一種杜松烷型倍半萜類化合物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及從粘毛鼠尾草的干燥全草中分離得到的一種 具有神經(jīng)保護(hù)作用的杜松烷型倍半萜類化合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 粘毛鼠尾草Salviaroborowskii Maxim.系唇形科一年生或二年生草本，又名野芝 麻、黃花鼠尾草，生長(zhǎng)于海拔2500~3700m的山坡草地、溝邊陰處、山腳山腰，分布于西藏、青 海、甘肅西南部、四川西部等地，植物資源非常豐富，目前已有人工引種栽培。粘毛鼠尾草味 微苦、微甘，性涼，具有清肝、明目、止痛之功效。粘毛鼠尾草藏藥名吉子嘎保，在藏民族地區(qū) 廣泛應(yīng)用，《青藏藥鑒》記載全草治肝炎、牙痛，《藏本草》記載全草治肝炎、肺炎、肺結(jié)核、咯 血、風(fēng)火牙痛?！恫厮幹尽酚涊d其味辛，性寒，可治療黃疸性發(fā)燒、肝熱、熱性病頭痛、眼翳、支 氣管炎、淋巴結(jié)炎、口腔潰瘍、感冒咳嗽等。同屬植物中同為藏藥的甘西鼠尾草 Salviaprzewalskii Maxim.的化學(xué)成分研究比較深入，主要有砲類(包括單砲、倍半砲、二 萜、二倍半萜、三萜）、酚酸類、木脂素、黃酮、揮發(fā)油等。
[0003] 粘毛鼠尾草化學(xué)成分有倍半萜類、二萜類、三萜類、黃類、留類、酚酸、揮發(fā)油、脂肪 酸等，其中倍半萜和三萜類是主要成分。倍半萜成分主要為吉瑪烷型倍半萜和愈創(chuàng)木烷型 倍半萜，以吉瑪烷型倍半萜為主。粘毛鼠尾草中三萜包含烏蘇烷型、齊墩果烷型、羽扇烷型 等，以羽扇烷型三萜、烏蘇烷型三萜為主。
[0004] 如前所述，粘毛鼠尾草成分主要為萜類化合物(倍半萜、二萜、三萜），而萜類化合 物具有廣泛的生物活性，如細(xì)胞毒性、抗腫瘤、抗氧化功能，此外還具有抗寄生蟲、抗菌、抗 艾滋病毒活性，因此從粘毛鼠尾草中尋找出具有良好前景的生物活性成分或先導(dǎo)化合物是 可行的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從粘毛鼠尾草的干燥全草中分離得到的一種具有神經(jīng) 保護(hù)作用的杜松烷型倍半萜類化合物及其制備方法。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0007] 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物(I)，
[0009]所述的化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：（a)粘毛鼠尾草的干燥全草粉 碎，用80~90%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水 飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a) 中乙酸乙酯萃取物用大孔樹脂除雜，先用15%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用75%乙醇洗脫12個(gè) 柱體積，收集75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫物浸膏；（c)步驟(b)中75%乙醇洗 脫物浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1、55:1、35:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇 梯度洗脫得到5個(gè)組分；（d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1、 15:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷 鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為80 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~10個(gè)柱體積 洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物(I)。
[0010] 進(jìn)一步地，步驟(a)中，用85%乙醇熱回流提取，合并提取液。
[0011] 進(jìn)一步地，所述大孔樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0012] -種藥物組合物，該藥物組合物含有治療有效量的權(quán)利要求1所述的化合物（I)和 藥學(xué)上可接受的載體。
[0013] 所述的化合物(I)在制備神經(jīng)保護(hù)的藥物中的應(yīng)用。
[0014] 所述的藥物組合物在制備神經(jīng)保護(hù)的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 本發(fā)明化合物用作藥物時(shí)，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0016] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學(xué)上可接受的、對(duì) 人和動(dòng)物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0017] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等;用于注射時(shí)，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
【附圖說明】
[0018] 圖1為化合物(I)結(jié)構(gòu)式；
[0019 ]圖2為化合物（I)理論ECD值與實(shí)驗(yàn)ECD值比較。
【具體實(shí)施方式】
[0020]下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0021 ]實(shí)施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0022] 試劑來源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購(gòu)自上海凌峰化 學(xué)試劑有限公司，甲醇，分析純，購(gòu)自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[0023]制備方法：（a)將粘毛鼠尾草的干燥全草(8kg)粉碎，用85%乙醇熱回流提取(25L X3次），合并提取液，濃縮至無醇味（3L)，依次用石油醚(3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和 水飽和的正丁醇(3LX3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(347g)和正丁醇 萃取物；（b)步驟(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔樹脂除雜，先用15%乙醇洗脫8個(gè)柱體 積，再用75%乙醇洗脫12個(gè)柱體積，收集75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫物浸膏 (131g);(c)步驟(b)中75%乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1(8個(gè)柱體 積）、55:1 (8個(gè)柱體積）、35:1 (6個(gè)柱體積）、15 :1 (8個(gè)柱體積)和1:1 (5個(gè)柱體積）的二氯甲 烷-甲醇梯度洗脫得到5個(gè)組分；（d)步驟(c)中組分4(29g)用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用 體積比為20:1(8個(gè)柱體積）、15:1(10個(gè)柱體積)和10:1(6個(gè)柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2(llg)用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積 百分濃度為80 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集8-10個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到 純的化合物（I)(233mg)。
[0024] 結(jié)構(gòu)確證:無色立方晶（甲醇）；冊(cè)43頂3顯示[1+他]+為111/2 241.1608，結(jié)合核磁 特征可得分子式為C15H220，不飽和度為5。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δΗ( ΡΡπι，DMS〇-d6，400MHz)，H-1 (2.75，m)，H-2(7.68，m)，H-3(5.92，d，J = 3.4)，H-5(5.62，br，d，J = 4.2)，H-6(1.99，m)，H-7 (1.68，m)，H-8(1.95，m)，H-8(2.17，m)，H-9(5.31，br，s)，H-ll(1.89，m)，H-12(3.35，m)，H-12(3.59，111)，!1-13(0.82，(1，了 = 7.0)，!1-14(1.82,8)，!1-15(1.71，8);核磁共振碳譜數(shù)據(jù)60 (ppm，DMS0-d6，100MHz):46.8(CH，l-C)，138.3(CH，2-C)，127.4(CH，3-C)，131.2(C，4-C)， 133.7(CH，5-C)，37.1(CH，6-C)，34.9(CH，7-C)，24.8(CH2,8-C)，122.1(CH，9-C)，136.5(C， 10-C)，35.4(CH，11-C)，66.3(CH2，12-C)，10.6(CH 3，13-C)，21.1(CH3，14-C)，21.6(CH3，15-C);碳原子標(biāo)記參見圖1。紅外光譜表明該化合物含有羥基基團(tuán)譜顯示了 三個(gè)甲基信號(hào)[6!10.82((1，了 = 7.0!^，]^-13)，1.71(8，]^-15)和1.82(8，]\^-14)]，一個(gè)含氧 亞甲基信號(hào)[SH3.35(m，H-12)和3.59(m，H-12)]，四個(gè)烯屬次甲基信號(hào)RH5.31(br，s，H-9)， 5.62(1^，(1，了 = 4.2抱，!1-5)，5.92((1，了 = 3.4!^，!1-3)，7.68(111，!1-2)]。13(：-匪1?譜顯示出 15 個(gè) 共振碳信號(hào)，包括三個(gè)甲基，兩個(gè)亞甲基（一個(gè)含氧亞甲基SC66.3)，八個(gè)次甲基（四個(gè)烯屬 次甲基6(：122.1，127.4，133.7和138.3)，以及兩個(gè)烯烴季碳0(：131.2和136.5)。 1!1-匪1?譜 中，低場(chǎng)甲基質(zhì)子信號(hào)δΗΙ.71和1.82(各3H，s)表明它們與雙鍵相連。1H- 1!! COSY譜中Η-ll與 H2-12和Me-13的相關(guān)性表明C-11位上連有一個(gè)甲基。HMBC譜中，含氧亞甲基信號(hào)[δΗ3.35 (m，H-12)和3.59(m，H-12)]與C-110C35.4)和(Μ3(δα〇.6)的相關(guān)性，以及含氧亞甲基碳 信號(hào)0C66.3)表明C-12為羥基亞甲基，與C-11相連。綜合氫譜、碳譜、HMBC譜和R0ESY譜，以 及文獻(xiàn)關(guān)于相關(guān)類型核磁數(shù)據(jù)，可基本確定該化合物如圖1所示，立體構(gòu)型進(jìn)一步通過ECD