。
[0202] 薄層層析硅膠板使用煙臺黃海服GF254或青島GF254硅膠板，薄層色譜法燈LC) 使用的硅膠板采用的規(guī)格是0. 15mm~0.20mm，薄層層析分離純化產(chǎn)品采用的規(guī)格是 0. 4mm~ 0. 5mm〇
[0203] 柱層析一般使用煙臺黃海硅膠200~300目硅膠為載體。
[0204] 無特殊說明，=乙胺、甲基叔下基酸、水合聯(lián)氨、四下基漠化錠、二氯亞諷、咪挫、氨 化鋼、=苯基憐、=氣乙酸購買于成都市科龍化工試劑廠；二碳酸二叔下基醋、N，N' -二幾 基二咪挫、N，N-二甲基甲酯胺二甲基縮醒、N，0-二甲基徑氨鹽酸鹽、順式-4-徑基-D-脯 氨酸鹽酸鹽購買于愛斯特（成都）醫(yī)藥技術(shù)有限公司；碳酸飽、棚氨化裡、叔下基二甲基氯 硅烷、N-徑基下二酷亞胺、二（S甲基娃基）氨基鋼、二苯亞甲基甘氨酸乙醋、反式A-徑 基脯氨酸購買于安耐吉化學(xué)；戴斯馬下購買于上海泰坦科技股份有限公司；=氣甲橫酸甲 醋、2, 5-二氣漠苯購買于上海德默醫(yī)藥科技有限公司；2-艦丙烷購買于上海畢得醫(yī)藥科技 有限公司；異丙基氯化儀/氯化裡四氨巧喃溶液購買于百靈威科技有限公司；烘丙基苯橫 酸醋、四下基氣化錠、=(乙酷氧基）棚氨化鋼、四下基六氣憐酸胺購買于阿達(dá)瑪斯試劑公 司；環(huán)戊二締基雙苯基麟）氯化釘（II)購買于ACROSorgainics;棚燒二甲硫酸購買 于韶遠(yuǎn)化學(xué)科技（上海）有限公司；四氨巧喃-3-橫酷基氯購買于南京康滿林化工實業(yè)有 限公司；過棚酸鋼購買于天津光復(fù)精細(xì)化工研究所；[化時-N-(2-氨基-1，2-二苯乙基） 五氣苯橫酷胺]氯化（對傘花控）釘（II)購買于Stremchemical;艦甲燒、甲基橫酷氯購 買于國藥集團藥業(yè)股份有限公司。
[0205] 氮氣氛是指反應(yīng)瓶連接一個約IL容積的氮氣氣球。
[0206] 氨氣氛是指反應(yīng)瓶連接一個約化容積的氨氣氣球。
[0207] 氨化反應(yīng)通常抽真空，充入氨氣，反復(fù)操作3次。實施例中無特殊說明，溶液是指 水溶液。
[020引實施例中無特殊說明，反應(yīng)的溫度為室溫。
[0209] 室溫溫度為20°C~30°C。
[0210] 實施例中縮寫：
[0211] Bn:芐基；Et:乙基；Ac:乙酷基；Me:甲基；Boc:叔下氧幾基；Ph:苯基；COOH:簇 基；OMe:甲氧基；OTBS:二甲基叔下基娃酸；SO3H:橫酸基；Ms:甲基橫酷基。
[0212] 中間體1 :叔下基（(2R，3巧-2-(2, 5-二氣苯基）-5-幾基四氨-2H-化喃-3-基） 氨基甲酸醋（中間體1)
[0213]tert-butyl((2R, 3S)-2-(2,5-difIuorophenyl)-S-OXOtetr址y化〇-2H-pyran-3-yl)carbamate
[0引引第一步：2-氨基-4-烘戊酸乙醋（IB)
[0216]ethyl2-aminopent-4-ynoate
[0217] 室溫下，將二苯亞甲基甘氨酸乙醋IA巧Og，0. 187mol)溶于甲基叔下基酸（300血） 中，加入烘丙基苯橫酸醋（44g，0. 224mol)和四下基漠化錠化.Ig, 0. 019mol)，升溫至50°C， 加入碳酸飽（121.8邑，0.374111〇1)，于50°(：溫度下反應(yīng)過夜。將反應(yīng)液過濾，濾餅用甲基叔下 基酸（40mLX2)洗涂，合并有機相，旋蒸濃縮至一半體積，加入鹽酸溶液（3mol/l，IOOmL), 室溫下攬拌1小時，靜置分液，水相用甲基叔下基酸（70mLX2)萃取，收集水相，濃縮得到 1B。
[0218] 第二步：2-((叔下氧幾基）氨基）-4-烘戊酸（1C)
[0219] 2-((tert-butoxyc曰rbonyl)amino)pent-4-ynoicacid
[0220] 將氨氧化鋼（33. 7g，0. 842mol)溶于水（IOOmL)，逐滴滴加至IB(26. 4g，0. 187mol) 的反應(yīng)液中，室溫下攬拌2小時，滴加二碳酸二叔下基醋（45g，0.206mol)的甲基叔下基酸 (125mL)溶液，室溫下攬拌4小時。靜置分液，水相用甲基叔下基酸（SOmLX。洗涂，水相 用3mol/L的鹽酸溶液調(diào)節(jié)抑至3,用甲基叔下基酸（IOOmLX。萃取，合并有機化有機 相用飽和氯化鋼水溶液（30mLX2)洗涂，無水硫酸儀干燥，過濾，旋干，得到黃色油狀液體 lC(33g,產(chǎn)率 83% )。
[022。MSm/z(ESI) :212. 0[M-1]。
[0222] 第S步：叔下基（1-(甲氧基（甲基）氨基）-1-幾基戊基-4-烘-2-基）氨基甲 酸醋（ID)
[0223] tert-butyl(1-(methoxy(methyl)amino)-l-〇xopent-4-yn-2-yl)carbamate
[0224] 將lC(33g，0. 155m〇U溶于N，N-二甲基甲酯胺（200血）中，控制溫度小于10°C， 加入N，N'-幾基二咪挫（32. 58g，0. 201mol)，0°C下反應(yīng)1小時，加入N，0-二甲基徑胺鹽酸 鹽（19. 6g，0. 186mol)，室溫攬拌過夜。向反應(yīng)液中逐滴加入水（150血)，攬拌1小時，用乙 酸乙醋（IOOmLX。萃取，合并有機化有機相依次用飽和碳酸氨鋼溶液（60mLX3)、飽和氯 化鋼溶液化OmLX3)洗涂，無水硫酸儀干燥，過濾，濃縮，殘留物用硅膠柱色譜分離提純（石 油酸/乙酸乙醋（v/v) = 10:1)，得到白色固體lD(35g,產(chǎn)率88. 2% )。
[0225] MSm/z巧SI) : 156. 9 [M+1]。
[0226] 第四步：叔下基（1-(2, 5-二氣苯基）-1-幾基戊基-4-烘-2-基）氨基甲酸醋姐）
[0227] te;rt-but5d(1- (2, 5-difIuoro地en}d) -l-〇xopent-4-yn-2-yl)carbamate
[022引氮氣保護下，將2, 5-二氣漠苯（15. 05g, 78mmol)溶于干燥甲苯巧OmL)中，冰鹽 浴降溫至-l0°CW下，逐滴加入異丙基氯化儀/氯化裡四氨巧喃溶液化6血，1. 3mol/L)，保 持在-10°C左右攬拌1小時，滴加lD(10g，39mmol)的干燥四氨巧喃（100血）溶液，保持溫 度-10°C，加畢，于室溫下反應(yīng)4小時，將溫度降至-10°C左右，逐滴加入飽和氯化錠溶液 (40血)，攬拌10分鐘，用3mol/L的鹽酸溶液調(diào)節(jié)抑至5~6,靜置分液，水相用甲基叔下基 酸巧OmLX2)萃取，合并有機相，有機相用飽和氯化鋼溶液（30mLX2)洗涂，無水硫酸鋼干 燥，過濾，濃縮，殘留物用硅膠柱色譜分離提純（石油酸/乙酸乙醋（v/v) =50:1~8:1)， 得到淡黃色固體IE(10.Ig,產(chǎn)率83. 5%)。
[0229] MSm/z巧SI) : 210. 1 [M+1]。
[0230] 第五步：叔下基（（IR, 2巧-1- (2, 5-二氣苯基）-1-徑基戊基-4-烘-2-基）氨基 甲酸醋（1巧
[0231] te;rt-butyl((IR, 2S) -1- (2, 5-difIuorophenyl) -l-hyd;roxypent-4-yn-2-yl) C過rb過mate
[023引 將1E(16. 07g，52mmol)溶于四氨巧喃（lOOmL)，加入S乙締二胺 (17. 39g, 155mmol)與[(R,R)-N-(2-氨基-1, 2-二苯乙基）五氣苯橫酷胺]氯化（對 傘花控）釘（II)(即RuCl(p-cymene)化時-FSD陽腳化37g, 0. 52mmol)，逐滴滴加甲酸 (14. 27g，310mmol)，加畢，于40°C反應(yīng)過夜。將反應(yīng)液濃縮除去四氨巧喃和甲酸，向殘留物 中加入水化OmL)和鹽酸（3mol/l，IOmL),用甲基叔下基酸巧OmLX3)萃取，合并有機相，有 機相用飽和碳酸氨鋼溶液（35mLX2)洗涂，無水硫酸儀干燥，過濾，濃縮，殘留物用硅膠柱 色譜分離提純（石油酸/乙酸乙醋（v/v) =60:1~10:1)，得到淡黃色膠狀物lF(15.37g， 產(chǎn)率95% )。
[0233] MSm/z巧SI) : 334. 2 [M巧3]。
[0234] 第六步：叔下基（(2R，3巧-2- (2, 5-二氣苯基）-3, 4-二氨-2H-化喃-3-基）氨基 甲酸醋（IG)
[0235] te;rt-butyl((2R, 3S) -2- (2, 5-difIuorophenyl) -3, 4-dihyd;r〇-2H-pyran-3-yl) C曰rbam曰te
[0236] 將1F(15. 37g, 49. 4mmol)加熱條件下溶于N,N-二甲基甲酯胺（75mL)，加入四 下基六氣憐酸胺化49g，6. 42mmol)、N-徑基下二酷亞胺（2. 84g，24. 75mmol)、S苯基麟 (0. 86g，3. 26mmol)和碳酸氨鋼（2. 16g，25. 69mmol)，氮氣置換S次，抽真空15分鐘，加入環(huán) 戊二締基雙（S苯基麟）氯化釘（II)(即CpRuCl任化3)2) (1. 79g，2. 47mmol)，氮氣置換S 次，并抽真空15分鐘，氮氣保護下，升溫至85°C反應(yīng)過夜。向反應(yīng)液中加入水（300mL)和 甲基叔下基酸（200mL)，用硅膠過濾，濾液靜置后分液，水相用甲基叔下基酸巧OmLX2)萃 取，合并有機相，有機相用飽和碳酸氨鋼溶液化OmLX2)洗涂，無水硫酸鋼干燥，過濾濃縮， 殘留物用硅膠柱色譜分離提純（石油酸/乙酸乙醋（v/v) = 80:1~30:1)，得到淡黃色粉 末固體1G(8. 9g，產(chǎn)率57. 9% )。
[0237] MSm/z(ESI) : 256. 2 [M+1]。
[0238] 第屯步：叔下基（(2R，3巧-2-(2, 5-二氣苯基）-5-徑基四氨-2H-化喃-3-基）氨 基甲酸醋（IH)
[0239] te;rt-but5d((2R, 3巧-2- (2, 5-difIuoro地en}d) -5-hy化oxytetr址y化〇-2H-pyra n-3-yl)C曰rbam曰te
[0240] 將1G(8. 9g，28. 6mmol)溶解于干燥甲基叔下基酸巧0血）中，加入干燥甲苯巧血)， 溫度降至-l〇°C，逐滴加入棚燒二甲硫酸四氨巧喃溶液（2mol/l，35. 9mL)，于(TC下反應(yīng)3. 5 小時。緩慢加入水（4mL)，逐滴加入氨氧化鋼溶液（Imol/l，89mL)，攬拌15分鐘，分批加入 過棚酸鋼（13. 2g，85.Smmol)，室溫攬拌過夜。靜置分液，水相用甲基叔下基酸巧OmLX2)萃 取，合并有機相，有機相用飽和氯化鋼溶液（20mLX2)洗涂，無水硫酸鋼干燥，過濾，濃縮， 向殘留物中加入甲苯巧OmL),加熱至90°C溶解，將正己燒（200mL)滴加至反應(yīng)液中，析出白 色固體，過濾，正己燒（30血X2)洗涂濾餅，濃縮除去溶劑，得到白色固體粉末lH(7.9g，產(chǎn) 率 84% )。
[0241] MSm/z巧SI) : 274. 1 [M+1]。
[0242] 第八步：叔下基（(2R, 3巧-2- (2, 5-二氣苯基）-5-幾基-四氨-2H- [I比喃-3-基） 氨基甲酸醋（中間體1)
[0243] te;rt-butyl((2R, 3巧-2- (2, 5-difIuoro地enyl) -S-oxo-tetr址y化〇-2H-pyran-3 -yl)carbamate
[0244]將53g, 35. 03mmol)溶解于二氯甲燒（130mL)，降溫至0°C，將戴斯馬下氧化 劑（29. 72g，70. 06mmol)分批加至反應(yīng)液中，自然升至室溫反應(yīng)4小時。降溫至(TC,將飽和 碳酸氨鋼溶液化OmL)滴加至反應(yīng)液中，攬拌20分鐘，過濾，濾液靜置分液，水相用甲基叔下 基酸化OmLX3)萃取，合并有機相，有機相用飽和碳酸氨鋼溶液（30mLX2)洗涂，無水硫酸 鋼干燥，過濾濃縮，殘留物用硅膠柱色譜分離提純（石油酸/乙酸乙醋（v/v) = 10:1-4:1)， 得到白色晶狀粉末中間體1 (10. 85g，產(chǎn)率94. 7% )。
[0245] MSm/z巧SI) : 272. 0 [M+1];
[024引 咱NMR(400MHz,DMSO-de) : 5 7. 29-7. 13 (m, 4H)，4. 77 - 4. 75 化甜），4. 22-4. 12 (d, 2H)，4. 08-4. 02 (m, 1H)，2. 75-2. 70 (m, 2H)，1. 23 (S, 9H)。
[0247] 中間體2 :2-甲基橫酸基-5, 6-二氨-4H-化咯并化4-C]化挫（中間體。
[024引 2-methylsulfonyl-5, 6-dihy化o-AH-pyrrolo[3, 4-c]pyrazole
[0250] 第一步：叔下基（3幻-3-(二甲基氨基甲締基）-4-幾基-四氨化咯-I-甲酸醋 蝕）
[0251] tert-butyl(3Z)-3-(dimethyl3minomethylene)-4-〇x〇-pyrrolidine-l-c3rboxy late
[0巧引將1-叔下氧幾基-3-化咯燒酬2A(lOOg，0. 54mol)溶于N，N-二甲基乙酷胺 化00血）中，加入N，N-二甲基甲酯胺二甲縮醒（83.6g，0. 70mmol)，升溫至105°C反應(yīng)40 分鐘，加水巧OOmL)澤滅反應(yīng)，用乙酸乙醋巧OOmLX2)萃取，合并有機相。有機相用水 巧00血X2)洗涂，無水硫酸鋼干燥，濃縮，殘留物用硅膠柱色譜分離提純（石油酸/乙酸乙 醋（v/v) = 4:1~1:1)得到淡黃色液體狀的2B(50g，產(chǎn)率47% )。
[0巧引第二步：叔下基6a-徑基-1，3曰，4, 6-四氨化咯并化4-C]化挫-5-甲酸醋（2C)
[0254]tert-butyl6曰-hydroxy-1,3 曰，4, 6-1etr曰hydropyrr〇 1 〇 [ 3,4-c] pyrazole-5-carboxylate
[0巧引 將2B巧0g，0.21m0U溶于甲醇（200mL)中，加入水合聯(lián)氨（7.8g，0. 16mmol，wt二 80% )，室溫反應(yīng)4小時。將反應(yīng)液濃縮得到2C，直接用于下一步。
[0巧引第^步：叔下基4,6-二氨-2H-化咯并化4-C]化挫-5-甲酸醋畑）
[0257]tert-butyl4, 6-dihydr〇-2H-pyrrolo[3, 4-c]pyr曰zole-5-c曰rboxyl曰te[0巧引將2C(47. 5g，0. 21m0U溶于二氯甲燒（300血）和甲醇（180血）的混合溶劑中，冷 卻至0°(：，加入對甲苯橫酸巧.64邑，0.029皿01)，反應(yīng)過夜。將反應(yīng)液濃縮，殘留物用硅膠柱 色譜分離提純（二氯甲燒）得到淡黃色固體的2D(20g，產(chǎn)率44% )。
[0巧引第四步：叔下基2-甲基橫酸基-4,6-二氨化咯并化4-C]化挫-5-甲酸醋蝕）[0260]tert-butyl2-methylsulfonyl-4,6-dihydropyrrolo[3,4-c] pyr曰zole-5-c曰rboxyl曰te
[02川將2D(3. 5g, 16. 7mmol)溶于四氨巧喃（35血）中，冷卻至0°C，加入60%的氨化鋼 (1.Og, 25. 4mmol)，反應(yīng)30分鐘，加入甲基橫酷氯化9g, 25. 4mmol)，反應(yīng)1小時。向反應(yīng)液 中加水（IOmL)澤滅反應(yīng)，用乙酸乙醋巧OmLX2)萃取，合并有機層，有機層用無水硫酸鋼干 燥，濃縮，殘留物用硅膠柱色譜分離提純（石油酸/乙酸乙醋（v/v) = 1:1)得到白色固體 的沈（2.Ig,產(chǎn)率44% )。
[026引第五步：2-甲基橫酸基-5, 6-二氨-4H-化咯并化4-C]化挫（中間體。
[026引2-methylsulfonyl-5, 6-dihy化o-AH-pyrrolo[3, 4-c]pyrazole[0264]將沈化lg, 7. 3mmol)溶于二氯甲燒（25血）中，冷卻至0°C，加入S氣乙酸巧血）， 反應(yīng)2小時。將反應(yīng)液濃縮，加入氨水（2mL)澤滅反應(yīng)，用硅膠柱色譜分離提純（二氯甲燒 /甲醇（v/v) = 50:1)得到白色固體的中間體2。
[026引咱NMR(400MHz,MeOD) 5 8. 09(S,1H)，4. 52(m,4H)，3. 45(S,3H)。
[0266] 實施例1
[0267] (2R，3R，4R，5巧-2- (2, 5-二氣苯基）-4-氣-5- (2-(甲基橫酷基）化咯并巧，4-C] 化挫-5 (2H，4H，6H)-基）四氨-2H-化喃-3-胺（化合物1)
[0268] (2R, 3R, 4R, 58)-2-(2, 5