本發(fā)明涉及魚類產(chǎn)品深加工技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及基于秋刀魚活性多肽的復(fù)配物及其制備方法。

背景技術(shù)：

自20世紀50年代起，海洋魚捕撈產(chǎn)量便呈逐年增加的趨勢，直至1996年產(chǎn)量達到8640萬噸，但進入21世紀以后，隨著人類的過度捕撈及海洋魚資源種類的滅絕與減少，海洋魚捕撈產(chǎn)量出現(xiàn)明顯的下降，至2010年這一產(chǎn)量已降至7740萬噸，且這種下降趨勢還將繼續(xù)持續(xù)下去。面對海洋魚資源的日益衰退，除了加大對資源的保護與扶持力度，還應(yīng)合理的規(guī)劃海洋資源的利用，避免寶貴資源的浪費與無形流失。

海洋魚類長期生活在極端、極具競爭及挑戰(zhàn)的環(huán)境中，其體內(nèi)化合物的組成及結(jié)構(gòu)均與陸地生物存在很大的區(qū)別，因此可以從海洋魚中獲得的截然不同的功能性物質(zhì)，如多不飽和脂肪酸、多糖、礦物質(zhì)、維生素、抗氧化物、酶及生物活性肽等。長期以來，盡管海洋魚富含人類所需要的多種營養(yǎng)成分及功能因子，但由于基本的處理手段、貯存方法及冷鏈運輸?shù)娜狈?，這部分海洋魚資源通常只是用于食用、作為動物的飼料，甚至被丟棄，造成了自然資源的極大浪費。隨著人類對健康的重視及對海產(chǎn)品營養(yǎng)價值的關(guān)注，關(guān)于海洋魚高值化利用、深度開發(fā)的報道日益增多。海洋魚含有相當大比例的肌肉蛋白，這部分肌肉蛋白營養(yǎng)價值高，由均衡的氨基酸組成，易于被人體消化。將加工副產(chǎn)品中的肌肉蛋白采用蛋白酶進行水解能夠?qū)崿F(xiàn)蛋白的回收利用，否則它們只能作為加工過程中的廢物而被丟棄。

現(xiàn)有技術(shù)如授權(quán)公告號為cn103937864b的中國發(fā)明專利，公開了一種從鳀魚中分離的活性多肽，得到的抗神經(jīng)細胞損傷多肽分子量為2,181da；由天門冬氨酸、蘇氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、異亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、組氨酸、賴氨酸和精氨酸等十一種氨基酸組成，是一種新型的具有活性的多肽。該活性多肽可以顯著提高pc12神經(jīng)細胞的存活率，在終濃度為50μg/ml時，細胞存活率與損傷組比較提高了26.4％，有效地減輕了谷氨酸鹽誘導(dǎo)的神經(jīng)細胞損傷，但口感較差，效果不明顯。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種成本低廉，有助于鈣磷的吸收，產(chǎn)品純度高，得率高的基于大黃魚魚鱗活性提取物的復(fù)配物。

本發(fā)明針對上述技術(shù)中提到的問題，采取的技術(shù)方案為：基于秋刀魚活性多肽的復(fù)配物，其成分及其重量份為：秋刀魚活性多肽6~12份、大豆蛋白粉18~23份、三聚磷酸鈉1.5~5份、白砂糖3~9份、環(huán)糊精7~13份、維生素0.5~1.5份、濃縮蘋果汁1~3份、水30~40份。

基于秋刀魚活性多肽的復(fù)配物的制備方法，具體操作步驟為：

所用菌種及其購買的公司為：枯草芽孢桿菌，購自北京北納創(chuàng)聯(lián)生物技術(shù)研究院。

液體培養(yǎng)基制備：按重量份取牛肉膏0.2~0.5份、nacl0.3~0.8份、蛋白胨3~4份、蒸餾水90~100份，混合均勻，調(diào)節(jié)ph至6.5~7.5，高壓滅菌，備用；

種子液制備：將枯草芽孢桿菌接種到液體培養(yǎng)基中，在30~40℃、200~220r/min下?lián)u床培養(yǎng)25~30h；

發(fā)酵培養(yǎng)基制備：將秋刀魚去頭、內(nèi)臟、骨頭，清洗，水浴蒸煮40~50min，冷卻后，按1:1.5~3的料水重量比勻漿，調(diào)節(jié)ph至6.5~7.5，封口，滅菌，備用；

發(fā)酵法提?。喊?~12%接種量將種子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)液中，在45~55℃、180~200r/min下?lián)u床培養(yǎng)24~30h，滅菌，離心，過濾，留取過濾液，枯草芽孢桿菌自身能合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶等酶類，有助于降解秋刀魚的蛋白質(zhì)，酶解率較高，能夠脫除秋刀魚的腥味和苦味；

分離純化：將過濾液上大孔樹脂柱，吸附20~40min，用蒸餾水沖洗，再用濃度為50~60%的乙醇溶液洗脫，冷凍干燥即得秋刀魚活性多肽，該多肽中含有一種抗疲勞肽，其氨基酸序列為hshacasysrvcgyyvshrgrcycrclrcrvlhpgklcvcvncsr，抗疲勞肽的分子量比蛋白質(zhì)小得多，容易被機體吸收利用，快速補給機體所需的氮源，不僅能夠抑制乳酸的積累和降低血清尿素氮在運動機體內(nèi)的含量，緩解機體的疲勞，而且具有很強的抗氧化活性，能夠清除或阻斷自由基的鏈式生成，對抗自由基損傷，具有廣泛的細胞保護和抗疲勞作用；

復(fù)配物制備：按配方稱取秋刀魚活性多肽、大豆蛋白粉、三聚磷酸鈉、白砂糖、環(huán)糊精、維生素、濃縮蘋果汁、水，混合均勻，滅菌，即得基于秋刀魚活性多肽的復(fù)配物，該復(fù)配物配比合理，營養(yǎng)豐富全面，口感潤滑、酸甜適口，沒有防腐劑和色素，滿足人們對健康食品的需求，適合廣泛人群飲用，容易被機體吸收利用，能快速補給機體所需的氮源和能量，緩解機體的疲勞，平衡人體電解質(zhì)。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點在于：1）本發(fā)明基于秋刀魚活性多肽的復(fù)配物配比合理，營養(yǎng)豐富全面，口感潤滑、酸甜適口，沒有防腐劑和色素，滿足人們對健康食品的需求，適合廣泛人群飲用；2）該復(fù)配物容易被機體吸收利用，能快速補給機體所需的能量，抑制乳酸的積累和降低血清尿素氮的含量，清除或阻斷自由基的鏈式生成，具有廣泛的細胞保護和抗疲勞作用；3）制備加工方法簡單可行，能提高秋刀魚的的資源利用率和經(jīng)濟價值，具有較大的是市場發(fā)展?jié)摿托б妗?/p>

具體實施方式

下面通過實施例對本發(fā)明方案作進一步說明：

實施例1：

基于秋刀魚活性多肽的復(fù)配物，其成分及其重量份為：秋刀魚活性多肽9份、大豆蛋白粉21份、三聚磷酸鈉3份、白砂糖7份、環(huán)糊精11份、維生素0.9份、濃縮蘋果汁1.5份、水35份。

基于秋刀魚活性多肽的復(fù)配物的制備方法，具體操作步驟為：

1）液體培養(yǎng)基制備：按重量份取牛肉膏0.3份、nacl0.5份、蛋白胨3.7份、蒸餾水95份，混合均勻，調(diào)節(jié)ph至7，高壓滅菌，備用；

2）種子液制備：將枯草芽孢桿菌接種到液體培養(yǎng)基中，在35℃、210r/min下?lián)u床培養(yǎng)27h；

3）發(fā)酵培養(yǎng)基制備：將秋刀魚去頭、內(nèi)臟、骨頭，清洗，水浴蒸煮47min，冷卻后，按1:1.5的料水重量比勻漿，調(diào)節(jié)ph至7，封口，滅菌，備用；

4）發(fā)酵法提?。喊?~12%接種量將種子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)液中，在50℃、190r/min下?lián)u床培養(yǎng)25h，滅菌，離心，過濾，留取過濾液，枯草芽孢桿菌自身能合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶等酶類，有助于降解秋刀魚的蛋白質(zhì)，酶解率較高，能夠脫除秋刀魚的腥味和苦味；

5）分離純化：將過濾液上大孔樹脂柱，吸附30min，用蒸餾水沖洗，再用濃度為55%的乙醇溶液洗脫，冷凍干燥即得秋刀魚活性多肽，該多肽中含有一種抗疲勞肽，其氨基酸序列為hshacasysrvcgyyvshrgrcycrclrcrvlhpgklcvcvncsr，抗疲勞肽的分子量比蛋白質(zhì)小得多，容易被機體吸收利用，快速補給機體所需的氮源，不僅能夠抑制乳酸的積累和降低血清尿素氮在運動機體內(nèi)的含量，緩解機體的疲勞，而且具有很強的抗氧化活性，能夠清除或阻斷自由基的鏈式生成，對抗自由基損傷，具有廣泛的細胞保護和抗疲勞作用；

6）復(fù)配物制備：按配方稱取秋刀魚活性多肽、大豆蛋白粉、三聚磷酸鈉、白砂糖、環(huán)糊精、維生素、濃縮蘋果汁、水，混合均勻，滅菌，即得基于秋刀魚活性多肽的復(fù)配物，該復(fù)配物配比合理，營養(yǎng)豐富全面，口感潤滑、酸甜適口，沒有防腐劑和色素，滿足人們對健康食品的需求，適合廣泛人群飲用，容易被機體吸收利用，能快速補給機體所需的氮源和能量，緩解機體的疲勞，平衡人體電解質(zhì)。

實施例2：

基于秋刀魚活性多肽的復(fù)配物，其成分及其重量份為：秋刀魚活性多肽10份、大豆蛋白粉20份、三聚磷酸鈉4份、白砂糖8份、環(huán)糊精12份、維生素1.2份、濃縮蘋果汁2份、水38份。

基于秋刀魚活性多肽的復(fù)配物的制備方法，具體操作步驟為：

1）液體培養(yǎng)基制備：按重量份取牛肉膏0.4份、nacl0.6份、蛋白胨3.6份、蒸餾水100份，混合均勻，調(diào)節(jié)ph至7，高壓滅菌，備用；

2）種子液制備：將枯草芽孢桿菌接種到液體培養(yǎng)基中，在40℃、220r/min下?lián)u床培養(yǎng)28h；

3）發(fā)酵培養(yǎng)基制備：將秋刀魚去頭、內(nèi)臟、骨頭，清洗，水浴蒸煮50min，冷卻后，按1:2的料水重量比勻漿，調(diào)節(jié)ph至7.2，封口，滅菌，備用；

4）發(fā)酵法提?。喊?~12%接種量將種子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)液中，在50℃、200r/min下?lián)u床培養(yǎng)28h，滅菌，離心，過濾，留取過濾液，枯草芽孢桿菌自身能合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶等酶類，有助于降解秋刀魚的蛋白質(zhì)，酶解率較高，能夠脫除秋刀魚的腥味和苦味；

5）分離純化：將過濾液上大孔樹脂柱，吸附38min，用蒸餾水沖洗，再用濃度為58%的乙醇溶液洗脫，冷凍干燥即得秋刀魚活性多肽，該多肽中含有一種抗疲勞肽，其氨基酸序列為hshacasysrvcgyyvshrgrcycrclrcrvlhpgklcvcvncsr，抗疲勞肽的分子量比蛋白質(zhì)小得多，容易被機體吸收利用，快速補給機體所需的氮源，不僅能夠抑制乳酸的積累和降低血清尿素氮在運動機體內(nèi)的含量，緩解機體的疲勞，而且具有很強的抗氧化活性，能夠清除或阻斷自由基的鏈式生成，對抗自由基損傷，具有廣泛的細胞保護和抗疲勞作用；

6）復(fù)配物制備：按配方稱取秋刀魚活性多肽、大豆蛋白粉、三聚磷酸鈉、白砂糖、環(huán)糊精、維生素、濃縮蘋果汁、水，混合均勻，滅菌，即得基于秋刀魚活性多肽的復(fù)配物，該復(fù)配物配比合理，營養(yǎng)豐富全面，口感潤滑、酸甜適口，沒有防腐劑和色素，滿足人們對健康食品的需求，適合廣泛人群飲用，容易被機體吸收利用，能快速補給機體所需的氮源和能量，緩解機體的疲勞，平衡人體電解質(zhì)。

本發(fā)明的操作步驟中的常規(guī)操作為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知，在此不進行贅述。

以上所述的實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案進行了詳細說明，應(yīng)理解的是以上所述僅為本發(fā)明的具體實施例，并不用于限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的原則范圍內(nèi)所做的任何修改、補充或類似方式替代等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。

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<110>樂清益昌食品技術(shù)有限公司

<120>基于秋刀魚活性多肽的復(fù)配物及其制備方法

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