本發(fā)明屬于生物學(xué)領(lǐng)域,本發(fā)明涉及一種提取體液(如羊水、血液、唾液、尿液)的懸浮細(xì)胞DNA提取試劑盒及提取方法。
背景技術(shù):
:機(jī)體中所含有水和分散在水里的各種物質(zhì)總稱為體液,體液可分為兩大部分:細(xì)胞內(nèi)液和細(xì)胞外液。本發(fā)明所述的體液指的為細(xì)胞外液;可分為血液、組織間隙液、淋巴液、腦脊液、尿液、唾液、精液等,另還有一些特殊的體液例如羊水。體液懸浮細(xì)胞指的是在體液中游離的細(xì)胞,例如羊水中游離的胎盤細(xì)胞,尿液中游離的上皮細(xì)胞,血液中游離的白細(xì)胞等等;這些細(xì)胞都反映著機(jī)體健康狀態(tài),因此可以通過(guò)檢測(cè)體液懸浮細(xì)胞對(duì)疾病進(jìn)行早期預(yù)警或預(yù)后判斷。例如,可以通過(guò)檢測(cè)羊水中游離的胎盤細(xì)胞DNA對(duì)胎兒是否患有唐氏綜合癥或其他遺傳病疾病進(jìn)行確認(rèn),通過(guò)檢測(cè)尿液中的游離細(xì)胞DNA可以達(dá)到對(duì)膀胱癌早期篩查的作用。對(duì)體液懸浮細(xì)胞檢測(cè)最常見(jiàn)方法就是對(duì)細(xì)胞提取DNA后進(jìn)行檢測(cè),DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)的完整性,DNA的產(chǎn)量和DNA的純度是DNA提取過(guò)程中的重要指標(biāo)。然而,體液成分組成復(fù)雜,且部分體液中懸浮細(xì)胞量很少(例如羊水),部分體液中成分復(fù)雜,因此在提取過(guò)程中純度、產(chǎn)量和完整性三個(gè)指標(biāo)難以同時(shí)滿足。且體液懸浮細(xì)胞DNA提取試劑盒主要用于臨床樣本的提取,因此,如何有效的控制提取試劑盒的成本,也是體液懸浮細(xì)胞DNA在應(yīng)用時(shí)需要考慮的重要因素。目前常見(jiàn)的DNA提取方法主要有三種:柱離心法、酚氯仿抽提法和磁珠法。柱離心法的原理是特殊硅基質(zhì)材料在一定的高鹽緩沖系統(tǒng)下高效、專一地吸附DNA(在高鹽、低pH值情況下吸附DNA;低鹽、高pH值情況下釋放DNA);然而柱離心法的DNA產(chǎn)量與最后洗脫步驟的洗脫效率有一定關(guān)系,而且在DNA洗滌過(guò)程中也會(huì)造成一定量的DNA損失,高速離心的情況下還會(huì)影響提取DNA的完整性,因此不適合細(xì)胞量少且對(duì)DNA完整性有一定需求的體液懸浮細(xì)胞DNA提取。酚氯仿抽提法是利用苯酚反復(fù)抽提,使蛋白質(zhì)變性,同時(shí)DNA易溶于水而不溶于有機(jī)溶劑的原理來(lái)提取DNA,但是苯酚和氯仿都是有毒的有機(jī)溶液,對(duì)人體傷害較大,在應(yīng)用上存在一定的局限性。磁珠法是采用了微納米級(jí)磁性微珠,這種磁珠微珠的表面包裹一層硅材料來(lái)吸附核酸,進(jìn)而通過(guò)磁鐵吸附從而達(dá)到分離核酸的目的。但是由于該方法對(duì)磁珠性能要求較高,提取DNA的效率與磁珠的性能有密切關(guān)聯(lián),但目前市售磁珠的性能參差不齊,而高端的磁珠價(jià)格昂貴,限制了該方法的應(yīng)用。中國(guó)發(fā)明專利CN104560959A提供了一種飽和氯化鈉法快速批量提取血液DNA的試劑盒和方法。該試劑盒包括紅細(xì)胞裂解液、去蛋白液、蛋白沉淀液、調(diào)節(jié)結(jié)合液、洗脫液和蛋白酶K溶液;其中,所述紅細(xì)胞裂解液包含8.29g/L的NH4Cl,31g/L的KHCO3和0.37g/L的Na2EDTA,pH7.2-7.4;所述去蛋白液為10%SDS,所述去蛋白沉淀液為飽和氯化鈉溶液,所述調(diào)節(jié)結(jié)合液為異丙醇,所述洗脫液為70%乙醇,所述蛋白酶K溶液濃度為20mg/ml,是本申請(qǐng)的最接近現(xiàn)有技術(shù),該方法可以實(shí)現(xiàn)對(duì)血液中的DNA進(jìn)行提取并且進(jìn)行PCR擴(kuò)增,但較血液而言,部分體液成分組成復(fù)雜(如唾液);部分體液中懸浮細(xì)胞量很少(例如羊水),因此在提取過(guò)程中純度、產(chǎn)量和完整性三個(gè)指標(biāo)更難以同時(shí)滿足,同時(shí)該發(fā)明中去蛋白液濃度高,采用10%的SDS在低溫下(10℃)容易產(chǎn)生沉淀,需要加熱溶解,使用不方便、經(jīng)濟(jì)成本高,最重要一點(diǎn),該方法不能完成對(duì)其他體液懸浮細(xì)胞DNA提取的目的,實(shí)用性受到限制。因此開(kāi)發(fā)一種成本低、無(wú)有毒有機(jī)溶液、提取DNA濃度較高、完整性好且適用于多種體液懸浮細(xì)胞DNA提取的方法及試劑盒可很好的改善當(dāng)前體液懸浮細(xì)胞DNA的臨床檢測(cè)準(zhǔn)確性并降低檢測(cè)成本,具有重要的理論意義及實(shí)踐意義。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明的一個(gè)目的是解決至少上述問(wèn)題,并提供至少后面將說(shuō)明的優(yōu)點(diǎn)。為了實(shí)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的上述目的和其他優(yōu)點(diǎn),本發(fā)明提供一種體液懸浮細(xì)胞DNA提取試劑盒,包括:重懸液、蛋白酶K溶液、RNA酶A溶液、裂解液、沉淀劑、洗滌液A、洗滌液B和DNA溶解液;所述重懸液選自磷酸鹽緩沖液、生理鹽水、Tris-HCl緩沖溶液、添加EDTA的Tris-HCl緩沖溶液中的一種;所述裂解液包括主裂解劑與輔助裂解劑;所述主裂解劑選自2-8mol/L鹽酸胍、2-8mol/L硫氰酸胍、0.1-9.9%SDS或其組合;所述輔助裂解劑為Triton-100和/或吐溫;所述的蛋白酶K溶液的濃度為10-19mg/mL;所述沉淀劑選自3-5mol/L的氯化鉀溶液和或3-6mol/L的硫酸銨溶液;所述洗滌液A為無(wú)水乙醇或95v/v%乙醇溶液;所述洗滌液B為71-80v/v%乙醇溶液;所述的DNA溶解液選自去離子水、Tris-HCl緩沖溶液、添加EDTA的Tris-HCl緩沖溶液中的一種;所述的RNA酶A溶液的濃度為10-30mg/mL。優(yōu)選的,所述裂解液還包括:DNA酶活性抑制劑和/或粘液清除劑;所述DNA酶活性抑制劑為氟苯哌苯醚溶液;所述粘液清除劑為N-乙?;?L-半胱氨酸溶液。優(yōu)選的,所述氟苯哌苯醚溶液的濃度為0.1-5mmol/L,該氟苯哌苯醚溶液中還含有0.1-0.4%的吐溫幫助溶解,提高氟苯哌苯醚溶在水中的溶解性;所述N-乙?;?L-半胱氨酸溶液的濃度為1-10mmol/L。優(yōu)選的,所述Tris-HCl緩沖溶液的濃度為1-100mmol/L;所述添加EDTA的Tris-HCl緩沖溶液為1-100mmol/LTris-HCl溶液和1-10mmol/LEDTA溶液的混合液;所述Triton-100的濃度為2-8v/v%;所述吐溫為吐溫20或吐溫60或吐溫80。上述試劑盒提取體液懸浮細(xì)胞DNA的方法,也是本發(fā)明要求保護(hù)的的內(nèi)容,包括以下操作步驟S1:取0.1-10mL體液,2000-13000rpm離心3-20分鐘;S2:棄上清,加入1-5mL重懸液;將離心下來(lái)的沉淀重懸后2000-13000rpm離心3-20分鐘,棄上清;S3:加入100-500μL裂解液、2-20μL蛋白酶K溶液、2-20μLRNA酶A溶液,室溫裂解10-30分鐘后-20℃靜置2分鐘;S4:加入10-200μL沉淀劑,8000-15000rpm離心1-10分鐘;S5:將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中,加入200-1000μL洗滌液A,在-20或-80℃溫度下靜置5-60分鐘后8000-15000rpm離心1-10分鐘;S6:棄上清,加入200-1000μL洗滌液B,8000-15000rpm離心1-10分鐘;S7:棄上清,室溫干燥1-10分鐘;S8:加入20-100μLDNA溶解液即可。優(yōu)選的,所述裂解液還包括:DNA酶活性抑制劑和/或粘液清除劑;所述DNA酶活性抑制劑為氟苯哌苯醚溶液;所述粘液清除劑為N-乙?;?L-半胱氨酸溶液。優(yōu)選的,所述氟苯哌苯醚溶液的濃度為0.1-5mmol/L,該氟苯哌苯醚溶液中還含有0.1-0.4%的吐溫;所述N-乙?;?L-半胱氨酸溶液的濃度為1-10mmol/L。優(yōu)選的,所述Tris-HCl緩沖溶液的濃度為1-100mmol/L;所述添加EDTA的Tris-HCl緩沖溶液為1-100mmol/LTris-HCl溶液和1-10mmol/LEDTA溶液的混合液;所述Triton-100的濃度為2-8v/v%;所述吐溫為吐溫20或吐溫60或吐溫80。優(yōu)選的,所述洗滌液A和洗滌液B置于-20℃溫度以下預(yù)冷處理30分鐘后使用。氟苯哌苯醚是一種苯基呃啶衍生物,是SSRI,可選擇性地抑制5-HT轉(zhuǎn)運(yùn)體,阻斷突觸前膜對(duì)5-HT的再攝取,延長(zhǎng)和增加5-HT的作用,從而產(chǎn)生抗抑郁作用,現(xiàn)有技術(shù)被應(yīng)用作為抗抑郁類藥物,本發(fā)明添加氟苯哌苯醚能夠抑制DNA酶活性,提高提取過(guò)程中DNA純度及產(chǎn)量。N-乙?;?L-半胱氨酸為白色結(jié)晶性粉末,有類似蒜的氣味,味酸。有吸濕性,易溶于水或乙醇,不溶于乙醚、氯仿。在水溶液中呈酸性(10g/LH2O中pH2-2.75),mp101-107℃,N-乙?;?L-半胱氨酸為半胱氨酸的N-乙酰化衍生物,分子中含有巰基,能使黏蛋白肽鍵的二硫鍵(-S-S-)斷裂,從而使黏蛋白鏈變成小分子肽鏈,降低粘蛋白的黏滯性,為黏痰、膿性痰、呼吸道黏液的溶解藥,生化試劑,醫(yī)藥,該品用作祛痰藥,稱痰易凈,易咳靜。對(duì)粘稠的痰液有分解作用,其作用機(jī)理是該品分子結(jié)構(gòu)中所含的巰基能使粘痰中粘蛋白多肽鏈中的二硫鍵斷裂,使粘蛋白分解,降低了痰液的粘度,使之液化易于咳出,適用于急,慢性呼吸道疾病的痰液粘稠不易咳出者,以及大量粘痰阻塞而引起吸吸因難的危重癥狀。本發(fā)明將N-乙?;?L-半胱氨酸應(yīng)用作為粘液清除劑,在裂解過(guò)程中添加粘液清除劑,克服提取過(guò)程中由于存在粘液(例如唾液)而到導(dǎo)致的提取困難,提高提取過(guò)程中DNA純度及產(chǎn)量。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比,其有益效果是:1.本發(fā)明試劑盒適用于稀有樣本的DNA提取,例如羊水細(xì)胞,并且提取樣本種類廣闊,可以用于血液、唾液、羊水、尿液等含有懸浮細(xì)胞的可流動(dòng)的體液,本發(fā)明提取的DNA可用于熒光定量PCR、高通量測(cè)序等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。2.本發(fā)明裂解液添加量低、裂解溫度溫和、成本低,能夠有效的控制提取試劑盒的成本,同時(shí)在提取過(guò)程中DNA純度、產(chǎn)量和完整性三個(gè)指標(biāo)能夠得以同時(shí)滿足,提高應(yīng)用效果,具有廣闊的應(yīng)用前景。3.本發(fā)明添加DNA酶活性抑制劑可以提高提取過(guò)程中DNA的完整性及產(chǎn)量,該酶活性抑制劑為氟苯哌苯醚。4.本發(fā)明添加N-乙?;?L-半胱氨酸作為粘液清除劑,可以清除唾液樣本中痰液粘液,提高唾液DNA提取的產(chǎn)量和純度。附圖說(shuō)明圖1.本發(fā)明實(shí)施實(shí)例1試劑盒與凱杰DNeasyBlood&TissueKit同時(shí)提取羊水DNA瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果圖2.本發(fā)明實(shí)施實(shí)例2試劑盒和實(shí)施實(shí)例3試劑盒分別提取3例血液DNA瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果圖3.本發(fā)明實(shí)施實(shí)例4試劑盒與對(duì)比例3試劑盒同時(shí)提取2個(gè)唾液樣本DNA瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果具體實(shí)施方式實(shí)施實(shí)例1提取對(duì)象:羊水其中重懸液為磷酸鹽緩沖液;裂解液為2mol/L的硫氰酸胍、0.1%的SDS溶液、0.1%的吐溫20及5mmol/L的氟苯哌苯醚,其余為去離子水;蛋白酶K溶液濃度為10mg/mL;RNA酶A溶液濃度為10mg/mL;沉淀劑為5mol/L氯化鉀溶液,洗滌液A為無(wú)水乙醇,洗滌液B為71%乙醇,DNA溶解液為去離子水,操作步驟為:S1:取3mL羊水2000rpm離心10分鐘;S2:棄上清,加入2mL重懸液重懸后,2000rpm離心10分鐘;S3:棄上清,加入400μL裂解液,10μL蛋白酶K溶液,10μLRNA酶A溶液,室溫溫裂解15分鐘后-20℃靜置2分鐘;S4:加入100μL沉淀劑,10000rpm離心10分鐘;S5:將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中,加入500μL洗滌液A,在-20℃溫度下靜置20分鐘后10000rpm離心10分鐘;S6:棄上清,加入1000μL洗滌液B,10000rpm離心10分鐘;S7:棄上清,室溫干燥5分鐘。S8:加入50μLDNA溶解液得到DNA溶液。本實(shí)施實(shí)例中所述洗滌液A和洗滌液B置于-20℃溫度以下預(yù)冷處理30分鐘后使用。為對(duì)比本發(fā)明試劑盒的效果,采用凱杰DNeasyBlood&TissueKit與本試劑盒提取同樣來(lái)源的羊水細(xì)胞DNA,提取步驟參照凱杰DNeasyBlood&TissueKit。表1.實(shí)施實(shí)例1本發(fā)明試劑盒與凱杰DNeasyBlood&TissueKit同時(shí)提取羊水DNA濃度及A260/A280、A260/A230數(shù)據(jù)對(duì)比通過(guò)圖1和表1數(shù)據(jù)可以看出本發(fā)明試劑盒相比較凱杰DNeasyBlood&TissueKit提取羊水DNA濃度更高,純度更高,完整性更好,DNA片段長(zhǎng)度超過(guò)20kb。實(shí)施實(shí)例2提取對(duì)象:血液其中重懸液為1mmol/LEDTA與10mmol/LTris-HCl的混合液;裂解液為8mol/L鹽酸胍及8v/v%Triton-100,其余為去離子水;蛋白酶K溶液濃度為19mg/mL;RNA酶A溶液濃度為10mg/mL;沉淀劑為3mol/L氯化鉀與1mol/L的硫酸銨的混合溶液,洗滌液A為無(wú)水乙醇,洗滌液B為80%乙醇,DNA溶解液為1mmol/L的EDTA和100mmol/L的Tris-HCl的混合溶液;操作步驟為:S1:取100μL新鮮血液13000rpm離心1分鐘;S2:棄上清,加入1mL重懸液重懸后,13000rpm離心1分鐘;S3:棄上清,加入200μL裂解液,20μL蛋白酶K溶液,20μLRNA酶A溶液,室溫裂解30分鐘后-20℃靜置2分鐘;S4:加入50μL沉淀劑,13000rpm離心5分鐘;S5:將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中,加入400μL洗滌液A,在-80℃溫度下靜置20分鐘后13000rpm離心10分鐘;S6:棄上清,加入500μL洗滌液B,13000rpm離心5分鐘;S7:棄上清,室溫干燥5分鐘。S8:加入50μLDNA溶解液得到DNA溶液。本實(shí)施實(shí)例中所述洗滌液A和洗滌液B置于-20℃溫度以下預(yù)冷處理30分鐘后使用。實(shí)施實(shí)例3提取對(duì)象:血液其中重懸液為生理鹽水;裂解液為2mol/L的鹽酸胍、2mol/L的硫氰酸胍、5%的Triton-100、0.1%的吐溫80及1mmol/L氟苯哌苯醚溶液,其余為去離子水;蛋白酶K溶液濃度為10mg/mL;RNA酶A溶液濃度為20mg/mL;沉淀劑為6mol/L硫酸銨溶液,洗滌液A為95%乙醇溶液,洗滌液B為75%乙醇,DNA溶解液為10mmol/L的Tris-HCl溶液,操作方法包括以下步驟:S1:取50μL新鮮血液13000rpm離心1分鐘;S2:棄上清,加入1mL重懸液重懸后,13000rpm離心1分鐘;S3:棄上清,加入250μL裂解液,10μL蛋白酶K溶液,10μLRNA酶A溶液,室溫裂解30分鐘后-20℃靜置2分鐘;S4:加入100μL沉淀劑,13000rpm離心5分鐘;S5:將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中,加入500μL洗滌液A,在-20℃溫度下靜置50分鐘后13000rpm離心10分鐘;S6:棄上清,加入500μL洗滌液B,13000rpm離心5分鐘;S7:棄上清,室溫干燥2分鐘。S8:加入50μLDNA溶解液得到DNA溶液。本實(shí)施實(shí)例中所述洗滌液A和洗滌液B置于-20℃溫度以下預(yù)冷處理30分鐘后使用。表2.本發(fā)明實(shí)施實(shí)例2和實(shí)施實(shí)例3分別提取3例血液DNA濃度及A260/A280、A260/A230數(shù)據(jù)通過(guò)圖2和表2可以看出本發(fā)明試劑盒提取血液DNA純度好,完整性高,產(chǎn)量高,裂解液中添加氟苯哌苯醚溶液,能夠提高DNA的純度和產(chǎn)量。實(shí)施實(shí)例4提取對(duì)象:唾液其中重懸液為100mMTris-HCl;裂解液為2mol/L的鹽酸胍、2mol/L的硫氰酸胍、5%的Triton-100、0.1%的吐溫80及2mmol/L氟苯哌苯醚溶液、2mmol/L的N-乙?;?L-半胱氨酸溶液,其余為去離子水;蛋白酶K溶液濃度為10mg/mL;RNA酶A溶液濃度為30mg/mL;沉淀劑為4mol/L硫酸銨溶液,洗滌液A為95%乙醇,洗滌液B為75%乙醇,DNA溶解液為100mmol/L的Tris-HCl溶液,操作方法包括以下步驟:S1:取100μL唾液13000rpm離心1分鐘;S2:棄上清,加入1mL重懸液重懸后,13000rpm離心1分鐘;S3:重復(fù)步驟2一次;S4:棄上清,加入500μL裂解液,10μL蛋白酶K溶液,10μLRNA酶A溶液,室溫裂解10分鐘后-20℃靜置2分鐘;S5:加入200μL沉淀劑,13000rpm離心5分鐘;S6:將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中,加入1000μL洗滌液A,在-80℃溫度下靜置5分鐘后13000rpm離心10分鐘;S7:棄上清,加入1000μL洗滌液B,13000rpm離心5分鐘;S8:棄上清,室溫干燥10分鐘。S9:加入40μLDNA溶解液得到DNA溶液。本實(shí)施實(shí)例中所述洗滌液A和洗滌液B置于-20℃溫度以下預(yù)冷處理30分鐘后使用。對(duì)比例1提取對(duì)象:與實(shí)施實(shí)例1相同羊水樣本其中重懸液為磷酸鹽緩沖液;裂解液為10%的SDS溶液,其余為去離子水;蛋白酶K溶液濃度為10mg/mL;RNA酶A溶液濃度為10mg/mL;沉淀劑為5mol/L氯化鉀溶液,洗滌液A為無(wú)水乙醇,洗滌液B為71%乙醇,DNA溶解液為去離子水;其操作步驟與實(shí)施實(shí)例1相同。對(duì)比例2提取對(duì)象:與實(shí)施實(shí)例1同一羊水樣本所述試劑盒組分與實(shí)施實(shí)例1相同,其操作步驟為:S1:取3mL羊水2000rpm離心10分鐘;S2:棄上清,加入2mL重懸液重懸后,2000rpm離心10分鐘;S3:棄上清,加入400μL裂解液,10μL蛋白酶K溶液,10μLRNA酶A溶液,室溫裂解15分鐘后-20℃靜置2分鐘;S4:加入100μL沉淀劑,10000rpm離心10分鐘;S5:將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中,加入500μL洗滌液A,室溫靜置20分鐘后10000rpm離心10分鐘;S6:棄上清,加入1000μL洗滌液B,10000rpm離心10分鐘;S7:棄上清,室溫干燥5分鐘。S8:加入50μLDNA溶解液得到DNA溶液。該對(duì)比例中所述洗滌液A和洗滌液B室溫配置后直接使用。表4:對(duì)比例1及對(duì)比例2同時(shí)提取3mL羊水DNA濃度及A260/A280數(shù)據(jù)對(duì)比提取對(duì)象:羊水平均濃度(ng/μL)平均A260/A280對(duì)比例143.62.09對(duì)比例236.71.97對(duì)比例3提取對(duì)象:與實(shí)施實(shí)例4相同的唾液樣本其中裂解液為2mol/L的鹽酸胍、2mol/L的硫氰酸胍、5%的Triton-100、0.1%的吐溫80及2mmol/L氟苯哌苯醚溶液、其余為去離子水;蛋白酶K溶液濃度為10mg/mL;RNA酶A溶液濃度為30mg/mL;沉淀劑為4mol/L硫酸銨溶液,洗滌液A為95%乙醇,洗滌液B為75%乙醇,DNA溶解液為100mmol/L的Tris-HCl溶液。本對(duì)比例的方法與實(shí)施實(shí)例4所述方法相比,刪除步驟S2與步驟S3重懸操作,其余全部相同。表5.實(shí)施實(shí)例4試劑盒與對(duì)對(duì)比例3試劑盒同時(shí)對(duì)2個(gè)唾液樣本進(jìn)行提取唾液的DNA濃度及A260/A280、A260/A230數(shù)據(jù)對(duì)比通過(guò)圖3和表5可以充分看出本發(fā)明試劑盒較對(duì)比試劑盒在提取唾液細(xì)胞DNA過(guò)程中,DNA的濃度和純度有明顯優(yōu)勢(shì),添加N-乙?;?L-半胱氨酸溶液可以清除唾液樣本中痰液粘液,提高唾液DNA提取的產(chǎn)量和純度。A260/A280的比值,用于評(píng)估樣品的純度,因?yàn)榈鞍椎奈辗迨?80nm。純凈的樣品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或者2.0,表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。A230是多肽、芳香基團(tuán)、苯酚和一些碳?xì)浠衔锏奈舛?,A230表示樣品中存在一些污染物,如碳水化合物、多肽、苯酚等,較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。A280是蛋白質(zhì)的吸光度。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3