專利名稱：一種具免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物及其制備方法與用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及微生物工程領(lǐng)域，具體地說涉及一種具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物及其制備方法與用途。
背景技術(shù)：
人體免疫力是人體自身的安全保衛(wèi)、防御系統(tǒng)，是人體維護(hù)生命健康和預(yù)防疾病的重要系統(tǒng)，對外能消滅、抵御外侵的病毒和致病菌；對內(nèi)可調(diào)控、清除非正常的變異細(xì)胞(癌細(xì)胞)，以達(dá)到保護(hù)人體生命的健康狀態(tài)。
現(xiàn)有的免疫增強(qiáng)劑類藥物，在國內(nèi)外均有臨床應(yīng)用及文獻(xiàn)報(bào)道。其產(chǎn)品的生產(chǎn)方法多為從動物、植物中提取或化學(xué)合成，也有用純單一益生菌發(fā)酵提取等，但因生產(chǎn)過程中經(jīng)過高溫或化學(xué)物質(zhì)的影響及因受生產(chǎn)原料的影響等諸多因數(shù)，最終造成現(xiàn)有的產(chǎn)品在使用中尚不夠理想和成本高昂等問題，使人體免疫增強(qiáng)劑這類產(chǎn)品還未能達(dá)到人類防病、治病、健康保健的理想效果。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服上述已有的技術(shù)水平不足，通過大量的研究工作，發(fā)明了一種效果全面、明顯、制備工藝簡單、安全無毒副作用的生物免疫激活增強(qiáng)劑及制備技術(shù)。
本發(fā)明的目的之一是提供一種具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物，是由兩種或多種乳酸菌屬Lacticacid bacteria菌種共同培養(yǎng)得到。
進(jìn)一步的，上述的乳酸菌屬菌種是嗜酸乳桿菌Lactobacillus acidophilus、干酪乳桿菌Lactbacillus casri(orla-Jensen)Hansen etlessel、發(fā)酵乳桿菌Lactbacillusfermentium Beijerinck、短雙歧桿菌Bifidobacterium breue Reuer、長雙歧桿菌Bifidobacterium Iongum Reuer、兩歧雙歧桿菌Bifidobacterium bifidum、嬰兒雙歧桿菌Bifidobacterium infantis Reuer、青春雙歧桿菌Bifidobacterium adolesce ntisReuer、干酪乳桿菌干酪亞種Lactabacillus casei subsp.casei、丁酸梭菌Clostridiumbutylicum、鼠李糖乳桿菌Lactbacillus rhamnosus、植物乳桿菌。
更進(jìn)一步的，上述的乳酸菌屬菌種是植物乳桿菌，短雙歧桿菌，干酪乳桿菌，發(fā)酵乳桿菌中的一種或多種。
再進(jìn)一步的，上述的具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物是由所述乳酸菌屬菌種經(jīng)共同液態(tài)培養(yǎng)得到。
本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種制備本發(fā)明具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物的方法，該方法包括以下步驟a、將選取的乳酸菌屬菌種制備成生產(chǎn)種子；b、將生產(chǎn)種子接種到培養(yǎng)基上，在25℃-35℃溫度下進(jìn)行共同培養(yǎng)；c、收集培養(yǎng)產(chǎn)物，調(diào)整濃度后分裝。
本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供一種由上述方法制備而成的具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物。
本發(fā)明的第四個(gè)目的是提供一種由上述具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物。它是由上述的免疫調(diào)節(jié)組合物添加藥學(xué)上可以接受的輔助性成分制備而成的免疫調(diào)節(jié)劑。
本發(fā)明的第六個(gè)目的是提供了上述的具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物在制備具有免疫調(diào)節(jié)功能的保健食品或免疫調(diào)節(jié)劑中的用途。
本發(fā)明免疫調(diào)節(jié)組合物能激活人體免疫系統(tǒng)，特別是巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、NKT細(xì)胞、能有效的快速修復(fù)和重建人體免疫系統(tǒng)，使其更好的攻擊和殺滅變異細(xì)胞，是一種優(yōu)秀的具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物。本發(fā)明具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物能用于制備免疫調(diào)節(jié)劑，具有很好的市場應(yīng)用前景。
具體實(shí)施例方式下面通過對本發(fā)明較佳實(shí)施方式的詳細(xì)描述對本發(fā)明進(jìn)行說明，但不應(yīng)理解為是對本發(fā)明的限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)本發(fā)明作出各種改變或變型，只要不脫離本發(fā)明的技術(shù)思想，均屬于本發(fā)明所附權(quán)利要求所定義的范圍。
實(shí)施例一本發(fā)明具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物的制備a、選取以下的乳酸菌屬菌種制備成生產(chǎn)種子嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、發(fā)酵乳桿菌、短雙歧桿菌、長雙歧桿菌、兩歧雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌。
b、將生產(chǎn)種子接種到100ml液態(tài)培養(yǎng)基上，在25℃-35℃溫度下進(jìn)行共同培養(yǎng)；c、收集培養(yǎng)產(chǎn)物，調(diào)整濃度后分裝。
實(shí)施例二本發(fā)明具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物的制備a、選取以下的乳酸菌屬菌種制備成生產(chǎn)種子嗜酸乳桿菌、發(fā)酵乳桿菌、短雙歧桿菌、長雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌。
b、將生產(chǎn)種子接種到3000ml液態(tài)培養(yǎng)基上，在25℃-35℃溫度下進(jìn)行共同培養(yǎng)；c、收集培養(yǎng)產(chǎn)物，調(diào)整濃度后分裝。
實(shí)施例三本發(fā)明具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物的制備a、選取以下的乳酸菌屬菌種制備成生產(chǎn)種子植物乳桿菌，短雙歧桿菌，干酪乳桿菌，發(fā)酵乳桿菌b、將生產(chǎn)種子接種到5000ml液態(tài)培養(yǎng)基上，在25℃-35℃溫度下進(jìn)行共同培養(yǎng)；c、收集培養(yǎng)產(chǎn)物，調(diào)整濃度后分裝。
實(shí)施例四本發(fā)明具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物的制備1、在實(shí)施例1-3中發(fā)酵培養(yǎng)后分別取出菌體，將菌絲體干燥粉碎后，用60％-70％的乙醇提取。
2、將步驟1的提取物去除沉淀物和乙醇，再與發(fā)酵液合并混勻。
3、分別濃縮加工并調(diào)整濃度至200ug/ml，得到口服液。
實(shí)施例五本發(fā)明具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物的制備1、取實(shí)施例1-3中制備的免疫調(diào)節(jié)組合物各200升，分別冷凍干燥除去水分。
2、將步驟1所得產(chǎn)物制為細(xì)粉。
3、將步驟2所制得的細(xì)粉按常規(guī)工藝裝入腸溶性硬膠囊，壓板、質(zhì)檢、包裝后得本發(fā)明多菌組合物的膠囊劑。
實(shí)驗(yàn)例一本發(fā)明多菌口服液的Beagle犬長期毒性實(shí)驗(yàn)使用本發(fā)明實(shí)施例一制得的多菌口服液分4.0ml/kg、2.0ml/kg、1.0ml/kg，大、中、小三個(gè)劑量(相當(dāng)于臨床擬定劑量80、40、20倍)，經(jīng)Beagle犬連續(xù)270天口服給藥，停藥后恢復(fù)期觀察30天。
三個(gè)劑量結(jié)果各劑量組均順利完成全程試驗(yàn)。試驗(yàn)過程中大、中、小劑量組和對照組各犬給藥后食欲和食量、行為活動等均未見異常，被毛光滑，各犬天然孔無異常分泌物，大、小便無異常，動物行走正常，精神正常，呼吸正常，給藥過程中雌犬有發(fā)情現(xiàn)象。停藥觀察30天各組犬均未見異常。
藥前2次、給藥45天、90天、135天、180天、225天、270天以及停藥30天，小便常規(guī)檢查10項(xiàng)未見異常。
體溫和眼科檢查，藥前2次、給藥45天、90天、135天、180天、225天、270天以及停藥30天無異常。
外周血象，藥前2次、給藥45天、90天、135天、180天、225天、270天以及停藥30天檢查，各劑量組及對照組各項(xiàng)指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)波動，給藥組與對照組比較無無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
各劑量組及對照組于給藥135、270天以及停藥30天，各組動物骨髓象增生活躍，均未見有原始和異常細(xì)胞。
心電圖檢查，藥前2次、給藥45天、90天、135天、180天、225天、270天以及停藥30天，各給藥組及對照組心電圖檢查均為竇性心律，P、T波與QRS主波方向一致，各波電壓、時(shí)間正常。
血液生化檢查，藥前2次、給藥45天、90天、135天、180天、225天、270天以及停藥30天，給藥各組及對照組血液生化10項(xiàng)指標(biāo)，各指標(biāo)均在正常范圍波動，組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
系統(tǒng)尸解，給藥135、270天以及停藥30天，給藥各組及對照組各臟器重量和系數(shù)組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
病理組織學(xué)檢查，給藥135天、給藥270天和停藥恢復(fù)觀察30天，試驗(yàn)各組各組織病理學(xué)檢查均未見異常。
本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明免疫調(diào)節(jié)組合物4.0ml/kg、2.0ml/kg、1.0ml/kg三個(gè)劑量連續(xù)270天插管灌胃給藥和停藥觀察30天，動物未見明顯毒性反應(yīng)，藥物對重要臟器無明顯的病理損傷，認(rèn)為推薦臨床試驗(yàn)劑量有較大安全性。
實(shí)驗(yàn)例二本發(fā)明多菌口服液免疫調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)以上述實(shí)例制備的具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物和免疫調(diào)節(jié)劑按常規(guī)藥效實(shí)驗(yàn)方法分組進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明本發(fā)明中多種有益微生物的代謝產(chǎn)物和微生物孢內(nèi)物質(zhì)中含有大量的可幫助消化的多種酶、菌多糖、小分子蛋白、維生素和多種氨基酸，并且含有大量抗氧化物質(zhì)可以增強(qiáng)人體細(xì)胞所需的各種營養(yǎng)成分，增強(qiáng)激活人體免疫力。本發(fā)明免疫調(diào)節(jié)組合物還具有幫助消化、提高免疫力、殺死和抑制胃腸道中的致病菌并有幫助通排便的作用。
本發(fā)明通過將具有不同功效的成分加以組合，制備成免疫調(diào)節(jié)組合物，不僅提高了人體的免疫力，促進(jìn)身體健康長壽而且能顯著的預(yù)治各種腫瘤疾病。
本發(fā)明具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物的制備方法通過控制營養(yǎng)元素含量的方法配制的有益微生物培養(yǎng)基，實(shí)現(xiàn)了多種有益微生物的共生繁殖，克服了不同微生物菌種間相互抑制的作用，實(shí)現(xiàn)有益微生物能夠在營養(yǎng)充分和全面的環(huán)境中保持持久活力，活菌數(shù)量超出國家標(biāo)準(zhǔn)數(shù)量級，并產(chǎn)生抗病的積極效果，簡化了工藝，節(jié)約了時(shí)間和生產(chǎn)成本。
上述實(shí)例證明本發(fā)明提供的免疫調(diào)節(jié)劑能激活人體免疫系統(tǒng)，特別是巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、NKT細(xì)胞、能有效的快速修復(fù)和重建人體免疫系統(tǒng)，使其更好的攻擊和殺滅變異細(xì)胞，是一種優(yōu)秀的具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物，能用于制備免疫調(diào)節(jié)劑和免疫調(diào)節(jié)保健食品。本發(fā)明制備方法簡便快速、產(chǎn)品得率高、活性強(qiáng)、利于大規(guī)模生產(chǎn)，具有很好的應(yīng)用前景以上對本發(fā)明的詳細(xì)描述并不限制本發(fā)明，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以根據(jù)本發(fā)明作出各種改變及變形，只要不脫離本發(fā)明的精神，均屬于本發(fā)明所附權(quán)利要求所定義的范圍。
權(quán)利要求
1.一種具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物，其特征在于由兩種或多種乳酸菌屬Lacticacid bacteria菌種共同培養(yǎng)得到。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物，特征在于所述的乳酸菌屬菌種是嗜酸乳桿菌Lactobacillus acidophilus、干酪乳桿菌Lactbacillus casri(orla-Jensen)Hansen etlessel、發(fā)酵乳桿菌Lactbacillusfermentium Beijerinck、短雙歧桿菌Bifidobacterium breue Reuer、長雙歧桿菌Bifidobacterium longum Reuer、兩歧雙歧桿菌Bifidobacterium bifidum、嬰兒雙歧桿菌Bifidobacterium infantis Reuer、青春雙歧桿菌Bifidobacteriumadolesce ntis Reuer、干酪乳桿菌干酪亞種Lactabacillus casei subsp.casei、丁酸梭菌Clostridium butylicum、鼠李糖乳桿菌Lactbacillus rhamnosus、植物乳桿菌中。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物，特征在于所述的乳酸菌屬菌種是植物乳桿菌，短雙歧桿菌，干酪乳桿菌，發(fā)酵乳桿菌中的兩種或多種。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物，其特征在于是由所述乳酸菌屬菌種共同液態(tài)培養(yǎng)得到。
5.一種制備權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物的的方法，包括以下的步驟a、將選取的乳酸菌屬菌種制備成生產(chǎn)種子；b、將生產(chǎn)種子接種到培養(yǎng)基上，在25℃-35℃溫度下進(jìn)行共同培養(yǎng)；c、收集培養(yǎng)產(chǎn)物，調(diào)整濃度后分裝。
6.一種具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物，是由權(quán)利要求5所述的方法制備而成的。
7.一種具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物，是由權(quán)利要求1-4、6任一項(xiàng)所述的免疫調(diào)節(jié)組合物添加藥學(xué)上可以接受的輔助性成分制備而成的。
8.權(quán)利要求1-4、6任一項(xiàng)所述具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物在制備免疫調(diào)節(jié)保健食品中的用途。
9.權(quán)利要求1-4、6任一項(xiàng)所述具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物在制備免疫調(diào)節(jié)劑中的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種具有免疫調(diào)節(jié)功能的多菌組合物，以及該多菌組合物的制備方法與用途。該多菌組合物是由兩種或多種乳酸菌屬(Lacticacid bacteria)菌種共同培養(yǎng)得到。本發(fā)明多菌組合物能激活和快速修復(fù)并重建免疫系統(tǒng)，使免疫細(xì)胞有能力去攻擊和殺滅變異細(xì)胞，從而達(dá)到提高免疫力的目的。本發(fā)明多菌組合物能用于制備免疫調(diào)節(jié)劑、抗癌藥物與保健食品。
文檔編號A61P37/02GK1957953SQ200610131968
公開日2007年5月9日 申請日期2006年10月13日 優(yōu)先權(quán)日2005年10月14日
發(fā)明者王殿學(xué), 王晶晶 申請人:德陽創(chuàng)新生物工程有限公司