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一種具有輔助降血壓作用的西洋參/人參提取物的發(fā)酵提取方法與流程

文檔序號(hào):12929287閱讀:691來源:國知局
一種具有輔助降血壓作用的西洋參/人參提取物的發(fā)酵提取方法與流程

本發(fā)明涉及一種西洋參/人參提取物的提取方法,尤其涉及一種具有輔助降血壓作用的西洋參/人參提取物的發(fā)酵提取方法。



背景技術(shù):

高血壓是一種常見的具有遺傳傾向的心血管疾病。服用藥物只能暫時(shí)得到控制,長期服用還具有損害肝腎功能的副作用。因此出現(xiàn)了許多具有輔助降血壓的功能性食品。如:cn20131021150.6《一種具有輔助降血壓作用的速溶粉及其制備方法》是以苦蕎麥粉、葛根提取物、決明子提取物、山楂提取物、枸杞提取物、地龍?zhí)崛∥?、夏枯草提取物、大豆卵磷脂、植脂末等制成。cn20081023576.7《具有降血壓功能的玉米黃粉蛋白水解物的制備方法及用途》是利用聚能式超聲處理玉米黃粉混懸液并進(jìn)行酶解制成玉米蛋白水解物。

血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制(acei)肽是血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的抑制劑,對(duì)降低血壓有積極的影響,因而開發(fā)具有acei活性的藥物和功能食品引起人們的關(guān)注。常用的抑制acei的藥物如卡托普利、依那普利、地拉普利等藥物,這些藥物療效確切,但是長期服用會(huì)使起患者出現(xiàn)一系列的副作用,對(duì)腎功能損害較大。與化學(xué)合成類藥物相比,天然藥物以其資源豐富,副作用及依耐性較小等優(yōu)勢日益受到關(guān)注。

目前,微生物發(fā)酵技術(shù)正成為國內(nèi)外研究的熱點(diǎn),通過特定菌種和培養(yǎng)基的發(fā)酵技術(shù),產(chǎn)生具有降解蛋白質(zhì)的acei活性肽,提高acei的活性。微生物發(fā)酵是以一種或多種新鮮蔬菜、水果、菌菇、中草藥等為原料,經(jīng)多種有益菌發(fā)酵而產(chǎn)生的,含有豐富的維生素、酶、礦物質(zhì)和次生代謝產(chǎn)物等營養(yǎng)成分的功能性微生物發(fā)酵產(chǎn)品。微生物酵素不但保存了發(fā)酵原料中所固有的營養(yǎng)物質(zhì),而且有不少有效成分大量增加,并產(chǎn)生了一些新的生物活性成分和生物酶。



技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

本發(fā)明的目的是提供一種具有輔助改善睡眠作用的西洋參/人參提取物的發(fā)酵提取方法。該方法所得的西洋參/人參提取物降壓作用更好,而且安全性高。

本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的:一種具有輔助降血壓作用的西洋參/人參提取物的發(fā)酵提取方法,包括以下步驟:

(1)原料處理:以西洋參/人參為原料,經(jīng)粉碎、膨化處理后備用;

(2)一次發(fā)酵:采用纖維素酶對(duì)經(jīng)過膨化處理后的西洋參/人參進(jìn)行酶解,獲得西洋參/人參酶解液,然后對(duì)西洋參/人參酶解液進(jìn)行滅活處理,過篩備用;

(3)二次發(fā)酵:以西洋參/人參酶解液、碳源、氮源和水配制發(fā)酵培養(yǎng)基,然后接種米曲霉菌液,在40-50℃下發(fā)酵2-3天,得到酵素液;

(4)濃縮:對(duì)所得的酵素液進(jìn)行過濾,所得上清液濃縮,獲得西洋參/人參提取物。

西洋參和人參為同屬不同種植物,二者所含的成分大部分相同,主要成分均為人參皂苷。西洋參和人參中含有的人參皂苷等化合物為大分子化合物,不容易被吸收。本發(fā)明通過對(duì)西洋參和人參進(jìn)行發(fā)酵處理,將人參皂苷等大分子化合物分解成小分子化合物,并在二次發(fā)酵中產(chǎn)生具有抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ace)多肽,從而獲得具有良好降血壓作用的提取物。

所述步驟(1)中,所述西洋參/人參不僅是指西洋參/人參根,也可以是指西洋參/人參葉、西洋參/人參莖或西洋參/人參根須等目前甚少利用的西洋參/人參其他部位。

所述步驟(1)中,西洋參/人參粉碎后的膨化溫度115-130℃。

所述步驟(2)中,酶解的溫度:恒溫45-55℃,酶解時(shí)間不低于5小時(shí)。

所述步驟(2)中,以西洋參/人參總質(zhì)量計(jì),所述的纖維素酶加入量為55-65u/g。

所述步驟(2)中,滅活溫度80-90℃,滅活時(shí)間25-35分鐘。

所述步驟(3)中,發(fā)酵培養(yǎng)基中,西洋參/人參酶解液、碳源、氮源和水質(zhì)量份數(shù)分別如下:

西洋參/人參酶解液45-55份,氮源12-15份,碳源20-30份,水70-95份。

所述步驟(3)中,米曲霉菌培養(yǎng)液的接種量為發(fā)酵培養(yǎng)基體積的8-12%。

所述步驟(3)中的發(fā)酵條件為:發(fā)酵溫度為40-50℃,濕度為45-55%,壓力0.02-0.04pa,空氣流量為1.0-2.0m3/min,真空攪拌培養(yǎng),轉(zhuǎn)速為15-25轉(zhuǎn)/min。

作為本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例,所述碳源包括但不限于大米、麥麩、芝麻和糙米中的一種或兩種以上的組合。所述氮源包括但不限于酪蛋白,所述酪蛋白包括但不限于胰蛋白胨。

作為本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例,所述步驟(3)中米曲霉菌培養(yǎng)液采用以下方式獲得:

以面粉為碳源,酪蛋白為氮源制備培養(yǎng)基,將米曲霉菌液接種于所述培養(yǎng)基中,在30-40℃下?lián)u床培養(yǎng)5-8小時(shí),即可獲得米曲霉菌培養(yǎng)液。米曲霉菌培養(yǎng)液為濃度1~5×107cfu/ml的米曲霉菌孢子懸液。

所述步驟(4)中,上清液濃縮至1/10-1/100,即得西洋參/人參提取物。

本發(fā)明還包括步驟(6)干燥,及對(duì)西洋參/人參提取物進(jìn)行冷凍干燥,得到粉末狀產(chǎn)品,便于保存。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下有益效果:

1.本發(fā)明在制備中采用對(duì)acei活性高的酪蛋白作為氮源,利用米曲霉進(jìn)行發(fā)酵,從而在酪蛋白和西洋參/人參酵素的協(xié)同作用下產(chǎn)生具有抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ace)多肽,使獲得的西洋參/人參提取物具有降血壓的作用,其降壓效果甚至比市場上的降壓保健品更好。

2.本發(fā)明優(yōu)化了二次發(fā)酵中的培養(yǎng)基的碳源。體外測定培養(yǎng)基的組成對(duì)acei活性的影響,發(fā)現(xiàn)使用大米作為培養(yǎng)基比采用糙米、芝麻和麥麩時(shí)acei的活性高,本降血壓效果最好。

3.本發(fā)明采用發(fā)酵方式提取西洋參/人參,操作簡單。

附圖說明

圖1是實(shí)施例1-5發(fā)酵第二天的acei活性率曲線圖。

圖2是實(shí)施例1-5發(fā)酵第三天的acei活性率曲線圖。

圖中,①為實(shí)施例1,②為實(shí)施例2,③為實(shí)施例3,④為實(shí)施例4,⑤為實(shí)施例5。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合附圖,進(jìn)一步對(duì)本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施例,進(jìn)行詳細(xì)說明。

以下實(shí)施例中所述西洋參/人參不僅是指西洋參/人參根,也可以是指西洋參/人參葉、西洋參/人參莖或西洋參/人參根須等目前甚少利用的西洋參/人參其他部位。

實(shí)施例1

(1)原料處理:以西洋參為原料,粉碎,120℃膨化處理后,備用。

(2)一次發(fā)酵:膨化后的西洋參中,加入60u/g(以西洋參總質(zhì)量計(jì))纖維素酶,然后加熱至50℃并保持恒溫,150r/min攪拌分解發(fā)酵5小時(shí)。發(fā)酵結(jié)束后,離心過濾機(jī)16目過濾,獲得西洋參酶解液。將西洋參酶解液加熱至90℃,滅活30min,備用。

(3)二次發(fā)酵:以面粉為碳源,酪蛋白為氮源制備培養(yǎng)基,按1:100將米曲霉菌液接種于所述培養(yǎng)基中,在35℃下?lián)u床培養(yǎng)6小時(shí),即可獲得米曲霉菌液,該米曲霉菌液為濃度1×107cfu/ml的米曲霉菌孢子懸液。采用以下質(zhì)量百分比的原料制備發(fā)酵培養(yǎng)基:西洋參酶解液50g,酪蛋白12.5g,大米25g,水77ml。然后按發(fā)酵培養(yǎng)基體積的10%接種米曲霉菌液,置于發(fā)酵罐中發(fā)酵,發(fā)酵條件:發(fā)酵溫度為50℃,濕度為45%,壓力0.03pa,空氣流量為1.0~2.0m3/min,真空攪拌培養(yǎng),轉(zhuǎn)速為20轉(zhuǎn)/min,培養(yǎng)2天,得到酵素液。

(4)濃縮:對(duì)所得的酵素液進(jìn)行過濾,所得上清液濃縮至1/10-1/100,獲得西洋參提取物。

(5)干燥:西洋參提取物經(jīng)過冷凍干燥,制備成粉末狀產(chǎn)品,便于保存。

實(shí)施例2

(1)原料處理:以西洋參為原料,粉碎,120℃膨化處理后,備用。

(2)一次發(fā)酵:膨化后的西洋參中,加入60u/g(以西洋參總質(zhì)量計(jì))纖維素酶,然后加熱至50℃并保持恒溫,150r/min攪拌分解發(fā)酵5小時(shí)。發(fā)酵結(jié)束后,離心過濾機(jī)16目過濾,獲得西洋參酶解液。將西洋參酶解液加熱至90℃,滅活30min,備用。

(3)二次發(fā)酵:以面粉為碳源,酪蛋白為氮源制備培養(yǎng)基,按1:100將米曲霉菌液接種于所述培養(yǎng)基中,在35℃下?lián)u床培養(yǎng)6小時(shí),即可獲得米曲霉菌液,該米曲霉菌液為濃度1×107cfu/ml的米曲霉菌孢子懸液。采用以下質(zhì)量百分比的原料制備發(fā)酵培養(yǎng)基:西洋參酶解液50g,酪蛋白12.5g,大米25g,麥麩0.5g,水77份。然后按發(fā)酵培養(yǎng)基體積的10%接種米曲霉菌液,置于發(fā)酵罐中發(fā)酵,發(fā)酵條件:發(fā)酵溫度為50℃,濕度為55%,壓力0.03pa,空氣流量為1.0~2.0m3/min,真空攪拌培養(yǎng),轉(zhuǎn)速為20轉(zhuǎn)/min,培養(yǎng)3天,得到酵素液。

(4)濃縮:對(duì)所得的酵素液進(jìn)行過濾,所得上清液濃縮至1/10-1/100,獲得西洋參提取物。

(5)干燥:西洋參提取物經(jīng)過冷凍干燥,制備成粉末狀產(chǎn)品,便于保存。

實(shí)施例3

(1)原料處理:以西洋參為原料,粉碎,120℃膨化處理后,備用。

(2)一次發(fā)酵:膨化后的西洋參中,加入60u/g(以西洋參總質(zhì)量計(jì))纖維素酶,然后加熱至50℃并保持恒溫,150r/min攪拌分解發(fā)酵5小時(shí)。發(fā)酵結(jié)束后,離心過濾機(jī)16目過濾,獲得西洋參酶解液。將西洋參酶解液加熱至90℃,滅活30min,備用。

(3)二次發(fā)酵:以面粉為碳源,酪蛋白為氮源制備培養(yǎng)基,按1:100將米曲霉菌液接種于所述培養(yǎng)基中,在35℃下?lián)u床培養(yǎng)6小時(shí),即可獲得米曲霉菌液,該米曲霉菌液為濃度1×107cfu/ml的米曲霉菌孢子懸液。采用以下質(zhì)量百分比的原料制備發(fā)酵培養(yǎng)基:西洋參酶解液50g,酪蛋白12.5g,大米25g,芝麻0.5g,水77份。然后按發(fā)酵培養(yǎng)基體積的10%接種米曲霉菌液,置于發(fā)酵罐中發(fā)酵,發(fā)酵條件:發(fā)酵溫度為50℃,濕度為55%,壓力0.03pa,空氣流量為1.0~2.0m3/min,真空攪拌培養(yǎng),轉(zhuǎn)速為20轉(zhuǎn)/min,培養(yǎng)3天,得到酵素液。

(4)濃縮:對(duì)所得的酵素液進(jìn)行過濾,所得上清液濃縮至1/10-1/100,獲得西洋參提取物。

(5)干燥:西洋參提取物經(jīng)過冷凍干燥,制備成粉末狀產(chǎn)品,便于保存。

實(shí)施例4

(1)原料處理:以西洋參為原料,粉碎,120℃膨化處理后,備用。

(2)一次發(fā)酵:膨化后的西洋參中,加入60u/g(以西洋參總質(zhì)量計(jì))纖維素酶,然后加熱至50℃并保持恒溫,150r/min攪拌分解發(fā)酵5小時(shí)。發(fā)酵結(jié)束后,離心過濾機(jī)16目過濾,獲得西洋參酶解液。將西洋參酶解液加熱至90℃,滅活30min,備用。

(3)二次發(fā)酵:以面粉為碳源,酪蛋白為氮源制備培養(yǎng)基,按1:100將米曲霉菌液接種于所述培養(yǎng)基中,在35℃下?lián)u床培養(yǎng)6小時(shí),即可獲得米曲霉菌液,該米曲霉菌液為濃度1×107cfu/ml的米曲霉菌孢子懸液。采用以下質(zhì)量百分比的原料制備發(fā)酵培養(yǎng)基:西洋參酶解液50g,酪蛋白12.5g,糙米25g,水94ml。然后按發(fā)酵培養(yǎng)基體積的10%接種米曲霉菌液,置于發(fā)酵罐中發(fā)酵,發(fā)酵條件:發(fā)酵溫度為50℃,濕度為55%,壓力0.03pa,空氣流量為1.0~2.0m3/min,真空攪拌培養(yǎng),轉(zhuǎn)速為20轉(zhuǎn)/min,培養(yǎng)3天,得到酵素液。

(4)濃縮:對(duì)所得的酵素液進(jìn)行過濾,所得上清液濃縮至1/10-1/100,獲得西洋參提取物。

(5)干燥:西洋參提取物經(jīng)過冷凍干燥,制備成粉末狀產(chǎn)品,便于保存。

實(shí)施例5

(1)原料處理:以西洋參為原料,粉碎,120℃膨化處理后,備用。

(2)一次發(fā)酵:膨化后的西洋參中,加入60u/g(以西洋參總質(zhì)量計(jì))纖維素酶,然后加熱至50℃并保持恒溫,150r/min攪拌分解發(fā)酵5小時(shí)。發(fā)酵結(jié)束后,離心過濾機(jī)16目過濾,獲得西洋參酶解液。將西洋參酶解液加熱至90℃,滅活30min,備用。

(3)二次發(fā)酵:以面粉為碳源,酪蛋白為氮源制備培養(yǎng)基,按1:100將米曲霉菌液接種于所述培養(yǎng)基中,在35℃下?lián)u床培養(yǎng)6小時(shí),即可獲得米曲霉菌液,該米曲霉菌液為濃度1×107cfu/ml的米曲霉菌孢子懸液。采用以下質(zhì)量百分比的原料制備發(fā)酵培養(yǎng)基:西洋參酶解液50g,酪蛋白12.5g,糙米25g,芝麻0.5g,水99ml。然后按發(fā)酵培養(yǎng)基體積的10%接種米曲霉菌液,置于發(fā)酵罐中發(fā)酵,發(fā)酵條件:發(fā)酵溫度為50℃,濕度為55%,壓力0.03pa,空氣流量為1.0~2.0m3/min,真空攪拌培養(yǎng),轉(zhuǎn)速為20轉(zhuǎn)/min,培養(yǎng)3天,得到酵素液。

(4)濃縮:對(duì)所得的酵素液進(jìn)行過濾,所得上清液濃縮至1/10-1/100,獲得西洋參提取物。

(5)干燥:西洋參提取物經(jīng)過冷凍干燥,制備成粉末狀產(chǎn)品,便于保存。

實(shí)施例6

(1)原料處理:以人參為原料,粉碎,120℃膨化處理后,備用。

(2)一次發(fā)酵:膨化后的人參中,加入60u/g(以人參總質(zhì)量計(jì))纖維素酶,然后加熱至50℃并保持恒溫,150r/min攪拌分解發(fā)酵5小時(shí)。發(fā)酵結(jié)束后,離心過濾機(jī)16目過濾,獲得人參酶解液。將人參酶解液加熱至90℃,滅活30min,備用。

(3)二次發(fā)酵:以面粉為碳源,酪蛋白為氮源制備培養(yǎng)基,按1:100將米曲霉菌液接種于所述培養(yǎng)基中,在35℃下?lián)u床培養(yǎng)6小時(shí),即可獲得米曲霉菌液,該米曲霉菌液為濃度1×107cfu/ml的米曲霉菌孢子懸液。采用以下質(zhì)量百分比的原料制備發(fā)酵培養(yǎng)基:人參酶解液55g,酪蛋白15g,大米30g,水90ml。然后按發(fā)酵培養(yǎng)基體積的8%接種米曲霉菌液,置于發(fā)酵罐中發(fā)酵,發(fā)酵條件:發(fā)酵溫度為40℃,濕度為50%,壓力0.04pa,空氣流量為1.0~2.0m3/min,真空攪拌培養(yǎng),轉(zhuǎn)速為20轉(zhuǎn)/min,培養(yǎng)3天,得到酵素液。

(4)濃縮:對(duì)所得的酵素液進(jìn)行過濾,所得上清液濃縮至1/10-1/100,獲得人參提取物。

(5)干燥:人參提取物經(jīng)過冷凍干燥,制備成粉末狀產(chǎn)品,便于保存。

實(shí)施例7

(1)原料處理:以人參為原料,粉碎,120℃膨化處理后,備用。

(2)一次發(fā)酵:膨化后的人參中,加入60u/g(以人參總質(zhì)量計(jì))纖維素酶,然后加熱至50℃并保持恒溫,150r/min攪拌分解發(fā)酵5小時(shí)。發(fā)酵結(jié)束后,離心過濾機(jī)16目過濾,獲得人參酶解液。將人參酶解液加熱至90℃,滅活30min,備用。

(3)二次發(fā)酵:以面粉為碳源,酪蛋白為氮源制備培養(yǎng)基,按1:100將米曲霉菌液接種于所述培養(yǎng)基中,在35℃下?lián)u床培養(yǎng)6小時(shí),即可獲得米曲霉菌液,該米曲霉菌液為濃度1×107cfu/ml的米曲霉菌孢子懸液。采用以下質(zhì)量百分比的原料制備發(fā)酵培養(yǎng)基:人參酶解液45g,酪蛋白13.5g,大米20g,水70ml。然后按發(fā)酵培養(yǎng)基體積的15%接種米曲霉菌液,置于發(fā)酵罐中發(fā)酵,發(fā)酵條件:發(fā)酵溫度為45℃,濕度為45-55%,壓力0.02-0.04pa,空氣流量為1.0~2.0m3/min,真空攪拌培養(yǎng),轉(zhuǎn)速為25轉(zhuǎn)/min,培養(yǎng)3天,得到酵素液。

(4)濃縮:對(duì)所得的酵素液進(jìn)行過濾,所得上清液濃縮至1/10-1/100,獲得人參提取物。

(5)干燥:人參提取物經(jīng)過冷凍干燥,制備成粉末狀產(chǎn)品,便于保存。

實(shí)驗(yàn)例

acei活性測定實(shí)驗(yàn):

對(duì)實(shí)施例1-5的西洋參提取物分別采用ace活性試劑盒測定樣品的acei活性。ace活性試劑盒購自sigma公司。根據(jù)試劑盒說明書中記載的方法操作即可。

從圖1和圖2中可以發(fā)現(xiàn),不同培養(yǎng)基的acei活性不同,結(jié)果證明了采用米曲霉為菌種,采用大米和酪蛋白作為培養(yǎng)基對(duì)西洋參進(jìn)行發(fā)酵,發(fā)酵液具有輔助降血壓的功效。

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