賴氨酸修飾的苯并呋咱化合物及合成方法、應(yīng)用、回收方法以及檢測(cè)銅離子濃度的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了賴氨酸修飾的苯并呋咱化合物及合成方法、應(yīng)用、回收方法以及檢測(cè)銅離子濃度的方法。該化合物結(jié)構(gòu)式為：。其合成方法：1）將甲醇、二氯亞砜、賴氨酸三者進(jìn)行反應(yīng)，得賴氨酸甲酯鹽酸鹽；2）縛酸劑存在下，將賴氨酸甲酯鹽酸鹽與4-氯-7-硝基苯并呋咱反應(yīng)，柱層析；3）將上步產(chǎn)物溶于堿液中，萃取數(shù)次，調(diào)節(jié)水相pH，萃取數(shù)次，收集萃取劑層，提純。檢測(cè)銅離子濃度的方法：1）制標(biāo)準(zhǔn)曲線；2）檢測(cè)記錄；3）計(jì)算。其回收方法：向含有銅離子的該化合物溶液中加入絡(luò)合劑水溶液，混勻，萃取，收集有機(jī)相除溶劑即可。該化合物在制備銅離子熒光探針中的應(yīng)用。本發(fā)明合成的化合物可以特異性檢測(cè)銅離子，制成探針，且可以回收。
【專利說明】賴氨酸修飾的苯并映咱化合物及合成方法、應(yīng)用、回收方法 以及檢測(cè)銅離子濃度的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及賴氨酸修飾的苯并呋咱化合物及合成方法、應(yīng)用、回收方法以及檢測(cè) 銅離子濃度的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 在陸地上，銅元素主要以氯化物、水合物、碳酸鹽、硝酸鹽，及與有機(jī)化合物形成螯 合體的形式存在；在水溶液中，它主要以二價(jià)的形式存在。通常環(huán)境中的銅含量比較低，但 其可通過食物鏈的富集，使銅元素在食品中的含量達(dá)到相當(dāng)高。1988年，由JECFA制定的銅 的PMTDI (暫定日攝入量)值為0.05 - 0.5 mg/kg bw，國內(nèi)水產(chǎn)品中銅元素的最大允許殘留 量為50 mg/kg。對(duì)于人體而言，二價(jià)銅離子也是必需的微量元素，其廣泛分布在人體內(nèi)，參 與基因的表達(dá)及酶的催化反應(yīng)，對(duì)影響人體調(diào)節(jié)機(jī)制的平衡至關(guān)重要。銅的毒性很小，但稍 微缺乏銅元素可導(dǎo)致代謝和生長的紊亂，銅離子在細(xì)胞中平衡的失調(diào)會(huì)導(dǎo)致抑制神經(jīng)性 的疾病以及影響到內(nèi)分泌的功能。若體內(nèi)銅離子過量，容易導(dǎo)致銅中毒，發(fā)生溶血、血紅蛋 白降低和腦組織病變等。目前，檢測(cè)銅離子的方法一般有原子吸收光譜和等離子體發(fā)射光 譜、電化學(xué)方法、比色法、生物和納米傳感器以及熒光探針等。然而這些方法中有一些需要 較大的樣品量和復(fù)雜的準(zhǔn)備過程，耗時(shí)長、成本高，不利于實(shí)時(shí)和原位檢測(cè)。而熒光探針在 靈敏度、選擇性、水溶性及原位檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)比較突出，所以設(shè)計(jì)并合成一種能檢測(cè)銅離子的 熒光探針顯得尤為重要。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的在于提供賴氨酸修飾的苯并呋咱化合物及合成方法、應(yīng)用、回收方 法以及檢測(cè)銅離子濃度的方法。
[0004] 本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是： 賴氨酸修飾的苯并呋咱化合物，其結(jié)構(gòu)式如下所示：

【權(quán)利要求】
1. 賴氨酸修飾的苯并呋咱化合物，其結(jié)構(gòu)式如下所示：
2. 權(quán)利要求1所述的賴氨酸修飾的苯并呋咱化合物的合成方法，其特征在于：步驟如 下： 1) 冰鹽浴下，將甲醇、二氯亞砜、賴氨酸三者攪拌混合10_20min;再于室溫下攪拌混 合2-4h;再于70-80°C下回流30-40min，冷卻至室溫，除甲醇，加乙醚析出固體物質(zhì)，再于 0-6°C下冷卻2-4h，析出沉淀，過濾、干燥，得到賴氨酸甲酯鹽酸鹽； 2) 將賴氨酸甲酯鹽酸鹽制成溶液并和縛酸劑混合，再滴入4-氯-7-硝基苯并呋咱的 溶液，在室溫下充分反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)進(jìn)程，反應(yīng)結(jié)束，抽濾并除去溶劑得到粗產(chǎn)物，用二 氯甲烷溶解粗產(chǎn)物，水洗滌至水層呈中性，除去縛酸劑，有機(jī)層用干燥劑干燥，抽濾，蒸干濾 液，將得到的粗產(chǎn)品進(jìn)行柱層析分離提純； 3)將分離提純后得到的4-賴氨酸甲酯-7-硝基苯并呋咱溶于堿液中，有機(jī)溶劑萃取數(shù) 次以除掉沒參加反應(yīng)的原料和其他副產(chǎn)物，水相中加入鹽酸至pH為5-7,再用萃取劑萃取 數(shù)次至水相沒有熒光為止，收集萃取劑層，干燥，抽濾，旋蒸除萃取劑，得粗產(chǎn)品，柱層析分 離提純即可。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的賴氨酸修飾的苯并呋咱化合物的合成方法，其特征在于：所 述的縛酸劑為胺類縛酸劑。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的賴氨酸修飾的苯并呋咱化合物的合成方法，其特征在于：步 驟2)-3)中柱層析所用的展開劑為二氯甲烷和乙酸乙酯的混合物。
5. -種檢測(cè)銅離子濃度的方法，其特征在于：步驟為： 1) 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線：將標(biāo)準(zhǔn)濃度的銅離子溶液加入到權(quán)利要求1所述的賴氨酸修飾的苯 并呋咱化合物制成的溶液中，配置銅離子濃度成梯度變化的溶液，記錄銅離子濃度與溶液 的熒光變化量，制作銅離子濃度對(duì)熒光變化量的標(biāo)準(zhǔn)曲線； 2) 檢測(cè)記錄：將含有銅離子的待測(cè)溶液加入到賴氨酸修飾的苯并呋咱化合物制成的溶 液中，記錄含有銅離子的該溶液的熒光變化量； 3) 計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)溶液中銅離子的濃度。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種檢測(cè)銅離子濃度的方法，其特征在于：步驟2)的具體為： 將含有銅離子的待測(cè)溶液加入到已知濃度的賴氨酸修飾的苯并呋咱化合物溶液中，待測(cè)溶 液的加入量為使得賴氨酸修飾的苯并呋咱化合物溶液的熒光達(dá)到最大的淬滅值，記錄該熒 光變化量。
7. 賴氨酸修飾的苯并呋咱化合物的回收方法，其特征在于：步驟為：按照權(quán)利要求5的 方法檢測(cè)銅離子濃度后，收集含有銅離子的賴氨酸修飾的苯并呋咱化合物溶液，向其中加 入絡(luò)合劑水溶液，攪拌均勻，用有機(jī)溶劑萃取，收集有機(jī)相并去除有機(jī)溶劑即可。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的賴氨酸修飾的苯并呋咱化合物的回收方法，其特征在于：所 述的有機(jī)溶劑為乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯甲烷、苯中至少一種。
9. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的賴氨酸修飾的苯并呋咱化合物的回收方法，其特征在于：所 述的絡(luò)合劑為EDTA。
10. 權(quán)利要求1所述的賴氨酸修飾的苯并呋咱化合物在制備銅離子熒光探針中的應(yīng) 用。
【文檔編號(hào)】G01N21/64GK104478823SQ201410682850
【公開日】2015年4月1日 申請(qǐng)日期:2014年11月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月24日
【發(fā)明者】馬立軍, 唐健, 李煦田, 葉茂強(qiáng), 張敏 申請(qǐng)人:華南師范大學(xué)