【技術(shù)領(lǐng)域】

本發(fā)明芒果甙制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種采用芒果葉制取芒果甙的工藝。

背景技術(shù)：

芒果，為常綠喬木，原產(chǎn)印度，現(xiàn)熱帶各地均栽種，栽培于華南地區(qū)，廣西、廣東、海南各地村莊或屋宅旁，稍微潤濕土壤可見星散植株。芒果葉是漆樹科植物芒果mangiferaindical的葉子，為廣西地方習(xí)用中藥，收載于《廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn)》1990年版，所含芒果甙(mangiferin)是芒果葉止咳、化痰、抗炎的主要活性成分，芒果甙具有抗炎、抗病毒、中樞神經(jīng)抑制和免疫抑制作用，還有抗脂質(zhì)過氧化、抗腫瘤作用，常用以治療肝炎，芒果甙治療慢性支氣管炎有較好療效，芒果甙對肝癌細(xì)胞株有明顯的毒性作用，能誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡，芒果甙具有抗氧化活力和延緩衰老作用。

目前公開的芒果甙提取純化方法多為水提醇沉、醇提大孔樹脂純化方法，如中國專利cn100475830c“高純度芒果甙制備方法”、專利cn101759689a“一種芒果甙的制備方法”和專利cn101429222a“提取芒果甙的一種方法”，都是采用大孔樹脂純化作為主要的分離步驟，然而采用大孔樹脂純化方法，樹脂用前需要處理，純化需經(jīng)過吸附和洗脫過程，生產(chǎn)周期長。在用大孔樹脂進(jìn)行純化洗脫時，由于物理吸附的原因，也容易造成一部分樣品死吸附，而導(dǎo)致轉(zhuǎn)移率降低。另外采用大孔樹脂純化洗脫液體積較大，溶劑回收時間長，增加了生產(chǎn)成本，并且溶劑回收產(chǎn)生較多的廢液，對環(huán)保造成一定的負(fù)擔(dān)。此外由于大孔樹脂的使用，增加了引入苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、烷烴類、二乙基苯類等有機(jī)殘留溶劑的風(fēng)險，對產(chǎn)品的安全性造成了一定的影響。

綜上所述，研究一種簡單可行、對環(huán)境污染小的芒果甙的提取方法具有很好的現(xiàn)實意義。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供的一種采用芒果葉制取芒果甙的工藝，以解決現(xiàn)有技術(shù)制得的芒果甙純度較低，不符合作為定性、定量的對照品要求，以及大孔樹脂的使用，增加引入苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、烷烴類、二乙基苯類等有機(jī)殘留溶劑的風(fēng)險，降低產(chǎn)品的安全性的問題。

為解決以上技術(shù)問題，本發(fā)明采用以下技術(shù)工藝：

一種采用芒果葉制取芒果甙的工藝，包括以下步驟：

s1：將芒果葉烘干至含水率≤3％后進(jìn)行粉碎并過篩子，制得芒果葉粉末；

s2：向步驟s1制得的芒果葉粉末中加入質(zhì)量比為8-12:1的乙醇和1-烯丙基-3-甲基氯化咪唑，在水浴條件下回流提取2-3次，每次提取時長為1.8-2.4h，提取完全后合并提取液，調(diào)節(jié)提取液的ph值至4.8-5.1，溫度控制為70-75℃，通過活性炭脫色除雜，過濾后制得一次脫色液；

s3：將步驟s2制得的一次脫色液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5-5.4倍體積的42-50℃的水進(jìn)行溶解，采用無水乙酸乙酯溶劑進(jìn)行萃取2-3次，繼續(xù)用無水乙酸乙酯進(jìn)行2-3次結(jié)晶處理，結(jié)晶過程中固液比為1:4-5(w/v)，制得結(jié)晶粗品；

s4：將步驟s3制得的粗晶經(jīng)70％-78％的乙醇溶解，調(diào)節(jié)溶液的ph值至5.2-5.5，溫度控制為76-80℃，通過活性炭脫色除雜，過濾后制得二次脫色液；

s5：將步驟s4制得的二次脫色液真空減壓濃縮后，在溫度為3-6℃下結(jié)晶，制得重結(jié)晶粗品；

s6：將步驟s5制得的重結(jié)晶粗品經(jīng)過超臨界co2萃取，萃取的條件：萃取釜壓力為12-20mpa，萃取溫度為40-45℃，萃取時間為30-40min，制得芒果甙液體；

s7：將步驟s6制得的芒果甙液體進(jìn)行真空減壓濃縮后結(jié)晶并干燥，制得芒果甙。

優(yōu)選地，步驟s1中所述篩子的目數(shù)為50-80。

優(yōu)選地，步驟s2中所述芒果葉粉末與乙醇和1-烯丙基-3-甲基氯化咪唑的總重量比為1:4-8。

優(yōu)選地，所述乙醇的體積分?jǐn)?shù)為75％-85％。

優(yōu)選地，步驟s2中所述通過活性炭脫色除雜的時間為0.5-1.1h。

優(yōu)選地，步驟s4中所述通過活性炭脫色除雜的時間為0.3-0.7h。

優(yōu)選地，步驟s6中所述超臨界co2萃取的條件：萃取釜壓力為20mpa，萃取溫度為45℃，萃取時間為30min。

優(yōu)選地，步驟s7中所述結(jié)晶是在溫度為2-5℃下進(jìn)行的。

優(yōu)選地，所述結(jié)晶是在溫度為2℃下進(jìn)行的。

優(yōu)選地，步驟s7中所述晶體在溫度為40-45℃下真空干燥至含水率≤1.2％。

本發(fā)明具有以下有益效果：

(1)本發(fā)明的方法制得的芒果甙的純度在99.09％以上，高于現(xiàn)有技術(shù)制得的芒果甙的純度，純度達(dá)到了作為定性、定量的對照品要求；

(2)本發(fā)明的方法避免大孔樹脂的使用，減少引入苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、烷烴類、二乙基苯類等有機(jī)殘留溶劑的風(fēng)險，提高產(chǎn)品的安全性。

【具體實施方式】

為便于更好地理解本發(fā)明，通過以下實施例加以說明，這些實施例屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍，但不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。

在實施例中，所述采用芒果葉制取芒果甙的工藝，包括以下步驟：

s1：將芒果葉烘干至含水率≤3％后進(jìn)行粉碎并過50-80目篩子，制得芒果葉粉末；

s2：向步驟s1制得的芒果葉粉末中加入質(zhì)量比為8-12:1的75％-85％乙醇和1-烯丙基-3-甲基氯化咪唑，其中芒果葉粉末與乙醇和1-丙基-3-甲基咪唑醋酸鹽的總重量比為1:4-8，在水浴條件下回流提取2-3次，每次提取時長為1.8-2.4h，提取完全后合并提取液，調(diào)節(jié)提取液的ph值至4.8-5.1，溫度控制為70-75℃，通過活性炭脫色除雜0.5-1h，過濾后制得一次脫色液；

s3：將步驟s2制得的一次脫色液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5-5.4倍體積的42-50℃的水進(jìn)行溶解，采用無水乙酸乙酯溶劑進(jìn)行萃取2-3次，繼續(xù)用無水乙酸乙酯進(jìn)行2-3次結(jié)晶處理，結(jié)晶過程中固液比為1:4-5(w/v)，制得結(jié)晶粗品；

s4：將步驟s3制得的粗晶經(jīng)70％-78％的乙醇溶解，調(diào)節(jié)溶液的ph值至5.2-5.5，溫度控制為76-80℃，通過活性炭脫色除雜0.3-0.7h，過濾后制得二次脫色液；

s5：將步驟s4制得的二次脫色液真空減壓濃縮后，在溫度為3-6℃下結(jié)晶，制得重結(jié)晶粗品；

s6：將步驟s5制得的重結(jié)晶粗品經(jīng)過超臨界co2萃取，萃取的條件：萃取釜壓力為12-20mpa，萃取溫度為40-45℃，萃取時間為30-40min，制得芒果甙液體；

s7：將步驟s6制得的芒果甙液體進(jìn)行真空減壓濃縮后，在溫度為2-5℃下進(jìn)行結(jié)晶，所述晶體在溫度為40-45℃下真空干燥至含水率≤1.2％，制得芒果甙。

實施例1

一種采用芒果葉制取芒果甙的工藝，包括以下步驟：

s1：將芒果葉烘干至含水率為3％后進(jìn)行粉碎并過70目篩子，制得芒果葉粉末；

s2：向步驟s1制得的芒果葉粉末中加入質(zhì)量比為10:1的80％乙醇和1-烯丙基-3-甲基氯化咪唑，其中芒果葉粉末與乙醇和1-丙基-3-甲基咪唑醋酸鹽的總重量比為1:6，在水浴條件下回流提取2次，每次提取時長為2.2h，提取完全后合并提取液，調(diào)節(jié)提取液的ph值至5，溫度控制為72℃，通過活性炭脫色除雜0.8h，過濾后制得一次脫色液；

s3：將步驟s2制得的一次脫色液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5.2倍體積的46℃的水進(jìn)行溶解，采用無水乙酸乙酯溶劑進(jìn)行萃取2次，繼續(xù)用無水乙酸乙酯進(jìn)行2次結(jié)晶處理，結(jié)晶過程中固液比為1:4.5(w/v)，制得結(jié)晶粗品；

s4：將步驟s3制得的粗晶經(jīng)75％的乙醇溶解，調(diào)節(jié)溶液的ph值至5.4，溫度控制為78℃，通過活性炭脫色除雜0.5h，過濾后制得二次脫色液；

s5：將步驟s4制得的二次脫色液真空減壓濃縮后，在溫度為5℃下結(jié)晶，制得重結(jié)晶粗品；

s6：將步驟s5制得的重結(jié)晶粗品經(jīng)過超臨界co2萃取，萃取的條件：萃取釜壓力為16mpa，萃取溫度為43℃，萃取時間為35min，制得芒果甙液體；

s7：將步驟s6制得的芒果甙液體進(jìn)行真空減壓濃縮后，在溫度為4℃下進(jìn)行結(jié)晶，所述晶體在溫度為43℃下真空干燥至含水率為1.2％，制得芒果甙。

實施例2

一種采用芒果葉制取芒果甙的工藝，包括以下步驟：

s1：將芒果葉烘干至含水率為2.5％后進(jìn)行粉碎并過50目篩子，制得芒果葉粉末；

s2：向步驟s1制得的芒果葉粉末中加入質(zhì)量比為8:1的75％乙醇和1-烯丙基-3-甲基氯化咪唑，其中芒果葉粉末與乙醇和1-丙基-3-甲基咪唑醋酸鹽的總重量比為1:4，在水浴條件下回流提取2次，每次提取時長為2.4h，提取完全后合并提取液，調(diào)節(jié)提取液的ph值至4.8，溫度控制為70℃，通過活性炭脫色除雜1h，過濾后制得一次脫色液；

s3：將步驟s2制得的一次脫色液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5倍體積的42℃的水進(jìn)行溶解，采用無水乙酸乙酯溶劑進(jìn)行萃取2次，繼續(xù)用無水乙酸乙酯進(jìn)行2次結(jié)晶處理，結(jié)晶過程中固液比為1:4(w/v)，制得結(jié)晶粗品；

s4：將步驟s3制得的粗晶經(jīng)70％的乙醇溶解，調(diào)節(jié)溶液的ph值至5.2，溫度控制為76℃，通過活性炭脫色除雜0.7h，過濾后制得二次脫色液；

s5：將步驟s4制得的二次脫色液真空減壓濃縮后，在溫度為3℃下結(jié)晶，制得重結(jié)晶粗品；

s6：將步驟s5制得的重結(jié)晶粗品經(jīng)過超臨界co2萃取，萃取的條件：萃取釜壓力為12mpa，萃取溫度為40℃，萃取時間為40min，制得芒果甙液體；

s7：將步驟s6制得的芒果甙液體進(jìn)行真空減壓濃縮后，在溫度為2℃下進(jìn)行結(jié)晶，所述晶體在溫度為40℃下真空干燥至含水率為1％，制得芒果甙。

實施例3

一種采用芒果葉制取芒果甙的工藝，包括以下步驟：

s1：將芒果葉烘干至含水率為2.2％后進(jìn)行粉碎并過80目篩子，制得芒果葉粉末；

s2：向步驟s1制得的芒果葉粉末中加入質(zhì)量比為12:1的85％乙醇和1-烯丙基-3-甲基氯化咪唑，其中芒果葉粉末與乙醇和1-丙基-3-甲基咪唑醋酸鹽的總重量比為1:8，在水浴條件下回流提取3次，每次提取時長為1.8h，提取完全后合并提取液，調(diào)節(jié)提取液的ph值至5.1，溫度控制為75℃，通過活性炭脫色除雜0.5h，過濾后制得一次脫色液；

s3：將步驟s2制得的一次脫色液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5.4倍體積的50℃的水進(jìn)行溶解，采用無水乙酸乙酯溶劑進(jìn)行萃取3次，繼續(xù)用無水乙酸乙酯進(jìn)行3次結(jié)晶處理，結(jié)晶過程中固液比為1:5(w/v)，制得結(jié)晶粗品；

s4：將步驟s3制得的粗晶經(jīng)78％的乙醇溶解，調(diào)節(jié)溶液的ph值至5.2-5.5，溫度控制為80℃，通過活性炭脫色除雜0.3h，過濾后制得二次脫色液；

s5：將步驟s4制得的二次脫色液真空減壓濃縮后，在溫度為6℃下結(jié)晶，制得重結(jié)晶粗品；

s6：將步驟s5制得的重結(jié)晶粗品經(jīng)過超臨界co2萃取，萃取的條件：萃取釜壓力為20mpa，萃取溫度為45℃，萃取時間為30min，制得芒果甙液體；

s7：將步驟s6制得的芒果甙液體進(jìn)行真空減壓濃縮后，在溫度為5℃下進(jìn)行結(jié)晶，所述晶體在溫度為45℃下真空干燥至含水率為0.9％，制得芒果甙。

對比例

采用“一種芒果甙的制備方法(公開號：cn101759689a)”的實施例1-4的方法制備芒果甙。

對實施例1-3和對比例制得的芒果甙的純度進(jìn)行檢測，結(jié)果如下表所示。

由以上表可知，本發(fā)明的方法制得的芒果甙的純度在99.09％以上，純度達(dá)到了作為定性、定量的對照品要求；而對比例的方法制得的芒果甙的純度在95％-96％，純度不符合作為定性、定量的對照品要求。

以上內(nèi)容是結(jié)合具體的優(yōu)選實施方式對本發(fā)明所作的進(jìn)一步詳細(xì)說明，不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實施只局限于這些說明，對于所屬技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡單推演或替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本發(fā)明由所提交的權(quán)利要求書確定的專利保護(hù)范圍。