本發(fā)明涉及生化
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種具有免疫調(diào)節(jié)作用的發(fā)酵組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
：水果的發(fā)酵工藝是水果深加工利用，營養(yǎng)細(xì)化，增加吸收效率的新的食用方式，為了增加發(fā)酵果蔬的口感，又添加傳統(tǒng)釀造工藝中的陳釀步驟，增加發(fā)酵果蔬汁的口感，即為市面上所稱的“酵素”?，F(xiàn)有技術(shù)的的酵素一般都為用各種雜果混合自然發(fā)酵而成的酵素，具有一定調(diào)節(jié)人體免疫調(diào)節(jié)功能。如專利申請(qǐng)?zhí)枮?01510865242.1的專利申請(qǐng)文件公開的一種提高免疫力的蛹蟲草獼猴桃酵素的制作方法；又如專利申請(qǐng)?zhí)枮?01610108666.8的專利申請(qǐng)文件公開的一種果蔬活性酵素液，通過將多種果肉和蔬菜密閉發(fā)酵制得，酵素液為維持人體基本平衡的多重營養(yǎng)，提高人體免疫力。但其活性較低，保質(zhì)期短。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：有鑒于此，本發(fā)明提供一種具有免疫調(diào)節(jié)作用的發(fā)酵組合物及其制備方法。本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)實(shí)現(xiàn)：一種具有免疫調(diào)節(jié)作用的發(fā)酵組合物，其原料按重量計(jì)包括：鳳梨科植物果肉50-100份；鳳梨科植物花序提取物0.1-7份；植物乳桿菌2.5-5份。進(jìn)一步的，所述鳳梨科植物花序提取物是鳳梨科植物新鮮花序在一氧化碳或一氧化氮氛圍下加熱保溫，粉碎后以酒精、甘露醇的混合物為溶劑浸提所獲的提取液。進(jìn)一步的，所述鳳梨科植物花序提取物是鳳梨科植物新鮮花序在一氧化碳或一氧化氮氛圍下加熱至40-80℃后保溫30-90小時(shí)，粉碎后以酒精、甘露醇的混合物為溶劑在10-30℃下浸提10-200小時(shí)所獲的提取液。更進(jìn)一步的，酒精、甘露醇的混合物中，酒精和甘露醇的體積比為5：（0.5-2）；所述酒精、甘露醇的混合物的質(zhì)量為鳳梨科植物新鮮花序質(zhì)量的10-50倍；所述提取液的質(zhì)量為鳳梨科植物新鮮花序質(zhì)量的0.1-10倍。優(yōu)選的，鳳梨科植物果肉為鳳梨科鳳梨屬植物果肉；鳳梨科植物花序?yàn)轼P梨科鐵蘭屬植物、鳳梨屬植物、水塔花屬植物中的至少一種的花序。本發(fā)明還提供一種具有免疫調(diào)節(jié)作用的發(fā)酵組合物的制備方法，包括如下工序：對(duì)鳳梨科植物果肉進(jìn)行清洗、切塊備用；將切塊好的備料進(jìn)行預(yù)處理；經(jīng)過預(yù)處理的備料進(jìn)行低溫破碎；將破碎后的混合液進(jìn)行分層發(fā)酵；將發(fā)酵液過100-150目濾布，濾液加入植物乳桿菌陳釀2-4周，加入所述鳳梨科植物花序提取物既得；所述備料預(yù)處理為梯度鹽洗，首先使用質(zhì)量濃度0.2-1.5%、溫度為25-35℃的鹽水浸泡1-2h；然后過濾再使用質(zhì)量濃度為1-5%的鹽水浸泡30-60min，接著過濾后使用質(zhì)量濃度為1.5%的蘇打水浸泡30-40min，再過濾使用質(zhì)量濃度為3%的蘇打水浸泡10-15min，最后過濾將塊狀備料按照質(zhì)量體積1kg：1l添水混合后放入攪拌機(jī)中破碎，破碎溫度-2℃—3℃，轉(zhuǎn)速為8000-15000r/min，時(shí)間為25-35min。進(jìn)一步，所述的分層發(fā)酵包括酒精發(fā)酵和醋酸發(fā)酵兩步驟，所述的酒精發(fā)酵為添入酵母菌常溫下發(fā)酵至槽內(nèi)酒精度數(shù)8度，所述的醋酸發(fā)酵為經(jīng)過酒精發(fā)酵的發(fā)酵液添入植物乳桿菌在常溫下繼續(xù)發(fā)酵2-4個(gè)月，發(fā)酵時(shí)減壓至0.8-0.9個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓，并每天施加功率密度為0.2-0.25瓦每立方厘米，頻率為18-20千赫的聲波1小時(shí)。優(yōu)選的，所述的酒精發(fā)酵前添加纖維素酶c1酶和cx酶以及淀粉酶在常溫紫外滅菌的環(huán)境中靜置2-3天。具體實(shí)施方式為了便于本領(lǐng)域技術(shù)人員理解，下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述：實(shí)施例1本實(shí)施例提供一種具有免疫調(diào)節(jié)作用的發(fā)酵組合物，其原料按重量計(jì)包括：鳳梨科植物果肉100份；鳳梨科植物花序提取物0.1份；植物乳桿菌5份。進(jìn)一步的，所述鳳梨科植物花序提取物是鳳梨科植物新鮮花序在一氧化碳或一氧化氮氛圍下加熱至40℃后保溫90小時(shí)，粉碎后以酒精、甘露醇的混合物為溶劑在10℃下浸提200小時(shí)所獲的提取液。更進(jìn)一步的，酒精、甘露醇的混合物中，酒精和甘露醇的體積比為5：0.5；所述酒精、甘露醇的混合物的質(zhì)量為鳳梨科植物新鮮花序質(zhì)量的50倍；所述提取液的質(zhì)量為鳳梨科植物新鮮花序質(zhì)量的0.1倍。優(yōu)選的，鳳梨科植物果肉為鳳梨科鳳梨屬植物果肉；鳳梨科植物花序?yàn)轼P梨科鐵蘭屬植物、鳳梨屬植物、水塔花屬植物中的至少一種的花序。實(shí)施例2本實(shí)施例提供一種具有免疫調(diào)節(jié)作用的發(fā)酵組合物，其原料按重量計(jì)包括：鳳梨科植物果肉50份；鳳梨科植物花序提取物7份；植物乳桿菌2.5份。進(jìn)一步的，所述鳳梨科植物花序提取物是鳳梨科植物新鮮花序在一氧化碳或一氧化氮氛圍下加熱保溫，粉碎后以酒精、甘露醇的混合物為溶劑浸提所獲的提取液。進(jìn)一步的，所述鳳梨科植物花序提取物是鳳梨科植物新鮮花序在一氧化碳或一氧化氮氛圍下加熱至80℃后保溫30小時(shí)，粉碎后以酒精、甘露醇的混合物為溶劑在30℃下浸提10-200小時(shí)所獲的提取液。更進(jìn)一步的，酒精、甘露醇的混合物中，酒精和甘露醇的體積比為5：2；所述酒精、甘露醇的混合物的質(zhì)量為鳳梨科植物新鮮花序質(zhì)量的10-50倍；所述提取液的質(zhì)量為鳳梨科植物新鮮花序質(zhì)量的0.1-10倍。優(yōu)選的，鳳梨科植物果肉為鳳梨科鳳梨屬植物果肉；鳳梨科植物花序?yàn)轼P梨科鐵蘭屬植物、鳳梨屬植物、水塔花屬植物中的至少一種的花序。實(shí)施例3本實(shí)施例提供一種具有免疫調(diào)節(jié)作用的發(fā)酵組合物，其原料按重量計(jì)包括：鳳梨科植物果肉82份；鳳梨科植物花序提取物5.5份；植物乳桿菌4份。進(jìn)一步的，所述鳳梨科植物花序提取物是鳳梨科植物新鮮花序在一氧化碳或一氧化氮氛圍下加熱至60℃后保溫50小時(shí)，粉碎后以酒精、甘露醇的混合物為溶劑在20℃下浸提40小時(shí)所獲的提取液。更進(jìn)一步的，酒精、甘露醇的混合物中，酒精和甘露醇的體積比為5：1；所述酒精、甘露醇的混合物的質(zhì)量為鳳梨科植物新鮮花序質(zhì)量的30倍；所述提取液的質(zhì)量為鳳梨科植物新鮮花序質(zhì)量的2倍。優(yōu)選的，鳳梨科植物果肉為鳳梨科鳳梨屬植物果肉；鳳梨科植物花序?yàn)轼P梨科鐵蘭屬植物、鳳梨屬植物、水塔花屬植物中的至少一種的花序。實(shí)施例4本實(shí)施例提供一種具有免疫調(diào)節(jié)作用的發(fā)酵組合物，其原料按重量計(jì)包括：鳳梨科植物果肉67份；鳳梨科植物花序提取物0.5份；植物乳桿菌4份。進(jìn)一步的，所述鳳梨科植物花序提取物是鳳梨科植物新鮮花序在一氧化碳或一氧化氮氛圍下加熱至50℃后保溫80小時(shí)，粉碎后以酒精、甘露醇的混合物為溶劑在25℃下浸提10-200小時(shí)所獲的提取液。更進(jìn)一步的，酒精、甘露醇的混合物中，酒精和甘露醇的體積比為5：0.9；所述酒精、甘露醇的混合物的質(zhì)量為鳳梨科植物新鮮花序質(zhì)量的45倍；所述提取液的質(zhì)量為鳳梨科植物新鮮花序質(zhì)量的8倍。優(yōu)選的，鳳梨科植物果肉為鳳梨科鳳梨屬植物果肉；鳳梨科植物花序?yàn)轼P梨科鐵蘭屬植物、鳳梨屬植物、水塔花屬植物中的至少一種的花序。實(shí)施例5本實(shí)施例提供一種具有免疫調(diào)節(jié)作用的發(fā)酵組合物，其原料按重量計(jì)包括：鳳梨科植物果肉100份；鳳梨科植物花序提取物0.1份；植物乳桿菌5份。進(jìn)一步的，所述鳳梨科植物花序提取物是鳳梨科植物新鮮花序粉碎后以酒精為溶劑浸提所獲的提取液。優(yōu)選的，鳳梨科植物果肉為鳳梨科鳳梨屬植物果肉；鳳梨科植物花序?yàn)轼P梨科鐵蘭屬植物、鳳梨屬植物、水塔花屬植物中的至少一種的花序。實(shí)施例6本實(shí)施例提供一種實(shí)施例1組合物的制備方法，包括如下工序：對(duì)鳳梨科植物果肉進(jìn)行清洗、切塊備用；將切塊好的備料進(jìn)行預(yù)處理；經(jīng)過預(yù)處理的備料進(jìn)行低溫破碎；將破碎后的混合液進(jìn)行分層發(fā)酵；將發(fā)酵液過100-150目濾布，濾液加入植物乳桿菌陳釀2-4周，加入所述鳳梨科植物花序提取物既得；所述備料預(yù)處理為梯度鹽洗，首先使用質(zhì)量濃度0.2-1.5%、溫度為25-35℃的鹽水浸泡1-2h；然后過濾再使用質(zhì)量濃度為1-5%的鹽水浸泡30-60min，接著過濾后使用質(zhì)量濃度為1.5%的蘇打水浸泡30-40min，再過濾使用質(zhì)量濃度為3%的蘇打水浸泡10-15min，最后過濾將塊狀備料按照質(zhì)量體積1kg：1l添水混合后放入攪拌機(jī)中破碎，破碎溫度-2℃—3℃，轉(zhuǎn)速為8000-15000r/min，時(shí)間為25-35min。進(jìn)一步的，所述的分層發(fā)酵包括酒精發(fā)酵和醋酸發(fā)酵兩步驟，所述的酒精發(fā)酵為添入酵母菌常溫下發(fā)酵至槽內(nèi)酒精度數(shù)8度，所述的醋酸發(fā)酵為經(jīng)過酒精發(fā)酵的發(fā)酵液添入植物乳桿菌在常溫下繼續(xù)發(fā)酵2-4個(gè)月，發(fā)酵時(shí)減壓至0.8-0.9個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓，并每天施加功率密度為0.2-0.25瓦每立方厘米，頻率為18-20千赫的聲波1小時(shí)。更進(jìn)一步的，述的酒精發(fā)酵前添加纖維素酶c1酶和cx酶以及淀粉酶在常溫紫外滅菌的環(huán)境中靜置2-3天。對(duì)比例1本實(shí)施例提供一種具有免疫調(diào)節(jié)作用的發(fā)酵組合物，其原料按重量計(jì)包括：鳳梨科植物果肉100份；植物乳桿菌5份。優(yōu)選的，鳳梨科植物果肉為鳳梨科鳳梨屬植物果肉。對(duì)比例2本實(shí)施例提供一種具有免疫調(diào)節(jié)作用的發(fā)酵組合物，其原料按重量計(jì)包括：鳳梨科植物果肉100份；鳳梨科植物花序提取物0.1份；植物乳桿菌5份。進(jìn)一步的，所述鳳梨科植物花序提取物是鳳梨科植物新鮮花序在一氧化氮氛圍下加熱至40℃后保溫90小時(shí)，粉碎后以甘露醇為溶劑在10℃下浸提200小時(shí)所獲的提取液。更進(jìn)一步的，所述甘露醇的質(zhì)量為鳳梨科植物新鮮花序質(zhì)量的50倍；所述提取液的質(zhì)量為鳳梨科植物新鮮花序質(zhì)量的0.1倍。藥物對(duì)小白鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能的測(cè)定。實(shí)驗(yàn)材料：小白鼠20只雌雄各半，體重20±2g，分成樣品組和空白對(duì)照組，每組10只。實(shí)驗(yàn)樣品：實(shí)施例1-5、對(duì)比例1-2的組合物。實(shí)驗(yàn)方法：藥物組每天灌胃給料1次，劑量3g/kg，對(duì)照組每天灌胃生理鹽水1次30ml，兩組連續(xù)灌胃5d，第6天每只小白鼠腹腔注射2%無菌雞紅細(xì)胞懸液1ml，間隔30分鐘后，頸椎脫臼處死，經(jīng)腹膜注入生理鹽水2ml，然后吸出腹腔洗液1ml，平均分滴于兩片載片上，置于37℃孵箱溫育30min，取出后用1：1丙酮-甲醇溶液固定，用4%giemsa液染色3min，蒸餾水沖洗晾干。結(jié)果判定：油鏡下計(jì)數(shù)巨噬細(xì)胞，每片200個(gè)。吞噬指數(shù)=被吞噬的雞紅細(xì)胞/200/2。相應(yīng)的測(cè)定結(jié)果如表1所示。表1樣品對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響組別吞噬指數(shù)實(shí)施例10.53±0.02實(shí)施例20.52±0.04實(shí)施例30.55±0.07實(shí)施例40.49±0.03實(shí)施例50.35±0.05對(duì)比例10.25±0.04對(duì)比例20.34±0.06對(duì)照組0.26±0.05結(jié)論：藥物能夠促進(jìn)小鼠巨噬細(xì)胞吞噬能力的提高。以上為本發(fā)明的其中具體實(shí)現(xiàn)方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并不能因此而理解為對(duì)本發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)，這些顯而易見的替換形式均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁12