技術特征:
技術總結
本發(fā)明涉及一種Cas蛋白結合DNA的方法,尤其是能夠方便、快速、高效地針對一個或者多個靶進行基因轉錄調控的方法、以及用于所述方法的試劑盒。確定基因組上的目標靶點,找到目標靶點左右區(qū)域內Cas蛋白(所述Cas蛋白為保留RNA酶活力、缺失DNA酶活力的Cas蛋白突變體)結合所需的PAM位點,針對所述PAM位點設計向導序列,確定所述Cas蛋白的同向重復序列,并構建轉錄所述同向重復序列與向導序列相連的crRNA序列的crRNA質粒;將Cas蛋白的編碼基因與轉錄所述crRNA質粒在細胞內共表達,即可使Cas蛋白特異地結合到目標靶點。采用本發(fā)明的方法,可以抑制一個或多個靶標基因的轉錄,整個操作過程與CRISPR/dCas9相比,操作過程非常簡單,且編輯效率與dCas9相當。
技術研發(fā)人員:成秋香
受保護的技術使用者:上海吐露港生物科技有限公司
技術研發(fā)日:2017.03.15
技術公布日:2017.07.25