技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種利用定點突變及酶切技術(shù)制備熒光分子量內(nèi)標(biāo)的方法，包括步驟：將目的DNA片段A克隆進質(zhì)粒載體，得到重組質(zhì)粒B；以重組質(zhì)粒B為模板，在DNA片段A的不同長度位置分別進行定點突變，引入限制性酶切位點，并得到相應(yīng)的重組質(zhì)粒C；設(shè)計DNA片段A的擴增引物F1、R1，并分別在引物5’端進行熒光標(biāo)記；利用擴增引物F1、R1擴增重組質(zhì)粒C，得到擴增產(chǎn)物D，將產(chǎn)物D進行純化；利用限制性內(nèi)切酶酶切純化后的擴增產(chǎn)物D，得到酶切產(chǎn)物E，即熒光分子量內(nèi)標(biāo)。利用本發(fā)明方法可以實現(xiàn)制備從50bp到500bp共14個片段的分子量內(nèi)標(biāo)，產(chǎn)物沒有引物峰等雜峰，且工藝適用于規(guī)?；a(chǎn)。

技術(shù)研發(fā)人員：榮海博;管樺;姜伯瑋;阮德林;張濤;金川;王峰;張黎明
受保護的技術(shù)使用者：公安部第一研究所;北京中盾安民分析技術(shù)有限公司
文檔號碼：201710228420
技術(shù)研發(fā)日：2017.04.10
技術(shù)公布日：2017.06.20