一種從萊菔子中提取芥子堿提取物的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種從萊菔子中提取芥子堿提取物的方法，包括萊菔子原料的炒制、脫脂、及脫脂后的提取、柱分離等工序；本發(fā)明方法安全可控，簡便實用，使用本發(fā)明方法制備的芥子堿提取物的純度較高。
【專利說明】一種從萊菔子中提取芥子堿提取物的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種從萊菔子中提取芥子堿提取物的方法，屬中醫(yī)藥【技術領域】。
【背景技術】
[0002]中藥是一個復雜的體系，一味藥中不同藥效作用成分共存一體。炮制會影響其內在成分的量或質。經(jīng)過對中藥生制品的系統(tǒng)研究，在認識炮制機理的基礎上，利用現(xiàn)代科技手段，對不同藥效部位、組分進行分離純化，使藥效成分有效富集，資源得到綜合利用?？梢栽趧┝繙p少，質量可控前提下，提高中藥的科技含量，實現(xiàn)傳統(tǒng)中藥飲片功效的優(yōu)化，也可對分離純化的部分進行新功效的開發(fā)，為創(chuàng)新藥物研制提供技術支撐。
萊菔子是中醫(yī)常用藥，其中含有30%-40%的脂肪油，按中藥傳統(tǒng)入煎劑使用只有不足5%被煎出，其余則隨藥渣廢棄。萊菔子脂肪油中含30%以上的芥酸。芥酸長期食用對人體不利，是食用油的限制性標準之一，但它是重要的化工原料，具有很高的工業(yè)利用價值。萊菔子中的芥子堿含量《中國藥典》2010年版規(guī)定不得低于0.4%。研究證明，芥子堿具有降血壓、降血脂、抗輻射、抗炎、抗腹瀉、抗癌、抗雄激素等多種藥理作用。上述作用與中醫(yī)使用萊菔子用于消食除脹，降氣化痰沒有必然的聯(lián)系。從萊菔子中獲得含量高的芥子堿提取物，可為研發(fā)以芥子堿為主要藥效成分的新藥提供技術支撐。同時可避免化學合成品成本高，副作用明顯等問題。從萊菔子中提取出芥子堿提取物，可更好地突出其他成分的藥理作用，并且有利于萊菔子中的高芥酸脂肪油、硫苷類成分深度開發(fā)和綜合利用。

【發(fā)明內容】

[0003]為了解決上述技術問題，本發(fā)明提供了一種從萊菔子中提取芥子堿提取物的方法。
[0004]在規(guī)范萊菔子炒制工藝的基礎上，通過物理脫脂獲得原料75%左右的萊菔子脂肪油部分，可為高芥酸脂肪油的精加工提供原料，使萊菔子資源得到綜合利用。
[0005]對脫脂后的部分優(yōu)化了提取精制工藝，獲得了含量超過20%的芥子堿提取物，較萊菔子原料中的芥子堿含量富集了近40倍。發(fā)明還對芥子堿提取物的質量控制方法和藥效進行了一定的研究。
萊菔子中芥子堿提取物的制備工藝如下:
1.萊菔子的炒制與脫脂
取萊菔子，凈制；炒制時，預熱至鍋底溫度達200-250 V時投藥，快速均勻翻炒1-1.5min，至質地鼓起，易脫皮，有爆裂聲和特有香氣時，取出，晾涼；粉碎成10目粉，90°C烘1-2h,使粉末溫度均勻達到90°C，壓油機物料室控溫95°C ±3°C，投料入壓油室，壓油機采用漸進式加壓，當脂肪油溢出后，暫停加壓，待油溢出速度顯著減慢時，再繼續(xù)加壓至油溢出，如此反復至出油率達到原料中脂肪油含量的75%±3%時，停止壓油；脂肪油另器保存，藥餅粉碎后供進一步提??；脂肪油可作為高芥酸脂肪油精加工的原料； 2.脫脂炒萊菔子芥子堿提 取物的制備經(jīng)物理脫脂后的炒萊菔子藥餅破碎成粗粉，加水浸泡0.5 h，加熱回流提取三次，加水量依次為藥料的8倍，6倍，6倍，提取時間分別為1.0 h，0.5 h，0.5 h，過濾，合并濾液，減壓濃縮至I g/ml，加入95%乙醇，邊加邊快速攪拌，使得乙醇濃度為80%，靜置24 h，過濾，濾液減壓濃縮，回收乙醇至無醇味，用氨水調整pH為8作為上樣溶液；
HPD722型大孔樹脂，濕法裝柱，取2倍柱體積pH8的上樣溶液以3 BV.IT1的流速上樣，吸附4 h，用3 BV蒸餾水以4 BVf1的流速洗脫，合并洗脫液，另器保存。再用5 BV的PH4的50%乙醇以4 BV 的流速洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇；于75 °C, -0.08-0.09Mpa條件下，減壓濃縮得浸膏，浸膏再以70 1:，壓力-0.09 Mpa，真空干燥至含水量不高于5.0%，得到炒萊菔子芥子堿提取物。
[0006]本發(fā)明的有益效果如下:
1、本發(fā)明優(yōu)選出的萊菔子炒制工藝，在不影響芥子堿含量與提取的前提下，既能保證有效滅活萊菔子中硫苷分解酶的活性，最大限度的提高炒萊菔子水提液中蘿卜苷及其他硫代葡萄糖苷的含量，又可避免不當?shù)某粗茰囟葘θR菔子中蘿卜苷等硫代葡萄糖苷的破壞。能顯著提高炒萊菔子中以蘿卜苷為主的總硫苷成分的含量。
[0007]2、本發(fā)明優(yōu)選出的炒萊菔子物理脫脂工藝，不使用有機溶媒。有效克服了有機溶媒脫脂易燃易爆，產(chǎn)品中存在有機溶媒殘留的難題，便于工業(yè)生產(chǎn)。又能保證脫脂過程中蘿
卜苷不被破壞，并且使芥子堿得到有效富集。該工藝既有效獲得了炒萊菔子脂肪油部位，為精細化工業(yè)提供了高芥酸脂肪油原料，使炒萊菔子資源得到了綜合利用，提高了其附加值。又為炒萊菔子中芥子堿提取物提取分離減少了干擾。
[0008]3、本發(fā)明優(yōu)選出的脫脂炒萊菔子提取精制工藝，簡便實用，便于推廣。用最小的溶媒量保證了芥子堿的提取率和轉移率。
[0009]4、本發(fā)明優(yōu)選出的脫脂炒`萊菔子提取液中芥子堿提取物分離制備工藝，從不同樹脂類型中，優(yōu)化出了大孔吸附樹脂柱型號，上樣藥液的PH值、吸附時間、洗脫液的種類和pH值、洗脫速度、洗脫液體積等關鍵參數(shù)，確保了芥子堿提取物的收率和純度。使提取物中芥子堿含量高于23%，較萊菔子原料提高了近60倍。簡便實用，便于推廣。
【具體實施方式】
[0010]下面結合實施例對本發(fā)明作進一步的說明。
[0011]實施例1
1.萊菔子的炒制與脫脂
取萊菔子，凈制。炒制時，預熱至鍋底溫度達200-250 °C時投藥，快速均勻翻炒1-1.5min，至質地鼓起，易脫皮，有爆裂聲和特有香氣時，取出，晾涼；粉碎成10目粉，90°C烘l_2h，使粉末溫度均勻達到90°C，壓油機物料室控溫95°C ±3°C，投料入壓油室，壓油機采用漸進式加壓使脂肪油溢出后，暫停加壓，待油溢出速度顯著減慢時，再繼續(xù)加壓至油溢出，如此反復至出油率達到原料中脂肪油含量的75%±3%時，停止壓油；脂肪油另器保存，藥餅粉碎后供進一步提取；
萊菔子脫脂前芥子堿含量:0.80% ;脫脂后蘿卜苷含量:1.08% ；
2.脫脂炒萊菔子芥子堿提取物的制備
經(jīng)物理脫脂后的炒萊菔子藥餅破碎成粗粉，加水浸泡0.5 h，加熱回流提取三次，加水量依次為藥料的8倍，6倍，6倍，提取時間分別為1.0 h，0.5 h，0.5 h，過濾，合并濾液，減壓濃縮至I g/ml，加入95%乙醇，邊加邊快速攪拌，使得乙醇濃度為80%，靜置24 h，過濾，濾液減壓濃縮回收乙醇至無醇味，用氨水調整pH為8作為上樣溶液。
[0012]HPD722型大孔樹脂，濕法裝柱，取2倍柱體積pH8的藥液以3 BV.IT1的流速上樣，吸附4 h，用3 BV蒸餾水以4 BV 的流速洗脫，合并洗脫液，另器保存；再用5 BV的PH4的50%乙醇以4 BV 的流速洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇；于75 °C, -0.08-0.09Mpa條件下，減壓濃縮得浸膏，浸膏再以70 1:，壓力-0.09 Mpa，真空干燥至含水量不高于
5.0%，得到炒萊菔子芥子堿提取物部位。
[0013]芥子堿提取物中芥子堿含量:23.07%。
[0014]所述萊菔子供試品中芥子堿的測定方法如下:
照《中國藥典》2010年版附錄VI D高效液相色譜法測定。
[0015]色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.1%醋酸溶液(15:85)為流動相；檢測波長為326nm。理論板數(shù)按芥子堿峰計算應不低于5000。
[0016]對照品溶液的制備取芥子堿硫氰酸鹽對照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加純凈水制成每I ml含40 μ g的溶液，即得。
[0017]供試品溶液的制備取芥子堿提取物粉末0.05 g，精密稱定，蒸餾水溶解，超聲20min,加蒸懼水定容至100 ml,取適量過0.45 μ m微孔濾膜。
`[0018]測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
[0019]注:《藥典》中有芥子堿含測方法，但使用的是苯基硅烷基鍵合硅膠柱，價格昂貴，本方法使用普通C18柱，方便實用。
【權利要求】
1.一種從萊菔子中提取芥子堿提取物的方法，其特征在于，包括以下步驟: 1)萊菔子的炒制與脫脂 取萊菔子，凈制；炒制時，預熱至鍋底溫度達200-250 °C時投藥，快速均勻翻炒1-1.5min，至質地鼓起，易脫皮，有爆裂聲和特有香氣時，取出，晾涼；粉碎成10目粉，90°C烘1-2h,使粉末溫度均勻達到90°C，壓油機物料室控溫95°C ±3°C，投料入壓油室，壓油機采用漸進式加壓，當脂肪油溢出后，暫停加壓，待油溢出速度顯著減慢時，再繼續(xù)加壓至油溢出，如此反復至出油率達到原料中脂肪油含量的75%±3%時，停止壓油；脂肪油另器保存，藥餅粉碎后供進一步提??； 2)脫脂炒萊菔子芥子堿提取物的制備 經(jīng)物理脫脂后的炒萊菔子藥餅破碎成粗粉，加水浸泡0.5 h，加熱回流提取三次，加水量依次為藥料的8倍，6倍，6倍，提取時間分別為1.0 h，0.5 h，0.5 h，過濾，合并濾液，減壓濃縮至I g/ml，加入95%乙醇，邊加邊快速攪拌，使得乙醇濃度為80%，靜置24 h，過濾，濾液減壓濃縮，回收乙醇至無醇味，用氨水調整pH為8作為上樣溶液； HPD722型大孔樹脂，濕法裝柱，取2倍柱體積pH8的上樣溶液以3 BV.IT1的流速上樣，吸附4 h，用3 BV蒸餾水以4 BV 的流速洗脫，合并洗脫液，另器保存；再用5 BV的PH4的50%乙醇以4 BV 的流速洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇；于75 °C, -0.08-0.09Mpa條件下，減壓濃縮得浸膏，浸膏再以70 1:，壓力-0.09 Mpa，真空干燥至含水量不高于5.0%，得到炒萊菔子芥子堿提取物。
2.根據(jù)權利要求 1所述的方法，其特征在于，所述的炒萊菔子芥子堿提取物中芥子堿的含量大于23%。
【文檔編號】A61K36/31GK103768121SQ201410049670
【公開日】2014年5月7日 申請日期:2014年2月13日 優(yōu)先權日:2014年2月13日
【發(fā)明者】呂文海, 馬山, 孟祥紅, 王群, 李書云 申請人:山東中醫(yī)藥大學