專利名稱：甜葉菊提取物及其提取方法和萊鮑迪甙a的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及萊鮑迪甙A的提取方法和甜葉菊提取物及其提取方法，屬食品化工領(lǐng) 域。
背景技術(shù)：
甜菊糖試(Totalsteviosides)是一種從甜葉菊(Stevia rebaudiana Bertohi) 的葉和莖中提取出來的高甜度、低熱量天然保健甜味劑，它主要含八種不同甜味成分甜菊 試(Stevioside)；萊鮑迪試(Rebaudioside) A、B、C、D、E 及杜爾可試(Dulcoside) A,B0 其中 甜菊甙約占總甙量的66 %，萊鮑迪甙A約占總甙量的22 %，萊鮑迪甙C約占總甙量的9 %， 杜爾可甙A約占總甙量的2%，其它成分含量極微。普通甜菊糖甙存在一些缺陷，其大多甜味成份具有較強(qiáng)的不良余味，這制約了甜 菊糖甙的廣泛應(yīng)用。而萊鮑迪甙A是甜菊糖甙中味質(zhì)最好的甜味成份，無不良余味，甜度也 最高(蔗糖的300 450倍)，是一種理想的天然保健甜味劑。因此高純度的萊鮑迪甙A產(chǎn) 品(含量>99%)是近年來國內(nèi)外甜菊糖甙生產(chǎn)工業(yè)的研究熱點(diǎn)。但是由于這些甜味成分 的化學(xué)結(jié)構(gòu)非常相似，僅區(qū)別于甙鍵上結(jié)合糖的種類、數(shù)量和構(gòu)成型式，因此目前在工業(yè)生 產(chǎn)上很難純化得到高純度的萊鮑迪甙A。迄今為止，高純度的萊鮑迪甙A制備方法有高效液相色譜法(HPLC)、薄層色譜 法、滴液逆流色譜法、毛細(xì)管電泳法、超臨界萃取法等，但這些方法處理量小、成本高，不適 用于工業(yè)生產(chǎn)。專利CN 1132840C公開了一種通過固液分離精制甜菊糖甙的方法，該方法將甜菊 糖甙與乙醇按1 1.4 1.7比例進(jìn)行混合，溶解過程中攪拌混合物，將溶解后的混合物進(jìn) 行固液分離，將得到的固體和液體分別進(jìn)行活性碳脫色、干燥后，得到精制甜菊糖甙。該方 法所得到的甜菊糖甙產(chǎn)品中萊鮑迪甙A的含量為88%，含有較多的不良余味雜質(zhì)。專利CN 1098860C公開了一種通過真空吸濾、離子交換樹脂分離富集甜菊糖甙的 工藝，該工藝選擇萊鮑迪甙A與甜菊甙之比在0.5 11的甜菊糖甙粗品為原料，以甲醇與 水混合液溶解攪拌甜菊糖甙，并將混合物過濾后，以離子交換樹脂脫鹽和活性碳脫色，蒸去 甲醇與水，得到產(chǎn)率為35 65%的萊鮑迪甙A與甜菊甙之比大于2. 5的甜菊糖甙產(chǎn)品，該 產(chǎn)品中甜菊糖甙含量大于95% (萊鮑迪甙的含量>78%)。該工藝中萊鮑迪甙的含量和產(chǎn) 率都較低。專利CN 1078217C公開了一種通過吸附樹脂分離富集萊鮑迪甙A的方法，該發(fā)明 合成了一系列的大孔吸附樹脂，并利用大孔吸附樹脂的選擇性吸附作用分離甜菊糖甙，再 通過重結(jié)晶可得到萊鮑迪甙A含量為90%的甜菊糖甙產(chǎn)品。該方法所得到的甜菊糖甙產(chǎn)品 中仍含有較多的不良余味雜質(zhì)，難以單獨(dú)作為甜味劑使用。
專利CN 1032651C公開了一種通過萃取精制甜菊糖甙的方法，該方法以脂肪醇或 脂肪醇加稀釋劑的混合溶劑對(duì)甜菊糖甙粗品溶液進(jìn)行液_液萃取，再用水進(jìn)行反萃取，干 燥后可得到甜菊糖總甙含量為90%的產(chǎn)品。該方法試劑消耗多，分離效果差，工業(yè)生產(chǎn)有困 難。專利CN 1024348C公開了一種通過普通樹脂提取甜菊糖甙的工藝，該工藝通過干 葉浸泡、板框過濾、吸附、脫鹽、普通強(qiáng)堿性樹脂脫色、濃縮干燥等步驟得到甜菊糖總甙含量 為98%的產(chǎn)品。該工藝采用普通強(qiáng)堿性樹脂脫色，脫色效率低且該樹脂在使用過程中極易中毒。專利JP 07, 143，860(1995)公開了一種生產(chǎn)高含量RA的方法。該方法以水或含 水溶劑從植物干莖或葉中提取甜菊糖甙，并從提取液中分離收集，可得到萊鮑迪甙A含量 為甜菊甙、萊鮑迪甙C、杜爾可甙A總量4. 8 8. 5倍的提取物。再通過以含水10 20% 甲醇的結(jié)晶、重結(jié)晶方法可得到RA含量為90 %的產(chǎn)品。專利JP 2002, 262，822公開了一種由甜葉菊變異品種的干葉中所提取的甜味劑 及其提取方法。該方法以水或水的溶劑對(duì)甜葉菊變異品種的干葉進(jìn)行提取，其中萊鮑迪甙 A含量是甜菊甙的2. 56倍。專利US 20060134292公開了一種從甜葉菊中提取甜味甙的方法，并可分別得到 萊鮑迪甙A及甜菊甙，提取在具有膠質(zhì)酶的條件下進(jìn)行，純化中使用了環(huán)狀糊精及斑脫土， 高純度萊鮑迪甙A由結(jié)晶及重結(jié)晶得到。高純度甜菊甙則由環(huán)狀糊精，斑脫土及離子交換 樹脂處理得到，酶修飾的萊鮑迪甙A，甜菊甙及純化提取物由Thermoactinomyces vilgaris 和Bacillus halophilus中所提取的酶進(jìn)行。專利US 20060083838公開了一種生產(chǎn)高含量萊鮑迪甙A的方法。該方法以配制 的乙醇溶劑與甜葉菊起始材料進(jìn)行回餾，回餾后過濾收集固體殘留物并以乙醇攪拌洗滌， 再次過濾，收集殘留物并除去乙醇并干燥可得純度>99%萊鮑迪甙A。由這些方法和工藝(除專利US 20060083838)所得到的甜菊糖甙中的萊鮑迪甙A 絕對(duì)含量較低(純度<96%)，更不能得到純度>99%的萊鮑迪甙A產(chǎn)品，難以單獨(dú)作為甜 味劑使用。專利US 20060083838聲稱能夠得到萊鮑迪甙A純度>99%的產(chǎn)品，但其提供的方 法步驟十分簡單常見。發(fā)明人經(jīng)重復(fù)實(shí)驗(yàn)表明如此簡單的處理步驟不能將萊鮑迪甙A同與 其結(jié)構(gòu)極為相似的其它成分分離開，因此實(shí)踐中通過該專利方法并不能得到其所聲稱的純 度彡99%的萊鮑迪甙A。雖然目前我國每年出口大量甜菊糖甙，但由于其中萊鮑迪甙A含量低(到目前為 止國內(nèi)還沒有萊鮑迪甙A純度> 96%的甜菊糖甙產(chǎn)品)，往往僅作為一種原料和初級(jí)產(chǎn)品 出口，技術(shù)含量低，價(jià)格便宜。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所解決的技術(shù)問題是提供了一種從甜葉菊中提取高純度、高產(chǎn)率萊鮑迪甙 A的方法。本發(fā)明提取方法包括如下步驟a、按 1 3 1 9m/v 的重量體積比例，將甜葉菊 Stevia rebaudiana Bertohi 葉和莖與0% 15% ν/ν的水與甲醇混合溶劑在50°C 80°C進(jìn)行連續(xù)逆流提取，水與甲醇混合溶劑對(duì)每千克甜葉菊原料的流速為1 4L/h ；b、將提取溶液濃縮后得萊鮑迪甙A粗品以水分散后進(jìn)行超濾，得濾液；C、以極性樹脂對(duì)超濾后濾液進(jìn)行吸附洗脫，吸附流速為1 4BV/h，吸附后以 30% 60% ν/ν的甲醇與水混合溶劑進(jìn)行洗脫，洗脫流速為0. 5 2BV/h ；d、將洗脫液濃縮后，于-20°C冷凍攪拌結(jié)晶24小時(shí)，再于-20°C冷凍攪拌重結(jié)晶24 小時(shí)，過濾收集晶體，80 0C烘干，得純度> 99 %的萊鮑迪甙A。其中，步驟a所述的甜葉菊與水與甲醇混合溶劑的重量體積比范圍為1 5 1 9。進(jìn)一步地，步驟a所述的甜葉菊與水與甲醇混合溶劑的重量體積比范圍為1 5 1 。其中，步驟a所述的水與甲醇的體積配比范圍為5% 15%。進(jìn)一步地，步驟a所 述的水與甲醇的體積配比范圍為5% 10%。其中，步驟a所述的連續(xù)逆流提取溫度為60°C 80°C。進(jìn)一步地，步驟a所述的 連續(xù)逆流提取溫度為70°C 80°C。其中，步驟a所述的水與甲醇混合溶劑對(duì)每千克甜葉菊原料的流速為1 3L/h。 進(jìn)一步地，步驟a所述的水與甲醇混合溶劑對(duì)每千克甜葉菊原料的流速為1 2L/h。其中，步驟b的超濾條件為超濾膜規(guī)格為1K，膜透壓為15 30PSI，透過流速為 10 40LMH。其中，步驟c中所述的極性樹脂對(duì)超濾后濾液的吸附流速為1 3BV/h。進(jìn)一步 地，步驟c中所述的極性樹脂對(duì)超濾后濾液的吸附流速為1 2BV/h。其中，步驟c中所述的洗脫極性樹脂的甲醇與水的體積配比范圍為40% 60%。 進(jìn)一步地，步驟c中所述的洗脫極性樹脂的甲醇與水的體積配比范圍為50% 60%。其中，步驟c中所述的甲醇與水混合溶劑對(duì)極性樹脂的洗脫流速為0. 5 1. 5BV/ h。進(jìn)一步地，步驟c中所述的甲醇與水混合溶劑對(duì)極性樹脂的洗脫流速為0. 5 lBV/h。應(yīng)用上述提取方法從甜葉菊中提取得制成的甜葉菊提取物，其中萊鮑迪甙A的含 量可> 99 %，萊鮑迪甙A產(chǎn)率> 85 %，其在口感上無任何不良余味，可單獨(dú)作為甜味劑使 用，且處理量大、成本低，適用于工業(yè)生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式針對(duì)本發(fā)明提供從甜葉菊中提取萊鮑迪甙A的方法，通過對(duì)本發(fā)明具體實(shí)施方式
的描述說明但不限制本發(fā)明，并通過下述實(shí)驗(yàn)證明其有益效果。實(shí)施例1甜葉菊原料與溶劑比例對(duì)連續(xù)逆流提取的影響按1 3、1 5、1 7、1 9 (m/v)的重量體積比例，分別將10千克干燥的甜葉 菊(Stevia rebaudianaBertohi)葉和莖(含萊鮑迪甙A 8%)與5% (ν/ν)的水與甲醇混 合溶劑在70°C進(jìn)行連續(xù)逆流提取，水與甲醇混合溶劑對(duì)每千克甜葉菊原料的流速為2L/h。測(cè)量提取液體積，并定量量取部分提取液蒸干至恒重后稱重，并分別取樣以HPLC 方法進(jìn)行純度鑒定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。表1甜葉菊原料與溶劑比例對(duì)連續(xù)逆流提取的影響
權(quán)利要求
萊鮑迪甙A的提取方法，它包括如下步驟a、按1∶3～1∶9m/v的重量體積比例，將甜葉菊Stevia rebaudiana Bertohi葉和莖與0％～15％v/v的水與甲醇混合溶劑在50℃～80℃進(jìn)行連續(xù)逆流提取，水與甲醇混合溶劑對(duì)每千克甜葉菊原料的流速為1～4L/h；b、將提取溶液濃縮后得萊鮑迪甙A粗品以水分散后進(jìn)行超濾，得濾液；c、以極性樹脂對(duì)超濾后濾液進(jìn)行吸附洗脫，吸附流速為1～4BV/h，吸附后以30％～60％v/v的甲醇與水混合溶劑進(jìn)行洗脫，洗脫流速為0.5～2BV/h；d、將洗脫液濃縮后，于 20℃冷凍攪拌結(jié)晶24小時(shí)，再于 20℃冷凍攪拌重結(jié)晶24小時(shí)，過濾收集晶體，80℃烘干，得純度≥99％的萊鮑迪甙A。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的萊鮑迪甙A的提取方法，其特征在于步驟a中是按1 5 1 9m/v的重量體積比例，將甜葉菊Stevia rebaudiana Bertohi葉和蓮與0% 15% ν/ ν的水與甲醇混合溶劑混合。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的萊鮑迪甙A的提取方法，其特征在于步驟a所述的水 與甲醇的體積配比范圍為5% 15%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的萊鮑迪甙A的提取方法，其特征在于步驟a所述的連續(xù)逆 流提取溫度為60°C 80°C。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的萊鮑迪甙A的提取方法，其特征在于步驟b所述的超濾條 件為超濾膜規(guī)格為1K，膜透壓為15 30PSI，透過流速為10 40LMH。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的萊鮑迪甙A的提取方法，其特征在于步驟c中所述的極性 樹脂對(duì)超濾后濾液的吸附流速為1 3BV/h ；洗脫極性樹脂的甲醇與水的體積配比范圍為 40% 60% ；甲醇與水混合溶劑對(duì)極性樹脂的洗脫流速為0. 5 1. 5BV/h。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的萊鮑迪甙A的提取方法，其特征在于步驟c中所述的極性 樹脂對(duì)超濾后濾液的吸附流速為1 2BV/h ；洗脫極性樹脂的甲醇與水的體積配比范圍為 50% 60% ；甲醇與水混合溶劑對(duì)極性樹脂的洗脫流速為0. 5 lBV/h。
8.甜葉菊提取物，它是采用權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的提取方法從甜葉菊中提取得到 的提取物，其中，萊鮑迪甙A的含量> 99%。
9.甜葉菊提取物的提取方法，它包括如下步驟a、按1 3 1 9m/v的重量體積比例，將甜葉菊Stevia rebaudiana Bertohi葉和 莖與0% 15% ν/ν的水與甲醇混合溶劑在50°C 80°C進(jìn)行連續(xù)逆流提取，水與甲醇混合 溶劑對(duì)每千克甜葉菊原料的流速為1 4L/h ；b、將提取溶液濃縮后得萊鮑迪甙A粗品以水分散后進(jìn)行超濾，得濾液；c、以極性樹脂對(duì)超濾后濾液進(jìn)行吸附洗脫，吸附流速為1 4BV/h，吸附后以30% 60% ν/ν的甲醇與水混合溶劑進(jìn)行洗脫，洗脫流速為0. 5 2BV/h ；d、將洗脫液濃縮后，于-20°C冷凍攪拌結(jié)晶24小時(shí)，再于-20°C冷凍攪拌重結(jié)晶24小 時(shí)，過濾收集晶體，80°C烘干，所得提取物中萊鮑迪甙A的含量> 99%。
全文摘要
本發(fā)明涉及萊鮑迪甙A的提取方法和甜葉菊提取物及其提取方法，屬食品化工領(lǐng)域，目的是提供一種從甜葉菊中提取高純度、高產(chǎn)率的萊鮑迪甙A的方法，包括如下步驟a、按1∶3～1∶9m/v的比例，將甜葉菊葉和莖與水與甲醇混合溶劑在50℃～80℃進(jìn)行連續(xù)逆流提取，水與甲醇混合溶劑對(duì)每千克甜葉菊原料的流速為1～4L/h；b、將提取溶液濃縮后得萊鮑迪甙A粗品以水分散后進(jìn)行超濾，得濾液；c、以極性樹脂對(duì)超濾后濾液進(jìn)行吸附洗脫，吸附后以甲醇與水混合溶劑進(jìn)行洗脫；d、濃縮洗脫液，于-20℃冷凍攪拌結(jié)晶24小時(shí)，再于-20℃冷凍攪拌重結(jié)晶24小時(shí)，收集晶體，80℃烘干，得純度≥99％的萊鮑迪甙A，產(chǎn)率＞85％，在口感上無不良余味，且處理量大、成本低，適用于工業(yè)生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07H15/256GK101941997SQ20101050415
公開日2011年1月12日 申請(qǐng)日期2006年12月15日 優(yōu)先權(quán)日2006年12月15日
發(fā)明者華君, 秦嶺, 許慶, 陽明福 申請(qǐng)人:成都華高藥業(yè)有限公司