本發(fā)明屬化學合成和藥物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

獲得性免疫缺陷綜合征(Acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)即艾滋病，是由于人體受免疫缺陷病毒(Human immunodeficiedcy virus,HIV)的感染而引發(fā)的疾病，HIV病毒能選擇性攻擊人體T淋巴細胞，破壞人體的免疫系統(tǒng)，導致人體容易受到外界病菌的感染，嚴重的還會引發(fā)惡性腫瘤，所以致死率高。

在HIV的病毒復制周期中，逆轉(zhuǎn)錄酶(Reverse transcriptase,RT)作用于其復制的早期環(huán)節(jié)，是催化病毒RNA向DNA轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵酶，因而HIV RT成為抗HIV藥物設(shè)計的重要靶點之一。HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑根據(jù)其結(jié)構(gòu)和作用機制上的差異可分為核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NRTIs)和非核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NNRTIs)，它們對HIV病毒都普遍顯示出了較高的抑制活性。但核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NRTIs)屬于競爭性抑制劑，它除了抑制病毒基因的復制，還會干擾正常細胞DNA鏈的生長，從而引發(fā)一些人體的毒副作用。相比之下，非核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NNRTIs)因其高效低毒的優(yōu)點而成為各國藥物化學家關(guān)注的熱點之一。目前，經(jīng)美國FDA批準上市的抗HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑有五種:即奈韋拉平(Nevirapine)、地拉韋啶(Delavirdine)、依非韋倫(Efavirenz)、依曲韋林(Etravirine)和利匹韋林(Rilpivirine)。

從1989年發(fā)現(xiàn)第一類NNRTIs，至今已發(fā)現(xiàn)了60多類結(jié)構(gòu)各異的NNRTIs，二氫烷氧芐基嘧啶酮類似物(DABOs)是其中較具代表性的一類,由于其具高效低毒、合成便利等特點而倍受關(guān)注。構(gòu)效關(guān)系研究表明，嘧啶環(huán)的C-2、C-6、C-5位取代基對該類化合物的活性至關(guān)重要?；贒ABOs類NNRTIs的作用模型，我們以柔性環(huán)己基取代DABOs嘧啶環(huán)C-6位芐基，發(fā)明了新型6-環(huán)已甲基嘧啶酮類化合物(S-DACOs),從而顯著改進了抗HIV活性及耐藥性(Yanping He，et.al.Bioorg.Med.Chem.Lett.，2011,21:694-697.)。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于通過對DACOs類NNRTIs的C-2及C-5側(cè)鏈進行結(jié)構(gòu)改造，合成一類新型的5-烷基-6-環(huán)己基甲基-2-(4’-羧酸酯基芐基)硫嘧啶酮類化合物，其對HIV復制具有明顯抑制作用。

本發(fā)明化合物為如下I式的5-烷基-6-環(huán)己基甲基-2-(4’-羧酸酯基芐基)硫嘧啶酮類化合物，或其藥學上可接受的鹽，或其具有同樣生物學功能的前體和衍生物：

Ⅰ式中的R₁為C_1-6的烷基、或環(huán)烷基；R₂為C_1-8的烷基、或環(huán)烷基，或單取代或多取代的苯基，其苯環(huán)上的取代基為氫、或鹵素、或硝基、或氨基、或氰基、或磺酸基、或羧基、或C_1-3的烷基、或C_1-3的烷氧基；或R₂為1-萘基、或2-萘基、或聯(lián)苯基、或2-噻吩基、或且X為氫、或鹵素、或硝基、或氨基、或氰基、或磺酸基、或羧基、或C_1-3的烷基、或C_1-3的烷氧基)；或R₂為

本發(fā)明所述的化合物可用下述方法制備：

以5-烷基-6-環(huán)己基甲基-硫尿嘧啶A為原料，在本專業(yè)人員已知的溶劑和堿性條件下，分別與4-羧酯基芐溴B反應(yīng)而獲得本發(fā)明化合物I，其反應(yīng)式如下：

反應(yīng)式中，R₁為C_1-6的烷基、或環(huán)烷基；R₂為C_1-8的烷基、或環(huán)烷基，或單取代或多取代的苯基且苯環(huán)上的取代基為氫、或鹵素、或硝基、或氨基、或氰基、或磺酸基、或羧基、或C_1-3的烷基、或C_1-3的烷氧基；或R₂為1-萘基、或2-萘基、或聯(lián)苯基、或2-噻吩基、或且X為氫、或鹵素、或硝基、或氨基、或氰基、或磺酸基、或羧基、或C_1-3的烷基、或C_1-3的烷氧基)；或R₂為

5-烷基-6-環(huán)己基甲基硫尿嘧啶A與各種取代的4-羧酯基芐溴B反應(yīng)的物質(zhì)的量比為1:1～1:1.5，反應(yīng)溫度為20～100℃，反應(yīng)時間為8～24小時。

合成路線中所用到的堿可以為Na₂CO₃、NaHCO₃、Cs₂CO₃、K₂CO₃、Et₃N、吡啶、DMAP等；溶劑為MeOH、EtOH、DCM、THF、丙酮、乙醚、二氧六環(huán)、甲苯、二甲苯、DMSO、DMF等溶劑中的一種或它們的混合物。

5-烷基-6-環(huán)己基甲基硫脲嘧啶A的制備方法為現(xiàn)有技術(shù)，例如可見發(fā)明人為何嚴萍等的中國專利文件ZL200710066433.7。

5-烷基-6-環(huán)己基甲基硫脲嘧啶A的制備可按下式：

各4-羧酯基芐溴B的制備方法可按下式：

本發(fā)明化合物合成過程中所用到的原料和試劑均有市售，或根據(jù)上面描述的方法、通過有機化學領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的步驟來制備。

本發(fā)明化合物的用途是用于制備治療艾滋病的藥物。

本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明提供的一類化合物具良好抗的HIV-1病毒抑制活性，且毒性小。

具體實施方式

通過下述實例將有助于理解本發(fā)明，但本發(fā)明的內(nèi)容不限于此。

實施例一：5-烷基-6-環(huán)己基甲基-2-(4’-羧酸酯基芐基)硫嘧啶酮類化合物(I)的制備

將0.002mol 6-環(huán)己甲基-5-乙基/異丙基硫嘧啶酮用9ml DMF溶解，加入0.0024mol無水K₂CO₃，室溫攪拌30分鐘，加入9ml溶有0.0021mol 4-羧酯基芐溴(B)的DMF溶解，室溫攪拌反應(yīng)，TLC跟蹤原料消失后停止反應(yīng)，反應(yīng)液倒入80ml冰水中，過濾或用乙酸乙酯萃取濃縮得粗產(chǎn)物，粗產(chǎn)物經(jīng)柱層析或重結(jié)晶的方法進行純化。

通過上述的方法，將6-環(huán)己甲基-5-烷基硫嘧啶酮(A)與不同的4-羧酯基芐溴(B)在適當溶劑中、堿催化下反應(yīng)制備得到通式I所述目標化合物，部分化合物的結(jié)構(gòu)及波譜數(shù)據(jù)如表1：

表1.化合物Ia-x結(jié)構(gòu)及波譜數(shù)據(jù)

實施案例2：抗HIV-1活性測試

采用HIV-1感染的C8166細胞進行細胞水平抗HIV生物活性測試。方法描述如下。

細胞毒性實驗：化合物對C8166細胞的毒性采用MTT法測定。在96孔細胞培養(yǎng)板中，將化合物進行五倍倍比稀釋，每孔加入4×10⁵/ml C8166細胞懸液。每個濃度設(shè)置3個復孔。同時設(shè)置不含藥物的細胞對照及AZT藥物對照。37℃，5％CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)三天，每孔加MTT溶液37℃孵育4小時。每孔再加入10％SDS-50％DMF，37℃，5％CO₂培養(yǎng)箱中孵育過夜。混勻后用BIO-TEK ELx800ELISA儀測定OD值(測定波長：595nm；參考波長：630nm)，根據(jù)實驗結(jié)果繪制計量反應(yīng)曲線，計算CC₅₀(50％細胞產(chǎn)生毒性時的化合物濃度)。

合胞體抑制實驗：將4×10⁵/ml C8166細胞懸液接種到含化合物五倍倍比稀釋的96孔細胞培養(yǎng)板中，加入HIV-1_ⅢB稀釋上清(MOI＝0.04)，每個濃度梯度設(shè)3個復孔。同時設(shè)置不含化合物的HIV-1_ⅢB感染的陰性對照孔和含AZT藥物的陽性對照孔。37℃，5％CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)三天，倒置顯微鏡下(100×)，選取5個不重疊的視野，計數(shù)合胞體數(shù)目。根據(jù)實驗結(jié)果繪制計量反應(yīng)曲線，按Reed&Muench法計算出化合物抑制病毒的50％有效濃度(EC₅₀，50％有效濃度)。計算公式：致細胞病變抑制率(％)＝(1－實驗孔合胞體數(shù)/對照孔合胞體數(shù))×100％

本發(fā)明用AZT及NVP作對照品，部分目標化合物對HIV-1III_B的抑制活性結(jié)果見表2：

表2.化合物抗HIV-1活性

^aSI(治療指數(shù))＝CC₅₀/EC₅₀

表2可見，檢測的24個化合物樣品中，有14個化合物對HIV的復制顯示了明顯抑制作用，其EC₅₀值在為0.009-0.32μM，且對C8166細胞毒性較小，治療指數(shù)(SI)均大于160，表明通式I所包含的5-烷基-6-環(huán)己基甲基-2-(4’-羧酯基芐基)硫嘧啶酮類化合物為一類新型非核苷類HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NNRTIs)，可應(yīng)用于制備治療和預防HIV病毒感染藥物。也可作為新型抗HIV-1先導化合物作進一步研究與開發(fā)。