細胞因子產(chǎn)生(例如包括過度或未受調(diào)控的TNF、IL-1、IL-6和IL-8產(chǎn)生)所導(dǎo)致的病癥。本發(fā)明延及這樣一種用途和這些化合物用于制造治療這類細胞因子-介導(dǎo)的疾病或障礙的藥物的用途。進而，本發(fā)明延及對人類給予有效量的p38抑制劑，用于治療任意這類疾病或障礙。
p38激酶在其中直接或者經(jīng)由促炎性細胞因子(包括細胞因子TNF、IL-1、IL-6和IL-8)扮演角色的疾病或障礙非限制性地包括自體免疫疾病、炎性疾病、破壞性骨障礙、增殖性障礙、神經(jīng)變性障礙、病毒疾病、變態(tài)反應(yīng)、感染性疾病、心臟病發(fā)作、血管生成障礙、中風中的再灌注/局部缺血、血管增生、器官缺氧、心肌肥大、凝血酶-誘導(dǎo)的血小板聚集和與前列腺素內(nèi)過氧化物酶合成酶-2(COX-2)有關(guān)的病癥。
可以預(yù)防或治療的自體免疫疾病包括但不限于類風濕性關(guān)節(jié)炎、炎性腸疾病、潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩氏病、多發(fā)性硬化、糖尿病、腎小球性腎炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬皮病、慢性甲狀腺炎、格雷夫氏病、溶血性貧血、自體免疫性胃炎、自體免疫性嗜中性粒細胞減少、血小板減少、慢性活動型肝炎、重癥肌無力、特應(yīng)性皮炎、移植物抗宿主疾病或者牛皮癬。
本發(fā)明進一步延及確切的自體免疫疾病類風濕性關(guān)節(jié)炎。
可以預(yù)防或治療的炎性疾病包括但不限于哮喘、變態(tài)反應(yīng)、呼吸窘迫綜合征和急性或慢性胰腺炎、可以預(yù)防或治療的破壞性骨障礙包括但不限于骨質(zhì)疏松、骨關(guān)節(jié)炎和多發(fā)性骨髓瘤-相關(guān)性骨障礙。
可以預(yù)防或治療的增殖性疾病包括但不限于急性或慢性粒細胞白血病、卡波西肉瘤、轉(zhuǎn)移性黑素瘤和多發(fā)性骨髓瘤。
可以預(yù)防或治療的神經(jīng)變性疾病包括但不限于帕金森氏病、阿爾茨海默氏病、腦缺血以及由創(chuàng)傷性損傷所導(dǎo)致的神經(jīng)變性疾病。
可以預(yù)防或治療的病毒疾病包括但不限于急性肝炎感染(包括甲型肝炎、乙型肝炎和丙型肝炎)、HIV感染和CMV視網(wǎng)膜炎。
可以預(yù)防或治療的感染性疾病包括但不限于膿毒性休克、膿毒病和志賀氏菌病。
另外，本所導(dǎo)致的病癥發(fā)明p38抑制劑也表現(xiàn)對誘導(dǎo)性促炎性蛋白表達的抑制作用，例如前列腺素內(nèi)過氧化物酶合成酶-2，也稱為環(huán)加氧酶-2(COX-2)，因此可用在治療中。從花生四烯酸衍生的環(huán)加氧酶途徑的促炎性介質(zhì)是由誘導(dǎo)性COX-2酶產(chǎn)生的。COX-2的調(diào)節(jié)將可調(diào)節(jié)這些促炎性介質(zhì)，例如前列腺素，它們影響多種細胞，是多種疾病狀態(tài)和病癥的重要與關(guān)鍵的炎性介質(zhì)。確切而言，這些炎性介質(zhì)在疼痛或水腫中有牽連，例如疼痛受體的敏感化。因此，另外的可以預(yù)防或治療的p38-介導(dǎo)病癥包括水腫、痛覺缺失、發(fā)熱和疼痛，例如神經(jīng)肌肉疼痛、頭痛、牙痛、關(guān)節(jié)炎疼痛和由癌癥所導(dǎo)致的疼痛。
作為p38抑制活性的結(jié)果，本發(fā)明化合物可用于預(yù)防和治療與細胞因子產(chǎn)生有關(guān)的疾病，包括但不限于與TNF、IL-1、IL-6和IL-8產(chǎn)生有關(guān)的那些疾病。
因而，TNF-介導(dǎo)的疾病或病癥例如包括類風濕性關(guān)節(jié)炎、類風濕性脊椎炎、骨關(guān)節(jié)炎、痛風性關(guān)節(jié)炎與其他關(guān)節(jié)炎性病癥、膿毒病、膿毒性休克綜合征、成人呼吸窘迫綜合征、腦型瘧、慢性肺炎性疾病、矽肺、肺肉樣瘤病、骨吸收疾病、再灌注損傷、移植物抗宿主反應(yīng)、同種異體移植物排斥、由感染引起的發(fā)熱與肌痛、繼發(fā)于感染、AIDS、ARC或惡性腫瘤的惡病質(zhì)、瘢痕瘤生成、瘢痕組織生成、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎、pyresis、病毒感染(例如HIV、CMV、流感和皰疹)與獸病毒感染(例如慢病毒感染，包括但不限于馬感染性貧血病毒、山羊關(guān)節(jié)炎病毒、綿羊脫髓鞘性病毒或呼吸困難病毒)或者逆病毒感染(包括貓免疫缺陷病毒、牛免疫缺陷病毒和犬免疫缺陷病毒)。
本發(fā)明化合物還可以用于治療病毒感染，其中這類病毒引發(fā)體內(nèi)TNF產(chǎn)生或者對TNF的增量調(diào)節(jié)作用是敏感的。這類病毒包括因感染的結(jié)果而產(chǎn)生TNF的那些和例如因減少復(fù)制的結(jié)果而對被本發(fā)明TNF抑制性化合物直接或間接抑制敏感的那些。這類病毒包括但不限于HIV-1、HIV-2與HIV-3、巨細胞病毒(CMV)、流感病毒、腺病毒和皰疹族病毒(例如帶狀皰疹和單純性皰疹病毒)。
IL-1-介導(dǎo)的疾病或病癥例如包括類風濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎、風疹性關(guān)節(jié)炎、炎性腸疾病、中風、內(nèi)毒素血和/或中毒性休克綜合征、由內(nèi)毒素誘發(fā)的炎性反應(yīng)、糖尿病、胰腺β-細胞疾病、阿爾茨海默氏病、結(jié)核、動脈粥樣硬化、肌肉退化和惡病質(zhì)。
IL-8-介導(dǎo)的疾病和病癥例如包括以大量嗜中性粒細胞浸潤為特征的那些，例如牛皮癬、炎性腸疾病、哮喘、心、腦與腎再灌注損傷、成人呼吸窘迫綜合征、血栓形成和腎小球性腎炎。與這些疾病中每一種有關(guān)的IL-8產(chǎn)生增加負責嗜中性粒細胞向炎性部位的趨化性。這是由于IL-8促進嗜中性粒細胞趨化性和活化的獨特性質(zhì)(相對于TNF、IL-1和IL-6而言)。因此，抑制IL-8產(chǎn)生將引起嗜中性粒細胞浸潤的直接減少。
已知IL-6和IL-8都是在鼻病毒(HRV)感染期間產(chǎn)生的，它們有助于與HRV感染有關(guān)的感冒發(fā)病和哮喘加重[Turner et al，Clin.Infec.Dis.，1997，26，840；Grunberg et al，Am.J.Crit.Care Med.1997，155，1362；Zhu et al，J.Clin.Invest.1996，97，421]。也已經(jīng)體外證明，肺上皮細胞被HRV感染(代表被HRV感染的原始部位)導(dǎo)致IL-6和IL-8的產(chǎn)生[Sabauste et al，J.Clin.Invest.1995，96，549]。因此，本發(fā)明p38抑制劑可以用于治療或預(yù)防由人鼻病毒感染(HRV)、其他腸病毒、冠狀病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒或腺病毒感染所導(dǎo)致的感冒或呼吸病毒感染。
就預(yù)防或治療p38-或促炎性細胞因子-介導(dǎo)的疾病而言，可以以藥物組合物形式對人類或哺乳動物給予根據(jù)本發(fā)明的化合物，按照本發(fā)明的進一方面，我們提供藥物組合物，它包含式(1)化合物以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。
根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物可以采取適合于口服、口腔、腸胃外、鼻用、局部、眼用或直腸給藥的劑型，或者適合于通過吸入或吹入給藥的劑型。
就口服給藥而言，藥物組合物例如可以采取片劑、錠劑或膠囊劑的劑型，它們可借助常規(guī)手段用藥學(xué)上可接受的賦形劑制備，例如粘合劑(例如預(yù)膠凝化的玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮或羥丙基甲基纖維素)、填充劑(例如乳糖、微晶纖維素或磷酸氫鈣)、潤滑劑(例如硬脂酸鎂、滑石或二氧化硅)、崩解劑(例如馬鈴薯淀粉或羥乙酸鈉)或濕潤劑(例如月桂基硫酸鈉)。可以按照本領(lǐng)域熟知的方法將片劑包衣。口服給藥用液體制備物例如可以采取溶液、糖漿劑或懸液的劑型，或者它們可以呈現(xiàn)干燥產(chǎn)物的形式，在使用前用水或其他適合的載體再生。這類液體制備物可以借助常規(guī)手段用藥學(xué)上可接受的添加劑制備，例如懸浮劑、乳化劑、非水性載體和防腐劑。制備物還可以酌情含有緩沖鹽、矯味劑、著色劑和甜味劑。
可以適當?shù)嘏渲瓶诜o藥用制備物，以便控制性釋放活性化合物。
就口腔給藥而言，組合物可以采取片劑或錠劑的劑型，其按常規(guī)方式配制。
式(1)化合物可以被配制成腸胃外注射給藥的劑型，例如大丸劑注射或輸注。注射用制劑可以呈現(xiàn)單元劑型，例如在玻璃安瓿或多劑容器內(nèi)，例如玻璃小瓶。注射用組合物可以采取在油性或水性載體中的懸液、溶液或乳液等劑型，并且可以含有配制試劑，例如懸浮劑、穩(wěn)定劑、防腐劑和/或分散劑。作為替代選擇，活性成分可以是粉末形式，在使用前用適合的載體再生，例如無菌無熱原的水。
除了上述制劑以外，式(1)化合物還可以被配制成藥庫制備物。這類長效制劑可以通過植入或肌內(nèi)注射給藥。
就經(jīng)鼻給藥或者通過吸入給藥而言，按照本發(fā)明使用的化合物可方便地以氣霧劑噴霧呈遞方式從加壓包裝或霧化器中遞送，并使用適合的推進劑，例如二氯二氟甲烷、三氯氟代甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他適合的氣體或者氣體混合物。
如果需要的話，組合物可以在包裝或分配裝置中被呈遞，其中可以含有一個或多個含有活性成分的單元劑型。包裝或分配裝置可以附有給藥說明書。
就局部給藥而言，按照本發(fā)明使用的化合物可以方便地被配制成適合的軟膏劑，其中活性組分懸浮或溶解在一種或多種藥學(xué)上可接受的載體中。確切的載體例如包括礦物油、液體石油、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯、乳化蠟和水。作為替代選擇，按照本發(fā)明使用的化合物可以被配制成適合的洗劑，其中活性組分懸浮或溶解在一種或多種藥學(xué)上可接受的載體中。確切的載體例如包括礦物油、脫水山梨醇單硬脂酸酯、聚山梨酸酯60、鯨蠟基酯蠟、鯨蠟基醇、苯甲醇、2-辛基十二烷醇和水。
就眼給藥而言，按照本發(fā)明使用的化合物可以方便地被配制成在等滲的、經(jīng)過pH調(diào)節(jié)的無菌鹽水中的微粉化懸液，其中含有或者沒有防腐劑，例如殺細菌劑或殺真菌劑，例如硝酸苯汞、苯扎氯銨或乙酸洗必泰。作為替代選擇，就眼給藥而言，化合物可以被配制成軟膏劑，例如礦脂。
就直腸給藥而言，按照本發(fā)明使用的化合物可以方便地被配制成栓劑。它們可以這樣制備，將活性組分與適合的無刺激性賦形劑混合，所述賦形劑在室溫下是固體，但是在直腸溫度下是液體，因此將在直腸中融化，釋放出活性組分。這類材料例如包括可可脂、蜂蠟和聚乙二醇。
預(yù)防或治療確切病癥所需的本發(fā)明化合物的量將因所選擇的化合物和所治療患者的病癥而異。不過一般而言，每日劑量可以從約100ng/kg至100mg/kg，例如約0.01mg/kg至40mg/kg體重(就口服或口腔給藥而言)；從約10ng/kg至50mg/kg體重(就腸胃外給藥而言)；和從約0.05mg至約1000mg，例如約0.5mg至約1000mg(就經(jīng)鼻給藥或者通過吸入或吹入給藥而言)。
本發(fā)明化合物可以借助大量方法制備，正如下列一般性描述和下文實施例的具體描述。在下列方法說明中，符號Ar、Cy1、Alk1、n、Rd、p、m和Y當用在所描繪的結(jié)構(gòu)式中時被理解為代表上面關(guān)于式(1a)所述那些基團，另有指定者除外。在下述反應(yīng)中，若在最終產(chǎn)物中是所需要的，則可能有必要保護反應(yīng)性官能團，例如羥基、氨基、巰基或羧基，以避免它們參與反應(yīng)?？梢园凑諛藴实膶嵺`使用常規(guī)的保護基團(例如參見Green，T.W.in″Protective Groups in OrganicSynthesis″，John Wiley and Sons，1999)。在有些情形中，去保護可能是式(1)化合物合成中的最終步驟，下文所述根據(jù)本發(fā)明的方法被理解為延及這類保護基團的除去。
因而，按照本發(fā)明的進一方面，其中Y是-C(O)-基團的式(1)化合物可以按照本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的酰胺鍵生成反應(yīng)從式(2)羧酸或式(5)酯制備。這類反應(yīng)列在參考文獻中，例如March′s AdvancedOrganic Chemistry(John Wiley and Sons 1992)、Larock′sComprehensive Organic Transformations(VCH Publishers Inc.，1992)和Comprehensive Organic Functional Group Transformations，ed.Katritzky et al.，volumes 1-8，1984與volumes 1-11，1994(Pergamon)?？梢杂糜诘玫绞?1a)化合物的這類方法的實例列在下列流程1和流程2中，但是不限于這些反應(yīng)。
流程1
因而，式(1a)酰胺可以這樣生成，即在偶聯(lián)試劑(例如碳二亞胺，如1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(EDC)或N，N’-二環(huán)己基碳二亞胺)的存在下，可選地在堿(例如胺，如三乙胺或N-甲基嗎啉)的存在下，使式(2)羧酸鹽(其中M+是金屬抗衡離子，例如鈉或鋰離子，或者作為替代選擇是銨或三烷基銨抗衡離子)與式(3)胺反應(yīng)。這些反應(yīng)可以在溶劑中進行，所述溶劑例如是酰胺溶劑，例如N，N-二甲基甲酰胺(DMF)，或者醚，例如環(huán)狀醚，如四氫呋喃或1，4-二噁烷，或者鹵代溶劑，例如二氯甲烷，反應(yīng)溫度為約環(huán)境溫度至60℃。在另一種工藝中，式(4)五氟苯基酯可以這樣制備，即在偶聯(lián)試劑(例如1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺)的存在下，在溶劑(例如酰胺溶劑，例如DMF)中，在約環(huán)境溫度下，使式(2)羧酸與五氟苯酚反應(yīng)。式(1a)酰胺然后可以這樣制備，即在有機溶劑(例如鹵代烴，如二氯甲烷)中，在約環(huán)境溫度下，可選地在叔胺堿(例如三乙胺或二異丙基乙胺)的存在下，使五氟苯基酯與式(3)胺反應(yīng)。式(2)中間體酸可以這樣制備，即在水和溶劑(例如四氫呋喃或醇，如乙醇)中，在約環(huán)境溫度至回流下，將式(5)酯用堿(例如堿金屬氫氧化物，如氫氧化鈉或氫氧化鋰)水解。
式(1a)酰胺也可以這樣直接從式(5)酯制備，即可選地在溶劑(例如2-乙氧基乙醇)的存在下，在大氣壓下或者在密封試管中在壓力下，與式(3)胺加熱直至胺的回流溫度(流程2)。
流程2 式(5)中間體酯可以借助下列流程3所列方法制備。該流程中，具體顯示了乙酯的制備，但是將被領(lǐng)會到的是，通過簡單地改變酯原料以及酌情地改變?nèi)我夥磻?yīng)條件，可以得到其他酯。
流程3 因而在流程3中，式(5a)或(5b)化合物可以這樣制備，即在鈀催化劑的存在下，使式(6)或(7)化合物與胺ArNH2反應(yīng)。反應(yīng)可以簡便地在溶劑(例如甲苯)中進行，溫度為高溫，例如回流溫度，并使用催化劑(例如三(二亞芐基丙酮)二鈀(0))，膦配體(例如2，2’-雙(二苯膦基)-1，1’-聯(lián)萘)和堿(例如碳酸銫)。若需要的話，可以采用可供替代的反應(yīng)條件，例如文獻所述[Luker et al.Tet.Lett.(2001)41，7731；Buchwald S.L.J.Org.Chem.(2000)65 1144；Hartwig J.F.Angew.Chem.In.Ed.Engl.(1998)37，2046]。
式(7)中間體可以這樣制備，即使式(8)化合物與式Cy1(Alk1)nZ烷基化劑反應(yīng)，其中Z是離去基團，例如鹵原子，例如氯、溴或碘原子，或者磺酰氧基，例如烷基磺酰氧基，例如三氟甲磺酰氧基，或芳基磺酰氧基，例如苯磺酰氧基。
反應(yīng)可以這樣進行，即在溶劑(例如取代的酰胺，如二甲基甲酰胺)的存在下，可選地在堿(例如無機堿，例如氫化鈉，或者有機堿，例如有機胺，例如環(huán)狀胺，例如1，5-二氮雜二環(huán)[4.3.0]壬-5-烯，或者與樹脂鍵合的有機胺，例如與樹脂鍵合的2-叔丁基亞氨基-2-二乙氨基-1，3-二甲基-全氫-1，3，2-二氮雜磷雜環(huán)己三烯(phosphorine)(PS-BEMP))的存在下，在高溫下，例如80至100℃。
式(6)中間體可以這樣制備，即使式(8)化合物與式Cy1B(OH)2代硼酸反應(yīng)，其中Cy1是芳基或雜芳基。反應(yīng)可以這樣進行，即在有機溶劑(例如鹵代烴，例如二氯甲烷或二氯乙烷)中，在銅試劑(例如銅(I)鹽，例如CuI，或者例如銅(II)試劑，例如乙酸銅(II))的存在下，可選地在氧化劑(例如2，2，6，6-四甲基哌啶-1-氧化物或吡啶-N-氧化物)的存在下，可選地在堿(例如有機胺，例如烷基胺，例如三乙胺，或芳族胺，例如吡啶)的存在下，在約環(huán)境溫度至回流溫度的溫度下進行(例如參見Chan，D.T.et al Tetrahedron Letters，1998，2933；Lam，P.Y.S.et al，Tetrahedron Letters，2001，3415)。
其中Cy1是芳基或雜芳基的式(6)中間體還可以這樣制備，即適當被活化的芳基或雜芳基鹵化物與式(8)化合物進行親核芳族取代。反應(yīng)可以這樣進行，即在二烷基酰胺溶劑(例如二甲基甲酰胺)中，在堿(例如金屬氫化物，例如氫化鈉)的存在下，在約環(huán)境溫度至100℃的溫度下。適當被活化的芳基或雜芳基鹵化物是具有吸電子取代基的那些，所述取代基例如硝基、氰基或酯基，例如氯-或氟-硝基苯或2-氯-5-硝基吡啶。作為替代選擇，含氮雜芳基鹵化物可以被N-氧化作用活化以進行親核取代，例如2-氯吡啶N-氧化物。
將被領(lǐng)會到的是，如果需要的話，剛才所述反應(yīng)可以按相反順序進行，從而首先用ArNH2與式(8)中間體進行胺化，繼之以烷基化/芳基化，得到式(5)化合物?？赡苡斜匾谶@些反應(yīng)過程期間保護式(8)化合物的氮官能團。這類保護可以借助O-烷基化作用實現(xiàn)，其中使用烷基鹵化物，例如環(huán)丙基甲基溴，或芳基烷基溴化物，例如芐基溴，如流程4所示。
流程4 O-烷基化反應(yīng)可以這樣進行，即在有機溶劑、例如二甲基甲酰胺中，在堿(例如無機堿，例如Cs2CO3，或者有機堿，例如胺，例如環(huán)狀胺，例如1，5-二氮雜二環(huán)[4.3.0]壬-5-烯)的存在下，在高溫下，例如80℃至100℃進行，得到式(13)化合物。然后可以如前文所述在鈀催化下進行被保護的化合物(13)與ArNH2的反應(yīng)，得到式(14)化合物。然后可以這樣實現(xiàn)去保護，即在高溫、例如回流溫度下，將這種化合物在醇、例如甲醇中的溶液用無機酸(例如濃HCl)處理，得到式(15)化合物。
作為替代選擇，若采用芐基保護，則該基團可以這樣被還原性除去，即在高壓氫下，在約環(huán)境溫度至60℃的溫度下，將化合物(14)在有機溶劑、例如EtOH中的溶液用鈀或鉑催化劑(例如披鈀碳或PtO2)處理。式(15)化合物然后可以如前文所述經(jīng)歷烷基化/芳基化反應(yīng)，得到式(5)化合物。
式(8)吡啶酮中間體可以這樣從式(9)吡啶N-氧化物制備，即先后在高溫、例如回流溫度下，與酸酐(例如乙酸酐)反應(yīng)，繼之以在溶劑(例如醚，例如環(huán)狀醚，例如四氫呋喃)中，在約環(huán)境溫度下，與無機堿(例如碳酸鹽，例如含水碳酸鉀)反應(yīng)。作為替代選擇，反應(yīng)可以這樣進行，即在0℃至環(huán)境溫度條件下，使用含三氟乙酸酐的二甲基甲酰胺(例如參見Konno et al.，Heterocycles(1986)24，2169)。
式(9)吡啶N-氧化物可以這樣生成，即在酸、例如乙酸的存在下，在高溫、例如約70℃至80℃下，使用氧化劑、例如過氧化氫氧化式(10)吡啶，或者作為替代選擇，可以在溶劑(例如鹵代烴，例如二氯甲烷，或者醇，例如叔丁醇)中，在環(huán)境溫度至回流溫度的溫度下，與過酸(例如過乙酸或間-氯過苯甲酸)反應(yīng)。
流程3中的式(10)中間體吡啶可以借助標準方法得到，例如通過Sandmeyer反應(yīng)。因此，例如，式(10)溴化物可以這樣制備，即在溶劑(例如腈，例如乙腈)的存在下，在約0至約65℃的溫度下，將式(11)芳基胺用一種亞硝酸烷基酯和銅鹽處理，前者例如亞硝酸叔丁酯，后者例如溴化銅(II)。
式(11)胺可以這樣生成，從式(12)2-鹵代吡啶-3-甲腈開始，與試劑、例如2-巰基乙酸乙酯反應(yīng)。反應(yīng)可以這樣進行，即在溶劑(例如取代的酰胺，例如N，N-二甲基甲酰胺，或者醚，例如環(huán)狀醚，例如四氫呋喃，或者醇，例如乙醇)的存在下，在堿(例如無機堿，例如碳酸鈉或氫化物，例如氫化鈉，或者有機堿，例如1，5-二氮雜二環(huán)[4.3.0]壬-5-烯或三烷基胺，例如三乙胺)的存在下，在約0℃與100℃之間的溫度下進行。甲腈原料是容易獲得的，或者可以利用標準工藝從已知化合物得到。
在另一種方法中，式(5a)中間體酯可以借助流程5所列反應(yīng)制備。在下列流程中，R20代表酯或腈，LG代表離去基團，例如鹵原子，例如氯或溴，或者磺酰氧基，例如烷基磺酰氧基，例如三氟甲磺酰氧基，或芳基磺酰氧基，例如對-甲苯磺酰氧基。
流程5 因而在反應(yīng)流程的步驟(A)中，可以使式(17)或(18)化合物與式(19)硫代酰胺反應(yīng)，其中Rx是可選被取代的烷基，例如甲基，W是氫原子、金屬離子或胺鹽。反應(yīng)可以在堿的存在下進行。適當?shù)膲A可以包括但不限于鋰堿，例如正丁基或叔丁基鋰或者二異丙氨基鋰(LDA)；硅氮烷，例如六甲基二硅氮烷基鋰(LiHMDS)或六甲基二硅氮烷基鈉(NaHMDS)；碳酸鹽，例如碳酸鉀；醇化物，例如乙醇鈉、甲醇鈉或叔丁醇鉀；氫氧化物，例如NaOH；氫化物，例如氫化鈉；有機胺，例如三乙胺或二異丙基乙胺；或者環(huán)狀胺，例如N-甲基嗎啉或吡啶。反應(yīng)可以在有機溶劑(例如酰胺，例如取代的酰胺，例如N，N-二甲基甲酰胺；醚，例如環(huán)狀醚，例如四氫呋喃或1，4-二噁烷；醇，例如甲醇、乙醇或丙醇；或者乙腈)中進行，溫度為從環(huán)境溫度至回流溫度。在該方法的一個確切方面，反應(yīng)是這樣實現(xiàn)的，即使用醇化物堿，尤其是乙醇鈉或甲醇鈉，在醇溶劑、尤其是乙醇中，在回流溫度下進行。
式(17)中間體若不是商業(yè)上可獲得的，則可以利用標準方法制備(例如參見Mir Hedayatullah，J.Heterocyclic Chem.，18，339(1981))。類似地，式(18)中間體若不是商業(yè)上可獲得的，也可以利用標準方法制備。例如，它們可以這樣就地制備，即使乙酸酯、例如乙酸乙酯與堿、例如甲醇鈉反應(yīng)，繼之以加入甲酸酯，例如甲酸甲酯。
按照相似的方式，式(19)中間體如果不是商業(yè)上可獲得的，那么可以利用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法制備(例如參見Adhikari et al，Aust.J.Chem.，52，63-67，(1999))。例如，可以在堿、例如NaHMDS的存在下，在適合的溶劑、例如四氫呋喃中，可選地在低溫下，例如約-78℃，使式Cy1NCS異硫氰酸酯與乙腈反應(yīng)。根據(jù)基團Cy1的屬性，式(19)中間體可以是就地制備的，例如利用本文所述方法，隨后加入式(17)或(18)化合物。
在這種方法的過程期間，可能生成式(20)中間體。如果需要的話，可以在步驟(A)結(jié)束時分離該中間體，隨后與中間體(21)反應(yīng)，生成所需的胺(22)。不過在有些情形中，不分離式(20)中間體可能是有利的，利用步驟(A)的反應(yīng)混合物可以直接進行反應(yīng)(B)。
如果在該方法第二階段期間使用不同的溶劑，那么可能有必要在進行第二階段之前在真空中蒸發(fā)來自該方法第一階段的溶劑。一旦蒸發(fā)，則來自步驟(A)的粗固體可以直接用于下一階段，或者可以純化，例如結(jié)晶，得到分離的中間體，例如式(20)化合物。
在該方法的步驟(B)期間，可以向反應(yīng)混合物或者來自步驟(A)的粗固體或純化產(chǎn)物在適合溶劑中的溶液加入式(21)中間體。適合的溶劑包括但不限于酰胺，例如取代的酰胺，例如二甲基甲酰胺；醇，例如乙醇、甲醇或異丙醇；醚，例如環(huán)狀醚，例如四氫呋喃或1，4-二噁烷；或者乙腈。反應(yīng)可以在環(huán)境溫度至回流溫度的溫度下進行。
在步驟(B)的過程期間，可以觀察到式(24)中間體 或者甚至分離出來，這取決于基團R20的屬性。式(24)中間體可以利用上述方法轉(zhuǎn)化為式(22)化合物。在這種情形中，可能有必要加入堿，目的是使反應(yīng)進行完全。適當?shù)膲A包括碳酸鹽，例如碳酸銫或碳酸鉀；醇化物，例如叔丁醇鉀；氫化物，例如氫化鈉；或者有機胺，例如三乙胺或二異丙基乙胺；或者環(huán)狀胺，例如N-甲基嗎啉或吡啶。
式(22)胺可以借助標準方法轉(zhuǎn)化為式(23)溴化物，例如通過Sandmeyer反應(yīng)，如前文關(guān)于式(11)化合物所述。然后可以借助已經(jīng)描述過的鈀催化胺化反應(yīng)從這些溴化物制備式(5a)化合物。
將被領(lǐng)會到的是，式(21)中間體若不是商業(yè)上可獲得的，則可以利用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標準方法加以制備。例如，利用技術(shù)人員已知的條件可以將醇基團轉(zhuǎn)化為離去基團，例如鹵原子或磺酰氧基。例如，可以在鹵代烴、例如二氯甲烷中，使醇與亞硫酰氯反應(yīng)，得到對應(yīng)的氯化物。還可以在反應(yīng)中使用堿，例如三乙胺。
只要R20是-CN，可以從流程5所描繪的反應(yīng)流程制備的式(23a)腈是可用于合成式(25a)中間體羧酸的中間體。該反應(yīng)可以這樣進行，即在醇溶劑、例如甲醇或乙醇中，在回流下，將腈(23a)用堿(例如堿金屬氫氧化物，例如2M氫氧化鈉水溶液)進行水解。
將被領(lǐng)會到的是，諸如(17)、(18)、(19)或(21)等中間體如果不是商業(yè)上可獲得的，那么也可以借助本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法、按照例如下述參考文獻所述工藝加以制備Rodd′s Chemistry of CarbonCompounds，Volumes 1-15 and Supplementals(Elsevier SciencePublishers，1989)，F(xiàn)ieser and Fieser′s Reagents for OrganicSynthesis，Volumes 1-19(John Wiley and Sons，1999)，Comprehensive Heterocyclic Chemistry，Ed.Katritzky et al，Volumes 1-8，1984 and Volumes 1-11，1994(Pergamon)，Comprehensive Organic Functional Group Transformations，Ed.Katritzky et al，Volumes 1-7，1995 Pergamon)，ComprehensiveOrganic Synthesis，Ed.Trost and Flemming，Volumes 1-9，(Pergamon，1991)，Encyclopedia of Reagents for OrganicSynthesis Ed.Paquette，Volumes 1-8(John Wiley and Sons，1995)，Larock′s Comprehensive Organic Transformations(VCH PublishersInc.，1989)和March′s Advanced Organic Chemistry(John Wiley andSons，1992)。
在另一種方法中，式(1a)酰胺可以借助下列流程6所述反應(yīng)制備。
流程6 因而，式(25)或(25a)酸可以這樣轉(zhuǎn)化為式(27)酰胺，即按照與前面關(guān)于化合物(2)向式(1a)酰胺轉(zhuǎn)化所述相同的方式，在偶聯(lián)試劑的存在下，與式(3)胺反應(yīng)。作為替代選擇，該羧酸可以這樣轉(zhuǎn)化為式(26)酰氯，即可選地在催化量DMF的存在下，在溶劑(例如鹵代烴，例如二氯甲烷，或者醚，例如環(huán)狀醚，例如四氫呋喃)中，在約環(huán)境溫度下，與氯化劑、例如草酰氯反應(yīng)；或者通常在溶劑中，例如甲苯，在回流溫度下，與氯化劑反應(yīng)，例如亞硫酰氯。所得酰氯然后可以與式(3)胺在溶劑(例如鹵代烴，例如二氯甲烷)中，在胺堿、例如三乙胺的存在下，在約環(huán)境溫度下反應(yīng)，得到式(27)酰胺。然后可以利用前面流程1所述鈀催化的芳基化工藝，從式(27)酰胺制備式(1a)酰胺。
在上述反應(yīng)過程期間，可能有利或必要的是保護可能存在的Rd取代基?？梢园凑諛藴实膶嵺`使用常規(guī)的保護基團(例如參見Green，T.W.in″Protective Groups in Organic Synthesis″，John Wiley and Sons，1999)。在有些情形中，去保護可能是式(1a)化合物合成中的最終步驟，下文所述根據(jù)本發(fā)明的方法被理解為延及這類保護基團的除去。
按照本發(fā)明的進一方面，其中Y是-S(O)2-基團的式(1)化合物可以借助流程7所列途徑制備。
流程7 因而，式(29)化合物可以這樣得到，即在溶劑(例如醚，例如環(huán)狀醚，例如四氫呋喃)中，在約0℃的溫度下，使式(28)化合物與金屬氨基化物堿、例如雙(三甲代甲硅烷基)氨基鈉反應(yīng)，然后加入二碳酸二叔丁酯在溶劑、例如四氫呋喃中的溶液，在環(huán)境溫度下攪拌。然后可以借助下列反應(yīng)順序制備式(1)化合物。在溶劑(例如醚，例如環(huán)狀醚，例如四氫呋喃)中，在約-78℃的溫度下，將式(29)化合物用堿(例如烷基鋰，例如正丁基鋰)處理。向反應(yīng)混合物通入二氧化硫氣體，然后使反應(yīng)物升溫至室溫。在真空中除去溶劑，將粗產(chǎn)物溶于溶劑(例如鹵代烴，例如二氯甲烷)中，在約環(huán)境溫度下將混合物用氯化試劑、例如N-氯琥珀酰亞胺處理。然后可以向反應(yīng)混合物加入式(3)胺，生成式(30)化合物，其中R＝叔丁氧羰基。式(1)磺酰胺然后可以這樣制備，即在溶劑(例如鹵代烴，例如二氯甲烷)中，將式(30)化合物用酸(例如無機酸，例如HCl，或者有機酸，例如三氟乙酸)處理。式(28)中間體可以這樣得到，即在溶劑(例如醚，例如環(huán)狀醚，例如四氫呋喃或1，4-二噁烷)中，在50℃直至回流溫度的溫度下，用酸(如無機酸，例如HCl)對式(2)化合物進行脫羧基作用。
若在上述通用方法中，本發(fā)明化合物合成所需的式Cy1(Alk1)nZ烷基化劑、式HSCH2CO2Et試劑和任意其他中間體不是商業(yè)上可獲得的或文獻上已知的，則它們可以容易地借助一種或多種采用取代、氧化、還原或裂解反應(yīng)的標準合成方法從更簡單的已知化合物得到。確切的取代方法包括常規(guī)的烷基化、芳基化、雜芳基化、酰化、硫代?；?、鹵化、磺?；?、硝化、甲?；团悸?lián)工藝。將被領(lǐng)會到的是，這些方法也可以用于得到或者修飾其他中間體，尤其是式(1)化合物，其中在這些化合物中存在適當?shù)墓倌軋F。下文實施例給出了這類方法的具體實例。
因此，例如，可選地在低溫下，例如約-78℃，在溶劑、例如四氫呋喃中，化合物中的芳族鹵素取代基可以用堿(例如鋰堿，例如正丁基鋰或叔丁基鋰)進行鹵素-金屬置換作用，然后用親電試劑猝滅，以引入所需的取代基。因而，例如，使用N，N-二甲基甲酰胺作為親電試劑可以引入甲酰基，使用二甲基二硫化物作為親電試劑可以引入硫甲基，使用醛作為親電試劑可以引入醇基團，使用二氧化碳作為親電試劑可以引入酸。將式ArMgHal格麗雅試劑用二氧化碳猝滅，也可以生成式ArCO2H芳族酸。
借助這種方法生成的式ArCO2H芳族酸和含有酸的化合物一般可以這樣轉(zhuǎn)化為活化衍生物，例如酰鹵，即可選地在惰性溶劑，(例如芳族烴，例如甲苯，或氯代烴，例如二氯甲烷)中，在約0℃至回流溫度的溫度下，與鹵化劑(例如亞硫酰鹵，例如亞硫酰氯；三鹵化磷，例如三氯化磷；五鹵化磷，例如五氯化磷)反應(yīng)，或者可以這樣轉(zhuǎn)化為式ArC(O)N(OMe)Me Weinreb酰胺，即先如剛才所述轉(zhuǎn)化為酰鹵，隨后可選地在堿(例如有機胺，例如三乙胺)的存在下，在惰性溶劑(例如芳族烴，例如甲苯，或氯代烴，例如二氯甲烷)中，在約0℃至環(huán)境溫度的溫度下，與式HN(OMe)Me胺或其鹽反應(yīng)。
式(1)化合物及其中間體中的酯基、例如-CO2Alk6和-CO2R4可以借助酸-或堿-催化的水解作用轉(zhuǎn)化為對應(yīng)的酸(-CO2H)，這依賴于基團Alk6或R4的屬性。酸-或堿-催化的水解作用例如可以這樣實現(xiàn)，即在有機溶劑(例如二氯甲烷)中用有機或無機酸(例如三氟乙酸)處理，或者在溶劑(例如1，4-二噁烷)中用無機酸、例如鹽酸處理，或者在含水醇(例如含水甲醇)中用堿金屬氫氧化物、例如氫氧化鋰處理。
在進一步的實例中，式(1)化合物及其中間體中的-OR6(其中R6代表烷基，例如甲基)可以這樣裂解為對應(yīng)的醇-OH，即在溶劑(例如鹵代烴，例如二氯甲烷)中，在低溫、例如約-78℃下，與三溴化硼反應(yīng)。
醇(-OH)基團也可以這樣得到，即在溶劑、例如乙醇中，在甲酸銨、環(huán)己二烯或氫的存在下，在約環(huán)境溫度至回流溫度下，使用支持物(例如碳)上的金屬催化劑(例如鈀)氫化對應(yīng)的-OCH2R31基團(其中R31是芳基)。在另一種實例中，-OH基團可以這樣生成，即在溶劑、例如甲醇中，使用例如復(fù)合金屬氫化物(例如氫化鋁鋰或硼氫化鈉)還原對應(yīng)的酯(例如-CO2Alk6)或醛(-CHO)。
在另一種實例中，化合物中的醇(-OH)基團可以這樣轉(zhuǎn)化為對應(yīng)的-OR6基團，即在溶劑、例如四氫呋喃中，在膦(例如三苯膦)和活化劑(例如偶氮二羧酸二乙酯、二異丙酯或二甲酯)的存在下，與試劑R6OH偶聯(lián)。
在另一種實例中，化合物中的氨基磺酰氨基(-NHSO2NH2)可以這樣得到，即在有機堿、例如吡啶的存在下，在高溫、例如回流溫度下，使對應(yīng)的胺(-NH2)與磺酰胺反應(yīng)。
在另一種實例中，含有-NHCSR7或-CSNHR7基團的化合物可以這樣制備，即在無水溶劑(例如環(huán)狀醚，例如四氫呋喃)中，在高溫、例如回流溫度下，將對應(yīng)的含有-NHCOR7或-CONHR7基團的化合物用硫雜化試劑、例如Lawesson試劑或P2S5處理。
在進一步的實例中，可以使用醛和還原劑，利用還原性烷基化方法將胺(-NH2)基團烷基化。適合的還原劑包括硼氫化物，例如三乙酰氧基硼氫化鈉或氰基硼氫化鈉。還原作用可以這樣進行，即在溶劑(例如鹵代烴，例如二氯甲烷；酮，例如丙酮；或者醇，例如乙醇)中，若必要的話則在酸、例如乙酸的存在下，在大約環(huán)境溫度下進行。作為替代選擇，可以首先在溶劑(例如芳族烴，例如甲苯)中使胺和醛反應(yīng)，然后在支持物(例如碳)上的金屬催化劑(例如鈀)的存在下，在溶劑(例如醇，例如乙醇)中進行氫化。
在進一步的實例中，式(1)化合物及其中間體中的胺(-NH2)基團可以這樣得到，即在溶劑(例如醇，例如乙醇)中，在環(huán)境溫度下，使對應(yīng)的酰亞胺與肼進行水解反應(yīng)。
在另一種實例中，硝基(-NO2)可以這樣被還原為胺(-NH2)，例如在支持物(例如碳)上的金屬催化劑(例如鈀)的存在下，在溶劑(例如醚，例如四氫呋喃，或者醇，例如甲醇)中使用氫進行催化氫化，或者在酸、例如鹽酸的存在下，使用金屬、例如錫或鐵進行化學(xué)還原。
在進一步的實例中，式(1)化合物及其中間體中的胺(-CH2NH2)基團可以借助腈(-CN)的還原作用得到，例如在金屬催化劑(例如支持物如碳上的鈀，或阮內(nèi)鎳)的存在下，在溶劑(例如醚，例如環(huán)狀醚，例如四氫呋喃，或者醇，例如甲醇或乙醇)中，可選地在氨溶液的存在下，在環(huán)境溫度至回流溫度的溫度下，使用例如氫或者例如在溶劑(例如醚，例如環(huán)狀醚，例如四氫呋喃)中，在0℃至回流溫度的溫度下，使用金屬氫化物、例如氫化鋁鋰進行化學(xué)還原。
在另一種實例中，化合物中的硫原子、例如當存在于基團L1或L2中時，可以在惰性溶劑(例如鹵代烴，例如二氯甲烷)中，在約環(huán)境溫度下，使用氧化劑(例如過酸，例如3-氯過苯甲酸)被氧化為對應(yīng)的亞砜或砜。
在進一步的實例中，式(1)化合物的N-氧化物一般可以通過例如如上關(guān)于式(5)中間體的制備所述氧化對應(yīng)的含氮堿而加以制備。
利用常規(guī)工藝，式(1)化合物的鹽可以借助式(1)化合物與適當?shù)膲A在適合的溶劑或溶劑混合物(例如有機溶劑，例如醚，例如二乙醚，或者醇，例如乙醇)中的反應(yīng)加以制備。
若需要得到式(1)化合物的特定對映體，則可以利用任意適合于拆分對映體的常規(guī)工藝從對應(yīng)的對映體混合物生成所述對映體。
因而，例如，非對映體衍生物、例如鹽可以通過使式(1)對映體混合物(例如外消旋物)和適當?shù)氖中曰衔?例如手性堿)反應(yīng)而制得。然后可以借助任意常規(guī)手段、例如結(jié)晶分離非對映體，回收所需對映體，例如用酸處理，在這種情形中非對映體是一種鹽。
在另一種拆分方法中，可以利用手性高效液相色譜分離式(1)外消旋物。作為替代選擇，如果需要的話，可以使用適當?shù)氖中灾虚g體在上述方法之一中得到特定的對映體。作為替代選擇，特定的對映體可以這樣得到，即進行對映體特異性酶促生物轉(zhuǎn)化作用，例如使用酯酶的酯水解，然后僅從未反應(yīng)的酯對映體中純化對映體純的酸水解產(chǎn)物。
色譜、重結(jié)晶和其他常規(guī)分離工藝也可以用于中間體或終產(chǎn)物，只要這是得到特定的本發(fā)明幾何異構(gòu)體所需要的。
下列實施例闡述本發(fā)明。所有溫度均以℃計。
使用下列縮寫NMM-N-甲基嗎啉EtOAc-乙酸乙酯MeOH-甲醇BOC-叔丁氧羰基DCM-二氯甲烷AcOH-乙酸DIPEA-二異丙基乙胺EtOH-乙醇Pyr-吡啶Ar-芳基DMSO-二甲基亞砜iPr-異丙基Et2O-二乙醚Me-甲基THF-四氫呋喃h-小時MCPBA-3-氯過苯甲酸NBS-N-溴琥珀酰亞胺
FMOC-9-芴基甲氧羰基r.t.-室溫DBU-1，8-二氮雜二環(huán)[5，4-0]十一碳-7-烯EDC-1-[3-(二甲氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽HOBT-1-羥基苯并三唑水合物BINAP-2，2’-雙(二苯膦基)-1，1’-聯(lián)萘DMF-N，N-二甲基甲酰胺dba-二亞芐基丙酮DME-乙二醇二甲醚p.s.i.-磅每平方英寸MTBE-甲基叔丁基醚m.p.-熔點所有NMR都是在300MHz或400MHz下得到的。
化合物的命名借助于Beilstein Autonom，供應(yīng)商為MDLInformation Systems GmbH，Theodor-Heuss-Allee 108，D-60486Frankfurt，Germany，或者借助于ACD Labs Name(v.5.0或v.6.0)，供應(yīng)商為Advanced Chemical Development，Toronto，Canada。
所引用的LCMS保留時間(RT)是在Hewlett Packard 1100 LC/MS上、采用下列方法生成的Phenomenex Luna 3μC18(2)50×4.6mm柱；移動相A＝含0.1％甲酸的水；移動相B＝含0.1％甲酸的MeCN；流速0.9mL/min，柱溫40℃。
梯度
若另有規(guī)定，采用替代LCMS條件(條件B)所引用的LCMS保留時間(RT)是在Hewlett Packard 1100/ThermoFinnigan LCQ DuoLC/MS系統(tǒng)上、采用電子噴射電離和下列方法生成的Phenomenex Luna5μC18(2)100×4.6mm柱；移動相A＝含0.08％甲酸的水；移動相B＝含0.08％甲酸的MeCN；流速3.0mL/min，柱溫35℃。
梯度
中間體13-氨基噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯將2-氯-3-氰基吡啶(330g，2.3mol)、2-巰基乙酸乙酯(361.2g，3.0mol)、碳酸鈉(265g，2.5mol)與EtOH(1.2L)的混合物加熱至回流達4.5小時。然后將反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度，加入到水(15L)中。將所得沉淀物攪拌30分鐘，然后過濾。將濾餅用兩份水洗滌(2×2.5L)，在45℃真空下干燥至恒重，得到標題化合物，為褐色固體(493.1g，93.2％)。
δH(CDCl3)8.68(1H，dd，J4.7，1.2Hz)，7.93(1H，dd，J8.5，1.2Hz)，7.29(1H，dd，J8.5，4.7Hz)，5.90(2H，b)，4.38(2H，q，J7.0Hz)，1.40(3H，t，J7.0Hz).LCMS RT 2.9 minutes，223(M+H)+.
中間體23-溴噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯將中間體1(363.6g)歷經(jīng)兩小時分批加入到在20至25℃溫度下攪拌著的溴化銅(II)(403.3g)、亞硝酸叔丁酯(220.6g)與乙腈(3.6L)的混合物中。將混合物在20℃下攪拌2小時，然后緩慢加入到2M HCl(aq)(4.2L)中。將反應(yīng)混合物漿液過濾，固體用水(500mL)洗滌。合并濾液，用乙酸乙酯(8L)萃取，該乙酸乙酯溶液用2M HCl(aq)(2.2L)洗滌。將固體溶于乙酸乙酯(6L)，該溶液用2M HCl(aq)洗滌兩次(4.4L和2.2L)。然后合并兩份乙酸乙酯溶液，用2M HCl(aq)(2.2L)洗滌，用水洗滌兩次(2×2L)。然后將該乙酸乙酯溶液干燥(MgSO4)，過濾，在40mbar真空和60℃下濃縮，得到固體殘余物。將其打碎，在45℃真空下干燥至恒重，得到標題化合物，為褐色固體(458.5g，97.9％)。
δH(DMSO-d6)8.89(1H，d，J4.7Hz)，8.47(1H，d，J8.6Hz)，7.71(1H，dd，J8.6，4.7Hz)，4.46(2H，q，J7.2Hz)，1.40(3H，t，J7.2Hz).LCMS RT 3.8 minutes，288(M+H)+.
中間體33-溴噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯N-氧化物在氮下，向中間體2(214g，0.747mol)的DCM(2140mL)漿液歷經(jīng)0.5小時分批加入70％mCPBA(240g，0.97mol)。然后將反應(yīng)物在室溫下攪拌18小時。將反應(yīng)混合物用水(800mL)猝滅，用10％w/v碳酸鈉溶液(1250mL)調(diào)節(jié)pH至8.5。除去堿性水層，有機層用水洗至pH7。在真空中濃縮有機層，回收粗標題產(chǎn)物，為黃褐色固體。將粗產(chǎn)物懸浮在MTBE(600mL)中制成漿液，在0-5℃下經(jīng)過1小時進行純化，得到標題化合物(174g，77％)。δH(CDCl3)8.44(1H，dd，J6.2，0.8Hz)，7.87(1H，dd，J8.3，0.8Hz)，7.48(1H，dd，J8.3，6.2Hz)，4.49(2H，q，J7.1Hz)，1.48(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 2.61 minutes，302(M+H)+.
中間體43-溴-6-氧代-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯向在室溫下攪拌的中間體3(95g，0.32mol)的DMF(950mL)懸液歷經(jīng)30分鐘滴加三氟乙酸酐(198g，131mL，0.94mol)(觀察到輕微放熱)。完全加入后，將反應(yīng)物在室溫下攪拌另外45分鐘。在真空下除去過量三氟乙酸酐，濃縮反應(yīng)混合物至原始體積的大約一半。然后將所得深色溶液倒在水(1L)與甲苯(400mL)的混合物上?；旌衔锓胖眉s10分鐘，然后過濾收集沉淀。將沉淀用甲苯洗滌(3×50mL)，然后在50-60℃真空烘箱中干燥。得到標題化合物，為米色固體(68.5g，72.1％)。δH(DMSO-d6)12.20(1H，brs)，7.75(1H，d，J9.0Hz)，6.50(1H，d，J9.0Hz)，4.15(2H，q，J7.1Hz)，1.12(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 2.86 minutes，302(M+H)+.m.p.261.7-268.1℃.
中間體53-溴-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯方法A向3L夾套容器裝入中間體4(100g，0.332mol)、CuI(15.8g，0.083mol)、苯基代硼酸(80g，0.664mol)、吡啶(104g，1.32mol)和乙腈(2.0L)，將混合物在40℃下攪拌。向反應(yīng)混合物劇烈吹入壓縮空氣達6小時。然后關(guān)閉壓縮空氣，將反應(yīng)混合物在40℃下攪拌過夜。第二天重復(fù)相同的過程。大約36小時后，HPLC指示原料向產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化率＞97％。將所得深色反應(yīng)混合物倒在水(1.2L)與濃鹽酸(300mL)的混合物上?；旌衔镉枚燃淄檩腿?2×1.5L)，合并有機層，用2M HCl(aq)洗滌(2×1.5L)。分離有機層，穿過MgSO4墊，在真空中濃縮。使粗殘余物從甲苯(600mL)中重結(jié)晶，得到標題化合物，為米色固體(93.85g，75.0％)。δH(CDCl3)7.82(1H，d，J8.5Hz)，7.70-7.62(3H，m)，7.54-7.42(2H，m)，6.70(1H，d，J8.5Hz)，4.15(2H，q，J7.1Hz)，1.14(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 3.75 minutes，378(M+H)+.MP＝201.6-206.0℃.
方法B(替代工藝)向2-頸圓底燒瓶按順序加入中間體4(302mg，1.00mmol)、乙酸銅(II)(278mg，1.50mmol)、苯基代硼酸(488mg，4.00mmol)、DCM(5mL)和吡啶(158mg，2.00mmol)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌18小時，排除水分。然后將反應(yīng)物用DCM(50mL)稀釋，用2M HCl(aq)(50mL)洗滌，水層用DCM(50mL)反萃取。合并有機層，然后用水(50mL)洗滌，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。將粗產(chǎn)物懸浮在甲醇(12mL)中進行純化，得到標題化合物，為米色固體(270mg，72％)。
δH(CDCl3)7.82(1H，d，J8.5Hz)，7.70-7.62(3H，m)，7.54-7.42(2H，m)，6.70(1H，d，J8.5Hz)，4.15(2H，q，J7.1Hz)，1.14(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT3.75 minutes，378(M+H)+.
中間體63-溴-7-(4-甲基苯基)-6-氧代-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯向燒瓶裝入中間體4(15.1g，0.05mol)、乙酸銅(II)(13.62g，0.075mol)、4-甲苯基代硼酸(14.0g，0.1mol)、DCM(500mL)和吡啶(25mL，0.3mol)，將混合物在室溫下攪拌24小時。將反應(yīng)混合物用2M HCl(2×200mL)、5％NaOH(aq)(200mL)、鹽水(200mL)洗滌，干燥(MgSO4)。在真空中除去溶劑，所得固體用甲醇研制，得到標題化合物，為固體(15.7g)。
δH(CDCl3)7.76(1H，d，J9.7Hz)，7.33(2H，d，J8.3Hz)，7.18(2H，d，J8.3Hz)，6.64(1H，d，J9.7Hz)，4.24(2H，q，J7.1Hz)，2.39(3H，s)，1.26(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 3.86 minutes，394(M+H)+中間體73-溴-7-(4-氟苯基)-6-氧代-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯從中間體4和4-氟苯基代硼酸開始，借助中間體6的方法。白色固體。δH(CDCl3)7.84(1H，d，J 9.7Hz)，7.41-7.37(2H，m)，7.32-7.25(2H，m)，6.72(1H，d，J 9.7Hz)，4.33(2H，q，J 7.1Hz)，1.34(3H，t，J 7.1Hz).LCMS(ES+)RT 3.729 minutes，397.8(M+H)+.
中間體83-溴-7-(4-氯苯基)-6-氧代-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯從中間體4和4-氯苯基代硼酸開始，借助中間體6的方法。
δH(CDCl3)7.86(1H，d，J 9.6Hz)，7.60(2H，d，J 8.5Hz)，7.37(2H，d，J 8.5Hz)，6.74(1H，d，J 9.6Hz)，4.35(2H，q，J 7.1Hz)，1.36(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 3.937 minutes，413(M+H)+.
中間體9
3-溴-7-(3-甲基苯基)-6-氧代-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯從中間體4和3-甲基苯基代硼酸開始，借助中間體6的方法。
δH(CDCl3)7.85(1H，d，J 9.6Hz)，7.51-7.48(1H，m)，7.38-7.27(1H，m)，7.29(2H，br m)，6.75(1H，d，J 9.6Hz)，4.34(2H，q，J 7.1Hz)，2.46(3H，s)，1.35(3H，t，J 7.1Hz).LCMS(ES+)RT 3.865 minutes，393(M+H)+.
中間體113-溴-7-(環(huán)丙基甲基)-6-氧代-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯在0℃下，將氫化鈉(60％礦物油分散體)(3.27g，81.4mmol)分批加入到中間體4(22.3g，74mmol)的DMF(300mL)溶液中。將混合物在室溫下攪拌30分鐘，然后緩慢加入環(huán)丙基甲基溴(10g，74mmol)，將混合物在60℃下加熱過夜。在真空中除去DMF，使殘余物在EtOAc與鹽水之間分配。將有機相干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含0-10％EtOAc的DCM)，得到標題化合物，為黃色固體(12.5g，47％)。δH(CDCl3)7.57(1H，d，J 9.5Hz)，6.47(1H，d，J 9.5Hz)，4.22(2H，q，J 7.0Hz)，3.87(2H，d，J7.1Hz)，1.26-1.19(4H，m)，0.43-0.37(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.80 minutes，357(M+H)+.
中間體123-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯將中間體5(1.00g，2.64mmol)、三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(0.121g，0.132mol)和BINAP(0.164g，0.264mmol)在甲苯(12mL)中攪拌5分鐘。加入4-氟-3-甲基苯胺(0.397g，3.172mmol)和碳酸銫(1.205g，3.701mmol)，在N2下將混合物在回流下加熱24小時。將混合物溶于THF(100mL)，用水洗滌。合并有機層，干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮。殘余物用MeOH研制，得到標題化合物，為白色固體(0.754g)。
δH(DMSO-d6)8.72(1H，s)，7.67-7.60(3H，m)，7.51-7.49(2H，m)，7.18-7.10(3H，m)，7.09-6.99(1H，m)，6.39(1H，d，J 9.7Hz)，4.15(2H，q，J 7.07Hz)，2.22(3H，s)，1.72(3H，t，J 7.08Hz).LCMS(ES+)423(M+H)+.
中間體133-[(2，4-二氟苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯將三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(1.21g，1.32mmol)加入到中間體5(10g，26.4mmol)、碳酸銫(12.05g，37.0mmol)、2，4-二氟苯胺(4.1g，3.23mL，31.7mmol)與BINAP(1.65g，2.64mmol)在無水甲苯(80mL)中的混合物中，在氮下將反應(yīng)物加熱至回流達4天。將反應(yīng)物冷卻，在DCM與水之間分配，將有機相干燥(MgSO4)，在真空中蒸發(fā)。粗殘余物用甲醇研制，得到標題化合物，為白色固體(9.87g)。
δH(CDCl3)8.49(1H，bs)，7.58-7.40(3H，m)，7.32-7.25(2H，m)，7.13-7.04(1H，m)，7.01(1H，d，J9.8Hz)，6.93-6.86(1H，m)，6.82-6.75(1H，m)，6.31(1H，d，J，9.8Hz)，4.20(2H，q，J7.1Hz)，1.23(3H，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 4.06 minutes，427(M+H)+.
3-苯胺基-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯中間體的通用制備工藝中間體酯14-26是按照與中間體13所述相似的工藝制備的。因此，向經(jīng)過烘箱干燥的反應(yīng)燒瓶加入磁攪拌器、適當?shù)娜〈谋桨?1.2equiv.)、無水甲苯、中間體5(1.0equiv.)、碳酸銫(1.4equiv.)、三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(5mol％)和BINAP(10mol％)。在氮下將反應(yīng)物加熱至回流，同時磁攪拌24-48小時。然后將每一反應(yīng)物用DCM稀釋，用水洗滌，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)過二氧化硅純化，用含EtOAc的DCM梯度洗脫，或者作為替代選擇，可以用甲醇或乙酸乙酯研制，得到標題化合物，為固體。
中間體143-苯胺基-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯從中間體5和苯胺得到標題化合物，為白色固體。
δH(CDCl3)8.70(1H，bs)，7.57-7.47(3H，m)，7.33-7.25(4H，m)，7.20-7.10(4H，m)，6.27(1H，d，J9.7Hz)，4.19(2H，q，J7.1Hz)，1.22(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 4.10 minutes，391(M+H)+.
中間體153-[(2-氯苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯從2-氯苯胺和中間體5得到標題化合物，為固體。
δH(CDCl3)8.60(1H，bs)，7.56-7.48(3H，m)，7.40-7.38(1H，m)，7.36-7.32(2H，m)，7.20-7.15(2H，m)，7.14-7.05(1H，m)，7.05-6.98(1H，m)，6.35(1H，d，J9.8Hz)，4.21(2H q，J7.1Hz)，1.23(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 4.38minutes，425(M+H)+.
中間體163-[(3-氰基苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯從3-氰基苯胺和中間體5得到標題化合物，為灰白色固體。
δH(CDCl3)8.58(1H，bs)，7.61-7.43(3H，m)，7.40-7.20(6H，m)，7.14(1H，d，J9.8Hz)，6.38(1H，d，J9.8Hz)，4.19(2H，q，J7.1Hz)，1.23(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 3.78 minutes，416(M+H)+.
中間體173-[(2-氰基苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯從2-氰基苯胺和中間體5得到標題化合物。
δH(CDCl3)8.72(1H，bs)，7.61-7.47(4H，m)，7.43-7.40(1H，m)，7.36-7.31(2H，m)，7.22-7.15(1H，m)，7.11-7.00(2H，m)，6.40(1H，d，J9.8Hz)，4.22(2H，q，J7.1Hz)，1.24(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 3.80 minutes，416(M+H)+.
中間體203-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯從中間體5和3-氯-4-氟苯胺得到標題化合物，為固體。
δH(CDCl3)8.70(1H，s)，7.67-7.59(3H，m)，7.44-7.41(2H，m)，7.24-7.02(4H，m)，6.43(1H，d，J 9.8Hz)，4.28(2H，q，J 7.1Hz)，1.31(3H，t，J7.1Hz).LCMS(ES+)RT 4.245 minutes，443(M+H)+.
中間體223-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-(4-氯苯基)-6-氧代-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯從中間體8和4-氟-3-甲基苯胺得到標題化合物，為固體。
δH(CDCl3)8.72(1H，br s)，7.58-7.38(2H，m)，7.35-7.28(2H，m)，6.99-6.98(4H，m)，6.34(1H，d，J 9.8Hz)，4.28(2H，q，J 7.1Hz)，2.29(3H，s)，1.32(3H，t，J 7.1Hz).LCMS(ES+)RT 4.57minutes，457(M+H)+.
中間體233-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-(3-甲基苯基)-6-氧代-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯從中間體9和4-氟-3-甲基苯胺得到標題化合物，為固體。
δH(CDCl3)8.63(1H，br s)，7.40-7.15(1H，m)，7.30-7.27(1H，m)，7.18-7.10(2H，m)，7.04-6.90(4H，m)，6.27(1H，d，J 9.7Hz)，4.18(2H，q，J7.1Hz)，2.21(3H，s)，2.20(3H，s)，1.21(3H，t，J 7.1Hz).LCMS(ES+)RT4.469 minutes，437(M+H)+.
中間體243-[(3-甲基苯基)氨基]-7-(3-甲基苯基)-6-氧代-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯從中間體9和3-甲基苯胺得到標題化合物，為固體。
δH(CDCl3)8.55(1H，br s)，7.32-7.28(1H，m)，7.27-7.17(1H，m)，7.08-7.00(4H，m)，7.88-7.75(3H，m)，6.15(1H，d，J 9.8Hz)，4.08(2H，q，J 7.1Hz)，2.27(3H，s)，2.17(3H，s)，1.12(3H，t，J 7.1Hz).LCMS(ES+)RT 4.543minutes，419(M+H)+.
中間體263-苯胺基-7-(環(huán)丙基甲基)-6-氧代-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯從中間體11和苯胺得到標題化合物。淡黃色固體。
δH(CDCl3)8.71(1H，br s)，7.29-7.22(2H，m)，7.10-6.97(4H，m)，6.18(1H，d，J 9.7Hz)，4.27(2H，q，J 7.1Hz)，3.94(2H，d，J 7.2Hz)，1.40-1.33(1H，m)，1.32(3H，t，J 7.1Hz)，0.53-0.48(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.79 minutes，369.0(M+H)+.
中間體273-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸鋰將中間體12(0.494g，1.170mmol)溶于EtOH/THF/H2O(2∶1∶1)(20mL)，加熱至80℃，用LiOH.H2O(0.054g，1.287mmol)處理。繼續(xù)反應(yīng)，直至沒有原料剩余(根據(jù)TLC判斷)。在真空中除去溶劑，使殘余物與甲苯共沸，得到標題化合物，為米色固體(0.284g)。
δH(DMSO-d6)7.81-7.75(3H，m)，7.64-7.62(2H，m)，7.41-7.38(1H，d，J 9.55Hz)，7.20-7.15(1H，t，J 9.01Hz)，7.04-7.03(1H，br m)，6.93-6.90(1H，br m)，6.48-6.46(1H，d，J 9.54Hz)，2.35(3H，s).LCMS(ES+)395(M+H)+.
中間體283-[(2，4-二氟苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸鋰按照中間體27的方法，從中間體13(6.34g，14.9mmol)和氫氧化鋰一水合物(686mg，16.4mmol)制備標題化合物。
δH(DMSO-d6)10.04(1H，bs)，7.81(3H，m)，7.69(2H，m)，7.50(1H，m)，7.48(1H，d，J9.6Hz)，7.16(2H，m)，7.56(1H，d，J9.6Hz).
中間體296-氧代-3-(苯基氨基)-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸銨將氫氧化鈉(339mg，8.5mmol，1.1equiv.)的水(20mL)溶液加入到中間體14(3.0g，7.7mmol，1.0equiv.)的乙醇(50mL)懸液中，將混合物在回流下加熱2小時。在真空中除去大部分乙醇，殘余物用飽和氯化銨溶液(aq)(30mL)處理。過濾收集所得固體，用水(2×20mL)、Et2O(2×20mL)洗滌，在室溫真空中干燥，得到標題化合物，為白色固體，定量收率。
δH(DMSO-d6)9.60(1H，bs)，7.65-7.57(3H，m)，7.49-7.46(2H，m)，7.29-7.18(3H，m)，6.97-6.91(3H，m)，6.34(1H，d，J9.6Hz).LCMS(ES+)RT 3.24minutes，363(M+H)+.
中間體307-(4-氯苯基)-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-6-氧代-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸鈉按照類似于中間體29所用的工藝，從中間體22(1.0g，2.1mmol)和氫氧化鈉(100mg，2.6mmol，1.2equiv.)制備標題化合物。不用飽和氯化銨溶液處理，在真空中除去揮發(fā)物，殘余物用EtOAc研制，得到標題化合物，為固體(800mg)。
δH(DMSO-d6)9.74(1H，bs)，7.67(2H，dd，J6.6，2.1Hz)，7.54(2H，dd，J6.6，2.1Hz)，7.24(1H，d，J9.6Hz)，7.20-7.01(1H，m)，6.90-6.80(1H，m)，6.85-6.75(1H，m)，6.31(1H，d，J9.5Hz)，4.68(3H，s).LCMS(ES+)RT 3.51minutes，429(M+H)+.
中間體313-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-(3-甲基苯基)-6-氧代-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸鈉按照中間體30的工藝，從中間體23(1.0g，2.2mmol)和氫氧化鈉(183mg，4.4mmol)制備標題化合物，為固體(1.0g)。
δH(DMSO-d6)7.56(1H，t，J7.7Hz)，7.44(1H，d，J7.7Hz)，7.38-7.24(3H，m)，7.07(1H，t，J9.1Hz)，6.96-6.91(1H，m)，6.88-6.75(1H，m)，6.37(1H，d，J9.6Hz)，2.47(3H，s)，2.25(3H，s).
中間體323-[(3-甲基苯基)氨基]-7-(3-甲基苯基)-6-氧代-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸鈉按照中間體30的工藝，從中間體24(1.0g，2.3mmol)和氫氧化鈉(140mg，3.5mmol)制備標題化合物，為固體(842mg)。
δH(DMSO-d6)9.81(1H，bs)，7.55(1H，t，J7.6Hz)，7.47(1H，d，J12Hz)，7.42-7.24(3H，m)，7.18(1H，t，J7.7Hz)，6.80-6.75(3H，m)，6.37(1H，J9.5Hz)，2.46(3H，s)，2.31(3H，s).
中間體333-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸鈉按照中間體30的工藝從中間體20(1.0g，2.2mmol)和氫氧化鈉(100mg，2.69mmol)制備標題化合物，為固體(680mg)。δH(DMSO-d6)9.78(1H，bs)，7.61-7.59(3H，m)，7.55-7.46(2H，m)，7.30-7.24(2H，m)，7.09-7.06(1H，m)，6.90-6.88(1H，m)，6.34(1H，d，J9.4Hz).LCMS(ES+)RT3.41 minutes，414(M+H)+.
中間體343-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸五氟苯基酯將EDC(0.163g，0.852mmol)加入到中間體27(0.284g，0.710mmol)的DMF(10mL)溶液中，將混合物在室溫下攪拌30分鐘。加入五氟苯酚(0.196g，1.065mmol)，將混合物在室溫下攪拌24小時。在真空中除去溶劑，將殘余物溶于DCM，然后用水洗滌，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，50％己烷/EtOAc)，得到標題化合物，為白色固體(0.226g)。δH(DMSO-d6)8.96(1H，s)，7.07-6.95(5H，br m)，7.55-7.39(4H，br m)，6.29(1H，d，J 9.86Hz)，2.08(3H，s).LCMS(ES+)561(M+H)+.
中間體35
3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸五氟苯基酯按照中間體34的方法從中間體28制備標題化合物，得到該產(chǎn)物，為白色固體。δH(CDCl3)8.66(1H，bs)，7.76(3H，m)，7.58(2H，m)，7.47(1H，m)，7.14(3H，m)，6.54(1H，d，J9.9Hz).LCMS(ES+)RT 4.57 minutes，565(M+H)+.
中間體363-溴-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸在室溫下，將氫氧化鈉(1.83g，45.8mmol，1.1equiv.)加入到中間體(15.75g，41.6mmol，1.0equiv.)的乙醇(78mL)與水(78mL)懸液中。然后將反應(yīng)混合物加熱至回流。一旦達到回流，固體產(chǎn)物已進入溶液，HPLC分析表明完全轉(zhuǎn)化為酸。然后將反應(yīng)混合物冷卻至～70℃，歷經(jīng)10分鐘加入濃鹽酸(46mL)。使反應(yīng)物冷卻至室溫，過濾收集所得固體，用水洗滌(3×25mL)，在真空中干燥，得到標題化合物，為米色固體(13.81g，97％)。
δH(DMSO-d6)8.13(1H，d，J9.6Hz)，7.92-7.80(3H，m)，7.78-7.74(2H，m)，6.92(1H，d，J9.6Hz).
中間體373-溴-7-(4-甲基苯基)-6-氧代-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸按照中間體36的方法，從中間體6(16.0g，40.3mmol)制備標題化合物，得到該產(chǎn)物，為固體(13.84g)。
δH(DMSO-d6)7.85(1H，d，J9.6Hz)，7.45-7.38(4H，m)，6.65(1H，d，J9.6Hz)，2.42(3H，s).
中間體383-溴-7-(4-氟苯基)-6-氧代-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸將氫氧化鋰一水合物(0.87g，20.8mmol)的水(30mL)溶液加入到中間體7(5.5g，13.9mmol)的二噁烷(100mL)溶液中，將反應(yīng)物在室溫下攪拌4小時。滴加濃鹽酸，直至產(chǎn)物已經(jīng)沉淀出來。過濾收集所得固體，用水(2×30mL)、二乙醚(2×30mL)洗滌，在真空烘箱中干燥，得到標題化合物，為固體(4.65g，91％)。
δH(DMSO-d6)7.66(1H，d，J9.6Hz)，7.43-7.38(2H，m)，7.30-7.24(2H，m)，6.46(1H，d，J9.6Hz).
中間體393-溴-2-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中間體36(10.0g，28.6mmol)與DMF(2滴)的THF(150mL)溶液歷經(jīng)30分鐘經(jīng)由注射器加入草酰氯(3.26mL，37.4mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌另外30分鐘，然后在真空中除去溶劑和過量試劑，得到中間體酰氯，為米色固體。將該酰氯溶于DCM(150mL)，歷經(jīng)45分鐘加入到(R)-2-吡咯烷甲醇(2.88g，28.5mmol)與三乙胺(4.36mL，31.3mmol)在100mL二氯甲烷中的混合物中。完全加入后，將反應(yīng)物在環(huán)境溫度下攪拌1小時。將反應(yīng)混合物倒在水(200mL)上，分離DCM層，水層用DCM(100mL)反萃取。合并有機層，然后用水(200mL)洗滌，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)，得到標題化合物，為亮褐色固體(12.83g)。
δH(CDCl3)7.70(1H，d，J9.6Hz)，7.50-7.60(3H，m)，7.35-7.45(2H，m)，6.75(1H，d，J9.6Hz)，4.25-4.35(1H，m)，4.00(1H，br s)，3.45-3.80(4H，m)，1.52-2.55(4H，m).LCMS(ES+)RT2.52 minutes，433.1(M+H)+.
中間體403-溴-2-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-(4-甲基苯基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中間體37(6.4g，17.5mmol)的DCM(80mL)懸液加入EDC(5.04g，26mmol)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌1小時。加入(R)-2-吡咯烷甲醇(2.6mL，26mmol)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌18小時。將反應(yīng)物用DCM(10mL)稀釋，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。粗殘余物經(jīng)過色譜純化(二氧化硅，含30-50％EtOAc的DCM)，得到標題化合物，為白色固體(3.44g，43％)。δH(CDCl3)7.65(1H，d，J9.6Hz)，7.37(2H，d，J8.2Hz)，7.20-7.19(2H，m)，6.66(1H，d，J9.6Hz)，4.25-4.23(1H，m)，3.80-3.40(4H，m)，2.37(3H，s)，2.13-2.04(1H，m)，1.79-1.53(3H，m).LCMS(ES+)RT 2.92 minutes，449(M+H)+.
中間體413-溴-7-(4-氟苯基)-2-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中間體40所述方法，從中間體38和(R)-2-吡咯烷甲醇制備標題化合物，得到該產(chǎn)物，為固體。LCMS(ES+)RT 2.83分鐘，452(M+H)+.
中間體423-溴-7-苯基-2-({(2R)-2-[(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向1L圓底燒瓶加入中間體39(12.5g，28.8mmol)、二氫吡喃(12.1g，144.8mmol)、對-甲苯磺酸(55mg，0.29mmol)和二氯甲烷(5000mL)。然后將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時。將反應(yīng)混合物倒在水(200mL)、飽和鹽水(100mL)和碳酸氫鈉溶液(100mL)上。分離各層，水層用二氯甲烷(100mL)反萃取。合并有機層，然后用上述含水混合物洗滌，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)至干。經(jīng)過柱色譜純化(270g硅膠)，用乙酸乙酯洗脫，得到標題化合物，為亮褐色固體/泡沫(12.73g)。
δH(DMSO-d6)7.80(1H，d，J9.6Hz)，7.70-7.45(5H，m)，6.60(1H，d，J9.6Hz)，4.50(1H，m)，4.15(1H，br s)，3.35-3.80(6H，m)，1.30-2.00(10H，m).LCMS(ES+)RT 3.65 minutes，519.1(M+H)+.
中間體433-溴-7-(4-甲基苯基)-2-({(2R)-2-[(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中間體42所用工藝，從中間體40(3.44g，7.6mmol)制備標題化合物。得到標題化合物，為亮褐色固體(4.85g)。
δH(CDCl3)7.63(1H，d，J9.6Hz)，7.28(2H，d，J7.8Hz)，7.17(2H，m)，6.63(1H，d，J9.6Hz)，4.48-4.28(2H，m)，3.85-3.30(6H，m)，2.36(3H，s)，2.15-1.70(7H，m)，1.48-1.46(3H，m).LCMS(ES+)RT 3.69 minutes，533(M)+.
中間體443-溴-7-(4-氟苯基)-2-({(2R)-2-[(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中間體42所用工藝，從中間體41(1.0g，2.21mmol)制備標題化合物。得到標題化合物，為亮褐色油(0.95g)。
δH(CDCl3)7.90(1H，d，J9.6Hz)，7.69(2H，m)，7.56(2H，t，J8.7Hz)，6.73(1H，d，J9.6Hz)，4.61-4.57(1H，m)，3.97-3.37(8H，m)，1.97-1.50(9H，m).LCMS(ES+)RT 3.51 minutes，560(M+Na)+.
中間體453-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-苯基-2-({(2R)-2-[(四氫-2H-吡喃-2-基氧基甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向裝有氮入口/出口的干燥500mL 2頸圓底燒瓶加入Cs2CO3(11.2g，31.7mmol)、(+/-)-BINAP(1.53g，2.46mmol)、中間體42(12.73g，24.6mmol)和Pd2(dba)3(1.12g，1.22mol)。向該混合物加入已充分脫氣的無水甲苯(200mL)，然后加入2，4-二氟苯胺(3.49g，27.0mmol)，在氮下將反應(yīng)物在回流下加熱48小時。將反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度，然后倒在1.0M HCl(aq)(300mL)上。用二氯甲烷萃取(2×100mL)，合并有機層，用1.0M HCl(aq)洗滌(2×300mL)，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮，得到褐色的油。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，3∶2乙酸乙酯∶庚烷)，得到標題化合物，為亮黃色固體(7.32g)。
δH(DMSO-d6)8.75(1H，s)，7.75(1H，d，J8.3Hz)，7.70-7.60(3H，m)，7.55-7.43(2H，m)，7.35-7.22(1H，m)，7.05-6.88(2H，m)，6.50(1H，d，J9.6Hz)，4.62(1H，bs)，4.45-4.30(1H，m)，3.65-2.75(6H，m)，1.90-1.20(10H，m).LCMS(ES+)RT 3.01minutes，566(M+H)+.
中間體463-[(3-甲基苯基)氨基]-7-苯基-2-({(2R)-2-[(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中間體45的方法，從中間體42(2.5g，4.84mmol)和間-甲苯胺(0.62mL，5.8mmol)制備標題化合物，得到該產(chǎn)物，為橙色固體(2.27g)。δH(CDCl3)7.76(3H，m)，7.66(3H，m)，7.30(1H，m)，7.00(3H，m)，6.54(1H，d，J9.7Hz)，4.68(1H，m)，4.65(1H，m)，3.90-3.50(6H，m)，2.46(3H，s)，2.10-1.50(10H，m).LCMS(ES+)RT 3.99 minutes，544(M+H)+.
中間體473-[(3-氯苯基)氨基]-7-苯基-2-({(2R)-2-[(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中間體45的方法，從中間體42(1.7g，3.3mmol)和3-氯苯胺(0.42mL，3.9mmol)制備標題化合物，得到該產(chǎn)物，為褐色固體(900mg)。δH(CDCl3)7.66(3H，m)，7.35(3H，m)，7.19(1H，m)，6.94(2H，m)，6.93(1H，m)，6.42(1H，d，J9.67Hz)，4.53(1H，m)，4.48(1H，m)，3.75-3.36(6H，m)，2.00-1.4(10H，m).LCMS(ES+)RT 3.90 minutes，564(M+H)+.
中間體483-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-(4-甲基苯基)-2-({(2R)-2-[(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中間體45的方法從中間體43(1.5g，2.8mmol)和2，4-二氟苯胺(0.35mL，3.3mmol)制備標題化合物，得到該產(chǎn)物，為固體(1.14g，69％)。δH(CDCl3)9.33(1H，bs)，7.39-7.30(2H，m)，7.19-7.14(3H，m)，6.96(1H，dd，J14.6，9.1Hz)，6.84(1H，t，J2.6Hz)，6.73(1H，t，J8.2Hz)，6.35(1H，d，J9.8Hz)，4.48-4.38(2H，m)，3.75-3.30(6H，m)，2.39(3H，s)，1.97-1.50(4H，m)，1.49-1.25(6H，m).
中間體493-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-(4-甲基苯基)-2-({(2R)-2-[(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中間體45的方法，從中間體43(1.5g，2.8mmol)和4-氟-3-甲基苯胺(0.42mL，3.3mmol)制備標題化合物，得到該產(chǎn)物，為固體(879mg)。δH(CDCl3)9.41(1H，bs)，7.48-7.38(2H，m)，7.28-7.13(4H，m)，6.84-6.74(3H，m)，6.30(1H，d，J9.8Hz)，4.46-4.36(2H，m)，3.71-3.25(6H，m)，2.37(3H，s)，2.15(3H，s)，1.96-1.54(6H，m)，1.45-1.40(3H，m).LCMS(ES+)RT 4.21 minutes，576(M+H)+.
中間體507-(4-甲基苯基)-3-[(3-甲基苯基)氨基]-2-({(2R)-2-[(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中間體45的方法，從中間體43(1.5g，2.8mmol)和間-甲苯胺(0.37mL，3.3mmol)制備標題化合物，得到該產(chǎn)物，為固體(1.0g，63％)。
δH(CDCl3)9.29(1H，m)，7.30-7.19(5H，m)，7.09(1H，t，J8.3Hz)，6.78-6.76(3H，m)，6.32(1H，d，J9.7Hz)，4.48-4.36(2H，m)，3.76-3.32(6H，m)，2.39(3H，s)，2.23(3H，s)，1.97-1.58(6H，m)，1.54-1.42(4H，m).
中間體513-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-({(2R)-2-[(四氫-2H-吡喃-2-基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中間體45的方法，從中間體44(0.48g，0.896mmol)和2，4-二氟苯胺(0.11mL，1.08mmol)制備標題化合物，得到該產(chǎn)物，為黃色固體(206mg，39％)。LCMS RT 3.87分鐘，606(M+Na)+。
中間體52
3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-({(2R)-2-[(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中間體45的方法，從中間體44(0.48g，0.896mmol)和3-甲基-4-氟苯胺(0.135g，1.08mmol)制備標題化合物，得到該產(chǎn)物，為固體(90mg)。δH(CDCl3)LCMS RT 3.94分鐘，581(M+H)+。
中間體533-氨基-7-(2-氯苯基)-6-氧代-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-甲腈在-78℃下，將乙腈(10mL)加入到雙(三甲代甲硅烷基)氨基化鈉(100mL，1.0M THF溶液，100mmol)的THF(50mL)溶液中，產(chǎn)生密集的白色沉淀。加入異硫氰酸2-氯苯基酯(7.72g，45.45mmol)，形成褐色溶液。使混合物歷經(jīng)1小時溫熱至室溫，然后用EtOH(50mL)稀釋。加入N，N-二甲基尿嘧啶(6.4g，45mmol)，將混合物在回流下加熱24小時。在真空中除去揮發(fā)物，將殘余物溶于乙腈(100mL)。加入氯乙腈(2.85mL，45mmol)，將混合物在50℃下加熱1小時，加入第二批氯乙腈(2.85mL，45mmol)，繼續(xù)加熱1.5小時。在真空中除去一些乙腈(～50mL)，加入水，以沉淀出產(chǎn)物。濾出褐色固體，用水(50mL)和Et2O(50mL)洗滌，干燥，得到標題化合物，為褐色固體(14.3g，定量)。
δH(DMSO-d6)8.10(1H，d，J 9.7Hz)，7.75-7.73(1H，m)，7.65-7.54(3H，m)，7.14(2H，br s，NH2)，6.54(1H，d，J 9.7Hz).LCMS(ES+)RT 2.97 minutes，302(M+H)+.
中間體543-溴-7-(2-氯苯基)-6-氧代-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-甲腈將中間體53(1.17g，3.88mmol)懸浮在乙腈(20mL)中。加入溴化銅(II)(953mg，4.27mmol)，繼之以亞硝酸叔丁酯(0.64mL，5.43mmol)。將混合物在室溫下攪拌3小時，然后在2M HCl aq(100mL)與EtOAc(100mL)之間分配。將有機層用2M HCl aq(50mL)、2M NaOHaq(50mL)和水(25mL)洗滌，干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮。經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含0-5％EtOAc的DCM)，得到標題化合物，為淡褐色固體(980mg，67％)。
δH(CDCl3)7.70(1H，d，J 9.7Hz)，7.61(1H，dd，J 1.7，7.7Hz)，7.52-7.44(2H，m)，7.34(1H，dd，J 1.7，7.7Hz)，6.70(1H，d，J 9.7Hz).LCMS(ES+)RT 3.56 minutes，365(M+H)+.
中間體553-溴-7-(2-氯苯基)-6-氧代-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸將中間體54(1.86g，5.0mmol)在甲醇(50mL)與2M NaOH aq(30mL)中的混合物在回流下加熱1.5小時。在真空中除去揮發(fā)物，殘余物用2M HCl aq(75mL)處理。將混合物在室溫下攪拌過夜，得到微細的灰白色沉淀。濾出固體，干燥，得到標題化合物，為灰白色固體(1.80g，92％)。δH(DMSO-d6)13.53(1H，br s)，7.75(1H，d，J 9.7Hz)，7.64-7.62(1H，m)，7.56-7.54(1H，m)，7.51-7.42(2H，m)，6.52(1H，d，J 9.7Hz).LCMS(ES+)RT 3.13 minutes，384(35Cl79Br)(M+H)+.
中間體563-溴-7-(2-氯苯基)-2-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮將亞硫酰氯(0.66mL，9.1mmol)加入到中間體55(1.75g，4.55mmol)的氯仿(50mL)懸液中。將混合物在50℃下加熱1小時。加入第二批亞硫酰氯(0.66mL，9.1mmol)，將混合物在50℃下加熱另外1小時，然后在室溫下攪拌過夜，最后在回流下加熱另外1小時，得到溶液。在真空中除去揮發(fā)物，將殘余物溶于DCM(30mL)。加入三乙胺(0.25mL，9.1mmol)和(R)-2-吡咯烷甲醇(0.540mL，5.46mmol)，將溶液在室溫下攪拌3小時。加入DCM(50mL)，將混合物用2M HCl aq(100mL)和2M NaOH aq(100mL)洗滌。將有機相干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮，得到標題化合物，為淡褐色泡沫(2.15g，定量)。
δH(CDCl3)7.70(1H，d，J 9.6Hz)，7.60-7.55(1H，m)，7.48-7.32(3H，m)，6.66(1H，d，J 9.6Hz)，4.28-4.16(1H，br s)，3.70-3.48(5H，m)，2.13-2.09(1H，m)，1.92-1.81(1H，m)，1.79-1.59(2H，m).LCMS(ES+)RT2.91 minutes，467(M+H)+.
中間體573-溴-7-(2-氯苯基)-2-({(2R)-2-[(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮將3，4-二氫-2H-吡喃(2.0mL，22.4mmol)和對-甲苯磺酸一水合物(45mg，5mol％)加入到中間體56(2.10g，4.48mmol)的DCM(25mL)溶液中。將混合物在室溫下攪拌48小時，然后用DCM(50mL)稀釋，用Na2CO3aq(50mL)與鹽水(50mL)的混合物洗滌。將有機相干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮。經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含70％EtOAc的己烷)，得到標題化合物，為黃色固體(2.08g，84％)。
δH(CDCl3)7.69(1H，m)，7.60-7.55(1H，m)，7.50-7.32(3H，m)，6.65(1H，m)，4.50(1H，br m)，4.29(1H，br m)，3.70-3.31(6H，m)，2.06-1.80(4H，m)，1.69-1.40(6H，m).LCMS(ES+)RT 3.61 minutes，551(M+H)+.
中間體587-(2-氯苯基)-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-({(2R)-2-[(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮從中間體57和4-氟-3-甲基苯胺開始，借助中間體45的方法。黃色固體。
δH(CDCl3)9.57(1H，br s)，7.67-7.63(1H，m)，7.54-7.40(3H，m)，7.25(1H，dd，J 1.0，9.8Hz)，6.95-6.85(3H，m)，6.37(1H，dd，J 1.0，9.8Hz)，4.56-4.50(1H，m)，4.48-4.43(1H，m)，3.84-3.40(6H，m)，2.24(3H，s)，2.02-1.45(10H，m).LCMS(ES+)RT 4.05 minutes，596(M+H)+.
中間體597-(2-氯苯基)-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-({(2R)-2-[(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]吡咯烷-1-基}羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮從中間體57和2，4-二氟苯胺開始，借助中間體45的方法。灰白色固體。δH(CDCl3)9.45-9.40(1H，m)，7.64-7.61(1H，m)，7.52-7.39(3H，m)，7.26(1H，d，J 9.8Hz)，7.07-7.01(1H，m)，6.92-6.87(1H，m)，6.82-6.77(1H，m)，6.40(1H，d，J 9.8Hz)，4.53-4.41(2H，m)，3.81-3.37(6H，m)，2.00-1.85(3H，m)，1.82-1.67(1H，m)，1.65-1.32(6H，m).LCMS(ES+)RT4.017 minutes，622.1(M+Na)+.
中間體603-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中間體28(～4.20g)的1，4-二噁烷(10mL)溶液加入2M HCl(aq)(10mL)，將反應(yīng)混合物在70℃下加熱1小時。將反應(yīng)物用水(30mL)稀釋，用EtOAc萃取(3×30mL)，將EtOAc萃取液干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。粗殘余物經(jīng)過二氧化硅色譜純化(含0-5％EtOAc的DCM)，得到標題化合物，為淡黃色固體(2.13g)。δH(CDCl3)7.94(1H，d，J 9.4Hz)，7.64-7.53(3H，m)，7.46(2H，m)，7.45(1H，m)，7.20(1H，m)，6.99(1H，m)，6.48(1H，d，J 9.4Hz)，5.74(1H，s).LCMS(ES+)RT 3.54 minutes，354.9(M+H)+.
中間體61(2，4-二氟苯基)(6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁基酯在0℃下，將雙(三甲代甲硅烷基)氨基化鈉(6.0mL，1.0M THF溶液，6mmol)加入到中間體60(2.0g，5.65mmol)的THF(50mL)溶液中。30分鐘后，加入二碳酸二叔丁酯(1.36g，6.22mmol)，將混合物在室溫下攪拌1小時。使反應(yīng)混合物在EtOAc與鹽水之間分配。水相用EtOAc萃取(x3)，合并有機萃取液，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含10％EtOAc的DCM)，得到標題化合物(1.2g，47％)。δH(CDCl3)7.45(1H，d，J 9.5Hz)，7.43-7.30(3H，m)，7.22-7.19(2H，m)，7.08-7.03(1H，m)，6.76-6.65(2H，m)，6.49-6.45(2H，m)，1.26(9H，s).LCMS(ES+)RT 3.79 minutes，455(M+H)+.
中間體62
(2，4-二氟苯基)(2-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]磺酰基}-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁基酯在-78℃下，將正丁基鋰(0.54mL 2.5M己烷溶液，1.35mmol)加入到中間體61(600mg，1.32mmol)的THF(30mL)溶液中。20分鐘后，向溶液通入二氧化硫氣體達5分鐘。使反應(yīng)混合物升溫至室溫，在真空中除去溶劑。將殘余物溶于DCM(40mL)，加入N-氯琥珀酰亞胺(210mg，1.45mmol)。在室溫下90分鐘后，加入(R)-2-吡咯烷甲醇(146mg，1.45mmol)的DCM(5mL)溶液，將混合物攪拌另外30分鐘。將混合物用DCM稀釋，用鹽水洗滌。將有機相干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含5％至15％EtOAc的DCM)，得到標題化合物(340mg，42％)。δH(CDCl3)7.40-7.34(4H，m)，7.18-7.10(3H，m)，6.74-6.67(1H，m)，6.65-6.58(1H，m)，6.49(1H，d，J 9.7Hz)，3.95(1H，br m)，3.92-3.24(4H br m)，1.77-1.58(5H，br m)，1.27(9H，s).LCMS(ES+)RT 3.55 minutes，618(M+H)+.
中間體633-[(2-氯苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸鈉按照中間體30的工藝，從中間體15(1.5g，3.52mmol)和氫氧化鈉(150mg)制備標題化合物，得到標題化合物，為固體(1.47g)。
δH(DMSO-d6)9.97(1H，bs)，9.56(1H，d，J9.6Hz)，7.23-7.01(2H，m)，7.26(1H，t，J7.0Hz)，7.34(1H，d，J9.5Hz)，7.47-7.13(3H，m)，7.72-7.64(3H，m).LCMS(ES+)RT 3.42 minutes，399(M+H)+.
中間體64外消旋-[1-({3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-基}羰基)吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁基酯向中間體35(300mg，0.53mmol)的DCM(5mL)溶液加入吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁基酯(300mg，1.6mmol)，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌18小時。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含60％乙酸乙酯的異己烷)，得到標題化合物，為黃色的膠(277mg)。NMR δH(CDCl3)7.53(3H，m)，7.19(2H，m)，7.17(1H，d，J9.5Hz)，6.98(1H，m)，6.85(1H，m)，6.73(1H，m)，6.38(1H，d，J9.7Hz)，4.50(1H，bm)，3.76(1H，m)，3.61(2H，m)，3.58(1H，m)，2.10(1H，m)，1.80(1H，m)，1.35(9H，s).LCMS(ES+)RT 3.50 minutes，567(M+H)+.
中間體65[(3S)-1-({3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基)6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-基}羰基)吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁基酯向中間體35(1g，1.77mmol)的DCM(30mL)溶液加入(S)-吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁基酯(363mg，1.95mmol)，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌18小時。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，乙酸乙酯)，得到標題化合物，為白色固體(700mg)。LCMS(ES+)RT 3.56分鐘，567(M+H)+.
中間體66[(3S)-1-({3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-基}羰基)吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁基酯向中間體34(1.0g，1.79mmol)的DCM(30mL)溶液加入(S)-吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁基酯(372mg，2.0mmol)，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌18小時。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含20％EtOAc的DCM)，得到標題化合物，為灰白色固體(1.2g)。NMRδH(CDCl3)9.61(1H，bs)，7.65-7.55(3H，m)，7.44-7.41(2H，m)，7.25(1H，d，J9.7Hz)，6.99-6.85(3H，m)，6.40(1H，d，J9.7Hz)，4.62(1H，m)，4.23(1H，m)，3.86-3.81(1H，m)，3.70-3.66(2H，m)，3.47(1H，dd，J10.3，4.2Hz)，2.27(3H，d，J1.9Hz)，2.18-2.12(1H，m)，1.91-1.85(1H，m)，1.44(9H，s).LCMS(ES+)RT 3.64 minutes，563(M+H)+.
中間體673-[(2-氰基苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸五氟苯基酯將LiOH一水合物(390mg，9.27mmol)的水(50mL)溶液加入到中間體17(3.5g，8.42mmol)的THF(50mL)與EtOH(100mL)懸液中，將混合物加熱至回流達5小時。在真空中除去溶劑，使殘余物與甲苯共蒸發(fā)(x3)，得到中間體3-[(2-氰基苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸鋰，為褐色固體。將該固體溶于DMF(100mL)，加入EDC(2.41g，12.6mmol)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌20分鐘，然后加入五氟苯酚(2.89g，15.7mmol)，然后攪拌另外18小時。在真空中除去DMF，使殘余物在DCM與水之間分配。分離有機層，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含30-100％EtOAc的異己烷)，得到標題化合物，為固體(1.35g)。LCMS(ES+)RT 4.06分鐘，554(M+H)+.
中間體683-溴-7-(4-氟苯基)-6-氧代-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-碳酰氯將亞硫酰氯(5.2mL，71mmol)滴加到中間體38(5.2g，14mmol)的甲苯(150mL)懸液中。然后將反應(yīng)物在回流下加熱3小時，然后使反應(yīng)物冷卻至室溫。在真空中除去溶劑和殘余亞硫酰氯，使所得固體與甲苯共蒸發(fā)(x3)。得到標題化合物，為橙色固體(4.9g)，無需進一步純化即可使用。NMR δH(CDCl3)7.77(1H，d，J9.7Hz)，7.29(4H，m)，6.68(2H，d，J9.7Hz).
中間體693-溴-7-(4-氟苯基)-2-{[(3R)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中間體68(2.5g，6.5mmol)與二異丙基乙胺(1.7mL，9.7mmol)的DCM(100mL)溶液加入(R)-3-羥基吡咯烷(850mg，9.7mmol)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌18小時。將反應(yīng)混合物用水和鹽水洗滌，分離DCM層，干燥(MgSO4)，然后在真空中濃縮，得到標題化合物，為橙色固體(2.65g)。LCMS RT 2.67分鐘，439(M+H)+.
中間體703-溴-7-(4-氟苯基)-2-{[(3S)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中間體68(2.5g，6.5mmol)與二異丙基乙胺(1.7mL，9.7mmol)的DCM(100mL)溶液加入(S)-3-羥基吡咯烷(850mg，9.7mmol)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌18小時。將反應(yīng)混合物用水和鹽水洗滌，分離DCM層，干燥(MgSO4)，然后在真空中濃縮，得到標題化合物，為橙色固體(2.84g)。LCMS RT 2.67分鐘，439(M+H)+.
中間體713-溴-7-(4-氟苯基)-2-{[(3R)-3-(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中間體69(2.65g，6.0mmol)的DCM(80mL)溶液加入對-甲苯磺酸(10mg，0.06mmol)和3，4-二氫-2H-吡喃(2.8mL，30mmol)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌3小時。將反應(yīng)混合物用飽和NaHCO3(aq)(x2)、然后用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含80％EtOAc的異己烷)，得到標題化合物，為白色固體(2.40g)。LCMS RT 3.28分鐘，523(M+H)+.
中間體723-溴-7-(4-氟苯基)-2-{[(3S)-3-(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中間體70(2.65g，6.0mmol)的DCM(80mL)溶液加入對-甲苯磺酸(10mg，0.06mmol)和3，4-二氫-2H-吡喃(2.8mL，30mmol)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌3小時。將反應(yīng)混合物用飽和NaHCO3(aq)(x2)、然后用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含80％EtOAc的異己烷)，得到標題化合物，為白色固體(2.74g)。LCMS RT 3.28分鐘，523(M+H)+.
中間體733-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-{[(3R)-3-(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向經(jīng)過脫氣的中間體71(1.2g，2.30mmol)、三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(210mg，0.23mmol)與(+/-)-BINAP(290mg，0.46mmol)的甲苯(15mL)溶液加入2，4-二氟苯胺(281μL，2.76mmol)和碳酸銫(1.0g，3.22mmol)。將反應(yīng)物在110℃氮下加熱2天。將反應(yīng)混合物用EtOAc(80mL)稀釋，用水、鹽水(x2)洗滌，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含50％EtOAc的異己烷)，得到標題化合物，為褐色固體(876mg)。LCMS RT 3.76分鐘，570(M+H)+.
中間體743-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-{[(3S)-3-(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向經(jīng)過脫氣的中間體72(1.37g，2.63mmol)、三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(120mg，0.13mmol)與(+/-)-BINAP(160mg，0.26mmol)的甲苯(15mL)溶液加入2，4-二氟苯胺(321μL，3.16mmol)和碳酸銫(1.20g，3.68mmol)。在氮下將反應(yīng)物在110℃下加熱18小時。加入另外當量的Pd2(dba)3(60mg，0.065mmol)和(+/-)-BINAP(80mg，0.13mmol)，將反應(yīng)物在回流下加熱另外2天。將反應(yīng)混合物用EtOAc(80mL)稀釋，用水、鹽水(x2)洗滌，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含50％EtOAc的異己烷)，得到標題化合物，為褐色固體(767mg)。LCMS RT 3.74分鐘，570(M+H)+.
中間體753-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-{[(3S)-3-(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向經(jīng)過脫氣的中間體72(1.37g，2.63mmol)、三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(120mg，0.13mmol)與(+/-)-BINAP(160mg，0.26mmol)的甲苯(15mL)溶液加入4-氟-3-甲基苯胺(400mg，3.16mmol)和碳酸銫(1.20g，3.68mmol)。在氮下將反應(yīng)物在110℃下加熱18小時。加入另外當量的Pd2(dba)3(60mg，0.065mmol)和(+/-)-BINAP(80mg，0.13mmol)，將反應(yīng)物在回流下加熱另外2天。將反應(yīng)混合物用EtOAc(80mL)稀釋，用水、鹽水(x2)洗滌，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含50％EtOAc的異己烷)，得到標題化合物，為褐色固體(980mg)。LCMS RT 3.84分鐘，566(M+H)+.
中間體763-溴-7-(2-氯苯基)-2-{[(3S)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中間體56的方法，從中間體55和(S)-3-羥基吡咯烷制備標題化合物。
中間體773-溴-7-(2-氯苯基)-2-{[(3S)-3-(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中間體57的方法，從中間體76和3，4-二氫-2H-吡喃制備標題化合物。NMRδH(CDCl3)7.77(1H，d，J9.6Hz)，7.66-7.61(1H，m)，7.54-7.41(3H，m)，6.73(1H，d，J9.6Hz)，4.69-4.53(1H，m)，4.45-4.43(1H，m)，3.86-3.49(6H，m)，2.17-2.14(2H，m)，1.87-1.69(2H，m)，1.55-1.40(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.45 minutes，539(M+H)+.
中間體787-(2-氯苯基)-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中間體75的方法，從中間體77(883mg，1.64mmol)和4-氟-3-甲基苯胺(267mg，2.13mmol)制備標題化合物。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含10％EtOAc的DCM)，得到標題化合物，為黃色固體(623mg)。NMR δH(CDCl3)9.70(1H，s)，7.68-7.64(1H，m)，7.55-7.41(3H，m)，7.27-7.24(1H，m)，6.96-6.85(3H，m)，6.37(1H，d，J9.8Hz)，4.654.63(1H，m)，4.42-4.40(1H，m)，3.84-3.64(5H，m)，3.51-3.47(1H，m)，2.24(3H，s)，2.16-2.01(1H，m)，1.99-1.92(1H，m)，1.80-1.70(1H，m)，1.68-1.67(1H，m)，1.56-1.49(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.94 minutes，582(M+H)+.
中間體797-(2-氯苯基)-3-[(3-甲基苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中間體75的方法，從中間體77(883mg，1.64mmol)和間-甲苯胺(0.28mL，2.62mmol)制備標題化合物。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含10％EtOAc的DCM)，得到標題化合物，為淡黃色固體(509mg)。
NMRδH(CDCl3)9.65(1H，m)，7.68-4.65(3H，m)，7.39(1H，d，J9.7Hz)，7.11(1H，t，J7.5Hz)，6.90-6.84(3H，m)，6.40(1H，d，J9.8Hz)，4.634.60(1H，m)，4.40-4.38(1H，m)，3.81-3.67(5H，m)，3.65-3.63(1H，m)，2.31(3H，s)，2.17-1.57(5H，m)，1.53(3H，s).LCMS(ES+)RT 3.91 minutes，564(M+H)+.
中間體807-(2-氯苯基)-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中間體75的方法，從中間體77(883mg，1.64mmol)和2，4-二氟苯胺(0.28mL，2.75mmol)制備標題化合物。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含10％EtOAc的DCM)，得到標題化合物，為褐色固體(750mg)。NMRδH(CDCl3)9.66(1H，d，J4.4Hz)，7.68-7.64(1H，m)，7.56-7.41(3H，m)，7.27(1H，d，J8.8Hz)，7.07-7.04(1H，m)，6.94-6.89(1H，m)，6.84-6.80(1H，m)，6.42(1H，d，J9.7Hz)，4.65-4.63(1H，m)，4.40-4.38(1H，m)，3.86-3.61(5H，m)，3.51-3.44(1H，m)，2.07-1.89(2H，m)，1.79-1.77(1H，m)，1.71-1.68(1H，m)，1.59-1.49(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.83 minutes，586(M+H)+.
中間體813-溴-7-(4-甲基苯基)-2-{[(3S)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中間體56的方法，從中間體37和(S)-3-羥基吡咯烷制備標題化合物。NMRδH(CDCl3)7.66(1H，d，J9.6Hz)，7.30(2H，d，J8.1Hz)，7.18(2H，d，J8.1Hz)，6.65(1H，d，J9.6Hz)，4.44(1H，bm)，3.80-3.25(4H，m)，2.37(3H，s)，2.20-1.93(3H，m).LCMS(ES+)RT 2.65 minutes，433(M+H，79Br)+，435(M+H，81Br)+.
中間體82
3-溴-7-(4-甲基苯基)-2-{[(3R)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照中間體56的方法，從中間體37(6.0g，18.0mmol)和(R)-3-羥基吡咯烷(2.0g，27.0mmol)制備標題化合物。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含20％THF的DCM)，得到標題化合物，為白色固體(5.36g)。
δH 7.68(1H，d，J9.6Hz)，7.32(2H，m)，7.20(2H，m)，6.66(1H，d，J9.6Hz)，4.49(1H，bs)，3.78-3.60(3H，m)，2.39(3H，s)，1.97(2H，bs)，1.82(2H，bs).LCMS(ES+)RT 2.64 minutes，433(M+H，79Br)+，435(M+H，81Br)+.
中間體833-溴-7-苯基-2-[(3-羥基氮雜環(huán)丁烷-1-基)羰基]-7H-噻吩并[2，3-b]吡啶-6-酮將中間體36(17.6g，50mmol)懸浮在DCM(150mL)中，向其中加入亞硫酰氯(30mL，411mmol)和DMF(0.5mL)。將混合物在回流下加熱1小時，在此期間固體溶解形成深色溶液。冷卻至環(huán)境溫度后，將溶液在真空中蒸發(fā)至干(30℃/150mBar)。用新鮮的DCM重復(fù)該步驟兩次(2×100mL)。得到中間體酰氯，為斑駁的褐色固體。
在單獨的燒瓶中，將3-羥基氮雜環(huán)丁烷鹽酸鹽(10.9g，100mmol)和二異丙基乙胺(50mL，360mmol)在20-25℃下在1∶1 DCM∶DMF(400mL)中攪拌1小時，然后冷卻至0-5℃。歷經(jīng)1小時向該制備物加入酰氯(19.9g)的DCM(200mL)溶液，將所得橙色-褐色溶液攪拌另外1小時。蒸發(fā)至干(5-100mBar/40℃)后，在40℃下使殘余物在EtOAc(500mL)與水(150mL)之間分配。將有機相用水洗滌兩次(2×100mL)，然后重新蒸發(fā)。在40℃下將殘余物重新懸浮在新鮮的EtOAc(200mL)中，然后過濾。用EtOAc洗滌(3×30mL)和在50℃真空中干燥后，得到標題化合物，為褐色粉末(16.5g，81.5％收率，m.p.199.1℃)。
δH(DMSO-d6)7.87(1H，d，J9.8Hz)，7.65(3H，m)，7.55(2H，m)，6.69(1H，d，J9.8Hz)，5.62(1H，d，J6.5Hz)，4.46(1H，m)，4.30(2H，m)，3.87(2H，br m).LCMS(ES+)RT 2.19 minutes，405(M+H)+.
中間體843-溴-7-苯基-2-[3-(四氫吡喃-2-基氧基)-氮雜環(huán)丁烷-1-羰基]-7H-噻吩并[2，3-b]吡啶-6-酮將對-甲苯磺酸一水合物(0.28g，1.47mmol)加入到中間體83(11.9g，29mmol)的DCM(100mL)懸液中，其中含有3，4-二氫-2H-吡喃(7.5g，89mmol)。攪拌該混合物，直至全部原料溶解，得到橙色溶液，然后在20-25℃下放置過夜。加入飽和NaHCO3(aq)(20mL)以猝滅反應(yīng)，隨后將有機相用水(25mL)洗滌。干燥(Na2SO4)和在真空中除去溶劑后，得到粗產(chǎn)物，為褐色玻璃狀物(22.8g)。在40℃下將該殘余物溶于EtOAc(100mL)，所得溶液冷卻至25℃后接種。一旦已經(jīng)開始結(jié)晶，則進一步降低溫度至0-5℃，攪拌該漿液達1小時。濾出褐色固體，用EtOAc洗滌(2×25mL)，在40℃真空中干燥，得到標題化合物(14.1g，71.2％收率，m.p.162℃)。δH(CDCl3)7.78(1H，d，J9.8Hz)，7.67(3H，m)，7.48(2H，m)，6.73(1H，d，J9.8Hz)，4.70(1H，m)，4.68(1H，m)，4.40(2H，dd)，4.19(2H，m)，3.81(1H，m)，3.50(1H，m)，1.42-1.90(6H，br m).LCMS(ES+)RT 3.31 minutes，489(M+H)+.
中間體853-(4-氟-3-甲基苯基氨基)-7-苯基-2-[3-(四氫吡喃-2-基氧基)氮雜環(huán)丁烷-1-羰基]-7H-噻吩并[2，3-b]吡啶-6-酮將中間體84(2.00g，4.21mmol)、4-氟-3-甲基苯胺(0.58g，4.64mmol)、rac-BINAP(0.26g，0.42mmol)、Pd2(dba)3(0.19g，0.21mmol)、碳酸銫(2.01g，6.17mmol)和甲苯(20mL)裝入經(jīng)過烘箱干燥的燒瓶，在氮氣氛下加熱至回流達2小時。冷卻至室溫后，加入水(20mL)，將該混合物攪拌10分鐘。此時經(jīng)由過濾分離固體，用甲苯(2×5mL)和水(2×5mL)洗滌，在真空中干燥，得到標題化合物(1.89g，84％)。δH(CDCl3)9.62(1H，s)，7.53-7.64(3H，m)，7.38-7.41(2H，m)，7.16-7.20(1H，d)，6.87-6.98(3H，m)，6.36-6.39(1H，d)，4.51-4.60(2H，m)，4.32-4.49(2H，m)，4.04-4.16(2H，m)，3.78-3.85(1H，m)，3.47-3.51(1H，m)，2.25(3H，s)，1.51-1.81(6H，m).LCMS(ES+)，RT 4.19 minutes，534(M+H)+.
中間體86[1-({3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-基}羰基)哌啶-4-基]氨基甲酸叔丁基酯將中間體35(800mg，1.42mmol)、Et3N(0.5mL)與哌啶-4-基氨基甲酸叔丁基酯(354mg，1.70mmol)在DCM(20mL)中的混合物在室溫下攪拌18小時。在真空下濃縮反應(yīng)物，用Et2O研制。經(jīng)過色譜純化(二氧化硅，含2％EtOAc的DCM)，得到標題化合物，為灰白色固體(267mg，32％)。δH(DMSO-d6)8.40(1H，s)，7.87(1H，d，J9.6Hz)，7.7-7.6(3H，m)，7.57-7.53(2H，m)，7.33-7.26(1H，m)，6.98-6.9(2H，m)，6.86-6.83(1H，m)，6.57(1H，d，J9.6Hz)，3.85-3.80(2H，m)，3.40-3.30(1H，m)，2.55-2.50(2H，m)，1.65-1.60(2H，m)，1.38(9H，s)，1.18-1.14(2H，m).LCMS(ES+)RT 3.50 minutes，581(M+H)+.
中間體87[1-({3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-6-氧代-7-苯基-6，7-二氫噻吩并[2，3-b]吡啶-2-基}羰基)氮雜環(huán)丁烷-3-基]氨基甲酸叔丁基酯將中間體35(483mg，0.85mmol)、Et3N(0.5mL)與氮雜環(huán)丁烷-3-基氨基甲酸叔丁基酯(175mg，1.02mmol)在DCM(20mL)中的混合物在室溫下攪拌18小時。在真空下濃縮反應(yīng)混合物，用Et2O研制。得到標題化合物，為黃色固體(386mg，82％)。
δH(DMSO-d6)9.32(1H，s)，7.71-7.62(3H，m)，7.57-7.50(2H，m)，7.45-7.38(1H，m)，7.36(1H，d，J9.7Hz)，7.17-7.10(1H，m)，7.09-7.00(1H，m)，6.47(1H，d，J9.7Hz)，4.60-4.30(3H，m)，3.90-3.80(2H，m)，3.35-3.30(1H，m)，1.40(9H，s).LCMS(ES+)RT 3.58 minutes，553(M+H)+.
中間體883-溴-7-(2-氯苯基)-2-{[(3R)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮從中間體(4.7g，12.2mmol)和(R)-3-羥基吡咯烷(1.13g，13mmol)開始，借助中間體56的方法得到標題化合物，為黃色固體(5.70g，定量)。
δH(CDCl3)7.77(1H，d，J9.6Hz)，7.63-7.60(1H，m)，7.51-7.37(3H，m)，6.70(1H，d，J9.6Hz)，4.51(1H，br m)，3.78-3.53(4H，m)，2.20-1.70(2H，m)，1.60(1H，br s).LCMS(ES+)RT 2.70 minutes，453(M+H)+.
中間體893-溴-7-(2-氯苯基)-2-{[(3R)-3-(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮從中間體88(5.35g，11.8mmol)和3，4-二氫-2H-吡喃(3.3mL，35.4mmol)開始，借助中間體57的方法得到標題化合物，為橙色固體(6.70g，定量)。δH(DMSO-d6)7.91-7.60(5H，m)，6.70(1H，d，J9.6Hz)，4.85-4.83(1H，m)，4.78-4.67(1H，m)，4.34-4.27(1H，m)，3.93-3.40(5H，m)，2.10-1.95(2H，m)，1.85-1.40(6H，m).LCMS(ES+)RT 3.46minutes，537(M+H)+.
中間體907-(2-氯苯基)-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3R)-3-(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮從中間體89(6.35g，11.8mmol)和2，4-二氟苯胺(1.45mL，14.1mmol)開始，借助中間體75的方法得到標題化合物，為淡褐色固體(3.0g，43％)。δH(DMSO-d6)8.99-8.94(1H，m)，7.83-7.79(1H，m)，7.74-7.59(4H，m)，7.39-7.26(1H，m)，7.06-6.93(2H，m)，6.51(1H，d，J9.7Hz)，4.62-4.54(1H，m)，4.23-4.18(1H，m)，3.73-3.50(6H，m)，1.95-1.35(8H，m).LCMS(ES+)RT 3.85 minutes，586(M+H)+.
實施例13-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中間體45(7.3g，12.9mmol)的乙醇(300mL)懸液加入10％HCl(aq)(40mL)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌16小時。然后在真空中濃縮反應(yīng)混合物，得到橙色/褐色油。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，EtOAc)，繼之以第二支柱處理(二氧化硅，含10％THF的DCM)，得到標題化合物，為亮黃色固體(4.05g)。
δH(CDCl3)9.36(1H，bs)，7.68-7.36(3H，m)，7.33-7.18(2H，m)，7.14-7.06(1H，m)，7.04-7.00(1H，m)，6.97-6.73(2H，m)，6.35(1H，d，J9.7Hz)，4.36-4.28(1H，m)，3.74-3.47(4H，m)，2.00-1.68(3H，m)，1.60-1.50(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.19 minutes，482(M+H)+.
實施例22-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(3-甲基苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例1的方法從中間體46(2.0g，3.68mmol)制備標題化合物，得到標題化合物，為淡黃色固體(747mg)。
δH(CDCl3)7.77(3H，m)，7.71(2H，m)，7.51(1H，d，J9.73Hz)，7.36(1H，m)，7.07(3H，m)，6.58(1H，d，J9.75Hz)，4.57(1H，m)，4.00-3.75(4H，m)，2.51(3H，s)，2.25-2.00(3H，m)，1.81(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.18 minutes，460(M+H)+.
實施例33-[(3-氯苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例1的方法從中間體47(0.85g，1.5mmol)制備標題化合物，得到標題化合物，為淡黃色固體(545mg)。
δH(CDCl3)7.60(3H，m)，7.55(3H，m)，7.37(1H，m)，7.03(2H，m)，6.95(1H，m)，6.49(1H，d，J9.7Hz)，4.38(1H，m)，3.80(1H，m)，3.76(1H，m)，3.62(2H，m)，2.18(1H，s)，1.96(3H，m)，1.66(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.15 minutes，480(M+H)+.
實施例43-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-(4-甲基苯基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例1的方法從中間體48(1.14g，2.0mmol)制備標題化合物，得到標題化合物，為淡黃色固體(470mg，46％)。
δH(CDCl3)7.31-7.29(2H，m)，7.19-7.13(3H，m)，6.95-6.84(1H，m)，6.83-6.80(1H，m)，6.74(1H，t，J7.7Hz)，6.34(1H，d，J9.7Hz)，4.31-4.25(1H，m)，3.72-3.48(4H，m)，2.37(3H，s)，1.96-1.73(3H，m)，1.62-1.51(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.24 minutes，496(M+H)+.
實施例53-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羥甲基)-吡咯烷-1-基]羰基}-7-(4-甲基苯基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例1的方法從中間體49(879mg，1.52mmol)制備標題化合物，得到標題化合物，為淡黃色固體(410mg，54％)。
δH(CDCl3)9.35(1H，bs)，7.30(2H，m)，7.21-7.12(3H，m)，6.86-6.75(3H，m)，6.29(1H，d，J9.7Hz)，4.30-4.25(2H，m)，3.72-3.70(1H，m)，3.69-3.63(1H，m)，3.62-3.49(2H，m)，2.174(3H，s)，2.170(3H，s)，1.96-1.74(3H，m)，1.58-1.50(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.30 minutes，492(M+H)+.
實施例62-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-(4-甲基苯基)-3-[(3-甲基苯基)氨基]噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例1的方法從中間體50(1.0g，1.8mmol)制備標題化合物，得到標題化合物，為黃色固體(492mg，56％)。
δH(CDCl3)9.20(1H，bs)，7.31-7.18(5H，m)，7.09(1H，t，J8.0Hz)，6.80-6.75(3H，m)，6.30(1H，d，J9.6Hz)，4.29-4.19(2H，m)，3.71-3.67(1H，m)，3.65-3.59(1H，m)，3.52-3.46(2H，m)，2.37(3H，s)，2.23(3H，s)，1.96-1.73(3H，m)，1.69-1.56(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.27 minutes，474(M+H)+.
實施例73-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例1的方法從中間體51(206mg，0.35mmol)制備標題化合物，得到標題化合物，為灰白色固體(155mg)。
δH(DMSO-d6)8.92(1H，s)，7.92(1H，d，J9.6Hz)，7.79(2H，m)，7.66(2H，t，J8.6Hz)，7.51-7.46(1H，m)，7.20-7.10(2H，m)，6.68(1H，d，J9.6Hz)，4.82(1H，m)，4.10(1H，bs)，3.54(1H，m)，3.44(1H，m)，3.11(1H，m)，1.98-1.87(3H，m)，1.80(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.15 minutes，500(M+H)+.
實施例83-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例1的方法從中間體52(90mg，0.16mmol)制備標題化合物，得到標題化合物，為淡黃色固體(63mg)。
δH(DMSO-d6)8.80(1H，s)，7.81(1H，d，J9.6Hz)，7.66(2H，m)，7.52(2H，t，J8.5Hz)，7.05(1H，t，J9.1Hz)，6.87-6.85(1H，m)，6.82-6.78(1H，m)，6.56(1H，d，J9.6Hz)，4.67(1H，t，J5.5Hz)，3.96(1H，m)，3.36-3.32(2H，m)，2.87(1H，m)，2.20(3H，s)，1.72-1.69(3H，m)，1.63-1.58(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.22 minutes，496(M+H)+.
實施例97-(2-氯苯基)-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮將1M HCl aq(2mL)加入到中間體58(500mg，0.84mmol)的EtOH(20mL)溶液中，將混合物在室溫下攪拌過夜。加入飽和Na2CO3aq(50mL)，混合物用EtOAc萃取(先50mL，再10mL)。合并有機層，干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮。殘余的膠用DCM(5mL)處理，然后在真空中除去溶劑，得到標題化合物，為黃色固體(400mg，93％)。
δH(CDCl3)9.47(1H，br d，J 7.7Hz)，7.60-7.56(1H，m)，7.49-7.33(3H，m)，7.18(1H，dd，J 0.5，9.8Hz)，6.89-6.79(3H，m)，6.30(1H，dd，J 0.5，9.8Hz)，4.33-4.31(1H，m)，4.29(1H，br s)，3.74-3.37(4H，m)，2.19(3H，d，J 1.5Hz)，1.99-1.64(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.28 minutes，512(M+H)+.
實施例107-(2-氯苯基)-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮從中間體59開始，借助實施例9的方法。褐色固體。
δH(CDCl3)9.40(1H，s)，7.65-7.62(1H，m)，7.53-7.39(3H，m)，7.24(1H，d，J 9.9Hz)，7.10-7.04(1H，m)，6.84-6.80(1H，m)，6.41(1H，d，J 9.8Hz)，4.40-4.34(1H，m)，4.17-4.18(1H，m)，3.79-3.54(4H，m)，1.98-1.75(3H，m)，1.55-1.50(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.247 minutes，516(M+H)+.
實施例113-[(2-氯苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中間體63(1.0g，2.4mmol)的DCM(15mL)懸液加入EDC(0.73g，3.7mmol，1.5equiv.)、HOBT(0.33g，3.7mmol，1.5equiv.)，將混合物在室溫下攪拌15分鐘。加入(R)-2-吡咯烷甲醇(0.25mL，3.7mmol)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌18小時。將反應(yīng)物用DCM(10mL)稀釋，用水(10mL)和鹽水(10mL)洗滌，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。粗殘余物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含20％EtOAc的DCM)，得到標題化合物，為灰白色固體(492mg)。δH(DMSO-d6)9.00(1H，bs)，7.77-7.68(7H，m)，7.38(1H，m)，7.07(2H，m)，6.64(1H，d，J9.6Hz)，4.78(1H，t，J5.9Hz)，4.22-4.15(1H，m)，3.55-3.53(2H，m)，3.46-3.39(1H，m)，3.26-3.18(1H，m)，1.99-1.77(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.28 minutes，(Cl37)482(M+H)+.
通過EDC偶聯(lián)制備酰胺實施例的通用工藝下列實施例都是按照實施例11所述方法從適當?shù)聂人嶂虚g體和胺原料制備的。
實施例123-[(2-氯苯基)氨基]-2-{[(2S)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例11的方法從中間體63(500mg，1.24mmol)和(S)-2-吡咯烷甲醇(0.12mL，1.86mmol)制備標題化合物，得到標題化合物，為灰白色固體(40mg)。δH(CDCl3)7.57-7.42(3H，m)，7.39-7.29(4H，m)，7.14-7.05(1H，m)，6.95-6.84(2H，m)，6.39(1H，d，J9.7Hz)，4.32-4.24(1H，m)，3.70-3.58(2H，m)，3.52-3.38(2H，m)，1.97-1.49(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.27 minutes，(Cl37)482(M+H)+.
實施例133-苯胺基-2-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例11的方法從中間體29和(R)-2-吡咯烷甲醇制備標題化合物，得到標題化合物，為淡黃色固體。
δH(CDCl3)7.56-7.47(3H，m)，7.36-7.33(2H，m)，7.27-7.19(3H，m)，7.02-6.99(3H，m)，6.34(1H，d，J9.7Hz)，4.34-4.29(1H，m)，3.73-3.69(1H，m)，3.65-3.62(1H，m)，3.57-3.48(2H，m)，2.06-1.70(3H，m)，1.60-1.45(2H，m).LCMS(ES+)RT 3.10 minutes，446(M+H)+.
實施例143-苯胺基-2-{[(2S)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例11的方法從中間體29和(S)-2-吡咯烷甲醇制備標題化合物，得到標題化合物，為淡黃色固體。
δH(CDCl3)9.31(1H，bs)，7.55-7.46(3H，m)，7.35-7.32(2H，m)，7.26-7.18(3H，m)，7.01-6.98(3H，m)，6.33(1H，d，J9.7Hz)，4.32-4.29(1H，m)，4.14(1H，bs)，3.73-3.64(2H，m)，3.61-3.50(2H，m)，1.97-1.71(3H，m)，1.58-1.50(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.11 minutes，446(M+H)+.
實施例153-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-[[(2S)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例11的方法從中間體28(1.0g，2.58mmol)和(S)-2-吡咯烷甲醇(390mg，3.87mmol)制備標題化合物，得到標題化合物，為淡黃色固體(300mg)。δH(CDCl3)7.65-7.48(3H，m)，7.35-7.32(2H，m)，7.15(1H，d，J9.7Hz)，7.04-7.01(1H，m)，6.99-6.72(2H，m)，6.36(1H，d，J9.7Hz)，4.37-4.29(1H，m)，3.74-3.47(4H，m)，1.95-1.74(3H，m)，1.61-1.53(1H，m).LCMS(ES+)RT3.18 minutes，482(M+H)+.
實施例183-苯胺基-2-{[(2S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例11的方法從中間體29和(S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷制備標題化合物，得到標題化合物，為淡黃色固體。
δH(CDCl3)9.50(1H，bs)，7.55-7.46(3H，m)，7.40-7.30(2H，m)，7.27(1H，d，J9.7Hz)，7.25-7.18(2H，m)，6.99-6.95(3H，m)，6.33(1H，d，J9.7Hz)，4.35-4.30(1H，m)，3.62-3.56(1H，m)，3.51-3.43(2H，m)，3.41-3.30(1H，m)，3.23(3H，s)，1.92-1.73(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.49 minutes，460(M+H)+.
實施例193-苯胺基-2-{[(2R)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例11的方法從中間體29和(R)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷制備標題化合物，得到標題化合物，為淡黃色固體。
δH(CDCl3)9.45(1H，bs)，7.55-7.46(3H，m)，7.40-7.30(2H，m)，7.27(1H，d，J9.7Hz)，7.25-7.18(2H，m)，6.99-6.95(3H，m)，6.33(1H，d，J9.7Hz)，4.35-4.30(1H，m)，3.62-3.56(1H，m)，3.51-3.43(2H，m)，3.41-3.30(1H，m)，3.23(3H，s)，1.92-1.73(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.49 minutes，460(M+H)+.
實施例207-(4-氯苯基)-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-([(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例11的方法從中間體30(800mg，1.87mmol)和(R)-2-吡咯烷甲醇(0.28mL，2.81mmol)制備標題化合物，得到標題化合物，為淡黃色固體(251mg)。
δH(CDCl3)9.43(1H，bs)，7.51-7.48(2H，m)，7.39-7.19(2H，m)，7.13(1H，d，J9.8Hz)，6.80-6.76(3H，m)，6.28(1H，d，J9.8Hz)，4.36-4.25(2H，m)，3.75-3.50(4H，m)，2.18(3H，s)，1.98-1.73(3H，m)，1.60-1.52(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.39 minutes，512(M+H)+.
實施例213-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(2S)-2-(羥甲基)-吡咯烷-1-基]羰基}-7-(3-甲基苯基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例11的方法從中間體31(1.0g，2.4mmol)和(S)-2-吡咯烷甲醇(0.36mL，3.6mmol)制備標題化合物，得到標題化合物，為淡黃色固體(212mg)。δH(CDCl3)9.38(1H，bs)，7.45-7.40(1H，m)，7.38-7.27(1H，m)，7.18-7.12(3H，m)，6.87-6.76(3H，m)，6.30(1H，d，J9.8Hz)，4.36-4.28(2H，m)，3.75-3.48(4H，m)，2.37(3H，s)，2.18(3H，s)，1.97-1.82(3H，m)，1.70-1.59(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.34 minutes，492(M+H)+.
實施例222-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-(3-甲基苯基)-3-[(3-甲基苯基)氨基]噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例11的方法從中間體32(842mg，2.15mmol)和(R)-2-吡咯烷甲醇(0.32mL，3.23mmol)制備標題化合物，得到標題化合物，為淡黃色固體(179mg)。δH(CDCl3)9.21(1H，bs)，7.40-7.35(1H，m)，7.27-7.24(2H，m)，7.18-7.07(3H，m)，6.81-6.76(3H，m)，6.31(1H，d，J9.7Hz)，4.30-4.22(2H，m)，3.70-3.46(4H，m)，2.37(3H，s)，2.25(3H，s)，1.98-1.66(3H，m)，1.58-1.47(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.30 minutes，474(M+H)+.
實施例233-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羥甲基)-吡咯烷-1-基]羰基}-7-(3-甲基苯基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例11的方法從中間體31(640mg，1.54mmol)和(R)-2-吡咯烷甲醇(0.25mL，2.3mmol)制備標題化合物，得到標題化合物，為淡黃色固體(112mg)。
δH(CDCl3)7.49-7.35(1H，m)，7.26(1H，d，J9.7Hz)，7.24-7.23(3H，m)，6.98-6.91(3H，m)，6.88(1H，d，J9.8Hz)，4.39-4.35(1H，m)，3.83-3.56(4H，m)，2.45(3H，s)，2.26(3H，s)，1.99-1.81(3H，m)，1.68-1.60(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.34 minutes，492(M+H)+.
實施例243-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羥甲基)-吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例11的方法從中間體33(340mg，0.77mmol)和(R)-2-吡咯烷甲醇(0.12mL，1.16mmol)制備標題化合物，得到標題化合物，為黃色固體(71mg)。δH(CDCl3)7.58-7.51(3H，m)，7.34-7.21(2H，m)，7.19-7.17(1H，m)，7.05-6.98(2H，m)，6.88-6.82(1H，m)，6.38(1H，d，J9.7Hz)，4.34-4.30(1H，m)，3.72-3.48(4H，m)，1.99-1.53(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.21 minutes，498(M+H)+.
實施例253-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-2-{[(2S)-2-(羥甲基)-吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例11的方法從中間體33(340mg，0.77mmol)和(S)-2-吡咯烷甲醇(0.12mL，1.16mmol)制備標題化合物，得到標題化合物，為黃色固體(65mg)。δH(CDCl3)7.66-7.59(3H，m)，7.44-7.31(2H，m)，7.28-7.26(1H，m)，7.14-7.08(2H，m)，6.98-6.93(1H，m)，6.47(1H，d，J9.8Hz)，4.43-4.40(1H，m)，3.81-3.57(4H，m)，2.06-1.62(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.21 minutes，498(M+H)+.
實施例263-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羥甲基)-吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮將(R)-2-吡咯烷甲醇(0.398mL，4.037mmol)加入到中間體34(1.5g，2.69mmol)的DCM(20mL)溶液中，將混合物在室溫下攪拌24小時。在真空中除去揮發(fā)物，殘余物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含1-10％ THF的DCM)，得到標題化合物，為橙色固體(0.737g)。
δH(DMSO-d6)8.45(1H，s)，7.65-7.55(4H，br m)，7.49-7.46(2H，m)，6.98-6.93(1H，m)，6.88-6.86(1H，m)，6.80-6.76(1H，m)，6.42(1H，d，J 9.63Hz)，4.06(1H，m)，3.45-3.36(3H，m)，3.21-3.17(2H，m)，2.08(3H，s)，1.85-1.74(3H，m)，1.68-1.60(1H，m).LCMS(ES+)478(M+H)+.HPLC Chiralpak AS 80∶20 Isohexane/EtOH.RT19.62 minutes.
實施例273-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(2S)-2-(羥甲基)-吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮將(S)-2-吡咯烷甲醇(0.198mL，2.007mmol)加入到中間體34(0.750g，1.338mmol)的DCM(10mL)溶液中，將混合物在室溫下攪拌24小時。在真空中除去揮發(fā)物，殘余物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含1-10％ THF的DCM)，得到標題化合物，為橙色固體(0.369g)。
δH(DMSO-d6)8.46(1H，s)，7.65-7.55(4H，br m)，7.49-7.46(2H，m)，6.98-6.93(1H，m)，6.88-6.86(1H，m)，6.80-6.76(1H，m)，6.42(1H，d，J 9.63Hz)，4.05(1H，m)，3.46-3.35(3H，m)，3.20-3.16(2H，m)，2.19(3H，s)，1.84-1.72(3H，m)，1.68-1.60(1H，m).LCMS(ES+)478(M+H)+.HPLC Chiralpak AS 80∶20 Isohexane/EtOH.RT15.37 minutes.
實施例283-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮將(S)-3-羥基吡咯烷(107mg，1.23mmol)加入到中間體35(400mg，0.709mmol)的DCM(8mL)溶液中，將反應(yīng)物在室溫下攪拌24小時。在真空中除去揮發(fā)物，粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含5-15％THF的DCM；和二氧化硅，含20-80％EtOAc的異己烷)，得到標題化合物，為淡黃色固體(156mg)。δH(CDCl3)7.46-7.53(3H，m)，7.33(2H，m)，7.19(1H，d，J10.2Hz)，6.95-7.01(1H，m)，6.82-6.87(1H，m)，6.72-6.76(1H，m)，6.35-6.38(1H，m)，4.22(1H，m)，3.64-3.69(2H，m)，3.62(1H，m)，3.55(1H，m)，1.89-1.94(2H，m).LCMS(ES+)RT 2.98 minutes，468(M+H)+.
實施例293-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3R)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮將(R)-3-羥基吡咯烷(107mg，1.23mmol)加入到中間體35(232mg，0.411mmol)的DCM(4mL)溶液中，將反應(yīng)物在室溫下攪拌24小時。在真空中除去揮發(fā)物，粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含5-15％THF的DCM)，得到標題化合物，為淡黃色固體(91mg)。δH(CDCl3)7.48(3H，m)，7.31(2H，m)，7.15(1H，d，J9.7Hz)，6.95(1H，m)，6.82(1H，m)，6.72(1H，m)，6.34(1H，d，J9.7Hz)，4.41(1H，m)，3.67-3.59(3H，m)，3.53(1H，m)，1.90(2H，m).LCMS(ES+)RT 2.95 minutes，468(M+H)+.
實施例303-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例28的方法從(S)-3-羥基吡咯烷(100mg，1.10mmol)和中間體34(200mg，0.36mmol)制備標題化合物，得到標題化合物，為淡黃色固體(55mg)。δH(CDCl3)7.51(3H，m)，7.34(2H，m)，7.19(1H，m)，6.84(2H，m)，6.80(1H，m)，6.33(1H，d，J9.75Hz)，4.44(1H，m)，3.66(4H，m)，2.18(3H，s)，1.91(2H，m).LCMS(ES+)RT 3.02 minutes，464(M+H)+.
實施例313-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(3R)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例28的方法從(R)-3-羥基吡咯烷(100mg，1.10mmol)和中間體34(200mg，0.36mmol)制備標題化合物，得到標題化合物，為淡黃色固體(73mg)。δH(CDCl3)7.65(3H，m)，7.60(2H，m)，7.29(1H，m)，6.90(3H，m)，6.48(1H，d，J9.73Hz)，4.58(1H，m)，3.80(3H，m)，3.76(1H，m)，2.31(3H，s)，2.07(2H，m).LCMS(ES+)RT 3.02 minutes，464(M+H)+.
實施例323-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3S，4S)-3，4-二羥基吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例28的方法從(S，S)-3，4-二羥基吡咯烷(110mg，1.10mmol)和中間體35(200mg，0.35mmol)制備標題化合物，得到標題化合物，為淡黃色固體(144mg)。
δH(CDCl3)9.49(1H，s)，7.51(3H，m)，7.34(2H，m)，7.18(1H，m)，6.93(1H，m)，6.84(1H，m)，6.82(1H，m)，6.36(1H，d，J9.72Hz)，4.15(2H，m)，3.83(2H，m)，3.57(2H，d，J12.4Hz).LCMS(ES+)RT 2.74 minutes，484(M+H)+.
實施例333-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-[(3-羥基氮雜環(huán)丁烷-1-基)羰基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例28的方法從鹽酸3-羥基氮雜環(huán)丁烷(110mg，1.05mmol)和中間體35(200mg，0.35mmol)制備標題化合物，其中加入二異丙基乙胺(0.195mL，1.12mmol)，得到標題化合物，為白色固體(64mg)。
δH(CDCl3)9.48(1H，s)，7.53(3H，m)，7.32(2H，m)，7.10(1H，d，J9.7Hz)，6.86(1H，m)，6.83(1H，m)，6.74(1H，m)，6.33(1H，d，J9.8Hz)，4.58(1H，s)，4.34(2H，m)，3.94(2H，m)，2.07(1H，s).LCMS(ES+)RT 3.06 minutes，454(M+H)+.
實施例343-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(2S)-2-(1-羥基-1-甲基乙基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例28的方法從2-[(2S)-吡咯烷-2-基]丙烷-2-醇(140mg，1.05mmol)和中間體35(200mg，0.35mmol)制備標題化合物，得到標題化合物，為淡黃色固體(140mg)。
δH(CDCl3)8.95(1H，s)，7.51(3H，m)，7.49(2H，m)，7.19(1H，m)，6.87(1H，m)，6.84(1H，m)，6.76(1H，m)，6.37(1H，d，J9.7Hz)，4.36(1H，m)，3.90(1H，m)，3.34(1H，m)，1.93(1H，m)，1.84(1H，m)，1.67(2H，m)，1.13(3H，s)，1.00(3H，s).LCMS(ES+)RT 3.47minutes，510(M+H)+.
實施例353-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(1-羥基-1-甲基乙基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例28的方法從2-[(2R)-吡咯烷-2-基]丙烷-2-醇鹽酸鹽(165mg，1.05mmol)和中間體35(200mg，0.35mmol)制備標題化合物，其中加入二異丙基乙胺(0.20mL，1.12mmol)，得到標題化合物，為灰白色固體(89mg)。δH(CDCl3)8.96(1H，s)，7.63(3H，m)，7.32(2H，m)，7.23(1H，m)，7.01(1H，m)，6.83(1H，m)，6.74(1H，m)，6.38(1H，d，J9.7Hz)，5.00(1H，s)，4.32(1H，m)，3.90(1H，m)，3.33(1H，m)，2.00(2H，m)，1.92(2H，m)，1.15(3H，s)，1.00(3H，s).LCMS(ES+)RT 3.47 minutes，510(M+H)+.
實施例363-[(2-氰基苯基)氨基]-2-{[(2S)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中間體17(400mg，0.96mmol)的2-乙氧基乙醇(5mL)懸液加入(S)-2-吡咯烷甲醇(0.48mL，4.81mmol)，將反應(yīng)物在78℃下加熱2天。在真空中除去溶劑，殘余物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含30-80％EtOAc的異己烷)，得到標題化合物，為固體(123mg)。
δH(CDCl3)9.26(1H，bs)，7.57-7.48(4H，m)，7.40-7.36(3H，m)，7.26(1H，d，J9.7Hz)，7.00-6.95(2H，m)，6.44(1H，d，J9.7Hz)，4.29-4.33(1H，m)，3.68-3.61(2H，m)，3.52-3.46(2H，m)，1.97-1.83(2H，m)，1.81-1.73(1H，m)，1.60-1.53(1H，m).LCMS(ES+)RT 2.98 minutes，471(M+H)+.
實施例373-[(2-氰基苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中間體17(400mg，0.96mmol)的2-乙氧基乙醇(5mL)懸液加入(R)-2-吡咯烷甲醇(0.48mL，4.81mmol)，將反應(yīng)物在78℃下加熱2天。在真空中除去溶劑，殘余物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含30-80％EtOAc的異己烷)，得到標題化合物，為白色固體(105mg)。
δH(CDCl3)9.25(1H，bs)，7.57-7.48(4H，m)，7.45-7.36(3H，m)，7.26(1H，d，J9.7Hz)，7.00-6.95(2H，m)，6.44(1H，d，J9.7Hz)，4.30(1H，m)，3.71-3.61(2H，m)，3.52-3.47(2H，m)，2.00-1.87(2H，m)，1.80-1.70(1H，m)，1.65-1.60(1H，m).LCMS(ES+)RT 2.94 minutes，471(M+H)+.
實施例383-苯胺基-7-(環(huán)丙基甲基)-2-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮在密封的Schlenk試管中，將中間體26(500mg，1.4mmol)與(R)-2-吡咯烷甲醇(2mL，20mmol)的混合物在130℃下加熱6小時。將反應(yīng)物冷卻至室溫，在EtOAc(50mL)與水(50mL)之間分配。將EtOAc層用水洗滌(2×20mL)，干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮。粗殘余物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含20-50％EtOAc的DCM)，得到標題化合物，為黃色固體(405mg，70％)。δH(CDCl3)9.31(1H，bs)，7.23-7.14(3H，m)，6.99-6.94(3H，m)，6.24(1H，d，J9.7Hz)，4.40-4.34(1H，m)，4.18-4.16(1H，m)3.98-3.88(3H，m)，3.76-3.58(3H，m)，2.04-1.93(3H，m)，1.90-1.81(1H，m)，1.67-1.61(1H，m)，0.62-0.58(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.12 minutes，424(M+H)+.
實施例393-[(3-氰基苯基)氨基]-2-{[(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中間體16(224mg)的2-乙氧基乙醇(2mL)懸液加入(R)-2-吡咯烷甲醇(1.0mL)，在密封試管中將反應(yīng)物在110℃下加熱18小時。在真空中除去溶劑，殘余物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含70％EtOAc的異己烷)，得到標題化合物，為白色固體(112mg)。
δH(DMSO-d6)9.18(1H，s)，7.90(1H，dd，J9.6，1.3Hz)，7.80-7.62(5H，m)，7.51(1H，t，J7.9Hz)，7.37-7.25(3H，m)，6.69(1H，d，J9.6Hz)，4.75(1H，m)，4.00(1H，m)，3.50-3.28(3H，m)，2.90(1H，m)，1.95-1.65(4H，m).LCMS(ES+)RT 2.99 minutes，471(M+H)+.
實施例403-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-([(2R)-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]磺?；鶀-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮將中間體62(340mg)、三氟乙酸(5mL)與DCM(20mL)的混合物在室溫下攪拌過夜。在真空中除去溶劑，使殘余物與甲苯共沸(x3)。將殘余物溶于DCM，用三乙胺(10mL)處理，在真空中濃縮混合物。經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含20％EtOAc的DCM)，得到標題化合物(160mg，23％)。δH(CDCl3)7.58-7.49(3H，m)，7.36-7.31(3H，m)，7.02(1H，d，J9.9Hz)，6.99-6.78(3H，m)，6.38(1H，d，J9.9Hz)，3.73-3.69(1H，m)，3.65-3.45(2H，m)，3.35-3.28(1H，m)，3.25-3.17(1H，m)，2.15(1H brm)，1.97-1.60(4H，m).LCMS(ES+)RT 3.34 minutes，518(M+H)+.
實施例412-{[(3R)-3-氨基吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮將中間體35(1g，1.77mmol)和二鹽酸(R)-3-氨基吡咯烷(309mg，1.95mmol)溶于二氯甲烷(50mL)，用三乙胺(360mg，3.0mmol)處理。在室溫下攪拌18小時后，反應(yīng)混合物用水洗滌，分離有機相，干燥(硫酸鈉)，在真空中濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含0-100％THF的DCM)，得到標題化合物，為白色固體(300mg)。
NMRδH(DMSO)9.08(1H，brs)，7.67-7.50(6H，m)，7.35-7.27(1H，m)，7.06-6.93(2H，m)，6.47(1H，d，J9.7Hz)，3.43-3.32(2H，m)，3.31-3.28(1H，m)，3.00(1H，dd，J4.0，10.5Hz)，1.89-1.77(1H，m)，1.65-1.53(1H，m)，1.52-1.45(1H，m).LCMS(ES+)RT 2.25 minutes，467(M+H)+.
從五氟苯基酯制備酰胺實施例的通用工藝下列實施例42-53都是按照實施例41所述方法從適當?shù)奈宸交ブ虚g體和胺原料制備的。若必要的話，反應(yīng)是在叔胺堿(例如三乙胺)的存在下進行的，以中和原料的酸鹽。
實施例422-{[(2S)-2-(氨甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助實施例41的方法，從中間體35(1g，1.77mmol)、(S)-2-(氨甲基)-吡咯烷(192mg，1.95mmol)和三乙胺(360mg，3.0mmol)制備。色譜純化(二氧化硅，含0-100％THF的DCM)得到標題化合物，為白色固體(296mg)。NMR δH(DMSO)8.73(1H，brs)，7.74(1H，d，J9.3Hz)，7.66-7.56(3H，m)，7.52-7.50(2H，m)，7.29(1H，dt，J2.6，8.9Hz)，6.996.89(2H，m)，6.42(1H，d，J9.6Hz)，3.88-3.78(1H，m)，2.43(1H，dd，J3.7，12.6Hz)，2.12(1H，dd，J7.9，12.5Hz)，1.75-1.56(4H，m)，1.30-1.11(2H，brm).LCMS(ES+)RT 2.32 minutes，481(M+H)+.
實施例432-{[(2R)-2-(氨甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助實施例41的方法，從中間體35(1g，1.77mmol)、(R)-2-(氨甲基)-吡咯烷(350mg，1.95mmol)和三乙胺(2mL，14.3mmol)制備。色譜純化(反相二氧化硅，60％乙醇∶40％水)得到標題化合物，為白色固體(390mg)。NMRδH(CDCl3)9.38(1H，s)，7.64-7.54(3H，m)，7.50-7.31(2H，m)，7.32-7.24(1H，m)，7.11-7.03(1H，m)，6.97-6.90(1H，m)，6.87-6.81(1H，m)，6.44(1H，d，J9.7Hz)，4.33-4.27(1H，m)，3.77-3.67(1H，m)，3.61-3.54(1H，m)，2.95(1H，dd，J 5.1，12.9Hz)，2.83(1H，dd，J 6.1，12.9Hz)，2.08-1.74(4H，m).LCMS(ES+)RT 2.32 minutes，481(M+H)+.
實施例443-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3R)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助實施例41的方法從中間體35(0.75g，1.33mmol)和(R)-3-(二甲氨基)吡咯烷(166mg，1.46mmol)制備。色譜純化(反相二氧化硅，60％乙醇∶40％水)得到標題化合物，為白色固體(440mg)。
NMRδH(DMSO)8.82(1H，s)，7.67-7.59(4H，m)，7.52-7.49(2H，m)，7.35-7.27(1H，m)，7.03-6.91(2H，m)，6.48(1H，d，J 9.7Hz)，3.50-3.21(4H，m)，3.00(1H，t，J 8.9Hz)，2.06(6H，s)，1.96-1.92(1H，m)，1.59-1.49(1H，m).LCMS(ES+)RT 2.266 minutes，495(M+H)+.
實施例453-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-[(4-羥基哌啶-1-基)羰基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助實施例41的方法從中間體35(200mg，0.36mmol)和4-羥基哌啶(110mg，1.1mmol)制備，得到標題化合物，為白色粉末(100mg)。
NMRδH(CDCl3)7.93(1H，s)，7.51(3H，m)，7.35(2H，m)，7.24(1H，d，J9.7Hz)，6.81-6.93(2H，m)，6.75(1H，m)，6.41(1H，d，J9.7Hz)，3.86(3H，m)，3.22(2H，m)，1.77(2H，m)，1.40(2H，m).LCMS(ES+)RT 2.90 minutes，482(M+H)+.
實施例46外消旋-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-[(3-羥基哌啶-1-基)羰基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助實施例41的方法從中間體35(200mg，0.36mmol)、鹽酸3-羥基哌啶(98mg，0.70mmol)和二異丙基乙胺(101mg，0.78mmol)制備。色譜純化(二氧化硅，含15％THF的DCM)得到標題化合物，為白色固體(137mg)。NMRδH(CDCl3)7.46-7.55(3H，m)，7.33-7.35(2H，m)，7.23(1H，d，J9.7Hz)，6.82-6.93(2H，m)，6.70-6.75(1H，m)，6.41(1H，d，J9.7Hz)，3.72-3.77(1H，m)，3.56-3.60(1H，m)，3.38-3.49(3H，m)，1.70-1.80(2H，m)，1.53-1.59(1H，m)，1.38-4.42(1H，m).LCMS(ES+)RT 3.02 minutes，482(M+H)+.
實施例472-{[(3R)-3-氨基吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助實施例41的方法從中間體34(1.0g，1.79mmol)、二鹽酸(R)-3-氨基吡咯烷(311mg，1.96mmol)和三乙胺(1mL，7.2mmol)制備。色譜純化(二氧化硅，含10％異丙醇的DCM)得到標題化合物，為黃色固體(620mg)。NMRδH(CDCl3)9.54(1H，bs)，7.56-7.44(3H，m)，7.34-7.31(2H，m)，7.19-7.14(1H，m)，6.88-6.75(3H，m)，6.31(1H，d，J10.2Hz)，3.73-3.65(2H，m)，3.59-3.52(2H，m)，3.29(1H，dd，J11.0，4.5Hz)，2.37-2.06(2H，bm)，2.17(3H，d，J2.3Hz)，2.04-1.95(1H，m)，1.70-1.62(1H，m).LCMS(ES+)RT 2.33 minutes，463(M+H)+.
實施例482-{[(2S)-2-(氨甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助實施例41的方法從中間體34(1.0g，1.79mmol)、(S)-2-(氨甲基)-吡咯烷(200mg)和三乙胺(1mL)制備。色譜純化(反相二氧化硅，含60％MeCN的水)得到標題化合物，為白色固體(260mg)。
NMRδH(CDCl3)9.57(1H，bs)，7.64-7.55(3H，m)，7.43-7.31(2H，m)，7.28-7.24(1H，m)，6.98-6.84(3H，m)，6.40(1H，d，J9.7Hz)，4.30-4.23(1H，m)，3.75-3.69(1H，m)，3.61-3.54(1H，m)，2.94(1H，ddJ11.8，4.4Hz)，2.75(1H，dd，J12.8，7.0Hz)，2.27(3H，d，J1.8Hz)，2.04-1.74(4H，m).LCMS(ES+)RT 2.36 minutes，477(M+H)+.
實施例493-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(3R)-3-(二甲氨基)-吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助實施例41的方法從中間體34(1.0g，1.79mmol)、(R)-3-(二甲氨基)-吡咯烷(245mg，2.15mmol)和三乙胺(1mL)制備。色譜純化(二氧化硅，含50-100％MeCN的DCM)得到標題化合物，為淡黃色固體(610mg)。NMRδH(CDCl3)9.50(1H，bs)，7.55-7.45(3H，m)，7.34-7.32(2H，m)，7.17(1H，d，J9.8Hz)，6.89-6.75(3H，m)，6.31(1H，d，J9.8Hz)，3.81-3.68(2H，m)，3.52-3.42(1H，m)，3.31-3.24(1H，m)，2.67-2.57(1H，m)，2.17(9H，s)，2.06-1.93(1H，m)，1.80-1.70(1H，m).LCMS(ES+)RT 2.34 minutes，491(M+H)+.
實施例503-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3R，4R)-3，4-二羥基吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助實施例41的方法從中間體35(196mg，0.35mmol)和(3R，4R)-3，4-二羥基吡咯烷(107mg，1.04mmol)制備。柱色譜純化(二氧化硅，含0-8％MeOH的DCM)，得到標題化合物，為黃色固體(111mg)。
NMRδH(CDCl3)7.33-7.41(3H，m)，7.20(2H，bm)，7.02(1H，m)，6.82-6.88(1H，m)，6.68-6.74(1H，m)，6.58-6.63(1H，m)，6.23(1H，d，J9.7Hz)，4.02(2H，m)，3.69(2H，m)，3.43(2H，d，J12.5Hz).LCMS(ES+)RT 2.79 minutes，484(M+H)+.
實施例513-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3R*，4S*)-3，4-二羥基吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助實施例41的方法從中間體35(250mg，0.44mmol)、鹽酸順式-3，4-二羥基吡咯烷(130mg，0.94mmol)和二異丙基乙胺(127mg，0.98mmol)制備。柱色譜純化(二氧化硅，含5-15％THF的DCM)得到標題化合物，為黃色固體(98mg)。
NMRδH(CDCl3)7.48-7.56(3H，m)，7.31-7.34(2H，m)，7.15(1H，m)，6.96-7.02(1H，m)，6.82-6.88(1H，m)，6.72-6.78(1H，m)，6.36(1H，d，J9.7Hz)，4.20-4.22(2H，m)，3.77(2H，m)，3.53(2H，m).LCMS(ES+)RT 2.84minutes，484(M+H)+.
實施例523-[(2-氰基苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助實施例41的方法從中間體67(340mg，0.61mmol)和(S)-3-羥基-吡咯烷(227mg，2.60mmol)制備。柱色譜純化(二氧化硅，含30-100％EtOAc的異己烷)，得到標題化合物，為白色固體(210mg)。
NMRδH(DMSO)9.68(1H，s)，7.86(1H，m)，7.72-7.81(4H，m)，7.63-7.71(3H，m)，7.19(1H，m)，7.12(1H，d)，6.64(1H，d，J9.7Hz)，5.07(1H，bs)，4.34(1H，bs)，3.59(3H，m)，3.39(1H，m)，1.88-1.97(2H，m).LCMS(ES+)RT 2.81 minutes，457(M+H)+.
實施例533-[(2-氰基苯基)氨基]-2-{[(3R)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助實施例41的方法從中間體67(340mg，0.61mmol)和(R)-3-羥基-吡咯烷(227mg，2.60mmol)制備。柱色譜純化(二氧化硅，含30-100％EtOAc的異己烷)，得到標題化合物，為白色固體(225mg)。
NMRδH(DMSO)9.59(1H，s)，7.70(1H，m)，7.62-7.73(4H，m)，7.54-7.60(3H，m)，7.10(1H，m)，7.03(1H，m)，6.56(1H，d，J9.7Hz)，4.98(1H，bs)，4.25(1H，bs)3.51(3H，m)，3.30(1H，m)，1.79-1.88(2H，m).LCMS(ES+)RT 2.81 minutes，457(M+H)+.
實施例54外消旋-2-{[3-氨基吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮將中間體64(270mg，0.48mmol)溶于4M HCl的二噁烷(30mL)溶液，在室溫下攪拌18小時。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，將殘余物溶于DCM，用飽和NaHCO3(aq)洗滌(x2)。分離有機層，干燥(MgSO4)，粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含2-6％MeOH的DCM)，得到標題化合物，為白色固體(89mg)。NMRδH(DMSO)9.01(1H，s)，7.42-7.59(6H，m)，7.25(1H，m)，6.98(2H，m)，6.40(1H，d，J9.7Hz)，5.50(1H，bm)，3.45(3H，m)，3.20(1H，m)，1.86(1H，m)，1.65(1H，m).LCMS(ES+)RT 2.23 minutes，467(M+H)+.
實施例552-{[(3S)-3-氨基吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮將中間體65(0.7g，1.24mmol)溶于二氯甲烷(10mL)，用三氟乙酸(5mL)處理，在室溫下攪拌2小時。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，與庚烷共沸除去殘余的三氟乙酸。將所得黃色的油重新溶于二氯甲烷，用碳酸氫鈉溶液洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，在真空中濃縮。色譜純化(反相二氧化硅，60％乙醇∶40％水)得到標題化合物，為白色固體(336mg)。
NMRδH(DMSO)9.08(1H，s)，7.66-7.50(6H，m)，7.35-7.27(1H，m)，7.08-6.94(2H，m)，6.47(1H，d，J9.7Hz)，3.43-3.35(2H，m)，3.02-2.98(1H，m)，1.83-1.76(1H，m)，1.68-1.48(3H，m).LCMS(ES+)RT 2.239 minutes，467(M+H)+.
實施例562-{[(3S)-3-氨基吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮將中間體66(1.2g，1.79mmol)溶于二噁烷(20mL)，用濃HCl(5mL)處理，在室溫下攪拌20分鐘。將反應(yīng)混合物用DCM(100mL)稀釋，用飽和NaHCO3(aq)中和。水層用若干份DCM萃取，合并萃取液，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含50-100％MeCN的DCM；然后含15％異丙醇的DCM)，得到標題化合物，為淡黃色固體(520mg)。
NMRδH(CDCl3)9.57(1H，bs)，7.56-7.46(3H，m)，7.35-7.32(2H，m)，7.19-7.15(1H，m)，6.89-675(3H，m)，6.31(1H，d，J9.7Hz)，3.74-3.66(2H，m)，3.61-3.53(2H，m)，3.24(1H，dd，J10.9，4.6Hz)，2.17(3H，d，J1.6Hz)，2.03-1.97(1H，m)，1.89-1.67(1H，m).LCMS(ES+)RT2.32 minutes，463(M+H)+.
實施例573-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-{[(3R)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中間體73(876mg，1.54mmol)的EtOH(45mL)溶液加入10％HCl(aq)(5mL)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌18小時。將反應(yīng)物用EtOAc(100mL)稀釋，用飽和NaHCO3(aq)(x2)、然后用鹽水洗滌。分離有機層，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含80％EtOAc的異己烷，在DCM中裝載產(chǎn)物)，得到標題化合物，為黃色固體(270mg)。NMRδH(CDCl3)7.36(2H，m)，7.19(3H，m)，6.99(1H，m)，6.76(1H，m)，6.72(1H，m)，6.33(1H，d，J9.7Hz)，4.45(1H，m)，3.62(4H，m)，1.85(2H，m).LCMS(ES+)RT3.04 minutes，486(M+H)+.
實施例583-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-{[(3S)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中間體74(767mg，1.35mmol)的EtOH(45mL)溶液加入10％HCl(aq)(5mL)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌18小時。將反應(yīng)物用EtOAc(100mL)稀釋，用飽和NaHCO3(aq)(x2)、然后用鹽水洗滌。分離有機層，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含80％EtOAc的異己烷，在DCM中裝載產(chǎn)物)，得到標題化合物，為黃色固體(304mg)。
NMRδH(CDCl3)7.27(2H，m)，7.20(3H，m)，6.99(1H，m)，6.85(1H，m)，6.74(1H，m)，6.36(1H，d，J9.7Hz)，4.46(1H，m)，3.75-3.50(4H，m)，1.97(2H，m).LCMS(ES+)RT 3.05 minutes，486(M+H)+.
實施例593-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-(4-氟苯基)-2-{[(3S)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮向中間體75(980mg，1.35mmol)的EtOH(45mL)溶液加入10％HCl(aq)(5mL)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌18小時。將反應(yīng)物用EtOAc(100mL)稀釋，用飽和NaHCO3(aq)(x2)、然后用鹽水洗滌。分離有機層，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含50-100％EtOAc的異己烷)，得到標題化合物，為淡黃色固體(654mg)。
NMRδH(CDCl3)7.27(2H，m)，7.14(3H，m)，6.84-6.72(3H，m)，6.26(1H，d，J9.7Hz)，4.39(1H，m)，3.62(4H，m)，2.12(3H，s)，1.88(2H，m).LCMS(ES+)RT 3.12 minutes，482(M+H)+。
實施例607-(2-氯苯基)-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例58所用工藝從中間體78(623mg，1.07mmol)制備標題化合物，得到亮黃色固體(253mg)。
NMRδH(CDCl3)9.60(1H，s)，7.64-7.57(1H，m)，7.52-7.37(3H，m)，7.25(1H，d，J9.8Hz)，6.98-6.70(3H，m)，6.34(1H，d，J9.8Hz)，4.34(1H，bs)，3.72-3.50(4H，m)，3.08(1H，bs)，2.22(3H，s)，1.86(2H，m).LCMS(ES+)RT 3.17 minutes，498(M+H)+.
實施例617-(2-氯苯基)-2-{[(3S)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(3-甲基苯基)氨基]噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例58所用工藝從中間體79(509mg，0.90mmol)制備標題化合物。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含20％EtOAc的DCM)，得到標題化合物，為亮黃色固體(253mg)。NMRδH(CDCl3)9.62(1H，bs)，7.72-7.60(1H，m)，7.58-7.25(4H，m)，7.23-7.20(1H，m)，7.02-6.86(3H，m)，7.46(1H，d，J7.3Hz)，4.35(1H，bs)，3.74-3.50(4H，m)，3.13(1H，bs)，2.40(3H，s)，1.96(2H，bs).LCMS(ES+)RT 3.12 minutes，480(M+H)+.
實施例627-(2-氯苯基)-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例58所用工藝從中間體80(750mg，1.28mmol)制備標題化合物，得到亮黃色固體(367mg)。
NMRδH(CDCl3)9.56(1H，s)，7.69-7.58(1H，m)，7.43-7.38(3H，m)，7.26(1H，d，J9.7Hz)，7.07-6.97(1H，m)，6.95-6.87(1H，m)，6.80-6.78(1H，m)，6.40(1H，d，J9.7Hz)，4.35(1H，s)，3.77-3.52(4H，m)，3.00(1H，bs)，1.90(2H，s).LCMS(ES+)RT 3.10 minutes，502(M+H)+.
實施例633-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}-7-(4-甲基苯基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮在氮下，向中間體81(1.0g，2.31mmol)、三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(212mg，0.23mmol，10mol％)與(+/-)-BINAP(288mg，0.46mmol，20mol％)的甲苯(50mL)溶液加入2，4-二氟苯胺(300μL，2.77mmol)和碳酸銫(1.05g，3.23mmol，1.4equiv.)。將反應(yīng)物在100℃氮下加熱4天。將反應(yīng)混合物用EtOAc(80mL)稀釋，用水、鹽水(x2)洗滌，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含20％EtOAc的異己烷)，得到標題化合物，為白色固體(123mg)。
NMRδH(CDCl3)9.49(1H，s)，7.33-7.30(2H，m)，7.22-7.18(2H，m)，7.16(1H，d，J9.7Hz)，6.97(1H，dd，J9.0，5.7Hz)，6.86-6.81(1H，m)，6.75-6.72(1H，m)，6.35(1H，d，J9.7Hz)，4.42(1H，bs)，3.70-3.62(3H，m)，3.56-3.53(1H，m)，2.39(3H，s)，1.97-1.85(3H，m).LCMS(ES+)RT3.13minutes，482(M+H)+.
實施例643-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}-7-(4-甲基苯基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例63的方法從中間體81(1.0g，2.3mmol)和4-氟-3-甲基苯胺(347mg)制備標題化合物。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含20％EtOAc的DCM)，得到標題化合物，為白色團體(60mg)。
NMRδH(CDCl3)9.56(1H，bs)，7.33-7.30(2H，m)，7.22-7.13(3H，m)，6.89-6.78(3H，m)，6.31(1H，d，J9.7Hz)，4.44(1H，m)，3.71-3.67(3H，m)，3.63-3.57(1H，m)，2.39(3H，s)，2.17(3H，d，J1.8Hz)，1.96-1.90(2H，m)，1.59(1H，bs).LCMS(ES+)RT 3.20 minutes，478(M+H)+.
實施例653-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3R)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}-7-(4-甲基苯基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例63的方法從中間體82和2，4-二氟苯胺制備標題化合物，得到白色固體。
NMRδH(CDCl3)7.44-7.21(2H，m)，7.19-7.16(3H，m)，6.99-6.97(1H，m)，6.96-6.94(1H，m)，6.92-6.87(1H，m)，6.98(1H，d，J9.8Hz)，4.44(1H，bs)，3.71-3.63(3H，m)，3.57-3.54(1H，m)，2.39(3H，s)，1.99-1.96(2H，m).LCMS(ES+)RT 3.14 minutes，482(M+H)+.
實施例663-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-{[(3R)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}-7-(4-甲基苯基)噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮按照實施例63的方法從中間體82(1.0g，2.3mmol)和4-氟-3-甲基苯胺(0.34mL，2.7mmol)制備標題化合物。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，含70％EtOAc的異己烷)，得到標題化合物，為白色固體(80mg)。
NMRδH(CDCl3)7.32-7.30(2H，m)，7.27-7.15(3H，m)，6.88-6.77(3H，m)，6.35(1H，d，J9.8Hz)，4.42(1H，bs)，3.73-3.62(4H，m)，2.39(3H，s)，2.17(3H，s)，1.98-1.89(2H，m).LCMS(ES+)RT 3.17 minutes，478(M+H)+.
實施例673-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-2-[(3-羥基氮雜環(huán)丁烷-1-基)羰基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮將中間體85(1.89g，3.55mmol)懸浮在EtOH(76mL)和10％HCl(10mL)中，在40℃下攪拌36小時。在減壓下濃縮混合物，將殘余物重新溶于DCM/MeOH。加入脫色木炭(0.09g)，將懸液攪拌30分鐘，過濾，重新濃縮，得到粗產(chǎn)物(1.58g，99％)。將該粗產(chǎn)物懸浮在EtOH(8mL)中，在室溫下攪拌4小時。過濾分離固體，用EtOH洗滌(3×2mL)，在真空中干燥，得到純的標題化合物(1.49g，94％)。
δH(CDCl3)9.60(1H，s)，7.52-7.63(3H，m)，7.38-7.41(2H，m)，7.16-7.19(1H，d)，6.86-6.98(3H，m)，6.35-6.39(1H，d)，4.36-4.42(2H，m)，3.97-4.03(2H，m)，2.33-2.43(1H，m)，2.25(3H，s).LCMS(ES+)RT 3.09 min，(M+H)+450.
實施例682-[(4-氨基哌啶-1-基)羰基]-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮將中間體86(326mg，0.46mmol)溶于HCl的1，4-二噁烷溶液(4.0N)，在室溫N2下攪拌18小時。在真空中濃縮粗產(chǎn)物，用Et2O研制。經(jīng)過色譜純化(二氧化硅，含5％MeOH的DCM)，得到標題化合物，為亮橙色固體(175mg，80％)。
δH(DMSO-d6)8.41(1H，s)，7.86(1H，d，J9.6Hz)，7.68-7.59(5H，m)，7.31-7.26(1H，m)，7.00-6.91(2H，m)，6.89-6.53(3H，m)，3.90-3.87(2H，m)，3.10-2.95(1H，m)，2.70-2.66(2H，m)，1.75-1.72(2H，m)，1.20-1.11(2H，m).LCMS(ES+)RT 2.17 minutes，481(M+H)+.
實施例692-[(3-氨基氮雜環(huán)丁烷-1-基)羰基]-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助實施例68的方法從中間體87(386mg，0.70mmol)得到標題化合物，為灰白色固體(303mg，95％)。δH(DMSO-d6)9.29(1H，s)，8.20-7.80(2H，br s)，7.70-7.63(3H，m)，7.57-7.53(2H，m)，7.46-7.40(1H，m)，7.32(1H，d，J9.7Hz)，7.22-7.16(1H，m)，7.12-7.05(1H，m)，6.48(1H，d，J9.7Hz)，4.33-4.25(2H，m)，4.05-3.90(3H，m).LCMS(ES+)RT2.23 minutes，453(M+H)+.
實施例703-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[4-(二甲氨基)哌啶-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮將實施例68(111mg，0.23mmol)、低聚甲醛(70mg，0.56mmol)與氰基硼氫化鈉(36mg，0.54mmol)的MeOH(10mL)溶液在室溫下攪拌18小時。將反應(yīng)混合物用aq HCl(2N)酸化，攪拌20分鐘。將酸性混合物用10％aq.NaOH中和，用DCM萃取。將DCM萃取液干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)過色譜純化(二氧化硅，含2％MeOH的DCM)，得到標題化合物，為灰白色固體(30mg，25％)。
δH(CDCl3)8.00(1H，s)，7.63-7.52(3H，m)，7.42-7.40(2H，m)，7.32(1H，d，J9.7Hz)，7.00-6.90(2H，m)，6.82-6.75(1H，m)，6.48(1H，d，J9.7Hz)，4.42-4.35(2H，m)，2.95-2.80(2H，m)，2.35-2.25(1H，m)，1.90-1.75(2H，m)，1.54(6H，s)，1.40-1.30(2H，m).LCMS(ES+)RT 2.20 minutes，509(M+H)+.
實施例713-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[3-(二甲氨基)氮雜環(huán)丁烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助實施例70的方法從實施例69(168mg，0.37mmol)、低聚甲醛(103mg，0.82mmol)和氰基硼氫化鈉(52mg，0.82mmol)得到標題化合物，為灰白色固體(130mg，70％)。
δH(DMSO-d6)11.23(1H，s)，7.71-7.62(3H，m)，7.56-7.54(2H，m)，7.44-7.39(2H，m)，7.18-7.12(1H，m)，7.08-7.04(1H，m)，6.48(1H，d，J9.7Hz)，4.15-3.95(2H，m)，3.85-3.75(2H，m)，3.10-3.00(1H，m)，2.07(6H，s).LCMS(ES+)RT 2.26 minutes，481(M+H)+.
實施例723-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3S)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-基]羰基}-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮將中間體35(1.0g，1.77mmol)和(S)-3-二甲氨基吡咯烷(222mg，1.95mmol)溶于DCM，在室溫下攪拌18小時。將溶液用aq NaHCO3溶液洗滌，干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮。色譜純化(60∶40乙醇∶水，反相二氧化硅)得到標題化合物(387mg，44％)。
δH(DMSO-d6)8.82(1H，br s)，7.67-7.59(4H，m)，7.51(2H，dd，J1.78，8.15Hz)，7.36-7.28(1H，m)，7.00-6.91(2H，m)，6.48(1H，d，J9.6Hz)，3.50-3.24(3H，m)，2.98(1H，t，J9.7Hz)，2.50-2.44(1H，m)，2.03(6H，s)，1.97-1.91(1H，m)，1.50(1H，t，J9.7Hz).LCMS(ES+)RT 2.214 minutes，495(M+H)+.
實施例732-{[(3S)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-基]羰基}-3-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-7-苯基噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助實施例72的方法從中間體34(1g，1.77mmol)和(S)-3-二甲氨基吡咯烷(222mg，1.94mmol)開始。
δH(DMSO-d6)8.78(1H，s)，7.67-7.56(4H，m)，7.51(2H，dd，J8.2，1.9Hz)，7.00(1H，t，J9.11Hz)，6.83-6.80(1H，m)，6.75-6.70(1H，m)，6.49(1H，d，J9.6Hz)，3.44-3.20(3H，m)，2.97(1H，t，J9.9Hz)，2.42-2.35(1H，m)，2.15(3H，s)，1.99(6H，s)，1.91-1.87(1H，m)，1.47-1.40(1H，m).LCMS(ES+)RT 2.282 minutes，491(M+H)+.
實施例747-(2-氯苯基)-3-[(2，4-二氟苯基)氨基]-2-{[(3R)-3-羥基吡咯烷-1-基]羰基}噻吩并[2，3-b]吡啶-6(7H)-酮借助實施例62的方法從中間體90(3.0g，5.1mmol)得到標題化合物，為淡黃色固體(1.61g，63％)。δH(CDCl3)7.60-7.57(1H，m)，7.48-7.33(3H，m)，7.19(2H，m)，7.00(1H，dt，J9.0，5.7Hz)，6.87-6.82(1H，m)，6.77-6.73(1H，m)，6.35(1H，d，J9.8Hz)，4.43-4.40(1H，m)，3.69-3.52(4H，m)，1.97-1.91(3H，m).LCMS(ES+)RT 3.10 minutes，502(M+H)+.
用于抑制劑測定法的活化人p38α的制備人p38α的純化按照廠商指導(dǎo)，在桿狀病毒-感染的High-FiveTM細胞(Invitrogen)中表達摻入了N-末端(His)6標記的人p38α。在感染后72小時收獲細胞，溶解在含有1％(w/v)β-辛基葡糖苷和Complete，EDTA-freeTM蛋白酶抑制劑(Roche Molecular Biochemicals)的磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中。在4℃下將裂解物在35,000xg下離心30分鐘，將上清液上NiNTATM柱(Qiagen)。(在用15mM咪唑的PBS溶液洗滌后)用150mM咪唑的PBS溶液洗脫所結(jié)合的蛋白質(zhì)，直接裝上HiTrap QTM柱(APBiotech)。使用20個柱體積的0至1M NaCl梯度洗脫所結(jié)合的蛋白質(zhì)。等量分配含有(His)6-p38的級分，在活化之前貯存在-70℃下。
含有GST-MKK6EE的裂解物的制備通過離心收獲表達與N-末端谷胱苷肽-S-轉(zhuǎn)移酶標記融合的人MKK6(GST-MKK6EE)的組成型活化形式的大腸桿菌(BL21 pLysS)，貯存在-70℃下。如下使細胞溶解重新懸浮在1/10培養(yǎng)體積的含有Complete，EDTA-freeTM蛋白酶抑制劑的PBS中，繼之以在冰上用超聲處理4×15sec。在35,000xg下離心除去細胞碎片，將所得上清液的等分試樣貯存在-70℃下。
(His)6-p38的活化在1mM β-甘油磷酸鹽、10mM MgCl2和9mM ATP的存在下，將0.45mL純化(His)6-p38與50μL含有GST-MKK6EE的裂解物在23℃下培育30分鐘。借助(His)6-p38的雙重磷酸化形式的質(zhì)譜檢測來監(jiān)測活化程度，所述形式通常占最終(His)6-p38制備物的90％以上。然后將活化的(His)6-p38在PBS中稀釋10倍，利用上述方法重新純化。使用A280，0.1％＝1.2，借助280nm下的UV吸光度測量經(jīng)過純化的活化(His)6-p38的濃度，在用于抑制劑測定法之前將制備物的等分試樣貯存在-70℃下。
p38抑制測定法對生物素基化髓鞘堿性蛋白(MBP)磷酸化的抑制作用利用DELFIA類格式測量對p38催化的生物素化MBP磷酸化的抑制作用。該測定法是在包含20mM HEPES(pH7.4)、5mM MgCl2和3mM DTT的緩沖液中進行的。就典型的IC50測定而言，在一定濃度范圍抑制劑的存在下(DMSO的最終濃度為2％)，在涂有鏈霉抗生物素的微量滴定平板中，將生物素化MBP(2.5μM)與活化的GST-p38(10nM)和ATP(1μM)一起在室溫下培育。15分鐘后，加入EDTA(75mM)終止反應(yīng)。然后將微量滴定平板用Tris緩沖鹽水(TBS)洗滌，然后加入100μM抗磷酸MBP抗體(小鼠)以及銪-標記的抗小鼠IgG抗體。在室溫下1小時后，將平板再次用TBS洗滌，繼之以加入強化溶液(Perkin Elmer Wallac)。在室溫下放置另外15分鐘后進行熒光測量。
利用log10抑制劑濃度(x-軸)對由沒有抑制劑存在的對照樣本所產(chǎn)生的熒光的抑制百分比(y-軸)作圖，由此測定IC50值。
人外周血單核細胞的純化從正常的健康志愿者分離外周血單核細胞(PBMC)。利用肝素化真空容器(Becton Dickinson)借助靜脈穿刺取全血，按1∶4稀釋在RPMI1640(Gibco，UK)中，歷經(jīng)Ficoll-paque梯度(Amersham-PharmaciaBiotech，UK)在400g下離心35分鐘。除去界面處的細胞，洗滌一次，繼之以低速旋轉(zhuǎn)(250g)，以除去血小板。然后將細胞重新懸浮在含有10％FCS、青霉素100單位/mL、鏈霉素50μg/mL和谷氨酰胺2mM的DMEM(Gibco，UK)中。
抑制劑的稀釋抑制劑儲備液(20mM)是保存在DMSO中的冷凍溶液(-20℃)。從250倍濃度的儲備液，在DMSO中進行抑制劑的系列稀釋。將抑制劑按1∶250稀釋在組織培養(yǎng)基中，預(yù)溫熱至37℃，轉(zhuǎn)移至含有PBMC的平板上。在加入LPS之前，將PBMC和抑制劑一起培育30分鐘。用在全血測定法中的抑制劑是按照不同的方案制備的。使用相同的儲備溶液，在DMSO中進行抑制劑的系列稀釋。然后將抑制劑按1∶500直接稀釋在1L全血中。在加入LPS之前，將抑制劑與全血培育30分鐘。
PBMC的LPS刺激將PBMC按2×105細胞/孔的密度重新懸浮在平底96孔組織培養(yǎng)平板中。加入抑制劑后，將細胞用最佳劑量的LPS(大腸桿菌菌株B5055，Sigma，最終濃度1μg/mL)刺激，在37℃5％CO2/95％空氣中培育18小時。借助夾心ELISA(BioSource #CHC1751)測量無細胞上清液中的TNF-α水平。
全血的LPS刺激利用肝素化真空容器(Becton Dickinson)，借助靜脈穿刺取全血，將500μL血液等量分配在24孔組織培養(yǎng)平板的每孔中。加入抑制劑后，將細胞用最佳劑量的LPS(大腸桿菌菌株B5055，Sigma，最終濃度1μg/mL)刺激，在37℃無CO2下培育18小時。借助夾心ELISA(BioSource #CHC1751)測量無細胞上清液的TNF-α水平。
大鼠LPS誘導(dǎo)的TNF釋放將雄性Lewis大鼠(180-200g)用Isofluor麻醉，i.v.注射LPS*在0.5mL無菌鹽水中的溶液。90分鐘后，將血液收集在EDTA試管中，用于制備血漿樣本。在用商業(yè)化ELISA測定TNFα之前，將血漿貯存在-70℃下。
大鼠CIA將雌性Lewis大鼠(180-200g)用Isofluor麻醉，用2×100μL乳劑在尾巴基部i.d.免疫接種，所述乳劑含有4mg/mL牛膠原II在0.01M乙酸中的溶液和Freund不完全佐劑，二者比例為1∶1。形成多關(guān)節(jié)炎，開始于致敏化之后約13天。該疾病主要限于踝部，借助器官充滿度測量法進行量化。結(jié)果以爪子體積隨時間的變化表示。
在上述p38抑制劑測定法中，本發(fā)明化合物具有約1μM和更低的IC50值。本發(fā)明化合物顯然是p38激酶、尤其是p38α激酶的有力抑制劑。
權(quán)利要求
1.式(1)化合物 其中Y是連接基團-C(O)-或-S(O)2-；n是零或整數(shù)1；m是整數(shù)1、2、3或4；p是整數(shù)1、2、3或4；Rd是-OH、-(Alk2)OH(其中Alk2是直鏈或支鏈C1-4亞烷基鏈)、-OR1(其中R1是直鏈或支鏈C1-6烷基)、-(Al k2)OR1、-NR2R3(其中R2和R3可以相同或不同，各自獨立地是氫原子或者直鏈或支鏈C1-6烷基)、-(Alk2)NR2R3或者直鏈或支鏈C1-6烷基；Alk1是直鏈或支鏈C1-4亞烷基鏈；Cy1是可選被取代的環(huán)脂族、芳族或雜芳族基團；Ar是可選被取代的芳族或雜芳族基團；及其鹽、溶劑化物、水合物和N-氧化物。
2.如權(quán)利要求1所要求保護的化合物，其中Rd是-OH、-(Alk2)OH、-(Alk2)OR1、-NR2R3或-(Alk2)NR2R3，其中Alk2、R1、R2和R3是如權(quán)利要求1所定義的。
3.如權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所要求保護的化合物，其中Alk2是-CH2-或-C(CH3)2-。
4.如在先權(quán)利要求任意一項所要求保護的化合物，其中R1是甲基。
5.如在先權(quán)利要求任意一項所要求保護的化合物，其中R2是氫或甲基。
6.如在先權(quán)利要求任意一項所要求保護的化合物，其中R3是氫或甲基。
7.如在先權(quán)利要求任意一項所要求保護的化合物，其中Cy1是苯基、氟苯基、氯苯基、甲基苯基或環(huán)丙基。
8.如在先權(quán)利要求任意一項所要求保護的化合物，其中Ar是苯基、二氟苯基、(氯)(氟)苯基、(氟)(甲基)苯基、氯苯基、氰基苯基或甲基苯基。
9.如本文具體公開在任意一個實施例中的、如權(quán)利要求1所要求保護的化合物。
10.藥物組合物，其中包含如權(quán)利要求1所定義的式(1)化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、水合物或N-氧化物，以及藥學(xué)上可接受的載體。
11.如權(quán)利要求1所定義的式(1)化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、水合物或N-氧化物制造藥物的用途，該藥物用于治療和/或預(yù)防適用p38 MAP激酶抑制劑的障礙。
12.治療和/或預(yù)防適用p38MAP激酶抑制劑的障礙的方法，包括對需要這類治療的患者給予如權(quán)利要求1所定義的式(1)化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、水合物或N-氧化物。
全文摘要
一系列噻吩并[2，3－b]吡啶－6(7H)－酮衍生物，在2－位被羰基－或磺?；B接的吡咯烷－1－基或相關(guān)部分取代，是p38MAP激酶的抑制劑，因此可用在醫(yī)藥中，例如用于治療和/或預(yù)防免疫或炎性障礙。
文檔編號A61P29/00GK1809575SQ200480017320
公開日2006年7月26日 申請日期2004年6月18日 優(yōu)先權(quán)日2003年6月20日
發(fā)明者D·C·布魯金斯, J·M·戴維斯, B·J·蘭厄姆 申請人:塞爾技術(shù)R&D有限公司