專利名稱：復合酶水解雞骨泥生產富含高鈣的動物水解蛋白的新工藝的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及復合酶水解雞骨泥生產富含高鈣的動物水解蛋白(HAP)的新工藝。
背景技術：
我國是禽肉生產的大國。以雞肉為例，2004年，我國的雞肉產量高達988萬噸，占世界雞肉產量的14.58％，約占雞總重25％的雞骨產量也相當可觀。但傳統(tǒng)觀念認為骨頭的營養(yǎng)價值不如肉類，嚴重阻礙了雞骨的開發(fā)和利用。事實上，雞骨中含有豐富的蛋白質和人體所需的微量元素以及磷脂、軟骨素和維生素等多種營養(yǎng)素，且鈣、磷、鐵等礦物質的含量遠遠大于肉類。因而對雞骨進行深度開發(fā)，不但使雞骨中的營養(yǎng)成分得到充分的利用，還可以解決目前骨頭無用的被動局面，為骨泥食品的發(fā)展打開市場。
動物水解蛋白(HAP)營養(yǎng)豐富，易于吸收與利用，可直接制成營養(yǎng)補充劑，或作為新型功能性調味料的基料應用于高檔調味品和湯料的生產，或作為肉味前體物質，通過熱反應技術，能模擬出比植物水解蛋白(HVP)更逼真而強烈的肉香物質。
目前HAP的生產原料主要以肉為主，原料價格高；若以雞肉加工的副產品雞骨為原料，HAP的生產成本將顯著降低，而且與肉水解產物相比，雞骨HAP中還含有豐富的天然鈣。國內由于始終無法突破雞骨的微細化技術，因此主要集中于研究酸解法生產雞骨HAP。眾所周知，酸水解耗時而且污染環(huán)境，水解產物分子量不均，而且部分氨基酸被破壞，而酶法水解生產的HAP以低分子量的小肽和有生物活性的L型游離氨基酸為主，能很好地保存蛋白質原有的營養(yǎng)價值。目前我國現(xiàn)已采用的酶法生產動物水解蛋白技術的主要不足之處在于1.所用的反應底物成本較高，多以肉為主，因而產品的價格偏高，無法普及。
2.酶解反應不夠徹底，使原料的綜合利用率低。
3.酶解產物存在諸如苦味、腥味等缺陷，大多通過吸附、包埋等物理方法或通過外加香料掩蓋酶解產物風味的不足。
發(fā)明內容
本發(fā)明提供了復合酶水解雞骨泥生產富含高鈣的動物水解蛋白(HAP)的新工藝，它很好地解決了原料所帶有的腥味和酶解過程產生的苦味問題，通過復合酶的協(xié)同作用能對原料進行徹底水解，產品多為短肽和游離氨基酸，能直接為人體吸收，提高了產品的綜合利用率，且產品具有一定的ACE(血管緊張素轉化酶)抑制活性。
本發(fā)明的技術方案的特征在于包括下列工藝步驟(1)原料預處理將雞骨進行超微粉碎，制成80-100目的骨泥，加水配制雞骨泥懸浮液，濃度為5％-8％(w/w，重量比)，80-100℃加熱20-30分鐘；(2)在(1)項制得的溶液中加入復合酶進行水解；(3)對(2)項制得的溶液滅酶升高反應體系溫度至85℃-90℃保持10-20分鐘；(4)將(3)項滅酶后的溶液過濾采用離心機，4000-4800轉/分鐘離心8-15分鐘；(5)濃縮取(4)項離心后的上清液，濃縮至15％-25％(w/w)，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
在本發(fā)明的工藝中，由于受熱后，蛋白質變性，會使酶解位點暴露，加快水解速度，但溫度過高或時間過長，蛋白質過度聚合，不利于水解，因此對原料進行預處理時，選用80-100℃下加熱20-30分鐘。水解后升溫至85℃以上的作用在于消滅殘留的蛋白酶，以免在下-個工序中繼續(xù)反應，造成干擾。
與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點1.本發(fā)明采用價格低廉的雞骨為原料，生產高附加值的動物水解蛋自，從而大大降低了成木。
2.本發(fā)明采用低溫粉碎，不易破壞雞骨中的營養(yǎng)成分，使骨骼中的營養(yǎng)物質得以充分利用，如產品中含鈣量為1％；3.在原有基礎上采用復合酶水解，酶解較徹底，產物多為短肽和游離氨基酸，易被人體直接吸收，且益于人體健康；4.水解產物風味良好，無任何苦味和異味，無需脫腥、脫苦處理，簡化了酶解的工藝。
采用本發(fā)明的生產工藝，產品的水解度為25-40％，氮收率高達85-90％，含鈣約為1％，能有效地消除雞骨的腥味以及酶解產生的苦味，大大提高了產品的品質，且通過高效液相色譜，對本發(fā)明雞骨泥的酶解產物進行檢測后，初步鑒定產品具有ACE(血管緊張素轉化酶)抑制活性。
具體實施例方式
本發(fā)明的特征在于包括下列工藝步驟(1)原料預處理將雞骨進行超微粉碎，制成80-100目的骨泥，加水配制雞骨泥懸浮液，濃度為5％-8％(w/w，重量比)，80-100℃加熱20-30分鐘；(2)在(1)項制得的溶液中加入酶進行水解；(3)對(2)項制得的溶液滅酶升高反應體系溫度至85℃-90℃保持10-20分鐘；(4)將(3)項滅酶后的溶液過濾采用離心機，4000-4800轉/分鐘離心8-15分鐘；(5)濃縮取(4)項離心后的上清液，濃縮至15％-25％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液；
(6)對(5)項濃縮后的濃縮液進行噴霧干燥，制得淡黃色粉末狀成品，噴霧干燥時采用噴霧干燥器進行干燥，噴霧干燥器的噴頭壓力2-3kg、進氣口溫度280-290℃、壺溫80-90℃、流速約1-1.2L/h。
在加入酶進行水解過程中，對蛋白酶的要求是水解時相互干擾低，產物的水解度高、風味好，經比較，選用Alcalase水解蛋白酶(諾維信公司商品酶)、或者Protamex復合蛋白酶(諾維信公司商品酶)、或者胰酶加入水解，或者綜合考慮內切酶和外切酶的作用位點以及產品的氮收率、風味、澄清度等因素，選用Alcalase水解蛋白酶和Flavourzyme復合風味蛋白酶(諾維信公司商品酶)先后加入水解，或者選用Protamex復合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶組合水解(兩種酶加入后共同水解)，或者選用胰酶和Flavourzyme復合風味蛋白酶組合水解(兩種酶先后加入后共同水解)，或者選用胰酶和Protamex復合蛋白酶組合水解(兩種酶先后加入后共同水解)，或者選用胰酶和木瓜蛋白酶先后加入水解。
選用Alcalase水解蛋白酶加入時，Alcalase水解蛋白酶用量為雞骨泥原料重量的0.75-1.5％，控制反應溫度為60-65℃，調整pH為8.0-9.5，反應1-2小時；選用Protamex復合蛋白酶加入時，Protamex復合蛋白酶用量為雞骨泥原料重量的1.0-1.5％，控制溫度為50-55℃，調整pH為6.5-7.5，反應1-2小時；選用胰酶加入時，胰酶用量為雞骨泥原料重量的0.5-1.5％，控制溫度為50-55℃，調整pH為8.0-9.0，反應1-2小時；選用Alcalase和Flavourzyme復合風味蛋白酶先后加入時，Alcalase和Flavourzyme復合風味蛋白酶用量分別為雞骨泥原料重量的0.75-1.5％和1.5-2.5％；先控制反應溫度為60-65℃，調整pH為8.0-9.5，加入Alcalase；水解1小時后，控制溫度為50-55℃，調整pH為6.5-7.5，加入Protamex，反應2-4小時；選用Protamex復合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶組合水解(兩種酶加入后共同水解)時，Protamex復合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶用量分別為雞骨泥原料重量的1.0-1.5％和1.5-3.0％，控制反應溫度為50-55℃，調整pH為6.5-7.5，反應2-3小時；選用胰酶和Flavourzyme復合風味蛋白酶組合水解(兩種酶先后加入后共同水解)時，胰酶和Flavourzyme復合風味蛋白酶用量分別為雞骨泥原料重量的0.5-1.5％和1.5-2.5％，控制反應溫度為50-55℃，調整pH為8.0-9.0，反應2-3小時；選用胰酶和Protamex復合蛋白酶組合水解(兩種酶先后加入后共同水解)時，胰酶和Protamex復合蛋白酶用量分別為雞骨泥原料重量的0.5-1.5％和1.0-1.5％，控制反應溫度為50-55℃，調整pH為8.0-9.0，反應2-3小時；選用胰酶和木瓜蛋白酶先后加入時，胰酶和木瓜蛋白酶用量分別為雞骨泥原料重量的0.5-1.5％和1.0-2.0％；先控制反應溫度為50-55℃，調整pH為8.0-9.0，加入胰酶；水解1小時后，控制溫度為60-70℃，調整pH為5.5-6.5，加入木瓜蛋白酶，反應1-2小時。
通過對照實驗，比較分步水解(第一種酶水解一定程度后加入第二種酶)與組合水解(兩種酶先后加入后共同水解)對酶解效果的影響。
(1)分段水解Alcalase水解蛋白酶反應一段時間后再加入Flavourzyme復合風味蛋白酶；組合水解Alcalase水解蛋白酶和Flavourzyme復合風味蛋白酶先后加入后共同水解；比較結果分段水解效果更好。
(2)分段水解AS1.398中性蛋白酶反應一段時間后再加入Protamex復合蛋白酶；組合水解Protamex復合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶先后加入后共同水解；比較結果兩種水解方法效果相差不大，為簡化工藝，選用后者。
(3)分段水解胰酶反應一段時間后再加入Flavourzyme復合風味蛋白酶；組合水解胰酶和Flavourzyme復合風味蛋白酶先后加入后共同水解；比較結果兩種水解方法效果相差不大，為簡化工藝，選用后者。
(4)分段水解胰酶反應一段時間后再加入Protamex復合蛋白酶；組合水解胰酶和Protamex復合蛋白酶先后加入后共同水解；比較結果兩種水解方法效果相差不大，為簡化工藝，選用后者。
(5)分段水解胰酶反應一段時間后再加入木瓜蛋白酶；組合水解胰酶和木瓜蛋白酶先后加入后共同水解；比較結果分段水解效果更好。
通過比較(1)(5)選用分段水解；(2)(3)(4)選用組合水解。
進一步比較組合水解時兩種酶加入的先后順序對酶解的影響，發(fā)現(xiàn)Protamex復合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶加入的順序對水解效果影響不大；胰酶和Flavourzyme復合風味蛋白酶先后加入時的水解效果更好；胰酶和Protamex復合蛋白酶先后加入時的水解效果更好。
下面通過具體實施例對本發(fā)明做進一步的說明實施例11.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(80日)。加水至底物濃度為5％(重量比)，于90℃下加熱25分鐘。
2.水解控制反應溫度為60℃，調整pH為9.5，加入Alcalase水解蛋白酶，加酶量為原料重量1.0％，反應2小時。
3.滅酶85℃下保持20分鐘。
4.過濾采用離心機，4000轉/分鐘離心15分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至20％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力2kg、進氣口溫度290℃、壺溫90℃、流速約1.2L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例21.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(100目)。加水至底物濃度為8％(重量比)，于80℃下加熱30分鐘。
2.水解控制反應溫度為65℃，調整pH為8.0，加入Alcalase水解蛋白酶，加酶量為原料重量0.75％，反應1.5小時。
3.滅酶90℃下保持10分鐘。
4.過濾采用離心機，4800轉/分鐘離心8分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至25％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力2.5kg、進氣口溫度280℃、壺溫85℃、流速約1.1L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例31.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(90目)。加水至底物濃度為6％(重量比)，于100℃下加熱20分鐘。
2.水解控制反應溫度為62℃，調整pH為9.0，加入Alcalase水解蛋白酶，加酶量為原料重量1.5％，反應1小時。
3.滅酶87℃下保持15分鐘。
4.過濾采用離心機，4500轉/分鐘離心10分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至15％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力3kg、進氣口溫度300℃、壺溫80℃、流速約1L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例41.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(90目)。加水至底物濃度為6％(重量比)，于100℃下加熱20分鐘。
2.水解控制反應溫度為50℃，調整pH為7.5，加入Protamex復合蛋白酶，加酶量為原料重量1.5％，反應1小時。
3.滅酶90℃下保持10分鐘。
4.過濾采用離心機，4800轉/分鐘離心8分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至20％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力2.5kg、進氣口溫度280℃、壺溫85℃、流速約1.1L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例51.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(80目)。加水至底物濃度為5％(重量比)，于90℃下加熱25分鐘。
2.水解控制反應溫度為55℃，調整pH為6.5，加入Protamex復合蛋白酶，加酶量為原料重量1.2％，反應1.5小時。
3.滅酶87℃下保持15分鐘。
4.過濾采用離心機，4500轉/分鐘離心10分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至25％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力3kg、進氣口溫度300℃、壺溫80℃、流速約1L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例61.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(100目)。加水至底物濃度為8％(重量比)，于80℃下加熱30分鐘。
2.水解控制反應溫度為52℃，調整pH為7.0，加入Protamex復合蛋白酶，加酶量為原料重量1％，反應2小時。
3.滅酶85℃下保持20分鐘。
4.過濾采用離心機，4000轉/分鐘離心15分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至15％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力2kg、進氣口溫度290℃、壺溫90℃、流速約1.2L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例71.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(80目)。加水至底物濃度為5％(重量比)，于90℃下加熱25分鐘。
2.水解控制反應溫度為53℃，調整pH為8.5，加入胰酶，酶用量為雞骨泥原料的1.5％，反應1小時。
3.滅酶87℃下保持15分鐘。
4.過濾采用離心機，4000轉/分鐘離心15分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至25％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力2kg、進氣口溫度290℃、壺溫90℃、流速約1.2L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例81.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(90目)。加水至底物濃度為6％(重量比)，于100℃下加熱20分鐘。
2.水解控制反應溫度為50℃，調整pH為9.0，加入胰酶，酶用量為雞骨泥原料的1.0％，反應1.5小時。
3.滅酶90℃下保持10分鐘。
4.過濾采用離心機，4500轉/分鐘離心10分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至20％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力2.5kg、進氣口溫度280℃、壺溫85℃、流速約1.1L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例91.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(100目)。加水至底物濃度為8％(重量比)，于80℃下加熱30分鐘。
2.水解控制反應溫度為55℃，調整pH為8.0，加入胰酶，酶用量為雞骨泥原料的0.5％，反應2小時。
3.滅酶85℃下保持20分鐘。
4.過濾采用離心機，4800轉/分鐘離心8分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至20％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力3kg、進氣口溫度300℃、壺溫80℃、流速約1L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例101.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(90目)。加水至底物濃度為6％(重量比)，于100℃下加熱20分鐘。
2.水解控制反應溫度為65℃，調整pH為9.5，加入Alcalase水解蛋白酶，加酶量為原料重量0.75％，反應1小時后，控制溫度為50℃，調整pH為7.5，加入1.5％Flavourzyme復合風味蛋白酶，反應2.5小時。
3.滅酶85℃下保持20分鐘。
4.過濾采用離心機，4800轉/分鐘離心8分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至20％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力2kg、進氣口溫度290℃、壺溫90℃、流速約1.2L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例111.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(100目)。加水至底物濃度為7％(重量比)，于80℃下加熱30分鐘。
2.水解控制反應溫度為60℃，調整pH為8.5，加入Alcalase水解蛋白酶，加酶量為原料重量1.0％，反應1小時后，控制溫度為55℃，調整pH為7.0，加入2.0％Flavourzyme復合風味蛋白酶，反應3小時。
3.滅酶87℃下保持15分鐘。
4.過濾采用離心機，4500轉/分鐘離心10分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至15％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力2.5kg、進氣口溫度280℃、壺溫85℃、流速約1.1L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例12
1.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(80目)。加水至底物濃度為5％(重量比)，于90℃下加熱25分鐘。
2.水解控制反應溫度為62℃，調整pH為8.0，加入Alcalase水解蛋白酶，加酶量為原料重量1.5％，反應1小時后，控制溫度為53℃，調整pH為6.5，加入2.5％Flavourzyme復合風味蛋白酶，反應2小時。
3.滅酶90℃下保持10分鐘。
4.過濾采用離心機，4000轉/分鐘離心15分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至25％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力3kg、進氣口溫度300℃、壺溫80℃、流速約1L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例131.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(100目)。加水至底物濃度為8％(重量比)，于80℃下加熱30分鐘。
2.水解控制反應溫度為55℃，調整pH為7.0，加入Protamex復合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶，酶用量分別雞骨泥原料的1.5％和1.5％，反應2.5小時。
3.滅酶90℃下保持10分鐘。
4.過濾采用離心機，4000轉/分鐘離心15分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至20％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力2kg、進氣口溫度290℃、壺溫90℃、流速約1.2L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例141.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(80目)。加水至底物濃度為5％(重量比)，于90℃下加熱25分鐘。
2.水解控制反應溫度為50℃，調整pH為7.5，加入Protamex復合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶，酶用量分別雞骨泥原料的1.2％和2.0％，反應3小時。
3.滅酶85℃下保持20分鐘。
4.過濾采用離心機，4800轉/分鐘離心8分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至25％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力2.5kg、進氣口溫度280℃、壺溫85℃、流速約1.1L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例151.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(90目)。加水至底物濃度為6％(重量比)，于100℃下加熱20分鐘。
2.水解控制反應溫度為53℃，調整pH為6.5，加入Protamex復合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶，酶用量分別雞骨泥原料的1.0％和3.0％，反應2小時。
3.滅酶88℃下保持15分鐘。
4.過濾采用離心機，4500轉/分鐘離心10分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至15％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力3kg、進氣口溫度300℃、壺溫80℃、流速約1L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例161.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(80目)。加水至底物濃度為5％(重量比)，于90℃下加熱25分鐘。
2.水解控制反應溫度為52℃，調整pH為9.0，先后加入胰酶和Flavourzyme復合風味蛋白酶，酶用量分別雞骨泥原料的1.5％和1.5％，反應2小時。
3.滅酶85℃下保持20分鐘。
4.過濾采用離心機，4000轉/分鐘離心15分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至20％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力2kg、進氣口溫度290℃、壺溫90℃、流速約1.2L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例171.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(90目)。加水至底物濃度為7％(重量比)，于100℃下加熱20分鐘。
2.水解控制反應溫度為50℃，調整pH為8.0，先后加入胰酶和Flavourzyme復合風味蛋白酶，酶用量分別雞骨泥原料的0.5％和2.5％，反應3小時。
3.滅酶87℃下保持15分鐘。
4.過濾采用離心機，4800轉/分鐘離心8分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至25％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力2.5kg、進氣口溫度280℃、壺溫85℃、流速約1.1L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例181.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(100目)。加水至底物濃度為8％(重量比)，于80℃下加熱30分鐘。
2.水解控制反應溫度為55℃，調整pH為8.5，先后加入胰酶和Flavourzyme復合風味蛋白酶，酶用量分別雞骨泥原料的1.0％和2.0％，反應2.5小時。
3.滅酶85℃下保持20分鐘。
4.過濾采用離心機，4500轉/分鐘離心10分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至15％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力3kg、進氣口溫度300℃、壺溫80℃、流速約1L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例191.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(90目)。加水至底物濃度為7％(重量比)，于100℃下加熱20分鐘。
2.水解控制反應溫度為50℃，調整pH為8.0，先后加入胰酶和Protamex復合蛋白酶，酶用量分別雞骨泥原料的0.5％和1.5％，反應3小時。
3.滅酶87℃下保持15分鐘。
4.過濾采用離心機，4800轉/分鐘離心8分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至25％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力2.5kg、進氣口溫度280℃、壺溫85℃、流速約1.1L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例20原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(80目)。加水至底物濃度為5％(重量比)，于90℃下加熱25分鐘。
水解控制反應溫度為52℃，調整pH為9.0，先后加入胰酶和Protamex復合蛋白酶，酶用量分別雞骨泥原料的1.0％和1.0％，反應2小時。
滅酶85℃下保持20分鐘。
過濾采用離心機，4000轉/分鐘離心15分鐘。
濃縮取離心的上清液，濃縮至20％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力2kg、進氣口溫度290℃、壺溫90℃、流速約1.2L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例211.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(100目)。加水至底物濃度為8％(重量比)，于80℃下加熱30分鐘。
2.水解控制反應溫度為55℃，調整pH為8.5，先后加入胰酶和Protamex復合蛋白酶，酶用量分別雞骨泥原料的1.5％和1.3％，反應2.5小時。
3.滅酶85℃下保持20分鐘。
4.過濾采用離心機，4500轉/分鐘離心10分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至15％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力3kg、進氣口溫度300℃、壺溫80℃、流速約1L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例22
1.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(90目)。加水至底物濃度為6％(重量比)，于100℃下加熱20分鐘。
2.水解控制反應溫度為50℃，調整pH為8.5，加入胰酶，加酶量為原料重量0.75％，反應1小時后，控制溫度為65℃，調整pH為6.5，加入1.5％木瓜蛋白酶，反應2小時。
3.滅酶85℃下保持20分鐘。
4.過濾采用離心機，4000轉/分鐘離心15分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至20％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力2kg、進氣口溫度290℃、壺溫90℃、流速約1.2L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例231.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(100目)。加水至底物濃度為8％(重量比)，于80℃下加熱20分鐘。
2.水解控制反應溫度為52℃，調整pH為8.0，加入胰酶，加酶量為原料重量0.5％，反應1小時后，控制溫度為60℃，調整pH為6.0，加入1.0％木瓜蛋白酶，反應1.5小時。
3.滅酶87℃下保持15分鐘。
4.過濾采用離心機，4500轉/分鐘離心10分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至25％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力3kg、進氣口溫度300℃、壺溫80℃、流速約1L/h，制成淡黃色粉狀成品。
實施例241.原料預處理取1Kg雞骨剔肉、清洗，進行粉碎(80目)。加水至底物濃度為5％(重量比)，于90℃下加熱25分鐘。
2.水解控制反應溫度為55℃，調整pH為9.0，加入胰酶，加酶量為原料重量1.5％，反應1小時后，控制溫度為70℃，調整pH為5.5，加入2.0％木瓜蛋白酶，反應1小時。
3.滅酶90℃下保持10分鐘。
4.過濾采用離心機，4800轉/分鐘離心8分鐘。
5.濃縮取離心的上清液，濃縮至25％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
6.噴霧干燥以麥芽糊精為載體，用噴霧干燥器干燥，控制條件為噴頭壓力2.5kg、進氣口溫度280℃、壺溫90℃、流速約1.2L/h，制成淡黃色粉狀成品。
權利要求
1.復合酶水解雞骨泥生產富含高鈣的動物水解蛋白的新工藝，其特征在于包括下列工藝步驟(1)原料預處理將雞骨進行超微粉碎，制成80-100目的骨泥，加水配制雞骨泥懸浮液，濃度為5％-8％，80-100℃加熱20-30分鐘；(2)在(1)項制得的溶液中加入復合酶進行水解；(3)對(2)項制得的溶液滅酶升高反應體系溫度至85℃-90℃保持10-20分鐘；(4)將(3)項滅酶后的溶液過濾采用離心機，4000-4800轉/分鐘離心8-15分鐘；(5)濃縮取(4)項離心后的上清液，濃縮至15％-25％，制得棕褐色、半透明狀的濃縮液。
2.根據(jù)權利要求1所述的復合酶水解雞骨泥生產富含高鈣的動物水解蛋白的新工藝，其特征在于將制得的濃縮液進行噴霧干燥，制得淡黃色粉末狀產品。
3.根據(jù)權利要求2所述的復合酶水解雞骨泥生產富含高鈣的動物水解蛋白的新工藝，其特征在于噴霧干燥時采用噴霧干燥器進行干燥，噴霧干燥器的噴頭壓力2-3kg、進氣口溫度280-300℃、壺溫80-90℃、流速約1-1.2L/h。
4.根據(jù)權利要求1、或2、或3所述的復合酶水解雞骨泥生產富含高鈣的動物水解蛋白的新工藝，其特征在于在加入復合酶進行水解過程中，選用Alcalase水解蛋白酶加入水解，或者選用Protamex復合蛋白酶加入水解，或者選用胰酶加入水解，或者選用Alcalase水解蛋白酶和Flavourzyme復合風味蛋白酶先后加入水解，或者選用Protamex復合蛋白酶和ASl.398中性蛋白酶加入后共同水解，或者選用胰酶和Flavourzyme復合風味蛋白酶先后加入后共同水解，或者選用胰酶和Protamex復合蛋白酶先后加入后共同水解，或者選用胰酶和木瓜蛋白酶先后加入水解。
5.根據(jù)權利要求4所述的復合酶水解雞骨泥生產富含高鈣的動物水解蛋白的新工藝，其特征在于選用Alcalase水解蛋白酶加入時，Alcalase水解蛋白酶用量為雞骨泥原料重量的0.75-1.5％，控制反應溫度為60-65℃，調整pH為8.0-9.5，反應1-2小時；選用Protamex復合蛋白酶加入時，Protamex復合蛋白酶用量為雞骨泥原料重量的1.0-1.5％，控制溫度為50-55℃，調整pH為6.5-7.5，反應1-2小時；選用胰酶加入時，胰酶用量為雞骨泥原料重量的0.5-1.5％，控制溫度為50-55℃，調整pH為8.0-9.0，反應1-2小時；選用Alcalase水解蛋白酶和Flavourzyme復合風味蛋白酶先后加入水解時，Alcalase水解蛋白酶和Flavourzyme復合風味蛋白酶用量分別為雞骨泥原料重量的0.75-1.5％和1.5-2.5％；先控制反應溫度為60-65℃，調整pH為8.0-9.5，加入Alcalase水解蛋白酶；水解1小時后，控制溫度為50-55℃，調整pH為6.5-7.5，加入Flavourzyme復合風味蛋白酶，反應2-3小時；選用Protamex復合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶加入后共同水解時，Protamex復合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶用量分別為雞骨泥原料重量的1.0-1.5％和1.5-3.0％，控制反應溫度為50-55℃，調整pH為6.5-7.5，反應2-3小時；選用胰酶和Flavourzyme復合風味蛋白酶先后加入后共同水解時，胰酶和Flavourzyme復合風味蛋白酶用量分別為雞骨泥原料重量的0.5-1.5％和1.5-2.5％，控制反應溫度為50-55℃，調整pH為8.0-9.0，反應2-3小時；選用胰酶和Protamex復合蛋白酶先后加入后共同水解時，胰酶和Protamex復合蛋白酶用量分別為雞骨泥原料重量的0.5-1.5％和1.0-1.5％，控制反應溫度為50-55℃，調整pH為8.0-9.0，反應2-3小時；選用胰酶和木瓜蛋白酶先后加入水解時，胰酶和木瓜蛋白酶用量分別為雞骨泥原料重量的0.5-1.5％和1.0-2.0％；先控制反應溫度為50-55℃，調整pH為8.0-9.0，加入胰酶；水解1小時后，控制溫度為60-70℃，調整pH為5.5-6.5，加入木瓜蛋白酶，反應1-2小時。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種復合酶水解雞骨泥生產富含高鈣的動物水解蛋白的新工藝，其特征在于，包括下列制備過程將雞骨進行超微粉碎，制成骨泥，配制雞骨泥懸浮液，在80－100℃下加熱預處理20－30分鐘，冷卻至酶反應的最適溫度，調整pH，加入復合酶，反應一定時間后，升溫到85℃－90℃保持10－20分鐘滅酶，產品為棕褐色、半透明狀的濃縮液或淡黃色粉狀物，具有良好的風味。本發(fā)明很好地解決了原料所帶有的腥味和酶解過程產生的苦味問題，通過復合酶的協(xié)同作用能對原料進行徹底水解，產品多為短肽和游離氨基酸，能直接為人體吸收，提高了產品的綜合利用率，且產品具有一定的ACE(血管緊張素轉化酶)抑制活性。
文檔編號A23J3/34GK1802982SQ20061001832
公開日2006年7月19日 申請日期2006年1月23日 優(yōu)先權日2006年1月23日
發(fā)明者倪莉, 丁小燕, 張雯, 饒平凡 申請人:福州大學