專利名稱：用于疾病相關(guān)的硫醇化合物的快速測(cè)定的設(shè)備的制作方法
用于疾病相關(guān)的硫醇化合物的快速測(cè)定的設(shè)備 關(guān)于聯(lián)邦政府贊助的研究&開發(fā)的聲明
在本申請(qǐng)中描述的發(fā)明不是根據(jù)任何聯(lián)邦政府贊助的研究或開發(fā)而作出的。
背景技術(shù)：
直到最近，口腔和全身健康狀態(tài)之間的密切關(guān)系還未充分地了解，并且很大程度上被 忽視。然而，現(xiàn)在強(qiáng)力的身體證據(jù)表明的是，口腔疾病例如牙周炎，與影響全身的失調(diào)緊密 地相關(guān)，例如心血管疾病、II型糖尿病和早產(chǎn)。發(fā)明概述
牙周炎的診斷是以及仍然是費(fèi)力的過程，其中圍繞每個(gè)牙齒的牙周袋中的空間必需被 多次探測(cè)，同時(shí)患者在牙醫(yī)的椅子上坐很長時(shí)間。傳統(tǒng)的診斷操作中涉及的時(shí)間和不適阻 擋了患者，導(dǎo)致這種嚴(yán)重的但可治療的狀況總體是不良診斷的。牙周炎涉及宿主組織的微生物感染和宿主的炎性反應(yīng)。雖然在分析上是可分的， 這兩個(gè)方面實(shí)際上串聯(lián)地作用，在數(shù)年和實(shí)際上數(shù)十年的時(shí)間上引起組織破壞的代價(jià)。鑒于這種長期的遠(yuǎn)景，牙周炎可以看作是連續(xù)事件的一部分，其中某些微生物的 水平逐漸地提高，常常伴隨提高的炎癥。這樣，從與良性的微生物過度生長時(shí)可能出現(xiàn)的相 關(guān)的口臭，到齒齦炎和牙周炎，顯示了正反饋環(huán)的特征，其原則上可以通過合適的預(yù)防和/ 或治療介入來中斷。這種破壞性螺旋的一個(gè)獨(dú)特的生物化學(xué)特征是隨著受試者從口臭發(fā)展到齒齦炎 到牙周炎，某些口腔流體中硫醇化合物水平的提高。硫醇化合物是帶有-SH或巰基官能團(tuán) 的化合物，被認(rèn)為也包括硫化物陰離子(HS_)以及帶有硫醇陰離子(RS_)的化合物?？谇涣黧w中硫醇化合物的測(cè)量一般涉及填滿電路的復(fù)雜的裝置，或多個(gè)步驟、多 個(gè)容器、耗時(shí)的分析。因此，存在著對(duì)測(cè)量口腔流體中硫醇化合物的簡(jiǎn)單、快速和低成本方 式的長期需要。本發(fā)明滿足了這種長期需要，并附帶地解決了快速和方便地測(cè)定流體中硫醇水平 的更一般的難題，以及快速和方便地評(píng)估受試者的各種狀況和/或疾病的風(fēng)險(xiǎn)的更具體的難題。本發(fā)明提供了用于測(cè)定流體的樣品中硫醇化合物的濃度的單次使用的可丟棄的 制品。附圖的簡(jiǎn)要說明
本專利或申請(qǐng)文件含有至少一個(gè)以彩色制作的圖畫。帶有彩色附圖的本申請(qǐng)或?qū)＠?請(qǐng)公開物的拷貝將在請(qǐng)求和支付了必要的費(fèi)用時(shí)由美國專利商標(biāo)局提供。附

圖1描繪了直接接觸法。附圖IA描繪了具有吸飽了試劑溶液的墊片的測(cè)試條。 箭頭表明測(cè)試樣品的應(yīng)用。附圖IB描繪了在一段時(shí)間后的測(cè)試棒，其中墊片在口腔流體進(jìn) 入墊片后(例如，舌接觸)產(chǎn)生顏色，與試劑反應(yīng)來為墊片賦予顏色改變。附圖2A-2D描繪了直接接觸方法。附圖3A-3E描繪了可選擇的測(cè)試條結(jié)構(gòu)。附圖4A和4B描繪了間接接觸設(shè)備(近端/遠(yuǎn)端型)。
附圖5描繪了間接接觸設(shè)備的實(shí)例(屏罩型)。附圖6描繪了間接接觸設(shè)備的實(shí)例(屏罩型)。附圖7A-7D描繪了間接接觸設(shè)備的各種實(shí)施方式，其中折疊或滑動(dòng)使得分離的部 件彼此接觸。附圖8A-8F描繪了本發(fā)明的各種包裝設(shè)計(jì)。附圖9描繪了間接接觸設(shè)備的實(shí)例。附圖10描繪了間接的有蓋的采集器設(shè)備的實(shí)例。附圖11顯示了用原型TDR溶液處理的、在短期穩(wěn)定性研究中使用的材料的結(jié)果。附圖12顯示了從墊片釋放的試劑的量。附圖13顯示了與呈現(xiàn)的TDR的量相比較的信號(hào)水平(可見的輸出)的圖形。發(fā)明的詳細(xì)說明
本發(fā)明提供了用于測(cè)定流體的樣品中硫醇化合物的濃度的單次使用的可丟棄的制品。本發(fā)明的以下的詳細(xì)說明意圖被診斷測(cè)試條和化學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)人員理解。因此， 詳細(xì)說明中采用的術(shù)語意圖一般地具有它們?cè)谠\斷測(cè)試條和化學(xué)領(lǐng)域中普通的含義。在所 采用的術(shù)語沒有為這些領(lǐng)域所特有的一般含義時(shí)，這些術(shù)語意圖是具有同時(shí)代的美國英語 運(yùn)用之內(nèi)的普通含義，其中的使用意圖是具有持久的法律效力。如果任何術(shù)語在本文件的 文本中被定義或澄清，本文件的文本內(nèi)的定義或澄清意圖控制該術(shù)語的任何其他含義。當(dāng)與本發(fā)明聯(lián)系使用時(shí)，“ 5，5 ’ - 二硫代雙_(2-硝基苯甲酸)”、“ 5_( 2-氨乙基)_ 二 硫代-2-硝基苯甲酸”、“N，N’ -二(4-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺” “N，N’ - 二 (3-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺”、“N，N’ - 二(2-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二 硫代二苯胺”、“N，N’ - 二( 2，4- 二硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺”和“N，N’ - 二 (4-nitrocinnamalylidene)-4, 4’ - 二硫代二苯胺”不僅是指相應(yīng)的化學(xué)組成本身，還指任 何它的鹽，包括任何它的化妝學(xué)和/或藥學(xué)上可接受的鹽。當(dāng)與本發(fā)明聯(lián)系使用時(shí)，“吸收材料”是指纖維材料。在某些實(shí)施方式中，所述吸 收材料是合成的、生物相容的、無紡的和/或多孔的/材料。吸收材料可以是，例如，包含聚 酰胺的纖維材料。相信的是，吸收材料可以是例如美國專利NO. 7，290, 668中描述的材料。 吸收材料可以是TRANS0RB 牌的材料(TRANS0RB是Filtrona Richmond, Inc .的注冊(cè)商 標(biāo))，例如稱為 R-27378 或 R28445 D#4345 的 TRANS0RB 牌材料，可從 Filtrona Fibertec, Richmond, Virginia, US 獲得。當(dāng)與本發(fā)明聯(lián)系使用時(shí)，“流體”是指至少其相當(dāng)部分可以經(jīng)歷流動(dòng)的材料。氣體 和液體是流體。流體不必是勻質(zhì)的，但是可以含有偶發(fā)的顆?；蚱渌鈦砦镔|(zhì)。因此，唾液、 齦溝液、齦線生物膜、舌生物膜、舌刮擦物和呼吸是流體，這些的任意多種的混合物也是，雖 然這些當(dāng)中的任何可以含有某些固體。當(dāng)與本發(fā)明聯(lián)系使用時(shí)，“基質(zhì)”是指根據(jù)本發(fā)明的物體的部分或部件，樣品可以 被采集在其中和/或其上，不是指被采樣的流體，也不是指該流體中的被分析物。當(dāng)與本發(fā)明聯(lián)系使用時(shí)，“樣片(swatch)，，是指代表性的顏色樣本。本發(fā)明在許多實(shí)施方式中提供，尤其是，可以在各個(gè)方面中了解。以下方面提供了 本發(fā)明的廣度和可用性的說明性但非限制性的描述。本發(fā)明提供了以下方面的每一個(gè)
方面1. 一種用于測(cè)定流體的樣品中硫醇化合物的濃度的單次使用的可丟棄的制品，所述制品包括
(a)包含至少一種吸收材料的基質(zhì)，所述基質(zhì)能夠吸收所述樣品；和
(b)一定量的檢測(cè)試劑，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述樣品的至少一部分 接觸之后的時(shí)間期間，所述檢測(cè)試劑的量能夠提供表明所述樣品中硫醇化合物的濃度的信號(hào)。方面2.方面1的制品，其中所述制品是測(cè)試條。方面3.方面1的制品，其中所述流體的樣品是生理性流體的樣品。方面4.方面3的制品，其中所述生理性流體是口腔流體。方面5.方面4的制品，其中所述口腔流體包括唾液和/或齦溝液和/或齦線生物 膜和/或舌生物膜和/或舌刮擦物和/或呼吸。方面6.方面1的制品，其中所述至少一種吸收材料包括聚酰胺材料。方面7.方面1的制品，其中所述檢測(cè)試劑包括以下的至少一種5，5’_ 二硫代 雙-(2-硝基苯甲酸)；5_ (2-氨乙基)-二硫代-2-硝基苯甲酸；N，N’-二(4-硝基苯亞 甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N, N，- 二(3-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N, N’ - 二 (2-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N，N’ - 二(2，4- 二硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代 二苯胺；N, N，- 二(4-nitrocinnamalylidene) -4, 4，- 二硫代二苯胺。方面8.方面7的制品，其中所述檢測(cè)試劑是5，5’ - 二硫代雙_(2_硝基苯甲酸)。方面9.方面1的制品，其中所述時(shí)間在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述 樣品的至少一部分接觸之后約一秒開始，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述樣品的 至少一部分接觸之后約十分鐘結(jié)束。方面10.方面1的制品，其中所述時(shí)間在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述 樣品的至少一部分接觸之后約五秒開始，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述樣品的 至少一部分接觸之后約五分鐘結(jié)束。方面11.方面1的制品，其中所述信號(hào)包括電磁信號(hào)。方面12.方面11的制品，其中所述電磁信號(hào)包括可見信號(hào)。方面13. —種用于測(cè)定流體的樣品中硫醇化合物的濃度的方法，所述方法包括
(a)提供單次使用的可丟棄的制品，其包含(i)包含至少一種吸收材料的基質(zhì)，所述 基質(zhì)能夠吸收所述樣品；和(ii) 一定量的檢測(cè)試劑，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與 所述樣品的至少一部分接觸之后的時(shí)間期間，所述檢測(cè)試劑的量能夠提供表明所述樣品中 硫醇化合物的濃度的信號(hào)；
(b)使所述基質(zhì)與所述樣品接觸；
(c)觀察由所述檢測(cè)試劑的量提供的信號(hào)；
(d)將所述檢測(cè)試劑的量所提供的信號(hào)與一個(gè)或更多個(gè)參考值比較，參考值的每一個(gè) 是硫醇化合物的濃度的指示，
從而測(cè)定所述樣品中硫醇化合物的濃度。方面14.方面13的方法，其中所述流體是生理性流體。方面15.方面14的方法，其中所述生理性流體是口腔流體。方面16.方面15的方法，其中所述口腔流體包括唾液和/或齦溝液和/或齦線 生物膜和/或舌生物膜和/或舌刮擦物和/或呼吸。
10
方面17.方面13的方法，其中所述制品是測(cè)試條。方面18.方面13的方法，其中所述至少一種吸收材料包括聚酰胺材料。方面19.方面13的方法，其中所述檢測(cè)試劑包括以下的至少一種5，5’ - 二硫代 雙-(2-硝基苯甲酸)，也稱為DTNB ;5- (2-氨乙基)-二硫代-2-硝基苯甲酸；N，N’-二 (4-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N，N’ - 二(3-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二 苯胺；N，N’ - 二(2-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N，N’ - 二(2，4- 二硝基苯亞甲 基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N，N’ -二(4-nitrocinnamalylidene) -4，4’ - 二硫代二苯胺。方面20.方面19的方法，其中所述檢測(cè)試劑是5，5’-二硫代雙-(2_硝基苯甲 酸)。方面21.方面13的方法，其中所述時(shí)間在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所 述樣品的至少一部分接觸之后約一秒開始，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述樣品 的至少一部分接觸之后約十分鐘結(jié)束。方面22.方面13的方法，其中所述時(shí)間在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所 述樣品的至少一部分接觸之后約五秒開始，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述樣品 的至少一部分接觸之后約五分鐘結(jié)束。方面23.方面13的方法，其中所述信號(hào)包括電磁信號(hào)。方面方面23的方法，其中所述電磁信號(hào)包括可見信號(hào)。方面25.方面M的方法，其中所述一個(gè)或更多個(gè)參考值的每一個(gè)是作為(a)顏 色的樣片和(b)硫醇化合物的濃度的配對(duì)的組合提供的。方面沈.一種用于測(cè)定哺乳動(dòng)物受試者患有特定疾病的風(fēng)險(xiǎn)的方法，所述方法包 括
(a)提供單次使用的可丟棄的制品，其包含(i)包含至少一種吸收材料的基質(zhì)，所述基 質(zhì)能夠吸收所述樣品；和(ii)一定量的檢測(cè)試劑，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所 述樣品的至少一部分接觸之后的時(shí)間期間，所述檢測(cè)試劑的量能夠提供表明所述樣品中硫 醇化合物的濃度的信號(hào)；
(b)使所述基質(zhì)與包含來自所述受試者的一種或更多種生理性流體的樣品接觸；
(c)觀察由所述檢測(cè)試劑的量提供的信號(hào)；
(d)將所述檢測(cè)試劑的量提供的信號(hào)與一個(gè)或更多個(gè)參考值比較，所述參考值的每一 個(gè)是受試者患有特定疾病的風(fēng)險(xiǎn)的指示，從而確定所述受試者患有特定疾病的風(fēng)險(xiǎn)。方面27.方面沈的方法，其中所述流體是生理性流體。方面觀.方面27的方法，其中所述生理性流體是口腔流體。方面四.方面觀的方法，其中所述口腔流體包括唾液和/或齦溝液和/或齦線生 物膜和/或舌生物膜和/或舌刮擦物和/或呼吸。方面30.方面沈的方法，其中所述制品是測(cè)試條。方面31.方面沈的方法，其中所述至少一種吸收材料包括聚酰胺材料。方面32.方面沈的方法，其中所述檢測(cè)試劑包括以下的至少一種5，5 ’-二硫代 雙-(2-硝基苯甲酸);5- (2-氨乙基)-二硫代-2-硝基苯甲酸；N，N’-二(4-硝基苯亞甲 基)-4，4 ’-二硫代二苯胺；N，N’-二(3-硝基苯亞甲基)-4，4 ’-二硫代二苯胺；N，N’ - 二 (2-硝基苯亞甲基)-4，4 ’-二硫代二苯胺；N，N’-二(2，4-二硝基苯亞甲基)-4，4 ’-二硫代二苯胺；N，N’ -二(4-nitrocinnamalylidene) -4，4’ - 二硫代二苯胺。方面33.方面32的方法，其中所述檢測(cè)試劑是5，5’-二硫代雙-(2_硝基苯甲 酸)。方面34.方面沈的方法，其中所述時(shí)間在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所 述樣品的至少一部分接觸之后約一秒開始，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述樣品 的至少一部分接觸之后約十分鐘結(jié)束。方面35.方面沈的方法，其中所述時(shí)間在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所 述樣品的至少一部分接觸之后約五秒開始，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述樣品 的至少一部分接觸之后約五分鐘結(jié)束。方面36.方面沈的方法，其中所述信號(hào)包括電磁信號(hào)。方面37.方面36的方法，其中所述電磁信號(hào)包括可見信號(hào)。方面38.方面37的方法，其中所述一個(gè)或更多個(gè)參考值的每一個(gè)是作為(a)顏色 的樣片和(b)受試者患有特定疾病的風(fēng)險(xiǎn)的配對(duì)的組合提供的。方面39.方面23的方法，其中所述觀察和/或比較的步驟的至少一個(gè)是由自動(dòng)化 的讀取器進(jìn)行的。方面40.方面36的方法，其中所述觀察和/或比較的步驟的至少一個(gè)是由自動(dòng) 化的讀取器進(jìn)行的。方面41.方面38的方法，其中所述特定疾病是牙周炎。方面42.方面38的方法，其中所述特定疾病是齒齦炎。方面43.方面38的方法，其中所述特定疾病是口臭。方面44.方面38的方法，其中所述特定疾病是心血管疾病。方面45.方面38的方法，其中所述特定疾病是II型糖尿病。方面46.方面38的方法，其中所述特定疾病是早產(chǎn)。方面47. —種試劑盒，包含
(a)至少一個(gè)用于測(cè)定流體的樣品中硫醇化合物的濃度的單次使用的可丟棄的制品， 所述制品包括
(i)包含至少一種吸收材料的第一基質(zhì)，所述基質(zhì)能夠吸收所述樣品；和
(ii)一定量的檢測(cè)試劑，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述樣品的至少一部分 接觸之后的時(shí)間期間，所述檢測(cè)試劑的量能夠提供表明所述樣品中硫醇化合物的濃度的可 見信號(hào)；
(b)比較物，其上印刷和/或固定了
(i)至少一個(gè)顏色樣片，相對(duì)所述顏色樣片來比較所述可見信號(hào)；和
(ii)與每個(gè)顏色樣片相聯(lián)系的，表明與所述顏色樣片相關(guān)的硫醇化合物的相對(duì)濃度的 字母數(shù)字標(biāo)識(shí)符；
(c)任選地，適合于含有所述制品和所述比較物的包裝； (d )任選地，所述制品和所述比較物的使用說明書。方面48.方面12的制品，進(jìn)一步包括比較物區(qū)域，所述比較物區(qū)域包含至少一個(gè) 顏色樣片，相對(duì)所述顏色樣片來比較所述可見信號(hào)。方面49. 一種用于測(cè)定來自哺乳動(dòng)物受試者的流體的樣品中硫醇化合物的濃度
12的單次使用的可丟棄的測(cè)試條，所述測(cè)試條包括
(a)包含至少一種吸收材料的基質(zhì)，所述基質(zhì)能夠吸收所述樣品；和
(b)一定量的檢測(cè)試劑，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述樣品的至少一部分 接觸之后的時(shí)間期間，所述檢測(cè)試劑的量能夠提供表明所述樣品中硫醇化合物的濃度的信號(hào)。方面50.方面49的測(cè)試條，其中所述流體包括唾液和/或齦溝液和/或齦線生 物膜和/或舌生物膜和/或舌刮擦物和/或呼吸。方面51.方面49的測(cè)試條，其中所述檢測(cè)試劑包括以下的至少一種5，5’_ 二硫 代雙-(2-硝基苯甲酸);5- (2-氨乙基)-二硫代-2-硝基苯甲酸；N，N’-二(4-硝基苯亞 甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N, N，- 二(3-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N, N’ - 二 (2-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N, N，- 二(2，4- 二硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代 二苯胺；N, N，- 二(4-nitrocinnamalylidene) -4, 4，- 二硫代二苯胺。方面52.方面51的測(cè)試條，其中所述檢測(cè)試劑是5，5’ - 二硫代雙_(2_硝基苯甲 酸)。方面53.方面49的測(cè)試條，其中所述時(shí)間在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與 所述樣品的至少一部分接觸之后約一秒開始，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述樣 品的至少一部分接觸之后約十分鐘結(jié)束。方面方面49的測(cè)試條，其中所述時(shí)間在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與 所述樣品的至少一部分接觸之后約五秒開始，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述樣 品的至少一部分接觸之后約五分鐘結(jié)束。方面55.方面49的測(cè)試條，其中所述信號(hào)包括電磁信號(hào)。方面56.方面55的測(cè)試條，其中所述電磁信號(hào)包括可見信號(hào)。方面57. —種用于測(cè)定哺乳動(dòng)物受試者患有特定疾病的風(fēng)險(xiǎn)的單次使用可丟棄 的測(cè)試條，所述測(cè)試條包括
(a)包含至少一種吸收材料的基質(zhì)，所述基質(zhì)能夠吸收所述樣品；和
(b)一定量的檢測(cè)試劑，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述樣品的至少一部分 接觸之后的時(shí)間期間，所述檢測(cè)試劑的量能夠提供表明所述受試者患有特定疾病的風(fēng)險(xiǎn)的 信號(hào)，和其中
(i)所述檢測(cè)試劑包括以下的至少一種5，5’-二硫代雙-(2-硝基苯甲酸)； 5- (2-氨乙基)-二硫代-2-硝基苯甲酸；N，N' -二(4-硝基苯亞甲基)-4，4' - 二硫代 二苯胺；N，N’ - 二(3-硝基苯亞甲基)-4，4’-二硫代二苯胺；N，N’-二(2-硝基苯亞甲 基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N，N’ - 二( 2，4- 二硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N，N’ - 二 (4-nitrocinnamalylidene)-4, 4’ - 二硫代二苯胺；和(ii)所述特定疾病是以下至少一種 牙周炎、齒齦炎、口臭、心血管疾病、II型糖尿病、早產(chǎn)。方面58.方面57的測(cè)試條，其中所述檢測(cè)試劑包含5，5’ - 二硫代雙_(2_硝基苯 甲酸)。方面59.方面57的測(cè)試條，其中所述特定疾病是牙周炎。方面60.方面57的測(cè)試條，其中所述特定疾病是齒齦炎。方面61.方面57的測(cè)試條，其中所述特定疾病是口臭。
方面 62.方面57的測(cè)試條，其中所述特定疾病是心血管疾病。方面 63.方面57的測(cè)試條，其中所述特定疾病是II型糖尿病。方面 64.方面57的測(cè)試條，其中所述特定疾病是早產(chǎn)。方面 65.一種試劑溶液，包含緩沖液、5，5’-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)(DTNB)
和濕潤劑。方面 66.方面65的試劑溶液，其中所述緩沖液是濃度約5 mM到200 mM的磷酸鈉
緩沖液。方面 67.方面65的試劑溶液，其中所述緩沖液是濃度約20 mM到150 mM的磷酸
鈉緩沖液。方面68.方面65的試劑溶液，其中所述緩沖液是濃度約IOOmM的磷酸鈉緩沖液。
方面69.方面65的試劑溶液，其中所述緩沖液pH值約6. 5到8. 5。
方面70. 方面65的試劑溶液，其中所述緩沖液pH值約6. 5到7. 5。
方面71.方面65的試劑溶液，其中所述緩沖液pH值約7. 0。
方面72.方面65的試劑溶液，其中所述DTNB以約10 mg/L到150 mg/L的濃度存 在。方面73.方面65的試劑溶液，其中所述DTNB以約80 mg/L到120 mg/L的濃度存在。方面74.方面65的試劑溶液，其中所述DTNB以約100 mg/L的濃度存在。 方面75.方面65的試劑溶液，其中所述濕潤劑包括甘油、木糖醇、山梨醇、甘油或
丙二醇方面76.方面75的試劑溶液，其中所述濕潤劑包括甘油。方面77.方面76的試劑溶液，其中所述甘油以按體積約0. 1%到5. 0%的濃度存在。方面78.方面76的試劑溶液，其中所述甘油以按體積約0. 5%的濃度存在。方面79.方面75的試劑溶液，其中所述濕潤劑包括木糖醇。 方面80.方面79的試劑溶液，其中所述木糖醇以按重量約洲到10%的濃度存在。
方面81.方面79的試劑溶液，其中所述木糖醇以按重量約4%的濃度存在。

方面82.方面65的試劑溶液，進(jìn)一步包含調(diào)味劑或香劑。方面83.方面82的試劑溶液，其中所述調(diào)味劑或香劑是薄荷。方面85.方面84的試劑溶液，其中所述醇是異丙醇或乙醇。方面86.方面65的試劑溶液，進(jìn)一步包含堿土金屬或過渡金屬。方面87.方面86的試劑溶液，其中所述金屬包括錳、鎂或鈷。方面88.—種包含固體基底的檢測(cè)設(shè)備，所述固體基底包含檢測(cè)區(qū)域，其中所述
檢測(cè)區(qū)域浸透方面65-87的任一項(xiàng)的試劑溶液方面 89.方面88的檢測(cè)設(shè)備，其中所述試劑溶液被干燥。方面90. 方面88的檢測(cè)設(shè)備，其中所述固體基底是惰性纖維的墊片。方面91. 方面90的檢測(cè)設(shè)備，其中所述纖維包括美國專利NO. 7，290, 668中描述的至少一種材料
方面92.方面90的檢測(cè)設(shè)備，其中所述纖維包含稱為R-27378或R28445 D#4345 的TRANS0RB 牌材料。方面93.方面88的檢測(cè)設(shè)備，其中所述固體基底是矩形的，或由一個(gè)或多個(gè)模切 的形狀組成，一般最多達(dá)約8 mmX8 mm，厚度約1.0 mm。方面94.方面90-93的檢測(cè)設(shè)備，其中所述固體基底進(jìn)一步包含一個(gè)或更多個(gè)標(biāo) 準(zhǔn)區(qū)域。方面95.方面94的檢測(cè)設(shè)備，其中所述一個(gè)或更多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)區(qū)域包含預(yù)定顏色和 強(qiáng)度的比色標(biāo)準(zhǔn)。方面96. —種制造硫醇化合物檢測(cè)設(shè)備的方法，包括使固體基底與根據(jù)方面 65-87的任一項(xiàng)的試劑溶液接觸，以及干燥所述設(shè)備。方面97.通過方面96的方法制造的檢測(cè)設(shè)備。方面98. —種檢測(cè)受試者中的口臭的方法，包括使采自所述受試者的口腔的生理 性流體與方面88或方面97的檢測(cè)設(shè)備接觸來形成接觸了生理性流體的設(shè)備，以及檢測(cè)所 述接觸了生理性流體的設(shè)備中硫醇化合物濃度水平，其中至少約40微摩爾的硫醇的水平 是口臭的指示。方面99. 一種檢測(cè)受試者中的齒齦炎的方法，包括使采自所述受試者的口腔的生 理性流體與方面88或方面97的檢測(cè)設(shè)備接觸來形成接觸了生理性流體的設(shè)備，以及檢測(cè) 所述接觸了生理性流體的設(shè)備中硫醇化合物濃度水平，其中至少約80微摩爾的硫醇的水 平是齒齦炎的指示。方面100. —種檢測(cè)受試者中的牙周病的方法，包括使采自所述受試者的口腔的 生理性流體與方面88或方面97的檢測(cè)設(shè)備接觸來形成接觸了生理性流體的設(shè)備，以及檢 測(cè)所述接觸了生理性流體的設(shè)備中硫醇化合物濃度水平，其中至少約160微摩爾的硫醇的 水平是牙周病的指示。方面101. 方面98、99或100的任一項(xiàng)的方法，其中所述檢測(cè)是通過比較(a)接 觸了生理性流體的設(shè)備與(b )標(biāo)準(zhǔn)物的顏色強(qiáng)度或吸光度來進(jìn)行的。方面102.方面101的方法，其中所述檢測(cè)是通過眼睛進(jìn)行的。方面103.方面101的方法，其中所述檢測(cè)是通過機(jī)械進(jìn)行的。方面104.方面101的方法，其中所述檢測(cè)是通過分光光度計(jì)進(jìn)行的。方面105.方面101的方法，其中所述檢測(cè)提供了定量或半定量的信號(hào)。方面106.方面98、99或100的任一項(xiàng)的方法，其中所述生理性流體是GCF、舌刮 擦物、舌生物膜、齦線生物膜、唾液或呼吸。方面107. —種對(duì)于口腔硫醇化合物的檢測(cè)有用的測(cè)試試劑盒，包括方面65的試 劑溶液、方面88的檢測(cè)設(shè)備或方面97的檢測(cè)設(shè)備。本發(fā)明的進(jìn)一步的方面。本發(fā)明尤其地在以下進(jìn)一步的方面中提供。在正常的狀況中，許多微生物在人體之上或之中生存而不引起對(duì)這些人的損害。 然而，某些微生物的提高的量可能與疾病狀態(tài)相關(guān)聯(lián)。特別有問題的是產(chǎn)生對(duì)人類有毒的 顯著濃度的化學(xué)物的微生物量的提高。這樣的毒素包括揮發(fā)性的含硫化合物(VSC)，例 如，硫化氫、甲硫醇、二甲基二硫醚和二甲基硫。更高濃度的揮發(fā)性硫化合物與某些疾病狀 態(tài)相關(guān)，并與社交的非難狀況相關(guān)，例如口臭，或呼吸臭。期望的是允許揮發(fā)性硫化合物的容易的檢測(cè)，以促進(jìn)潛在致病微生物的存在的檢測(cè)，以及這些微生物相關(guān)的疾病狀態(tài)和狀 況的檢測(cè)。口腔細(xì)菌產(chǎn)生的主要的VSC是硫化氫和甲硫醇。硫化氫由細(xì)菌酶L 一半胱氨酸脫 巰基酶產(chǎn)生，所述酶降解氨基酸L 一半胱氨酸產(chǎn)生硫化氫、銨和2-丙酮酸。另一種主要的 VSC,甲硫醇，在細(xì)菌酶L 一甲硫氨酸γ裂解酶的作用下產(chǎn)生，所述酶分解氨基酸L 一甲硫 氨酸產(chǎn)生甲硫醇、銨和2- 丁酮酸。已經(jīng)報(bào)道了毫摩爾水平的VSC在患有嚴(yán)重牙周病的人的齦溝液(GCF)中出現(xiàn)。VSC 的存在給患有疾病的人的呼吸帶來惡臭。除了惡臭之外，VSC還顯示了是有毒的以及不利 地影響許多哺乳動(dòng)物酶。在口腔內(nèi)的舌背面和其他地方寄居的細(xì)菌的VSC產(chǎn)生給呼出的呼 吸帶來惡臭，引起口臭。幾種口腔流體的每一種中的VSC的水平與牙周病活性的水平直接 相關(guān)。呼出氣中VSC的水平與呼吸臭或口臭的水平直接相關(guān)。雖然本領(lǐng)域中DTNB的比色反應(yīng)可能被認(rèn)為在pH 8. 0下最佳地工作，DTNB的水溶 液在這樣的條件下在室溫下保存幾天時(shí)是不穩(wěn)定的。出乎意料地發(fā)現(xiàn)的是，包含金屬鹽以 及約中性的PH值的調(diào)整賦予了顯著地延長的儲(chǔ)存期限的有利性質(zhì)。舉例來說和非限制性 的，發(fā)現(xiàn)的是，當(dāng)混合物包括磷酸鹽或咪唑緩沖液，PH 7. 0和0. 1 mM氯化錳時(shí)，DTNB混合物 在室溫下維持穩(wěn)定超過一年。因此，本發(fā)明尤其地提供了產(chǎn)色的組合物，其吸光度與和所述 組合物混合的流體中VSC的濃度直接相關(guān)，并且所述組合物具有至少一年的儲(chǔ)存期限。根據(jù)本發(fā)明的制品和/或方法和/或組合物對(duì)于檢測(cè)口腔流體中存在的、以及由 舌背面寄居的尤其是細(xì)菌產(chǎn)生的、和來自齒齦縫的GCF中的惡臭性毒素的存在是有用的。例如，在根據(jù)本發(fā)明的方法的一個(gè)方面中，通過根據(jù)本發(fā)明的制品的至少基質(zhì)部 分輕輕地接觸受試者的口腔中的口腔流體，從而來自受試者口腔的口腔流體被吸收到所述 制品的基質(zhì)部分中，來獲得口腔流體的樣品，然后等待數(shù)秒到數(shù)分鐘之間的時(shí)間，此后觀察 在所述制品的基質(zhì)部分上產(chǎn)生的顏色，所述顏色然后與和所述制品一起提供的顏色比較物 圖表上的一種或更多種顏色比較。舉例來說而非限制性的，根據(jù)本發(fā)明的檢測(cè)VSC的方法可以具有10微摩爾VSC級(jí) 別的檢測(cè)下限，以及2毫摩爾VSC級(jí)別的響應(yīng)范圍的上限。本發(fā)明還提供了檢測(cè)呼出呼吸中VSC的方法。受試者向緊靠受試者口腔持握的根 據(jù)本發(fā)明的制品上呼出呼吸，呼出呼吸的冷凝物接觸并被吸收到所述制品的基質(zhì)部分中。根據(jù)本發(fā)明的制品和/或方法和/或組合物的使用簡(jiǎn)單性促成了護(hù)理專業(yè)人員的 辦公室內(nèi)測(cè)試和受試者的家庭測(cè)試。根據(jù)本發(fā)明的制品和/或方法和/或組合物更一般地 對(duì)于樣品中VSC的檢測(cè)是有用的，所述樣品包括空氣、水、油和/或與糧食或食物接觸的其 他流體，因此對(duì)于微生物代謝作用的產(chǎn)物、致病微生物、口臭、VSC污染、食物腐敗或污染的 檢測(cè)也是有用的。本發(fā)明在許多實(shí)施方式中提供，尤其是，可以在各個(gè)實(shí)施例中了解。以下實(shí)施例提 供了本發(fā)明的廣度和可用性的說明性但非限制性的描述。實(shí)施例1.根據(jù)本發(fā)明的制品的實(shí)施方式的制造。選擇吸收材料。一片選定的吸 收材料浸入溶液中，所述溶液含有溶劑和檢測(cè)試劑以及任選地其他成分。在一段時(shí)間以后， 片層從溶液中取出并干燥。干燥的片層固定在塑料背襯上形成片層-背襯疊層。片層-背 襯疊層切割成條，所述條的每一個(gè)是根據(jù)本發(fā)明的制品。
實(shí)施例2. 吸收材料。例如在美國專利NO. 7，290，668中描述的材料或其他類 似的材料可以用作吸收材料。材料例如稱為R-27378或R28445 D#4345和可從Filtrona Fibertec, Richmond, Virginia, US獲得的TRANS0RB 牌材料可以用作吸收材料。實(shí)施例3. 檢測(cè)試劑。檢測(cè)試劑可以包括5，5’_ 二硫代雙-(2-硝基苯甲酸)； 5-(2-氨乙基)-二硫代-2-硝基苯甲酸；N，N’-二(4-硝基苯亞甲基)-4，4’-二硫代二苯胺； N，N，- 二(3-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N, N，- 二(2-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二 硫代二苯胺；N，N’-二(2，4-二硝基苯亞甲基)-4，4’-二硫代二苯胺；和/或N，N’-二 (4-nitrocinnamalylidene)-4, 4’ - 二硫代二苯胺。二硫代二苯胺化合物，例如在美國專利 NO. 4，414，414的實(shí)施例1_13的任一個(gè)中描述的，作為檢測(cè)試劑是合適的。實(shí)施例4.含有溶劑和檢測(cè)試劑的溶液。水可以用作5，5’ - 二硫代雙-(2-硝基 苯甲酸)的溶劑。非水性溶劑可以用作N，N’-二(4-硝基苯亞甲基)-4，4’-二硫代二苯胺； N，N，- 二(3-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N，N，- 二(2-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二 硫代二苯胺；N，N’-二(2，4-二硝基苯亞甲基)-4，4’-二硫代二苯胺；和/或N，N’-二 (4-nitrocinnamalylidene) -4，4’ - 二硫代二苯胺的溶劑。實(shí)施例5.含有溶劑和檢測(cè)試劑的溶液的任選的其他成分。對(duì)于水溶液，本領(lǐng)域 已知的水可混溶的醇類，例如，異丙醇，可以被包括來促進(jìn)片層的干燥。本領(lǐng)域已知的緩沖 液，例如，磷酸鈉，可以被包括用于PH值穩(wěn)定在接近中性和由此檢測(cè)試劑的穩(wěn)定。本領(lǐng)域已 知的濕潤劑，例如，木糖醇、山梨醇、甘油或丙二醇，可以被包括，從而根據(jù)本發(fā)明的制品可 以保持稍微潮濕和不會(huì)不必要地易碎。本領(lǐng)域已知的二價(jià)陽離子的化妝上可接受的鹽，例 如，氯化錳、氯化鎂或氯化鈷，可以被包括用于根據(jù)本發(fā)明的未使用的制品的顏色-固定。 本領(lǐng)域已知的二價(jià)陽離子的化妝上可接受的螯合劑，例如，乙二胺四乙酸(EDTA)可以被包 括，用于在根據(jù)本發(fā)明的制品的使用期間產(chǎn)生的顏色的穩(wěn)定。本領(lǐng)域已知的香味素、本領(lǐng)域 已知的著色劑和/或本領(lǐng)域已知的抗微生物劑也可以任選地被包括。實(shí)施例6.直接和間接接觸設(shè)備。在第一個(gè)示范性的實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的 制品是薄的和淺的正矩形棱柱體。占據(jù)最大表面積的棱柱的兩個(gè)面之一的末端部分、固定 于其上的是正矩形的棱柱狀的第一墊片。第一墊片含有檢測(cè)試劑。這種實(shí)施方式預(yù)計(jì)用于 樣品與檢測(cè)試劑的直接接觸。在第二個(gè)示范性的實(shí)施方式中，對(duì)于樣品與檢測(cè)試劑的間接 接觸，正矩形的棱柱狀的第二墊片置于與第一個(gè)示范性的實(shí)施方式中固定第一墊片的同一 面的對(duì)側(cè)末端上，所述制品沿著這個(gè)面的緯度方向的軸卷曲，以具有“V”形形狀，第一墊片 處在“V”形的一個(gè)臂的末端，第二墊片處在另一個(gè)臂的末端。在這個(gè)實(shí)施方式中，第二墊片 沒有檢測(cè)試劑。第二墊片與樣品接觸。第二墊片然后與第一墊片接觸，從而將所述樣品的 至少一部分從第二墊片轉(zhuǎn)移到第一墊片。實(shí)施例7.墊片顏色和檢測(cè)試劑的組合的選擇以便于結(jié)果的可視化。在合適的條 件下，DTNB在與硫醇化合物反應(yīng)時(shí)提供了黃色的信號(hào)。在一個(gè)實(shí)施方式中，類似于上述第 一個(gè)示范性的實(shí)施方式中的制品用白色墊片制成。觀察到的是，淡黃色顏色有時(shí)是人眼難 以針對(duì)比較物來辨別的，DTNB提供的黃色信號(hào)將與所述比較物來比較，其帶有白色的樣片 和相應(yīng)于各種硫醇濃度的各種濃淡的黃色的樣片。在一個(gè)可選擇的實(shí)施方式中，類似于上 述第一個(gè)示范性的實(shí)施方式中的制品用藍(lán)色墊片制成。觀察到的是，在這個(gè)藍(lán)色背景上產(chǎn) 生的黃色可以向人眼呈現(xiàn)綠色，在某些情況下比在白色背景上產(chǎn)生的黃色更容易辨別。對(duì)于這種可選擇的實(shí)施方式，提供了比較物，DTNB提供的信號(hào)將針對(duì)所述比較物來比較，其帶 有藍(lán)色的樣片(來匹配未反應(yīng)的墊片)、和與各種硫醇濃度相應(yīng)的各種濃淡的綠色的樣片。實(shí)施例8.根據(jù)本發(fā)明的制品用于診斷目的的用途篩選牙周病的唾液測(cè)試條的 臨床研究。制備根據(jù)本發(fā)明的唾液測(cè)試條，其具有浸透顯色試劑的多孔的墊片，所述顯色試 劑檢測(cè)微生物硫化合物。這項(xiàng)研究比較了有和沒有牙周疾病的受試者中的唾液條(SS)分 值，并檢查了 SS分值和牙周病狀態(tài)的臨床度量之間的關(guān)系。編入了七十三位受試者，平均 年齡(SD) 44. 73 (19.61)，年齡范圍23到85歲，男性百分比55%，白種人百分比44%。對(duì) 每個(gè)牙齒的6個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行牙周病學(xué)評(píng)估，包括菌斑指數(shù)(PI)、齒齦指數(shù)(GI)、臨床的牙周病 學(xué)附著體水平(AL)和探查時(shí)的出血(Β0Ρ)。受試者分成3個(gè)組牙周健康的(沒有附著體的 損失和沒有牙齦出血，18位受試者)、齒齦炎(沒有附著體的損失和存在牙齦出血，32位受試 者)、和牙周炎(在5顆或更多牙齒中附著體的損失〉5 mm，23位受試者)。產(chǎn)色的條被用于 從所有存在的牙齒的牙齦緣采集唾液流體(每個(gè)牙齦1條)。根據(jù)比色圖表對(duì)顯色反應(yīng)計(jì)分。 計(jì)分檢查人對(duì)臨床狀態(tài)是不知曉的。在平均SS分值和GI (r=0. 6，p=0. 001)和AL(r=0. 47， P = 0.001)之間發(fā)現(xiàn)了良好到中度的相關(guān)性。方差分析顯示了在三個(gè)研究組之間SS分值 的顯著差異(P= 0.03) ;p0st-h0C分析顯示了健康和牙周炎之間的差異(p = 0.01)。結(jié)果 表明這些條作為牙周疾病的篩選測(cè)試是有用的。它們使用簡(jiǎn)單，提供了快速的結(jié)果，不需要 臨床的專門技能。同樣的測(cè)試可以在任何醫(yī)學(xué)的/牙科的環(huán)境中容易地進(jìn)行。實(shí)施例9.用于檢測(cè)/估計(jì)溶解的口腔硫醇的裝置和方法?？谇坏目诔艉脱乐?疾病經(jīng)常涉及揮發(fā)性硫化合物(VSC)、主要是硫化氫和甲硫醇的微生物產(chǎn)生。歷史上，工作 集中于檢測(cè)它們?cè)诤舫龊粑械拇嬖?，而不是微生物的生物膜?nèi)的存在。這項(xiàng)研究的目的 是開發(fā)針對(duì)溶解的硫醇的測(cè)試條，其提供了快速可見的結(jié)果，易于使用，對(duì)口腔組織沒有刺 激。篩選了各種材料在用含有根據(jù)本發(fā)明的方面7的硫醇檢測(cè)試劑的溶液預(yù)處理之后提供 對(duì)溶解的硫醇的視覺可辨別反應(yīng)的能力。通過用添加的硫醇攻擊清洗液，光譜學(xué)地估計(jì)了 干燥的檢測(cè)試劑從墊片浸出的傾向。原型測(cè)試條置入穩(wěn)定性研究中以估計(jì)貨架壽命。由獨(dú) 立的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行了刺激測(cè)試。最后，改變檢測(cè)試劑的濃度，來確定是否可以達(dá)到不同的“截 止”結(jié)果顯色。鑒定了多孔的墊片材料，其具有良好的物理性質(zhì)并且適合于硫醇檢測(cè)試劑和 它的生色產(chǎn)物。一旦干燥在墊片上，試劑顯示了在再水化時(shí)浸出的很低傾向，維持了良好的 光譜反應(yīng)，顯示了隨著時(shí)間的過去的合理的穩(wěn)定性。當(dāng)與標(biāo)準(zhǔn)的口腔護(hù)理產(chǎn)品比較時(shí)，發(fā)現(xiàn) 所述試劑對(duì)于培養(yǎng)的齒齦組織細(xì)胞是非刺激性的。最后，通過提高或降低試劑濃度(墊片中 檢測(cè)物的量)，我們發(fā)現(xiàn)我們可以操縱測(cè)試的平臺(tái)期顯色。這些結(jié)果表明本發(fā)明包含的測(cè)試 條作為檢測(cè)口臭和牙周疾病致病病原體的輔助是有用的。實(shí)施例10.利用原型測(cè)試條的溶解的口腔硫醇的檢測(cè)。革蘭氏陰性厭氧菌一般 對(duì)口臭和牙周病特征性的硫化合物負(fù)責(zé)。當(dāng)活躍時(shí)，它們可以通過標(biāo)記代謝活性，例如，硫 化氫和甲硫醇的產(chǎn)生來檢測(cè)。這些可以在氣相中，例如在通過口腔呼出的呼吸中檢測(cè)，然而 這樣的技術(shù)需要昂貴的裝置。因此，制備了相對(duì)便宜的、易于使用和解釋的原型測(cè)試條，其 可以檢測(cè)溶解在水性液體中的揮發(fā)性和非揮發(fā)性的硫醇。這項(xiàng)研究的目的是1)確定測(cè)試 條檢測(cè)舌背面的口腔流體中的硫醇的能力；2)確定測(cè)試條檢測(cè)齒齦表面的口腔流體中的硫 醇的能力；3)比較舌表面的發(fā)現(xiàn)和齒齦表面的發(fā)現(xiàn)；和4)比較測(cè)試條結(jié)果與利用氣相色 譜法分析的樣品。制備原型，其類似于和呈現(xiàn)為像可丟棄的PH值測(cè)試條。它們由軟質(zhì)塑料背襯上的多孔墊片組成。在裝配之前，墊片用硫醇檢測(cè)物溶液處理并干燥。利用標(biāo)準(zhǔn)的硫 醇溶液，產(chǎn)生比色圖表，它的顏色條(樣片)與硫醇的具體濃度相關(guān)。圖表隨后用于估計(jì)未知 的流體樣品中的硫醇濃度。在采集自舌背面的流體、以及來自齒齦表面的流體中檢測(cè)溶解 的硫醇。在小的研究群體中，來自舌背面的溶解的硫醇的平均水平(15 μΜ)相對(duì)低于自齒 齦表面發(fā)現(xiàn)的(88 μΜ)。總體上，具有可檢測(cè)的口腔流體硫醇(任何來源)的個(gè)體顯示了一 般更高水平的揮發(fā)性的硫醇，如通過氣相色譜法測(cè)量的。因此，開發(fā)了快速和容易的分析， 其能夠檢測(cè)口腔流體中溶解的硫醇。舌背面和齒齦生物膜具有潛在的診斷價(jià)值，每一種顯 示了與呼出呼吸中可測(cè)量的原始揮發(fā)性硫醇相關(guān)。這些結(jié)果表明，類似這些的測(cè)試條也可 以在期望估計(jì)的溶解的硫醇時(shí)一般地使用。另外，以下提供了本發(fā)明的進(jìn)一步描述和實(shí)施例說明。本發(fā)明提供了尤其是檢測(cè)硫醇化合物的試劑溶液、檢測(cè)設(shè)備和產(chǎn)色方法，所述硫 醇化合物包括寄居在舌背面上和齒齦縫中的口腔細(xì)菌產(chǎn)生的揮發(fā)性的硫化合物(VSC)。如 在此使用的，“硫醇化合物”是指具有硫醇或“-SH”官能團(tuán)的分子，或具有硫醇鹽或硫化物陰 離子的分子。含硫分子的實(shí)例包括硫化氫和甲硫醇(methanethiol，甲硫醇)。在本發(fā)明的 某些實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的產(chǎn)色組合物的吸光度與同所述組合物混合的流體中硫醇化 合物的濃度直接相關(guān)。根據(jù)本發(fā)明的組合物和方法對(duì)于檢測(cè)舌背面上和獲自齒齦縫的GCF中寄居的細(xì) 菌所產(chǎn)生的惡臭性毒素的存在是有用的。例如，在根據(jù)本發(fā)明的方法的方面中，通過針對(duì)舌背面輕輕地摩擦測(cè)試條獲得舌 刮擦物，來形成裝載了刮擦物的敷涂器尖端。另外，或作為選擇，測(cè)試條可以用唾液濕潤。在 另一個(gè)實(shí)施方式中，通過將消毒的紙吸收點(diǎn)插入到齒齦縫中來獲得GCF樣品。產(chǎn)生發(fā)色團(tuán) 的測(cè)試條或吸收點(diǎn)的顏色與顏色編碼圖表上的標(biāo)準(zhǔn)或與內(nèi)部對(duì)照物比較。在某些實(shí)施方式 中，圖表按照黃色的濃淡分級(jí)，從相應(yīng)于20-100微摩爾硫醇的LOW (淡黃)、相應(yīng)于100-200 微摩爾硫醇的MEDIUM (黃色)到相應(yīng)于>200微摩爾硫醇的HIGH (亮黃)。本發(fā)明提供了，尤其是，含有緩沖液、5，5’ - 二硫代雙(2-硝基苯甲酸)(DTNB)和 濕潤劑的試劑溶液。當(dāng)與本發(fā)明聯(lián)系使用時(shí)，“DTNB”是指5，5’ - 二硫代雙(2-硝基苯甲 酸)。DTNB也稱為Ellman’ s試劑，具有CAS編號(hào)69-78-3。不希望受理論的限制，發(fā)明人相 信，本領(lǐng)域已知的是DTNB與從H2S或CH3SH中存在的-SH官能團(tuán)形成的硫化物或硫醇陰 離子反應(yīng)。在這樣的反應(yīng)中，DTNB的二硫化物硫之一被HS_或CH3S_陰離子攻擊，此時(shí)釋放 5-硫代2-硝基苯甲酸鹽陰離子(TNB)。TNB與互變的硫代苯醌平衡地存在。硫代苯醌具有 在412 nm處最大的吸收(吸光度)，13，GOOM-1CnT1的摩爾消光系數(shù)。這容許反應(yīng)通過混合物 的黃色的提高來光譜學(xué)地或視覺上定量。本發(fā)明還提供了檢測(cè)設(shè)備，其是固體基底，例如，多孔質(zhì)固體基底，包括檢測(cè)區(qū)域， 其中所述檢測(cè)區(qū)域浸透了含有緩沖液、5，5’ - 二硫代雙(2-硝基苯甲酸)(DTNB)和濕潤劑 的試劑溶液。本發(fā)明還提供了制造對(duì)于檢測(cè)生理性流體中硫醇化合物有用的檢測(cè)設(shè)備的方法。 所述制造方法包括使固體基底與含有緩沖液、5，5’ - 二硫代雙(2-硝基苯甲酸)(DTNB)和 濕潤劑的試劑溶液接觸，和干燥所述設(shè)備。本發(fā)明還提供了通過如上所述的方法制造的、對(duì)于檢測(cè)生理性流體中的硫醇化合物有用的檢測(cè)設(shè)備。本發(fā)明提供了通過使取自受試者的口腔的生理性流體與如上所述檢測(cè)設(shè)備接觸， 來形成接觸了生理性流體的設(shè)備，檢測(cè)所述接觸了生理性流體的設(shè)備中硫醇化合物濃度水 平，來檢測(cè)受試者的口臭的方法，其中大于約40微摩爾硫醇的水平是口臭的指示。在某些 實(shí)施方式中，所述硫醇化合物濃度水平在約40-200微摩爾之間。本發(fā)明提供了通過使取自受試者的口腔的生理性流體與如上所述檢測(cè)設(shè)備接觸， 來形成接觸了生理性流體的設(shè)備，檢測(cè)所述接觸了生理性流體的設(shè)備中硫醇化合物濃度水 平，來檢測(cè)受試者的齒齦炎的方法，其中大于約80微摩爾硫醇的水平是齒齦炎的指示。在 某些實(shí)施方式中，所述硫醇化合物濃度水平在約80-400微摩爾之間。本發(fā)明提供了通過使取自受試者的口腔的生理性流體與如上所述檢測(cè)設(shè)備接觸， 來形成接觸了生理性流體的設(shè)備，檢測(cè)所述接觸了生理性流體的設(shè)備中硫醇化合物濃度水 平，來檢測(cè)受試者的牙周炎的方法，其中大于約160微摩爾硫醇的水平是牙周炎的指示。在 某些實(shí)施方式中，所述硫醇化合物濃度水平在約160-600微摩爾之間。本發(fā)明進(jìn)一步提供了對(duì)于檢測(cè)來自口腔的生理性流體中的硫醇化合物有用的測(cè) 試試劑盒，包括試劑溶液的測(cè)試試劑盒，所述試劑溶液含有緩沖液、5，5’ - 二硫代雙(2-硝 基苯甲酸)(DTNB)和潤濕劑，是包括檢測(cè)區(qū)域的固體基底的檢測(cè)設(shè)備，其中所述檢測(cè)區(qū)域浸 透含有緩沖液、5，5’ - 二硫代雙(2-硝基苯甲酸)(DTNB)和濕潤劑的試劑溶液，或通過上述 方法制成的檢測(cè)設(shè)備。試劑溶液.發(fā)明人開發(fā)了在檢測(cè)口臭、齒齦炎和/或牙周疾病中有用的試劑溶 液。所述試劑溶液含有緩沖液、檢測(cè)試劑和濕潤劑。所述緩沖液用于將溶液保持在靠近生 理學(xué)pH值的pH值，其是約7. 0的pH值。當(dāng)前的試劑溶液的pH值可以在約6. 5到8. 5的 范圍內(nèi)，或在約6.5到7.5的范圍內(nèi)。在某些實(shí)施方式中，所述試劑溶液的pH值在7.0。在 某些實(shí)施方式中，所述緩沖液是濃度約5 mM到200 mM的磷酸鈉緩沖液。在某些實(shí)施方式 中，所述緩沖液是濃度約20 mM到150 mM的磷酸鈉緩沖液。在某些實(shí)施方式中，所述緩沖 液是濃度約100 mM的磷酸鈉緩沖液。本發(fā)明的試劑溶液含有檢測(cè)試劑。在某些實(shí)施方式中，所述檢測(cè)試劑是5，5’ - 二 硫代雙(2-硝基苯甲酸)(DTNB)。在某些實(shí)施方式中，所述DTNB以約10 mg/L到150 mg/L 的濃度存在。在某些實(shí)施方式中，所述DTNB以約30 mg/L到150 mg/L的濃度存在。在某 些實(shí)施方式中，所述DTNB以約80 mg/L到120 mg/L的濃度存在。在某些實(shí)施方式中，所述 DTNB以約100 mg/L的濃度存在。本發(fā)明的試劑溶液含有濕潤劑。本發(fā)明的濕潤劑是食品或藥品級(jí)別的。適合的濕 潤劑包括甘油、木糖醇、山梨醇、甘油或丙二醇。在某些實(shí)施方式中，所述試劑溶液包括以按 體積約0. 1%到5.0%的濃度存在的甘油。在某些實(shí)施方式中，所述甘油以按體積約0.5%的 濃度存在。在某些實(shí)施方式中，所述試劑溶液包括木糖醇。在某些實(shí)施方式中，所述木糖醇 以按重量計(jì)算約洲到10%的濃度存在。在某些實(shí)施方式中，所述木糖醇以按重量計(jì)算約4% 的濃度存在。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)對(duì)于某些應(yīng)用，甘油和木糖醇良好地工作，來維持墊片材料的起始 顏色(米色)，以提供檢測(cè)與硫醇/DTNB反應(yīng)相關(guān)的顏色改變的最佳“平臺(tái)”。此外，木糖醇為 墊片表面賦予了甜味(在許多口腔護(hù)理制劑中使用)，甘油賦予了更軟的觸感。添加甘油，一
20種濕潤劑和軟化劑，幫助維持干燥時(shí)起始的墊片顏色，也為墊片提供了更平滑的觸感。本發(fā)明的試劑溶液還可以含有調(diào)味劑或香劑，例如，薄荷。在一個(gè)實(shí)施方式中，0. 5 g羥基丙基β -環(huán)糊精用作載體，向它添加0. 16 mL薄荷油。處在IOmL水中的這種混合物 用作向100 mL試劑溶液中的添加劑。因而，每IL標(biāo)準(zhǔn)試劑溶液量，香味劑/香劑添加物是 5 g羥基丙基環(huán)糊精和1.6 mL薄荷油，復(fù)合的油混合到100 mL水中，之后將它添加到試劑 溶液的主體中。本發(fā)明的試劑溶液還可以含有醇，例如，異丙醇。在某些實(shí)施方式中，使用70%的 異丙醇。醇是USP級(jí)別的。在某些實(shí)施方式中，達(dá)到試劑的十分之一體積是醇。醇的存在 容許檢測(cè)試劑在固體基底例如墊片材料上更快地干燥。本發(fā)明的試劑溶液任選地還可以含有堿土金屬或過渡金屬。適合的金屬的實(shí)例包 括錳、鎂，以及，特別是對(duì)于間接接觸設(shè)備，包括鈷。在室溫和大氣壓力下，當(dāng)水性液體被容 納在開放容器中時(shí)，硫化氫傾向于從溶解了硫化氫的水性液體中逃逸，進(jìn)入開放容器上方 的空氣中。本發(fā)明的設(shè)備和方法在測(cè)量液體樣品以及氣體樣品中的硫醇化合物水平方面是 令人驚訝地成功的。檢測(cè)設(shè)備。發(fā)明人開發(fā)了在檢測(cè)口臭、齒齦炎和/或牙周炎中有用的檢測(cè)設(shè)備。在 某些實(shí)施方式中，所述檢測(cè)設(shè)備是固體基底，其含有檢測(cè)區(qū)域，其中所述檢測(cè)區(qū)域浸透如上 所述的試劑溶液。在某些實(shí)施方式中，所述試劑溶液被干燥在所述固體基底上。發(fā)明人發(fā) 現(xiàn)，一旦試劑溶液被干燥在所述固體基底上，它是相當(dāng)穩(wěn)定的。在某些實(shí)施方式中，可以添 加金屬離子(例如錳)。在某些實(shí)施方式中，所述固體基底是惰性纖維的多孔的墊片。在某些實(shí)施方式中， 所述纖維由美國專利NO. 7，290，668中描述的至少一種材料組成。在某些實(shí)施方式中，所 述纖維由稱為R-27378或R28445 D#4345的TRANS0RB 牌材料組成。在某些實(shí)施方式中， 有色的(例如，藍(lán)色)墊片可以代替白色墊片使用。藍(lán)色的顯現(xiàn)容許可選擇的顏色發(fā)生可能 性，能夠改變墊片的起始顏色，也容許有效地操縱與疾病過程的不同階段相應(yīng)的閾值濃度。 在某些實(shí)施方式中，“標(biāo)準(zhǔn)”墊片或色帶(即，具有靜態(tài)的顏色)緊鄰于“檢測(cè)物”墊片放置。 在其他實(shí)施方式中，這些“標(biāo)準(zhǔn)”和“檢測(cè)物”區(qū)域通過小的間隙互相分隔，顯示在它們之間 的白色背景。當(dāng)視覺地比較某些顏色組合時(shí)，兩個(gè)區(qū)域之間的細(xì)小間隙容許更好的可見性。 發(fā)現(xiàn)的是，當(dāng)檢測(cè)取決于黃色指示物時(shí)，以及當(dāng)顏色強(qiáng)度和/或濃淡的差異細(xì)微、而不是非 常明顯時(shí)，這是實(shí)際的。在某些實(shí)施方式中，也可以使用內(nèi)部對(duì)照物。在某些實(shí)施方式中，固體基底可以被切割或另外形成某些期望的形狀和/或大小 (例如，通過模切)。在某些實(shí)施方式中，所述固體基底例如墊片可以是約0.8 mm到約1.2 mm 之間的厚度、約5. 5 mm到約8 mm之間的寬度，和約7 mm到8 mm之間的長度。可以形成除 了正矩形的棱柱狀形狀以外的形狀，例如，在大約8 mmX8 mm的區(qū)域內(nèi)，例如，形成圓形、菱 形和加號(hào)形。也可以模切其他期望的形狀。并且，也可以引入反應(yīng)性和非反應(yīng)性部分之間 的間隙。在某些實(shí)施方式中，除了具有檢測(cè)區(qū)域之外，檢測(cè)設(shè)備還具有標(biāo)準(zhǔn)區(qū)域。因而，檢 測(cè)設(shè)備的用戶能夠容易地比較檢測(cè)區(qū)域和標(biāo)準(zhǔn)區(qū)域來確定測(cè)試是陽性還是陰性。在某些實(shí) 施方式中，所述標(biāo)準(zhǔn)區(qū)域是預(yù)定強(qiáng)度的比色標(biāo)準(zhǔn)。在一個(gè)實(shí)施方式中，測(cè)試棒被用于直接接觸應(yīng)用(附圖1)。在這個(gè)實(shí)施方式中，使用在棒的一個(gè)末端含有墊片的測(cè)試棒，其中所述墊片浸透測(cè)試溶液。在某些實(shí)施方式中測(cè) 試溶液被干燥，容許溶劑蒸發(fā)。墊片置于與樣品(例如，唾液)直接接觸中。在一段時(shí)間之 后，檢查墊片來確定顏色的發(fā)生。某些實(shí)施方式包括直接接觸試驗(yàn)設(shè)備(附圖2A-2D)。在與測(cè)試樣品接觸時(shí)，反應(yīng)性 墊片可以或可以不改變顏色(取決于樣品中存在的硫醇的水平)。比較物的顏色在測(cè)試期間 不改變，因?yàn)樵诒容^物墊片中不存在檢測(cè)試劑。比較物可以具有a)與反應(yīng)性墊片的起始顏 色相同的顏色(例如，附圖2A，其中樣品中更高的硫醇水平導(dǎo)致反應(yīng)性墊片與比較物顏色逐 漸地分開)，或b)目標(biāo)截止顏色(例如，附圖2B，其中在設(shè)定的時(shí)點(diǎn)，逐步更高的硫醇水平引 起所述反應(yīng)性墊片集中，或可能超過比較物顏色)。可以采用超過一個(gè)比較物，例如，當(dāng)例如 起始和截止比較物顏色都存在時(shí)，分別緊靠反應(yīng)性墊片的上方或下方(附圖2C)。因此，截 止顏色可以表明如果樣品中存在一定的硫醇水平，反應(yīng)性墊片可能獲得的顏色。嵌套的反 應(yīng)性墊片可以(取決于硫醇濃度)獲得或超過比較物的顏色。圍繞反應(yīng)性墊片的間隙(參見 上文的較早的論述)，可以便于顏色改變的更好的識(shí)別。附圖2D描繪了一種情況，其中附圖 2B的墊片位置相反。附圖3 (也是直接接觸形式)描繪了可選擇的測(cè)試條結(jié)構(gòu)，其中模切的(成形的)反 應(yīng)性墊片嵌套在比較物內(nèi)。舉例來說，此處呈現(xiàn)的形狀是圓形、菱形或交叉形。附圖3A-C 描繪了嵌套在比較物內(nèi)的圓形的反應(yīng)性墊片。嵌套的反應(yīng)性墊片可以(取決于硫醇濃度)獲 得或超過比較物的顏色。作為陽性測(cè)試的指示的匹配或超過比較物顏色由附圖3A和;3B顯 示。作為陽性測(cè)試的指示的單獨(dú)的超過由附圖3C-E顯示。附圖3C和3D類似于3C，但是具 有非圓形的反應(yīng)性墊片。沒有在這個(gè)系列中顯示的是圍繞反應(yīng)性墊片的間隙(參見上文的 較早的論述)，其可以便于顏色改變的更好的識(shí)別。本發(fā)明提供了尤其是間接接觸設(shè)備(例如，附圖4A和4B)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方 式中(附圖4A)，試劑被施加在圓柱形多孔基質(zhì)的遠(yuǎn)端，試劑稍微地朝向近端遷移到部分中。 然后干燥材料，置入透明的保護(hù)罩中。在使用期間，樣品施加到近端，流體遷移朝向遠(yuǎn)端，并 填充所述材料。當(dāng)樣品與處在遠(yuǎn)端的檢測(cè)試劑接觸時(shí)，它可以與試劑反應(yīng)，引起顏色改變。 在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中(附圖4B)，試劑溶液被施加到兩個(gè)圓筒之一上，容許干燥。浸 透試劑的圓筒置入透明的保護(hù)罩內(nèi)。第二圓筒(用于樣品)置于靠近、但不直接接觸所述第 一圓筒的位置。在使用期間，樣品施加到“樣品”圓筒上并填充“樣品”圓柱。然后使樣品 圓筒與試劑圓筒接觸，樣品流體從樣品圓筒遷移到檢測(cè)圓筒中。與檢測(cè)試劑反應(yīng)的樣品中 的硫醇將在檢測(cè)圓筒中顯現(xiàn)。在間接接觸設(shè)備的另一個(gè)實(shí)施方式中(例如，附圖5)，樣品接觸平的表面，然后將 它導(dǎo)引到反應(yīng)性墊片上。然后通過相對(duì)樣品應(yīng)用面的測(cè)試設(shè)備的表面的透明窗，觀察反應(yīng) 性墊片中的顏色改變(或顏色改變的缺乏)。本發(fā)明的檢測(cè)設(shè)備的一個(gè)實(shí)施方式在附圖6中示出。檢測(cè)設(shè)備10具有樣品側(cè)面 11和結(jié)果側(cè)面12。位于側(cè)面11的是樣品墊片20。一旦樣品流體進(jìn)入側(cè)面11上的樣品墊 片20，它被轉(zhuǎn)移到反應(yīng)墊片22，其面對(duì)側(cè)面12。透明蓋23覆蓋了結(jié)果墊片22。間接接觸設(shè)備的其他實(shí)施方式在附圖7A-7D中示出。附圖7A和7B是“折疊”設(shè) 備的實(shí)例。在附圖7A中顯示了設(shè)備30，其具有支持物31、樣品采集墊片32和試劑墊片33。 試劑溶液浸入試劑墊片33，任選地可以在其中干燥。樣品(例如，唾液)施于樣品采集墊片32中，折疊支持物，從而所述樣品采集墊片32和試劑墊片33相互接觸。當(dāng)折疊時(shí)，樣品采 集墊片32和試劑墊片33可以被輕輕地?cái)D壓，從而來自樣品采集墊片32的流體濕潤了并轉(zhuǎn) 移到試劑墊片33。用戶然后打開設(shè)備并觀察結(jié)果(例如，顏色改變對(duì)比沒有顏色改變)，在試 劑墊片中見到。附圖7B顯示了具有樣品采集區(qū)域41、試劑區(qū)域42和反應(yīng)窗口 45的試驗(yàn)設(shè)備40。 試劑溶液浸入試劑區(qū)域42，可以任選地在內(nèi)干燥。樣品(例如，唾液)施于樣品采集區(qū)域41 中，折疊支持物，從而所述樣品采集區(qū)域41和試劑區(qū)域42相互接觸。當(dāng)折疊時(shí)，樣品采集 區(qū)域41和試劑區(qū)域42可以被輕輕地?cái)D壓，從而來自樣品采集區(qū)域41的流體濕潤了試劑區(qū) 域42。不同于打開設(shè)備來觀察結(jié)果(如附圖7A中的)，用戶簡(jiǎn)單地翻轉(zhuǎn)試驗(yàn)設(shè)備，來通過透 明的(例如，塑料的)窗口 45觀察結(jié)果。附圖7C和7D顯示了采用“滑動(dòng)物”構(gòu)思的檢測(cè)設(shè)備。在附圖7C所示的實(shí)施方式 中，設(shè)備50由條51組成，其包括樣品采集區(qū)域52和透明(例如，塑料)套筒53。套筒53包 括附著在其內(nèi)的試劑區(qū)域M?？梢员桓稍锏脑噭┤芤航朐噭﹨^(qū)域M。用戶從套筒53中 移出條51，向樣品采集區(qū)域52施加樣品。用戶然后滑動(dòng)條51進(jìn)入套筒53，從而樣品采集 區(qū)域52接觸試劑區(qū)域M。用戶可以輕輕地?cái)D壓樣品采集區(qū)域52和試劑區(qū)域M，從而來自 樣品采集區(qū)域52的流體潤濕試劑區(qū)域54。在一個(gè)實(shí)施方式中，試劑區(qū)域M是套筒53的不 可分割的部分。附圖7D顯示了檢測(cè)設(shè)備60，其包括樣品采集區(qū)域62、套筒63和反應(yīng)窗口 65。套 筒63包括試劑區(qū)域64?？梢员桓稍锏脑噭┤芤航朐噭﹨^(qū)域64。用戶將樣品施加到樣品 采集區(qū)域62上，然后滑動(dòng)套筒從而試劑區(qū)域64接觸樣品采集區(qū)域62。所述接觸足夠緊密 以容許樣品遷移到反應(yīng)區(qū)域64中。用戶然后通過透明(例如，塑料)窗口 65讀取結(jié)果，其緊 靠反應(yīng)區(qū)域64的上方安置。附圖8A-8F描繪了本發(fā)明的各種可選擇的包裝設(shè)計(jì)。附圖8A描繪了“火柴板”設(shè) 計(jì)。單獨(dú)的條由用戶取下。每個(gè)條可以任選地被包裝，例如，用箔片。每個(gè)板具有方便量的 測(cè)試條，例如每個(gè)板6-12個(gè)。附圖8B描繪了箔包裝和盒形設(shè)計(jì)。測(cè)試條以批量保存在盒 子中，例如，卡紙板或塑料盒子，或包裝在箔條中。每個(gè)箔條含有方便量的測(cè)試條，例如每條 5-10個(gè)。附圖8C描繪了“口香糖包裝”設(shè)計(jì)。測(cè)試條以批量保存在盒子中，例如，紙板或 塑料盒子，或單獨(dú)地包裝在鋁箔包裝中。附圖8D是與附圖8C類似的設(shè)計(jì)，僅僅包裝是塑料 罩。每個(gè)測(cè)試條獨(dú)立地包裝。在一個(gè)實(shí)施方式中，5-10個(gè)測(cè)試條包裝在分配器中。附圖8E 提供了具有蓋子的分配器。附圖8F提供了滑動(dòng)抽取型分配器。本發(fā)明進(jìn)一步提供了模壓的測(cè)試殼(附圖9)。在一個(gè)實(shí)施方式中，反應(yīng)區(qū)域被包裹 在模壓的塑料部分中。在這個(gè)實(shí)施方式中，試劑區(qū)域浸入檢測(cè)試劑溶液，其在反應(yīng)區(qū)域上干 燥。反應(yīng)區(qū)域由可移動(dòng)的多孔膜或墊片覆蓋，其充當(dāng)樣品區(qū)域。樣品(例如，唾液)被采集在 樣品墊片上，然后遷移到鄰近它的試劑區(qū)域。不同于通過透明窗口觀察結(jié)果(如使用附圖6 中的設(shè)備時(shí))，樣品墊片被取下和丟棄，露出試劑區(qū)域。查看結(jié)果并解釋。本發(fā)明進(jìn)一步提供了有蓋的采集器設(shè)備(附圖10)。附圖10顯示了有蓋的檢測(cè)設(shè) 備80。在一個(gè)實(shí)施方式中，檢測(cè)設(shè)備包括把手81、樣品采集區(qū)域82、蓋子83和試劑區(qū)域84。 可以被干燥的試劑溶液浸入試劑區(qū)域84。在可選擇的實(shí)施方式中，檢測(cè)設(shè)備80包括把手 81、樣品采集區(qū)域82和蓋子83?？梢员桓稍锏脑噭┤芤航霕悠凡杉瘏^(qū)域82。在這個(gè)實(shí)施方式中，保護(hù)帽從試驗(yàn)設(shè)備上取下，樣品采集墊片/棉拭插入受試者的口中。樣品采集墊 片/棉拭與測(cè)試樣品接觸。然后從口腔中取出樣品采集墊片/棉拭，重新蓋上設(shè)備。在某 些實(shí)施方式中，樣品采集墊片/棉拭已經(jīng)浸透檢測(cè)試劑，其可以任選地在樣品采集墊片/棉 拭上干燥。在其他實(shí)施方式中，已經(jīng)浸透可以任選地在試劑墊片上干燥的檢測(cè)試劑的試劑 墊片被整合到保護(hù)帽中。在這個(gè)實(shí)施方式中，當(dāng)設(shè)備被重新蓋上時(shí)，這個(gè)動(dòng)作使得樣品采集 墊片/棉拭與試劑墊片接觸。在任一實(shí)施方式中，在合適的時(shí)間之后，觀察試劑墊片來確定 顏色改變的程度。制造方法和制造的設(shè)備。本發(fā)明包括制造用于測(cè)量含有牛理件流體的樣品中硫醇 化合物的量的檢測(cè)設(shè)備的方法。所述制造方法包括用如上所述的試劑溶液接觸固體基底， 和干燥所述設(shè)備。本發(fā)明進(jìn)一步包括通過如上所述的方法制造的、用于測(cè)量含有生理性流體的樣品 中硫醇化合物的量的檢測(cè)設(shè)備。牛理學(xué)樣品中硫醇化合物的檢測(cè)方法。本發(fā)明提供了檢測(cè)受試者中的口臭、齒齦 炎和/或牙周炎的方法。所述方法涉及使采自受試者的口腔的生理性流體與如上所述的檢 測(cè)設(shè)備之一接觸來形成接觸了生理學(xué)流體的設(shè)備，和檢測(cè)所述接觸了生理學(xué)流體的設(shè)備中 硫醇化合物的濃度水平。至少約40微摩爾的水平是口臭的指示，至少約80微摩爾的水平 是齒齦炎的指示，至少約160微摩爾的水平是牙周炎指示。在某些實(shí)施方式中，所述檢測(cè)設(shè) 備能夠檢測(cè)低達(dá)10-20微摩爾的水平的硫醇化合物的存在。在某些實(shí)施方式中，所述生理性流體從受試者的口腔中取出，然后與檢測(cè)設(shè)備接 觸。在其他實(shí)施方式中，所述檢測(cè)設(shè)備插入受試者的口腔，從而生理性流體與所述設(shè)備原位 地直接接觸。例如，測(cè)試條被插入口腔中，反應(yīng)性基質(zhì)直接接觸受試者的唾液。令人驚訝地， 發(fā)現(xiàn)的是，含有檢測(cè)試劑的原型試劑溶液不刺激口腔，即使當(dāng)口腔組織與含有DTNB的棉拭 直接接觸時(shí)。在某些實(shí)施方式中，檢測(cè)設(shè)備以“直接接觸”方法來使用。在這種方法中，具有浸透 檢測(cè)物的基質(zhì)的設(shè)備與用戶進(jìn)行直接接觸。例如，設(shè)備的檢測(cè)區(qū)域是條的末端的簡(jiǎn)單的墊 片。在某些實(shí)施方式中，所述檢測(cè)設(shè)備在“間接接觸”方法中使用。在這種方法中，檢測(cè)物浸 透的基質(zhì)的設(shè)備不與用戶進(jìn)行直接接觸。通過流體樣品的擴(kuò)散、或采集的樣品基質(zhì)的機(jī)械 運(yùn)動(dòng)，從而流體樣品或采集的樣品基質(zhì)與檢測(cè)物浸透的基質(zhì)接觸，來在一定時(shí)間進(jìn)行接觸。在某些實(shí)施方式中，檢測(cè)通過比較(a)接觸了生理學(xué)流體的設(shè)備和(b)標(biāo)準(zhǔn)物的 顏色強(qiáng)度或吸光度來進(jìn)行。在某些實(shí)施方式中，檢測(cè)通過眼睛進(jìn)行。在其他實(shí)施方式中，檢 測(cè)通過機(jī)器，例如通過分光光度計(jì)(例如，反射分光光度計(jì))來進(jìn)行。在某些實(shí)施方式中，檢 測(cè)步驟提供了定量的或半定量的信號(hào)，其傾向于最小化人與人之間的主觀性。在當(dāng)前方法中測(cè)試的生理性流體是GCF、舌刮擦物、舌生物膜、齦線生物膜、唾液或 呼吸、或多種這些流體的組合。在本發(fā)明的方法的一個(gè)實(shí)施方式中，濾紙條通過用試劑溶液接觸所述條來浸透試 劑混合物，容許過量的溶劑蒸發(fā)來形成浸透的測(cè)試條。然后由受試者吐出唾液到浸透的測(cè) 試條上。容許反應(yīng)在浸透的測(cè)試條之中或之上進(jìn)行。在固定的時(shí)間之后，通過比較浸透的 測(cè)試條的表面上產(chǎn)生的顏色和標(biāo)準(zhǔn)物例如分級(jí)的比色圖表，來測(cè)定硫醇化合物的濃度。在一個(gè)實(shí)施方式中，測(cè)試棒在直接接觸應(yīng)用中使用。在這個(gè)實(shí)施方式中，使用在棒的一個(gè)末端含有多孔的墊片的測(cè)試棒，其中所述墊片浸透測(cè)試溶液。在某些實(shí)施方式中測(cè) 試溶液被干燥，容許過量的溶劑蒸發(fā)。墊片置于與樣品(例如，唾液)直接接觸中。一段時(shí)間 以后(例如，5-10秒)，檢查墊片來確定顏色的發(fā)生或顏色的改變。在另一個(gè)實(shí)施方式中，測(cè)試條含有鄰近于所述檢測(cè)墊片的比較物(S卩，內(nèi)部對(duì)照 物)。在一個(gè)實(shí)施方式中，未使用的測(cè)試條的反應(yīng)性區(qū)域和比較物區(qū)域具有相同的顏色。當(dāng) 測(cè)試條的這兩個(gè)區(qū)域與樣品接觸時(shí)，它們起初從不使用的測(cè)試條變?yōu)椴煌念伾?即，在被 樣品水化之后它們都獲得的顏色)。一段時(shí)間以后，反應(yīng)性區(qū)域的顏色偏離比較物區(qū)域，強(qiáng) 度是硫醇化合物的濃度的指示(例如，在附圖2A中示出的)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，檢測(cè)和比較物區(qū)域可以起初具有不同的顏色。在更高濃度 的硫醇下，反應(yīng)性墊片變?yōu)橹饾u更象比較物，并且可以超過截止強(qiáng)度(例如，在附圖2B中示 出的)。在另一個(gè)直接接觸方法實(shí)施方式中，條含有三個(gè)不同的區(qū)域顯示了起始顏色的 比較物、顯示截止(診斷)顏色的比較物和反應(yīng)性區(qū)域(附圖2C)。隨著硫醇水平提高，反應(yīng) 性區(qū)域顏色偏離起始(上部的)顏色并與比較物(下部)匯合。在這樣的情況下，觀察者或電 子設(shè)備比較各個(gè)區(qū)域，對(duì)于反應(yīng)性區(qū)域(例如，中心墊片)是更像起始顏色(例如，上部墊片) 還是更像比較物顏色(例如，下部墊片)作出確定。在另一個(gè)直接接觸方法實(shí)施方式中，條含有兩個(gè)不同的區(qū)域反應(yīng)性墊片(上部)， 以淡藍(lán)色開始；在更高濃度的硫醇下變得逐漸地更綠(例如，如附圖2D顯示的)。顯色可以 滿足或超過顏色或比較物(墊片下方)。這類似于附圖2B中顯示的形式，除了檢測(cè)和比較物 墊片的位置被調(diào)換。在某些實(shí)施方式中，使用不同的指示物顏色，和/或使用不同的形狀(例如，附圖 3A-3E)。測(cè)試試劑盒。本發(fā)明提供了對(duì)于硫醇化合物的檢測(cè)有用的測(cè)試試劑盒。所述試劑 盒包括如上所述的試劑溶液和/或檢測(cè)設(shè)備?，F(xiàn)在將通過以下非限制性的進(jìn)一步實(shí)施例來說明本發(fā)明。進(jìn)一步的實(shí)施例1.試劑溶液如下配置 緩沖液(磷酸鈉，USP)-100 mM, pH 7.0 DTNB, 100mg/L
甘油(USP)，按體積0.5% 木糖醇(食物/藥物級(jí)別)，按重量計(jì)算4% 進(jìn)一步的實(shí)施例2.試劑溶液如下配置 成分和量(對(duì)于IL溶液)
去離子水(DI H20 ；適合于攝食) 800 mL+適量到IL
磷酸氫二鈉七水化物，USP 3. 093 g (3. 060-3. 120 g)
磷酸二氫鈉，USP 1.015 g (1. 010-1. 020 g)
甘油，USP 5. 0 mL (4.9-5. 1 mL)
木糖醇，食物/藥物級(jí)別 40. 0 g (39. 6-40. 4 g)
DTNB 0.100 g (0.099-0. 101 g)
70%異丙醇(或USP級(jí)別IPA，稀釋到70%) 100 mL (任選的)試劑溶液然后利用PES濾器(0.2微米孔徑大小)過濾。用50或100 mg DTNB/L溶液 制備的條發(fā)現(xiàn)對(duì)于白色墊片是合理地適合的，因?yàn)镈TNB的水平在干燥時(shí)給墊片賦予了即 使有也很小的顏色。進(jìn)一步的實(shí)施例3.本領(lǐng)域已知的是硫醇化合物在與腐壞的肉相關(guān)的流體中積 累。因而，根據(jù)本發(fā)明的制品對(duì)于檢測(cè)與腐壞的肉相關(guān)的提高的硫醇水平是有用的。進(jìn)一步的實(shí)施例4.本領(lǐng)域已知的是硫醇化合物在與降解的墻板產(chǎn)品相關(guān)的流體 中積累，墻板產(chǎn)品含有硫酸鈣并經(jīng)歷硫酸鹽還原細(xì)菌的降解。因而，根據(jù)本發(fā)明的制品對(duì)于 檢測(cè)與降解的墻板產(chǎn)品相關(guān)的提高的硫醇水平是有用的。進(jìn)一步的實(shí)施例5.在下文的內(nèi)容中公開了本發(fā)明的各種進(jìn)一步的方面，其中硫 醇檢測(cè)試劑包含根據(jù)本發(fā)明的方面7的檢測(cè)試劑。檢測(cè)/估計(jì)溶解的口腔硫醇的快速方法
目的口腔的口臭和牙周疾病經(jīng)常涉及揮發(fā)性硫化合物(VSC)、主要是硫化氫和甲 硫醇的微生物產(chǎn)生。歷史上，工作集中于檢測(cè)它們?cè)诤舫龊粑械拇嬖?，而不是微生物的?物膜內(nèi)的存在。我們的目的是開發(fā)針對(duì)溶解的硫醇的測(cè)試條，其提供了快速可見的結(jié)果，易 于使用，對(duì)口腔組織沒有刺激。方法我們篩選了各種材料在用硫醇檢測(cè)化合物預(yù)處理之后提供對(duì)溶解的硫 醇的視覺上可辨別的反應(yīng)的能力。通過用添加的硫醇攻擊清洗液，光譜學(xué)地估計(jì)了干燥的 檢測(cè)試劑從墊片浸出的傾向。原型測(cè)試條置入穩(wěn)定性研究中以估計(jì)貨架壽命。由獨(dú)立的實(shí) 驗(yàn)室進(jìn)行了刺激測(cè)試。最后，我們改變檢測(cè)試劑的濃度，來確定是否可以達(dá)到不同的“截止” 結(jié)果顏色。結(jié)果鑒定了多孔的墊片材料，其具有良好的物理性質(zhì)并且適合于硫醇檢測(cè)試劑 和它的產(chǎn)色的產(chǎn)品。一旦干燥在墊片上，試劑顯示了在再水化時(shí)浸出的很低傾向，維持了良 好的光譜反應(yīng)，顯示了隨著時(shí)間的過去的合理的穩(wěn)定性。當(dāng)與標(biāo)準(zhǔn)的口腔護(hù)理產(chǎn)品比較時(shí)， 發(fā)現(xiàn)墊片處理試劑對(duì)于培養(yǎng)的齒齦組織細(xì)胞是非刺激性的。最后，通過提高或降低試劑濃 度(墊片中檢測(cè)物的量)，我們發(fā)現(xiàn)我們可以操縱測(cè)試的平臺(tái)期顯色。結(jié)論我們的結(jié)果表明采用這種技術(shù)的測(cè)試條作為檢測(cè)口臭和牙周疾病致病病 原體的輔助是有用的。這項(xiàng)努力中我們的一般方法是利用硫醇檢測(cè)試劑("TDR")的性質(zhì)和能力，來檢測(cè) 與口腔惡臭和牙周疾病相關(guān)的溶解的硫化合物，和利用干燥的化學(xué)試劑形式來進(jìn)行。在此 呈現(xiàn)了這種形式的某些設(shè)計(jì)方面和能力。背景
口腔惡臭(口臭)和慢性牙周疾病通常特征在于分別在舌背面或槽內(nèi)、牙齒和牙齦組織 之間的細(xì)菌的存在。存在于這些舌和齒齦生物膜中的許多革蘭氏陰性厭氧細(xì)菌，隨著它們 代謝帶有含硫氨基酸的蛋白質(zhì)，具有從半胱氨酸和甲硫氨酸除去末端含硫基團(tuán)的能力，分 別產(chǎn)生硫化氫和甲硫醇。
2權(quán)利要求
1.一種用于測(cè)定流體的樣品中硫醇化合物的濃度的單次使用的可丟棄的制品，所述制 品包括(a)包含至少一種吸收材料的基質(zhì)，所述基質(zhì)能夠吸收所述樣品；和(b)一定量的檢測(cè)試劑，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述樣品的至少一部分 接觸之后的時(shí)間期間，所述檢測(cè)試劑的量能夠提供表明所述樣品中硫醇化合物的濃度的信號(hào)。
2.權(quán)利要求1的制品，其中所述制品是測(cè)試條。
3.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的制品，其中所述流體的樣品是生理性流體的樣品。
4.權(quán)利要求3的制品，其中所述生理性流體是口腔流體。
5.權(quán)利要求4的制品，其中所述口腔流體包括唾液和/或齦溝液和/或齦線生物膜和 /或舌生物膜和/或舌刮擦物和/或呼吸。
6.權(quán)利要求1到5的任一項(xiàng)的制品，其中所述至少一種吸收材料包括聚酰胺材料。
7.權(quán)利要求1到6的任一項(xiàng)的制品，其中所述檢測(cè)試劑包括至少一種的5，5’- 二硫 代雙-(2-硝基苯甲酸);5- (2-氨乙基)-二硫代-2-硝基苯甲酸；N，N’-二(4-硝基苯亞 甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N, N，- 二(3-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N, N’ - 二 (2-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N，N’ - 二(2，4- 二硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代 二苯胺；N, N，- 二(4-nitrocinnamalylidene) -4, 4，- 二硫代二苯胺。
8.權(quán)利要求7的制品，其中所述檢測(cè)試劑是5，5’-二硫代雙-(2-硝基苯甲酸)。
9.權(quán)利要求1到8的任一項(xiàng)的制品，其中所述時(shí)間在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分 與所述樣品的至少一部分接觸之后約一秒開始，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述 樣品的至少一部分接觸之后約十分鐘結(jié)束。
10.權(quán)利要求1到8的任一項(xiàng)的制品，其中所述時(shí)間在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分 與所述樣品的至少一部分接觸之后約五秒開始，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述 樣品的至少一部分接觸之后約五分鐘結(jié)束。
11.權(quán)利要求1到10的的任一項(xiàng)的制品，其中所述信號(hào)包括電磁信號(hào)。
12.權(quán)利要求11的制品，其中所述電磁信號(hào)包括可見信號(hào)。
13.權(quán)利要求12的制品，進(jìn)一步包括比較物區(qū)域，所述比較物區(qū)域包含至少一個(gè)顏色 樣片，相對(duì)于所述顏色樣片來比較所述可見信號(hào)。
14.一種用于測(cè)定流體的樣品中硫醇化合物的濃度的方法，所述方法包括(a)提供單次使用的可丟棄的制品，其包含(i)包含至少一種吸收材料的基質(zhì)，所述基 質(zhì)能夠吸收所述樣品；和(ii) 一定量的檢測(cè)試劑，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所 述樣品的至少一部分接觸之后的時(shí)間期間，所述檢測(cè)試劑的量能夠提供表明所述樣品中硫 醇化合物的濃度的信號(hào)；(b)使所述基質(zhì)與所述樣品接觸；(c)觀察由所述檢測(cè)試劑的量提供的信號(hào)；(d)將所述檢測(cè)試劑的量所提供的信號(hào)與一個(gè)或更多個(gè)參考值比較，參考值的每一個(gè) 是硫醇化合物的濃度的指示，從而測(cè)定所述樣品中硫醇化合物的濃度。
15.權(quán)利要求14的方法，其中所述流體是生理性流體。
16.權(quán)利要求15的方法，其中所述生理性流體是口腔流體。
17.權(quán)利要求16的方法，其中所述口腔流體包括唾液和/或齦溝液和/或齦線生物膜 和/或舌生物膜和/或舌刮擦物和/或呼吸。
18.權(quán)利要求14到17的任一項(xiàng)的方法，其中所述制品是測(cè)試條。
19.權(quán)利要求14到18的任一項(xiàng)的方法，其中所述至少一種吸收材料包括聚酰胺材料。
20.權(quán)利要求14到19的任一項(xiàng)的方法，其中所述檢測(cè)試劑包括至少一種的5，5’- 二 硫代雙-(2-硝基苯甲酸);5_ (2-氨乙基)-二硫代-2-硝基苯甲酸；N，N’-二(4-硝基苯 亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N，N’ - 二( 3-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N，N’ - 二 (2-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N，N’ - 二(2，4- 二硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代 二苯胺；N, N，- 二(4-nitrocinnamalylidene) -4, 4，- 二硫代二苯胺。
21.權(quán)利要求20的方法，其中所述檢測(cè)試劑是5，5’-二硫代雙-(2-硝基苯甲酸)。
22.權(quán)利要求14到21的任一項(xiàng)的方法，其中所述時(shí)間在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部 分與所述樣品的至少一部分接觸之后約一秒開始，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所 述樣品的至少一部分接觸之后約十分鐘結(jié)束。
23.權(quán)利要求14到21的任一項(xiàng)的方法，其中所述時(shí)間在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部 分與所述樣品的至少一部分接觸之后約五秒開始，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所 述樣品的至少一部分接觸之后約五分鐘結(jié)束。
24.權(quán)利要求14到23的任一項(xiàng)的方法，其中所述信號(hào)包括電磁信號(hào)。
25.權(quán)利要求對(duì)的方法，其中所述電磁信號(hào)包括可見信號(hào)。
26.權(quán)利要求14到25的任一項(xiàng)的方法，其中所述一個(gè)或更多個(gè)參考值的每一個(gè)是作為 (a)顏色的樣片和(b)硫醇化合物的濃度的配對(duì)的組合提供的。
27.權(quán)利要求14到沈的任一項(xiàng)的方法，其中所述觀察和/或比較的步驟的至少一個(gè)是 由自動(dòng)化的讀取器進(jìn)行的。
28.一種用于測(cè)定哺乳動(dòng)物受試者患有特定疾病的風(fēng)險(xiǎn)的方法，所述方法包括(a)提供單次使用的可丟棄的制品，其包含(i)包含至少一種吸收材料的基質(zhì)，所述基 質(zhì)能夠吸收所述樣品；和(ii) 一定量的檢測(cè)試劑，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所 述樣品的至少一部分接觸之后的時(shí)間期間，所述檢測(cè)試劑的量能夠提供表明所述樣品中硫 醇化合物的濃度的信號(hào)；(b)使所述基質(zhì)與包含來自所述受試者的一種或更多種生理性流體的樣品接觸；(c)觀察由所述檢測(cè)試劑的量提供的信號(hào)；(d)將所述檢測(cè)試劑的量提供的信號(hào)與一個(gè)或更多個(gè)參考值比較，所述參考值的每一 個(gè)是受試者患有特定疾病的風(fēng)險(xiǎn)的指示，從而確定所述受試者患有特定疾病的風(fēng)險(xiǎn)。
29.權(quán)利要求觀的方法，其中所述流體是生理性流體。
30.權(quán)利要求四的方法，其中所述生理性流體是口腔流體。
31.權(quán)利要求30的方法，其中所述口腔流體包括唾液和/或齦溝液和/或齦線生物膜 和/或舌生物膜和/或舌刮擦物和/或呼吸。
32.權(quán)利要求觀到31的任一項(xiàng)的方法，其中所述制品是測(cè)試條。
33.權(quán)利要求觀到32的任一項(xiàng)的方法，其中所述至少一種吸收材料包括聚酰胺材料。
34.權(quán)利要求觀到33的任一項(xiàng)的方法，其中所述檢測(cè)試劑包括至少一種的5，5’- 二 硫代雙-(2-硝基苯甲酸);5-(2_氨乙基)-二硫代-2-硝基苯甲酸；N，N’ - 二(4-硝基苯亞 甲基)-4，4，- 二硫代二苯胺；N，N’ - 二(3-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N，N’ - 二 (2-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N，N’ - 二(2，4- 二硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代 二苯胺；N, N，- 二(4-nitrocinnamalylidene) -4, 4，- 二硫代二苯胺。
35.權(quán)利要求34的方法，其中所述檢測(cè)試劑是5，5’-二硫代雙-(2-硝基苯甲酸)。
36.權(quán)利要求觀到35的任一項(xiàng)的方法，其中所述時(shí)間在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部 分與所述樣品的至少一部分接觸之后約一秒開始，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所 述樣品的至少一部分接觸之后約十分鐘結(jié)束。
37.權(quán)利要求觀到35的任一項(xiàng)的方法，其中所述時(shí)間在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部 分與所述樣品的至少一部分接觸之后約五秒開始，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所 述樣品的至少一部分接觸之后約五分鐘結(jié)束。
38.權(quán)利要求觀到37的任一項(xiàng)的方法，其中所述信號(hào)包括電磁信號(hào)。
39.權(quán)利要求38的方法，其中所述電磁信號(hào)包括可見信號(hào)。
40.權(quán)利要求觀到39的任一項(xiàng)的方法，其中所述一個(gè)或更多個(gè)參考值的每一個(gè)是作為 (a)顏色的樣片和(b)受試者患有特定疾病的風(fēng)險(xiǎn)的配對(duì)的組合提供的。
41.權(quán)利要求28到40的任一項(xiàng)的方法，其中所述觀察和/或比較的步驟的至少一個(gè)是 由自動(dòng)化的讀取器進(jìn)行的。
42.權(quán)利要求觀到41的任一項(xiàng)的方法，其中所述特定的疾病是牙周炎。
43.權(quán)利要求觀到41的任一項(xiàng)的方法，其中所述特定的疾病是齒齦炎。
44.權(quán)利要求觀到41的任一項(xiàng)的方法，其中所述特定的疾病是口臭。
45.權(quán)利要求觀到41的任一項(xiàng)的方法，其中所述特定的疾病是心血管疾病。
46.權(quán)利要求觀到41的任一項(xiàng)的方法，其中所述特定的疾病是II型糖尿病。
47.權(quán)利要求觀到41的任一項(xiàng)的方法，其中所述特定的疾病是早產(chǎn)。
48.一種試劑盒，包括(a)至少一個(gè)用于測(cè)定流體的樣品中硫醇化合物的濃度的單次使用的可丟棄的 制品，所述制品包括(i)包含至少一種吸收材料的第一基質(zhì)，所述基質(zhì)能夠吸收所述樣品；和(ii)一定量的檢測(cè)試劑，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述樣品的至少一部分 接觸之后的時(shí)間期間，所述檢測(cè)試劑的量能夠提供表明所述樣品中硫醇化合物的濃度的可 見信號(hào)；(b)比較物，其上印刷和/或固定了 (i)至少一個(gè)顏色樣片，相對(duì)所述顏色樣片來比較所述可見信號(hào)；和(ii)與每個(gè)顏色樣片相聯(lián)系的，表明與所述顏色樣片相關(guān)的硫醇化合物的相對(duì)濃度的 字母數(shù)字標(biāo)識(shí)符；(c)任選地，適合于含有所述制品和所述比較物的包裝；(d)任選地，所述制品和所述比較物的使用說明書。
49.一種用于測(cè)定來自哺乳動(dòng)物受試者的流體的樣品中硫醇化合物的濃度的單次使用的可丟棄的測(cè)試條，所述測(cè)試條包括(a)包含至少一種吸收材料的基質(zhì)，所述基質(zhì)能夠吸收所述樣品；和(b)一定量的檢測(cè)試劑，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述樣品的至少一部分 接觸之后的時(shí)間期間，所述檢測(cè)試劑的量能夠提供表明所述樣品中硫醇化合物的濃度的信號(hào)。
50.權(quán)利要求49的測(cè)試條，其中所述流體包括唾液和/或齦溝液和/或齦線生物膜和 /或舌生物膜和/或舌刮擦物和/或呼吸。
51.權(quán)利要求49或50的的測(cè)試條，其中所述檢測(cè)試劑包括至少一種的5，5’- 二硫代 雙-(2-硝基苯甲酸)；5_ (2-氨乙基)-二硫代-2-硝基苯甲酸；N，N’-二(4-硝基苯亞 甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N, N，- 二(3-硝基苯亞甲基)-4，4’ - 二硫代二苯胺；N, N’ - 二 (2-硝基苯亞甲基)-4，4 ’ - 二硫代二苯胺；N，N’ - 二(2，4- 二硝基苯亞甲基)-4，4 ’ - 二硫 代二苯胺；N，N’ -二(4-nitrocinnamalylidene) -4,4，- 二硫代二苯胺。
52.權(quán)利要求51的測(cè)試條，其中所述檢測(cè)試劑是5，5’-二硫代雙-(2-硝基苯甲酸)。
53.權(quán)利要求49到52的任一項(xiàng)的測(cè)試條，其中所述時(shí)間在所述檢測(cè)試劑的量的至少一 部分與所述樣品的至少一部分接觸之后約一秒開始，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與 所述樣品的至少一部分接觸之后約十分鐘結(jié)束。
54.權(quán)利要求49到52的任一項(xiàng)的測(cè)試條，其中所述時(shí)間在所述檢測(cè)試劑的量的至少一 部分與所述樣品的至少一部分接觸之后約五秒開始，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與 所述樣品的至少一部分接觸之后約五分鐘結(jié)束。
55.權(quán)利要求49到M的的任一項(xiàng)的測(cè)試條，其中所述信號(hào)包括電磁信號(hào)。
56.權(quán)利要求55的測(cè)試條，其中所述電磁信號(hào)包括可見信號(hào)。
57.一種用于測(cè)定哺乳動(dòng)物受試者患有特定疾病的風(fēng)險(xiǎn)的單次使用的可丟棄的測(cè)試 條，所述測(cè)試條包括(a)包含至少一種吸收材料的基質(zhì)，所述基質(zhì)能夠吸收所述樣品；和(b)一定量的檢測(cè)試劑，在所述檢測(cè)試劑的量的至少一部分與所述樣品的至少一部分 接觸之后的時(shí)間期間，所述檢測(cè)試劑的量能夠提供表明所述受試者患有特定疾病的風(fēng)險(xiǎn)的 信號(hào)，和其中(i)所述檢測(cè)試劑包括以下的至少一種5，5’-二硫代雙-(2-硝基苯甲酸);5_(2-氨 乙基)-二硫代-2-硝基苯甲酸，N，N’-二(4-硝基苯亞甲基)-4，4 ’_ 二硫代二苯胺； N, N’ -二(3-硝基苯亞甲基)-4,4 ’- 二硫代二苯胺；N，N’ -二(2-硝基苯亞甲基)-4，4 ’_ 二硫代二苯胺；N，N’-二(2，4-二硝基苯亞甲基)-4，4 ’_ 二硫代二苯胺；N，N’-二 (4-nitrocinnamalylidene) -4, 4，- 二硫代二苯胺；禾口(ii)所述特定疾病是以下至少一種牙周炎、齒齦炎、口臭、心血管疾病、II型糖尿病、 早產(chǎn)。
58.權(quán)利要求57的測(cè)試條，其中所述檢測(cè)試劑包含5，5’- 二硫代雙-(2-硝基苯甲酸)。
59.權(quán)利要求57或58的測(cè)試條，其中所述特定疾病是牙周炎。
60.權(quán)利要求57或58的測(cè)試條，其中所述特定疾病是齒齦炎。
61.權(quán)利要求57或58的測(cè)試條，其中所述特定疾病是口臭。
62.權(quán)利要求57或58的測(cè)試條，其中所述特定疾病是心血管疾病。
63.權(quán)利要求57或58的測(cè)試條，其中所述特定疾病是II型糖尿病。
64.權(quán)利要求57或58的測(cè)試條，其中所述特定疾病是早產(chǎn)。
65.一種試劑溶液，包含緩沖液、5，5 ’-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)(DTNB)和濕潤劑。
66.權(quán)利要求65的試劑溶液，其中所述緩沖液是濃度約5mM到200 mM的磷酸鈉緩沖液。
67.權(quán)利要求65的試劑溶液，其中所述緩沖液是濃度約20mM到150 mM的磷酸鈉緩沖液。
68.權(quán)利要求65的試劑溶液，其中所述緩沖液是濃度約IOOmM的磷酸鈉緩沖液。
69.權(quán)利要求65到68的任一項(xiàng)的試劑溶液，其中所述緩沖液的pH值是約6.5到8. 5。
70.權(quán)利要求65到68的任一項(xiàng)的試劑溶液，其中所述緩沖液的pH值是約6.5到7. 5。
71.權(quán)利要求65到68的任一項(xiàng)的試劑溶液，其中所述緩沖液的pH值是約7.0。
72.權(quán)利要求65到71的任一項(xiàng)的試劑溶液，其中所述DTNB以約10mg/L到150 mg/L 的濃度存在。
73.權(quán)利要求65到71的任一項(xiàng)的試劑溶液，其中所述DTNB以約80mg/L到120 mg/L 的濃度存在。
74.權(quán)利要求65到71的任一項(xiàng)的試劑溶液，其中所述DTNB以約100mg/L的濃度存在。
75.權(quán)利要求65到74的任一項(xiàng)的試劑溶液，其中所述濕潤劑包括甘油、木糖醇、山梨 醇、甘油或丙二醇。
76.權(quán)利要求75的試劑溶液，其中所述濕潤劑包括甘油。
77.權(quán)利要求76的試劑溶液，其中所述甘油以按體積約0.1%到5. 0%的濃度存在。
78.權(quán)利要求76的試劑溶液，其中所述甘油以按體積約0.5%的濃度存在。
79.權(quán)利要求75的試劑溶液，其中所述濕潤劑包括木糖醇。
80.權(quán)利要求79的試劑溶液，其中所述木糖醇以按重量約21到10%的濃度存在。
81.權(quán)利要求79的試劑溶液，其中所述木糖醇以按重量約4%的濃度存在。
82.權(quán)利要求65到81的任一項(xiàng)的試劑溶液，進(jìn)一步包含調(diào)味劑或香劑。
83.權(quán)利要求82的試劑溶液，其中所述調(diào)味劑或香劑是薄荷。
84.權(quán)利要求65到83的任一項(xiàng)的試劑溶液，進(jìn)一步包含醇。
85.權(quán)利要求84的試劑溶液，其中所述醇是異丙醇或乙醇。
86.權(quán)利要求65到85的任一項(xiàng)的試劑溶液，進(jìn)一步包含堿土金屬或過渡金屬。
87.權(quán)利要求86的試劑溶液，其中所述金屬包括錳、鎂或鈷。
88.—種包含固體基底的檢測(cè)設(shè)備，所述固體基底包含檢測(cè)區(qū)域，其中所述檢測(cè)區(qū)域浸 透權(quán)利要求65-87的任一項(xiàng)的試劑溶液。
89.權(quán)利要求88的檢測(cè)設(shè)備，其中所述試劑溶液在所述固體基底上被干燥。
90.權(quán)利要求88或89的檢測(cè)設(shè)備，其中所述固體基底是惰性纖維的墊片。
91.權(quán)利要求90的檢測(cè)設(shè)備，其中所述纖維包括美國專利NO.7，290, 668中描述的至 少一種材料。
92.權(quán)利要求90的檢測(cè)設(shè)備，其中所述纖維包含稱為R-27378或R28445D#4345的 TRANS0RB 牌材料。
93.權(quán)利要求88到92的任一項(xiàng)的檢測(cè)設(shè)備，其中所述固體基底是矩形的，或由一個(gè)或 多個(gè)模切的形狀組成，一般最多大約8 mmX8 mm，以及約1. 0 mm的厚度。
94.權(quán)利要求88-93的任一項(xiàng)的檢測(cè)設(shè)備，其中所述固體基底進(jìn)一步包含一個(gè)或更多 個(gè)標(biāo)準(zhǔn)區(qū)域。
95.權(quán)利要求94的檢測(cè)設(shè)備，其中所述一個(gè)或更多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)區(qū)域包含預(yù)定顏色和強(qiáng)度的 比色標(biāo)準(zhǔn)。
96.一種制造硫醇化合物檢測(cè)設(shè)備的方法，包括使固體基底與根據(jù)權(quán)利要求65-87的 任一項(xiàng)的試劑溶液接觸，以及干燥所述設(shè)備，從而形成所述檢測(cè)設(shè)備。
97.通過權(quán)利要求96的方法制造的檢測(cè)設(shè)備。
98.一種檢測(cè)受試者中的口臭的方法，包括使采自所述受試者的口腔的生理性流體與 權(quán)利要求88到95或權(quán)利要求97的任一項(xiàng)的檢測(cè)設(shè)備接觸來形成接觸了生理性流體的設(shè) 備，以及檢測(cè)所述接觸了生理性流體的設(shè)備中硫醇化合物濃度水平，其中至少約40微摩爾 的硫醇的水平是口臭的指示。
99.一種檢測(cè)受試者中的齒齦炎的方法，包括使采自所述受試者的口腔的生理性流體 與權(quán)利要求88到95或權(quán)利要求97的任一項(xiàng)的檢測(cè)設(shè)備接觸來形成接觸了生理性流體的 設(shè)備，以及檢測(cè)所述接觸了生理性流體的設(shè)備中硫醇化合物濃度水平，其中至少約80微摩 爾的硫醇的水平是齒齦炎的指示。
100.—種檢測(cè)受試者中的牙周疾病的方法，包括使采自所述受試者的口腔的生理性 流體與權(quán)利要求88到95或權(quán)利要求97的任一項(xiàng)的檢測(cè)設(shè)備接觸來形成接觸了生理性流 體的設(shè)備，以及檢測(cè)所述接觸了生理性流體的設(shè)備中硫醇化合物濃度水平，其中至少約160 微摩爾的硫醇的水平是牙周炎的指示。
101.權(quán)利要求98、99或100的任一項(xiàng)的方法，其中所述檢測(cè)是通過比較(a)接觸了生 理性流體的設(shè)備與(b)標(biāo)準(zhǔn)物的顏色強(qiáng)度或吸光度來進(jìn)行的。
102.權(quán)利要求101的方法，其中所述檢測(cè)是通過眼睛進(jìn)行的。
103.權(quán)利要求101的方法，其中所述檢測(cè)是通過機(jī)械進(jìn)行的。
104.權(quán)利要求101的方法，其中所述檢測(cè)是通過分光光度計(jì)進(jìn)行的。
105.權(quán)利要求101到104的任一項(xiàng)的方法，其中所述檢測(cè)提供了定量或半定量的信號(hào)。
106.權(quán)利要求98到105的任一項(xiàng)的方法，其中所述生理性流體是GCF、舌刮擦物、舌生 物膜、齦線生物膜、唾液或呼吸。
107.一種對(duì)于口腔硫醇化合物的檢測(cè)有用的測(cè)試試劑盒，包括權(quán)利要求65的試劑溶 液，以及權(quán)利要求88的檢測(cè)設(shè)備或權(quán)利要求97的檢測(cè)設(shè)備。
全文摘要
公開的是用于測(cè)定流體的樣品中硫醇化合物的濃度的單次使用的可丟棄的制品，以及如何制造和使用所述制品的說明。
文檔編號(hào)G01N33/68GK102124337SQ200980131587
公開日2011年7月13日 申請(qǐng)日期2009年6月15日 優(yōu)先權(quán)日2008年6月13日
發(fā)明者伯蓋斯-卡斯勒 A., E. 哈利 B. 申請(qǐng)人:Alt 生物科學(xué)有限責(zé)任公司