專利名稱：微生物催化制備(2s, 3r)-2-苯甲酰氨甲基-3-羥基丁酸酯及菌株的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及唐菖蒲伯克霍爾德氏菌(Burkholderia gladioli)ZJB-12126，及其在微生物轉(zhuǎn)化外消旋2-苯甲酰氨甲基-3-羰基丁酸酯制備式(I) (2S，3R)-2-苯甲酰氨甲基-3-羥基丁酸酯中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
4-乙酰氧基氮雜環(huán)丁酮(簡(jiǎn)稱為4AA)，是一種重要的手性合成子，是合成碳青霉烯和青霉烯類新型廣譜抗生素的重要中間體，如用于合成亞胺培南、法羅培南、美羅培南
等4AA的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如式(I)所示。4AA的分子骨架特征是一個(gè)四元內(nèi)酰胺環(huán)，共含有3個(gè)手性中心，存在8 種立體異構(gòu)體，如何高選擇性地建立手性中心，是合成4AA的關(guān)鍵所在。日本Noyori和Takasago公司采用以乙酰乙酸乙酯為起始原料的路線,各步的收率和立體選擇性都很好，總收率高達(dá)50%，是一條非常具有工業(yè)化前景的路線，該工藝路線如式
(I)所示，其中R是含有1-6個(gè)碳原子的飽和低級(jí)烷基。在該路線中，乙酰乙酸乙酯首先與鹵化后N-羥甲基苯甲酰胺反應(yīng)，生成2-苯甲酰氨甲基-3-羰基丁酸酯(式11 )，然后利用手性催化劑(R) -BINAP-Ru經(jīng)過羰基不對(duì)稱還原反應(yīng)，生成(2S，3R) -2-苯甲酰氨甲基_3_羥基丁酸酯(式III)，再經(jīng)過脫保護(hù)基、分子內(nèi)成酰胺鍵、叔丁基二甲硅基保護(hù)、三氯化釕催化下的乙酰氧基化得到4AA。
權(quán)利要求
1.唐菖蒲伯克霍爾德氏菌(Burkholderiagladioli)ZJB-12126，保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，地址中國(guó)，武漢，武漢大學(xué)，郵編430072，保藏編號(hào)CCTCC No M 2012379，保藏日期2012年9月25日。
2.如權(quán)利要求1所述的唐菖蒲伯克霍爾德氏菌ZJB-12126，其特征在于該菌株的16SrDNA序列如SEQ ID No.1所示。
3.如權(quán)利要求1所述的唐菖蒲伯克霍爾德氏菌ZJB-12126在微生物轉(zhuǎn)化外消旋2-苯甲酰氨甲基-3-羰基丁酸酯制備式(I)所示(2S，3R) -2-苯甲酰氨甲基-3-羥基丁酸酯中的應(yīng)用
4.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述微生物轉(zhuǎn)化在2(T45°C、pH5.(T9. O下進(jìn)行。
5.如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于所述微生物轉(zhuǎn)化在ρΗ6.(Γ7. 5的緩沖液中進(jìn)行。
6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于所述緩沖液中還添加有2(Tl00g/L的輔助底物，所述輔助底物為下列之一甲醇、乙醇、異丙醇、葡萄糖、果糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖、甘油。
7.如權(quán)利要求5或6所述的應(yīng)用，其特征在于所述緩沖液中還添加有占緩沖液體積2 20%的助溶劑，所述助溶劑為下列之一甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、二甲基亞砜、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、乙酸乙酯。
全文摘要
本發(fā)明提供了一株能夠催化羰基不對(duì)稱還原的新菌株——唐菖蒲伯克霍爾德氏菌 ZJB-12126，及其在微生物轉(zhuǎn)化外消旋2-苯甲酰氨甲基-3-羰基丁酸酯制備(2S，3R)-2-苯甲酰氨甲基-3-羥基丁酸酯中的應(yīng)用。該菌株保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，地址中國(guó)，武漢，武漢大學(xué)，郵編430072，保藏編號(hào)CCTCC NoM 2012379，保藏日期2012年9月25日。本發(fā)明菌株用于生物轉(zhuǎn)化合成(2S，3R)-2-苯甲酰氨甲基-3-羥基丁酸酯，反應(yīng)條件溫和，環(huán)境友好，更重要的是，產(chǎn)物構(gòu)型主要為(2S，3R)-構(gòu)型，省去了再用化學(xué)法翻轉(zhuǎn)產(chǎn)物構(gòu)型的步驟，因而操作流程簡(jiǎn)單，具有良好的工業(yè)應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)C12P41/00GK103045504SQ20121052774
公開日2013年4月17日 申請(qǐng)日期2012年12月5日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月5日
發(fā)明者鄭裕國(guó), 孫麗慧, 陳翔, 張國(guó)海, 沈寅初 申請(qǐng)人:浙江工業(yè)大學(xué)