本發(fā)明涉及魚(yú)類(lèi)產(chǎn)品深加工技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及基于馬鮫魚(yú)活性多肽的復(fù)配物。

背景技術(shù)：

馬鮫魚(yú)（scomberomorusniphonius）體形狹長(zhǎng)，頭及體背部藍(lán)黑色，一般體長(zhǎng)為25~50厘米、體重300~1000克。分布于北太平洋西部，我國(guó)產(chǎn)于黃海和渤海。馬鮫魚(yú)肉質(zhì)細(xì)嫩潔白，糯軟鮮爽，營(yíng)養(yǎng)豐富，尾巴的味道特別好，物美價(jià)廉，素有"鯧魚(yú)嘴，馬鮫尾"之說(shuō)。馬鮫魚(yú)生得渾身肥滿(mǎn)，是一種經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高的海產(chǎn)優(yōu)質(zhì)魚(yú)類(lèi)，每百克魚(yú)肉含蛋白質(zhì)19.1克，脂肪2.5克，并含多種維生素等。馬鮫魚(yú)膽固醇含量低，富含提高人腦智力的dha元素和大量蛋白質(zhì)、氨基酸以及鈣、鐵、鈉等微量元素，還具有提神和防衰老等食療功效，常食對(duì)治療貧血、早衰、營(yíng)養(yǎng)不良、產(chǎn)后虛弱和神經(jīng)衰弱等癥有一定輔助療效。馬鮫魚(yú)肉多刺少，肉嫩味美，民間有"山上鷓鴣獐，海里馬鮫魚(yú)"的贊譽(yù)。

生物活性肽(bioactivepeptides)是指一類(lèi)有特殊生理活性的肽類(lèi)，一般由3到20個(gè)氨基酸組成，具有各種代謝和生理調(diào)節(jié)功能。肽的吸收機(jī)制要比氨基酸好，蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)蛋白酶酶解后，大部分以多肽形式被吸收，所以其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值要比游離態(tài)的氨基酸高。生物活性肽按來(lái)源可以分為陸地和海洋生物活性肽；按功能可以分為感官肽和生理功能肽，其中生理功能肽包括抑菌肽、抗氧化肽、降血壓肽、降血脂肽等；按獲取方式則可以分為天然存在的生物活性肽、人工合成的和酶解制備的生物活性肽。目前生物活性肽的高效制備主要采用酶解的方式，這種方法有許多優(yōu)點(diǎn)，如條件溫和、安全性高、成本低等，因而備受關(guān)注。利用海洋生物制備生產(chǎn)海洋生物活性肽已成為現(xiàn)在研究的熱點(diǎn)，海洋中存在各種天然生物活性物質(zhì)，作為海洋活性物質(zhì)的重要組成部分天然海洋活性多肽依然成為未來(lái)發(fā)展的焦點(diǎn)。

現(xiàn)有技術(shù)如授權(quán)公告號(hào)為cn103937864b的中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利，公開(kāi)了一種從鳀魚(yú)中分離的活性多肽，得到的抗神經(jīng)細(xì)胞損傷多肽分子量為2,181da；由天門(mén)冬氨酸、蘇氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、異亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、組氨酸、賴(lài)氨酸和精氨酸等十一種氨基酸組成，是一種新型的具有活性的多肽。該多肽可以顯著提高pc12神經(jīng)細(xì)胞的存活率，在終濃度為50μg/ml時(shí)，細(xì)胞存活率與損傷組比較提高了26.4％，有效地減輕了谷氨酸鹽誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞損傷，但該制備方法比較復(fù)雜，不合適工業(yè)化生產(chǎn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種吸收效率高，無(wú)金屬異味，性質(zhì)穩(wěn)定，無(wú)毒副作用，具有改善缺鐵性貧血作用的基于馬鮫魚(yú)活性多肽的復(fù)配物。

本發(fā)明針對(duì)上述技術(shù)中提到的問(wèn)題，采取的技術(shù)方案為：基于馬鮫魚(yú)活性多肽的復(fù)配物，成分及其重量份為：馬鮫魚(yú)活性多肽2~3份、1mol/l的氯化亞鐵溶液0.5~1份、抗壞血酸0.1~0.3份、水90~100份。上述復(fù)配物是一種多肽-亞鐵螯合物，可制成醫(yī)用食品，能容易的透過(guò)腸粘膜而被腸道有效吸收，促進(jìn)和提高了人體對(duì)鐵元素的吸收利用，利用率高，對(duì)人體無(wú)毒副作用，無(wú)金屬異味，性質(zhì)穩(wěn)定，具有改善缺鐵性貧血，促進(jìn)生長(zhǎng)、延緩衰老及增強(qiáng)機(jī)體免疫力等生物及營(yíng)養(yǎng)功能活性。

基于馬鮫魚(yú)活性多肽的復(fù)配物的制備方法，具體操作步驟為：

原料預(yù)處理：將馬鮫魚(yú)副產(chǎn)物切塊，烘干，粉碎后過(guò)100~120目篩，2~6℃下密封保存，備用；

脫脂：將魚(yú)粉以料液比為1:2~4加入石油醚，20~30℃下抽提5~7h脫脂，過(guò)濾，清水洗凈，待石油醚揮發(fā)完全后烘干；

一步酶解：將脫脂后魚(yú)粉按料液比為1:2~4加水，混合均勻，調(diào)節(jié)ph值至6~7，按0.5~1.5%加酶量添加木瓜蛋白酶，在52~75℃下酶解2~3h，滅酶，備用；

二步酶解：將脫脂一步酶解后魚(yú)粉混合液，調(diào)節(jié)ph值至8~9，按1~2%加酶量添加堿性蛋白酶，在50~60℃下酶解2~3h，滅酶，離心，酶解液備用，因?yàn)閴A性蛋白酶水解能力強(qiáng)，但水解位點(diǎn)的活性氨基酸較少，得到的大分子肽段多，經(jīng)離心得到的多肽得率少，不宜作為第一步酶解，而木瓜蛋白酶的水解位點(diǎn)的活性氨基酸較多，故應(yīng)先用木瓜蛋白酶水解，再用堿性蛋白酶作為第二步深度水解，既保證得到的水解液多肽分子量低，同時(shí)含量較高；

脫色、脫腥：將酶解液ph調(diào)節(jié)至3.5~4.5，加入0.3~0.8wt%的活性炭，在40~50℃下攪拌40~50min，經(jīng)2~3μm微濾膜微濾，微濾液備用，活性炭具有發(fā)達(dá)的空隙結(jié)構(gòu)，比表面積大，當(dāng)被脫除的有色物質(zhì)分子直徑小于或等于活性炭孔的入口直徑時(shí)，可被活性炭吸附，起到脫色、脫腥作用；

分離純化：將微濾液ph調(diào)節(jié)至5.5~6.5，濃度為2~3%，在壓力為0.3~0.8mpa下納濾90~110min，超濾收集分子量為1~3kda的肽段液，冷凍干燥，即得馬鮫魚(yú)活性肽，該活性多肽中含有一種氨基酸序列為hshacasysrcycrclrcrvlhpgcvncsr的活性肽，該活性肽帶有高濃度的負(fù)電荷，可通過(guò)多肽的氨基、亞氨基、羰基或羧基以共價(jià)鍵的形式與金屬離子發(fā)生配位形成螯合物，金屬離子借助肽形成有機(jī)態(tài)，避免了腸道吸收中某些物質(zhì)對(duì)金屬離子的沉淀或吸附，可通過(guò)氨基酸或肽的吸收通道被吸收，提高吸收效率，能高效快速地合成蛋白質(zhì)，加快機(jī)體吸收金屬離子的進(jìn)程；

復(fù)配物配制：按配方稱(chēng)取馬鮫魚(yú)活性多肽、1mol/l的氯化亞鐵溶液、抗壞血酸、水，在ph為6~7，溫度為25~35℃下超聲螯合25~35min，即得基于馬鮫魚(yú)活性多肽的復(fù)配物，該復(fù)配物是一種多肽-亞鐵螯合物，可制成醫(yī)用食品，能容易的透過(guò)腸粘膜而被腸道有效吸收，促進(jìn)和提高了人體對(duì)鐵元素的吸收利用，利用率高，對(duì)人體無(wú)毒副作用，無(wú)金屬異味，性質(zhì)穩(wěn)定，具有改善缺鐵性貧血，促進(jìn)生長(zhǎng)、延緩衰老及增強(qiáng)機(jī)體免疫力等生物及營(yíng)養(yǎng)功能活性。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：1）本發(fā)明復(fù)配物是一種多肽-亞鐵螯合物，可通過(guò)氨基酸或肽的吸收通道被吸收，提高吸收效率，能高效快速地合成蛋白質(zhì)，加快機(jī)體吸收金屬離子的進(jìn)程；2）利用率高，無(wú)金屬異味，性質(zhì)穩(wěn)定，無(wú)毒副作用，具有改善缺鐵性貧血，促進(jìn)生長(zhǎng)、延緩衰老及增強(qiáng)機(jī)體免疫力等生物及營(yíng)養(yǎng)功能活性；3）該制備方法采用兩步酶解法制備活性肽，使得到的多肽分子量低，含量較高，無(wú)腥苦味，顏色較淡。

具體實(shí)施方式

下面通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明方案作進(jìn)一步說(shuō)明：

實(shí)施例1：

基于馬鮫魚(yú)活性多肽的復(fù)配物，成分及其重量份為：馬鮫魚(yú)活性多肽2.3份、1mol/l的氯化亞鐵溶液0.8份、抗壞血酸0.2份、水95份。

基于馬鮫魚(yú)活性多肽的復(fù)配物的制備方法，具體操作步驟為：

1）原料預(yù)處理：將馬鮫魚(yú)副產(chǎn)物切塊，在90℃烘箱中烘干，粉碎后過(guò)120目篩，5℃下密封保存，備用；

2）脫脂：將魚(yú)粉以料液比為1:3加入石油醚，23℃下抽提6h脫脂，過(guò)濾，清水洗凈，待石油醚揮發(fā)完全后烘干；

3）一步酶解：將脫脂后魚(yú)粉按料液比為1:3加水，混合均勻，調(diào)節(jié)ph值至6.5，按0.8%加酶量添加木瓜蛋白酶，在55℃下酶解3h，110℃下滅酶17min，備用；

4）二步酶解：將脫脂一步酶解后魚(yú)粉混合液，調(diào)節(jié)ph值至8，按1.6%加酶量添加堿性蛋白酶，在55℃下酶解2h，110℃下滅酶17min，4000r/min下離心15min，去除沉淀物質(zhì)，留酶解液備用，因?yàn)閴A性蛋白酶水解能力強(qiáng)，但水解位點(diǎn)的活性氨基酸較少，得到的大分子肽段多，經(jīng)離心得到的多肽得率少，不宜作為第一步酶解，而木瓜蛋白酶的水解位點(diǎn)的活性氨基酸較多，故應(yīng)先用木瓜蛋白酶水解，再用堿性蛋白酶作為第二步深度水解，既保證得到的水解液多肽分子量低，同時(shí)含量較高；

5）脫色、脫腥：將酶解液ph調(diào)節(jié)至4，加入0.6wt%的活性炭，在48℃下攪拌50min，經(jīng)2μm微濾膜微濾掉活性炭，微濾液備用，活性炭具有發(fā)達(dá)的空隙結(jié)構(gòu)，比表面積大，當(dāng)被脫除的有色物質(zhì)分子直徑小于或等于活性炭孔的入口直徑時(shí)，可被活性炭吸附，起到脫色、脫腥作用；

6）分離純化：將微濾液ph調(diào)節(jié)至6，濃度為2%，在壓力為0.8mpa下納濾100min，超濾收集分子量為1~3kda的肽段液，冷凍干燥，即得馬鮫魚(yú)活性肽，該活性多肽中含有一種氨基酸序列為hshacasysrcycrclrcrvlhpgcvncsr的活性肽，該活性肽帶有高濃度的負(fù)電荷，可通過(guò)多肽的氨基、亞氨基、羰基或羧基以共價(jià)鍵的形式與金屬離子發(fā)生配位形成螯合物，金屬離子借助肽形成有機(jī)態(tài)，避免了腸道吸收中某些物質(zhì)對(duì)金屬離子的沉淀或吸附，可通過(guò)氨基酸或肽的吸收通道被吸收，提高吸收效率，能高效快速地合成蛋白質(zhì)，加快機(jī)體吸收金屬離子的進(jìn)程；

7）復(fù)配物配制：按配方稱(chēng)取馬鮫魚(yú)活性多肽、1mol/l的氯化亞鐵溶液、抗壞血酸、水，在ph為6.8，溫度為30℃下超聲螯合28min，即得基于馬鮫魚(yú)活性多肽的復(fù)配物，該復(fù)配物是一種多肽-亞鐵螯合物，可制成醫(yī)用食品，能容易的透過(guò)腸粘膜而被腸道有效吸收，促進(jìn)和提高了人體對(duì)鐵元素的吸收利用，利用率高，對(duì)人體無(wú)毒副作用，無(wú)金屬異味，性質(zhì)穩(wěn)定，具有改善缺鐵性貧血，促進(jìn)生長(zhǎng)、延緩衰老及增強(qiáng)機(jī)體免疫力等生物及營(yíng)養(yǎng)功能活性。

實(shí)施例2：

基于馬鮫魚(yú)活性多肽的復(fù)配物，成分及其重量份為：馬鮫魚(yú)活性多肽3份、1mol/l的氯化亞鐵溶液0.7份、抗壞血酸0.1份、水95份。

基于馬鮫魚(yú)活性多肽的復(fù)配物的制備方法，具體操作步驟為：

1）原料預(yù)處理：將馬鮫魚(yú)副產(chǎn)物切塊，烘干，粉碎后過(guò)100目篩，3℃下密封保存，備用；

2）脫脂：將魚(yú)粉以料液比為1:3加入石油醚，25℃下抽提5h脫脂，過(guò)濾，清水洗凈，待石油醚揮發(fā)完全后烘干，

3）一步酶解：將脫脂后魚(yú)粉按料液比為1:3加水，混合均勻，調(diào)節(jié)ph值至7，按1.1%加酶量添加木瓜蛋白酶，在55℃下酶解2.5h，滅酶，備用；

4）二步酶解：將脫脂一步酶解后魚(yú)粉混合液，調(diào)節(jié)ph值至8.5，按1.3%加酶量添加堿性蛋白酶，在57℃下酶解2h，滅酶，離心，酶解液備用，因?yàn)閴A性蛋白酶水解能力強(qiáng)，但水解位點(diǎn)的活性氨基酸較少，得到的大分子肽段多，經(jīng)離心得到的多肽得率少，不宜作為第一步酶解，而木瓜蛋白酶的水解位點(diǎn)的活性氨基酸較多，故應(yīng)先用木瓜蛋白酶水解，再用堿性蛋白酶作為第二步深度水解，既保證得到的水解液多肽分子量低，同時(shí)含量較高；

5）脫色、脫腥：將酶解液ph調(diào)節(jié)至4，加入0.5wt%的活性炭，在45℃下攪拌45min，經(jīng)3μm微濾膜微濾，微濾液備用，活性炭具有發(fā)達(dá)的空隙結(jié)構(gòu)，比表面積大，當(dāng)被脫除的有色物質(zhì)分子直徑小于或等于活性炭孔的入口直徑時(shí)，可被活性炭吸附，起到脫色、脫腥作用；

6）分離純化：將微濾液ph調(diào)節(jié)至5.5，濃度為3%，在壓力為0.5mpa下納濾90min，超濾收集分子量為1~3kda的肽段液，冷凍干燥，即得馬鮫魚(yú)活性肽，該活性多肽中含有一種氨基酸序列為hshacasysrcycrclrcrvlhpgcvncsr的活性肽，該活性肽帶有高濃度的負(fù)電荷，可通過(guò)多肽的氨基、亞氨基、羰基或羧基以共價(jià)鍵的形式與金屬離子發(fā)生配位形成螯合物，金屬離子借助肽形成有機(jī)態(tài)，避免了腸道吸收中某些物質(zhì)對(duì)金屬離子的沉淀或吸附，可通過(guò)氨基酸或肽的吸收通道被吸收，提高吸收效率，能高效快速地合成蛋白質(zhì)，加快機(jī)體吸收金屬離子的進(jìn)程；

7）復(fù)配物配制：按配方稱(chēng)取馬鮫魚(yú)活性多肽、1mol/l的氯化亞鐵溶液、抗壞血酸、水，在ph為6.5，溫度為33℃下超聲螯合30min，即得基于馬鮫魚(yú)活性多肽的復(fù)配物，該復(fù)配物是一種多肽-亞鐵螯合物，可制成醫(yī)用食品，能容易的透過(guò)腸粘膜而被腸道有效吸收，促進(jìn)和提高了人體對(duì)鐵元素的吸收利用，利用率高，對(duì)人體無(wú)毒副作用，無(wú)金屬異味，性質(zhì)穩(wěn)定，具有改善缺鐵性貧血，促進(jìn)生長(zhǎng)、延緩衰老及增強(qiáng)機(jī)體免疫力等生物及營(yíng)養(yǎng)功能活性。

本發(fā)明的操作步驟中的常規(guī)操作為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知，在此不進(jìn)行贅述。

以上所述的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行了詳細(xì)說(shuō)明，應(yīng)理解的是以上所述僅為本發(fā)明的具體實(shí)施例，并不用于限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的原則范圍內(nèi)所做的任何修改、補(bǔ)充或類(lèi)似方式替代等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。

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<110>樂(lè)清益昌食品技術(shù)有限公司

<120>基于馬鮫魚(yú)活性多肽的復(fù)配物

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