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隨機(jī)測(cè)定含EPA鏈化合物的方法與流程

文檔序號(hào):12061456閱讀:來源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.隨機(jī)測(cè)定含EPA鏈化合物的方法,其特征是包括以下步驟:

1)、樣品前處理:

將鯽魚肌肉組織洗凈后研磨成糜,在糜中加入有機(jī)溶劑Ⅰ后震蕩提取,提取完畢后加入純水并震蕩混勻;

所得的混合物用冷凍離心機(jī)離心,移取下相溶液,將該下相溶液干燥,得脂質(zhì)粗提物;

有機(jī)溶劑Ⅰ為甲醇:氯仿=1:2體積比的混合液或者為甲醇:二氯甲烷=1:2體積比的混合液,糜與有機(jī)溶劑Ⅰ的料液比為1g/15~30ml;所加入水的量為有機(jī)溶劑Ⅰ的0.5體積倍;

2)、進(jìn)樣:

將脂質(zhì)粗提物用甲醇:二氯甲烷=1:2體積比的有機(jī)溶劑定容至100mL作為樣品;

移取1mL樣品過0.22μm濾膜后作為待測(cè)樣液,使用針泵注射器注射進(jìn)質(zhì)譜;

3)、質(zhì)譜檢測(cè):

使用負(fù)離子模式,根據(jù)特征子離子尋找所有含有該子離子的母離子,掃描范圍為400-1000Da,駐留時(shí)間為2秒,氣簾氣為10psi,加速電壓為-4500ev,輔助氣Ⅰ為20psi,輔助氣Ⅱ?yàn)?0psi,圖譜累加100~200次;使用Analyst軟件采集數(shù)據(jù);

4)、數(shù)據(jù)分析:

將步驟3)質(zhì)譜檢測(cè)所得譜圖進(jìn)行分析,得各個(gè)離子峰的結(jié)構(gòu)信息。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的隨機(jī)測(cè)定含EPA鏈化合物的方法,其特征是:

所述步驟4)為:

將步驟3)質(zhì)譜檢測(cè)所得譜圖經(jīng)過噪音過濾,基線扣除4Da,去同位素峰后,得到處理后譜圖;將處理后譜圖導(dǎo)出為txt文件后使用Lipid Mass Spec.Prediction軟件鑒定,即可得到各個(gè)離子峰的結(jié)構(gòu)信息。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的隨機(jī)測(cè)定含EPA鏈化合物的方法,其特征是:

所述步驟4)還包括:

各個(gè)母離子濃度經(jīng)公式:計(jì)算,其中Abundancei為化合物豐度,Ai為譜圖中該特定離子峰的峰面積,A1~An為譜圖中所得的所有離子峰的峰面積。

4.根據(jù)權(quán)利要求1~3任一所述的隨機(jī)測(cè)定含EPA鏈化合物的方法,其特征是:

所述步驟1)中,以移取下相溶液后的離心所得物替代水產(chǎn)品組織,以機(jī)溶劑Ⅰ中的二氯甲烷或者氯仿替代機(jī)溶劑Ⅰ;再重復(fù)提取1~3次;將所有提取后所得的下相溶液合并后進(jìn)行后續(xù)的干燥和復(fù)溶。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的隨機(jī)測(cè)定含EPA鏈化合物的方法,其特征是:

所述步驟1)中,用冷凍離心機(jī)離心為:于4℃、8000~12000rpm離心5~15分鐘。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的隨機(jī)測(cè)定含EPA鏈化合物的方法,其特征是:

所述步驟2)中,針泵注射器流速為10~20μL/min。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的隨機(jī)測(cè)定含EPA鏈化合物的方法,其特征是:

所述步驟3)中,所采用的掃描方法為子找母掃描,特征子離子為m/z 301,去簇電壓為-80~-100ev,碰撞電壓為-30~-40ev。

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