專利名稱：：Il-12/p40結(jié)合蛋白的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及IL-12p40結(jié)合蛋白，具體來說，涉及其在預(yù)防和/或治療急性和t曼性炎性疾病中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：人白介素-12(IL-12)是具有獨特結(jié)構(gòu)和多向作用(Kobayashi,等人(1989)JExpMed170:827-845;Seder，等人(1993)Proc.Natl.Acad.Sd.90:10188-10192,Ling,等人(1995)JExpMed154:116-127;Podlaski,等人(1992)Arch.Biochem.Biophys.294:230-237)。IL-12在與涉及免物活性和其在疾病中的作用的綜述可參見Trinchieri,G.(2003)Nat.Rev.Immun.3:133-146。在結(jié)構(gòu)上，IL-12是異二聚體蛋白(稱為"p70"蛋白)，其包括35kDa亞單位(p35)和40kDa亞單位(p40)，這兩個亞單位是通過二硫橋連接在一起的。異二聚體蛋白主要是通過抗原呈遞細(xì)胞例如單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹狀細(xì)胞產(chǎn)生的。相對于p70亞單位，這些類型細(xì)胞還分泌過量p40亞單位。p40和p35亞單位在基因上是無關(guān)的，并且沒有報道具有生物活性，雖然p40同二聚體可以起IL-12拮抗劑的作用。在功能上，IL-12在調(diào)控抗原特異性T輔助細(xì)胞1型(Thl)與2型(Th2)淋巴細(xì)胞之間的平衡中起關(guān)鍵作用。Thl和Th2細(xì)胞控制自身免疫性病癥的開始和發(fā)展，并且IL-12在Thl-淋巴細(xì)胞分化和成熟的調(diào)控中起關(guān)鍵作用。通過Thl細(xì)胞釋放的細(xì)胞因子是炎性的，并且包括rf擾素(IFN-y)、IL-2和淋巴毒素(LT)。Th2細(xì)胞分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10和IL-13以幫助體液免疫、變態(tài)反應(yīng)和免疫抑制。與自身免疫性疾病中Thl反應(yīng)占優(yōu)勢以及IFN-y的促炎活性相一致的是，IL-12可以在與很多自身免疫性疾病和炎性疾病例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、多發(fā)性硬化(MS)、牛皮癬(PS)和局限性回腸炎(CD)有關(guān)的病理學(xué)中起主要作用。已經(jīng)證實患有MS的人類患者具有IL-12表達(dá)提高，這是通過在急性MS斑中的p40mRNA水平證實的(Windhagen等人，(1995)JExp.Med.182:1985-1996)。此外，與對照T細(xì)胞相比，具有得自MS患者的CD40L表達(dá)T細(xì)胞的抗原呈遞細(xì)胞的外體內(nèi)刺激導(dǎo)致IL-12生成增加，這與CD40/CD40L相互作用是IL-12的有效誘導(dǎo)劑的觀測相一致。已經(jīng)觀測到，與健康對照相比，在RA患者的滑液中具有增高水平的IL-12p70(Morita等人(1998)Arth.andRhe籠at.41:306-314)。RA滑液中的細(xì)胞因子信使核糖核酸(mRNA)表達(dá)狀況主要鑒定出了Thl細(xì)胞因子(Bucht等人(1996)Clin.Exp.Immunol.103:347-367)。IL-12疾病的患者的腸粘膜中觀測到EMF-y和IL-12表達(dá)的增加(Fais等人(1994)JInterferonRes.14:235-238;Parronchi等人(1997)Am.J.Path.150:823-832;Monteleone等人(1997)Gastroent.112:1169-1178，andBerrebi等人(1998)Am.JPath152:667-672)。來自CD患者的固有層的T細(xì)胞的細(xì)胞因子分泌的特征在于主要是Thl反應(yīng)，板塊大大增加大IFN-y水平(Fuss,等人(1996)JImmunol.157:1261-1270)。此外，得自CD患者的結(jié)腸組織切片表明富含表達(dá)IL-12的巨嗜細(xì)胞和表達(dá)IFN畫y的T細(xì)胞(Parronchi等人，(1997)Am.J.Path.150:823-832)。IL-23也是異二聚細(xì)胞因子，并且屬于由5個這樣的異二聚細(xì)胞因子組成的家族，5個這樣的異二聚細(xì)胞因子包括IL-12和IL-27(Trmchieri等人，(2003)Immunity19:641-644)。IL-23與IL-12具有相同的p40亞單位，但是與p19亞單位經(jīng)由二硫鍵結(jié)合。p19亞單位在結(jié)構(gòu)上與IL-6、粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)以及IL-12的p35亞單位有關(guān)，IL-23是通過與JLL-12類似大細(xì)胞類型產(chǎn)生的，并且其受體是在T細(xì)胞、NK細(xì)胞以及吞噬和樹狀造血細(xì)胞上表達(dá)的。IL-23通過與由BL-23R和IL-12pl組成的異二聚受體結(jié)合而介導(dǎo)信號傳遞。IL-12受體也具有EL-12pi亞單位，IL-12受體是由IL-12pi和IL-12P2組成的。DL-23與IL-12有重疊功能(通過誘導(dǎo)IFN-y生成、Thl細(xì)胞分化以及激活樹狀細(xì)胞的抗原呈遞功能)，然而，其選擇性地誘導(dǎo)記憶T細(xì)胞的增殖(Oppmann等人(2000)Immunity13:715-725，Parham,等人(2002)J.Immunol.168:5699-5708)。IL-23在自身免疫炎癥中的作用已經(jīng)通過用p19剔除的小鼠進(jìn)行的試驗而得到了部分探明(Murphy等人JExpMed198:1951-1957;Cua等人(2003)Nature421:744-748)。研究已經(jīng)證明IL-23調(diào)節(jié)對于感染的免疫反應(yīng)(參見例如Pirhonen，等人(2002)J.Immunol.169:5673-5678;Broberg，等人(2002)J.InterferonCytokineRes.22:641-651;Elkins,等人(2002)InfectionImmunity70:1936-1948;Cooper,等人(2002)J.Immunol.168:1322-1327)。據(jù)信IL-23在免疫介導(dǎo)的炎性疾病中起作用(Langrish等人，(2004)ImmunologicalReviews202:96-105)。由于人IL-12在多種人類病癥中的作用，已經(jīng)設(shè)計了治療策略來抑制或抵抗IL-12活性。特別是，已經(jīng)尋找了與IL-12結(jié)合并中和IL-12的抗體來作為抑制IL-12活性的手段。某些較早發(fā)現(xiàn)的抗體是鼠單克隆抗體(mAb),由用IL-12免疫接種的小鼠淋巴細(xì)胞制得的雜交瘤分泌的(參見例如Strober等人，PCT公開WO97/15327;Gately等人，W09937682A2;Ne扁th等人，JExp.Med182:1281-1290(1995);Duchmarm等人，JImmunol.26:934-938(1996))。這些鼠IL-12抗體在體內(nèi)應(yīng)用方面是有限的，因為把小鼠抗體施用給人類會帶來一些問題，例如短的血清半存留期，不能夠引發(fā)一些人類效應(yīng)子功能，以及在人類中引起抗小鼠抗體的不希望的免疫反應(yīng)("人抗小鼠抗體"(HAMA)反應(yīng))?？朔谌祟愔惺褂萌罂贵w帶來的問題的一種方法是產(chǎn)生全人抗體，例如Salfeld等人，PCT公開WO00/56772Al中描述的方法?？嘶蚬こ烫幚?，使得其更"類似人"。例如，已經(jīng)制備了嵌合型抗體，其中抗體鏈的可變區(qū)是源自鼠，并且抗體鏈的恒定區(qū)是源自人(Junghans,等人(1990)CancerRes.50:1495-1502;Brown等人(1991)Proc.Natl.Acad.Sci.88:2663-2667;Kettleborough等人(1991)Prot.Engineer.4:773-783)。這樣的抗IL-12的嵌合型抗體還公開在Peritt等人PCT公開WO2002097048A2中。然而，由于這些嵌合型抗體仍然保留著鼠可變鏈序列，當(dāng)長時間施用時，他們?nèi)匀挥锌赡芤鸩幌Ｍ拿庖叻磻?yīng)，尤其是人抗嵌合抗體(HACA)反應(yīng)。本領(lǐng)域需要能夠結(jié)合IL-12的p40亞單位(IL-12p40)的改進(jìn)的抗體。這樣的抗體優(yōu)選結(jié)合IL-12和/或IL-23。這樣的抗體優(yōu)選能夠結(jié)合IL-12和/或IL-23。本發(fā)明提供了一個新家族的結(jié)合蛋白、CDR接枝抗體、人源化抗體及其片段，其能夠結(jié)合IL-12p40，以高親合力結(jié)合，以及結(jié)合并中和IL-12和/或IL-23。發(fā)明概述本發(fā)明涉及IL-12p40結(jié)合蛋白，特別是能夠結(jié)合人IL-12的p40亞單位和人IL-23的p40亞單位的抗體。此外，本發(fā)明提供了制備和使用IL-12p40結(jié)合蛋白的方法。本發(fā)明的一個方面涉及包括能夠結(jié)合IL-12的p40亞單位的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的結(jié)合蛋白。在一個實施方案中，抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包括至少一個包含選自下列的氨基酸序列的CDR:CDR-Hl.X廣X2漏X3-X4-X5-X6-X7(SEQIDNO:55)，其中X義D、K、T或S;Xs是Y、S或T;Xg是Y、V、G、W、S或F;X4是I或M;Xj是H、G、E或V;Xe是V，或者不存在；且X7是S,或者不存在；CDR-H2.X廠X2一X3-X4—Xs—Xs-Xy-Xs-Xg-Xjo-Xn-Xu-Xn-XM-Xis-Xis-Xn-XfXw-XsJSEQIDNO:56),其中X,是H、D、G、W、S、Y或R;乂2是1或F;Xg是Y、W、L、S、N、D或G;乂4是W、P、H、T或S;Xs是D、G、E、A或I;Xs是D、G、S、T或N;X是D、G、S或P;Xs是K、N、S、E、T或H;Xg是Y、T、P、I或N;X,。是Y、N、T、H、K、S或G;Xu是N或Y;X^是P、N、A、D或S;Xu是S、E、D或P;乂14是L、K、D、T或Y;乂15是K、F、V、M、R或A;X,6是S、K、Q、P,或者不存在；X,7是D、G、R,或者不存在；Xw是F，或者不存在；Xw是Q,或者不存在；且X加是D,或者不存在；CDR-H3.X,-X2-X3畫X4-X5-X6隱X7陽X8陽X9-X,o畫Xn隱X,2陽X,3(SEQIDNO:57),其中X,是R、N或W;X2是G、T、R、P或H;&是I、R、F、Y或Q;X4是R、V、Y、F或A;Xs是S、N、G、A或R;Xs是A、Y、L、F或M;X是M、A、D、L或F;X8是D、M、Y或W;Xg是Y、D或N;X^是Y、A,或者不存在;Xn是M,或者不存在；X^是D,或者不存在；且X,3是Y，或者不存在；CDR-Ll.X廣X2-X3-X4-X5-X6-X7畫X8-X9-Xio畫Xu-X!2-X!3-Xi4-X,5(SEQIDNO:58)，其中X,是K或R;乂2是A;X3是S;X4是Q或E;Xs是S或N;乂6是V或I;乂7是S、G或D;Xg是N、T或K;Xg是D、N或Y;X,o是V、G或L;X!,是A、I或H;Xu是S,或者不存在；Xn是F,或者不存在；Xm是M,或者不存在；且Xu是N,或者不存在；CDR陽L2.X廣X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8(SEQIDNO:59),其中Xi是Y或S;X2是A或T;Xg是S或A;乂4是化H、S或Q;Xs是R、N或S;Xe是Y、Q或I;乂7是7\S或G;且X8是S,或者不存在；和CDR-L3.X廣X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9(SEQIDNO:60),其中X！是Q;Xg是D、Y或S;乂4是Y、N、K或I;Xs是N、T、S或E;X6是S、Y、V或W;X是P;Xs是W、F、Y、L或P;且Xg是T或S。優(yōu)選地，抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包括至少一個包含選自下列的氨基酸序列的CDR:SEQIDNO.:35的殘基31-37;SEQIDNO.:35的殘基52-67;SEQIDNO.:35的殘基100-108;SEQIDNO.:36的殘基24-34;SEQIDNO.:36的殘基50-56;SEQIDNO.:36的殘基89-97;SEQIDNO.:37的殘基31-37;SEQIDNO.:37的殘基52-67;SEQIDNO.:37的殘基100-109;SEQIDNO.:38的殘基24-34;SEQIDNO.:38的殘基50-56;SEQIDNO.:38的殘基89-97;SEQIDNO.:39的殘基31-35;SEQIDNO.:39的殘基50-66;SEQIDNO.:39的殘基99-106;SEQIDNO.:40的殘基24隱34;SEQIDNO.:40的殘基50-56;SEQIDNO.:40的殘基89-97;SEQIDNO.:41的殘基31-35;SEQIDNO.:41的殘基50-66;SEQIDNO.:41的殘基99-106;SEQIDNO.:42的殘基24-34;SEQIDNO.:42的殘基50-56;SEQIDNO.:42的殘基89-97;SEQIDJNU.:43的殘基31-35;SEQIDNO.:43的殘基50-66;SEQIDNO.:43的殘基99-106;SEQIDNO.:44的殘基24-34;SEQIDNO.:44的殘基50-56;SEQIDNO.:44的殘基89-97;SEQIDNO.:45的殘基31-35;SEQIDNO.:45的殘基50-66;SEQIDNO.:45的殘基99-101;SEQIDNO.:46的殘基24-34;SEQIDNO.:46的殘基50-56;SEQIDNO.:46的殘基89-97;SEQIDNO.:47的殘基31-35;SEQIDNO.:47的殘基50-66;SEQIDNO.:47的殘基99-106;SEQIDNO.:48的殘基24-34;SEQIDNO.:48的殘基50-56;SEQIDNO.:48的殘基89-97;SEQIDNO.:49的殘基31漏35;SEQIDNO.:49的殘基50-66;SEQIDNO.:49的殘基99-111;SEQIDNO.:50的殘基24-38;SEQIDNO.:50的殘基53-60;SEQIDNO.:50的殘基93-101;SEQIDNO.:51的殘基31-37;SEQIDNO.:51的殘基52-67;SEQIDNO.:51的殘基100-109;SEQIDNO.:52的殘基24-34;SEQIDNO.:52的殘基50-56;SEQIDNO.:52的殘基89-97;SEQIDNO.:53的殘基31-35;SEQIDNO.:53的殘基47-66;SEQIDNO.:53的殘基99-107;SEQIDNO.:54的殘基24-34;SEQIDNO.:54的殘基50-56;和SEQIDNO.:54的殘基89-97。在優(yōu)選的實施方案中，結(jié)合蛋白包括至少3個選自上述序列的CDR。更優(yōu)選地，所選擇的3個CDR來自選自下列的可變區(qū)CDR組<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>在一個實施方案中，本發(fā)明的結(jié)合蛋白包含至少兩個可變區(qū)CDR組。更優(yōu)選地，所述兩個可變區(qū)CDR組選自VH1D4CDR組&VL1D4CDR組；VH1A6CDR組&VL1A6CDR組；VH1D8CDR組&VL1D8CDR組；VH3G7CDR組&VL3G7CDR組；VH5E8CDR組&VL5E8CDR組；VH8E1CDR組&VL8E1CDR組；VH1H6CDR組&VL1H6CDR組；VH3A11CDR組(feVL3A11CDR組；VH4B4CDR組&VL4B4CDR組；和VH7G3CDR組&VL7G3CDR組。在另一個實施方案中，上面公開的結(jié)合蛋白還包括人接受者框架。人接受者框架優(yōu)選包含選自下列的氨基酸序列SEQIDNO.:6SEQIDNO.:7;SEQIDNO.:8;SEQIDNO.:9;SEQIDNO.:11;SEQIDNO.:12;SEQIDNO.:14182226303495SEQIDNO.SEQIDNO.SEQIDNO.SEQIDNO.SEQIDNO.SEQIDNO.SEQIDNOSEQIDNO.:1013;SEQIDNO.SEQIDNO.SEQIDNO.SEQIDNO.SEQIDNO.SEQIDNO.172125293394,SEQIDN〇.15;SEQIDNO.:16;SEQIDNO19;SEQIDNO.:20;SEQIDN〇23;SEQIDNO.:24;SEQIDNO27;SEQIDNO.:28;SEQIDNO31;SEQIDNO.:32;SEQIDNO92,SEQIDNO.:93，SEQIDNO96，ANDSEQIDNO.:97。在優(yōu)選的實施方案中，結(jié)合蛋白是能夠結(jié)合IL-12或IL-23的p40亞單位的CDR接枝的抗體或其抗原結(jié)合部分。所述CDR接枝的抗體或其抗原結(jié)合部分優(yōu)選包含一個或多個上面公開的CDR。所述CDR接枝的抗體或其抗原結(jié)合部分更優(yōu)選包含至少一個具有選自下列的氨基酸序列的可變區(qū)SEQIDNO.:61;SEQIDNO.:62;SEQIDNO.63;SEQIDNO.:6467;SEQIDNO.:6871;SEQIDNO.:7275;SEQIDNO.:76SEQIDNO.:65;SEQIDNO.:66;SEQIDNO.SEQIDNO.:69;SEQIDNO.:70;SEQIDNO.SEQIDNO.:73;SEQIDNO.:74;SEQIDNO.SEQIDNO.:77;和SEQTDNO.:78。所述CDR接枝的抗體或其抗原結(jié)合部分最優(yōu)選包含兩個選自上面公開的序列的可變區(qū)。所述CDR接枝的抗體或其抗原結(jié)合部分優(yōu)選包含人接受者框架。所述人接受者框架更優(yōu)選是任一個上面公開的人接受者框恕不。在優(yōu)選的實施方案中，結(jié)合蛋白是能夠結(jié)合IL-12或IL-23的p40亞單位的人源化抗體或其抗原結(jié)合部分。所述人源化抗體或其抗原結(jié)合部分優(yōu)選包含摻入到人接受者框架的人抗體可變區(qū)內(nèi)的一個或多個上面公開的CDR。人抗體可變區(qū)優(yōu)選是共有人可變區(qū)。人接受者框架更優(yōu)選包含至少一個在關(guān)鍵殘基上的框架區(qū)氨基酸取代，其中所述關(guān)鍵殘基選自與CDR相鄰的殘基；糖基化位點殘基；稀有殘基(rareresidue);能夠與人IL-12的p40亞單位相互作用的殘基；能夠與CDR相互作用的殘基；正規(guī)殘基(canonicalresidue);重鏈可變區(qū)與輕鏈可變區(qū)之間的接觸殘基；Vernier區(qū)內(nèi)的殘基；以及在Chothia-定義的可變重鏈CDR1與Kabat-定義的第一重鏈框架之間重疊的區(qū)域內(nèi)的殘基。優(yōu)選地，所述關(guān)鍵殘基選自3H、5H、10H、11H、12H、13H、15H、16H、18H、19H、23H、24H、25H、30H、41H、44H、46H、49H、66H、68H、71H、73H、74H、75H、76H、77H、78H、79H、81H、82H、82AH、82BH、82CH、83H、84H、85H、86H、87H、89H、93H、98H、108H、109H、1L、2L、3L、7L、8L、9L、亂、l比、12L、13L、15L、17L、19L、20L、21L、22L、36L、41L、42L、43L、45L、46L、58L、60L、62L、63L、67L、70L、73L、74L、77L、78L、79L、80L、83L、85L、87L、104L和106L。優(yōu)選地，人接受者框架包含至少一個框架區(qū)氨基酸取代，其中該框架的氨基酸序列與所述人接受者框架的序列是至少65%相同，并且包含至少70個與所述人接受者框架相同的氨基酸殘基。在優(yōu)選的實施方案中，結(jié)合蛋白是能夠結(jié)合IL-12或IL-23的p40亞單位的人源化抗體或其抗原結(jié)合部分。所述人源化抗體或抗原結(jié)合部分優(yōu)選包含一個或多個上面公開的CDR。所述人源化抗體或其抗原結(jié)合部分更優(yōu)選包含3個或更多個上面公開的CDR。所述人源化抗體或其抗原結(jié)合部分最優(yōu)選包含6個上面公開的CDR。在本發(fā)明的另一個實施方案中，所述人源化抗體或抗原結(jié)合部分包含至少一個具有選自下列的氨基酸序列的可變區(qū)SEQIDNO.:79、SEQIDNO.:80、SEQIDNO.:81、SEQIDNO.:82、SEQIDNO.:83、SEQIDNO.:84、SEQIDNO.:85、SEQIDNO.:86、SEQIDNO.:87、SEQIDNO.:88、SEQIDNO.:89、SEQIDNO.:卯、SEQIDNO.:91、SEQIDNO.:98、SEQIDNO.:99、SEQIDNO.:100、SEQIDNO.:101、SEQIDNO.:102、SEQIDNO.:103、SEQIDNO.:104、SEQIDNO.:105、SEQIDNO.:106、SEQIDNO.:107、SEQIDNO.:108和SEQIDNO.:109。更優(yōu)選地，所述人源化抗體或其抗原結(jié)合部分包含兩個選自上面7>開的序列的可變區(qū)。最優(yōu)選地，所述人源化抗體或其抗原結(jié)合部分包含兩個可變區(qū)，其中所述兩個可變區(qū)具有選自下列的氨基酸序列SEQIDNO.:67&SEQIDNO.:79、SEQIDNO.:80&SEQIDNO.:81、SEQIDNO.:82&SEQIDNO.:83、SEQIDNO.:84&SEQIDNO.:85、SEQIDNO.:86&SEQIDNO.:87、SEQIDNO.:88&SEQIDNO.:89、SEQIDNO.:90&SEQIDNO.:91、SEQIDNO.:98&SEQIDNO.:99、SEQIDNO.:100&SEQIDNO.:101、SEQIDNO.:102&SEQIDNO.:103、SEQIDNO.:104&SEQIDNO.:105、SEQIDNO.:106&SEQIDNO.:107和SEQIDNO.:108&SEQIDNO.:109。在優(yōu)選的實施方案中，上面公開的結(jié)合蛋白包含選自下列的重鏈免疫球蛋白恒定區(qū)人IgM恒定區(qū)、人IgGl恒定區(qū)、人lgG2恒定區(qū)、人lgG3恒定區(qū)、人lgG4恒定區(qū)、人IgE恒定區(qū)和人IgA恒定區(qū)。更優(yōu)選地，結(jié)合蛋白包含SEQIDNO.:2;SEQDDNO.:3;SEQIDNO.:4;和SEQIDNO.:5。本發(fā)明的結(jié)合蛋白能夠結(jié)合選自IL-12和IL-23的靶。本發(fā)明結(jié)合蛋白優(yōu)選能夠調(diào)節(jié)選自IL-12和IL-23的靶的生物功能。本發(fā)明結(jié)合蛋白更優(yōu)選能夠中和選自IL-12和IL-23的靶。在一個實施方案中，本發(fā)明結(jié)合蛋白對于IL-12或IL-23的結(jié)合速率常數(shù)(Kon)為至少約lO'M-V1;至少約1()3M"s";至少約104M"s-';至少約105M-'s-、或至少約106M-、"，這是通過表面等離子共振測定的。優(yōu)選地，本發(fā)明結(jié)合蛋白對于IL-12或IL-23的結(jié)合速率常數(shù)(Kon)為102M"s.1-103M.V1;103M"s.1—104M.V1;104M"s"—105M-、"；或lC^M-V1-10SM"s-1，這是通過表面等離子共振測定的。在另一個實施方案中，本發(fā)明結(jié)合蛋白對于IL-12或IL-23的解離速率常數(shù)(Koff)為至多約10-3s";至多約10"s";至多約10-Ss";或至多約10-6s"，這是通過表面等離子共振測定的。優(yōu)選地，本發(fā)明結(jié)合蛋白對于IL-12或IL-23的解離速率常數(shù)(Koff)為10'3s"-10-4s-1;或10-4s—1-10-5s—1;或10—5s-1-10—6s—1，這是通過表面等離子共振測定的。在另一個實施方案中，本發(fā)明結(jié)合蛋白對于IL-12或IL-23的離解常數(shù)(KD)為至多約10-7M;至多約10-SM;至多約10^M;至多約10-IQM;至多約10"'M;至多約10"M;或至多約10"3M。優(yōu)選地，本發(fā)明結(jié)合蛋白對于IL-12或IL-23的離解常數(shù)(KD)為10-7M-10-8M;10-8M-10—9M;10—9M-10—10M;10—10M-10—11M;10—11M-10.12M;或10-12M-l(T13M。本發(fā)明的一個實施方案提供了抗體構(gòu)建物，其包含任一種上面公開的結(jié)合蛋白和接頭多肽或免疫球蛋白。在優(yōu)選的實施方案中，抗體構(gòu)建物選自免疫球蛋白分子、單克隆抗體、嵌合型抗體、CDR-接枝抗體、人源化抗體、Fab、Fab，、F(ab')2、Fv、二硫鍵連"t妻的Fv、scFv、單結(jié)構(gòu)域抗體、多特異性抗體、雙重特異性抗體和雙特異性抗體。在優(yōu)選的實施方案中，抗體構(gòu)建物包含選自下列的重鏈免疫球蛋白恒定區(qū)人IgM恒定區(qū)、人IgGl恒定區(qū)、人lgG2恒定區(qū)、人lgG3恒定區(qū)、人lgG4恒定區(qū)、人IgE恒定區(qū)和人IgA恒定區(qū)。更優(yōu)選地，抗體構(gòu)建物包含SEQIDNO.:2;SEQIDNO.:3;SEQIDNO.:4;和SEQIDNO.:5。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了抗體綴合物，其包含上面公開的抗體構(gòu)建物和選自下列的物質(zhì)免疫粘著分子、造影劑、治療劑和細(xì)胞毒性劑。在優(yōu)選的實施方案中，造影劑選自》丈射性標(biāo)記物、酶、熒光標(biāo)記物、發(fā)光標(biāo)記物、生物發(fā)光標(biāo)記物、磁性標(biāo)記物和生物素。更優(yōu)選地，造影劑是選自下列的放射性標(biāo)記物3H、14C、35S、90Y、"Tc、川In、125I、131I、177Lu、166Ho和153Sm。在優(yōu)選的實施方案中，治療劑或細(xì)胞毒性劑選自抗-代謝物；烷化劑；抗生素；生長因子；細(xì)胞因子；抗-血管生成劑；抗-有絲分裂劑；蒽環(huán)霉素；毒素；和編程性細(xì)胞死亡劑。在另一個實施方案中，抗體構(gòu)建物是糖基化的。糖基化優(yōu)選是人糖基化模式。在另一個實施方案中，上面公開的結(jié)合蛋白、抗體構(gòu)建物或抗體綴合物作為晶體存在。優(yōu)選地，所述晶體是沒有載體的藥學(xué)控制釋放晶體。在一個優(yōu)選的實施方案中，晶體形式的結(jié)合蛋白、晶體形式的內(nèi)半存留期:在另一;實施方案中，晶體形式;結(jié)合蛋白、晶體形式的抗體構(gòu)建物或晶體形式的抗體綴合物在結(jié)晶之后保留其生物活性。本發(fā)明的一個方面涉及編碼任一種上面7>開的結(jié)合蛋白、抗體構(gòu)建物或抗體綴合物的分離的核酸。另一個實施方案提供了包含上面公開的分離的核酸的載體，其中所述載體選自pcDNA;pTT(Durocher等人，NucleicAcidsResearch2002,Vol30,No.2);pTT3(具有另外的多克隆位點的pTT);pEFBOS(Mizushima，S.和Nagata,S.,(1990)NucleicacidsResearchVol18,No.17);pBV;pJV;和pBJ。在另一個方面，用上面公開的載體轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞。優(yōu)選地，宿主細(xì)胞是原核細(xì)胞。更優(yōu)選地，宿主細(xì)胞是大腸桿菌。在相關(guān)實施方案中，宿主細(xì)胞是真核細(xì)胞。優(yōu)選地，所述真核細(xì)力包選自原生生物細(xì)胞、動物細(xì)胞、植物細(xì)胞和真菌細(xì)胞。更優(yōu)選地，宿主細(xì)胞是哺乳動物細(xì)胞，包括但不限于CHO和COS;或者真菌細(xì)胞，例如啤酒糖酵母(Saccharomycescerevisiae);或昆蟲纟田月包,例》口Sf9。本發(fā)明的另一方面提供結(jié)合IL-12的p40亞單位的結(jié)合蛋白的制備方法，所述方法包括在足以產(chǎn)生結(jié)合IL-12的p40亞單位的結(jié)合蛋白的條件下在培養(yǎng)基中培養(yǎng)上面公開的宿主細(xì)胞中的任何一種。另一個實施方案提供根據(jù)上面公開的方法制備的結(jié)合蛋白。一個實施方案提供了用于釋放結(jié)合蛋白的組合物，其中所述組合物包括制劑，所述制劑包含上面公開的晶體形式的結(jié)合蛋白、晶體形式的抗體構(gòu)建物或晶體形式的抗體綴合物和組分，和至少一種聚合載體。優(yōu)選地，所述聚合載體是選自一種或多種下列聚合物的聚合物聚(丙烯酸)、聚(氰基丙烯酸酯)、聚(氨基酸)、聚(酸酐)、聚(縮肽)、聚(酯)、聚(乳酸)、聚(乳酸-共-羥基乙酸)或PLGA、聚((3-羥基丁酸)、聚(己內(nèi)酯)、聚(二氧雜環(huán)己酮)；聚(乙二醇)、聚((羥丙基)曱基丙烯酰胺)、聚[(有機)磷嗪]、聚(原酸酯)、聚(乙烯醇)、聚(乙烯吡咯烷酮)、馬來酸酐-烷基乙烯基醚共聚物、多聚醇(pluromcpolyols)、白蛋白、藻酸鹽、纖維素和纖維素衍生物、膠原、纖維蛋白、明膠、透明質(zhì)酸、低聚糖、糖氨基聚糖(glycaminoglycan)、硫酸多糖、他們的混合物和共聚物。優(yōu)選地，所述組分選自白蛋白、蔗糖、海藻糖、乳糖醇、明膠、羥丙基-p-環(huán)糊精、甲氧基聚乙二醇和聚乙二醇。另一個實施方案提供了治療哺乳動物的方法，所述方法包括給哺乳動物施用有效量的上面7>開的組合物。本發(fā)明還提供了藥物組合物，所述組合物包含上面公開的結(jié)合蛋白、抗體構(gòu)建物或抗體綴合物與可藥用載體。在另一個實施方案中，所述藥物組合物包含至少一種用于治療其中IL-12和/或IL-23活性是有害的病癥的另外的治療劑。優(yōu)選地，另外的物質(zhì)選自治療劑、造影劑、細(xì)胞毒性劑、血管生成抑制劑(包括但不限于抗-VEGF抗體或VEGF-誘捕劑);激酶抑制劑(包括但不限于KDR和TIE-2抑制劑);共同-刺激分子阻斷劑(包括但不限于抗-B7.1、抗-B7.2、CTLA4-Ig、抗-CD20);粘著分子阻斷劑(包括但不限于抗-LFA-lAbs、抗-E/L選擇蛋白Abs、小分子抑制劑)；抗-細(xì)胞因子抗體或者其功能片段(包括但不限于抗-IL-18、抗-TNF、抗-IL-6/細(xì)胞因子受體抗體)；甲氨喋呤；環(huán)孢菌素；雷帕霉素；FK506;可檢測的標(biāo)記物或報道基因；TNF拮抗劑；抗風(fēng)濕藥物；肌肉松弛劑、麻醉劑、非甾類抗炎藥物(NSAID)、鎮(zhèn)痛劑、麻醉藥、鎮(zhèn)靜劑、局麻劑、神經(jīng)肌肉阻斷劑、抗微生物劑、皮質(zhì)類固醇藥物、組成代謝甾類藥物、紅細(xì)胞生成素、致免疫劑、免疫球蛋白、免疫抑制劑、生長激素、激素替代藥物、放射性藥物、抗抑郁劑、抗精神病劑、興奮劑、哮喘藥物、P-激動劑、吸入的甾類藥物、腎上腺素或類似物、細(xì)胞因子和細(xì)胞因子拮抗劑。在另一個方面，本發(fā)明提供了用于抑制人IL-12和/或人IL-23活性的方法，所述方法包括將人IL-12和/或人IL-23與上面公開的結(jié)合蛋白接觸，從而抑制人IL-12和/或人IL-23活性。在有關(guān)方面，本發(fā)明提供了在人個體中抑制人IL-12和/或人IL-23活性的方法，所述人個體患有其中IL-12和/或IL-23活性是有害的病癥，所述方法包括給人個體施用上面公開的結(jié)合蛋白，這樣人個體中的人IL-12和/或人IL-23活性一皮抑制，從而實現(xiàn)治療。優(yōu)選地，所述病癥選自關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、幼年慢性關(guān)節(jié)炎、膿毒性關(guān)節(jié)炎、萊姆關(guān)節(jié)炎、牛皮擗性關(guān)節(jié)炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、脊推關(guān)節(jié)病、全身紅斑狼瘡、局限性回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、炎性腸病、胰島素依賴性糖尿病、曱狀腺炎、哮喘、變態(tài)反應(yīng)疾病、牛皮癬、皮炎硬皮病、移植物抗宿主病、器官移植排異、與器官移植相關(guān)的急性或慢性免疫疾病、肉狀瘤病、動脈粥樣硬化、傳播性血管內(nèi)凝血、Kawasaki's病、Grave's病、腎病綜合征、慢性疲勞綜合征、Wegener's肉芽月中病、Henoch-Schoenlein紫癥、腎微小性血管炎、慢性活性肝炎、眼色素層炎、膿毒性休克、中毒休克綜合征、膿毒癥綜合征、惡病質(zhì)、傳染病、由寄生蟲引起的疾病、獲得性免疫缺陷綜合征、急性橫向骨髓炎、亨廷頓舞蹈病、帕金森病、早老性癡呆、中風(fēng)、原發(fā)膽汁性肝硬化、溶血性貧血、惡性胂瘤、心力衰竭、心肌梗塞、Addison's病、散發(fā)性I型多腺缺乏和II型多腺缺乏、Schmidt's綜合征、成人(急性)呼吸窘迫綜合征、脫發(fā)、斑形脫發(fā)、血清反應(yīng)陰性關(guān)節(jié)病、關(guān)節(jié)病、Reiter's病、牛皮癬性關(guān)節(jié)病、潰瘍性結(jié)腸關(guān)節(jié)病、腸病性滑膜炎、衣原體、鼠疫和沙門氏菌相關(guān)關(guān)節(jié)病、脊推關(guān)節(jié)病、動脈粥樣化疾病/動脈硬化、特應(yīng)性變態(tài)反應(yīng)、自身免疫大皰病、尋常性天皰瘡、落葉性天皰瘡、類天皰瘡、線性IgA病、自身免疫性溶血性貧血、Coombs陽性溶血性貧血、獲得性性惡性貧血、少年惡性貧血、肌痛性大腦炎/RoyalFree病、慢性粘膜皮膚念珠菌病、巨細(xì)胞關(guān)節(jié)炎、原發(fā)性硬化性肝炎、起因不明自身免疫性肝炎、荻得性免疫缺陷病綜合征、獲得性免疫缺陷相關(guān)疾病、乙肝、丙肝、普通各式各樣的免疫缺陷(普通各式各樣的血丙種球蛋白減少癥)、膨脹心肌病、女性不孕癥、卯巢衰竭、早產(chǎn)卯巢衰竭、纖維變性肺病、起因不明的纖維組織形成牙槽炎、炎后間質(zhì)性肺病、間質(zhì)性肺炎、與間質(zhì)性肺病相關(guān)的結(jié)締組織疾病、與肺病相關(guān)的混合結(jié)締組織疾病、與間質(zhì)性肺病相關(guān)的全身硬化、與間質(zhì)性肺病相關(guān)的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、與肺病相關(guān)的全身紅斑狼瘡、與肺病相關(guān)的皮膚肌炎/多肌炎、與肺病相關(guān)的Sjogren's病、與肺病相關(guān)的僵硬脊推炎、結(jié)節(jié)性血管炎彌散肺病、與肺病相關(guān)的含鐵血黃素沉著病、藥物引起的間質(zhì)性肺病、纖維化、輻射纖維化、閉塞性毛細(xì)支氣管炎、慢性嗜酸性肺炎、淋巴細(xì)胞浸潤性肺病、傳染病后間質(zhì)性肺病、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、自身免疫性肝炎、1-型自身免疫性肝炎(典型自身免疫性或狼瘡樣肝炎)、2-型自身免疫性肝炎(抗-LKM抗體肝炎)、自身免疫介導(dǎo)的低血糖、具有黑色棘皮癥的B型胰島素抗性、甲狀旁腺機能減退、與器官移植相關(guān)的急性免疫疾病、與器官移植相關(guān)的慢性免疫疾病、骨關(guān)節(jié)炎、原發(fā)性硬化性膽管炎、1型牛皮癬、2型牛皮癬、特發(fā)性白細(xì)胞減少、自身免疫中性白細(xì)胞減少、腎病NOS、腎小球腎炎、腎微小性血管炎、萊姆病、盤形紅斑狼瘡、特發(fā)性男性不孕癥或NOS、精液自身免疫性、多發(fā)性硬化(所有亞型)、交感神經(jīng)眼炎、結(jié)締組織疾病繼發(fā)性高血壓、Goodpasture's綜合征、結(jié)節(jié)性多動脈炎的肺表現(xiàn)、急性風(fēng)濕性發(fā)燒、類風(fēng)濕性脊推炎、Still's病、全身硬化、Sjogren's綜合征、Takayasu's病/動脈炎、自身免疫性血小板減少、特發(fā)性血小板減少、自身免疫性曱狀腺病、甲狀腺機能亢進(jìn)、曱狀腺腫性自身免疫性甲狀腺機能減退(Hashimoto's病)、萎縮性自身免疫性曱狀腺機能減退、原發(fā)性粘液水胂、晶狀體原性眼色素層炎、原發(fā)性血管炎、白癜風(fēng)、急性肝病、慢性肝病、酒精性肝硬化、酒精引起的肝損傷、choleosatatis、特應(yīng)性肝病、藥物引起的肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、變態(tài)反應(yīng)和哮喘、B族鏈球菌(GBS)感染、精神病(例如抑郁癥和精神分裂癥)、Th2型和Thl型介導(dǎo)的疾病，急性和慢性疼痛(不同形式的疼痛)和癌癥，例如肺癌、乳腺癌、胃癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、卵巢癌、前列腺癌和直腸癌，以及造血惡性肺瘤(白血病和淋巴瘤)，無P脂蛋白血癥、手足發(fā)紺、急性和慢性寄生或感染過程、急性白血病、急性成淋巴細(xì)胞性白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、急性或慢性細(xì)菌感染、急性胰腺炎、急性腎衰竭、腺癌、空異位搏動、AIDS癡呆綜合征、酒精誘導(dǎo)的肝炎、過敏性結(jié)膜炎、過敏性接觸性皮炎、過敏性鼻炎、同種移植物排斥、a-l-抗胰蛋白酶缺乏、肌萎縮性側(cè)索硬化、貧血、心絞痛、前角質(zhì)細(xì)胞變性、抗cd3治療、抗磷脂綜合征、抗-受體過敏反應(yīng)、主動月永和周圍動脈瘤、主動脈切開、動脈高血壓、動力永石更化、動靜"永瘺、共濟(jì)失調(diào)、心房纖維性顫動(持續(xù)或陣發(fā)性的)、心房樸動、房室阻滯、B細(xì)胞淋巴瘤、骨移植排斥、骨髓移植(BMT)排斥、束支傳導(dǎo)阻滯、Burkitt's淋巴瘤、燒傷、心臟心律不齊、心臟震顫綜合征、心臟腫瘤、心肌病、心肺旁路炎癥反應(yīng)、軟骨移植排斥、腦皮層變性、混亂或多灶性心房性心博過速、與化療有關(guān)的病癥、慢性髓細(xì)胞性白血病(CML)、慢性酒精中毒、慢性炎性病變、慢性淋巴細(xì)胞性白血病(CLL)、慢性阻塞性肺病(COPD)、慢性水楊酸中毒、結(jié)腸直腸癌、充血性心力衰竭、結(jié)膜炎、接觸性皮炎、肺原性心臟病、冠狀動脈疾病、Creutzfeldt-Jakob病、培養(yǎng)陰性膿毒癥、嚢性纖維化、與細(xì)胞因子治療有關(guān)的病癥、拳擊手癡呆、脫髓鞘性疾病、登革熱、出血熱、皮炎、皮月夫病癥、糖尿病、糖尿病癥、糖尿病性動脈粥樣疾病、彌散性雷維小體病、擴(kuò)張性充血性心肌病、基底神經(jīng)節(jié)病癥、中年Down's綜合征、阻斷CNS多巴胺的藥物誘導(dǎo)的運動障礙、藥物敏感性、濕疹、腦脊髓炎、心內(nèi)膜炎、內(nèi)分泌病、會厭炎、愛-巴病毒感染、紅斑性肢痛癥、錐體束外和腦病癥、家族性噬紅細(xì)胞細(xì)胞淋巴組織細(xì)胞增多癥、胎兒胸腺移植排斥、Friedreich's共濟(jì)失調(diào)、功能性周圍動脈病癥、真菌膿毒癥、氣性壞疽、胃潰瘍、腎小球性腎炎、任何器官或組織的移植物排斥、革蘭氏陰性膿毒癥、革蘭氏陽性膿毒癥、由于細(xì)胞內(nèi)生物體導(dǎo)致的肉芽腫、毛細(xì)胞白血病、Hallerrorden-Spatz疾病、橋本氏曱狀腺炎、枯草熱、心臟移植排斥、血色素沉著癥、血液透析、溶血尿毒癥綜合征/溶血栓血小板生成紫癜、出血、肝炎(A)、希斯束心律失常、EQV感染/HIV神經(jīng)病、Hodgkin's病、運動機能亢進(jìn)病癥、過敏反應(yīng)、過敏性肺炎、高血壓、運動機能減退病癥、海馬-垂體-腎上腺軸評估、特發(fā)性Addison's病、特發(fā)性肺纖維化、抗體介導(dǎo)的細(xì)胞毒性、衰弱、嬰兒脊髓肌肉萎縮、主動脈炎癥、流感、離子輻射暴露、虹膜睫狀體炎/眼色素層炎/視神經(jīng)炎、缺血-再灌注損傷、缺血性中風(fēng)、幼年類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、幼年脊髓肌肉萎縮、Kaposi's肉瘤、腎移植排斥、軍團(tuán)菌病、利什曼病、麻風(fēng)病、皮質(zhì)脊髓系統(tǒng)損傷、脂肪水腫、肝臟移植排斥、淋巴水腫、癥疾、惡性淋巴瘤、惡性組織細(xì)胞增多癥、惡性黑素瘤、軟膜蛛網(wǎng)膜炎、腦膜炎球菌血癥、代謝性/特發(fā)性、偏頭痛、線粒體多系統(tǒng)病癥、混合型結(jié)締組織疾病、單克隆y-球蛋白病、多骨髓瘤、多系統(tǒng)變性(MencelDejerine-ThomasShi-Drager和Machado-Joseph)、重癥肌無力、細(xì)胞內(nèi)鳥分枝桿菌、結(jié)核分枝桿菌、脊髓發(fā)育不良綜合征、心急梗塞、心肌缺血性病癥、鼻咽癌、新生兒慢性肺病、腎炎、腎變病、神經(jīng)變性疾病、神經(jīng)原性I型肌肉萎縮、粒細(xì)胞缺乏性發(fā)熱、非何杰氏淋巴瘤、腹部主動脈及其分枝閉塞、閉塞性動脈病癥、okt3治療、睪丸炎/附睪炎、睪丸炎/輸精管切除述逆向操作、器官巨大癥、骨質(zhì)疏松、胰腺移植排斥、胰腺癌、腎瘤形成綜合征/惡性高鈣血癥、甲狀旁腺移植排斥、骨盆炎癥疾病、常年性鼻炎、心包病、周圍動脈粥樣硬化疾病、周圍血管病癥、腹膜炎、惡性貧血、卡氏肺嚢蟲肺炎、肺炎、POEMS綜合征(多精神病、器官巨大癥、內(nèi)分泌病、單克隆Y-球蛋白病和皮膚改變綜合征)、灌注后綜合征、泵后綜合征、MI心臟切開術(shù)后綜合征、子癇前期、進(jìn)行性核上性麻痹、原發(fā)性月申動脈高血壓、放療、Raynaud's現(xiàn)象和疾病、Raynoud's病、Refsum's病、規(guī)律性窄QRS心搏過速、腎血管高血壓、再灌注損傷、限制性心肌病、肉瘤、石更皮病、老年舞蹈病、雷維小體型老年癡呆、血清反應(yīng)陰性關(guān)節(jié)病、休克、鐮狀細(xì)胞性貧血、皮膚同種移植物排斥、皮膚改變綜合征、小腸移植排斥、實體瘤、特異性心律失常、脊髓性共濟(jì)失調(diào)、脊髓小腦變性、鏈球菌肌炎、小腦結(jié)構(gòu)損傷、亞急性硬化性全腦炎、昏厥、心血管系統(tǒng)梅毒、全身性過敏反應(yīng)、全身性炎性反應(yīng)綜合征、全身性發(fā)作型幼年類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、T-細(xì)胞或FABALL、毛細(xì)管擴(kuò)張、閉塞性血^全血管炎、血小板減少癥、中毒、移植、創(chuàng)傷/出血、III型過敏反應(yīng)、IV型過敏反應(yīng)、不穩(wěn)定心絞痛、尿毒癥、尿膿毒癥、蕁麻滲、瓣性心臟病、靜脈曲張、血管炎、靜脈疾病、靜脈血栓形成、心室纖維性顫動、病毒和真菌感染、病毒性腦炎/無菌性腦膜炎、與病毒有關(guān)的噬血細(xì)胞綜合征、Wernicke-Korsakoff綜合征、Wilson's病、任何器官或組織的異種移植排斥。在另一個方面，本發(fā)明提供了治療患者中其中人IL-12和/或人IL-23是有害的病癥的方法，所述方法包括在施用上述第二種治療劑之前、同時或之后施用上面公開的任一種結(jié)合蛋白的步驟。在優(yōu)選的實施方案中，所述第二種治療劑選自布地奈德、表皮生長因子、皮質(zhì)甾類藥物、環(huán)孢菌素、柳氮磺胺吡啶、氨基水楊酸鹽、6-巰基嘌呤、石克唑。票呤、甲硝噠唑、脂氧合酶抑制劑、美沙拉口秦、奧沙拉。秦、巴柳氮、抗氧化劑、血栓烷抑制劑、IL-1受體拮抗劑、抗-IL-ip單克隆抗體、抗-IL-6單克隆抗體、生長因子、彈性蛋白酶抑制劑、吡啶基-咪唑化合物，TNF、LT、IL-1、IL-2、IL-6、IL-7、IL-8、IL-15、IL-16、IL-18、EMAP-II、GM-CSF、FGF和PDGF的抗體或激動劑,CD2、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD90或其配體的抗體，曱氨喋呤、環(huán)孢菌素、FK506、雷帕霉素、霉酚酸酯、來氟洛米、NSAID、布洛芬、皮質(zhì)甾類藥物、氫化潑尼松、磷酸二酯酶抑制劑、腺苷激動劑、抗血栓劑、補體抑制劑、腎上腺素能劑、IRAK、NIK、IKK、p38、MAP激酶抑制劑、IL-1卩轉(zhuǎn)化酶抑制劑、TNFa轉(zhuǎn)化酶抑制劑、T-細(xì)胞信號傳導(dǎo)抑制劑、金屬蛋白酶抑制劑、柳氮磺胺吡咬、硫唑噤呤、6-巰基噤呤、血管緊張肽轉(zhuǎn)化酶抑制劑、可溶性細(xì)胞因子受體、可溶性p55TNF受體、可溶性p75TNF受體、sIL-lRI、sIL-lRII、sIL-6R、抗炎細(xì)胞因子、IL-4、IL-10、IL-ll、IL-13和TGF卩。在優(yōu)選的實施方案中，上面公開的藥物組合物是通過選自下列的途徑對個體給藥胃腸外、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、支氣管內(nèi)、腹內(nèi)、嚢內(nèi)、軟骨內(nèi)、腔內(nèi)、腹腔內(nèi)、小腦內(nèi)、月畝室內(nèi)、結(jié)腸內(nèi)、子宮頸內(nèi)、胃內(nèi)、肝內(nèi)、心肌內(nèi)、骨內(nèi)、骨盆內(nèi)、心包內(nèi)、腹膜內(nèi)、胸膜內(nèi)、前列腺內(nèi)、肺內(nèi)、直腸內(nèi)、腎內(nèi)、—見網(wǎng)膜內(nèi)、脊柱內(nèi)、滑液內(nèi)、胸內(nèi)、子宮內(nèi)、膀胱內(nèi)、快速濃注、經(jīng)陰道、經(jīng)直腸、頰、舍下、鼻內(nèi)和經(jīng)皮。本發(fā)明的一個方面涉及至少一種IL-12抗-遺傳型抗體，所述抗體抗至少一種本發(fā)明的IL-12結(jié)合蛋白。所述抗-遺傳型抗體包括含有分子的任何蛋白或肽，所述分子包含免疫球蛋白分子的至少一部分，例如但不限于至少一個重鏈或輕鏈的互補性決定區(qū)(CDR)或其配體結(jié)合部分，重鏈或輕鏈可變區(qū)，重鏈或輕鏈恒定區(qū)，框架區(qū)；或可以引入到本發(fā)明結(jié)合蛋白內(nèi)的其任何部分。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及IL-12p40結(jié)合蛋白，特別是抗-IL-12p40抗體，或結(jié)合IL-12p40的其抗原結(jié)合部分。本發(fā)明的各個方面涉及抗體和抗體片段，及其藥物組合物，以及用于制備這樣的抗體和片段的核酸、重組表達(dá)載體和宿主細(xì)胞。本發(fā)明還包括使用本發(fā)明抗體來在體外和體內(nèi)檢測人IL-12p40、人IL-12和人IL-23的方法；抑制人IL-12和/或人IL-23活性的方法；以及調(diào)節(jié)基因表達(dá)的方法。除非在這里另有定義，否則與本發(fā)明相關(guān)使用的科學(xué)和技術(shù)術(shù)語應(yīng)該具有本領(lǐng)域技術(shù)人員通常理解的定義。術(shù)語的含義和范圍應(yīng)當(dāng)是清楚的，然而，如果出現(xiàn)任何潛在的含糊之處，則本文提供的定義優(yōu)先于任何詞典或外部定義。此外，除非上下文必需說明，單數(shù)應(yīng)該包括復(fù)數(shù)，而復(fù)數(shù)應(yīng)當(dāng)包括單數(shù)。在本說明書中，除非另有說明，否則"或"的意思是"和/或"。此外，術(shù)語"包括"以及其他形式，例如第三人稱的和過去式的"包括，，的使用，是非限制性的。還有。除非另有說明，否則術(shù)語，例如"元素"或"成分"包括包含一個成分的元素和成分以及包括一個以上子單位的元素和成分。一般情況下，與這里描述的細(xì)胞和組織培養(yǎng)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、遺傳學(xué)和蛋白質(zhì)和核酸化學(xué)和雜交技術(shù)相關(guān)使用的術(shù)語是本領(lǐng)域公知的和通常使用的。本發(fā)明的方法和技術(shù)一般根據(jù)本領(lǐng)域公知的常規(guī)方法和本說明書引述的和討論的各種概述性的和更專業(yè)的參考文獻(xiàn)來進(jìn)行，除非另有說明。根據(jù)廠商說明書進(jìn)行酶促反應(yīng)和純化技術(shù)，如本領(lǐng)域常規(guī)實現(xiàn)的或者如這里描述的。與這里描述的實驗步驟、分析化學(xué)、合成有機化學(xué)和藥物化學(xué)技術(shù)相關(guān)的術(shù)語是本領(lǐng)域公知的和通常使用的?；瘜W(xué)合成、化學(xué)分析、藥物制備、制劑和遞送和對患者的治療是標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。下面定義選擇的術(shù)語，可以更容易理解本發(fā)明。本文使用的術(shù)語"多肽"是指任何氨基酸的聚合鏈。術(shù)語"肽"和"蛋白質(zhì)"與術(shù)語多肽互換使用，也指氨基酸的聚合鏈。術(shù)語"多肽"包括天然或人造蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)片段和蛋白質(zhì)序列的多肽類似物。多肽可以是單體的或聚合的。術(shù)語"分離的蛋白質(zhì)"或"分離的多肽"是由于其來源或產(chǎn)生來物種的其他蛋白質(zhì)；由不同物種的細(xì)胞表達(dá)；或者在自然中不存在的蛋白質(zhì)或多肽。因此，化學(xué)合成或在不同于其天然起源細(xì)胞的細(xì)胞系中合成的多肽是與其天然相關(guān)成分"分離的"。利用本領(lǐng)域公知的蛋白質(zhì)純化技術(shù)，通過分離，可以使得蛋白質(zhì)基本上沒有天然相關(guān)成分。本文使用的術(shù)語"回收""是指，例如，利用本領(lǐng)域^^知的蛋白質(zhì)純化技術(shù)，通過分離，使得化學(xué)物質(zhì)例如多肽基本上沒有天然相關(guān)成分的方法。本文所用術(shù)語"人IL-12"(在本文中簡稱為hIL-12或IL-12)包括主要由抗原呈遞細(xì)胞例如單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹狀細(xì)胞分泌的人細(xì)胞因子。該術(shù)語包括異二聚體蛋白，其包括35kDa亞單位(p35)和40kDa亞單位(p40)，這兩個亞單位是通過二硫橋連接在一起的。所述異二聚體蛋白稱為"p70蛋白"。人IL-12的結(jié)構(gòu)進(jìn)一步描述于例如Kobayashi，等人(1989)J.ExpMed.170:827-845;Seder,等人(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.90:10188-10192;Ling，等人(1995)J.ExpMed.154:116-127;Podlaski，等人(1992)Arch.Biochem.Biophys.294:230-237中。術(shù)語人IL-12包括重組人IL-12(rhIL-12),其可通過標(biāo)準(zhǔn)重組表達(dá)方法制<曰付。本文所用術(shù)語"人IL-23"(在本文中簡稱為hIL-23或IL-23)包括屬于由5個這樣的異二聚細(xì)胞因子組成的異二聚人細(xì)胞因子家族，5個這樣的異二聚細(xì)胞因子包括IL-12和IL-27(Trinchieri等人，(2003)Immunity19:641-644)。該術(shù)語包括異二聚體蛋白，該異二聚體蛋白包含19kD亞單位(pl"和40kD亞單位(p40),這兩個亞單位是通過二硫橋連接在一起的。術(shù)語人IL-23包括重組人IL-23(rhIL-23)，其可通過標(biāo)準(zhǔn)重組表達(dá)方法制得。本文所用術(shù)語"IL-12p40"與"IL-23p40"相同，并且也簡稱為"p40"，包括人細(xì)胞因子IL-12(p40)的40kD亞單位和人細(xì)胞因子IL-23的40kD亞單位。表1顯示了本領(lǐng)域已知的IL-12p40的氨基酸序列，SEQIDNo.1。表l:IL-12和IL-23的p40亞單位的序列<table>tableseeoriginaldocumentpage50</column></row><table>本文所用術(shù)語"生物活性"是指細(xì)胞因子的所有固有生物性質(zhì)。IL-12的生物性質(zhì)包括但不限于結(jié)合IL-12受體；誘導(dǎo)干擾素-y(IFN-y)分泌和調(diào)節(jié)抗原特異性T輔助細(xì)胞1型(Thl)與2型(Th2)淋巴細(xì)胞之間的平衡。IL-23的生物性質(zhì)包括但不限于結(jié)合IL-23受體；誘導(dǎo)IFN-y生成。Thl細(xì)胞分化和激活樹狀細(xì)胞的抗原呈遞功能，以及選擇性地誘導(dǎo)記憶T細(xì)胞的增殖。關(guān)于抗體、蛋白質(zhì)或肽與第二化學(xué)物質(zhì)相互作用的本文使用的術(shù)語"特異性結(jié)合，，或"特異地結(jié)合"，意思是相互作用取決于化學(xué)物質(zhì)上的特定結(jié)構(gòu)(例如抗原決定簇或表位)的存在；例如，抗體識別和結(jié)合特定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)而不是一般的蛋白質(zhì)。如果抗體對于表位"A"是特異性的，則在含有標(biāo)記的"A"和抗體的反應(yīng)中，含有表位A(或者游離的沒有標(biāo)記的A)的分子的存在會減少與抗體結(jié)合的標(biāo)記的A的量。本文使用的術(shù)語"抗體，，在廣義上指由四個多肽鏈構(gòu)成的任何免疫球蛋白(Ig)分子兩個重鏈(H)和兩個輕鏈(L)，或者保留Ig分子的基本表位結(jié)合特征的其任何功能片段、突變體、變體或衍生物。這樣的突變體、變體或衍生物抗體形式是本領(lǐng)域公知的。下面討論非限制性實施方案。在全長抗體中，每條重鏈由一個重鏈可變區(qū)(本文中縮寫為HCVR或VH)和一個重鏈恒定區(qū)構(gòu)成。重鏈恒定區(qū)由三個結(jié)構(gòu)域，CH1、CH2和CH3構(gòu)成。每條輕鏈由一個輕鏈可變區(qū)(本文中縮寫為LCVR或VL)和一條輕鏈恒定區(qū)構(gòu)成。輕鏈恒定區(qū)由一個結(jié)構(gòu)域CL構(gòu)成。VH和VL區(qū)能進(jìn)一步分為高變區(qū)，稱作互補性決定區(qū)(CDR),期中散布著更保守的稱作框架區(qū)(FR)的區(qū)。每條VH和VL由三個CDR和四個FR構(gòu)成，從氨基末端至羧基末端以下面的順序排列FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。免疫球蛋白分子可以是任何類型(例如IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和IgY)、類別(例如IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgAl和IgA2)或亞類。本文使用的術(shù)語，抗體的"抗原-結(jié)合部分"(或者簡單地"抗體部分")是指保留特異性結(jié)合抗原(例如hlL-12)能力的抗體的一個或幾個片段。已經(jīng)證明通過全長抗體的片段能完成抗體的抗原-結(jié)合功能。這樣的抗體實施方案還可以是雙特異性的，雙重特異性的或多特異性的形式；特異性結(jié)合兩個或多個不同的抗原。術(shù)語抗體的"抗原-結(jié)合部分"所包括的結(jié)合片段的實例包括(i)Fab片段。由VL、VH、CL和CH1結(jié)構(gòu)域構(gòu)成的一價片段；(ii)F(ab')2片段，包括在鉸鏈區(qū)通過二硫橋連接的兩個Fab片段的二價片段；(iii)由VH和CH1結(jié)構(gòu)域構(gòu)成的Fd片段；(iv)由抗體單臂的VL和VH結(jié)構(gòu)域構(gòu)成的Fv片段，(v)dAb片段(Ward等人，(1989)Nature341:544-546，Winter等人，PCT/〉開WO90/05144Al，其引入本文以供參考)。其包括一個可變區(qū)；和(vi)分離的互補決定區(qū)(CDR)。此外，雖然Fv片段的兩個結(jié)構(gòu)域，VL和VH由不同的基因編碼，但是利用重組方法，通過使他們制備成其中VL和VH區(qū)對形成一價分子(已知是單鏈Fv(scFv);參見例如Bird等人(1988)Science242:423-426;和Huston等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:5879-5883)的蛋白質(zhì)單鏈的合成接頭，能將他們連接。這樣的單鏈抗體也包括在術(shù)語抗體的"抗原-結(jié)合部分"中。也包括其他形式的單《連抗體，例如雙抗體。雙抗體是二價雙特異性抗體，其中VH和VL結(jié)構(gòu)域在單鏈多肽上表達(dá)，但是使用太短不能在相同鏈上兩個結(jié)構(gòu)域之間配對的接頭。從而使結(jié)構(gòu)域與另一個鏈的互補結(jié)構(gòu)域配對，產(chǎn)生兩個抗原結(jié)合位點(參見例如Holliger，R，等人(1"3)Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:6444-6448;Poljak,R.J.，等人(1994)Structure2:1121-1123)。這樣的抗體結(jié)合部分是本領(lǐng)域已知的(Kontermann和Dubeleds.，AntibodyEngineering(2001)Springer-Verlag.NewYork.790pp.(ISBN3-540-41354-5)。本文所用術(shù)語"抗體構(gòu)建物，，是指多肽，其包含與接頭多肽或免疫球蛋白恒定區(qū)連接的一個或多個本發(fā)明抗原結(jié)合部分。接頭多肽包含通過肽鍵連接的兩個或多個氨基酸殘基，并且用于連接一個或多個抗原結(jié)合部分。這樣的接頭多肽是本領(lǐng)域眾所周知的(參見例如Holliger,P.,等人(1993)Proc.Natl.Acad.ScLUSA90:6444-6448;Poljak，RJ.,等人(1994)Structure2:1121-1123)。免疫球蛋白恒定區(qū)是指重鏈或輕鏈恒定區(qū)。人IgG重鏈和輕鏈恒定區(qū)氨基酸序列是本領(lǐng)域已知的，并且顯示在表2中。表2:人IgG重鏈恒定區(qū)和輕鏈恒定區(qū)的序列<table>tableseeoriginaldocumentpage52</column></row><table>此外，抗體或其抗原-結(jié)合部分可以是更大的免疫粘著分子的部分，是通過抗體或抗體部分與一個或幾個其他蛋白質(zhì)或肽的共價或非共價結(jié)合形成的。這樣的免疫粘著分子的例子包括使用鏈霉抗生物素蛋白核心區(qū)形成四聚體scFv分子(Kipriyanov，S.M.，等人(1995)HumanAntibodiesandHybridomas6:93-101)和使用半胱氨酸殘基，一種標(biāo)記肽和C-末端多組氨酸標(biāo)簽形成二價的和生物素化scFv分子(Kipnyanov，S.M.,等人(1994)Mol.Immunol.31:1047-1058)?？贵w部分，例如Fab和F(ab')2片段，能應(yīng)用常規(guī)技術(shù)，例如分別對全抗體進(jìn)行木瓜蛋白酶或胃蛋白酶消化而從全抗體制備。此外，應(yīng)用這里描述的標(biāo)準(zhǔn)重組DNAa技術(shù)能獲得抗體、抗體部分和免疫粘著分子。本文使用的術(shù)語"分離的抗體"意指基本上沒有具有不同抗原特異性的其他抗體的抗體(例如特異性結(jié)合WL-12的分離的抗體基本上沒有特異性結(jié)合hIL-12以外抗原的抗體)。然而，特異性結(jié)合hIL-12的分離的抗體具有與其他抗原例如來自其他物種的IL-12分子的交叉反應(yīng)性。此外，分離的抗體基本上沒有其他細(xì)胞材料和/或化學(xué)物質(zhì)。本文使用的術(shù)語"人抗體，，意指包括具有來自人種系免疫球蛋白序列的可變區(qū)和恒定區(qū)的抗體。本發(fā)明的人抗體可以包括不是人種系免疫球蛋白序列編碼的氨基酸殘基(例如體外隨機或定點誘變或通過體內(nèi)體突變誘導(dǎo)的突變)，例如在CDR中，特別是在CDR3中。然而，本文使用的術(shù)語"人抗體"不包括其中來自另一個哺乳動物種系例如小鼠的種系的CDR序列接枝到人構(gòu)架序列內(nèi)的抗體。本文使用的術(shù)語"重組人抗體"意在包括通過重組方法制備、表達(dá)、產(chǎn)生或分離的所有的人抗體，例如利用轉(zhuǎn)染到宿主細(xì)胞中的重組表達(dá)載體表達(dá)的抗體(在下面nC章節(jié)進(jìn)一步描述)，從重組組合人抗體庫分離的抗體(HoogenboomKR.,(1997)TIBTech.15:62-70;AzzazyH.，和HighsmithW.E.，(2002)Clm.Biochem.35:425-445;GavilondoJ.V.,andLarrick丄W.(2002)BioTechniques29:128-145;HoogenboomH.，andChamesP.(2000)ImmunologyToday21:371-378),從人免疫球蛋白基因轉(zhuǎn)基因的動物(例如小鼠)分離的抗體(參見例如Taylor,L.D.，等人(1992)Nucl.AcidsRes.20:6287-6295;KellermannS-A.,和GreenL.L.(2002)CurrentOpinioninBiotechnology13:593-597;LittleM.等人(2000)ImmunologyToday21:364畫370)或者通過涉及人免疫球蛋白基因序列與其他DNA序列剪接的任何其他方法制備、表達(dá)、產(chǎn)生或分離的抗體。這樣的重組人抗體具有來自人種系免疫球蛋白序列的可變區(qū)和恒定區(qū)。但是在一些實施方案中，對這樣的重組人抗體體外誘變(或者當(dāng)體內(nèi)體誘變使用人Ig序列的轉(zhuǎn)基因動物時)，從而重組抗體的VH和VL區(qū)的氨基酸序列是來自體內(nèi)人抗體種系全部中天然并不存在的人種系VH和VL序列和與人種系VH和VL序列相關(guān)的序列。術(shù)語"嵌合抗體"是指包括來自一個物種的重鏈和輕鏈可變區(qū)序列和來自另一個物種的恒定區(qū)序列的抗體，例如具有與人恒定區(qū)連接的鼠重鏈和輕鏈可變區(qū)的抗體。術(shù)語"CDR-接枝抗體"是指包括來自一個物種的重鏈和輕鏈可變區(qū)，但是其中序列中VH和/或VL中一個或幾個CDR區(qū)被另一個物種的CDR序列置換，例如具有其中一個或幾個鼠CDR(例如CDR3)被人CDR序列置換的鼠重鏈和輕鏈可變區(qū)的抗體。術(shù)語"人源化抗體，，是指包含來自非人物種(例如小鼠)但是其中VH和/或VL序列中至少一部分被變?yōu)楦?人-樣"，即與人種系可變序列更相似的重鏈和輕鏈可變區(qū)序列的抗體。人源化抗體的一種類型是CDR-接枝抗體，其中人CDR序列導(dǎo)入非人VH和VL序列以置換相應(yīng)的非人CDR序列。術(shù)語"Kabat編號"、"Kabat定義"和"Kabat標(biāo)記，，在本文中是交替使用。為本領(lǐng)域所知的這些術(shù)語是指氨基酸殘基編號系統(tǒng)，這些氨基酸殘基比抗體或其抗原結(jié)合部分的重鏈和輕鏈可變區(qū)中的其他氨基酸殘基是更可變(即高度可變)(Kabat等人(1971)Ann.NYAcad，Sci.190:382-391和Kabat,E.A.,等人(1991)SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,FifthEdition,U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIH公開91-3242)。對于重鏈可變區(qū)，對于CDRl,高度可變區(qū)域位于31-35位氨基酸，對于CDR2,位于50-65位氨基酸，對于CDR3，位于95-102位氨基酸。對于輕鏈可變區(qū)，對于CDR1，高度可變區(qū)域位于24-34位氨基酸，對于CDR2,位于50-56位氨基酸，對于CDR3,位于89-97位氨基酸。本文所用術(shù)語"接受者"和"接受者抗體"是指抗體或核酸序列，其提供或編碼一個或多個框架區(qū)的氨基酸序列的至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%。在某些實施方案中，術(shù)語"接受者"是指提供或編碼恒定區(qū)的抗體氨基酸或核酸序列。在另一個實施方案中，術(shù)語"接受者"是指通過或編碼一個或多個框架區(qū)和恒定區(qū)的抗體氨基酸或核酸序列。在一個具體實施方案中，術(shù)語"接受者，，是指人抗體氨基酸或核酸序列，其提供或編碼一個或多個框架區(qū)的氨基酸序列的至少80%、至少85%、至少卯％、至少95%、至少98%或100%。依據(jù)該實施方案，接受者可含有至少1個、至少2個、至少3個、至少4個、至少5個或至少10個在人抗體的一個或多個特點位置不存在的氨基酸殘基。接受者框架區(qū)和/或接受者恒定區(qū)可以例如衍生自或得自種系抗體基因、成熟抗體基因、功能抗體(例如本領(lǐng)域眾所周知的抗體、開發(fā)中的抗體或可商購獲得的抗體)。本文所用術(shù)語"CDR"是指抗體可變序列內(nèi)的互補性決定區(qū)。在重鏈和輕鏈的每個可變區(qū)中存在3個CDR，對于每個可變區(qū)，其稱為CDR1、CDR2和CDR3。本文所用術(shù)語"CDR組"是指在能夠結(jié)合抗原的一個可變區(qū)中存在的一組3個CDR。這些CDR的精確界限已經(jīng)根據(jù)不同系統(tǒng)進(jìn)行了不同定義。Kabat描述的系統(tǒng)(Kabat等人，SequencesofProteinsofImmunologicalInterest(NationalInstitutesof可變區(qū)的明確的殘基編號系統(tǒng)，而且還提供了i義這三個CDR的精確殘基界限。這些CDR可稱為KabatCDR。Chothia及其同事(Chothm&Lesk,丄Mol.Biol.196:901-917(1987)和Chothia等人，Nat腦342:877-883(19S9))發(fā)現(xiàn)，KabatCDR內(nèi)的一些亞部分幾乎采取了相同的肽骨架構(gòu)象，盡管在氨基酸序列水平上具有很大差異。這些亞部分指定為Ll、L2和L3，或者Hl、H2和H3，其中"L"和"H"分別是指輕鏈和重鏈區(qū)域。這些區(qū)域可以稱為ChothiaCDR，其具有與KabatCDR重疊的界限。Padlan(FASEBJ.9:133-139(1995))和MacCallum(JMolBiol262(5):732-45(1996))中已經(jīng)描述了定義與KabatCDR重疊的CDR的其他界限。其他CDR界限可能沒有嚴(yán)格遵照一個上述系統(tǒng)，但是仍然與KabatCDR重疊，盡管根據(jù)以下預(yù)測或?qū)嶒灠l(fā)現(xiàn)，他們可以被縮短或延長，特定殘基或殘基組或甚至整個CDR沒有顯著影響抗原結(jié)合。本文使用的方法可使用根據(jù)任一這些系統(tǒng)所定義的CDR，不過優(yōu)選的實施方案使用Kabat或Chothia定義的CDR。本文所用術(shù)語"正規(guī)"殘基是指CDR或框架中的殘基，其限定了正規(guī)CDR結(jié)構(gòu)，如Chothia等人所定義(J.Mol.Biol.196:901-907(1987);Chothia等人，J.Mol.Biol.227:799(1992),二者引入本文以供參考)。根據(jù)Chothia等人，很多抗體的CDR的關(guān)鍵部分具有幾乎相同的肽骨架構(gòu)象，盡管在氨基酸序列水平上具有很大差異。對于形成環(huán)的氨基酸殘基的相連片段來說，每個正規(guī)結(jié)構(gòu)主要指定一組肽骨架扭轉(zhuǎn)角。本文所用術(shù)語"供體"和"供體抗體"是指提供一個或多個CDR的抗體。在優(yōu)選的實施方案中，供體抗體是與由其獲得或衍生出框架區(qū)的抗體不同物種的抗體。在人源化抗體的上下文中，術(shù)語"供體抗體"是指提供一個或多個CDR的非人類抗體。本文所用術(shù)語"框架"或"框架序列"是指減去CDR之后的可變區(qū)的其余序列。由于CDR序列的精確定義可以通過不同系統(tǒng)來確定，所以框架序列的含義相應(yīng)地具有不同解讀。六個CDR(輕鏈的CDR-Ll、-L2和-L3和重鏈的CDR-Hl、-H2和-H3)還把輕鏈和重鏈上的框架區(qū)在每個鏈上分為4個亞區(qū)(FR1、FR2、FR3和FR4),其中CDR1位于FR1與FR2之間，CDR2位于FR2與FR3之間，并且CDR3位于FR3與FR4之間。如果沒有把特定亞區(qū)指定為FR1、FR2、FR3或FR4,由其他來指定的框架代表一個天然存在的免疫球蛋白鏈的可變區(qū)內(nèi)的組合的FR。本文所用術(shù)語FR代表這四個亞區(qū)中的一個，F(xiàn)Rs代表構(gòu)成沖匡架區(qū)的這四個亞區(qū)中的兩個或多個。人類重鏈和輕鏈接受者序列是本領(lǐng)域已知的。在本發(fā)明的一個實施方案中，人類重鏈和輕鏈接受者序列選自表3和表4中描述的序列。<table>tableseeoriginaldocumentpage57</column></row><table>本文所用術(shù)語"種系抗體基因"或"基因片段"是指免疫球蛋白序列，其是由沒有經(jīng)過突變過程的非淋巴細(xì)胞編碼的，對于特定免疫球蛋白的表達(dá)，所述突變導(dǎo)致基因重排和突變(參見例如Shapiro等人，Crit.Rev.Immunol.22(3):183-200(2002);Marchalonis等人，AdvExpMedBiol.484:13-30(2001))。由本發(fā)明的各個實施方案提供的一個優(yōu)點源于這樣的認(rèn)識，也就是說，種系抗體基因比成熟抗體基因更有可能保存物種個體的必需氨基酸序列結(jié)構(gòu)特征，因此當(dāng)在物種中治療使用時被作為外來抗體識別的可能性更小。本文所用術(shù)語"關(guān)鍵"殘基是指對于抗體，特別是人源化抗體的結(jié)合特異性和/或親合力具有更大影響的可變區(qū)內(nèi)的一些殘基。關(guān)鍵殘基包括但不限于一個或多個下列殘基與CDR相鄰的殘基，現(xiàn)在的糖基化位點(可以是N-或O-糖基化位點)，稀有殘基，能夠與抗原相互作用的殘基，能夠與CDR相互作用的殘基，正規(guī)殘基，重鏈可變區(qū)與輕鏈可變區(qū)之間的接觸殘基，Vernier區(qū)內(nèi)的殘基，以及在可變重鏈CDR1的Chothm定義與第一重鏈框架的Kabat定義之間重疊的區(qū)域中的殘基。本文所用術(shù)語"人源化抗體"是這樣的抗體或其變體、衍生物、類似物或片段，其免疫特異性地與所關(guān)注的抗原結(jié)合，并且包含基本上具有人抗體的氨基酸序列的框架(FR)區(qū)和基本上具有非人抗體抗體的氨基酸序列的互補性決定區(qū)(CDR)。本文所用的，在CDR上下文中的術(shù)語"基本上"是指，CDR所具有的氨基酸序列與非人抗體CDR的氨基酸序列具有至少80%，優(yōu)選至少85%,至少90%,至少95%,至少98%或至少99%的同一性。人源化抗體包括基本上所有至少一個，通常兩個可變區(qū)(Fab、Fab'、F(ab')2、FabC、Fv),其中所有或基本上所有CDR區(qū)與非人免疫球蛋白(即供體抗體)的CDR區(qū)相一致，并且所有或基本上所有框架區(qū)是人免疫球蛋白共有序列的那些。優(yōu)選地，人源化抗體還包含免疫球蛋白恒定區(qū)(Fc)，通常人免疫球蛋白恒定區(qū)的至少一部分。在某些實施方案中，人源化抗體包含輕《連以及重《連的至少可變區(qū)。抗體還可以包括重鏈的CH1、鉸鏈、CH2、CH3和CH4區(qū)。在某些實施方案中，人源化抗體僅含有人源化輕鏈。在某些實施方案中，人源化抗體僅含有人源化重鏈。在具體實施方案中，人源化人源化抗體可以選自任何種類的免疫球蛋白，包括IgM、IgG、IgD、IgA和IgE,以及任何同種型，包括但不限于IgGl、IgG2、IgG3和IgG4。人源化抗體可以包含一個類別以上的序列或同種型，并且可以選擇特定的恒定區(qū)來使用本領(lǐng)域眾所周知的技術(shù)優(yōu)化所需的效應(yīng)子功能。人源化抗體的框架和CDR區(qū)域不需要精確地與母序列相一致，例如，供體抗體CDR或共有框架可以通過取代、插入和/或刪去至少一個氨基酸殘基來進(jìn)行誘變，這樣在該位置的CDR或框架殘基與供體抗體或共有框架不一致。然而，在優(yōu)選的實施方案中，這樣的突變將不是廣泛的。通常，至少80%,優(yōu)選至少85%,更優(yōu)選至少90%,最優(yōu)選至少95%的人源化抗體殘基將與母FR和CDR序列的殘基相一致。本文所用術(shù)語"共有框架"是指在共有免疫球蛋白序列中的框架區(qū)。本文所用術(shù)語"共有免疫球蛋白序列"是指由一個家族的相關(guān)免疫球蛋白序列中的最經(jīng)常存在的氨基酸(或核苷酸)形成的序列(參見例如Winnaker,FromGenestoClones(Verlagsgesellschaft,Weinheim,Germany1987)。在一個家族的免疫球蛋白中，共有序列中的每個位置在該家族的此位置上被最經(jīng)常存在的氨基酸所占據(jù)。如果兩個氨基酸存在的頻率相同，則他們都可以包括在共有序列中。本文所用術(shù)語"Vernier"區(qū)域是指一個亞組的框架殘基，其可以調(diào)節(jié)CDR結(jié)構(gòu)，并且微調(diào)與抗原的適合性，如Foote和Winter所描述的那樣(1992，J.Mol.Biol.224:487-499,其引入本文以供參考)。Vernier區(qū)殘基形成在CDR下面的層，并且可以影響CDR的結(jié)構(gòu)以及抗體的親合力。本文所用術(shù)語"中和"是指，當(dāng)結(jié)合蛋白特異性地與細(xì)胞因子結(jié)合時，中和細(xì)胞因子的生物活性。優(yōu)選地，中和性結(jié)合蛋白是中和性抗體，其與hIL-12和/或hIL-23結(jié)合導(dǎo)致hIL-12和/或hIL-23的生物活性被抑制。優(yōu)選地，中和性結(jié)合蛋白結(jié)合hIL-12和/或hIL-23并且把IL-12和/或hlL-23的生物活性降低至少約20%,40%,60%，80%，85%或更多。中和性結(jié)合蛋白對于hIL-12和/或hIL-23生物活性的抑制可通過測定本領(lǐng)域眾所周知的hIL-12和/或hIL-23生物活性的一個或多個指標(biāo)來評估。例如，在PHA胚細(xì)胞干擾素吖誘導(dǎo)分析中的人植物凝集素胚細(xì)胞增殖的抑制(參見實施例l.l.C)或在人IL-12受體結(jié)合分析中的受體結(jié)合抑制(還參見Salfeld等人，PCT公開WOOO/56772Al)。術(shù)語"活性"包括活性，例如抗體例如與IL-12抗原結(jié)合的抗-hlL-12抗體對于抗原的結(jié)合特異性/親合力，和/或抗體例如抗-hlL-12抗體的中和效力，所述抗體與hIL-12的結(jié)合抑制hIL-12的生物活性，例如PHA胚細(xì)胞增殖的抑制或在人IL-12受體結(jié)合分析中受體結(jié)合的抑制，或PHA胚細(xì)胞干擾素-Y誘導(dǎo)分析(參見實施例1丄C)。術(shù)語"表位"包括能特異性結(jié)合免疫球蛋白或T-細(xì)胞受體的任何多肽決定簇。在一些實施方案中，表位決定簇包括象氨基酸、糖側(cè)鏈、磷酰基或磺?；@樣的分子的化學(xué)活性表面基團(tuán)，并且在一些實施方案中，可以具有特定的三維結(jié)構(gòu)特征和/或特定電荷特征。表位是抗體結(jié)合的抗原的區(qū)。在一些實施方案中，當(dāng)抗體優(yōu)先識別蛋白和/或大分子的復(fù)合混合物中其靶物抗原時，抗體特異性結(jié)合抗原。如本文使用的術(shù)語"表面等離振子共振"是指一種光學(xué)現(xiàn)象，它使得通過檢測生物傳感器基體中蛋白質(zhì)濃度的改變來分析實時生物特異性相互作用，例如利用BIAcore系統(tǒng)(PharmaciaBiosensorAB,Uppsala,SwedenandPiscataway,NJ)。關(guān)于進(jìn)一步描述,參見Jonsson,U.，等人(1993)Ann.Biol.Clin.51:19-26;Jonsson，U.，etal(1991)Biotechniques11:620-627;Johnsson,B.,等人(1995)J.MolRecognit.8:125-131;和Johnnson,B.，等人(1991)Anal.Biochem.198:268-277。如本文使用的術(shù)語"K。n"意指本領(lǐng)域公知的抗體與抗原締合以生成抗體/抗原復(fù)合體的生成速率常數(shù)。如本文使用的術(shù)語"K。ff"意指本領(lǐng)域公知的抗體從抗體/抗原復(fù)合體離解的離解速率常數(shù)。如本文使用的術(shù)語"Kd"意指本領(lǐng)域^^知的特定抗體-抗原相互作用的離解常數(shù)。如本文使用的術(shù)語"標(biāo)記的結(jié)合蛋白，，是指帶有引入的標(biāo)記物提供結(jié)合蛋白鑒定的蛋白。優(yōu)選地，標(biāo)記物是可檢測標(biāo)記物，例如引入放射性標(biāo)記的氨基酸或連接可通過標(biāo)記的抗生物素蛋白檢測的生物素基部分(例如包含熒光標(biāo)記物或者可通過光學(xué)或比色方法檢測的酶活性的鏈霉抗生物素蛋白)。多肽的標(biāo)記物的例子包括但不限于下列放射性同位素或放射性核素(例如3H、14C、35S、90Y、"Tc、川ln、1251、1311、177Lu、166Ho或153Sm);熒光標(biāo)記物(例如FITC、羅丹明、鑭系磷光劑)，酶學(xué)標(biāo)記物(例如辣根過氧化物酶、熒光素酶、堿性磷酸酶)；化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物；生物素基團(tuán)；預(yù)先確定的第二報告基團(tuán)識別的多肽表位(例如亮氨酸拉鏈對序列、二次抗體的結(jié)合位點、金屬結(jié)合結(jié)構(gòu)域、表位標(biāo)簽)；和有吸引力的試劑例如釓螯合劑。術(shù)語"抗體綴合物，，是指與第二化學(xué)部分，例如治療劑或細(xì)胞毒性劑化學(xué)連接的抗體。術(shù)語"試劑"在這里用來指化合物，化合物的混合物，生物大分子或者從生物材料制備的提取物。優(yōu)選地，治療劑或細(xì)胞毒性劑包括但不限于百日咳毒素、紫杉醇、細(xì)胞+》弛素B、短桿菌肽D、溴化乙錠、吐根石威、絲裂霉素、依托泊苷、tenoposide、長春新堿、長春堿、秋水仙堿、阿霉素、柔紅霉素、二羥基炭疽菌素二酮、二羥蒽二酮、光輝霉素、放線菌素D、l-脫氫睪酮、糖皮質(zhì)激素、普魯卡因、丁卡因、利多卡因、普萘洛爾和嘌呤霉素，和他們的類似物或同系物。本文使用的術(shù)語"晶體"和"結(jié)晶"是指以晶體形式存在的抗體或其抗原結(jié)合部分。晶體是一種固態(tài)形式，它與其他形式例如無定形固態(tài)或液晶態(tài)截然不同。晶體由原子、離子、分子(例如蛋白如抗體)或分子集合體(例如抗原/抗體復(fù)合體)有序的重復(fù)的三維排列組成。這些三維排列根據(jù)本領(lǐng)域公知的特殊數(shù)學(xué)關(guān)系排列。晶體中重復(fù)的基礎(chǔ)單元或者構(gòu)件稱作不對稱單元。證實給出確定的結(jié)晶學(xué)對稱性的排列中重復(fù)的不對稱單元提供晶體的"晶胞"。所有三個方向規(guī)則轉(zhuǎn)換的晶胞的重復(fù)得到晶體。參見Giege,R.和Ducruix,A.Barrett,CrystallizationofNucleicAcidsandProteins,aPracticalApproach,2ndea.,pp.201-16,OxfordUniversityPress,NewYork,NewYork,(1999)。本文中稱作"多核苷酸"的術(shù)語在這里指兩個或多個核苷酸，核糖核酸或脫氧核糖核酸或任何類型核苷酸的修飾形式的聚合形式。該術(shù)語包括單《連和雙鏈形式的DNA,但是優(yōu)選雙《泉DNA。本文使用的術(shù)語"分離的多核苷酸"意思是多核苷酸(例如基因組的、cDNA或者合成來源，或者他們的某些組合)，其由于其來源，"分離的多核苷酸，，與自然界發(fā)現(xiàn)的"分離的多核苷酸"的多核苷酸的全部或部分不相締合；與自然界不連接的多核苷酸可操縱地連接；或者在自然界不作為更大序列的部分而存在。本文使用的術(shù)語"載體"意指能將它所連接的另一個核酸轉(zhuǎn)運的核酸分子。載體的一種類型是"質(zhì)粒，，其是指其中可以連接另外的DNA片段的環(huán)狀雙鏈DNA環(huán)。載體的另一種類型是病毒載體，其中另外的DNA片段可連接到病毒基因組中。一些載體能在導(dǎo)入他們的宿主細(xì)胞中自主復(fù)制(例如有細(xì)菌復(fù)制起點的細(xì)菌載體和游離基因哺乳動物載體)。其他載體(例如非游離型哺乳動物載體)在導(dǎo)入宿主細(xì)胞中時能被整合到宿主細(xì)胞的基因組中，從而與宿主基因組一起復(fù)制。此外，一些載體能指導(dǎo)他們可操縱地連接的基因的表達(dá)。這樣的載體在這里稱作"重組表達(dá)載體，，(或者簡單地"表達(dá)載體")。一般情況下，重組DNA技術(shù)中使用的表達(dá)載體經(jīng)常是質(zhì)粒形式。本說明書中，"質(zhì)粒"和"載體"可以互換使用，因為質(zhì)粒是最常使用的載體形式。然而，本發(fā)明意在包括這樣的表達(dá)載體的其他形式，例如病毒載體(例如復(fù)制缺陷逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺病毒和腺相關(guān)病毒)，他們起著同等的功能。術(shù)語"可操縱地連接"是指其中將描述的成分相關(guān)聯(lián)使得他們以期望的方式發(fā)揮功能的連接。與編碼序列"可操縱地連接"的調(diào)控序列以這樣的方式連接使得在與調(diào)控序列相匹配的條件下實現(xiàn)編碼序列的表達(dá)。"可操縱地連接的"序列包括與感興趣的基因鄰接的表達(dá)調(diào)控序列和以反式起作用或者與感興趣的調(diào)控基因有距離的表達(dá)調(diào)控序列。本文使用的"表達(dá)調(diào)控序列，，是指進(jìn)行表達(dá)和加工他們連接的編碼序列所必需的多核苷酸序列。表達(dá)調(diào)控序列包括合適的轉(zhuǎn)錄起始序列、中止序列、啟動子和增強子序列；有效RNA加工信號，例如剪接和多腺苷酸酸化信號；穩(wěn)定胞質(zhì)mRNA的序列；提高翻譯效率的序列(即Kozak共有序列)；提高蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的序列；以及如果期望，增強蛋白質(zhì)分泌的序列。這樣的調(diào)控序列的性質(zhì)根據(jù)宿主生物而不同；在原核生物中，這樣的調(diào)控序列一般包括啟動子、核糖體結(jié)合位點和轉(zhuǎn)錄終止序列；在真核生物中，一般情況下，這樣的調(diào)控序列包括啟動子和轉(zhuǎn)錄終止序列。術(shù)語"調(diào)控序列，，意在包括其存在對于表達(dá)和加工是必須的成分，并且還包括其存在是有利的附加成分，例如前導(dǎo)序列和融合相應(yīng)物序列。這里定義的"轉(zhuǎn)化"是指外源DNA進(jìn)入宿主細(xì)胞的任何過程。利用本領(lǐng)域公知的各種各樣的方法在天然或人為條件下可以發(fā)生轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)化可以依賴/>知的方法將外來核酸序列插入原核或真核宿主細(xì)胞內(nèi)。根據(jù)轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞選擇方法，并且包括但不限于病毒感染、電穿孔、脂質(zhì)轉(zhuǎn)染和粒子轟擊。這樣的"轉(zhuǎn)化"細(xì)胞包括穩(wěn)定轉(zhuǎn)化的細(xì)胞，其中插入的DNA能作為自身復(fù)制質(zhì)?；蛘咦鳛樗拗魅旧w的部分復(fù)制。他們還可以包括瞬時表達(dá)插入的DNA或RNA有限時間的細(xì)胞。本文使用的"重組宿主細(xì)胞"(或者筒單地"宿主細(xì)胞")意指其中已經(jīng)導(dǎo)入外源DNA的細(xì)胞。應(yīng)該理解這樣的術(shù)語意在不僅指特定受體細(xì)胞，而且還有這樣的細(xì)胞的后代。因為由于突變或環(huán)境影響，在后代中可能發(fā)生一些改變，這樣的后代事實上可能與母本細(xì)胞不同，但是它仍然包括在本文使用的術(shù)語"宿主細(xì)胞"的范圍內(nèi)。優(yōu)選地，宿主細(xì)胞包括選自生命界任何原核和真核細(xì)胞。優(yōu)選的真核細(xì)胞包括原生生物、真菌、植物和動物細(xì)胞。最優(yōu)選地，宿主細(xì)胞包括但不限于原核細(xì)胞系大腸桿菌；哺乳動物細(xì)胞系CHO、HEK293和COS;昆蟲細(xì)胞系Sf9;和真菌細(xì)胞啤酒糖酵母。標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)可以用于重組DNA、寡核苷酸合成和組織培養(yǎng)和轉(zhuǎn)化(例如電穿孔、脂質(zhì)轉(zhuǎn)染)。酶促反應(yīng)和純化技術(shù)可以根據(jù)廠商說明書進(jìn)行或者以本領(lǐng)域常規(guī)做法或者根據(jù)本文的描述進(jìn)行。上述技術(shù)和方法一般根據(jù)本領(lǐng)域公知的常規(guī)方法和各種概述和更具體引用的參考文獻(xiàn)的描述進(jìn)行，這些參考文獻(xiàn)在本說明書中引述并討論。參見，例如Sambrook等人MolecularCloning:ALaboratoryManual(2ded.,ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,N.Y.(1989)),本文為了任何的目的引作參考。正如本領(lǐng)域公知的和本文使用的"轉(zhuǎn)基因生物"是指有包含轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞的生物，其中導(dǎo)入生物體中的轉(zhuǎn)基因(生物體的祖先)表達(dá)在生物體中天然并不表達(dá)的多肽。"轉(zhuǎn)基因"是DNA構(gòu)建體，其穩(wěn)定且可操縱地整合到產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因生物體的細(xì)胞的基因組中，在轉(zhuǎn)基因生物的一種或幾種細(xì)胞類型或組織中指導(dǎo)編碼基因產(chǎn)物的表達(dá)。術(shù)語"調(diào)控"和"調(diào)節(jié)，，互換使用，如本文使用的，是指感興趣的分子活性(例如hIL-12的生物活性)的變化或改變。調(diào)控可以是感興趣的分子的某些活性或功能大小的增加或減小。舉例的分子的活性和功能包括但不限于結(jié)合特征、酶活性、細(xì)胞受體激活和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。相應(yīng)地，本文使用的術(shù)語"調(diào)節(jié)劑，，是能改變或變化感興趣的分子的活性或功能(例如WL-12的生物活性)的化合物。例如，調(diào)節(jié)劑可以引起分子的某些活性或功能的大小與不存在調(diào)節(jié)劑所發(fā)現(xiàn)的活性或功能的大小相比有所增大或降低。在一些實施方案中，調(diào)節(jié)劑是抑制劑，其降低分子的至少一種活性或功能大小。舉例的抑制劑包括但不限于蛋白質(zhì)、肽、抗體、peptibodies、碳水化合物或小有機分子。Peptibodies描述在例如WO01/83525中。本文使用的術(shù)語"激動劑"是指一種調(diào)節(jié)劑，其當(dāng)與感興趣的分子接觸時，引起分子的某些活性或功能的大小與不存在激動劑所發(fā)現(xiàn)的活性或功能的大小相比有所增大。特別感興趣的激動劑包括但不限于IL-12多肽、核酸、碳水化合物或結(jié)合hIL-12的任何其他分子。本文使用的術(shù)語"拮抗劑"或"抑制劑"是指一種調(diào)節(jié)劑，其當(dāng)與感興趣的分子接觸時，引起分子的某些活性或功能的大小與不存在拮抗劑所發(fā)現(xiàn)的活性或功能的大小相比有所降低。特別感興趣的拮抗劑包括阻斷或調(diào)節(jié)hIL-2和/或WL-23的生物學(xué)或免疫學(xué)活性的那些。hIL-12和/或hIL-23的拮抗劑和抑制劑包括但不限于蛋白、核酸、碳水化合物或結(jié)合hIL-12和/或WL-23的任何其他分子。本文所用術(shù)語"有效量，，是指這樣的治療量，其足以減輕或改善病癥或其一種或多種癥狀的持續(xù)，預(yù)防病癥的進(jìn)展，引起病癥恢復(fù)，防止與病癥有關(guān)的一種或多種癥狀的復(fù)發(fā)、發(fā)作或進(jìn)展，；險測病癥或者提高或改善另一種治療(例如預(yù)防劑或治療劑)的預(yù)防或治療效果。本文使用的術(shù)語"樣品"以其廣義使用。本文使用的"生物樣品，，包括但不限于來自活體或活體前的任何量物質(zhì)。這樣的活體包括但不限于人、小鼠、大鼠、猴、狗、兔和其他動物。這樣的物質(zhì)包括但不限于血液、血清、尿液、滑液、細(xì)胞、器官、組織、骨髓、淋巴結(jié)和脾。I.結(jié)合人IL-12p40的人抗體本發(fā)明的一個方面提供了以高親合力、低解離速率和高中和能力結(jié)合IL-12p40的分離的鼠單克隆抗體或其抗原結(jié)合部分。優(yōu)選地，抗體，或者其部分是分離的抗體。本發(fā)明的第二個方面提供了結(jié)合IL-12p40的嵌合抗體。本發(fā)明的第三個方面提供了結(jié)合IL-12p40的CDR接枝抗體或其抗原結(jié)合部分。本發(fā)明的第四個方面提供了結(jié)合IL-12p40的人源化抗體或其抗原結(jié)合部分。優(yōu)選地，所述抗體或其部分是分離的抗體。優(yōu)選地，本發(fā)明的抗體是中和性人抗-IL-12和/或人抗-IL-23抗體。A.制備抗IL-12p40抗體的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明的抗體可通過本領(lǐng)域已知的多種技術(shù)中的任何一種來制備。1.使用雜交瘤技術(shù)的抗-IL-12p40單克隆抗體單克隆抗體可使用本領(lǐng)域已知的多種技術(shù)制得，包括使用雜交瘤、重組和噬菌體展示技術(shù)或其組合。例如，單克隆抗體可以使用雜交瘤技術(shù)來制備，包括本領(lǐng)域已知的雜交瘤技術(shù)，以及例如在Harlow等人，Antibodies:ALaboratoryManual,(ColdSpringHarborLaboratoryPress,2nded.1988);Hammerling,等人，in:單克隆抗體andT匿CeIlHybridomas563-681(Elsevier,N.Y.，1981)(所述文獻(xiàn)全文引入本文以供參考)中教導(dǎo)的那些技術(shù)。本文所用術(shù)語"單克隆抗體"不限于通過雜交瘤技術(shù)產(chǎn)生的抗體。術(shù)語"單克隆抗體，，是指從一個克隆產(chǎn)生的抗體，包括真核、原核或噬菌體克隆，不是產(chǎn)生他的方法。使用雜交瘤技術(shù)來制備和篩選特定抗體的方法是本領(lǐng)域眾所周知的。在一個實施方案中，本發(fā)明提供了產(chǎn)生單克隆抗體的方法，以及通過包括培養(yǎng)能分泌本發(fā)明抗體的雜交瘤細(xì)胞的方法所產(chǎn)生的抗體，其中優(yōu)選地，雜交瘤是這樣產(chǎn)生的將從用本發(fā)明抗原免疫的小鼠中分離出來的脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，然后篩選融合所產(chǎn)生的雜交瘤，以篩選出分泌能夠結(jié)合本發(fā)明多肽的抗體的雜交瘤克隆(參見實施例1.2)。簡言之，可將小鼠用IL-12抗原免疫。在優(yōu)選的實施方案中，將IL-12抗原與助劑一起施用以刺激免疫反應(yīng)。這樣的助劑包括完全或不完全福氏佐劑、RIBI(胞壁酰二肽)或ISCOM(免疫刺激復(fù)合體)。這樣的輔助劑通過局部沉積分離它而可以保護(hù)多肽不快速散播，或者他們可以含有刺激宿主分泌對巨噬細(xì)胞和免疫系統(tǒng)的其他成分有趨化性的物質(zhì)。優(yōu)選地，如果施用多肽，免疫程序包括施用兩次或多次多肽，延續(xù)幾周。用IL-12抗原免疫動物之后，可以從動物獲得抗體和/或產(chǎn)生抗體的血清。可以使用從動物獲得的血清，從血清獲得的免疫球蛋白級分，或者從血清純化的抗-IL-12抗體。以這種方式獲得的血清或免疫球蛋白是多克隆的，因此帶有一系列異源性質(zhì)。一旦檢測到免疫反應(yīng)，例如在小鼠血清中檢測到對于抗原IL-12有特異性的抗體，即收獲小鼠脾，并且分離出脾細(xì)胞。然后通過眾所周知的技術(shù)來將脾細(xì)胞與任何合適的骨髓瘤細(xì)胞，例如從得自ATCC的細(xì)胞系SP20獲得的細(xì)胞融合。通過有限稀釋來選擇和克隆雜交瘤。然后通過本領(lǐng)域已知的方法分析雜交瘤克隆，以獲得分泌能夠結(jié)合IL-12的抗體的細(xì)胞。通常含有高水平抗體的腹水流體可通過用陽性雜交瘤克隆免疫小鼠來產(chǎn)生。在另一個實施方案中，產(chǎn)生抗體的無限增殖化雜交瘤可以由免疫動物獲得。免疫后，將動物殺死，把脾B細(xì)胞與無限增殖化骨髓瘤細(xì)胞融合是本領(lǐng)域眾所周知的。參見例如上文中的HarlowandLane。在優(yōu)選的實施方案中，骨髓瘤細(xì)胞不分泌免疫球蛋白多肽(非分泌性細(xì)胞系)。融合與抗生素選擇之后，使用IL-12或其部分或表達(dá)IL-12的細(xì)胞來篩選雜交瘤。在優(yōu)選的實施方案中，利用酶聯(lián)免疫分析(ELISA)或者放射免疫分析(RIA)進(jìn)行最初的篩選，優(yōu)選ELISA。ELISA篩選的實例記載于WO00/37504中，其引入本文以供參考。選擇產(chǎn)生抗-IL-12p40抗體的雜交瘤，克隆，并且進(jìn)一步篩選期望的特征，包括強健雜交瘤生長、高抗體產(chǎn)生和期望的抗體特征，下面進(jìn)一步討論。培養(yǎng)雜交瘤并且在同源動物體內(nèi)，在沒有免疫系統(tǒng)的動物，例如棵鼠中展開，或者在培養(yǎng)基中體外培養(yǎng)。篩選、克隆和擴(kuò)展雜交瘤的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。在優(yōu)選的實施方案中，雜交瘤是小鼠雜交瘤，如上所述。在另一個優(yōu)選的實施方案中，雜交瘤是在非人、非小鼠物種中產(chǎn)生的，例如大鼠、綿羊、豬、山羊、?；蝰R。在另一個實施方案中，雜交瘤是人雜交瘤，其中人非分泌性骨髓瘤與表達(dá)抗-IL-2抗體的人細(xì)胞融合。識別特異性表位的抗體片段可以通過已知技術(shù)產(chǎn)生。例如，本發(fā)明的Fab和F(ab')2片段可以通過使用酶將免疫球蛋白分子分解來制得，所述酶是例如木瓜蛋白酶(產(chǎn)生Fab片段s)或胃蛋白酶(產(chǎn)生F(ab')2片段)。F(ab片段含有可變區(qū)、輕鏈恒定區(qū)和重鏈的CHI區(qū)。2.使用SLAM的抗-IL-12p40單克隆抗體在本發(fā)明的另一個方面，利用本領(lǐng)域稱作篩選淋巴細(xì)胞抗體方法(SLAM)的方法從單一的分離的淋巴細(xì)胞制備重組抗體，如U.S.專利5，627,052,PCT公開WO92/02551和Babcock,J.S.等人(1996)Proc.Natl.Acad.ScLUSA93:7843-7848中所述。在該方法中，應(yīng)用抗原特異性溶血血小板測試來篩選章節(jié)I中描述的從任何一種免疫動物得到的分泌感興趣的抗體的單一細(xì)胞，例如'淋巴細(xì)胞，在抗原特異性溶血血小板測試中，抗原IL-12，IL-12的亞單位，或者其片段，利用接頭，例如生物素，與綿羊紅細(xì)胞偶聯(lián)，并且用來鑒定分泌對IL-12有特異性的抗體的單一細(xì)胞。鑒定感興趣的分泌抗體的細(xì)胞之后，通過逆轉(zhuǎn)錄酶-PCR從細(xì)胞獲得重鏈和輕鏈可變區(qū)cDNA,然后在哺乳動物細(xì)胞例如COS或CHO細(xì)胞中，在合適的免疫球蛋白恒定區(qū)(例如人恒定區(qū))的上下游表達(dá)這些可變區(qū)。用來自體內(nèi)篩選的淋巴細(xì)胞的擴(kuò)增的免疫球蛋白序列轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞，然后進(jìn)一步分析并體外篩選，例如通過使轉(zhuǎn)染細(xì)胞分離表達(dá)抗IL-12的抗體的細(xì)胞。進(jìn)一步體外操作擴(kuò)增的免疫球蛋白序列，例如通過體外親合性成熟方法，例如在PCT公開WO97/29131和PCT/^開WO00/56772中描述的方法。3.使用轉(zhuǎn)基因動物的抗-IL-12p40單克隆抗體在本發(fā)明的一個實施方案中，通過用IL-12抗原免疫包括人免疫球蛋白基因座全部或部分的非人動物來制備人抗體。在優(yōu)選的實施方案中，非人動物是XENOMOUSE轉(zhuǎn)基因小鼠，包括人免疫球蛋白基因座的大片段并且在小鼠抗體產(chǎn)生中缺乏的基因工程小鼠品系。參見，例如Green等人NatureGenetics7:13-21(1994)和美國專利5,916,771、5,939,598、5,985,615、5,998,209、6,075，181、6,091,001、6,114,598和6,130,364。還參見WO91/10741,1991年7月25日公開，WO94/02602，1994年2月3日公開，WO96/340%和WO96/33735,二者都是在1996年10月31日/>開，WO98/16654，1998年4月23日公開，WO98/24893，1998年6月11日公開，WO98/50433，1998年11月12日/>開，WO99/45031,1999年9月10日/>開，WO99/53049,1999年10月21日公開，WO0009560，2000年2月24日公開，和WO00/037504，2000年6月29日公開。XENOMOUSE轉(zhuǎn)基因小鼠產(chǎn)生全人抗體的成人-樣人抗體庫，并且產(chǎn)生抗原-特異性人Mab。XENOMOUSE轉(zhuǎn)基因小鼠通過導(dǎo)入兆堿基大小的人重鏈基因座和x輕鏈基因座的種系構(gòu)型YAC片段而包含大約80%人抗體庫。參見Mendez等人，NatureGenetics15:146-156(1997),GreenandJakobovitsJ.Exp.Med.188:483-495(1998)，該文獻(xiàn)/>開內(nèi)容引入本文以供參考。4.使用重組抗體庫的抗-IL-12單克隆抗體也可以利用體外方法來制備本發(fā)明的抗體，其中篩選抗體庫來鑒定具有期望的結(jié)合特異性的抗體。這樣篩選重組抗體庫的方法是本領(lǐng)域/>知的并且包括例如下面文獻(xiàn)中描述的方法Ladner等人U.S.專利5,223,409;Kang等人PCT公開WO92/18619;Dower等人PCT公開WO91/17271;Winter等人PCT公開WO92/20791;Markland等人PCT公開WO92/15679;Breitlmg等人PCT公開WO93/01288;McCafferty等人PCT公開WO92/01047;Garrard等人PCT公開WO92/09690;Fuchs等人(1991)Bio/Technology9:1370-1372;Hay等人(1992)HumAntibodHyhndomas3:81-85;Huse等人(1989)Science246:1275-1281;McCafferty等人，Nature(1990)348:552-554;Griffiths等人(1993)EMBOJ12:725-734;Hawkins等人(1992)JMoIBiol226:889-8%;Clackson等人(1991)Nature352:624-628;Gram等人(1992)PNAS89:3576-3580;Garrad等人(1991)Bio/Technology9:1373-1377;Hoogenboom等人(1991)NucAcidRes19:4133-4137;和Barbas等人(1991)PNAS88:7978-7982，US專利申請公開20030186374,和PCT公開WO97/29131,每一這些文獻(xiàn)的內(nèi)容都引入本文以供參考。重組抗體庫可以來自用IL-12或IL-23或IL-12或IL-23的部分免疫的個體?；蛘?，重組抗體庫可以來自棵個體，即沒有用IL-12或IL-23免疫的個體，例如從沒有用人IL-12或IL-23免疫的人個體獲得的人抗體庫。通過用包括人人IL-12p40的肽篩選重組抗體庫來篩選本發(fā)明的抗體，乂人而篩選識別人IL-12p40的那些抗體。實施這樣的篩選和選擇的方法是本領(lǐng)域公知的，例如上一段中的參考文獻(xiàn)中描述的。為了篩選對hIL-12具有特定結(jié)合親合性的本發(fā)明抗體，例如以特定解離速率常數(shù)從人IL-12離解的那些，能利用本領(lǐng)域公知的表面等離振子共振的方法來篩選具有期望的解離速率常數(shù)的抗體。為了篩選對hIL-12具有特定中和活性的本發(fā)明抗體，例如具有特定IQ。的那些，可以利用本領(lǐng)域公知的評價hIL-12活性的抑制作用的本領(lǐng)域公知的標(biāo)準(zhǔn)方法。在一個方面，本發(fā)明提供了結(jié)合人IL-12和/或人IL-23的分離的抗體或者其抗原結(jié)合部分。優(yōu)選地，抗體是中和抗體。優(yōu)選地，抗體是人抗體。在很多實施方案中，抗體是重組抗體或單克隆抗體。例如，本發(fā)明的抗體還可以使用本領(lǐng)域已知的各種噬菌體展示方法。在噬菌體展示方法中，在噬菌體顆粒表面上展示功能抗體結(jié)構(gòu)域，所述噬菌體顆粒攜帶編碼他們的多核普酸序列。特別是，這樣的噬菌體可用于展示由所有抗體或組合抗體庫(例如人或鼠)表達(dá)的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域。使用抗原，例如使用標(biāo)記的抗原或者結(jié)合或捕獲到固體表面或珠子上的抗原來選擇表達(dá)能結(jié)合感興趣抗原的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的噬菌體。在這些方法中使用的噬菌體通常是絲狀噬菌體，其包括fd和M13結(jié)合結(jié)構(gòu)域，這些結(jié)構(gòu)域是由具有重組融合到噬菌體基因III或基因VIII蛋白上的Fab、Fv或二硫鍵穩(wěn)定的Fv的噬菌體表達(dá)的。可用于制備本發(fā)明抗體的噬菌體展示方法的實例包括在下列文獻(xiàn)中公開的方法Brinkman等人，J.Immunol.Methods182:41-50(1995);Ames等人，J.Immunol.Methods184:177-186(1995);Kettleborough等人，Eur.J.Immunol.24:952-958(1994);Persic等人，Gene1879-18(1997);Burton等人，AdvancesinImmunology57:191-280(1994);PCT申請PCT7GB91/01134;PCT公開WO卯/02809;WO91/10737;WO92/01047;WO92/18619;WO93/11236;WO95/15982;WO95/20401;和U.S.專利5,698,426;5,223,409;5,403,484;5,580,717;5,427,908;5,750，753;5,821,047;5，571，698;5,427，908;5，516,637;5,780,225;5,658,727;5,733,743和5,969,108;每一這些文獻(xiàn)都全文引入本文以供參考。如上面的文獻(xiàn)中所述，噬菌體選擇之后，可從噬菌體中分離出抗體編碼區(qū)，并且用于產(chǎn)生包括人抗體或任何其他所需抗原結(jié)合片段的全部抗體，并且在任何所需宿主中表達(dá)，所述宿主包括哺乳動物細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞、；險物細(xì)胞、酵母和細(xì)菌，例如如下面信息描述。例如，還可以采用用于重組產(chǎn)生Fab、Fab'和F(ab')2片段的技術(shù)，使用本領(lǐng)域已知的方法，例如在下列文獻(xiàn)中公開的方法PCT公開WO92/22324;Mulli腿等人，BioTechn甲es12(6):864-869(1992);和Sawai等人，AJRI34:26-34(1995);以及Better等人，Science240:1041-1043(1988)(所述文獻(xiàn)全文引入本文以供參考)?？捎糜诋a(chǎn)生單鏈Fv和抗體的技術(shù)的實例包括在下列文獻(xiàn)中公開的方法U.S.專利4,946,778和5,258,498;Huston等人，MethodsmEnzymology203:46-88(1991);Shu等人,PNAS90:7995-7999(1993);和Skerra等人，Science240:1038-1040(1988)。作為通過噬菌體展示來篩選重組抗體庫的替代方法，可以采用本領(lǐng)域已知的用于篩選大組合庫的其他方法來鑒定本發(fā)明的雙特異性抗體。一種類型的替代表達(dá)系統(tǒng)是這樣的系統(tǒng)，其中重組抗體庫是作為RNA-蛋白融合體來表達(dá)，如Szostak和Roberts的PCT公開WO98/31700,以及Roberts,R.W.和Szostak,J.W.(1997)Proc.Natl.Acad.Sci.USA94:12297-12302中所述。在該系統(tǒng)中，在mRNA與肽或蛋白之間產(chǎn)生共價融合體，其通過在體外翻i,合成mRNA而編碼，所述mRNA在3'末端攜帶噤呤霉素，一種肽基接受者抗生素。因此，特異性mRNA可從mRNA的復(fù)雜混合物(例如組合庫)中富集，基于編碼的肽或蛋白例如抗體或其部分的性質(zhì)，例如抗體或其部分與雙特異性抗以通過如上所述的重組工具來表達(dá)(例如在哺乳動物宿主細(xì)月包中表達(dá))，此外，可以通過另外輪次的mRNA-肽融合體篩選來進(jìn)行進(jìn)一步的親合性成熟，其中已經(jīng)將突變引入到初始選擇的序列內(nèi)，或者通過如上所述的用于重組抗體體外親合性成熟的其他方法。在另一個方法中，本發(fā)明抗體還可以使用本領(lǐng)域已知的酵母展示方法來產(chǎn)生。在酵母展示方法中，使用基因方法來把抗體結(jié)構(gòu)域結(jié)合在酵母細(xì)胞壁上，并且在酵母表面上展示他們。特別是，這樣的酵母可用于展示從所有抗體或組合抗體庫(例如人或鼠)表達(dá)的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域?？捎糜谥苽浔景l(fā)明抗體的酵母展示方法的實例包括在Wittmp,等人U.S.專利6,699,658中公開的方法，其引入本文以供參考。B.產(chǎn)生重組IL-Up40抗體通過本領(lǐng)域7>知的各種技術(shù)可以制備本發(fā)明的抗體。例如，從宿主細(xì)胞表達(dá)，其中編碼重鏈和輕鏈的表達(dá)載體通過標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)被轉(zhuǎn)染導(dǎo)宿主細(xì)胞中。各種形式的術(shù)語"轉(zhuǎn)染"意在包括通常用于將外源DNA導(dǎo)入原核或真核宿主細(xì)胞中的各種技術(shù)，例如電穿孔、磷酸鈣沉淀、DEAE-葡聚糖轉(zhuǎn)染等。雖然有可能在原核或真核宿主細(xì)胞中表達(dá)本發(fā)明的抗體，但是在真核細(xì)胞中表達(dá)是優(yōu)選的，最優(yōu)選在哺乳動物宿主細(xì)胞中表達(dá)抗體，因為這樣的真核細(xì)胞(特別是哺乳動物細(xì)胞)比原核細(xì)胞更有可能裝配和分泌適當(dāng)?shù)卣郫B并具有免疫活性的抗體。用于表達(dá)本發(fā)明的重組抗體的優(yōu)選的哺乳動物宿主細(xì)胞包括中國倉鼠卵巢細(xì)胞(CHO細(xì)胞)(包括dhfr-CHO細(xì)胞，描述于UrlaubandChasm,(1980)Proc.Natl.Acad.ScLUSA77:4216-4220中，與DHFR選4奪標(biāo)記物一起使用，例如描述在RJ.KaufmanandP.A.Sharp(1982)Mol.Biol.159:601-621中)，NSO骨髓瘤細(xì)胞，COS細(xì)胞和SP2細(xì)胞。當(dāng)將編碼抗體基因的重組表達(dá)載體導(dǎo)入哺乳動物宿主細(xì)胞中時，通過將宿主細(xì)胞培養(yǎng)足以使抗體在宿主細(xì)胞中表達(dá)的時間來制備抗體，或者，更優(yōu)選地，抗體分泌到宿主細(xì)胞在其中生長的培養(yǎng)基中。利用標(biāo)準(zhǔn)蛋白純化技術(shù)從培養(yǎng)基中回收抗體。宿主細(xì)胞還可以用來制備功能抗體片段例如Fab片段或scFv分子。理解上述方法中的變化在本發(fā)明的范圍內(nèi)。例如，可以預(yù)期用編碼本發(fā)明的抗體的輕鏈和/或重鏈的功能片段的DNA來轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞。還可以利用重組DNA技術(shù)來去除對于與感興趣的抗原結(jié)合不是必需的編碼輕鏈和重鏈之一或二者的DNA的一些或部分。由這樣截短的DNA分子表達(dá)的分子也包括在本發(fā)明的抗體內(nèi)。另外，可以制備雙功能抗體，其中一個重鏈和一個輕鏈?zhǔn)潜景l(fā)明的抗體，而另一個重鏈和輕鏈對于感興趣的抗原之外的抗原是特異性的，通過標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)交聯(lián)方法使本發(fā)明的抗體與第二抗體交聯(lián)。在本發(fā)明抗體或其抗原-結(jié)合部分的重組表達(dá)的優(yōu)選系統(tǒng)中，通過磷酸鈣介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染，將編碼抗體重鏈和抗體輕鏈的重組表達(dá)載體導(dǎo)入dhfr-CHO細(xì)胞。在重組表達(dá)載體中，抗體重鏈和輕鏈基因各自可操縱地連接于CMV增強子/AdMLP啟動子調(diào)控元件，驅(qū)動高水平基因轉(zhuǎn)錄。重組表達(dá)載體還帶有DHFR基因，其用于使用曱氨喋呤篩選/擴(kuò)增用載體轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞的篩選。培養(yǎng)選擇的轉(zhuǎn)化子宿主細(xì)胞讓它表達(dá)抗體重鏈和輕鏈，并且從培養(yǎng)基回收完整抗體。利用標(biāo)準(zhǔn)分子生物技術(shù)來制備重組表達(dá)載體，轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞，選擇轉(zhuǎn)化子，培養(yǎng)宿主細(xì)胞，并且從培養(yǎng)基回收抗體。本發(fā)明還提供通過在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)本發(fā)明的宿主細(xì)胞直到合成本發(fā)明的重組抗體來合成本發(fā)明的重組抗體的方法。該方法進(jìn)一步包括從培養(yǎng)基分離重組抗體。1.抗IL-12p40抗體表5是本發(fā)明優(yōu)選的抗-hIL-12p40抗體的氨基酸序列一覽。表5:VH和VL區(qū)的氨基酸序列一覽<table>tableseeoriginaldocumentpage72</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage73</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage74</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage75</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage76</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage77</column></row><table>上面分離的抗-IL-12p40抗體CDR序列確立了根據(jù)本發(fā)明分離的并且包含包括下面表6列出的CDR序列的多肽的IL-12p40結(jié)合蛋白的新家族。為了制備和選擇在hIL-12和/或hIL-23方面具有優(yōu)選的IL-12p40結(jié)合和/或中和活性的本發(fā)明的CDR,可以使用本領(lǐng)域/>知的用于產(chǎn)生結(jié)合蛋白的標(biāo)準(zhǔn)方法以及用于評估那些結(jié)合蛋白的IL-12和/或IL-23結(jié)合和/或中和特征的標(biāo)準(zhǔn)方法，包括但不限于本文中具體描述的方法。<table>tableseeoriginaldocumentpage78</column></row><table>嵌合型抗體是這樣的分子，其中抗體的不同部分源自不同動物物種，例如具有源自鼠單克隆抗體的可變區(qū)和人免疫球蛋白恒定區(qū)的抗體。用于制備嵌合型抗體的方法是本領(lǐng)域已知的，并且詳細(xì)描述在實施例2.1中。參見例如Momson，Science229:1202(1985);Oi等人，BioTechniques4:214(1986);Gillies等人，(1989)J.Immunol.Methods125:191-202;U.S.專利5,807,715;4,816,567;和4,816,397，其全文引入本文以供參考。此外，可以使用通過將得自具有適當(dāng)抗原特異性的小鼠抗體的基因與得自具有適當(dāng)生物活性的人抗體的基因一起剪接而開發(fā)出的制備"親合性抗體"的技術(shù)(Momson等人，1984，Proc.Natl.Acad.Sci.81:851-855;Neuberger等人，1984,Nature312:604-608;Takeda等人，1985，Nature314:452-454,其全文引入本文以供參考)。在一個實施方案中，本發(fā)明嵌合型抗體是這樣制得的用人IgGl恒定區(qū)替代在章節(jié)1中描述的鼠單克隆抗人IL-12抗體的重鏈恒定區(qū)。在一個具體實施方案中，本發(fā)明的嵌合型抗體包括重鏈可變區(qū)(VH)，所述重鏈可變區(qū)包括以下氨基酸序列SEQIDNO:35;SEQIDNO:37;SEQIDNO:39;SEQIDNO:41;SEQIDNO:43;SEQIDNO:45;SEQIDNO:47;SEQIDNO:49;SEQIDNO:51;或SEQIDNO:53的氨基酸序列，和輕鏈可變區(qū)(VL),所述輕鏈可變區(qū)包括以下氨基酸序列SEQIDNO:36;SEQIDNO:38;SEQIDNO:40;SEQIDNO:42;SEQIDNO:44;SEQIDNO:46;SEQIDNO:48;SEQBDNO:50;SEQIDNO:52;或SEQIDNO:54的序列。3.抗IL-12p40CDR接枝抗體本發(fā)明的CDR-接枝抗體包含來自人抗體的重鏈和輕鏈可變區(qū)序列，其中VH和/或VL的一個或多個CDR區(qū)被本發(fā)明鼠抗體的CDR序列替代。得自人抗體的框架序列可以起CDR接枝的模板的作用。然而，直鏈替代到這樣的框架上經(jīng)常導(dǎo)致對于抗原的結(jié)合親合力的某些損失。人抗體與初始鼠抗體的同源性越高，把鼠CDR與人框架組合起來將在CDR中引入降低親合力的畸變的可能性就越小。因此，優(yōu)選地，選擇用來替代除了CDR之外的鼠可變框架的人可變框架與鼠抗體可變區(qū)框架具有至少65%的序列同一性。更優(yōu)選地，人可變區(qū)與除了CDR之外的鼠可變區(qū)具有至少70%的序列同一性。甚至更優(yōu)選地，人可變區(qū)與除了CDR之外的鼠可變區(qū)具有至少75%的序列同一性。最優(yōu)選地，人可變區(qū)與除了CDR之外的鼠可變區(qū)具有至少80%的序列同一性。用于制備親合性抗體的方法是本領(lǐng)域已知的，并且詳細(xì)描述在實施例2.2中(還參見EP239,400;PCT公開WO91/09967;U.S.專利5,225，539;5,530,101;和5,585,089)，修飾或加工(EP592,106;EP519,596;Padlan,MolecularImmunology28(4/5):489-498(1991);Studnicka等人，ProtemEngineering7(6):805-814(1994);Roguska等人，PNAS91:969-973(1994))和鏈穿梭(U.S.專利5,565,352)。在具體的實施方案中，本發(fā)明提供了具有如表7中所述Vh和/或Vd連的CDR接枝抗體。表7:CDR接枝抗體<table>tableseeoriginaldocumentpage81</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage82</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage83</column></row><table>4.抗IL-12p40人源化抗體人源化抗體是得自非人物種抗體的抗體分子，其結(jié)合所需抗原，蛋白分子^框架區(qū)。已知的人Ig序列是公開的，例如i,www,ncbi.nlm.nih.gov/entrez-/query.fcgi;www,atcc.org/phage/hdb.html;www,sciquest,com/;www,abc咖.com/;www.antibodyresource.com/onlineconip.html;www.pubUc.iastate.edu/.about.pedro/research—tools.html;輕w.mgen.uni-heidelberg,de/SD/n7ir.html;www.wMreeman.com/immunology/CH-05/kuby05.htm;wvvw.Ubrary.thinkquest.org/12429/Immune/Antibody.html;www.hhmi.org/graiits/lectures/1996/vlab/;www.path.cam.ac,uk/.about.rarc7/m-ikeimages.html;www.antibodyresouTce.com/;mcb.harvard.edu/BioLinks/Iramuno-logy.html.www.immunologylink.com/;pathbox.wustl.edu/,about.hcenter/index.-html;www.biotech.ufl.edu/.about.hcl/;www.pebio.com/pa/340913/3409B.himl-;www.nal.usda.gov/awic/pubs/antibody/;www.m.ehime-u.acjp/.about.yasuhito-/Elisa.hUnl;www.biodesign.com/table.asp;www.icnet.uk/axp/facs/davies/lin-ks.htinl;www.biotech.ufl.edu/.about.fccl/protocol.html;www.isac-net,org/sites"geo.html;aximtl.inat.uni-marburg.de/.about.rek/AEP-Start.html;baserv.uci.kun.nl/.aboutjraats/linksI.html;www>recab.uni-hd.de/immuno.bme.nwu.e<iu/;www.mrc-cpe.c咖.ac.uk/imt-doc/pu-blic/INTRO.html;www.ibt.unam.mx/vir/V—:mice.html;imgt.cnusc,fr:8104/;www.biochem.ucl.ac.uk/,about.martin/abs/index.html;antibody.bath.ac:uk/;abgen.cvm.tamu.edu/lab/wwwabgen.html;www,unizh.ch/,about.honegger/AHOsem-inar/Slide01.html;www.cryst.bbk.ac.uk/.about.\ibcg07s/;www.nimr.mrc.ac.uk/CC/ccaewg/ccaewg.htm;www.path.cam.ac.uk/.about.mrc7/h-umanisation/TAHHP.html;w商.ibt.unam.mx/vir/structure/stat一ajm.html;www.biosci.missouri.edu/smithgp/index.html;www.cryst.bioc.canxac.ulc/.abo-ut.ftnolina/Web-pages/Pept,spottech.html;www.jerini.de/frroducts.htm;www.patents.ib:tn.com/ibm.htinl.Kabatetat.,SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,U.S.Dept.Health(1983),其全文引入本文以供參考。這樣輸入的序列可用于致免疫，或者降低、提高或改變結(jié)合力、親合力、結(jié)合速率常數(shù)(on-rate)、解離速率常數(shù)(off-rate)、親合性、特異性、半存留期或任何其他合適的特征。人框架區(qū)中的框架殘基可以用來自CDR供體抗體的相應(yīng)殘基取代，以改變，優(yōu)選提高抗原結(jié)合力。這些框架取代是通過本領(lǐng)域眾所周知的方法鑒定的，例如，通過制作CDR與框架殘基之間的相互作用的模型以鑒定出對于抗原結(jié)合與序列比較很重要的框架殘基，以確定出在特定位置上的異常框架殘基(參見例如Queen等人，U.S.專利5,585,089;Riechmann等人，Nature332:323(1988),其全文引入本文以供參考)。三維免疫球蛋白通常是可獲得的，并且為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知。計算機程序是可獲得的，其闡明和顯示所選免疫球蛋白序列的可能三維構(gòu)象結(jié)構(gòu)。檢查這些顯示使得能夠分析殘基在候選免疫球蛋白序列的功能中的可能作用，即分析能夠影響候選免疫球蛋白結(jié)合其抗原的能力。以這種方式，可以選擇FR殘基，并且從共有序列和輸出序列組合，以獲得所需抗體特征例如對于靶抗原的親合性增加。通常情況下，CDR殘基直接并且顯著參與影響抗原結(jié)合?？梢允褂帽绢I(lǐng)域已知的技術(shù)將抗體人源化，例如在以下文獻(xiàn)中描述的方法Jones等人，Nature321:522(1986);Verhoeyen等人，Science239:1534(1988))，Sims等人，J.Immunol.151:2296(1993);ChothiaandLesk,J.Mol.Biol.196:901(1987)，Carter等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.89:4285(1992);Presta等人，J.Immunol.151:2623(1993),Padlan,MolecularImmunology28(4/5):489-498(1991);Studnicka等人，ProteinEngmeermg7(6):805-814(1994);Roguska.等人，PNAS91:969-973(1994);PCT公開WO91/09967，PCT/:US98/16280、US96/18978、US91/09630、US91/05939、US94/01234、GB89/01334、GB91/01134、GB92/01755;WO90/14443、WO90/14424、WO90/14430、EP229246、EP592,106;EP519,596、EP239,400、U.S.PatNos.5,565,332、5,723,323、5,976,862、5,824,514,5,817,483、5814476、5763192、5723323、5,766886、5,714,352,6,204,023、6,180,370、5,693,762、5,530,101、5,585,089、5,225,539;4,816,567，每一文獻(xiàn)都全文引入本文，包括其中所引用的文獻(xiàn)，以供參考。C.生成抗體和抗體-生成性細(xì)胞系優(yōu)選地，本發(fā)明的抗-IL-12p40抗體表現(xiàn)出降低或中和IL-12活性的高能力，例如通過本領(lǐng)域已知的幾種體外和體內(nèi)分析中的任一種來評估(例如參見實施例1丄C)。例如，這些抗體中和IL-12-誘導(dǎo)的PHA胚細(xì)胞產(chǎn)生干擾素-Y,其中ICs。值為至少約IO"M,約10力M，或約10"°M。優(yōu)選地，本發(fā)明的抗-IL-12p40抗體還表現(xiàn)出降低或中和IL-23活性的高能力。在優(yōu)選的實施方案中，分離的抗體或其抗原結(jié)合部分結(jié)合人BL-12p40，其中抗體或其抗原結(jié)合部分以約O.ls"或更小的解離速率常數(shù)(K。ff)從人IL-12p40上解離，這是通過表面等離子共振測定的，或者以約1x10-6M或更小的IQ。抑制人IL-12和/或人IL-23活性?；蛘撸贵w或其抗原結(jié)合部分可以以約1x10—2s"或更小的解離速率常數(shù)從人IL-12p40上解離，這是通過表面等離子共振測定的，或者可以以約1x10-7M或更小的IC5。抑制人IL-12和/或人IL-23活性?；蛘撸贵w或其抗原結(jié)合部分可以以約1x10—3s"或更小的解離速率常數(shù)從人IL-12p40上解離，這是通過表面等離子共振測定的，或者可以以約1x10-8M或更小的ICs。抑制人IL-12和/或人IL-23?；蛘?，抗體或其抗原結(jié)合部分可以以約1x10—4s—'或更小的解離速率常數(shù)從人IL-12p40上解離，這是通過表面等離子共振測定的，或者可以以約1x1(^M或更小的ICs。抑制人IL-12和/或人IL-23活性。或者，抗體或其抗原結(jié)合部分可以以約lx10-5s"或更小的解離速率常數(shù)從人IL-12p40上解離，這是通過表面等離子共振測定的，或者可以以約1x10-1QM或更小的ICs。抑制人IL-12和/或人IL-23活性?；蛘撸贵w或其抗原結(jié)合部分可以以約1x10-5s"或更小的解離速率常數(shù)從人IL-12p40上解離，這是通過表面等離子共振測定的，或者可以以約1x10"M或更小的IC50抑制人IL-12和/或人IL-23活性。在一些實施方案中，抗體包括重鏈恒定區(qū)，例如IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgE、IgM或IgD恒定區(qū)。優(yōu)選地，重鏈恒定區(qū)是IgGl重^^f亙定區(qū)或IgG4重《連恒定區(qū)。此外，抗體可以包含輕《連恒定區(qū)，k輕鏈恒定區(qū)或人輕鏈恒定區(qū)。優(yōu)選地，抗體包含k輕鏈恒定區(qū)?；蛘?，抗體部分可以是例如Fab片段或單鏈Fv片段。替換Fc部分的氨基酸殘基來改變抗體效應(yīng)子功能是本領(lǐng)域已知的(Wmter，等人USPATNOS5,648,260;5624821)?？贵w的Fc部分介導(dǎo)幾種重要的效應(yīng)子功能，例如抗體和抗原-抗體復(fù)合物的細(xì)胞因子誘導(dǎo)，ADCC,吞噬作用，補體依賴性細(xì)胞毒性(CDC)和半存留期/清除速率。在某些情況下，這些效應(yīng)子功能對于治療抗體是所希望的，而在其他情況下，這些效應(yīng)子功能可能是不需要的或者甚至是有害的。一些人IgG同種型，特別是IgGl和IgG3分別通過與FcyR和補體CIq結(jié)合來介導(dǎo)ADCC和CDC。新生兒Fc受體(FcRn)是決定抗體循環(huán)半存留期的關(guān)鍵成分。在另一個實施方案中，至少一個氨基酸殘基在抗體的恒定區(qū)被替換，例如抗體的Fc區(qū)，這樣抗體的效應(yīng)子功能被改變一個實施方案提供了標(biāo)記的結(jié)合蛋白，其中本發(fā)明抗體或抗體部分衍生至或連接到另一個功能分子(例如另一種肽或蛋白)上。例如，本發(fā)明的標(biāo)記的結(jié)合蛋白可以通過把本發(fā)明抗體或抗體部分與一個或多個其他分子實體連接(通過化學(xué)偶聯(lián)、基因融合、非共價締合或其他)來獲得，所述其他分子實體是例如另一種抗體(例如雙特異性抗體或二抗體)、可檢測到的試劑、細(xì)胞毒性劑、藥劑和/或可以介導(dǎo)抗體或抗體部分與另一個分子(例如鏈霉抗生物素蛋白或多組氨酸標(biāo)記物)的締合的蛋白或肽。焚光素、萸光素;硫氰酸酯:羅;明、5-二曱基胺-i-萘磺酰i、藻紅蛋白等。還可以用可檢測酶將抗體衍生化，例如用堿性磷酸酶、辣根過氧化物酶、葡萄糖氧化酶等等能夠。當(dāng)用可檢測酶將抗體衍生化時，通過加入另外的試劑;險測它，酶用來產(chǎn)生可片全測反應(yīng)產(chǎn)物。例如，當(dāng)存在可檢測試劑辣根過氧化物酶時，加入過氧化氬和二氨基聯(lián)苯胺產(chǎn)生有色反應(yīng)產(chǎn)物，其是可檢測的。也可以用生物素將抗體衍生物化，并且通過間接測定抗生物素蛋白或鏈酶抗生物素蛋白結(jié)合來測定。本發(fā)明的另一個實施方案提供了結(jié)晶結(jié)合蛋白。優(yōu)選地，本發(fā)明涉及本文公開的全抗-IL-12p40抗體及其片段的結(jié)晶，含有這樣的結(jié)晶的制劑和組合物。在一個實施方案中，結(jié)晶的結(jié)合蛋白具有比結(jié)合蛋白的可溶相應(yīng)物更長的體內(nèi)半存留期。在另一個實施方案中，結(jié)合蛋白在結(jié)晶之后保留了生物活性。根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法和根據(jù)中公開的，可以制備本發(fā)明的結(jié)晶結(jié)合蛋白，WO02072636在此引作參考。本發(fā)明的另一個實施方案提供了糖基化結(jié)合蛋白，其中抗體或其抗原-結(jié)合部分包括一個或幾個糖殘基。最初的體內(nèi)蛋白質(zhì)的產(chǎn)生可以進(jìn)一步加工，這是翻"^后修飾。特別地，糖(糖基)殘基可以酶促加上，這個過程是糖基化作用。得到的帶有共價連接的寡糖側(cè)鏈的蛋白質(zhì)已知是糖基化蛋白質(zhì)或糖蛋白。抗體是糖蛋白，其在Fc結(jié)構(gòu)域以及可變區(qū)中具有一個或多個糖殘基。Fc結(jié)構(gòu)域中的糖殘基對于Fc結(jié)構(gòu)域的效應(yīng)子功能具有重要影響，對于抗體的抗原結(jié)合或半存留期有最小影響(R.Jeffens,Biotechnol.Prog.21(2005),pp.11-16)。相反，可變區(qū)的糖基化可對抗體的抗原結(jié)合活性具有影響?？勺儏^(qū)中的糖基化可對抗體結(jié)合親合力具有負(fù)面影響，這可能是由于立體阻礙所致(Co,M.S.,等人，Mol.Immunol.(1993)30:1361-1367)，或者導(dǎo)致對于抗原的親合力增力口(Wallick，S.C.,等人，Exp.Med.(1988)168:1099-1109;Wright,A.，等人，EMBOJ.(1991)10:27172723)。本發(fā)明的一個方面涉及產(chǎn)生糖基化位點突變體，其中結(jié)合蛋白的O-或N-連接糖基化位點已經(jīng)突變。本領(lǐng)域技術(shù)人員可使用標(biāo)準(zhǔn)眾所周知的技術(shù)來產(chǎn)生這樣的突變體。保留生物活性，但是具有增加或降低的結(jié)合活性的糖基化位點突變體是本發(fā)明的另一個目的，在另一個實施方案中，本發(fā)明抗體或抗原結(jié)合部分的糖基化被修飾。例如，可以制得無糖基化抗體(即抗體缺乏糖基化)。可以改變糖基化，以例如提高抗體對于抗原的親合力。這樣的糖修飾可以通過例如改變抗體序列內(nèi)的一個或多個糖基化位點來實現(xiàn)。例如，可以產(chǎn)生一個或多個氨基酸取代，導(dǎo)致一個或多個可變區(qū)糖基化位點被刪除，從而刪除在該位點的糖基化位點。這樣的非糖基化可提高抗體對于抗原的親合力。這樣的方法進(jìn)一步詳細(xì)描述于PCT公開W〇2003016466A2以及U.S.專利5,714,350和6,350,861中，每一專利都全文引入本文以供參考。此外或者供選擇地，可以制得本發(fā)明的修飾抗體，其具有改變的糖基化類型，例如具有少量巖藻糖基殘基的低巖藻糖化抗體，或具有增加的等分GlcNAc結(jié)構(gòu)。已經(jīng)證實這樣改變的糖基化模式能夠提高抗體的ADCC能力。這樣的糖修飾可以通過例如在具有改變的糖基化機制的宿主細(xì)胞中表達(dá)抗體來實現(xiàn)。具有改變的糖基化機制的細(xì)胞已經(jīng)在現(xiàn)有技術(shù)中描述過，并且可以用作宿主細(xì)胞，以表達(dá)本發(fā)明的重組宿主細(xì)胞，由此產(chǎn)生具有改變的糖基化的抗體。參見例如Shields,R.L.等人(2002)J.Biol.Chem.277:26733-26740;Umana等人(1999)Nat.Biotech.17:176-1,以及歐洲專利EP1,176,195;PCT公開WO03/035835;WO99/5434280，每一所述文獻(xiàn)都全文引入本文以供參考。蛋白質(zhì)糖基化作用取決于感興趣的蛋白質(zhì)的氨基酸序列，以及其中表達(dá)蛋白質(zhì)的宿主細(xì)胞。不同的生物體可以產(chǎn)生不同的糖基化作用酶(例如糖基轉(zhuǎn)移酶和糖苷酶)，并且具有不同的可利用底物(核苷酸糖類)。由于這樣的因素，蛋白糖基化模式和糖基殘基的組成可以根據(jù)其中表達(dá)特定蛋白質(zhì)的宿主系統(tǒng)而不同。本發(fā)明中使用的糖基殘基可以包括但不限于葡萄糖、半乳糖、甘露糖、巖藻糖、N-乙酰氨基葡萄糖和唾液酸。優(yōu)選地，糖基化結(jié)合蛋白包括糖基化殘基，使得糖基化模式是人的。本領(lǐng)域技術(shù)人員公知不同的蛋白糖基化作用可以產(chǎn)生不同的蛋白質(zhì)特征。例如，與哺乳動物例如CHO細(xì)胞系中表達(dá)的相同蛋白質(zhì)相比，微生物宿主例如使用酵母內(nèi)源途徑的酵母中產(chǎn)生的糖基化的治療性蛋白質(zhì)的效力可能被減小。這樣的糖蛋白在人體中也可以是免疫原性的并且具有給藥后減小的體內(nèi)半存留期。人和其他動物中的特異受體可以識別特異糖基殘基并且促進(jìn)蛋白質(zhì)從血流中的快速清除。其他副作用包括蛋白質(zhì)折疊、可溶性、對蛋白酶的靈敏性、運輸、轉(zhuǎn)運、區(qū)室化、分泌、被其他蛋白質(zhì)或因子識別、抗原性或變應(yīng)原性的改變。因此，醫(yī)師可能優(yōu)選具有特定糖基化作用組成和模式的治療性蛋白質(zhì)，例如與人細(xì)胞中或關(guān)注的個體動物的物種-特異性細(xì)胞中產(chǎn)生的相同或至少相A乂的壽唐基4匕組成和沖莫式。通過基因修飾宿主細(xì)胞來表達(dá)異源糖基化酶，可以實現(xiàn)與宿主細(xì)胞不同的糖基化蛋白的表達(dá)。應(yīng)用本領(lǐng)域公知的技術(shù)，醫(yī)師可以獲得表現(xiàn)出人蛋白糖基化作用的抗體或其抗原-結(jié)合部分。例如，對酵母菌抹進(jìn)行基因修飾來表達(dá)非天然存在的糖基化酶，使得這些酵母菌抹中產(chǎn)生的糖基化蛋白質(zhì)(糖蛋白)具有與動物細(xì)胞，特別是人細(xì)胞產(chǎn)生的相同的蛋白糖基化作用(U.S專利申請20040018590和20020137134以及PCT公開WO2005100584A2)。除了結(jié)合蛋白以外，本發(fā)明還涉及對于這樣的本發(fā)明結(jié)合蛋白具有特異性的抗獨特型(抗-Id)抗體?？?Id抗體是這樣的抗體，其識別通常與另一抗體的抗原結(jié)合區(qū)締合的獨特決定簇?？?Id可以通過用結(jié)合蛋白或含有CDR的其區(qū)域免疫來制得。免疫的動物將識別免疫化抗體的獨特型決定蔟并且對其作出反應(yīng)，產(chǎn)生抗-Id抗體?？?Id抗體還可以用作"免疫原"以在另一動物中誘導(dǎo)免疫反應(yīng)，產(chǎn)生所謂的抗-抗-Id抗體。此外，本領(lǐng)域技術(shù)人員明白，使用經(jīng)基因工程處理的表達(dá)各種糖基化酶的宿主細(xì)胞庫，可以表達(dá)感興趣的蛋白質(zhì)，使得庫中成員宿主細(xì)胞產(chǎn)生具有不同糖基化作用模式的感興趣的蛋白質(zhì)。醫(yī)師可以選擇并分離具有特定新糖基化作用模式的感興趣的蛋白質(zhì)。優(yōu)選地，具有特定的選擇的新的糖基化作用模式的蛋白具有改善的或改變的生物性質(zhì)。D.抗-IL-12p40抗體的用途由于他們與人IL-12p40結(jié)合的能力，本發(fā)明的抗-人IL-12p40抗體或者其部分能用來檢測IL-12和/或人IL-23(例如生物樣品例如血清或血漿中的)，利用常規(guī)的免疫分析，例如常用的酶聯(lián)免疫吸著測定法(ELISA)、放射免疫測定法(RIA)或組織免疫組織化學(xué)法。本發(fā)明提供檢測生物樣品中IL-12和/或人IL-23的方法，包括使生物樣品接觸本發(fā)明的抗體或抗體部分，并且檢測與IL-12和/或人IL-23結(jié)合的抗體(或抗體部分)或沒有結(jié)合的抗體(或抗體部分)，從而檢測生物樣品中的IL-12和/或人IL-23。用可檢測物質(zhì)直接或間接標(biāo)記抗體有利于結(jié)合或沒有結(jié)合的抗體的檢測。合適的可檢測物質(zhì)包括各種酶、輔基、熒光材料、發(fā)光材料和放射性材料。合適的酶的例子包括辣根過氧化物酶、石成性磷酸酶、(3-半乳糖苷酶或乙酰膽石成酯酶；合適的輔基復(fù)合體的例子包括鏈霉抗生物素蛋白/生物素和抗生物素蛋白/生物素；合適的熒光材料的例子包括7-羥基香豆素、熒光素、熒光素異硫氰酸酯、羅丹明、二氯三喚基胺熒光素、丹磺酰氯或藻紅蛋白；發(fā)光材料的例子包括魯米諾；合適的放射性材料的例子包括3H、14C、35S、90Y、"Tc、mIn、I25I、131I、177Lu、欣Ho或"3Sm。供標(biāo)記抗體可選擇的，通過使用用可檢測物質(zhì)標(biāo)記的人IL-12標(biāo)準(zhǔn)物和沒有標(biāo)記的抗-人IL-12p40抗體的竟?fàn)幟庖邷y定能測定生物液體中的人IL-12。在該項分析中，生物樣品，標(biāo)記的rhIL-12標(biāo)準(zhǔn)物和抗-人IL-12p40抗體合并，并且測定與沒有標(biāo)記的抗體結(jié)合的標(biāo)記的rhIL-12標(biāo)準(zhǔn)物的量。生物樣品中，人IL-12的量與和抗-IL-12p40抗體結(jié)合的標(biāo)記的rhIL-12標(biāo)準(zhǔn)物的量成反比。類似地，在生物流體中人IL-23也可以通過使用用可檢測物質(zhì)標(biāo)記的rhIL-23標(biāo)準(zhǔn)物和沒有標(biāo)記的抗-人IL-12p40抗體的竟?fàn)幟庖叻治鰜頊y定。本發(fā)明的抗體和抗體部分能夠在體外和體內(nèi)中和人IL-12和/或人IL-23活性。因此，例如，在含有hIL-12和/或hIL-23的細(xì)胞培養(yǎng)物中,哺乳動物個體中，這樣的本發(fā)明的抗體和抗體部分能用來抑制IL-12和/或IL-23活性。在一個實施方案中，本發(fā)明提供了抑制hIL-12和/或hIL-23活性的方法，包括使hIL-12和/或hIL-23接觸本發(fā)明的抗體或抗體部分，使得hIL-12和/或hIL-23活性被抑制。例如，在含有或懷疑含有hIL-12和/或hIL-23的細(xì)胞培養(yǎng)物中，向培養(yǎng)基加入本發(fā)明的抗體或抗體部分，以抑制培養(yǎng)物中的hIL-12和/或hIL-23活性。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供減小個體中hIL-12和/或hIL-23活性的方法，有利地在患有其中IL-12或IL-23活性是有害的疾病或病癥的患者中減小hIL-12和/或hIL-23活性。本發(fā)明提供在患有這樣的疾病或病癥的個體中減小IL-12和/或IL-23活性的方法，該方法包括對個體施用本發(fā)明的抗體或抗體部分，使得患者體內(nèi)IL-12和/或IL-23活性被減小。優(yōu)選地，IL-12是人IL-12,IL-23是人IL-23,并且個體是人個體?；蛘?，可以是可以表達(dá)本發(fā)明抗體能夠結(jié)合的IL-12和/或IL-23的哺乳動物。還有，個體還可以是已經(jīng)導(dǎo)入了IL-12和/或IL-23的哺乳動物(例如通過施用IL-12和/或IL-23或者通過IL-12和/或IL-23轉(zhuǎn)基因的表達(dá))。為了治療目的，可以對人個體施用本發(fā)明的抗體。此外，為了獸醫(yī)的目的或者作為人疾病的動物模型，可對表達(dá)其中抗體能結(jié)合的IL-12和/或IL-23的非人哺乳動物施用本發(fā)明的抗體。關(guān)于后一種情況，這樣的動物模型對于評價本發(fā)明的抗體的治療效力是有用的(例如劑量試驗和給藥持續(xù)時間)。如本文使用的術(shù)語"其中IL-12和/或IL-23活性是有害的病癥"意在包括其中已經(jīng)確診患有疾病的患者體內(nèi)存在IL-12和/或IL-23是或者懷疑是疾病病理原因或者使疾病惡化原因的因素的疾病或其他病癥。因此，其中IL-12和/或IL-23活性是有害的疾病是其中預(yù)期IL-12和/或IL-23活性的減小能夠減輕疾病的癥狀和/或進(jìn)展的疾病?；加屑膊〉膫€體的生物液體中IL-12和/或IL-23濃度的增加可以證實這種疾病(例如個體的血清、血漿、滑液等中IL-18濃度的增加)，利用例如上述抗-IL-12p40抗體能檢測。能使用本發(fā)明抗體治療的病癥的非限制性實例包括下面涉及本發(fā)明抗體的藥物組合物的章節(jié)中討論的那些病癥。D.藥物組合物體的藥物組合物。包含本發(fā)明抗體的藥物組合物可用于但不限于預(yù)防、治療、控制或改善病癥或其一種或多種癥狀和/或研究。在具體的實施方案中，組合物包含一種或多種本發(fā)明抗體，在另一個實施方案中，藥物組合物包含一種或多種本發(fā)明抗體與一種或多種用于治療其中IL-12和/或IL-23活性是有害的病癥的除本發(fā)明抗體之外的預(yù)防劑或治療劑。優(yōu)選已知用于或者已經(jīng)用于或目前用于預(yù)防、治療、控制或改善病癥或其一種或多種癥狀的預(yù)防劑或治療劑。根據(jù)這些實施方案，組合物還可以包含載體、稀釋劑或賦形劑。本發(fā)明的抗體和抗體部分能被摻入適合對個體給藥的藥物組合物中。典型地，藥物組合物含有本發(fā)明的抗體或抗體部分和可藥用載體。本文使用的"可藥用載體"包括生理相容的任何和所有溶劑、分散介質(zhì)、抗細(xì)菌劑和抗真菌劑，等張劑和吸收延遲劑等?？伤幱幂d體的實例包括下面的一種或多種水、鹽水、磷酸鹽緩沖鹽水、葡萄糖、甘油、乙醇等，以及他們的組合。很多情況下，組合物中優(yōu)選含有等張劑，例如糖，多元醇，例如甘露糖醇，山梨醇或氯化鈉。可藥用載體還包括少量輔助物質(zhì)，例如濕潤劑或乳化劑，防腐劑或緩沖液，他們提高抗體或抗體部分的貯存期或有效性。各種遞送系統(tǒng)是已知的，并且可用于施用一種或多種本發(fā)明抗體或者一種或多種本發(fā)明抗體與用于預(yù)防、控制、治療或改善病癥或一種或多種其癥狀的預(yù)防劑或治療劑的組合，例如包封在脂質(zhì)體、位顆粒、微膠嚢、能夠表達(dá)抗體或抗體片段的重組細(xì)胞中，受體介導(dǎo)的胞吞作用(參見例如Wu和Wu,J.Biol.Chem.262:4429-4432(1987》，構(gòu)建核酸作為逆轉(zhuǎn)錄病毒或其他載體的部分等。施用本發(fā)明預(yù)防劑或治療劑的方法包括但不限于胃腸外給藥(例如皮內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)和皮下)，硬膜外給藥，腫瘤內(nèi)給藥，和粘膜給藥(例如鼻內(nèi)和口服途徑)。此外，可以采用肺給藥，例如通過使用吸入器或噴霧器，和使用氣霧劑的制劑。參見例如U.S.專利6,019,968、5,985,320、5,985,309、5,934,272、5,874,064、5,855,913、5,290,540和4,880,078;和PCT公開WO92/19244、WO97/32572、WO97/44013、WO98/31346和WO99/66卯3,每一專利全文引入本文以供參考。在一個實施方案中，本發(fā)明的抗體、組合治療或本發(fā)明組合物使用AlkermesAIR(R)經(jīng)肺給藥技術(shù)(Alkermes,Inc.,Cambridge,Mass.)來施用。在一個具體實施方案中，本發(fā)明的預(yù)防劑或治療劑是肌內(nèi)給藥、靜脈內(nèi)給藥、腫瘤內(nèi)給藥、口服給藥、鼻內(nèi)給藥、經(jīng)肺給藥或皮下給藥。預(yù)防劑或治療劑可以通過任何適宜的途徑給藥，例如通過輸注或快速濃注，通過經(jīng)由上皮或粘膜皮膚襯里(例如口腔粘膜、直腸和場粘膜等)，并且可以與其他生物活性劑一起給藥。給藥可以是全身或局部給藥。在一個具體實施方案中，可能希望把本發(fā)明的預(yù)防劑或治療劑局部施用到需要治療的區(qū)域；這可通過例如但不限于局部輸注、注射或通過植入物來實現(xiàn)，所述植入物是多孔或非孔材料，包括膜和基質(zhì)，例如sialastic膜、聚合物、纖維基質(zhì)(例如Tissuel),或膠原基質(zhì)。在一個實施方案中，把有效量的一種或多種本發(fā)明抗體拮抗劑局部施用給個體以預(yù)防、治療、控制和/或改善癥狀或其癥狀。在另一個實施方案中，將有效量的一種或多種本發(fā)明抗體與除本發(fā)明抗體之外的一種或多種治療劑(例如一種或多種預(yù)防劑或治療劑)聯(lián)合局部施用到個體的患病區(qū)域，以預(yù)防、治療、控制和/或改善病癥或其一種或多種癥狀。在另一個實施方案中，可以將預(yù)防劑或治療劑在控釋或持續(xù)釋放系統(tǒng)中遞送。在一個實施方案中，可以使用泵來遞送控制或持續(xù)釋放(參見Langer，supra;Sefton,1987，CRCCrit.Ref.BiomedEng.14:20;Buchwald等人，1980，Surgery88:507;Saudek等人，1989，N.Engl.J.Med.321:574)。在另一個實施方案中，可使用聚合材料來實現(xiàn)本發(fā)明治療劑的控制或持續(xù)釋放(參見例如MedicalApplicationsofControlledRelease,LangerandWise(eds.),CRCPres.,BocaRaton,FIa.(1974);ControlledDrugBioavailability,DrugProductDesignandPerformance,SmolenandBall(eds.)，Wiley，NewYork(1984);RangerandPeppas,1983,J.,Macromol.Sci.Rev.Macromol.Chem.23:61;還參見Levy等人，1985,Science228:l卯；During等人，1989,Ann.Neurol.25:351;Howard等人，1989,J.Neurosurg.71:105);U.S.專利5,679,377;U.S.專利5,916,597;U.S.專利5,912,015;U.S.專利5,989,463;U.S.專利5,128,326;PCT公開WO99/15154;和PCT公開WO99/20253。用于持續(xù)釋放制劑的聚合物的實例包括但不限于聚(丙烯酸2-羥基乙酯)、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸)、聚(乙烯-共聚-乙酸乙烯酯)、聚(曱基丙烯酸)、聚乙交酯(PLG)、聚酸酐、聚(N-乙烯吡咯烷酮)、聚(乙烯醇)、聚丙烯酰胺聚(乙二醇)、聚丙交酯(PLA)、聚(丙交酯-共聚-乙交酯)(PLGA)和聚原酸酯。在優(yōu)選的實施方案中，在持續(xù)釋放制劑中使用的聚合物是惰性的，不含滲漏的雜質(zhì)，能夠穩(wěn)定儲存，無菌的，并且是生物可降解的。在另一個實施方案中，可以將控制或持續(xù)釋放系統(tǒng)置于預(yù)防劑或治療劑鄰近處，由此僅需要一部分全身劑量(參見例戈口Goodson,MedicalApplicationsofControlledRelease,supra,vol.2,pp.115-138(1984))?？蒯屜到y(tǒng)由Langer做了綜述性討論(1990，Science249:1527-1533)。本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何技術(shù)可用于制備包含一種或多種本發(fā)明治療劑的持續(xù)釋放制劑。參見例如U.S.專利4,526,938,PCT公開WO91/05548，PCT公開WO96/20698,Ning等人，1996，"IntratumoralRadioimmunotheraphyofaHumanColonCancerXenograftUsingaSustained-ReleaseGel,"Radiotherapy&Oncology39:179-189,Song等人，1995,"AntibodyMediatedLungTargetingofLong-CirculatingEmulsions,，，PDAJournalofPharmaceuticalScience&Technology50:372-397,Cleek等人，1997，"BiodegradablePolymericCarriersforabFGFAntibodyforCardiovascularApplication,，，Pro.Intl.Symp.Control.Rel.Bioact.Mater.24:853-854,andLam等人，1997,"MicroencapsulationofRecombinantHumanizedMonoclonalAntibodyforLocalDelivery,"Proc.Int'l.Symp.ControlRel.Bioact.Mater.24:759-760，每一文獻(xiàn)全文引入本文以供參考。在一個具體的實施方案中，其中本發(fā)明組合物是編碼預(yù)防劑或治療劑的核酸，通過構(gòu)建其作為合適的核酸表達(dá)載體的一部分，所述核酸可以體內(nèi)給藥以促進(jìn)其所編碼的預(yù)防劑或治療劑的表達(dá)，并且將其給藥，這樣其變成細(xì)胞內(nèi)，例如通過使用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體(參見U.S.專利4,980,286),或者通過直接注射，或者通過使用微顆粒轟擊(例如基因槍；Biolistic，Dupont)，或用脂質(zhì)或細(xì)胞表面受體或轉(zhuǎn)染劑包4皮，或者通過將其與已知能進(jìn)入細(xì)胞核的同種盒型肽連接來給藥(參見例如Joliot等人，1991，Proc.Natl.Acad.Sci.USA88:1864-1868)。或者，可以將核酸引入到細(xì)胞內(nèi)，并且摻入宿主細(xì)胞DNA內(nèi)以通過同種重組來進(jìn)行表達(dá)。本發(fā)明的藥物制劑可以配制成與預(yù)期的給藥途徑相容。給藥途徑的實例包括但不限于胃腸外，例如靜脈內(nèi)、皮內(nèi)、皮下、口服、鼻內(nèi)(例如吸入)、經(jīng)皮(例如局部)、經(jīng)粘膜和直腸給藥。在具體實施方案中，組合物是依據(jù)常規(guī)方法，作為適于靜脈內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、口服、鼻內(nèi)或局部給藥的藥物組合物對人給藥。用于靜脈內(nèi)給藥的組合物通常是在無菌等滲水緩沖液中的溶液。當(dāng)需要時，組合物還可以包含助溶劑和局麻劑例如lignocamne來減輕注射位點的疼痛。如果本發(fā)明組合物是局部給藥，可以將組合物配制成膏劑、霜劑、透皮貼劑、洗劑、凝膠劑、香波、噴霧劑、氣霧劑、溶液、乳劑或本領(lǐng)域:技術(shù)人員眾所周知的其他形式。參見例如Remington'sPharmaceuticalSciencesandIntroductiontoPharmaceuticalDosageForms,19thed.,MackPub.Co.，Easton，Pa.(1995)。對于非噴霧局部劑型，通常采用包含一種或多種與局部應(yīng)用相容并且其動力學(xué)粘度優(yōu)選大于水的賦形劑的粘稠至半固體或固體劑型。合適的制劑包括但不限于溶液、懸浮液、乳劑、霜劑、膏劑、粉劑、搽劑、油膏劑等，如果需要的話，將其滅菌或者與輔助劑(例如防腐劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑、緩沖劑或鹽)混合以影響各種性質(zhì)例如滲透壓。其他合適的局部劑型包括可噴霧的氣霧劑，其中優(yōu)選與固體或液體惰性載體組合的活性組分被包裝在具有加壓揮發(fā)性物質(zhì)(例如氣態(tài)推進(jìn)劑如氟利昂)的混合物中或擠瓶中。如果需要的話，潤濕劑或濕潤劑也可以加到藥物組合物和如果本發(fā)明方法包括施用組合物，組合物可以配制成氣霧劑、噴霧劑、霧劑或滴劑形式。特別是，依據(jù)本發(fā)明使用的預(yù)防劑或治療劑可以以氣霧劑形式從加壓包裝或噴霧器中遞送，其中使用了合適的推進(jìn)劑(例如二氯二氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合適的氣體)。對于加壓氣霧劑，劑量單位可通過提供閥以遞送計量的量來確定。用于吸入器或吹入器的膠嚢和藥筒(由例如明膠組成)可以配制成含有化合物與合適的粉末基質(zhì)例如乳糖或淀粉的粉末混合物。如果本發(fā)明方法包括口服給藥，組合物可以配制成用于口服給予的片劑、膠嚢、扁嚢劑、凝膠蓋劑、溶液劑、懸浮液等。片劑或膠嚢可以通過常規(guī)方法用下列物質(zhì)制得可藥用賦形劑例如粘合劑(例如預(yù)凝膠化玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮或羥丙基曱基纖維素)；填充劑(例如乳糖、微晶纖維素或磷酸氫鈣)；潤滑劑(例如硬脂酸鎂、滑石粉或二氧化硅)；崩解劑(例如馬鈴薯淀粉或淀粉乙醇酸鈉)；或潤濕劑(例如十二烷基硫酸鈉)。片劑可以通過本領(lǐng)域眾所周知的方法包衣。用于口服給藥的液體制劑可以呈但不限于溶液、糖漿劑或懸浮劑的形式，或者他們可以作為用于在使用之前用水或其他合適的賦形劑配制的無水產(chǎn)品的形式。這樣的液體制劑可以通過常規(guī)方法用以下物質(zhì)制得可藥用添加劑例如懸浮劑(例如山梨醇糖漿、纖維素衍生物或氬化可食用脂肪)；乳化劑(例如卵磷脂或阿拉伯膠)；非水載體(例如杏仁油、油性酯、乙醇或分餾的植物油)；和防腐劑(例如對羥基苯曱酸曱酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯或山梨酸)。制劑還可以按照需要含有緩沖鹽、矯味劑、著色劑和甜味劑。用于口服給藥的制劑可以適當(dāng)?shù)嘏渲瞥捎糜诰徛尫?、控制釋放或持續(xù)釋放預(yù)防劑或治療劑的形式。本發(fā)明方法可包括經(jīng)肺給藥，例如使用吸入器或噴霧器，采用氣霧劑配制成的組合物。參見例如U.S.專利6,019,968、5,985,320、5,985,309、5,934,272、5,874,064、5,855,913、5,290,540和4,880,078;以及PCT公開WO92/19244、WO97/32572、WO97/44013、WO98/31346和WO99/66903,每一專利都全文引入本文以供參考。在具體的實施方案中，本發(fā)明抗體、聯(lián)合治療和/或本發(fā)明組合物使用AlkermesAIR(R)經(jīng)月市纟會藥才支術(shù)(Alkermes，Inc.,Cambridge,Mass.)來纟合藥。本發(fā)明方法可包括給予配制成用于通過注射(例如通過快速濃注或連續(xù)輸注)來胃腸外給藥的組合物。注射用制劑可以在具有加入的防腐劑的單位劑型中給藥(例如在安瓿或多劑量容器)。組合物可以呈在油性或水性載體內(nèi)的懸浮液、溶液或乳液的形式，并且可以含有輔助劑例如懸浮劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑。或者，活性組分可以呈在使用之前用合適的載體(例如無菌不含熱原的水)配制的粉末形式。本發(fā)明方法還可以包括給予配制成貯庫制劑的組合物。這樣的長效制劑可以通過才直入(例如皮下或肌內(nèi))或通過肌內(nèi)注射來鄉(xiāng)合予。因此，例如，組合物可以用合適的聚合或疏水材料(例如在可接受油中的乳液)或離子交換樹脂配制，或者配制成難溶性衍生物(例如作為難溶性鹽)。本發(fā)明方法包括給予配制成中性或鹽形式的組合物?？伤幱名}包括用陰離子例如衍生自鹽酸、磷酸、乙酸、草酸、酒石酸等的陰離子形成的鹽，以及用陽離子例如衍生自鈉、鉀、銨、鈣、氫氧化鐵、異丙胺、三乙胺、2-乙基氨基乙醇、組氨酸、普魯卡因等的陽離子形成的鹽。組合物的組分一般是單獨提供或者在單位劑型中混合在一起，例如作為干燥凍干粉或不含水的濃縮物而包裝在指定活性劑量的密封容器例如安瓿或藥嚢中。當(dāng)給藥方式是輸注時，組合物可以用含有無菌藥用級水或鹽水的輸液瓶配送。當(dāng)給藥模式是通過注射來進(jìn)行時，可以提供無菌注射用水或鹽水的安瓿，這樣可以在給藥之前將組分混合。特別是，本發(fā)明還提供了，將一種或多種本發(fā)明預(yù)防劑或治療劑或藥物組合物包裝在指定活性劑量的密封容器例如安瓿或藥嚢中。在一個實施方案中，一種或多種本發(fā)明預(yù)防劑或治療劑或藥物組合物是作為干燥凍干粉或不含水的濃縮物在密封容器中提供，并且可以重新配制成(例如用水或鹽水)用于施用給個體的濃縮物。優(yōu)選地，一種或多種本發(fā)明預(yù)防劑或治療劑或藥物組合物是作為干燥無菌凍干粉在密封容器中以下列單位劑量提供至少5mg,更優(yōu)選至少10mg，至少15mg,至少25mg,至少35mg,至少45mg,至少50mg,至少75mg或至少100mg。凍千的本發(fā)明預(yù)防劑或治療劑或藥物組合物應(yīng)當(dāng)在2°C-8°C貯存在其初始容器中，并且本發(fā)明預(yù)防劑或治療劑或藥物組合物應(yīng)當(dāng)在配制后1周內(nèi)，優(yōu)選5天內(nèi)，72小時內(nèi)，48小時內(nèi)，48小時內(nèi)，24小時內(nèi)，12小時內(nèi)，6小時內(nèi)，5小時內(nèi)，5小時內(nèi)，3小時內(nèi)或1小時內(nèi)施用。在另一個實施方案中，一種或多種本發(fā)明預(yù)防劑或治療劑或藥物組合物以液體形式在指明活性劑濃度的密封容器中提供。優(yōu)選地，液體形式的組合物在密封容器中以下列濃度提供至少0.25mg/ml，更4尤選至少0.5mg/ml，至少1mg/ml，至少2.5mg/ml，至少5mg/ml,至少8mg/ml，至少10mg/ml，至少15mg/kg,至少25mg/ml，至少50mg/ml，至少75mg/ml或至少100mg/ml。液體形式應(yīng)當(dāng)在2°C-8°C貯存在其初始容器中。本發(fā)明抗體和抗體部分可以摻入到適于胃腸外給藥的藥物組合物中。優(yōu)選地，把抗體或抗體部分制成含有0.1-250mg/ml抗體的注射液。注射液可以由液體或凍干劑型在火石并瓦或琥珀并瓦、安瓿并瓦或預(yù)填充的注射器組成。緩沖劑可以是L-組氨酸(l-50mM)，任選5-10mM，pH5.0-7.0(任選pH6.0)。其他合適的緩沖劑包括但不限于琥珀酸鈉、檸檬酸鈉、磷酸鈉或磷酸鉀?？梢杂寐然c來改變0-300mM(對于液體劑型最佳150mM)濃度的溶液的毒性。凍干劑型可以含有抗凍劑型，主要是0-10%蔗糖(最佳0.5-1.0%)。其他合適的抗凍劑包括海藻糖和乳糖。凍干劑型可以含有膨脹劑，主要是1-10%甘露糖醇(最佳2-4%)。液體和凍干劑型可以含有穩(wěn)定劑，主要是1-50mML-甲硫氨酸(最佳5-10mM)。其他合適的膨脹劑包括甘氨酸、精氨酸，可以含有0-0.05%吐溫-80(最佳0.005-0.01%)。另外的表面活性劑包括但不限于吐溫20和BRIJ表面活性劑。制成胃腸外給藥用注射液的包含本發(fā)明抗體和抗體部分的藥物組合物還可以包含佐劑，例如用于提高吸收的物質(zhì)或治療蛋白(例如抗體)的分散劑。特別有用的佐劑是透明質(zhì)酸酶例如Hylenex(重組人透明質(zhì)酸酶)。在注射液中加入透明質(zhì)酸酶改善了胃腸外給藥，特別是皮下給藥之后人生物利用度。其還容許較大位點體積(即大于1ml)，具有較小頭疼和不適，以及注射位點反應(yīng)的的最小發(fā)生率(參見WO2004078140，US2006104%8,其引入本文以供參考)。本發(fā)明的組合物可以是各種各樣的劑型。這些包括例如液體、半固體和固體劑型，例如液體溶液(例如注射液和輸注液)，分散劑或懸浮劑，片劑，丸劑，粉劑，脂質(zhì)體和栓劑。優(yōu)選劑型取決于想要的給藥方式和治療應(yīng)用。典型優(yōu)選組合物是注射液或灌注液，例如與用其腸外(例如靜脈內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)、肌內(nèi))。在優(yōu)選的實施方案中，通過靜脈內(nèi)輸注或注射施用抗體。在另一個優(yōu)選的實施方案中，通過肌內(nèi)或皮下注射施用抗體。治療性組合物一般必須是滅菌的并且在制備和貯存條件下是穩(wěn)定的。組合物可以配制成溶液、微乳劑、分散劑、脂質(zhì)體或者適合高藥物濃度的其他有序結(jié)構(gòu)。通過將活性化合物(即抗體或抗體部分)與上面例舉的成分的一種或組合一起摻入需要量的合適的溶劑，如果需要，接著無菌過濾，能制備滅菌注射液。一般情況下，通過將活性成分摻入到含有基本分散基質(zhì)和上面例舉的那些的其他成分的無菌賦形劑中來制備分散劑。在無菌情況下，無菌注射液制劑的凍干粉末劑，制劑的優(yōu)選方法是真空干燥和噴霧千燥，得到活性成分加預(yù)先滅菌過濾的溶液的任何附加期望的成分的粉末劑。例如，通過^吏用包衣例如卯磷脂，通過在分散劑情況下保持要求的粒度和通過使用表面活性劑，能保持溶液的合適的流動性。通過組合物中含有延遲吸收的物質(zhì)，例如一硬脂酸鹽和明膠，能使可注射組合物延續(xù)吸收。通過本領(lǐng)域公知的各種方法能施用本發(fā)明的抗體和抗體-部分，但是對于很多治療性應(yīng)用，優(yōu)選的給藥途徑/方式是皮下注射，靜脈內(nèi)注射或輸液。如本領(lǐng)域技術(shù)人員明白的，給藥途徑/方式根據(jù)預(yù)期結(jié)果而不同。在一些實施方案中，使用保護(hù)化合物抗快速釋放的載體可以制備活性化合物制劑，例如控制釋放制劑，包括植入物，透皮貼，和微膠嚢送藥系統(tǒng)?？梢允褂每缮锝到馍锲ヅ渚酆衔?，例如乙烯醋酸乙烯酯、聚酐類、聚乙二醇酸、膠原、聚原酸酯和聚乳酸。這樣的制劑的很多制備方法申請了專利或者一般為本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。參見，例如，SustainedandControlledReleaseDrugDeliverySystems,J.R.Robi謂n，編著，MarcelDekker，Inc.,NewYork,1978。在一些實施方案中，本發(fā)明的抗體或抗體部分可以例如和惰性稀釋劑或可同化可食用載體一起口服給藥?；衔?如果期望和其他成分)還可以在硬或軟外殼明膠膠囊中封閉，壓制成片，或者直接摻到個體的食物中。對于口服治療給藥，化合物可以與賦形劑混合并且以攝食片劑，口腔片劑，錠劑，膠嚢，酏劑，懸浮劑，糖漿，糯米紙嚢劑等劑型使用。對于通過腸胃外給藥之外的本發(fā)明化合物的施用，必需用防止它失活的材料將化合物包衣，或者與化合物共同給藥。還可以向組合物中摻入補充活性化合物。在一些實施方案中，本發(fā)明的抗體或抗體部分與用于治療其中IL-12活性是有害的疾病的一種或幾種另外的治療藥物共同配制和/或共同給藥。例如，本發(fā)明的抗-hIL-12抗體或抗體部分可以與結(jié)合其他耙物的一種或幾種另外的抗體(例如結(jié)合其他細(xì)胞因子或結(jié)合細(xì)胞表面分子的抗體)共同配制和/或共同給藥。此外，本發(fā)明的一種或幾種抗體可以與上述治療藥物的一種或幾種聯(lián)合使用。這樣的聯(lián)合治療可以有利地使用較低劑量的施用的治療藥物，從而避免與各種單一治療相關(guān)的可能的毒性或并發(fā)癥。在一些實施方案中，抗IL-12抗體或者其片段與本領(lǐng)域公知的半存留期伸長賦形劑連接。這樣的賦形劑包括但不限于Fc結(jié)構(gòu)域、聚乙二醇和葡聚糖。這樣的賦形劑描述于，例如美國申請順序號No.09/428,082和公開的PCT申請No.WO99/25044中，他們?yōu)榱巳魏文康脑诖艘鲄⒖肌Ｔ谝粋€具體實施方案中，施用包含編碼本發(fā)明抗體或另一種本發(fā)明預(yù)防劑或治療劑的核苷酸序列的核酸序列來通過基因治療以治療、預(yù)防、控制或改善病癥或一種或多種其癥狀?；蛑委熓侵竿ㄟ^給予個體表達(dá)或可表達(dá)的核酸來進(jìn)行的治療。在本發(fā)明的實施方案中，核劑:、、j,'、'、.一、、,'、根據(jù)本發(fā)明可以使用可在本領(lǐng)域中使用的任何基因治療方法。關(guān)于基因治療方法的一般綜述，請參見Goldspiel等人，1993,ClinicalPharmacy12:488-505;WuandWu,1991,Biotherapy3:87-95;Tolstoshev，1993，Arm.Rev.Pharmacol.Toxicol.32:573-596;Mulligan,Science260:926-932(1993);和MorganandAnderson，1993,Arm.Rev.Biochem.62:191-217;May,1993，TIBTECH11(5):155-215。可以使用的本領(lǐng)域通常已知的重組DNA技術(shù)方法描迷于Ausubel等人(eds.)，CurrentProtocolsinMolecularBiology,JohnWiley&Sons,NY(1993);andRriegler,GeneTransferandExpression,ALaboratoryManual,StocktonPress,NY(1990)中。US20050042664Al中公開了各種基因治療方法的詳細(xì)描述，其引入本文以供參考。作用。這些疾病包括但不;;類i濕性關(guān)節(jié)i、骨關(guān)節(jié)炎、幼年慢性關(guān)節(jié)炎、膿毒性關(guān)節(jié)炎、萊姆關(guān)節(jié)炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、脊推關(guān)節(jié)病、全身紅斑狼瘡、局限性回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、炎性腸病、胰島素依賴性糖尿病、曱狀腺炎、嗜喘、變態(tài)反應(yīng)疾病、牛皮癬、皮炎硬皮病、移植物抗宿主病、器官移植排異、與器官移植相關(guān)的急性或慢性免疫疾病、肉狀瘤病、動脈粥樣硬化、傳播性血管內(nèi)凝血、Kawasaki's病、Grave's病、腎病綜合征、'漫性疲勞綜合征、Wegener's肉芽腫病、Henoch-Schoenlein紫癜、腎微小性血管炎、慢性活性肝炎、眼色素層炎、膿毒性休克、中毒休克綜合征、膿毒癥綜合征、惡病質(zhì)、傳染病、由寄生蟲引起的疾病、獲得性免疫缺陷綜合征、急性橫向骨髓炎、亨廷頓舞蹈病、帕金森病、早老性癡呆、中風(fēng)、原發(fā)膽汁性肝硬化、溶血性貧血、惡性腫瘤、心力衰竭、心肌梗塞、Addison's病、散發(fā)性I型多腺缺乏和II型多腺缺乏、Schmidt's綜合征、成人(急性)呼吸窘迫綜合征、脫發(fā)、斑形脫發(fā)、血清反應(yīng)陰性關(guān)節(jié)病、關(guān)節(jié)病、Reiter's病、牛皮癬性關(guān)節(jié)病、潰瘍性結(jié)腸關(guān)節(jié)病、腸病性滑力莫炎、衣原體、鼠疫和沙門氏菌相關(guān)關(guān)節(jié)病、脊片t關(guān)節(jié)病、動脈粥樣化疾病/動脈硬化、特應(yīng)性變態(tài)反應(yīng)、自身免疫大皰病、尋常性天皰瘡、落葉性天皰瘡、類天皰瘡、線性IgA病、自身免疫性溶血性貧血、Coombs陽性溶血性貧血、獲得性性惡性貧血、少年惡性貧血、肌痛性大腦炎/RoyalFree病、慢性粘膜皮膚念珠菌病、巨細(xì)胞關(guān)節(jié)炎、原發(fā)性硬化性肝炎、起因不明自身免疫性肝炎、獲得性免疫缺陷病綜合征、獲得性免疫缺陷相關(guān)疾病、乙肝、丙肝、普通各式各樣的免疫缺陷(普通各式各樣的血丙種球蛋白減少癥)、膨脹心肌病、女性不孕癥、卵巢衰竭、早產(chǎn)卵巢衰竭、纖維變性肺病、起因不明的纖維組織形成牙槽炎、炎后間質(zhì)性肺病、間質(zhì)性肺炎、與間質(zhì)性肺病相關(guān)的結(jié)締組織疾病、與肺病相關(guān)的混合結(jié)締組織疾病、與間質(zhì)性肺病相關(guān)的全身硬化、與間質(zhì)性肺病相關(guān)的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、與肺病相關(guān)的全身紅斑狼掩、與肺病相關(guān)的皮膚肌炎/多肌炎、與肺病相關(guān)的Sjogren's病、與肺病相關(guān)的僵硬脊推炎、結(jié)節(jié)性血管炎彌散肺病、與肺病相關(guān)的含鐵血黃素沉著病、藥物引起的間質(zhì)性肺病、纖維化、輻射纖維化、閉塞性毛細(xì)支氣管炎、慢性嗜酸性肺炎、淋巴細(xì)胞浸潤性肺病、傳染病后間質(zhì)性肺病、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、自身免疫性肝炎、1-型自身免疫性肝炎(典型自身免疫性或狼瘡樣肝炎)、2-型自身免疫性肝炎(抗-LKM抗體肝炎)、自身免疫介導(dǎo)的低血糖、具有黑色棘皮癥的B型胰島素抗性、曱狀旁腺機能減退、與器官移植相關(guān)的急性免疫疾病、與器官移植相關(guān)的慢性免疫疾病、骨關(guān)節(jié)炎、原發(fā)性硬化性膽管炎、1型牛皮癬、2型牛皮癬、特發(fā)性白細(xì)胞減少、自身免疫中性白細(xì)胞減少、腎病NOS、腎小球腎炎、腎微小性血管炎、萊姆病、盤形紅斑狼瘡、特發(fā)性男性不孕癥或NOS、精液自身免疫性、多發(fā)性硬化(所有亞型)、交感神經(jīng)眼炎、結(jié)締組織疾病繼發(fā)性高血壓、Goodpasture's綜合征、結(jié)節(jié)性多動脈炎的肺表現(xiàn)、急性風(fēng)濕性發(fā)燒、類風(fēng)濕性脊推炎、Still's病、全身硬化、Sjogren's綜合征、Takayasu's病/動脈炎、自身免疫性血小板減少、特發(fā)性血小板減少、自身免疫性曱狀腺病、甲狀腺機能亢進(jìn)、曱狀腺腫性自身免疫性甲狀腺機能減退(Hashimoto's病)、萎縮性自身免疫性甲狀腺機能減退、原發(fā)性粘液水腫、晶狀體原性眼色素層炎、原發(fā)性血管炎、白癜風(fēng)、急性肝病、慢性肝病、酒精性肝硬化、酒精引起的肝損傷、choleosatatis、特應(yīng)性肝病、藥物引起的肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、變態(tài)反應(yīng)和嗜喘、B族鏈球菌(GBS)感染、精神病(例如抑郁癥和精神分裂癥)、Th2型和Thl型介導(dǎo)的疾病，急性和l曼性疼痛(不同形式的疼痛)和癌癥，例如肺癌、乳腺癌、胃癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、卵巢癌、前列腺癌和直腸癌，以及造血惡性腫瘤(白血病和淋巴瘤)，無P脂蛋白血癥、手足發(fā)紺、急性和慢性寄生或感染過程、急性白血病、急性成淋巴細(xì)胞性白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、急性或慢性細(xì)菌感染、急性胰腺炎、急性腎衰竭、腺癌、空異位搏動、AIDS癡呆綜合征、酒精誘導(dǎo)的肝炎、過敏性結(jié)膜炎、過敏性接觸性皮炎、過敏性鼻炎、同種移植物排斥、a-l-抗胰蛋白酶缺乏、肌萎縮性側(cè)索石更化、貧血、心絞痛、前角質(zhì)細(xì)胞變性、抗cd3治療、抗磷脂綜合征、抗-受體過敏反應(yīng)、主動脈和周圍動脈瘤、主動脈切開、動脈高血壓、動脈硬化、動靜脈瘺、共濟(jì)失調(diào)、心房纖維性顫動(持續(xù)或陣發(fā)性的)、心房樸動、房室阻滯、B細(xì)胞淋巴瘤、骨移植排斥、骨髓移植(BMT)排斥、束支傳導(dǎo)阻滯、Burkitt's淋巴瘤、燒傷、心臟心律不齊、心臟震顫綜合征、心臟腫瘤、心肌病、心肺旁路炎癥反應(yīng)、軟骨移植排斥、腦皮層變性、混亂或多灶性心房性心博過速、與化療有關(guān)的病癥、慢性髓細(xì)胞性白血病(CML)、慢性酒精中毒、慢性炎性病變、慢性淋巴細(xì)胞性白血病(CLL)、慢性阻塞性肺病(COPD)、慢性水楊酸中毒、結(jié)腸直腸癌、充血性心力衰竭、結(jié)膜炎、4妄觸性皮炎、肺原性心臟病、冠狀動脈疾病、Creutzfeldt-Jakob病、培養(yǎng)陰性膿毒癥、嚢性纖維化、與細(xì)胞因子治療有關(guān)的病癥、拳擊手癡呆、脫髓鞘性疾病、登革熱、出血熱、皮炎、皮月夫病癥、糖尿病、糖尿病癥、糖尿病性動脈粥樣疾病、彌散性雷維小體病、擴(kuò)張性充血性心肌病、基底神經(jīng)節(jié)病癥、中年Down's綜合征、阻斷CNS多巴胺的藥物誘導(dǎo)的運動障礙、藥物敏感性、濕疹、腦脊髓炎、心內(nèi)膜炎、內(nèi)分泌病、會厭炎、愛-巴病毒感染、紅斑性月支痛癥、錐體束外和腦病癥、家族性噬紅細(xì)胞細(xì)胞淋巴組織細(xì)胞增多癥、胎兒胸腺移植排斥、Friedreich's共濟(jì)失調(diào)、功能性周圍動脈病癥、真菌膿毒癥、氣性壞疽、胃潰瘍、腎小球性腎炎、任何器官或組織的移植物排斥、革蘭氏陰性膿毒癥、革蘭氏陽性膿毒癥、由于細(xì)胞內(nèi)生物體導(dǎo)致的肉芽腫、毛細(xì)胞白血病、Hallerrorden-Spatz疾病、橋本氏曱狀腺炎、#古草熱、心臟移植排斥、血色素沉著癥、血液透析、溶血尿毒癥綜合征/溶血栓血小板生成紫癜、出血、肝炎(A)、希斯束心律失常、EQV感染/HIV神經(jīng)病、Hodgkin's病、運動才幾能亢進(jìn)病癥、過壽文反應(yīng)、過壽文性月申炎、高血壓、運動機能減退病癥、海馬-垂體-腎上腺軸評估、特發(fā)性Addison's病、特發(fā)性肺纖維化、抗體介導(dǎo)的細(xì)胞毒性、衰弱、嬰兒脊髓肌肉萎縮、主動脈炎癥、流感、離子輻射暴露、虹膜睫狀體炎/眼色素層炎/視神經(jīng)炎、缺血-再灌注損傷、缺血性中風(fēng)、幼年類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、幼年脊髓肌肉萎縮、Kaposi's肉瘤、腎移植排斥、軍團(tuán)菌病、利什曼病、麻風(fēng)病、皮質(zhì)脊髓系統(tǒng)損傷、脂肪水腫、肝臟移植排斥、淋巴水腫、癥疾、惡性淋巴瘤、惡性組織細(xì)胞增多癥、惡性黑素瘤、軟膜蛛網(wǎng)膜炎、腦膜炎球菌血癥、代謝性/特發(fā)性、偏頭痛、線粒體多系統(tǒng)病癥、混合型結(jié)締組織疾病、單克隆Y-球蛋白病、多骨髓瘤、多系統(tǒng)變性(MencelDejerine-ThomasShi-Drager禾口Machado-Joseph)、重癥月幾無力、細(xì)胞內(nèi)鳥分枝桿菌、結(jié)核分枝桿菌、脊髓發(fā)育不良綜合征、心急梗塞、心肌擊夫血性病癥、鼻咽癌、新生兒'艮性肺病、腎炎、腎變病、神經(jīng)變性疾病、神經(jīng)原性I型肌肉萎縮、粒細(xì)胞缺乏性發(fā)熱、非何杰氏淋巴瘤、腹部主動脈及其分枝閉塞、閉塞性動脈病癥、okt3治療、睪丸炎/附睪炎、睪丸炎/輸精管切除述逆向操作、器官巨大癥、骨質(zhì)疏松、胰腺移植排斥、胰腺癌、腎瘤形成綜合征/惡性高鈣血癥、曱狀旁腺移植排斥、骨盆炎癥疾病、常年性鼻炎、心包病、周圍動脈粥樣硬化疾病、周圍血管病癥、腹膜炎、惡性貧血、卡氏肺嚢蟲肺炎、肺炎、POEMS綜合征(多精神病、器官巨大癥、內(nèi)分泌病、單克隆Y-球蛋白病和皮膚改變綜合征)、灌注后綜合征、泵后綜合征、MI心臟切開術(shù)后綜合征、子癇前期、進(jìn)行性核上性麻痹、原發(fā)性肺動脈高血壓、放療、Raynaud's現(xiàn)象和疾病、Raynoud's病、Refsum's病、規(guī)律性窄QRS心搏過速、腎血管高血壓、再灌注損傷、限制性心肌病、肉瘤、石更皮病、老年舞蹈病、雷維小體型老年癡呆、血清反應(yīng)陰性關(guān)節(jié)病、休克、鐮狀細(xì)胞性貧血、皮膚同種移植物排斥、皮膚改變綜合征、小腸移植排斥、實體瘤、特異性心律失常、脊髓性共濟(jì)失調(diào)、脊髓小腦變性、鏈球菌肌炎、小腦結(jié)構(gòu)損傷、亞急性硬化性全腦炎、昏厥、心血管系統(tǒng)梅毒、全身性過敏反應(yīng)、全身性炎性反應(yīng)綜合征、全身性發(fā)作型幼年類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、T-細(xì)胞或FABALL、毛細(xì)管擴(kuò)張、閉塞性血栓血管炎、血小板減少癥、中毒、移植、創(chuàng)傷/出血、III型過敏反應(yīng)、IV型過敏反應(yīng)、不穩(wěn)定心絞痛、尿毒癥、尿膿毒癥、蕁麻疹、瓣性心臟病、靜脈曲張、血管炎、靜脈疾病、靜脈血栓形成、心室纖維性顫動、病毒和真菌感染、病毒性腦炎/無菌性腦膜炎、與病毒有關(guān)的噬血細(xì)胞綜合征、Wernicke-Korsakoff綜合征、Wilson's病、任何器官或組織的異種移植排斥(參見Peritt等人PCT公開WO2002097048A2，Leonard等人，PCT公開W09524918Al和Salfeld等人，PCT公開WO00/56772Al)。本發(fā)明的抗體好抗體部分可用于治療患有下列病癥的人自身免疫性疾病，特別是與炎癥有關(guān)的那些，包括類風(fēng)濕性脊推炎、變態(tài)反應(yīng)、自身免疫性糖尿病、自身免疫性眼色素層炎。優(yōu)選地，本發(fā)明的抗體或其抗原-結(jié)合部分被用來治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、局限性回腸炎、多發(fā)性硬化、胰島素依賴型糖尿病和牛皮癬。本發(fā)明的抗體或抗體部分還可以與用于治療自身免疫性和炎癥疾病的一種或多種治療劑一起給藥。本發(fā)明的抗體或者其抗原-結(jié)合部分可以單獨使用或聯(lián)合治療這樣的疾病。應(yīng)該明白本發(fā)明的抗體或者其抗原-結(jié)合部分可以單獨使用或與附加的藥物例如治療性藥物聯(lián)合，所述附加的藥物由技術(shù)人員為了想要的目的來選擇。例如，附加的藥物可以是本領(lǐng)域認(rèn)為用于本發(fā)明的抗體治療的疾病或病癥的治療藥物。附加藥物也可以是對治療組合物有有益貢獻(xiàn)的藥物，例如影響組合物粘度的藥物。還應(yīng)該明白本發(fā)明所包括的聯(lián)合是用于他們想要的目的的那些組合。下面列出的藥物是為了詳細(xì)說明的目的而不是為了限制。作為本發(fā)明一部分的組合是本發(fā)明的抗體和至少一種選自下面列出的附加藥物。組合還可以包括一種以上的附加藥物，例如兩種或三種附加藥物，如果如此組合，則形成的組合物能實現(xiàn)它想要的功能。本文描述的結(jié)合蛋白可以與另外的治療劑例如疾病調(diào)節(jié)性抗風(fēng)濕藥物(DMARD)或非甾類抗炎藥物(NSAID)或甾類藥物或其組合聯(lián)合使用。DMARD的優(yōu)選實例是羥氯喹、來氟洛米、曱氨蝶呤、胃腸外用金、口服金、柳氮磺胺吡啶。還稱為NSAIDS的非甾類抗炎藥物的優(yōu)選實例包括藥物例如布洛芬。其他優(yōu)選的組合是皮質(zhì)類固醇，包括氫化潑尼松；當(dāng)與本發(fā)明的抗-IL-12抗體聯(lián)合治療患者時，通過減小甾類劑量能減小甚至消除使用甾類的公知的副作用。本發(fā)明的抗體或抗體部分可以與之聯(lián)合使用的用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療劑的非限制性實例包括下列細(xì)胞因子抑制抗炎藥物(CSAID);其他人細(xì)胞因子或生長因子的抗體或拮抗劑，例如TNF、LT、IL-I、IL-2、IL-3、IL-4、IL腸5、IL-6、IL-1、IL-S、IL-15、IL-16、IL-18、IL-21、IL-23、干擾素、EMAP-II、GM-CSF、FGF和PDGF。本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合部分能與細(xì)胞表面分子的抗體聯(lián)合使用，細(xì)胞表面分子是例如CD2、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD80(B7.1)、CD86(B7.2)、CD90、CTLA或他們的配體，包括CD154(gp39或CD40L)。在自身免疫和接著的炎癥級聯(lián)中不同點，治療劑優(yōu)選的聯(lián)合可能干涉；優(yōu)選的例子包括TNF拮抗劑，例如可溶性p55或p75TNF受體，其衍生物，(p75TNFRIgG(EnbrelTM)或p55TNFRJgG(Lenercept),嵌合、人源化或人TNF抗體或其片段，包括英夫單抗(Remicade,JohnsonandJohnson;描述于U.S.專利5,656,272，該專利引入本文以供參考)，CDP571(—種人源化單克隆抗-TNF-aIgG4抗體)，CDP870(一種人源化單克隆抗-TNF-a抗體片段)，抗-TNFdAb(Peptech),CNTO148(golimumab;MedarexandCentocor，參見WO02/12502),好adalim腿ab(HumiraAbbottLaboratories,—種人抗-TNFmAb,作為D2E7描述在US6,090,382中)?？捎糜诒景l(fā)明的TNF抗體描述在U.S.專利6,593,458;6,498,237;6,451,983;和6,448,380中，其分別引入本文以供參考。其他組合包括TNFa轉(zhuǎn)化酶(TACE)抑制劑；出于相同原因，IL-1抑制劑(白介素-l-轉(zhuǎn)化酶抑制劑，1L-1RA等)可以是有效的。其他優(yōu)選組合包括白介素11。還有另一個優(yōu)選組合是自身免疫應(yīng)答的其他關(guān)鍵起作用者，其作用平行于，依賴于或與IL-12功能一致；特別優(yōu)選的是IL-18拮抗劑包括IL-18抗體或可溶性IL-18受體，或IL-8結(jié)合蛋白。已經(jīng)證明IL-12和IL-18重疊但是功能不同，兩者的拮抗劑的聯(lián)合可能最有效。還有另一個優(yōu)選的聯(lián)合是非耗盡抗-CD4抑制劑。還有其他優(yōu)選的聯(lián)合包括共同刺激途徑CD80(B7.1)或CD86(B7.2)的拮抗劑，包括抗體、可溶性受體或拮抗劑配體。本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合部分還可以與下面的藥物聯(lián)合，例如甲氨喋呤、6-MP、硫唑嘌呤、柳氮磺胺吡啶、美沙拉秦、奧沙拉秦、氯化喹啉/羥氯喹、pencillamine、金石克丁二鈉(肌內(nèi)和口服)、^L唑噪呤、cochicine、皮質(zhì)類固醇(口服、吸入和局部注射)、|3-2腺受體激動劑(沙丁胺醇、特布他林、沙美特洛)、黃噤呤(茶葉堿、氨茶堿)、色甘酸鹽、萘多羅米、酮替芬、阿托品和溴乙東堿、環(huán)孢菌素、FK506、雷帕霉素、霉酚酸酯、來氟洛米、NSAIDs、例如、布洛芬皮質(zhì)類固醇，例如、氫化潑尼松、磷酸二酯酶抑制劑、腺苦激動劑、抗血栓形成劑、補體抑制劑，腎上腺素能劑、干擾通過促炎癥細(xì)胞因子例如TNFa或IL-1傳導(dǎo)信號的藥物(例如IRAK、NIK、IKK、p38或MAP激酶抑制劑)、IL-1(3轉(zhuǎn)化酶抑制劑、TNFa轉(zhuǎn)化酶(TACE)抑制劑、T-細(xì)胞信號傳導(dǎo)抑制劑，例如激酶抑制劑、金屬蛋白酶抑制劑、柳氮磺胺吡啶、硫唑。票呤、6-巰基噤呤、血管緊張肽轉(zhuǎn)化酶抑制劑、可溶性細(xì)胞因子受體和其衍生物(例如可溶性p55或p75TNF受體和衍生物p75TNFRIgG(EnbrelHp55TNFRIgG(Lenercept))、sIL-lRI、sIL-IRII、sIL-6R)、抗炎細(xì)胞因子(例如，IL-4、IL-IO、IL-ll、IL-13和TGF卩)、塞來昔布、葉酸、羥氯喹好u酸鹽、羅非克西、etanercept、英夫單抗、萘普生、valdecoxib、柳氮磺胺吡咬、曱潑尼龍、美洛昔康、甲潑尼龍乙酸鹽、金硫丁二鈉、阿司匹林、去炎松，待所利德、丙氧芬，二硫硫胺/樸熱息痛、葉酸鹽、萘普酮、二氯酚酸鈉、吡羅昔康、依托度酸、雙氯芬酸鈉、》惡丙。秦、氧可酮鹽酸鹽、氫可酮二酒石酸鹽/樸熱息痛、雙氯芬酸鈉/米索普特、芬太尼、anakinra、人重組體、曲馬朵鹽酸鹽、雙水楊酯、舒林酸、維生素B12/脂肪酸/維生素B6、樸熱息痛、阿侖特羅鈉、氫化潑尼松、硫酸嗎啡、利多卡因鹽酸鹽、消炎痛、硫酸葡萄糖胺/軟骨素、鹽酸阿米替林、磺胺嘧啶、鹽酸氧可酮/樸熱息痛、鹽酸奧洛他定、米索普特、萘普生鈉、奧美拉唑、環(huán)磷酰胺、利妥?，敗L-1TRAP、MRA、CTLA4-IG、IL-18BP、抗-IL-18、抗-IL15、BIRB-796、SCIO-469、VX-702、AMG-548、VX-740、Roflumilast、IC-485、CDC-801和曱基氫化潑尼松。優(yōu)選的聯(lián)合包括曱氨喋呤或來氟洛米，在中等或嚴(yán)重類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎情況下、環(huán)孢菌素?？梢耘cIL-12或IL-23抗體或其抗原結(jié)合部分聯(lián)合使用來治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的非限制性另外的藥物包括但不限于下列非甾類抗炎藥物(NSAIDs);細(xì)胞因子抑制性抗炎藥物(CSADDs);CDP-571/BAY-10-3356(人源化抗-TNFa抗體；Cdltech/Bayer);cA^英夫單抗(嵌合型抗畫TNFa抗體；Centocor);75kdTNFR-IgG/etanercept(75kDTNF受體-IgG融合蛋白；Immunex;參見例如Arthritis&Rheumatism(1994)Vol.37，S295;/.Invest.Med.(1996)Vol.44，235A);55kdTNF-IgG(55kDTNF受體-IgG融合蛋白；Hoffmann-LaRoche);IDEC-CE9.1/SB210396(非耗盡性靈長化抗-CD4抗體；IDEC/SmithKlme;參見例如Arthritis&Rheumatism(1995)Vol.38，S185);DAB486-IL-2和/或DAB389-1L-2(IL-2融合蛋白；Seragen;參見例如Arthritis&Rheumatism(1993)Vol.36,1223);抗-Tac(人源化抗-IL-2Ra;ProteinDesignLabs/Roche);EL-4(抗炎細(xì)胞因子；DNAX/Schering);IL-10(SCH52000;出租IL-10,抗炎細(xì)胞因子；DNAX/Schering);IL-4;EL-IO和/或IL-4激動劑(例如激動劑抗體)；IL-IRA(IL-I受體拮抗劑；Synergen/Amgen);anakinm(Kineret/Amgen);TNF-bp/s-TNF(可溶'性TNF結(jié)合蛋白；參見例如Arthritis&Rheumatism(1996)Vol.39,No.9(增千'J),S284;Amer.J.Physiol,HeartandCirculatoryPhysiology(1995)Vol.268,pp.37-42);R973401(磷酸二酯酶IV型抑制劑；參見例如Arthritis&Rheumatism(1996)Vol.39,No.9(增刊)，S282);MK-966(COX-2Inhibitor;參見例如Arthritis&Rheumatism(1996)Vol.39，No.9(增刊)，S81);Iloprost(參見例如Arthritis&Rheumatism(1996)Vol.39,No.9(增刊)，S82);甲胺蝶呤；沙利度胺(參見例如Arthritis&Rheumatism(1996)Vol.39，No.9(增刊)，S282)和沙利度胺相關(guān)藥物(例如Celgen);lefiunomide(抗炎和細(xì)胞因子抑制劑;參見例如Arthritis&Rheumatism(1996)Vol.39，No.9(增刊)，S131;InflammationResearch(1996)Vol.45，pp.103-107);氨曱環(huán)酸(纖溶酶原激活抑制劑；參見例如Arthritis&Rheumatism(1996)Vol.39，No.9(增刊)，S284);T-614(細(xì)胞因子抑制劑；參見例如Arthritis&Rheumatism(1996)Vol.39,No.9(增刊)，S282);前列腺素E1(參見例如Arthritis&Rheumatism(1996)Vol.39,No.9(增刊),S282);Temdap(非甾類抗炎藥物;參見例如Arthritis&Rheumatism(1996)Vol.39,No.9(增刊)，S280);萘普生(非甾類抗炎藥物；參見例如NeuroReport(1996)Vol.7，pp.1209-1213);美洛昔康(非甾類抗炎藥物)；布洛芬(非甾類抗炎藥物)；吡羅昔康(非甾類抗炎藥物)；雙氯芬酸(非甾類抗炎藥物)；消炎痛(非甾類抗炎藥物)；柳氮磺胺吡啶(參見例如Arthritis&Rheumatism(1996)Vol.39,No.9(增刊)，S281);辟u哇。票呤(參見例如Arthritis&Rheumatism(1996)Vol.39,No.9(增刊)，S281);ICE抑制劑(白介素-l(3轉(zhuǎn)化酶抑制劑);zap-70和/或lck抑制劑(酪氨酸激酶zap-70或lck的抑制劑)；VEGF抑制劑和/或VEGF-R抑制劑(血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子或血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體的抑制劑；血管生成抑制劑)；皮質(zhì)類固醇類抗炎藥物(例如SB203580);TNF-轉(zhuǎn)化酶抑制劑；抗-IL-12抗體；抗-IL-18抗體；白介素-11(參見例如Arthritis&Rheumatism(1996)Vol.39,No.9(增刊)，S296);白介素-13(參見例如Arthritis&Rheumatism(1996)Vol.39，No.9(增刊)，S308);白介素-17抑制劑(參見例如Arthritis&Rheumatism(1996)Vol.39,No.9(增刊)，S120);金；青霉胺；氯喹；苯丁酸氮芥；羥氯喹；環(huán)孢菌素；環(huán)磷酰胺；全淋巴放射；抗-胸腺細(xì)胞球蛋白；抗-CD4抗體；CD5-毒素；口服給藥的肽和膠原；羥苯基氯氨茴酸二鈉；細(xì)胞因子調(diào)控劑(CRA)HP228和HP466(HoughtenPharmaceuticals,Inc.);ICAM-I反義硫代磷酸酯低聚-脫氧核苷酸(ISIS2302;IsisPharmaceuticals,Inc.);可溶性補體受體1(TPIO;TCellSciences,Inc.);強的松；奧古蛋白；多磷酸糖胺聚糖；米諾環(huán)素；抗-IL2R抗體；海洋和植物脂質(zhì)(魚類和植物種子脂肪酸；參見例如DeLuca等人(1995)Rheum.Dis.Clm.NorthAm.21:759-777);金諾芬；保泰松；曱氯芬那酸；氟芬那酸；靜脈內(nèi)免疫球蛋白；zileuton;azanbine;霉酚酸(RS-61443);tacrolimus(FK-506);sirolimus(雷帕霉素)；amiprilose(therafectin);cladribme(2-氯脫氧腺香)；曱氨蟲某呤；抗病毒劑；和免疫調(diào)節(jié)劑。在一個實施方案中，將本發(fā)明的IL-12抗體或其抗原結(jié)合部分與用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的一種或多種下列藥物聯(lián)合給藥KDR的小分子抑制劑(ABT-123),Tie-2的小分子抑制劑；曱氨喋呤；強的松；塞來昔布；葉酸；石克酸羥氯喹；羅非克西；etanercept;英夫單抗；來氟洛米；萘普生；valdecoxib;柳氮磺胺吡啶；曱基氫化潑尼松；布洛芬；美洛昔康；醋酸甲基氫化潑尼松；金硫丁二鈉；阿司匹林；硫唑嘌呤；曲安奈德；萘石黃酸丙氧芬/apap;葉酸鹽；萘丁美酮；二氯酚酸鈉；吡咯昔康；乙哚酸；二氯酚酸鈉；奧沙普溱；鹽酸羥可待酮；重酒石酸二氬可待因酮/apap;二氯酚酸鈉/米索普特；芬太尼；人重組anakinra;鹽酸曲馬多；雙水楊酸酯；舒林酸；維生素BJfa/維生素B6;對乙酰氨基酚；阿侖膦酸鈉；潑尼松龍；硫酸嗎啡；鹽酸利多卡因；吲哚美辛；硫酸葡糖胺/軟骨素；環(huán)孢菌素；鹽酸阿米替林；磺胺嘧啶；鹽酸羥可待酮對乙酰氨基酚；鹽酸奧洛他定；米索普特；萘普生鈉；奧美拉唑；霉酚酸酯；環(huán)磷酰胺；利妥?，?；IL-ITRAP;MRA;CTLA4-IG;IL-18BP;ABT-874;ABT-325(抗-IL18);抗-IL15;BIRB-796;SCIO-469;VX-702;AMG-548;VX-740;Roflumilast;IC-485;CDC-801;和mesopram。在另一個實施方案中，將IL-12或IL-23抗體或其抗原結(jié)合部分與用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的一種或多種上述藥物聯(lián)合給藥來治療IL-12或IL-23相關(guān)病癥。本發(fā)明的抗體或抗體部分能與之聯(lián)合一起治療炎性腸病的治療藥物的非限制性例子包括下列budenoside;表皮生長因子；皮質(zhì)類固醇藥物；環(huán)孢菌素；柳氮磺胺吡啶；氨基水楊酸鹽；6-巰基嘌呤；硫唑噤呤；曱硝噠唑；脂氧合酶抑制劑；美沙拉。秦；奧沙拉。秦；巴柳氮；抗氧化劑；血栓烷抑制劑；IL-1受體拮抗劑；抗-IL-l(3單克隆抗體；抗-IL-6單克隆抗體；生長因子；彈性蛋白酶抑制劑；吡啶-咪唑化合物；其他人細(xì)胞因子或生長因子的抗體或拮抗劑，例如TNF、LT、IL-1、IL陽2、IL-6、IL-7、IL-8、IL-15、IL-16、IL-17、IL-18、EMAP-II、GM-CSF、FGF和PDGF。本發(fā)明的抗體或者其抗原結(jié)合部分能與細(xì)胞表面分子的抗體聯(lián)合，例如CD2、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD90或者他們的配體。本發(fā)明的抗體或者其抗原結(jié)合部分還可以與藥物聯(lián)合，例如與曱氨喋呤，環(huán)孢菌素，F(xiàn)K506,雷帕霉素，霉酚酸酯，來氟洛米，NSAID例如布洛芬，皮質(zhì)類固醇，例如氫化潑尼松，磷酸二酯酶抑制劑，腺苷激動劑，抗血栓劑，補體抑制劑，腎上腺素能劑，干擾促炎癥細(xì)胞因子例如TNFa或IL-1傳導(dǎo)信號的藥物(例如IRAK、NIK、IKK、p38或MAP激酶抑制劑)，IL-1|3轉(zhuǎn)化酶抑制劑，TNFa轉(zhuǎn)化酶抑制劑，T-細(xì)胞信號傳導(dǎo)抑制劑，例如激酶抑制劑，金屬蛋白酶抑制劑，柳氮磺胺吡啶，硫唑嘌呤，6-巰基。票呤，血管緊張肽轉(zhuǎn)化酶抑制劑，可溶性細(xì)胞因子受體和其衍生物(例如可溶性p55或p75TNF受體，sIL-lRI、sIL-lRII、sIL-6R)，抗炎細(xì)胞因子(例如，IL-4、IL-IO、IL漏ll，IL-13和TGF卩)。本發(fā)明的抗體或抗原結(jié)合部分能與之聯(lián)合一起治療局限性回腸炎的治療藥物的優(yōu)選例子包括下面的TNF拮抗劑例如抗-TNF抗體，D2E7(PCT公開W097/29131;HUMIRA),CA2(REMICADE),CDP571，TNFR-Ig構(gòu)建體，(p75TNFRIgG(ENBREL)和p55TNFRIgG(LENERCEPT))抑制劑和PDE4抑制劑。本發(fā)明的抗體，或其抗原結(jié)合部分能與皮質(zhì)類固醇聯(lián)合，例如budenoside和地塞米松。本發(fā)明的抗體，或其抗原結(jié)合部分還可以與藥物例如柳氮石黃胺吡，定，5-氨基水楊酸和奧沙拉。秦，和干擾炎性細(xì)胞因子例如IL-1的合成或作用的藥物，例如IL-1(3轉(zhuǎn)化酶抑制劑和IL-lra聯(lián)合。本發(fā)明的抗體，或其抗原結(jié)合部分還可以與T細(xì)胞信號傳導(dǎo)抑制劑使用，例如，酪氨酸激酶抑制劑6-巰基。票呤。本發(fā)明的抗體，或其抗原結(jié)合部分能與IL-ll聯(lián)合。本發(fā)明的抗體，或其抗原結(jié)合部分能與下面的藥物聯(lián)合美沙拉溱，潑尼松，硫唑噪呤，巰基噪呤，英夫單抗，曱潑尼龍，琥珀酸鈉，地芬諾酯/硫酸阿托品，鹽酸洛派丁胺，曱氨喋呤，奧美拉唑，葉酸鹽，環(huán)丙沙星/葡萄糖-水，重酒石酸二氫可待因酮/樸熱息痛，鹽酸四環(huán)素，氟輕松醋酸酯，甲硝。達(dá)唑，硫貢纟款/硼酸，消膽胺/蔗糖，鹽酸環(huán)丙沙星，^琉酸天仙子胺，鹽酸杜冷丁，鹽酸咪達(dá)唑侖，鹽酸氧可酮/樸熱息痛，鹽酸異丙溱，磷酸鈉，新諾明/曱氧,定，塞來昔布，聚丙烯酸樹脂，萘磺酸丙氧芬，氫化可的松，多種維他命，巴柳氮二鈉，磷酸可卡因/樸熱息痛，colesevelam鹽酸鹽，維生素B12,葉酸，左氟沙星，曱潑尼龍，nataliz腿ab和干擾素畫y。本發(fā)明的抗體或抗體部分能與之聯(lián)合治療多發(fā)性硬化的治療藥物的非限制性例子包括下面的皮質(zhì)類固醇；氫化潑尼松；曱潑尼龍；硫唑。票呤；環(huán)磷酰胺；環(huán)孢菌素；甲氨喋呤；4-氨基吡啶；替扎尼定；干擾素-卩l(xiāng)a(AVONEX;Biogen);干擾素-卩l(xiāng)b(BETASERON;Chiron/Berlex);干擾素a-n3)(InterferonSciences/Fujimoto),干擾素-a(AlfaWasser歸nn/J&J)，干擾素-(31A-IF(Serono/InhaleTherapeutics),Peginterfe醒a2b(Enzon/Schering畫Plough)，共聚物l(Cop畫l;格拉太咪爾；TevaPharmaceuticalIndustries,Inc.);高壓純氧；靜脈內(nèi)免疫i求蛋白；克拉利平；其他人細(xì)胞因子或生長因子和他們的受體的抗體或拮抗劑，例如，TNF，LT,IL-l,IL-2,IL-6，IL-7,IL-8，IL曙23，IL-15,IL-16，IL-18，EMAP-II，GM-CSF,FGF，和PDGF。本發(fā)明的抗體或者其抗原結(jié)合部分能與細(xì)胞表面分子的抗體聯(lián)合，例如CD2，CD3,CD4，CD8,CD19,CD20,CD25，CD28，CD30,CD40,CD45，CD69,CD80,CD86，CD90或者他們的配體。本發(fā)明的抗體或者其抗原結(jié)合部分還可以與藥物聯(lián)合，例如與曱氨喋呤，環(huán)孢菌素，F(xiàn)K506，雷帕霉素，霉酚酸酯，來氟洛米，NSAIDs，例如，布洛芬，皮質(zhì)類固醇，例如氫化潑尼松，磷酸二酯酶抑制劑，腺苦激動劑，抗血栓劑，補體抑制劑，腎上腺素能劑，干擾促炎癥細(xì)胞因子例如TNFa或IL-1傳導(dǎo)信號的藥物(例如IRAK,NIK,IKK，p38或MAP激酶抑制劑)，IL-ip轉(zhuǎn)化酶抑制劑，TACE抑制劑，T-細(xì)胞信號傳導(dǎo)抑制劑，例如激酶抑制劑，金屬蛋白酶抑制劑，柳氮磺胺吡啶，硫唑嘌呤，6-巰基嘌呤，血管緊張肽轉(zhuǎn)化酶抑制劑，可溶性細(xì)胞因子受體和其衍生物(例如可溶性p55或p75TNF受體，sIL隱lRI,sIL-lRII,sIL-6R)，抗炎細(xì)胞因子(例如，IL-4，IL-IO，IL-ll，IL-13和TGFp)。本發(fā)明的抗體或者其抗原結(jié)合部分能與之聯(lián)合治療多發(fā)性硬化的治療藥物優(yōu)選例子包括干擾素-(3，例如，IFN(31a和IFN(31b;格拉太咪爾，皮質(zhì)類固醇，胱天蛋白酶抑制劑，例如胱天蛋白酶-1的抑制劑，IL-1抑制劑,TNF抑制劑,和CD40配體和CD80的抗體。本發(fā)明的抗體或者其抗原結(jié)合部分還可以與藥物聯(lián)合，例如alemtuzumab,四氛大麻酉分，Unimed,daclizumab,米4乇蒽、酉昆,xaliprodenhydrochloride,4-氨基p比。定，乙酉臾才各4立太口米爾，natalizumab,sinnabidol，a-immunokineNNS03,ABR-215062,AnergiX.MS,趨化因子受體拮抗劑，BBR-2778,calagualine,CPI-1189,LEM(脂質(zhì)體月交嚢米托蒽醌)，THC.CBD(類大麻素激動劑)MBP-8298，曱基氫化潑尼松(PDE4抑制劑)，MNA-715，抗-IL-6受體抗體，neurovax，派非尼酮，allotrap1258(RDP-1258),sTNF-Rl,talampanel，teriflunomide，TGF畫p2,tiplimotide，VLA-4拮抗劑(例如，TR-14035,VLA4Ultrahaler,Antegran-ELAN/Biogen)，y干擾素拮抗劑，IL陽4激動劑。本發(fā)明的抗體或抗體部分能與之聯(lián)合治療心絞痛的治療藥物的非限制性例子包括下面的阿司匹林，硝酸甘油，單硝酸異山梨酯，琥珀酸美托洛爾，阿替洛爾，酒石酸美托洛爾，阿羅地平磺酸鹽，硫氮镲酮鹽酸鹽，硝酸異山梨酯，氯吡格雷硫酸氫鹽，心痛定，阿托伐他汀釣，氯化鉀，呋塞米，辛伐他汀，鹽酸維拉帕米，地高辛，鹽酸心得安，卡維地洛，萘諾普利，螺內(nèi)酯，二氫氯噻，依那普利馬來酸鹽，納多洛爾，雷米普利，依諾肝素鈉，肝素鈉，纈沙坦，鹽酸曱磺胺心定，降脂異丙酯，ezetimibe,布美他尼，氯沙坦鉀，萘諾普利/二氫氯噻，非洛地平，卡托普利，比索洛爾富馬酸鹽。本發(fā)明的抗體或抗體部分能與之聯(lián)合治療關(guān)節(jié)強硬脊推炎的治療藥物的非限制性例子包括下面的布洛芬，二氯酚酸鈉和米索普特，萘普生，美洛昔康，消炎痛，二氯酚酸鈉，塞來昔布，羅非克西，柳氮磺胺吡。定，曱氨喋呤，硫唑。票呤，米諾環(huán)素，潑尼松，etanercept，英夫單抗。本發(fā)明的抗體或抗體部分能與之聯(lián)合治療哮喘的治療藥物的非限制性例子包括下面的沙丁胺醇，沙美特羅/氟地松，孟魯司特鈉，氟地松丙酸鹽，步地奈德，潑尼松，沙美特羅xinafoate，levalbuterol鹽酸鹽，硫酸沙丁胺醇/異丙托品，潑尼松龍磷酸鈉，曲安柰德，倍氯米松二丙酸鹽，溴化異丙托品，阿奇霉素，乙酸吡布特羅，氫化潑尼松，無水茶葉堿，曱潑尼龍鈉琥珀酸鹽，克拉霉素，扎魯司特，福莫特羅富馬酸鹽，流感病毒疫苗，曱潑尼龍，阿莫西林三水合物，氟尼縮松，變應(yīng)性變態(tài)反應(yīng)注射液，色氨酸鈉，鹽酸曱美芳銨，氟尼縮松/薄荷醇，阿莫西林/克拉維酸鉀，左氟沙星，吸入器輔助裝置，愈創(chuàng)甘油醚，地塞米松鈉磷酸鹽，莫西沙星鹽酸鹽，鹽酸多西環(huán)素，愈創(chuàng)甘油醚/d-消旋啡烷，p-麻黃素/cod/樸爾敏，加替沙星，西替利溱鹽酸鹽，糠酸毛他松，沙美特羅xmafoate，退嗽，頭孢氨千，pe/氫可酮/樸爾敏，西替利喚鹽酸鹽/偽麻黃堿，苯福林/cod/異丙。秦，可卡因/異丙溱，頭孢羅齊，地塞米松，愈創(chuàng)甘油醚"艮麻黃石成，樸爾壽文/氫可酮，奈多羅米鈉，硫酸特布他林，腎上腺素，甲潑尼龍，硫酸奧西那林。本發(fā)明的抗體或抗體部分能與之聯(lián)合治療COPD的治療藥物的非限制性例子包括下面的硫酸沙丁胺醇/異丙托品，溴化異丙托品，沙美特羅/氟地+>,沙丁胺醇，沙美特羅xmafoate，倍氯米+>二丙酸鹽，潑尼松，無水茶葉堿，曱潑尼龍鈉琥珀酸鹽，孟魯司特鈉，布地奈德，福莫特羅富馬酸鹽，曲安柰德，左氟沙星，愈創(chuàng)甘油醚，阿奇霉素，倍氯美松二丙酸鹽，levalbuterol鹽酸鹽，氟尼縮松，頭孢曲松鈉，阿莫西林三水合物，加替沙星，扎魯司特，阿莫西林/克拉維酸鉀，氟尼縮松/薄荷醇，樸爾敏/氫可酮，硫酸奧西那林，曱潑尼龍，糠酸毛他松，對黃麻堿/cod/樸爾敏，乙酸吡布特羅，對黃麻堿/氯雷他定，硫酸特布他林，tiotropiumbromide,(R,R)-福莫特羅，TgAAT，Cilomilast,Roflumilast。本發(fā)明的抗體或抗體部分能與之聯(lián)合治療HCV的治療藥物的非限制性例子包括下面的干擾素-a-2a,千擾素-a-2b,千擾素-a-conl,千擾素-a-nl，PEG化千擾素-a-2a,PEG化干擾素-a-2b，利巴韋林，PEG化干擾素-ot-2b+利巴韋林，熊去氧膽酸，甘草酸，胸腺法新，Maxamine，VX-497和用下面的耙物干擾用來治療HCV的任何化合物HCV聚合酶，HCV蛋白酶，HCV螺旋酶，HCVIRES(內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點)。本發(fā)明的抗體或抗體部分能與之聯(lián)合治療特發(fā)性肺纖維化的治療藥物的非限制性例子包括下面的潑尼松，硫唑。票呤，沙丁胺醇，秋水仙石成，為i酸沙丁胺醇，地高辛，y干擾素，曱潑尼龍鈉琥珀酸鹽，勞拉西泮，吹塞米，賴諾普利，硝酸甘油，螺內(nèi)酯，環(huán)磷酰胺，異丙托品，放線菌素d,阿替普酶，丙酸氟地松，左氟沙星，；克酸奧西那林，硫酸嗎啡，鹽酸羥可待酮，氯化鉀，曲安奈德，無水他克莫司，鈣，干擾素-a,甲氨喋呤，霉酚酸酯，干擾素-丫-1|3。本發(fā)明的抗體或抗體部分能與之聯(lián)合治療心肌梗塞的治療藥物的非限制性例子包括下面的阿司匹林，硝酸甘油，酒石酸美托洛爾，依諾肝素鈉，肝素鈉，氯吡格雷二硫酸鹽，卡維地洛，阿替洛爾，硫酸嗎啡，琥珀酸美托洛爾，法華林鈉，賴諾普利，單硝酸異山梨酯，地高辛，呋塞米，辛伐他汀，雷米普利，替尼普酶，馬來酸依那普利，torsemide，瑞替普酶，氯沙坦鉀，鹽酸喹那普利，碳酸鎂，布美他尼，阿替普酶，依那普利拉，胺碘酮鹽酸鹽，鹽酸替羅非班一水合物，鹽酸地爾硫萆，卡托普利，依貝沙坦，纈沙坦，鹽酸普萘洛爾，福辛普利鈉，鹽酸利多卡因，表非替得，頭孢唑啉鈉，硫酸阿托品，亮氨酸，螺內(nèi)酯，千擾素，鹽酸索他洛爾，氯化鉀，琥珀辛酯鈉，鹽酸多巴酚丁胺，阿普唑侖，普伐他汀鈉，阿46伐他汀鈣，鹽酸。米達(dá)唑侖，鹽酸度冷丁，硝酸異山梨酯，腎上腺素，鹽酸多巴胺，比伐盧定，rosuvastatin,ezetimibe/辛伐他汀，avasimibe,cariporide。本發(fā)明的抗體或抗體部分能與之聯(lián)合治療牛皮辨的治療藥物的非限制性例子包括下面的KDR的小分子抑制劑(ABT-123)，Tie-2的小分子抑制劑，鈣泊三烯，丙酸氯倍他索，曲安奈德，halobetasol丙酸鹽，他佐羅汀，曱氨喋呤，氟輕松醋酸酯，增長的倍他米松，氟輕松，阿維A，焦油香波，纈草酸倍他米松，糠酸毛他松，酮康唑，普拉莫星/氟輕松，纈草酸氫化可的松，氟氫縮松，脲，倍他米松，丙酸氯倍他索/伊莫，氟地松丙酸鹽，阿奇霉素，氫化可的松，加濕配方，葉酸，地奈德，pimecrolimus，煤焦油，二乙酸二氟拉松,etanerceptfolate,乳酸，甲氧沙4木，hc/bismuthsubgal/znox/resor,乙齊復(fù)甲波尼龍，強的松，防曬劑，哈西奈德，水楊酸，蒽林，新戊酸氯可托龍，煤提取物，煤焦油/水楊酸，煤焦油/水楊酸/硫，去羥米松，安定，潤滑藥，氟輕+>醋酸酯/潤滑藥，礦物油/蓖麻油/nalact,礦物油/花生油，石油/十四酸異丙酯，補骨脂素，水楊酸，皂/三溴沙侖，硫貢撒/硼酸，塞來昔布，英夫單#元，J不孑包菌素，alefacept，efalizumab,tacrolimus，pimecrolimus,PUVA,UVB，柳氮石黃胺吡咬。本發(fā)明的抗體或抗體部分能與之聯(lián)合治療牛皮癬關(guān)節(jié)炎的治療藥物的非限制性例子包括下面的甲氨喋呤，etanercept,羅非克西，塞來昔布，葉酸，柳氮磺胺吡咬，萘普生，來氟洛米，乙酸曱潑尼龍，消炎痛，硫酸羥氯喹，強的松，舒林酸，漸增的二丙酸倍他米松，英夫單抗，曱氨喋呤，葉酸鹽，曲安奈德，二氯酚酸鈉，二曱基亞砜，吡羅昔康，雙氯芬酸鈉，酮洛芬，美洛昔康，曱潑尼龍，萘普酮，托美丁鈉，釣泊三烯，環(huán)孢菌素，雙氯芬酸鈉/米索普特，氟輕松醋酸酯，硫酸葡萄糖胺，硫羥蘋果酸金鈉，氫可酮酒石酸氫酯/樸熱息痛，布洛芬，利塞膦酸鈉，磺胺嘧啶，硫鳥嘌呤，valdecoxib,alefacept，efalizumab。本發(fā)明的抗體或抗體部分能與之聯(lián)合治療再狹窄的治療藥物的非限制性例子包括下面的西羅莫司，紫杉醇，everolimus，tacrolimus,ABT-578,樸熱息痛。本發(fā)明的抗體或抗體部分能與之聯(lián)合治療坐骨神經(jīng)痛的治療藥物的非限制性例子包括下面的氫可酮酒石酸氫酯/樸熱息痛，羅非克西，鹽酸環(huán)苯扎林，甲潑尼龍，萘普生，布洛芬，鹽酸氧可酮/樸熱息痛，塞來昔布，valdecoxib，乙酸曱潑尼龍，強的松，磷酸可卡因/樸熱息痛，鹽酸曲馬朵/樸熱息痛，美他沙酮，美洛昔康，美索巴莫，鹽酸利多卡因，雙氯芬酸鈉，加巴噴丁，地塞米松，卡立普多，酮洛酸，氨丁三醇，消炎痛，樸熱息痛，安定，萘普酮，鹽酸氧可酮，替扎尼定鹽酸鹽，雙氯芬酸鈉/米索普特，丙氧芬二硫硫胺/樸熱息痛，阿司匹林/oxycod/羥可待酮ter,布洛芬/少量氫可酮，鹽酸曲馬朵，乙哚乙酸，鹽酸丙氧芬，鹽酸阿米替林，肌安寧/磷酸可卡因/阿司匹林，硫酸嗎啡，多種維他命，萘普生鈉，鄰曱苯海拉明檸檬酸鹽，替馬西泮。本發(fā)明的抗體或抗原結(jié)合部分能與之聯(lián)合治療SLE(狼瘡)的治療藥物的優(yōu)選例子包括下面的NSAIDS,例如，雙氯芬酸，萘普生，布洛芬，吡羅昔康，消炎痛；COX2抑制劑，例如，塞來昔布，羅非克西，valdecoxib;抗疾藥，例如，羥氯查；類固醇，例如，強的木>,氫4匕〉發(fā)尼+>,budenoside,3也塞米+>;纟田月包毒素，例^口，石克唾口票p令，環(huán)磷酰胺，霉酚酸酯，曱氨喋呤；PDE4的抑制劑或噤呤合成抑制劑，例如麥考酚酸嗎啉乙酯。本發(fā)明的抗體或抗原結(jié)合部分還可以與下面的藥物聯(lián)合，例如柳氮磺胺吡啶，5-氨基水楊酸，奧沙拉。秦，硫唑。票呤，和干擾促炎性細(xì)胞因子例如IL-1的合成，制備或作用的藥物，例如胱天蛋白酶抑制劑，象IL-1(3轉(zhuǎn)化酶抑制劑和IL-lra聯(lián)合。本發(fā)明的抗體，或其抗原結(jié)合部分還可以與T細(xì)胞信號傳導(dǎo)抑制劑使用，例如，酪氨酸激酶抑制劑；或瞄向T細(xì)胞激活分子的分子，例如，CTLA-4-IgG或抗-B7家族抗體，抗-PD-l家族抗體。本發(fā)明的抗體或抗原結(jié)合部分還可以與IL-ll或抗-細(xì)力包因子抗體聯(lián)合，例如，fonotolizumab(抗-IFNg抗體)，或抗-受體受體抗體，例如，抗-IL-6受體抗體和抗B-細(xì)胞表面分子抗體。本發(fā)明的抗體或抗原結(jié)合部分還可以與下面的藥物聯(lián)合使用LJP394(abetimus)，減少或滅活B-細(xì)月包的藥物，例如，利妥希瑪(抗-CD20抗體)，lymphostat-B(抗畫BlyS抗體)，TNF拮抗劑，例如，抗-TNF抗體，D2E7(PCT公開WO97/29131;HUMIRA),CA2(REMICADE),CDP571，TNFR畫Ig構(gòu)建體，(p75TNFRIgG(ENBREL)和p55TNFRIgG(LENERCEPT))。本發(fā)明的藥物組合物可以含有"治療有效量"或"預(yù)防有效量"本發(fā)明的抗體或抗體部分。"治療有效量的"指實現(xiàn)期望的治療結(jié)果的必需的劑量和給藥時間的有效量。本發(fā)明的抗體或抗體部分的治療有效量可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員確定并且才艮據(jù)個體因素例如疾病狀態(tài)，年齡，性別和體重，以及抗體或抗體部分激發(fā)個體期望的響應(yīng)的能力而不同。治療有效量也是其中治療有益作用比抗體或抗體部分的毒性或有害作用更重要的量。"預(yù)防有效量"指實現(xiàn)期望的預(yù)防結(jié)果的必需的劑量和給藥時間的有效量。典型地，在疾病之前或早期使用預(yù)防劑量，預(yù)防有效量比治療有效量小。調(diào)節(jié)給藥方案提供最佳期望響應(yīng)(例如治療或預(yù)防響應(yīng))。例如，可以施用一次快速濃注，也可以在一定時間施用幾次分開的劑量，或者根據(jù)治療狀況緊急情形顯示的，可以相應(yīng)減小或增加劑量。以易于給藥和劑量均勻性的單位劑型配制腸胃外用組合物是特別有利的。本文使用的單位劑型指適合作為要治療的哺乳動物個體的單一劑量的物理分散的單位；各個單位含有經(jīng)計算產(chǎn)生期望的治療效果的預(yù)定量的活性化合物和必需的藥物載體。根據(jù)(a)活性化合物的獨特特征和要實現(xiàn)的特定的治療或預(yù)防效果，和(b)化合物領(lǐng)域固有的限制如活性化合物對于個體治療靈敏性，指示本發(fā)明的單位劑型的說明，并且該說明直接根據(jù)(a)和(b)。作為例子，本發(fā)明的抗體或抗體部分治療或預(yù)防有效量的非限制范圍是0.1-20毫克/千克，更優(yōu)選1-10毫克/千克。注意，劑量值可以隨著要減輕的癥狀的類型和嚴(yán)重程度而變化。要進(jìn)一步明白，對于任何特定個體，應(yīng)該根據(jù)個體需要和實施或監(jiān)督組合物的給與的人的專業(yè)判斷，隨時間調(diào)節(jié)具體給藥方案，這里給出的劑量范圍只是例舉而不是為了限制要求的組合物的范圍或?qū)嵤?。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的是這里描述的本發(fā)明的其他合適的修飾和改變是顯而易見的，并且不脫離本發(fā)明的范圍或這里公開的實施方案使用合適的等同物可以進(jìn)行。在詳細(xì)描述本發(fā)明的基礎(chǔ)上，參照下面的實施例，更清楚地理解，實施例只是為了詳細(xì)說明的目的而不是要限制本發(fā)明的范圍。實施例實施例1:產(chǎn)生和分離抗人IL-12單克隆抗體實施例1.1:l定抗人IL-12抗體的測定在實施例1中，除非另有說明，利用下面的試驗鑒定和表征抗人IL-12抗體。實施例l.l.A:ELISA如下所述進(jìn)行用于篩選結(jié)合人IL-12抗體的酶聯(lián)免疫吸附測定。實施例l.l.A.l:檢測抗人IL-12抗體與IL-12p70結(jié)合的ELISA將ELISA平板(CormngCostar，Acton,MA)用50iuL/孑L的5|ag/ml特異性山羊抗-小鼠IgGFc(Pierce#31170,Rockford,IL.)在磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中的混合物于4。C包被過夜。把平板用含有0.05%Tween-20的PBS洗滌一次。通過加入在PBS中稀釋至2%的200nL/孔阻斷溶液(BioRad#170-6404,Hercules，CA.)來阻斷平板，在室溫阻斷1小時。阻斷之后，^巴平板用含有0.05%Tween-20的PBS洗滌一次。將50微升/孔的在含有0.1。/o牛血清白蛋白(BSA)(Sigma，St.Loms，MO.)的PBS中稀釋的小鼠血清或雜交瘤上清液加到如上所述準(zhǔn)備的ELISA平板中，并且在室溫培養(yǎng)1小時。把孔用含有0.05%Tween-20的PBS洗滌3次。將50微升在含有0.1%BSA的PBS中稀釋的生物素化的重組純化的人IL-12p70加到每個孔中，并且在室溫培養(yǎng)1小時。將平板用含有0.05%Tween-20的PBS洗滌3次。將鏈霉抗生物素蛋白HRP(Pierce#21126,Rockland，IL.)在含有0.1%BSA的PBS中稀釋稀釋1:20000倍；加入50)uL/孔，將平板在室溫培養(yǎng)1小時。將平板用含有0.05%Tween-20的PBS洗滌3次。向每個孔中加入50微升TMB溶液(Sigma#T0440,St.Louis，MO.),并且在室溫培養(yǎng)10分鐘。通過加入IN;克酸來停止反應(yīng)。把平板在450nm波長進(jìn)行分光光度計讀數(shù)。實施例1.1.A.2:評估IL-12p70或IL-12p40竟?fàn)幙谷薎L-12抗體與IL-12p70結(jié)合的能力的ELISA將ELISA平板(CorningCostar,Acton,MA)用50pL/孔的5|ug/ml特異性山羊抗-小鼠IgGFc(Pierce#31170，Rockford,IL.)在磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中的混合物于4。C包被過夜。把平板用含有0.05%Tween-20的PBS洗滌一次。通過加入PBS+10%乳粉來阻斷平板，在室溫阻斷1小時。阻斷之后，才巴平一反用PBS+0.05%Tween-20洗滌3次。實施例l丄A2(a):IL-12p70竟?fàn)嶦LISA方案根據(jù)預(yù)期的抗體滴度，將小鼠血清或雜交瘤上清液在含有0.1%BSA(Sigma，St.Louis,MO.)的PBS中稀釋。在含有0.1%BSA的PBS中，把生物素化的重組純化的人IL-12p70制成三倍濃縮(3x)的0.1嗎/ml貯備液。在含有0.1%BSA的PBS中，把重組純化的人IL-12p70制成具有0.1-10pg/ml的不同濃度。將等體積的(75)uL)每一下列溶液混合稀釋的小鼠血清或雜交瘤上清液、生物素化的重組純化的人IL-12p70和重組純化的人IL-12p70。將50微升該混合物加到如上所述包被的ELISA平板中，并且在室溫培養(yǎng)1小時。將孔用含有0.05%Tween-20的PBS洗滌3次。將鏈霉抗生物素蛋白HRP(Pierce#21126，Rockland,IL.)在含有0.1%BSA的PBS中進(jìn)行1:20000稀釋；加入50iuL/孔，并且將平板在室溫培養(yǎng)1小時。將平板用含有0.05%Tween-20的PBS洗滌3次。向每個孔中加入50微升TMB溶液(Sigma#T0440,St.Loms,MO.)，并且在室溫培養(yǎng)10分鐘。通過加入IN石危酸來停止反應(yīng)。把平板在450nm波長進(jìn)行分光光度計讀數(shù)。實施例l.l.A2(b):IL-12p40竟?fàn)嶦LISA方案根據(jù)預(yù)期的抗體滴度，將小鼠血清或雜交瘤上清液在含有0.1%BSA(Sigma,St.Louis,MO.)的PBS中稀釋。在含有0.1%BSA的PBS中，把生物素化的重組純化的人IL-12p70制成三倍濃縮(3x)的0.1pg/ml貯備液。在含有0.P/。BSA的PBS中，把重組純化的人IL-12p40制成具有0.1-10|ug/ml的不同濃度。將等體積的(7&L)每一下列溶液混合稀釋的小鼠血清或雜交瘤上清液、生物素化的重組純化的人IL-12p70和重組純化的人IL-12p40。將50微升該混合物加到如上所述包被的ELISA平板中，并且在室溫培養(yǎng)1小時。將孔用含有0.05%Tween-20的PBS洗滌3次。將鏈霉抗生物素蛋白HRP(Pierce#21126，Rockland,IL.)在含有0.1%BSA的PBS中進(jìn)行1:20000稀釋；加入50iuL/孔，并且將平板在室溫培養(yǎng)1小時。將平板用含有0.05%Tween-20的PBS洗滌3次。向每個孔中加入50微升TMB溶液(Sigma#T0440,St.Louis,MO.),并且在室溫培養(yǎng)10分鐘。通過加入IN石克酸來停止反應(yīng)。把平板在450nm波長進(jìn)行分光光度計讀數(shù)。實施例1丄B:使用BIACORE技術(shù)測定親合力BIACORE分析(Biacore,Inc，Piscataway，NJ)測定抗體親合力，結(jié)合速率、解離速率常數(shù)的動力學(xué)常數(shù)。在2VC,使用Biacore3000裝置(Biacore⑧AB，Uppsala,Sweden),通過基于表面等離子共振的測量方法測定抗體與重組純化的人IL-12p70或重組純化的人IL-12p40的結(jié)合，使用HBS畫EP(10mMHEPES[pH7.4],150mMNaC1，3mMEDTA,和0.005%表面活性劑P20)。所有化學(xué)試劑從BiacoreAB(Uppsala,Sweden)或者從本文所述其他不同來源獲得。所有標(biāo)準(zhǔn)胺偶聯(lián)試劑盒，根據(jù)生產(chǎn)商的說明和操作指示，將在10mM乙酸鈉(pH4.5)中稀釋的大約5000RU山羊抗-小鼠IgG，(Fc力，對多克隆抗體有特異性的片l殳(PierceBiotechnologyInc，Rockford，IL)以25)ng/ml直接固定在CM5研究級生物傳感器芯片上。將生物傳感器表面上未反應(yīng)的部分用乙醇胺阻斷。使用在流動池2和4中的修飾的羧甲基葡聚糖作為反應(yīng)表面。流動池1和3中不具有山羊抗-小鼠IgG的未修飾的羧甲基葡聚糖用作參照表面。對于動力學(xué)分析，使用Biaevaluation4.0.1軟件將得自1:1Langmmr結(jié)合模型的速率等式同時擬合到所有8次注射的結(jié)合與解離相上(使用球形擬合分析)。將純化的抗體在HEPES-緩沖鹽水中稀釋以捕獲山羊抗-小鼠IgG特異性反應(yīng)表面。將欲作為配體被捕獲的(25pg/ml)小鼠抗體以5pl/分鐘的流速注射到反應(yīng)基質(zhì)上。在25pl/分鐘的連續(xù)流速下測定結(jié)合與解離速率常數(shù)，K。(單位M"s—1)和K。ff(單位s-1)。通過在10-200nM的10個不同抗原濃度做動力學(xué)結(jié)合測定來得到速率常數(shù)。通過以下公式由動力學(xué)速率常數(shù)計算出小鼠抗體與重組純化的人IL-12p70或重組純化的人IL-12p40之間的反應(yīng)的平衡離解常數(shù)(單位M):KD=K。ff/K。n。記錄結(jié)合與時間之間的關(guān)系，并且計算動力學(xué)速率常數(shù)。在該測定中，可以測定快達(dá)106M"s"的結(jié)合速率(on畫rate)和慢達(dá)l(T6s"的解離速率(off-rate)。實施例1.1.C:抗人IL-12抗體的功能活性為了測定本發(fā)明抗-人IL-12抗體的功能活性，在測定抗體抑制IL-12活性的能力的下列測定中使用抗體。實施例1.1.Cl:制備人PHA-激活的成淋巴細(xì)胞按照CurrentProtocolsinImmunology,Unit7.1中描述的方法，通過在1500rpm進(jìn)行Ficoll-Hypaque梯度離心45分鐘來從leukopac分離出人周圍血液單核細(xì)胞(PBMC),所述leukopac是從健康供體采集的。收集在血液水溶液界面以及淋巴細(xì)胞分離培養(yǎng)基中的PBMC,并且用磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)通過以1500rpm離心l5分鐘來洗滌3次以除去Ficoll-Paque顆粒。然后4安月、CurrentProtocolsinImmunology,Unit6.16中描述的方法將PBMC活化以形成成淋巴細(xì)胞。將洗滌的PBMC以0.5-1x106個細(xì)胞/mL重懸在補充有0.01mg/mLPHA-P(Sigma#L8754，St.Louis,MO)的RPMI完全培養(yǎng)基(RPMI1640培養(yǎng)基，10。/q胎牛血清(FBS),100U/ml青霉素，100tg/ml鏈霉素)中，并且在5%c02氣氛下于37。C培養(yǎng)4天。4天后，把向細(xì)胞培養(yǎng)基中再加入lxl()S個細(xì)胞/mL,所述細(xì)胞在含有0.01mg/mLPHA-P和50U/mL重組人IL-2(R&DSystems#202-EL,Minneapolis,MN.)的培養(yǎng)基中。把細(xì)胞在37。C培養(yǎng)24小時，用RPMI完全培養(yǎng)基洗滌，然后在95%FBS，5%DMSO中以1x1()7個細(xì)月包/mL;令凍。實施例1.1.C2:PHA成淋巴細(xì)胞IFN-丫誘導(dǎo)測定抑制人IL-12活性如下所述分析抗-人IL-12抗體抑制人IL-12誘導(dǎo)的PHA成淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IFN-y的能力。在微量滴定板(U-底，96-孔，Costar)中，將不同濃度的免疫的小鼠血清、鼠雜交瘤上清液或純化的抗-人IL-12抗體與400pg/ml重組純化的人IL-12p70在100juLRPMI完全培養(yǎng)基中于37。C預(yù)培養(yǎng)1小時。將如上所述分離的PHA成淋巴細(xì)胞洗滌一次，并且重懸在RPMI完全培養(yǎng)基中至細(xì)胞密度為1x1(^個細(xì)胞/ml。將PHA成淋巴細(xì)胞(100pL1x106個細(xì)胞/ml)加到抗體與重組純化的人IL-12p70混合物(最終的IL-12p70濃度為200pg/ml)中，并且在3TC培養(yǎng)l8小時。培養(yǎng)之后，從各個孔中取出150不含細(xì)胞的上清液，并且使用人IFN-yELISA(R&DSystemsCat存DIF50)測定產(chǎn)生的IFN-y的水平。實施例1.1.C3:PHA成淋巴細(xì)胞IFN-Y誘導(dǎo)測定抑制獼猴(cyno)IL-12活性如下所述分析抗-人IL-12抗體抑制獼猴IL-12誘導(dǎo)的PHA成淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IFN-y的能力。在微量滴定板(U-底，96-孔，Costar)中，將不同濃度的免疫的小鼠血清、鼠雜交瘤上清液或純化的抗-人IL-12抗體與150pg/ml重組純化的獼猴IL-12p70在100|uLRPMI完全培養(yǎng)基中于37。C預(yù)培養(yǎng)1小時。將如上所述分離的PHA成淋巴細(xì)胞洗滌一次，并且重懸在RPMI完全培養(yǎng)基中至細(xì)胞密度為lxl(^個細(xì)胞/ml。將PHA成淋巴細(xì)胞(100)uL1x1(^個細(xì)胞/ml)加到抗體與重組純化的獼猴IL-12p70混合物(最終的獼猴IL-12p70濃度為75pg/ml)中，并且在37。C培養(yǎng)18小時。培養(yǎng)之后，從各個孔中取出150不含細(xì)胞的上清液，并且使用人IFN-yELISA(R&DSystemsCat弁DIF50)測定產(chǎn)生的IFN-y的水平。實施例1.2:產(chǎn)生抗人IL-12單克隆抗體如下所述獲得抗人IL-12小鼠單克隆抗體實施例1.2.A:用人IL-12抗原免疫小鼠在第1天，將與完全Freund's佐齊i)(RocklandImmunochemicals,Gilbertsville,PA)混合的20微克重組純化的人IL-12p70皮下注射到5只6-8周大小的Balb/C和5只AJ小鼠中。在第24、38和49天，將與Immunoeasy佐劑(Qiagen，Valencia,CA)混合的28孩i克重組純化的人IL-12p70皮下注射到相同的5只Balb/C和5只AJ小鼠中。在第84天或第112天或第114天，給小鼠皮下注射10ug重組純化的人IL-12p70或2ug重組純化的人IL-12p40(R&DSystems,Minneapolis,MN)。實施例1.2.B:產(chǎn)生雜交瘤根據(jù)Kohler,G.和Milstein1975,Nature,256:495中描述的方法，將得自實施例1.2.A中描述的免疫小鼠的脾細(xì)胞與SP2/OAg-14細(xì)胞以5:1的比例融合以產(chǎn)生雜交瘤。在96-孔平板中，將融合蛋白以2.5x106個脾細(xì)胞/孔的密度鋪在含有氮絲氨酸和次黃嘌呤的選擇培養(yǎng)基中。融合之后7-10天，觀測到肉眼可見的雜交瘤集落。通過ELISA測定每個孔中含有雜交瘤集落的上清液以確定IL-12p70的抗體的存在(如實施例l丄A.l中所述)。然后，通過IL-12p了0或IL-12p斗0竟?fàn)嶦LISA(如實施例1.1.A.2中所述)測試對于與IL-12p70的結(jié)合呈測試陽性的上清液，以確定他們是否是p40-特異性的。然后在IFN-y的PHA成淋巴細(xì)胞(如實施例1丄C中所述)測定表現(xiàn)出IL-12p40-特異活性的上清液中和IL-12的能力。表8:用人IL-12免疫小鼠之后的融合與篩選數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage122</column></row><table>實施例1.2.C:鑒定和表征抗人IL-12P40單克隆抗體將根據(jù)實施例1.2.B和1.2.C產(chǎn)生的，生成結(jié)合IL-12，并且能夠特異性地結(jié)合IL-12p40,以及在PHA成淋巴細(xì)胞測定中具有l(wèi)2nM或小于12nM的IC5。值的抗體的雜交瘤擴(kuò)增，并且通過有限稀釋來克隆。將雜交瘤細(xì)胞接種到含有10%低IgG胎牛血清(Hyclone#SH30151，Logan,UT.)的培養(yǎng)基中。平均收獲250mL每一雜交瘤上清液(得自克隆群體)，濃縮，并且按照Harlow,E.和Lane,D.1988"Antibodies:ALaboratoryManual"中描述的方法，通過蛋白A親合色謙進(jìn)行純化。使用實施例1丄C2和1.1.C3中描述的PHA成淋巴細(xì)胞分析來測定純化的mAb抑制IL-12活性的能力。表9表明了對于10種單克隆抗體，得自PHA成淋巴細(xì)胞分析的ICs。值。200680024097.3說明書第96/131頁表9:抗IL-Up40鼠單克隆抗體對IL-12的中和<table>tableseeoriginaldocumentpage123</column></row><table>使用實施例1.1.B中描述的表面等離子共振(Biacore⑧)測定單克隆抗體與重組純化的人IL-12p70的結(jié)合親合力。表10表明了上面描述的10種單克隆抗體對于人IL-12p70的親合力。表10:抗IL-12p40鼠單克隆抗體對于IL-12p:70的親合力<table>tableseeoriginaldocumentpage124</column></row><table>實施例1.2.C.1:鼠單克隆抗-人IL-12p40抗體的物種特異性為了確定上面描述的IO種單克隆抗體是否識別IL-12,設(shè)定兩組ELISA。首先，通過用5ug/ml重組純化的小鼠IL-12(Peprotech)直4妻包被ELISA平板來設(shè)定直接的ELISA。在含有0.1%BSA(Sigma,StLoms,MO)的PBS中制備介于3-200ng/ml的不同濃度的鼠-抗-人IL-12p40mAb。將50pl每一抗體稀釋液加到包被的ELISA平板中，并且在室溫培養(yǎng)1小時。將孔用含有0.05%Tween-20的PBS洗滌3次。將抗-小鼠IgG-HRP抗體(R&D#HAF007,Minneapolis,MN)在含有0.1%BSA的PBS中進(jìn)行1:2000稀釋；加入50iuL/孔，并且將平板在室溫培養(yǎng)1小時。向每個孔中加入50微升TMB溶液(Sigma#T0440,St.Louis,MO.)，并且在室溫培養(yǎng)10分鐘。通過加入2N硫酸來停止反應(yīng)。把平板在450nm波長進(jìn)行分光光度計讀數(shù)。然后，通過用5ug/ml山羊抗-小鼠IgG,Fc片段特異性抗體(Pierce#31170，Rockland,IL)包被ELISA平板來設(shè)定間接的ELISA。在含有0.1%BSA的PBS中制備介于0.1-100ng/ml的不同濃度的鼠-抗-人IL-12p40mAb;將50pi每一抗體稀釋液加到包被的ELISA平板中，并且在室溫培養(yǎng)1小時。將孔用含有0.05%Tween-20的PBS洗滌3次。把重組純化的小鼠IL-12(Preprotech)在含有0.1%BSA的PBS中以0.2ug/ml稀釋；加入50ul/孔，并且將平板在室溫培養(yǎng)1小時。將孔用含有0.05%Tween-20的PBS洗滌3次。將生物素化的抗-小鼠IL-12抗體(R&D#BAF419)在含有0.1%BSA的PBS中以0.2ug/ml稀釋；加入50ul/孔，并且將平板在室溫培養(yǎng)1小時。將孔用含有0.05%Tween-20的PBS洗滌3次。把寺連霉抗生物素蛋白HRP(Pierce#21126,Rockland,IL.)在含有0.1%BSA的PBS中進(jìn)行1:20000稀釋；加入50]uL/孑U并且將平板在室溫培養(yǎng)1小時。將孔用含有0.05%Tween-20的PBS洗滌3次。向每個孔中加入50微升TMB溶液，并且在室溫培養(yǎng)10分鐘。通過加入2N^克酸來停止反應(yīng)。4巴平板在450nm波長進(jìn)4亍分光光度計讀lt。Resultsfromthedirectandindirect4尋自用這10種單克隆抗體進(jìn)行的直接和間接ELISA的結(jié)果如表11所示。表ll:抗IL-12鼠單克隆抗體與小鼠IL-12p40的結(jié)合<table>tableseeoriginaldocumentpage125</column></row><table>實施例1.2.D:測定每一鼠抗-人IL-12p40mAb的可變區(qū)的氨基酸序?qū)τ诿恳话被嵝蛄袦y定，通過離心分離出大約10><106個雜交瘤細(xì)胞，并且使用Trizol(GibcoBRL/Invitrogen,Carlsbad,CA.)4安照生產(chǎn)商的說明進(jìn)行加工以分離出全部RNA。使用SuperscriptFirst-StrandSynthesisSystem(hivitrogen,Carlsbad,CA)按照生產(chǎn)商的說明將全部RNA進(jìn)行第一鏈DNA合成。使用Oligo(dT)來引導(dǎo)第一鏈合成以選擇口0^(八)+RNA。然后使用設(shè)計用來擴(kuò)增鼠免疫球蛋白可變區(qū)的引物(Ig-PrimerSets,Novagen,Madison,WI)通過PCR來擴(kuò)增第一鏈cDNA產(chǎn)物。將PCR產(chǎn)物在瓊脂糖凝膠上分離，切割，純化，然后用TOPOCloning試劑盒亞克隆到pCR2.1-TOPO載體(Invitrogen，Carlsbad，CA)，并且轉(zhuǎn)染到TOP10化學(xué)活性的大腸桿菌(Invitrogen，Carlsbad,CA)內(nèi)。在轉(zhuǎn)化體上進(jìn)行集落PCR以鑒定含有插入片段的克隆。4吏用QIAprepMiniprepkit(Qiagen,Valencia,CA)/人含有才翁入片段的克隆中分離出質(zhì)粒DNA。使用M13正向和M13反向引物(FermentasLifeSciences,HanoverMD)測定質(zhì)粒中插入片段的兩條4連的序列，以確定可變重鏈或可變輕鏈DNA序列。實施例1.2.C中描述的10種單克隆抗體的可變重鏈或可變輕鏈序列描述在表1中。實施例2:重組抗人IL-12p40抗體實施例2.1:構(gòu)建和表達(dá)重組嵌合型抗人IL-12p40抗體通過在細(xì)胞中同源重組，將編碼鼠抗-人IL-12p40單克隆抗體3G7、8E1、1A6和1D4的重鏈恒定區(qū)的DNA用編碼人IgGl恒定區(qū)的含有2個鉸鏈區(qū)氨基酸突變的cDNA片段替換。這些突變是在234位(EU編號)上的亮氨酸變?yōu)楸彼岷驮?35位上的上的亮氨酸變?yōu)楸彼?Lund等人，1991，J.Immunol.,147:2657)。將每一這些抗體的輕鏈恒定區(qū)用染K恒定區(qū)替換。將全長嵌合型抗體在COS細(xì)胞中瞬時表達(dá)，這是通過將嵌合重鏈和輕鏈cDNA連接到pBOS表達(dá)質(zhì)粒(MizushimaandNagata，NucleicAcidsResearch1990,Vol18,pg5322)內(nèi)來實現(xiàn)的，所述質(zhì)粒包含重鏈信號序列MEFGLSWLFLVAILKGVQC(SEQIDNO.110)和輕《連信號序列MDMRVPAQLLGLLLLWFPGSRC((SEQIDNO.111)。通過ProteinASepharose色譜純化含有重組嵌合型抗體的上清液，并且通過加入酸鄉(xiāng)爰沖液來洗脫結(jié)合的抗體。將抗體中和并且透析到PBS內(nèi)。將編碼嵌合3G7的重鏈cDNA(如上所述)與1D4嵌合輕鏈cDNA(都連接到pBOS載體內(nèi))共轉(zhuǎn)染到COS細(xì)胞內(nèi)。通過ProteinASepharose色譜純化含有重組嵌合型抗體的上清液，并且通過加入酸緩沖液來洗脫結(jié)合的抗體。將抗體中和并且透析到PBS內(nèi)。如實施例1.1.C2和1.1.C3所述，通過PHA成'淋巴細(xì)胞分析來測定純化的嵌合型抗-人IL-12單克隆抗體抑制IL-12誘導(dǎo)的IFN-y生成的能力。表12顯示了5種嵌合型抗體在PHA成淋巴細(xì)胞測定中的IC50值。表12:抗IL-12嵌合型抗體中和IL-12<table>tableseeoriginaldocumentpage127</column></row><table>實施例2.2:構(gòu)建和表達(dá)CDR接枝的抗人IL-12p40抗體如下所述產(chǎn)生CDR-接枝的抗-人IL-12抗體。實施例2.2.1:選擇人抗體框架將鼠可變重鏈和可變輕鏈基因序列(如表3中所述)單獨地對著44人免疫球蛋白種系可變重鏈或46種系可變輕鏈序列(得自NCBIIgBlast網(wǎng)址，在http:〃www.ncbi.nlm.nih.gov/igblast/retrieveig.html.)4吏用VectorNTI軟件進(jìn)行比對。對于每一重《連和輕鏈序列，選擇與初始鼠序列具有最高總同源性的人可變區(qū)序列(以及在已知對于抗原結(jié)合很重要的位置上具有最高同源性)(Welschof，M.和Krauss，J.MethodsInMolecularBiology，Vol207)來提供框架(FW)1、2和3序列以用于CDR-接枝。鑒定合適的人可變重鏈和輕鏈FW4區(qū)(還稱為"連接"區(qū))是通過單獨將每一鼠重鏈和輕鏈FW4區(qū)域與NCBI數(shù)據(jù)庫中的6人免疫球蛋白種系連接重鏈和5種系連接輕鏈序列進(jìn)行比對來完成的。完全CDR接枝抗體的Insilico構(gòu)建是通過將人可變區(qū)CDR序列(來自NCBI網(wǎng)址)用鼠CDR序列(來自雜交瘤)置換，并且向每一個3，端加上FW4區(qū)(還稱為"連接"區(qū))來完成的。實施例2.2.2:構(gòu)建CDR-接枝抗體使用寡核苷酸重新構(gòu)建所述Insilico構(gòu)建的CDR接枝抗體。對于每一可變區(qū)cDNA,分別涉及6個長度為60-80個核苷酸的寡核苷酸來在每一寡核苷酸的5'和/或3'末端彼此重疊20個核苷酸。在退火反應(yīng)中，將所有6個寡核苷酸合并，煮沸，并且在dNTPs存在下退火。然后加入DNA聚合酶I，大(Klenow)片段(NewEnglandBiolabs#M0210，Beverley,MA.)以填補在重疊寡核苷酸之間大約40bp的缺口。在改性的pBOS載體(Mizushima,S.andNagata，S.，(1990)NucleicacidsResearchVol18,No.17))中使用含有與多克隆位點互補的突出端序列的兩個最外面引物來進(jìn)行PCR以擴(kuò)增整個可變區(qū)基因。將得自每個cDNA裝配體的PCR產(chǎn)物在瓊脂糖凝膠上分離，并且切下與所預(yù)測的可變區(qū)cDNA尺寸一致的條帶，純化。通過在細(xì)菌中同源重組，把該可變區(qū)插入到cDNA片段上的框架內(nèi)，所述cDNA片段表達(dá)人IgGl恒定區(qū)，并且含有2個鉸鏈區(qū)氨基酸突變(SEQIDNO,3)。這些突變是在234位(EU編號)上的亮氨酸變?yōu)楸彼嵋约?35位上的亮氨酸變?yōu)楸彼?Lund等人，1991,J.Immunol.,147:2657)。通過同源重組將該可變輕鏈區(qū)插入到具有人K恒定區(qū)的框架(SEQIDNO.4)內(nèi)。分離出細(xì)菌集落，并且提取質(zhì)粒DNA;測定cDNA插入片段的整個序列。將與每一抗體相對應(yīng)的正確的CDR-接枝的重鏈和輕鏈共轉(zhuǎn)染到COS細(xì)胞內(nèi)以瞬時生成全長CDR-接枝的抗-人IL-12抗體。對于1A6，將含有1A6重鏈接枝的cDNA和1D4輕鏈接枝的cDNA的pBOS載體從轉(zhuǎn)染到COS細(xì)胞內(nèi)(當(dāng)接枝時，1A6輕鏈序列與1D4輕《連序列相同)。通過ProteinASepharose色譜純化含有重組嵌合型抗體的上清液，并且通過加入酸緩沖液來洗脫結(jié)合的抗體。將抗體中和并且透析到PBS內(nèi)。表5中描述了9種CDR接枝抗體。如實施例1.1.C2和1.1.C3所述，通過PHA成、淋巴細(xì)胞分析來測定純化的CDR接枝抗體抑制IL-12活性的能力。使用實施例1.1.B中描述的表面等離子共振(Biacore⑧)測定純化的CDR接枝抗體與重組純化的人IL-12p70的結(jié)合親合力。表13顯示了表7中描述的9種CDR接枝抗體在PHA成淋巴細(xì)胞測定中的ICs。值，以及這9種CDR接枝抗體對于人IL-12p70和獼猴人IL-12p70的親合力。表13:抗IL-12p40CDR接枝抗體中和IL-12以及抗IL-12p40CDR接枝抗體對于人好獼猴IL-12p70的親合力<table>tableseeoriginaldocumentpage129</column></row><table>實施例2.3:人源化抗人IL-12抗體的構(gòu)建如下所述進(jìn)行抗人IL-12抗體的人源化。實施例2.3.1:用CDR-接枝抗體進(jìn)行同源性模型化使用同源性模型化來鑒定鼠抗體獨特的殘基，預(yù)測這些殘基對于抗體合并位點(CDR)的結(jié)構(gòu)來說是至關(guān)重要的。同源性模型化是計算方法，其中產(chǎn)生蛋白的近似三維坐標(biāo)。初始坐標(biāo)的來源以及對于其進(jìn)一步精化的指導(dǎo)是第二種蛋白，參照蛋白，參照蛋白的三維坐標(biāo)是已知的，并且其序列與第一種蛋白有關(guān)。使用這兩種蛋白序列之間的關(guān)系來產(chǎn)生參照蛋白與希望獲得其坐標(biāo)的蛋白，即耙蛋白之間的相應(yīng)性。將參照蛋白與把蛋白的一級序列與直接從參照蛋白移動到靶蛋白中的這兩種蛋白的相同部分的坐標(biāo)進(jìn)行比對。將這兩種蛋白的錯配部分的坐標(biāo)，例如由于殘基突變、插入或刪除而導(dǎo)致的錯配部分的坐標(biāo)從基因結(jié)構(gòu)模板構(gòu)建，并且進(jìn)行能量精化以保證與已經(jīng)移動的模型坐標(biāo)相一致。這種計算的蛋白結(jié)構(gòu)可以進(jìn)一步精化或者直接用于模型研究。從該描述中應(yīng)該清楚的是，模型結(jié)構(gòu)的質(zhì)量是由參照蛋白與靶蛋白相關(guān)的精度以及構(gòu)建序列比對的精確度決定的。對于鼠序列1A6、8E1和1D4,使用BLAST檢索與目視檢查的組合來鑒定合適的參照結(jié)構(gòu)。所選擇的關(guān)于1A6和1D4的參照結(jié)構(gòu)是PDB登陸1JRH。對于8E1，重鏈參照結(jié)構(gòu)是PDB登陸1FL3.輕鏈參照結(jié)構(gòu)是1MEX。參照氨基酸序列與靶氨基酸序列之間的25%序列同一性被認(rèn)為是嘗試同源性模型化操作的最低要求。手動構(gòu)建序列比對，并且用程序Jackal產(chǎn)生模型坐標(biāo)(參見Petrey,D.,Xiang,Z.,Tang，C.L.,Xie,L.,Gimpelev，M.，Mitros，T.,Soto,C.S.，Goldsmith-Fischman，S.,Kernytsky，A.,Schlessinger，A.,等人2003.Usingmultiplestructurealignments,fastmodelbuilding,andenergeticanalysisinfoldrecognitionandhomologymodeling.Proteins53(Suppl.6):430-435)。所選抗體的鼠和人框架區(qū)的一級序列具有顯著同一性。不同的殘基位置是鼠殘基包括在人源化序列中的候選者，以保留所觀測到的鼠抗體的結(jié)合能力。手動構(gòu)建人與鼠序列之間不同的一覽框架序列。給定框架殘基將影響抗體結(jié)合性質(zhì)的可能性取決于其與CDR殘基的近似性。因此，使用模型結(jié)構(gòu)，根據(jù)其與CDR中任何原子的距離，將鼠與人序列之間不同的殘基排列。在任何CDR原子的4.5埃內(nèi)的殘基鑒定為是最重要的，并且推薦作為在人源化抗體中保留鼠殘基的候選者(即回復(fù)突變)。計算機模型測定表明，在抗體1A6.1中，輕鏈(1D4.1VKB3)的殘基Ll、L2、L36和L67與CDR顯著接觸，因此這意味著，鼠殘基應(yīng)當(dāng)保留在這些位置上。對于1D4.1，重鏈(1D4.1VH2-70)的殘基H1和H98以及輕鏈(1D4.1VKB3)的L2和L67是作為回復(fù)突變位置被鑒定的。實施例2.3.2:產(chǎn)生混合抗體為了確定什么CDR-接枝的鏈(VH、VL或)可受益于框架回復(fù)突變，通過讓CDR-接枝的H或L鏈與合適的嵌合型鼠H或L鏈成對，然后共轉(zhuǎn)染到COS細(xì)胞內(nèi)來構(gòu)建"混合"抗體。表14表明了混合抗體1A6.3、1A6.4、1A6.7、1A6.8、1D4.4和1D4.5的VH好VL氨基酸序列。表14:混合抗體的氨基酸序列<table>tableseeoriginaldocumentpage132</column></row><table>按照純化的CDR接枝抗體抑制IL-12活性的能力。純化的CDR接枝抗體與重組純化的人IL-12p70的結(jié)合親合力。表13顯示了表7中描述的9種CDR接枝抗體在PHA成淋巴細(xì)胞測定中的ICs。值，以及這9種CDR接枝抗體對于人IL-12p70和獼浙美人IL-12p70的親合力。通過蛋白A親合力色譜(實施例1.2.C)純化混合抗體，并且如如實施例1.1.C2和1.1.C3所述，通過PHA成淋巴細(xì)胞分析來測定效力。使用實施例1.1.B中描述的Biacore⑧測定動力學(xué)。表15表明了混合抗體的KD和IC5。值。將用混合mAb獲得的效力和親合力數(shù)據(jù)與用合適的CDR-接枝的mAb(實施例2.3.1)獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，以確定由于VH或VL鏈導(dǎo)致的效力和親合力改變。使用實施例2.3.1中描述的方法評估人源化VH或VL鏈?zhǔn)欠袷亲罴焰?。在某些情況下，沒有在任何CDR原子的4.5埃內(nèi)的殘基是回復(fù)突變的另外的靶目標(biāo)。<table>tableseeoriginaldocumentpage133</column></row><table>實施例2.3.3:CDR-接枝抗體中框架回復(fù)突變的構(gòu)建為了產(chǎn)生人源化抗體，使用誘變引物和QuikChangeMultiSite-DirectedMutagenesis試劑盒(Stratagene#200513，LaJolla，CA)才耍照生產(chǎn)商的說明將框架回復(fù)突變引入到CDR-接枝抗體內(nèi)。對于每一個CDR-接枝，構(gòu)建回復(fù)突變的不同組合，以鑒定每一殘基的相對重要性。1A6.1輕鏈VKB3變體1(Ll-D—S,L2-I—V，L36隱Y—F,L67-S—Y),1D4.1VKB3變體2(L1-D—S，L36-Y—F,L67-S—Y),1D4.1VKB3變體3(Ll-D—S,L67-S—Y),1D4.1VKB3變體4(L2-I—V,L67-S—Y)和1D4.1VKB3變體5(L67-S—Y)。1D4.1重4€VH2-70變體1(Hl醒E~>Q,H93-A—T)和1D4.1VH2-70變體2(H93-A—T)。然后將突變的單鏈DNA轉(zhuǎn)化成XL10-Gold超活性細(xì)胞。在轉(zhuǎn)化體上進(jìn)行集落測序以鑒定攜帶所需突變的克隆。使用QiagenMaxiprep試劑盒(Qiagen,Valencia,CA)從陽性克隆中分離出質(zhì)粒DNA,并且測定可變區(qū)和恒定區(qū)的全長序列。如上所述，對于CDR接枝抗體構(gòu)建幾種另外的回復(fù)突變組合。按照實施例2.3.4中描述的方法進(jìn)行如上所述所產(chǎn)生的人源化抗體的表征。實施例2.3.4:人源化抗體的表達(dá)和表征將攜帶含有框架回復(fù)突變的重鏈和輕鏈的PBOS表達(dá)載體(參見實施例2.1和2.2.2)共轉(zhuǎn)染到COS細(xì)胞內(nèi)以瞬時產(chǎn)生全長人源化抗體。表16中顯示了該人源化抗體的VH和VL區(qū)的氨基酸序列。<table>tableseeoriginaldocumentpage135</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage136</column></row><table>CDR-接枝抗體的VH和VL中回復(fù)突變的氨基酸位置列在表17中。表17:人源化抗體中存在的回復(fù)突變的氨基酸<table>tableseeoriginaldocumentpage137</column></row><table>按照實施例1.2.C中描述的方法純化含有人源化抗體的細(xì)胞上清液。使用實施例1.1.C2和1.1.C3中描述的PHA成淋巴細(xì)胞分析來測定純化的人源化抗體中和IL-12的能力。使用實施例l丄B中描述的BIAcore測定重組純化的人IL-12p70的純化抗體的結(jié)合親合力。表18顯示了PHA成淋巴細(xì)胞測定的IC5。值，以及得自BIAcore的KD。表18:抗-IL-12p40人源化抗體的IL-12中和以及抗-IL-12p40人源化<table>tableseeoriginaldocumentpage138</column></row><table>實施例2.4:產(chǎn)生另外的人源化抗人IL-12抗體基本上按照Queen,C,等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA86:10029-10033(1989)中描述的方法進(jìn)行鼠單克隆抗體8E1和1A6的可變區(qū)的人源化。首先鑒定與鼠單克隆抗體VH或VL氨基酸序列具有高度同源性的人V片段。然后，將互補決定區(qū)(CDR)序列與對于保持CDR結(jié)構(gòu)很重要的框架氨基酸一起接枝到選擇的人框架序列內(nèi)。此外，將發(fā)現(xiàn)在相應(yīng)的V區(qū)稀有的人框架氨基酸用共有氨基酸取代以以減小可能的免疫原性。如上所述，將所得人源化單克隆抗體在細(xì)胞中表達(dá)、純化和表征。如下所述產(chǎn)生單克隆抗體8E1.4、8E1.5、8E1.6、1A6.10、1A6.11和1A6.12。實施例2.4.1:產(chǎn)生人源化單克隆抗體8E1.4、8E1.5、8E1.6對于8E1可變區(qū)的人源化，基于序列同源性選擇用作8E1的CDR的接受者的人V區(qū)框架。首先，借助于計算機程序ABMOD和ENCAD(Levitt,M.,J.Mol.Biol.168:595-620(1983))構(gòu)建8E1可變區(qū)的分子模型。然后，基于針對人V和J片段序列的同源性檢索，選擇VH片段HA3D1(Olee,T.,等人，J.Exp.Med.175:831-842(1992))和J片段JH4(Ravetch,J.V.,等人，Cell27:583-591(1981))來提供8E1.4、8E1.5和8E1.6重鏈可變區(qū)的框架。對于8E1.4、8E1.5和8E1.6輕鏈可變區(qū)，使用VL片段HK137(Bentley，D丄.，andRabbitts，T.H.,Cell32:181-189(1983))和J片段JK2(Hieter,P.A.,等人，J.Biol.Chem.257:1516-1522(1982))。8E1VH與接受者人HA3D1和JH4片段之間的框架氨基酸的同一性是84%,而8E1VL與接受者人HK137和JK4片段之間的同一性是67%。用于產(chǎn)生另外的人源化抗-人IL-12抗體的人抗體重鏈和輕鏈接受者序列列在表19和表20中。表19:用于另外的人源化抗體的重鏈接受者序列<table>tableseeoriginaldocumentpage139</column></row><table>表20:用于另外的人源化抗體的輕鏈接受者序列<table>tableseeoriginaldocumentpage139</column></row><table>實施例2.4.2:構(gòu)建8E1.4、8E1.5和8E1.6抗體4安照出片反的方法(Rouillard,丄-M.，等人，NucleicAcidsRes.32:W176-W180(2004))使用大約30個長度為約20-40個石威基的重疊合成寡核苷酸來構(gòu)建重鏈和輕鏈可變區(qū)基因。將所述寡核苷酸退火，并且使用ExpandHighFidelityPCRSystem(RocheDiagnosticsCorporation,Indianapolis,IN)裝配，產(chǎn)生全長產(chǎn)物。使用ExpandHighFidelityPCRSystem通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增所得產(chǎn)物。將PCR擴(kuò)增片段進(jìn)行凝膠純化，用MIuI和Xbal消化，進(jìn)行凝膠純化，并且分別亞克隆到改性形式的pVgl.D.Tt(Cole,M.S.，等人，J.Immunol.159:3613-3621(1997);以及參見下文)和pVk(Co,M.S.，等人，丄Immunol.148:1149-1154(1992))中。在其中計算機模型表明與CDR顯著接觸的框架位置，用小鼠V區(qū)的氨基酸替代初始人框架氨基酸。對于8E1.4和8E1.5重鏈，這是在殘基49上進(jìn)行的，對于8E1.6重鏈，這是在殘基74上發(fā)生的。對于8E1.5和8E1.6的輕鏈，替代是在殘基46上發(fā)生的，對于8E1.5,還發(fā)生在殘基60上的替代。將僅在相應(yīng)的人V區(qū)亞組中的他們各自位置稀有存在的框架殘基用這些位置上的人共有氨基酸替代。對于8E1.5和8E1.6重鏈，這是在殘基78上發(fā)生的，對于8E1.5和8E1.6輕鏈，這是在殘基36上發(fā)生的。1"吏用QuikChangeIISite-DirectedMutagenesisi式劑盒(Stratagene,LaJolla，CA)，按照生產(chǎn)商的說明進(jìn)行合成V-基因的位置定向誘變。使用寡核苷酸和本領(lǐng)域眾所周知的PCR方法產(chǎn)生8E1.6VH基因的特異性突變。該PCR步驟是用PfuUltraHFDNA聚合酶(Stratagene),按照生產(chǎn)商的說明進(jìn)行，通過以下流程進(jìn)行的在9"C培養(yǎng)30秒，然后是18個循環(huán)的95。C30秒，55°C1分鐘以及68。Cl分鐘，之后在68°C培養(yǎng)7分鐘。用Dpnl消化之后，將大腸桿菌林TOP10ChemicallyCompetentCells(InvitrogenCorporation,Carlsbad,CA)用小部分PCR產(chǎn)物轉(zhuǎn)化。將序列得以證實的miniprepDNA用MIuI和Xbal消化，將含有突變的8E1.6VH基因的所得限制片段亞克隆到下述改性的pVgl.D.Tt表達(dá)載體中。類似地，使用寡核苷酸和本領(lǐng)域眾所周知的PCR方法產(chǎn)生8E1.5VL基因的特異性突變。如上所述進(jìn)行PCR步驟，并且隨后用MIuI和Xbal進(jìn)行消化，將所得限制片段亞克隆到pVk表達(dá)載體內(nèi)。通過核苷酸測序來證實突變。設(shè)計作為最小外顯子的編碼人源化VH或VL的基因，包括信號肽、剪接供體信號和合適的限制酶位點，以用于隨后克隆到哺乳動物表達(dá)載體內(nèi)。VH和VL最小外顯子中的剪接供體信號分別來自相應(yīng)的人種系JH和JK序列。人源化VH最小外顯子中的信號肽序列是MEFGLSWLFLVAILKGVQC(SEQIDNO.110)，在人源化VL最小外顯子中是MDMRVPAQLLGLLLLWFPGSRC(SEQIDNO.111)。通過重疊合成寡核苷酸的裝配和本領(lǐng)域眾所周知的PCR方法來構(gòu)建8E1.4、8E1.5和8E1.6VH和VL基因。實施例2.4.3:產(chǎn)生人源化單克隆抗體1A6.1Q、1A6.11和1A6.12對于1A6.10、1A6.11和1A6.12可變區(qū)的人源化，采用本發(fā)明中提供的一般方法。首先，借助于計算機程序ABMOD和ENCAD(Levitt,M.,J.Mol.Biol.168:595-620(1983))構(gòu)建1A6可變區(qū)的分子模型。然后，基于針對人V和J片段序列的同源性檢索，選擇VH片^殳M60(Schroeder,Jr.，H.W.andWang,J.Y.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA87:6146畫6150(1990))和J片段JH4(Ravetch,J.V.,等人，Cell27:583-591(1981))來提供1A6.10和1A6.12重鏈可變區(qū)的框架。對于1A6.10、1A6.11和1A6.12輕鏈可變區(qū)，使用VL片段III-3R(Manheimer畫Lory,A.,等人，J.Exp.Med.174:1639-1652(1991))和J片段JK4(Hieter，P.A.,等人，J.Biol.Chem.257:1516-1522(1982))。1A6VH與接受者人M60和JH4片段之間的框架氨基酸的同一性是74%，而1A6VL與接受者人III-3R和JK4片段之間的同一性是71%。用于產(chǎn)生另外的人源化抗-人IL-12抗體的人抗體重鏈和輕鏈接受者序列列在表19和表20中。所產(chǎn)生的抗體序列描述在實施例2.3.3中。在其中計算機模型表明與CDR顯著接觸的框架位置，用小鼠V區(qū)的氨基酸替代初始人框架氨基酸。1A6.10、1A6.11和1A6.12重鏈，這是在殘基68上發(fā)生的。對于輕鏈，對于1A6.11和1A6.12,替代是在殘基36和67上發(fā)生的，對于1A6.12，還發(fā)生在殘基60上的替代。將僅在相應(yīng)的人V區(qū)亞組中的他們各自位置稀有存在的框架殘基用這些位置上的人共有氨基酸替代。對于重鏈，這是在殘基10、46、83、84、86和87上發(fā)生的，對于1A6.10、1A6.11和1A6.12的輕《連，這是在殘基62上發(fā)生的。如上所述使用寡核苷酸和本領(lǐng)域眾所周知的PCR方法進(jìn)行位置定向誘變。表21中列出了所產(chǎn)生的另外的人源化抗-IL-12抗體的VH和VL區(qū)的氨基酸序列。<table>tableseeoriginaldocumentpage142</column></row><table>框架中突變的氨基酸位置列在表22中。表22:人源化抗體中框架突變的位置<table>tableseeoriginaldocumentpage143</column></row><table>實施例2.4.4:表達(dá)另外的人源化抗體將表達(dá)質(zhì)粒pVgl.D.Tt中的Theallotypeofthehumangamma人y-l恒定區(qū)基因的異型從GIm(z,a)修飾為z,non-a異型。使用誘變引物，通過重疊延伸PCR方法(Higuchi,R.，"PCRTechnology:PrinciplesandApplicationsforDNAAmplification",StocktonPress,NewYork(1989》pp.61-70)來產(chǎn)生氨基酸取代D356E和L358M(根據(jù)EUindexofKabat編號,E.A.,等人，"SequencesofProteinsofImmunologicalInterest",5thed.，NationalInstitutesofHealth,Bethesda，MD(1991))。PCR步驟是如上所述用QuikChangeIISite-DirectedMutagenesisKit(Stratagene)進(jìn)行的。PCR產(chǎn)物用Sfil和Eagl消化后，將所得限制片段亞克隆到改性形式的pVgl.D.Tt表達(dá)載體中，所述載體在位于鉸鏈與CH2外顯子之間的內(nèi)含子中包含Nhel限制位點。通過位置定向誘變還產(chǎn)生Y-l恒定區(qū)基因的較低鉸鏈區(qū)的突變。使用誘變寡核苷酸特異性地產(chǎn)生氨基酸取代L234AandL235A(根據(jù)EUindexofKabat編號，E.A.，等人)。PCR步驟是如上所述用QuikChangeIISite-DirectedMutagenesisKit(Stratagene)進(jìn)4亍的。PCR產(chǎn)物用Nhel和Eagl消化后，將所得限制片段亞克隆到上述改性形式的pVgl.D.Tt表達(dá)載體中，所述載體含有D356E和L358M突變，以及在位于鉸鏈與CH2外顯子之間的內(nèi)含子中包含Nhel位點。通過核苷酸測序證實突變。人源化VH和VL最小外顯子的氨基酸序列列在表21中。將所得V基因片段分別克隆到改性形式的pVgl.D.Tt和pVk中。于37。C在7.5%C02培養(yǎng)箱中,將人腎細(xì)胞系293T/17(AmericanTypeCultureCollection,Manassus,VA)保持在DMEM(BioWhittaker，Walkersville，MD)中，所述DMEM含有10。/。胎牛血清(FBS)(HyClone,Logan,UT)、0.1mMMEM非必需氨基酸(InvitrogenCorporation)和2mML-谷氨酰胺(InvitrogenCorporation),其在下文中稱為293培養(yǎng)基。為了表達(dá)和純化單克隆抗體，在瞬時轉(zhuǎn)染后，把293T/17細(xì)胞在DMEM中培養(yǎng)，所述DMEM含有10。/o低-IgGFBS(HyClone)、0.1mMMEM非必需氨基酸和2mML-谷氨酰胺，其在下文中稱為低-IgG293培養(yǎng)基。<吏用Lipofectamine2000(InvitrogenCorporation)4姿照生產(chǎn)商的i兌明進(jìn)行293T/17細(xì)胞的瞬時轉(zhuǎn)染。將大約2x107個細(xì)胞/轉(zhuǎn)染鋪在T-175燒瓶內(nèi)的50ml293培養(yǎng)基中，并且生長過夜至鋪滿。在第二天，將35|ug輕鏈質(zhì)粒和35|ug重鏈質(zhì)粒與3.75mlHybridoma-SFM(HSFM)(LifeTechnologies,Rockville,MD)合并。在單獨的管中，將175piLipofectamme2000試劑與3.75mlHSFM合并，并且在室溫培養(yǎng)5分鐘。將3.75mlLipofectamine2000-HSFM混合物與3.75mlDNA-HSFM混合物輕微混合，并且在室溫培養(yǎng)20分鐘。抽吸出覆蓋293T/17細(xì)胞的培養(yǎng)基，并且用低-IgG培養(yǎng)基替換，然后向細(xì)胞中滴加Lipofectamine-DNA復(fù)合物，通過渦旋而輕孩i混合，并且把細(xì)胞于37°C在7.5。/。C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7天，然后收獲上清液。如上所述獲得產(chǎn)生8E1.4、8E1.5和8E1.6的瞬時轉(zhuǎn)染體。通過混合ELISA測定人源化8E1.4、8E1.5和8E1.6抗體表達(dá)。在4。C將MaxiSorpELISA平才反(NuncNalgeInternational,Rochester,NY)用100pl/孔1:1000稀釋的AffiniPure山羊抗-人IgGFcy-鏈特異性多克隆抗體(JacksonImmunoResearchLaboratories,Inc.,WestGrove,PA)在0.2M碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液pH9.4中的混合物包被過夜，用洗滌緩沖液(含有0.1%Tween20的PBS)洗滌，在室溫用300iu1/孑LSuperBlockBlockingBuffer在TBS(PierceChemicalCompany，Rockford,IL)中的混合物阻斷1小時。用洗滌緩沖液洗滌之后，將含有8E1.4、8E1.5或8E1.6的樣本在ELISA緩沖液(含有1%BSA和0.1%Tween20的PBS)中適當(dāng)?shù)叵♂?，?00jal/孔施加到ELISA平板上。使用人源化IgGl/k抗體daclizumab(PDLBioPharma,Inc.)作為標(biāo)準(zhǔn)。將平板在室溫培養(yǎng)l小時后，并且用洗滌緩沖液洗滌，使用100pl/孔1:1000稀釋的HRP-綴合的山羊抗-人k鏈特異性多克隆抗體(SouthernBiotechnologyAssociates,Inc.,Birmingham,AL)一全測結(jié)合的#元體。在室溫培養(yǎng)l小時，并且用洗滌緩沖液洗滌之后，通過加入100pl/孔ABTSPeroxidaseSubstrate/PeroxidaseSolutionB(KPL，Inc.,Gaithersburg,MD)來顯色。在室溫培養(yǎng)7分鐘之后，通過加入50)ul/孔2%草酸來停止顯色。使用VersaMax微量滴定板讀書器(MolecularDevicesCorporation,Sunnyvale,CA)讀取在415nm的吸4文度。通過ELISA分析得自瞬時轉(zhuǎn)染的293T/17細(xì)胞的培養(yǎng)物上清液中8El.4、8E1.5和8E1.6的生成。觀測到大約30-50嗎/ml的表達(dá)水平。如上所述對陽性樣本進(jìn)4亍純化。實施例2.4.5:純化另外的人源化抗體如下所述，使用ProtemASepharose柱從耗盡的培養(yǎng)物上清液中純化8E1.4、8E1.5和8E1.6IgGl/k單克隆抗體。通過離心/人瞬時轉(zhuǎn)染物收獲培養(yǎng)物上清液，并且無菌過濾。通過加入l"0體積的1M檸檬酸鈉，pH7.0來調(diào)節(jié)過濾的上清液的pH。將上清液過1mlHiTrapProtein145AHP柱(GEHealthcareBio-SciencesCorporation,Piscataway,NJ),所述柱預(yù)先用20mM檸檬酸鈉，150mMNaCl，pH7.0平衡。將柱用相同緩沖液洗滌，用20mM檸檬酸鈉，pH3.5洗脫結(jié)合的抗體。通過加入1/50體積的1.5M檸檬酸鈉，pH6.5來中和，使用15mlAmiconUltra-15離心濾器裝置(30,000daltonMWCO)(MilliporeCorporation,Bedford,MA)把合并的抗體級份濃縮至約0.5-1.0mg/ml。然后使用具有HTTuffryn膜的0.2|umAcrodisc注射濾器(PallCorporation,EastHills,NY)把樣本無菌過濾。通過UV光語法經(jīng)由測定在280nm的吸收度來確定純化抗體的濃度(lmg/ml=1.4A280)。在非還原條件下進(jìn)行的SDS-PAGE分析表明抗體的分子量為約150-160kD。在還原條件下進(jìn)行的分析表明，抗體由重鏈和輕《連組成，重鏈的分子量為約50kD，輕鏈的分子量為約25kD。抗體的純度超過95%。實施例2.4.6:使用競爭ELISA表征另外的人源化抗體在4。C,將MaxiSorpELISA平板(NalgeNuncInternational)用100lul/孔1.0pg/ml人IL-12在0.2M碳酸鈉-碳酸氳鈉，pH9.4中的混合物包被過夜，用洗滌緩沖液(含有0.1%Tween20的PBS)洗滌，在室溫用300)ul/孑LSuperBlockBlockingBuffer在TBS(PierceChemicalCompany,Rockford,IL)中的混合物阻斷1小時。用洗滌緩沖液洗滌后，以一式兩份加入生物素化8E1(0.8貼/ml終濃度)和竟?fàn)幙贵w(8E1或8E1.4或8E11.5或8E1.6)，從100|ug/ml終濃度開始并且進(jìn)行3倍系列稀釋)在100iul/孔ELISA緩沖液中的混合物。作為同種型對照，使用100)ul/孑L100pg/ml小鼠IgGl/K(MuFd79)或人源化IgGl/K(HuFd79)單克隆抗體在ELISA緩沖液中的混合物。作為非竟?fàn)帉φ?，使?00pl/孔ELISA緩沖液。將平板在室溫培養(yǎng)1小時并且用洗滌緩沖液洗滌之后，使用100pl/孔lpg/mlHRP-綴合的鏈霉抗生物素蛋白(PierceChemicalCompany)在ELISA緩沖液中的混合物4企測結(jié)合的抗體。在室溫培養(yǎng)l小時，并且用洗滌緩沖液洗滌之后，通過加入100pl/孑LABTSPeroxidaseSubstrate/PeroxidaseSolutionB(KPL，Inc.)來顯色。在室溫培養(yǎng)5分鐘之后，通過加入50jal/孔2%草酸來停止顯色。讀取在415nm的吸收度。1如上所述，通過竟?fàn)嶦LISA分析8E1.4、8E1.5和8E1.6對人IL-12的親合力。8E1和三種人源化變型都以劑量依賴方式與生物素化的8E1竟?fàn)?。?3表明了使用計算機軟件GraphPadPrism(GraphPadSoftwareInc.,SanDiego,CA)獲得的8E1、8E1.4、8E1.5和8E1.6的EC50值。表23:8E1.4、8E1.5和8E1.6抗體的結(jié)合性質(zhì)抗體Expt.1Expt.2Expt.3平均S.D.犯l2.632.782.282.560.268E1.4N.D.N.D,8,33N/A隱8E1.5N.D.N.D.13,4N/AN/A8E1.62.252.431.612.100.43值代表竟?fàn)?.8Og/ml)生物素化的8E1抗體所需的IC5Q(pg/ml)還使用實施例2.3中描述的方法來產(chǎn)生抗體1A6.10、1A6.11、1A6.12、8E1.4和8E1.5。在COS細(xì)胞中表達(dá)抗體。并且分別通過實施例2.2.2和1.2.C中描述的方法，通過ProteinA親合力色i普法純化。根據(jù)實施例1丄B和1.1.C2表征這些純化的mAb的IC^和KD。表24表明了1A6.10、1A6.11、1A6.12、8E1.4和8E1.5的結(jié)合特征。表24:另外的人源化抗體的動力學(xué)和效力參數(shù)抗體1A6.101A6.111A6.128E1.48E1.58E1.6結(jié)合速率3,2xl05ND7.德58xl051.6jd061.7xl06解離速率(1/s)7.6xl0-fiND3x10"ixicr31.24xl038xl05KD(nM)0.024ND0.41.30.750.046Av.IC幼(nM)huIL-120.15ND0.088128NDAv.ICso(nM)cynoIL-12NDNDNDNDNDND本發(fā)明參考了分子生物學(xué)領(lǐng)域公知的全部技術(shù)。這些技術(shù)包括但不限于下面出版物中描述的技術(shù)Ausubel,F.M等人eds.,ShortProtocolsInMolecularBiology(4thEd.1999)JohnWiley&Sons,NY.(ISBN0-471-32938-X).Lu和Weinereds.,CloningandExpressionVectorsforGeneFunctionAnalysis(2001)BioTechniquesPress.Westbo函gh,MA.298pp.(ISBN1-881299-21-X).Kontermann和Dubeleds.，AntibodyEngineering(2001)Springer-Verlag.NewYork.790pp.(ISBN3-540-41354-5).Old,R.W.&S.B.Primrose,PrinciplesofGeneManipulation:AnIntroductionToGeneticEngineering(3dEd.1985)BlackwellScientificPublications,Boston.StudiesinMicrobiology;V.2:409pp.(ISBN0-632-01318-4).Sambrook,J.等人eds.,MolecularCloning:ALaboratoryManual(2dEd.1989)ColdSpringHarborLaboratoryPress,NY.Vols.1-3.(ISBN0-87969-309-6).Winnacker,EX.FromGenesToClones:IntroductionToGeneTechnology(1987)VCHPublishers,NY(translatedbyHorstIbelgaufts).634pp.(ISBN0-89573-614-4).參考文獻(xiàn)U.S.專利4,816,397，4,816,567,4,880,078;5,985,309,5,223,409;5,225,539;5,258,498;5,290,540，5,290,540,5,403,484;5,427,908;5,516,637;5,530,101;5,571,698;5,580,717;5,585,089,5,658,727;5,693,762，5,714,352,5,723,323,5,733,7435,750,753;5,766886,5,780，2255,817,483,5,821,047;5,824,514，5,855,913,5,874,064,5,934,272,5,939,598,5鄰9,108;5,976,862,5,985,320,5,985,309,5,985,615,5，卿'209,5,624,8215,723,323'5,763,192,5,814,476,6,075,181,6,091,001,6,114,5986,130,3646,180,370,6,204,023,6,350,861,5,585,089，6,914,1284,526,938，4,980,286,5,912,015;4,946,778,5,916,597;5,128,326;5,565,352),5'679,377;5,y卵,463;5,225,539;5,565,332,5,698,426;5,714,350,5,807,715,6'019，％8,6,019，968,5,627,052,5,916,771,5,648,260,6鄰9,658,U.S.申請09/428，082U.S專利申請20020137134,20040018590,20030186374，20050042664AlUS2006104968國外專利WO97/15327，WO00/56772AlWO91/17271，WO92/09690,W09937682A2，WO92/15679'WO92/01047，WO2002097048A2,W09524918Al,PCT/GB91/01134,WO99/25044,WO97/29131,WO98/31700WO99/15154;WO99/20253,WO92/19244,W092/簡4，WO00/37504,WO00/56772.WO91/05548，WO91層67，WO91腳67;箭92/02551W092/22324WO96/2069g，WO97/29131WO0簡525.WO2003016466A2,WO2005畫84A2).WO03/035835;WO,2,'PCT/US91/05939,PCIYUS9歸630,PCT/US94腦34,PCT/US96/1897S，PCT/US髓6280，WO92顏91，WO90/05144AlWO0009560,WO00/03750《WO02072636'WO91/膨7，WO91/10741WO92/01047,WO92/18619,WO93/11236，WO94/02602，WO95A5982,WO95/20401,WO96/3373SWO96/340%WO97/32572，WO97/32572，WO97/44013,WO97/44013，WO98/16654WO類柳3,WO98/31346,WO98/31346,WO98/50433，WO99/45031,WO99/53049,WO99/543428,WO99腳03WO99/66903，WO90/14424,WO90/14430,WO90/14443WO2004078140,歐洲專利EP229246，EP239,400，EP239,400;EP519,596，EP519，596;EP592,106;EP592,106;EP1,176,195;GB89/01334,GB91/01134,GB92/01755;其他文獻(xiàn)Amesetal.，J,Immunol.Methods184:177-186(1995)，Babcock,J.S.WaZ.(l卯6)Pnc.Wa/Z.Acad,21:7843-7848,Barbas"aZ.(1991)WMS紐:7978-7982，Bentley,D丄.，andRabbitts,T.H.，Cell32:181-189(1983),Berrebietal.(1998)Am.JPath152:667-672,Betteretal.,Science240:1041-1043(l卿)，Bird"aZ.(1988)Sci'e"ce242:423~426.BreiflingwPCTPublicationNo.WO93/01288,Brinkmanetal"J.Immunol,Methods182:41-50(1995),Broberg，etal.(2002)J.InterferonCytokineRes.22:641-651,Brownetal.(1991)Proc.Natl.Acad.Sci.88:2663-2667,Buchtetal.,(1996)Clin.Exp.Immunol.103:347-367,Buchwaldetal.,1980，Surgery88:507;Burtonetal.'AdvancesinImmunology57:191-280(1994),Carteretal.'Proc.Natl.Acad.Sci,U.S.A,89:4285(1992);Chothia&Lesk，J.Mol.Biol.196:901-917(1987),Chothiaetal.,J.Mol.Biol.227:799(1992)，Chothiaetal.,Nature342:877-883(1989),Clacksonw。Z.(1991)352:624-628.Cleeketal.,1997,"BiodegradablePolymericCarriersforabFGFAntibodyforCardiovascularApplication,"Pro.Int'l.Symp.Control,Rel.Bioact.Mater.24:853-854，Co,M.S.,etal.,J.Immunol.148:1149-1154(1992)Co,M.S.,etal.,Mol.Immunol.(1993)30:1361-1367,Cole,M.S.,etal.,J.Imnumol.159:3613-3621(1997),Cooper,etal.(2002)J.Immunol.168:1322-1327,Cuaetal.(2003)Nature421:744-748,DuchmarmetJImmunol.26:934-938(1996),Duringetal.,1989，Ann.Neurol.25:351;Durocheretal.,M<deicA"'cfeiesearc/i2002,Vol30，No.2,Elkins,etal.(2002)InfectionImmunity70:1936-1948，F(xiàn)aisetal.(1994)JInterferonRes.14:235-238;FooteandWinter(1992)，J.Mol.Biol.224:487-499，F(xiàn)uchse《a/.(1991)J/o/Tec/wotogy2:1370-1372，F(xiàn)uss,etal.,(1996)JImmunol.157:1261-1270,Garrad&(1991)Jio/Tec/mo&gy2:13734377,Giege,R,andDucruix,A.Barrett,'CrystallizationofNucleicAcidsandProteins,aPracticalApproach,2ndea.，pp.201-16,OxfordUniversityPress,NewYork,NewYork,(1999),Gilliesetal.,(1989)J.Immunol.Methods125:1.91-202,Goldspieletal.,1993,ClinicalPharmacy12:488-505;Goodson，inMedicalApplicationsofControlledRelease,supra,vol.2，pp.115-138(1984)，Gram"aZ.(1992)尸腐巡:3576-3580,GreenandJakobovits/JScp.Afec.188:483-495(1998)，Greenetal.JV必"wCew"icj7:13-21(1994)Griffiths"(1993)/12:725-734,Hammerling,etal.,:MonoclonalAntibodiesandT-CellHybrido咖s563-681(Elsevier,N.Y.,1981)，Harlowetal.,Antibodies:ALaboratoryManual,(ColdSpringHarborLaboratoryPress,2nded.l卿)，HawkinsW(1992)J編胸226:889-896Hay"flZ.(1992)flWnAn"6odify&ridomflj2:81-85,Hieter,P.A.，etal"J.Biol.Chem.257:1516-1522(1982),Higuchi,R.,in'TCRTechnology:PrinciplesandApplicationsforDNAAmplification",StocktonPress,NewYork(1989)，pp.61-70),Holliger,P.，etal,(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA￡Q:6444-6448，HoogenboomaZ.(1991)WwcAcidies!￡:4133-4137,HoogenboomH.R.,(1997)77BrecA.15:62-70;AzzazyH.，andHighsmithW.E,(2002)C!in.說'oc/tem,35:425-445;GavilondoJ.V.，andLarrickJ.W.(2002)說orecftm々wej29:128-145;HoogenboomH.,andGhamesP,(2000)/wimtmotogyTbday21:371-378,Howardetal.,1989，J.Neurosurg.71:105);Huse"a/.(1989〉Sc!'e固246:1275-1281，Hustonetal.(1988)Proc.Natl.Acad.Sci,USAM:5879-5883,Hustonetal.,MethodsinEnzymology203:46-88(1991);Johnnson，B.,e^Z.(1991)A""/.歷ocAe附.198:268-277.Johnsson，B.,aZ,(1995)J.MoZ.RecograV.雖:125-131，Joliotetal.,1991,Proc.Natl.Acad.Sci.USA88:1864-1868，Jonesetal.，Nature321:522(1986);J&nsson，U,,WaZ.(1993)歷oZ.CW".il:19-26;化nsson，Junghans,etal.(1990)CancerRes.50:1495-1502,Kabatef(1971)An".Acad,Sci.190:382-391.Kabat,E.A.,"aZ.(1991)S，ew"!j。/iVoto'"jo/VmrntmoZogfcd!F訴A￡WWo;i,U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIHPublicationNo.91-3242,KangwaZ.PCTPublicationNo.WO92/18619,KellermatmS-A.,andGreenL丄.(2002)Cwrg"f0/jz'm!'om!"歷Wec/wwZ05y13:593-597，Kettleboroughetal.(1991)Prot.Engineer.4:773-783,Kettleboroughetal.,Eur,J.Immunol.24:952-958(1994),Kipriyanov,S.M.，(1994)AfoZ./附"w/10Z.21:1047-1058,Kipriyanov,S.M.，flZ.(1995)Hww做andHyWdomcw6:93-101,Kobayashi,etal.(1989)JExpMed17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X9是Y、T、P、I或N；X10是Y、N、T、H、K、S或G；X11是N或Y；X12是P、N、A、D或S；X13是S、E、D或P；X14是L、K、D、T或Y；X15是K、F、V、M、R或A；X16是S、K、Q、P，或者不存在；X17是D、G、R，或者不存在；X18是F，或者不存在；X19是Q，或者不存在；且X20是D，或者不存在；CDR-H3.X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13(SEQIDNO:57)，其中X1是R、N或W；X2是G、T、R、P或H；X3是I、R、F、Y或Q；X4是R、V、Y、F或A；X5是S、N、G、A或R；X6是A、Y、L、F或M；X7是M、A、D、L或F；X8是D、M、Y或W；X9是Y、D或N；X10是Y、A，或者不存在；X11是M，或者不存在；X12是D，或者不存在；且X13是Y，或者不存在；CDR-L1.X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14-X15(SEQIDNO:58)，其中X1是K或R；X2是A；X3是S；X4是Q或E；X5是S或N；X6是V或I；X7是S、G或D；X8是N、T或K；X9是D、N或Y；X10是V、G或L；X11是A、I或H；X12是S，或者不存在；X13是F，或者不存在；X14是M，或者不存在；且X15是N，或者不存在；CDR-L2.X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8(SEQIDNO:59)，其中X1是Y或S；X2是A或T；X3是S或A；X4是N、H、S或Q；X5是R、N或S；X6是Y、Q或I；X7是T、S或G；且X8是S，或者不存在；和CDR-L3.X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9(SEQIDNO:60)，其中X1是Q；X2是Q；X3是D、Y或S；X4是Y、N、K或I；X5是N、T、S或E；X6是S、Y、V或W；X7是P；X8是W、F、Y、L或P；且X9是T或S。2.權(quán)利要求1的結(jié)合蛋白，其中所述至少一個CDR包含選自下列的氨基酸序列SEQIDNO.:35的殘基31-37;SEQIDNO.:35的殘基52-67;SEQIDNO.:35的殘基100-108;SEQIDNO.:36的殘基24-34;SEQIDNO.:36的殘基50-56;SEQIDNO.:36的殘基89-97;SEQIDNO.:37的殘基31-37;SEQIDNO.:37的殘基52-67;SEQIDNO.:37的殘基100-109;SEQIDNO.:38的殘基24-34;SEQIDNO.:38的殘基50-56;SEQIDNO.:38的殘基89-97;SEQIDNO.:39的殘基31-35;SEQIDNO.:39的殘基50-66;SEQIDNO.:39的殘基99-106;SEQIDNO.:40的殘基24-34;SEQIDNO.:40的殘基50-56;SEQIDNO.:40的殘基89-97;SEQIDNO.:41的殘基31-35;SEQIDNO.:41的殘基50-66;SEQIDNO.:41的殘基99-106;SEQIDNO.:42的殘基24-34;SEQIDNO.:42的殘基50-56;SEQIDNO.:42的殘基89-97;SEQIDJNU.:43的殘基31-35;SEQIDNO.:43的殘基50-66;SEQIDNO.:43的殘基99-106;SEQIDNO.:44的殘基24-34;SEQIDNO.:44的殘基50-56;SEQIDNO.:44的殘基89-97;SEQIDNO.:45的殘基31-35;SEQIDNO.:45的殘基50-66;SEQIDNO.:45的殘基99-101;SEQIDNO.:46的殘基24-34;SEQIDNO.:46的殘基50-56;SEQIDNO.:46的殘基89-97;SEQIDNO.:47的殘基31-35;SEQIDNO.:47的殘基50-66;SEQIDNO.:47的殘基99-106;SEQIDNO.:48的殘基24-34;SEQIDNO.:48的殘基50-56;SEQIDNO.:48的殘基89-97;SEQIDNO.:49的殘基31-35;SEQIDNO.:49的殘基50-66;SEQIDNO.:49的殘基99-111;SEQIDNO.:50的殘基24-38;SEQIDNO.:50的殘基53-60;SEQIDNO.:50的殘基93-101;SEQIDNO.:51的殘基31-37;SEQIDNO.:51的殘基52-67;SEQIDNO.:51的殘基100-109;SEQIDNO.:52的殘基24-34;SEQIDNO.:52的殘基50-56;SEQIDNO.:52的殘基89-97;SEQIDNO.:53的殘基31-35;SEQIDNO.:53的殘基47-66;SEQIDNO.:53的殘基99-107;SEQIDNO.:54的殘基24-34;SEQIDNO.:54的殘基50-56;和SEQIDNO.:54的殘基89-97。3.權(quán)利要求1的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白包含至少3個CDR。4.權(quán)利要求3的結(jié)合蛋白，其中所述至少3個CDR選自由下列組成的可變區(qū)CDR組<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>5.權(quán)利要求4的結(jié)合蛋白，所述結(jié)合蛋白包含至少兩個可變區(qū)CDR組。6.權(quán)利要求5的結(jié)合蛋白，其中所述至少兩個可變區(qū)CDR組選自VH1D4CDR組&VL1D4CDR組；VH1A6CDR組&VL1A6CDR組；VH1D8CDR組&VL1D8CDR組；VH3G7CDR組&VL3G7CDR組；VH5E8CDR組&VL5E8CDR組；VH8E1CDR組&VL8E1CDR組；VH1H6CDR組&VL1H6CDR組；VH3A11CDR組feVL3A11CDR組；VH4B4CDR組&VL4B4CDR組；和VH7G3CDR組&VL7G3CDR組。7.權(quán)利要求3的結(jié)合蛋白，所述結(jié)合蛋白還包含人接受者框架。8.權(quán)利要求4的結(jié)合蛋白，所述結(jié)合蛋白還包含人接受者框架。9.權(quán)利要求5的結(jié)合蛋白，所述結(jié)合蛋白還包含人接受者框10.權(quán)利要求6的結(jié)合蛋白，所述結(jié)合蛋白還包含人接受者框11.權(quán)利要求7的結(jié)合蛋白，其中所述人接受者框架包含選自下列的氨基酸序列SEQIDNO.:6SEQIDNO,:19卿I'DNO.:32SEQIDNO.:7SEQIDNO.:20SEQIDNO.:33SEQIDNO.■-8SEQIDNO.:21SEQIDNO.:34SEQIDNO.:9SEQ工DNO.:22SEQIDNO-:92SEQIDNO.:10SEQ工D亂:23SEQIDNO.:93SEQIDNO.:11SEQIDNO.:24SEQ工DNO-:94SEQIDNO-:12SEQIDNO.:25SEQI.DNO.:95SEQ工DNO.:13SEQ工DNO.:26SEQI:DNO.:96SEQIDNO.:14SEQ工DNO.:27和SEQIDNO.:15SEQIDNO.:28SEQIDNO.:97SEQ工DNO.:ISSEQ工DNO.:29SEQIDNO.:17SEQ工DNO.:30SEQ工DNO.:18SEQ工DNO.:3112.權(quán)利要求8的結(jié)合蛋白，其中所述人接受者框架包含選自下列的氨基酸序列SEQIDNO-:6SEQIDNO.:19SEQIDNO.:32SEQIDNO.:7SEQ工DNO.:20SEQIDNO.:33SEQ工DNO.:8SEQIDM).:21SEQIDM).:34SEQIDNO.:9SEQIDNO.:22SEQIDM3.:92SEQIDNCK:10SEQIDNO.:23SEQ工DMO.:93SEQ工DNO,:USEQ工DNO.:24SEQIDNO.:94SEQ工DNO,:12SEQ工D亂:25SEQ工DNO.:95SEQIDNO.:13SEQID恥.:26SEQ工DNO.:96SEQ工DNO,:14SEQ工DNO.:27和SEQIDNO.:15SEQIDNO.:28SEQIDNO.:97SEQ工DNO,:16SEQIDNO.:29SEQIDNO.:17SEQIDNO.:30SEQID恥.:18SEQ工DNO.:3113.權(quán)利要求9的結(jié)合蛋白，其中所述人接受者框架包含選自下列的氨基酸序列SEQIDNO.r6SEQIDNO.:19SEQ工DUK).:32SEQID恥.:7SEQIDNO,:20SEQIDNO.:33SEQIDNO.:8SEQIDNO.:21SEQID1TO.:34SEQIDNO.:9SEQIDNO.:22SEQIDWO.:92SEQIDNO.:10SEQIDNO.:23SEQIDNO.:93SEQIDNO.:11SEQIDNO.:24SEQIDNO.:94SEQIDWO.:12SEQ工DNO.:25SEQIDNO.:95SEQ工DNO.:13SEQ工D亂:26SEQIDNO.:96SEQIDNO.:14SEQ工DNO.:27和SEQIDNO.:15SEQIDNO.:28SEQIDNO.:97SEQIDNO.:16SEQ工DNO.:29SEQIDNO.:17SEQIDNO.:30SEQ工DNO.:18SEQIDNO-:3114.權(quán)利要求10的結(jié)合蛋白，其中所述人接受者框架包含選自下列的氨基酸序列SEQIDNO.:6SEQID亂:19SEQIDNO.:32SEQ工DNO,:7SEQIDNO.:20SEQIDNO.:33SEQ工DNO.;8SEQIDNO.:21SEQIDNO.:34SEQ工DNO.:9SEQIDNO.:22SEQIDNO.:92SEQIDNO.:10SEQ工DNO.:23SEQIDNO.:93SEQ工DNO-:11SEQIDNO.:24SEQIDNO.:94SEQ工DNO.:12SEQ工DNO.:25SEQIDNO.:95SEQ工DNO.:13SEQ工DNO,:26SEQIDNO-:96SEQIDNO-:14SEQIDNO.:27和SEQIDNO.:15SEQIDNO.:28SEQIDNO.:97SEQIDUO.:16SEQIDNO.:29SEQ工DNO.:17SEQIDNO.:30SEQ工DNO.:18SEQIDNO.:3115.權(quán)利要求l的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白包含至少一個具有選自下列的氨基酸序列的可變區(qū)SEQIDNO.:61SEQIDNO.:62SEQIDNO.:63SEQIDNO.:69SEQ工DNO.:75SEQIDNO.:64SEQIDNO.:70SEQIDNO.:76SEQIDNO.:65SEQIDNO.:71SEQIDNO.:77SEQ工DNO.:66SEQID恥.:72和SEQIDNO,:67SEQIDNO.:73SEQIDNO.:78。SEQIDNO.:68SEQIDNO.:7416.權(quán)利要求15的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白包含兩個可變區(qū)，其中所述兩個可變區(qū)具有選自下列的氨基酸序列SEQIDNO,:61&SEQIDNO.:62,SEQIDNO.:63&SEQIDNO.:64,SEQ工DNO.:65&SEQIDNO.:66,SEQID亂:67&SEQIDNO.:68,SEQIDNO.:69ScSEQIDNO.:70,SEQID恥.:71&SEQIDNO.:72,SEQIDNO.:73&SEQIDNO.:74,SEQIDNO.:75&SEQIDNO.:76,SEQ工DNO.:77&SEQIDNO.:78SEQIDNO.:67&SEQIDNO.:70,工DNO.:69&SEQ工DNO.:68,17.權(quán)利要求7的結(jié)合蛋白，其中所述人接受者框架包含至少一個在關(guān)鍵殘基上的框架區(qū)氨基酸取代，所述關(guān)鍵殘基選自與CDR相鄰的殘基；糖基化位點殘基；稀有殘基；能夠與人IL-12的p40亞單位相互作用的殘基；能夠與CDR相互作用的殘基；正規(guī)殘基；重鏈可變區(qū)與輕鏈可變區(qū)之間的接觸殘基；Vernier區(qū)內(nèi)的歹戔基；和在Chothia-定義的可變重鏈CDR1與Kabat-定義的第一重鏈框架之間重疊的區(qū)域內(nèi)的殘基。18.權(quán)利要求10的結(jié)合蛋白，其中所述人接受者框架包含至少一個在關(guān)鍵殘基上的框架區(qū)氨基酸取代，所述關(guān)鍵殘基選自與CDR相鄰的殘基；糖基化位點殘基；稀有殘基；能夠與人IL-12的p40亞單位相互作用的殘基；能夠與CDR相互作用的殘基；正規(guī)殘基；重鏈可變區(qū)與輕鏈可變區(qū)之間的接觸殘基；Vernier區(qū)內(nèi)的歹戔基；和在Chothia-定義的可變重鏈CDRl與Kabat-定義的第一重鏈框架之間重疊的區(qū)域內(nèi)的殘基。19.權(quán)利要求16的結(jié)合蛋白，其中所述人接受者框架包含至少一個在關(guān)鍵殘基上的框架區(qū)氨基酸取代，所述關(guān)鍵殘基選自與CDR相鄰的殘基；糖基化位點殘基；稀有殘基；能夠與人IL-12的p40亞單位相互作用的殘基；能夠與CDR相互作用的殘基；正規(guī)殘基；重鏈可變區(qū)與輕鏈可變區(qū)之間的接觸殘基；Vernier區(qū)內(nèi)的殘基；和在Chothia-定義的可變重鏈CDRl與Kabat-定義的第一重鏈框架之間重疊的區(qū)域內(nèi)的殘基。20.權(quán)利要求17的結(jié)合蛋白，其中所述關(guān)鍵殘基選自3H、5H、10H、11H、12H、13H、15H、16H、18H、19H、23H、24H、25H、30H、41H、44H、46H、49H、66H、68H、71H、73H、74H、75H、76H、77H、78H、79H、81H、82H、82AH、82BH、82CH、83H、84H、85H、86H、87H、89H、93H、98H、108H、109H、1L、2L、3L、7L、8L、9L、10L、11L、12L、13L、15L、17L、19L、20L、21L、22L、36L、41L、42L、43L、45L、46L、58L、60L、62L、63L、67L、70L、73L、74L、77L、78L、79L、80L、83L、85L、87L、104L和106L。21.權(quán)利要求18的結(jié)合蛋白，其中所述關(guān)鍵殘基選自:m、5H、麗、IIH、12H、13H、15H、16H、腦、19H、23H、24H、25H、30H、41H、44H、46H、49H、66H、68H、71H、73H、74H、75H、76H、77H、78H、79H、81H、82H、82AH、82BH、82CH、83H、84H、85H、86H、87H、89H、93H,.98H、108H、109H、1L、2L、3L、7L、8L、9L、IOL、IIL、12L、13L、15L、17L、19L、20L、21L、22L、36L、41L、42L、43L、45L、46L、58L、60L、62L、63L、67L、70L、73L、74L、77L、78L、79L、80L、83L、85L、87L、104L和106L。22.權(quán)利要求19的結(jié)合蛋白，其中所述關(guān)鍵殘基選自:犯、5H、IOH、IIH、12H、13H、15H、16H、18H、19H、23H、24H、25H、30H、41H、44H、46H、49H、66H、68H、71H、73H、74H、75H、76H、77H、78H、79H、81H、82H、82AH、82BH、82CH、83H、84H、85H、86H、87H、89H、93H、,98H、108H、109H、1L、2L、3L、7L、8L、9L、IOL、UL、12L、13L、15L、17L、亂、20L、21L、22L、36L、41L、42L、43L、45L、46L、58L、60L、62L、63L、67L、70L、73L、74L、77L、78L、79L、80L、83L、85L、87L、104L和106L。23.權(quán)利要求17的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白是共有人可變區(qū)。24.權(quán)利要求18的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白是共有人可變區(qū)。25.權(quán)利要求19的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白是共有人可變區(qū)。26.權(quán)利要求7的結(jié)合蛋白，其中所述人接受者框架包含至少一個框架區(qū)氨基酸取代，其中該框架的氨基酸序列與所述人接受者框架的序列是至少65%相同，并且包含至少70個與所述人接受者框架相同的氨基酸殘基。27.權(quán)利要求10的結(jié)合蛋白，其中所述人接受者框架包含至少一個框架區(qū)氨基酸取代，其中該框架的氨基酸序列與所述人接受者框架的序列是至少65%相同，并且包含至少70個與所述人接受者框架相同的氨基酸殘基。28.權(quán)利要求16的結(jié)合蛋白，其中所述人接受者框架包含至少一個框架區(qū)氨基酸取代，其中該框架的氨基酸序列與所述人接受者框架的序列是至少65%相同，并且包含至少70個與所述人接受者框架相同的氨基酸殘基。29.權(quán)利要求l的結(jié)合蛋白，所述結(jié)合蛋白包含至少一個具有選自下列的氨基酸序列的可變區(qū)SEQ工DNO.:79SEQIDNO.:88SEQIDNO.:103SEQ工DNO.:80SEQ工DNO.:89SEQ工DNO.:104SEQIDNO.:81SEQID亂:90SEQ工DNO.:105SEQ工DNO.:82SEQIDNO.:91SEQIDNO.:106SEQIDNO,:83SEQIDNO.:98SEQ工DNO.:107SEQ工DNO.:84SEQIDNO.:99SEQIDMO.:108SEQ工D亂:85SEQID:100和SEQIDNO.:86SEQID亂:101SEQ工DMO.:10〗)SEQ工DNO.:87SEQIDNO.:10230.權(quán)利要求29的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白包含兩個可變區(qū)，其中所述兩個可變區(qū)具有選自下列的氨基酸序列SEQIDNO.:67&SEQIDNO.:79,SEQIDNO.:80&SEGIDNO.:81,SEQ工DNO.:82&SEQ工DNO.:83,SEQ工D:84&SEQIDNO.:85,SEQ工D恥.:86&SEQIDNO.:87,SEQIDNO.:88&SEQID亂89,SEQIDNO.:90&SEQIDNO.:91,SEQIDNO.:98&SEQ工DNO.:99,SEQ工DNO.:100&SEQIDNO.SEQ工DNO.:102&SEQIDNO,:103,SEQ工D亂:104&SEQIDNO.rl05,SEQIDWO.:106&SEQ工DNO.:107,SEQIDNO.:108&SEQ工DNO.-109Q31.權(quán)利要求20的結(jié)合蛋白，所述結(jié)合蛋白包含至少一個具有選自下列的氨基酸序列的可變區(qū)SEQIDNO.:79SEQ工DNO.:88SEQIDNO,:103SEQIDNO.:80SEQIDNO.:89SEQ工DNO.:104SEQ工DNO.:81SEQIDNO.:90SEQIDNO.:105SEQIDNO.:82SEQIDNO.:91SEQIDNO.SEQIDNO.:83SEQIDNO.:98SEQ工DNO.:107SEQIDNO.:84SEQID恥.:99SEQIDNO.:IOBSEQIDNO.:85SEQ工DNO.:100和SEQ工DNO.:86SEQIDNO.:101SEQIDNO.:109SEQID亂:87SEQ工DNO.:10232.權(quán)利要求21的結(jié)合蛋白，所述結(jié)合蛋白包含至少一個具有選自下列的氨基酸序列的可變區(qū)SEQ工DNO.:79SEQIDNO.:88SEQIDNO.:103SEQIDNO.:80SEQIDNO,:89SEQIDUO.:104SEQ工DNO-:81SEQID亂:90SEQIDNO.:105SEQIDNO.:82SEQIDNO,:91SEQIDNO.:106SEQ工DNO.:83SEQIDNO.:98SEQIDNO.:107SEQIDNO.:84SEQIDNO.:99SEQIDM).:108SEQIDNO.:85SEQIDNO.:100和SEQIDNO.:86SEQIDNO.:101SEQIDNO.:109SEQ工DNO.:87SEQ工DUO.:10233.權(quán)利要求22的結(jié)合蛋白，所述結(jié)合蛋白包含至少一個具有選自下列的氨基酸序列的可變區(qū)SEQIDNO.:79SEQIDNO.:87SEQIDNO.:101SEQIDNO.:80SEQ工DNO,.:88SEQ工DNO.:102SEQIDNO.:81SEQIDUO,.:89SEQIDNO.:103SEQ工DNO.:82SEQ工DNO.:90SEQIDUO.:104SEQIDNO.:83SEQIDWO.:91SEQ工DNO.:105SEQ工DNO.:84SEQ工DNO,:98SEQIDNO.:1C'6SEQ工DNO.;85SEQIDNO,:99SEQIDNO.:107SEQIDNO.:86SEGIDNO，100SEQIDNO.;108,和SEQIDNO.34.權(quán)利要求1的結(jié)合蛋白，IL-12和IL-23的耙。35.權(quán)利要求4的結(jié)合蛋白，IL-12和IL-23的耙。36.權(quán)利要求6的結(jié)合蛋白，IL-12和IL-23的耙。37.權(quán)利要求7的結(jié)合蛋白，IL-12和IL-23的耙。38.權(quán)利要求11的結(jié)合蛋白IL-12和IL-23的耙。39.權(quán)利要求15的結(jié)合蛋白IL-12和IL-23的靶。40.權(quán)利要求17的結(jié)合蛋白IL-12和IL-23的耙。41.權(quán)利要求20的結(jié)合蛋白IL-12和IL-23的耙。42.權(quán)利要求26的結(jié)合蛋白IL-12和IL-23的耙。43.權(quán)利要求29的結(jié)合蛋白IL-12和IL-23的耙。44.權(quán)利要求34的結(jié)合蛋白IL-12和IL-23的耙的生物功能。45.權(quán)利要求39的結(jié)合蛋白IL-12和IL-23的靶的生物功能。46.權(quán)利要求43的結(jié)合蛋白IL-12和IL-23的靶的生物功能。47.權(quán)利要求34的結(jié)合蛋白IL-12和IL-23的靶。48.權(quán)利要求39的結(jié)合蛋白IL-12和IL-23的耙。49.權(quán)利要求43的結(jié)合蛋白IL-12和IL-23的耙。其中所述結(jié)合蛋白能夠結(jié)合選自其中所述結(jié)合蛋白能夠結(jié)合選自其中所述結(jié)合蛋白能夠結(jié)合選自其中所述結(jié)合蛋白能夠結(jié)合選自其中所述結(jié)合蛋白能夠結(jié)合選自其中所述結(jié)合蛋白能夠結(jié)合選自其中所述結(jié)合蛋白能夠結(jié)合選自其中所述結(jié)合蛋白能夠結(jié)合選自其中所述結(jié)合蛋白能夠結(jié)合選自其中所述結(jié)合蛋白能夠結(jié)合選自其中所述結(jié)合蛋白能夠調(diào)節(jié)選自其中所述結(jié)合蛋白能夠調(diào)節(jié)選自其中所述結(jié)合蛋白能夠調(diào)節(jié)選自其中所述結(jié)合蛋白能夠中和選自其中所述結(jié)合蛋白能夠中和選自其中所述結(jié)合蛋白能夠中和選自50.權(quán)利要求34的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白對于所述靶的結(jié)合速率常數(shù)(Kon)選自約l(^M"s";至少約103M"s";至少約104M-V1;至少約105M"s";和至少約106M-V1;這是通過表面等離子共振測定的。51.權(quán)利要求39的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白對于所述靶的結(jié)合速率常數(shù)(Kon)選自約l(^M"s";至少約103M"s";至少約104M-V1;至少約105M-V1;和至少約106M"s";這是通過表面等離子共振測定的。52.權(quán)利要求42的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白對于所述靶的結(jié)合速率常數(shù)(Kon)選自約l(^M"s";至少約103M"s";至少約104M"s";至少約105M-V1;和至少約106M-V1;這是通過表面等離子共振測定的。53.權(quán)利要求43的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白對于所述靶的結(jié)合速率常數(shù)(Kon)選自約102M"s";至少約103M-'s—1;至少約104M-Y1;至少約105M-V1;和至少約106NT's—1;這是通過表面等離子共振測定的。54.權(quán)利要求34的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白對于所述耙的解離速率常數(shù)(Koff)選自至多約lO3s-';至多約10-、"；至多約10-5s";和至多約10"s";這是通過表面等離子共振測定的。55.權(quán)利要求39的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白對于所述靶的解離速率常數(shù)(Koff)選自至多約10-3s";至多約10"s";至多約10-5s-1;和至多約lO-S—1;這是通過表面等離子共振測定的。56.權(quán)利要求42的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白對于所述把的解離速率常數(shù)(Koff)選自至多約10-3s";至多約10-4s";至多約10-5s";和至多約lO-S—1;這是通過表面等離子共振測定的。57.權(quán)利要求43的結(jié)合蛋白，其中所迷結(jié)合蛋白對于所述靶的解離速率常數(shù)(Koff)選自至多約10-3s";至多約10-4s";至多約10-5s-1;和至多約10-、"；這是通過表面等離子共振測定的。58.權(quán)利要求34的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白對于所述靶的離解常數(shù)(K。)選自至多約10—7M;至多約l(T8M;至多約IO力M;至多約10"。M;至多約1(T"M;至多約10-12]^;和至多10"M。59.權(quán)利要求39的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白對于所述耙的萬解常數(shù)(Kd)逸自至多約10-7M;至多約10-8M;至多約l(T9M;至多約10"。M;至多約10—"M;至多約10"M;和至多10"3M。60.權(quán)利要求42的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白對于所述靶的葛解常數(shù)(Kd)逸自至多約It)-7M;至多約10-8M;至多約10-9M;至多約10"。M;至多約10-"M;至多約10"M;和至多10"M。61.權(quán)利要求43的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白對于所述靶的離解常數(shù)(Ko)選自至多約10-7M;至多約10-8M;至多約10-9M;至多約10"。M;至多約10-"M;至多約10-12M;和至多10"M。62.包含權(quán)利要求1-61任一項的結(jié)合蛋白的抗體構(gòu)建物，所述抗體構(gòu)建物還包含接頭多肽或免疫球蛋白恒定區(qū)。63.權(quán)利要求62的抗體構(gòu)建物，其中所述結(jié)合蛋白選自免疫球蛋白分子，單克隆抗體，嵌合型抗體，CDR-接枝抗體，人源化抗體，F(xiàn)ab，F(xiàn)ab,,F(ab,)2，F(xiàn)v,二硫鍵連接的Fv,scFV,單結(jié)構(gòu)域抗體，二抗體，多特異性抗體，雙重特異性抗體，和雙特異性抗體。64.權(quán)利要求62的抗體構(gòu)建物，其中所述結(jié)合蛋白包含選自下列的重鏈免疫球蛋白恒定區(qū)人IgM恒定區(qū)，人lgG4恒定區(qū)，人IgGl恒定區(qū)，人IgE恒定區(qū)，人lgG2恒定區(qū)，人lgG3恒定區(qū)，好人IgA恒定區(qū)。65.權(quán)利要求62的抗體構(gòu)建物，其中所述構(gòu)建物包含免疫球蛋白恒定區(qū)，所述免疫球蛋白恒定區(qū)具有選自下列的氨基酸序列SEQIDNO.:2SEQIDNO.:4SEQIDNO.:5和SEQIDNO.:3。66.包含權(quán)利要求62-65任一項的抗體構(gòu)建物的抗體綴合物，所述抗體綴合物還包含選自下列的物質(zhì)免疫粘著分子、造影劑、治療劑和細(xì)"包毒性劑。67.權(quán)利要求66的抗體綴合物，其中所述物質(zhì)是選自下列的造影劑》文射性標(biāo)記物、酶、熒光標(biāo)記物、發(fā)光標(biāo)記物、生物發(fā)光標(biāo)記物、》茲性標(biāo)記物和生物素。68.權(quán)利要求66的抗體綴合物，其中所述造影劑是選自下列的放射性標(biāo)記物3H、14C、35S、90Y、"Tc、山In、125I、131I、177Lu、166Ho和153Sm。69.權(quán)利要求66的抗體綴合物，其中所述物質(zhì)是選自下列的治療劑或細(xì)胞毒性劑抗-代謝物、烷化劑、抗生素、生長因子、細(xì)胞因子、抗-血管生成劑、抗-有絲分裂劑、蒽環(huán)霉素、毒素和編程性細(xì)胞死亡劑。70.權(quán)利要求64的抗體構(gòu)建物，其中所述結(jié)合蛋白具有人糖基化模式。71.權(quán)利要求66的抗體綴合物，其中所述結(jié)合蛋白具有人糖基化模式。72.權(quán)利要求3的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白作為晶體存在。73.權(quán)利要求62的抗體構(gòu)建物，其中所述抗體構(gòu)建物作為晶體存在。74.權(quán)利要求66的抗體綴合物，其中所述抗體構(gòu)建物作為晶體存在。75.權(quán)利要求72的結(jié)合蛋白，其中所述晶體是沒有載體的藥學(xué)控制釋放晶體。76.權(quán)利要求73的抗體構(gòu)建物，其中所述晶體是沒有載體的藥學(xué)控制釋放晶體。77.權(quán)利要求74的抗體綴合物，其中所述晶體是沒有載體的藥學(xué)控制釋放晶體。78.權(quán)利要求72的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白具有比所述結(jié)合蛋白的可溶性相應(yīng)物更大的體內(nèi)半存留期。79.權(quán)利要求73的抗體構(gòu)建物，其中所述抗體構(gòu)建物具有比所述抗體構(gòu)建物的可溶性相應(yīng)物更大的體內(nèi)半存留期。80.權(quán)利要求74的抗體綴合物，其中所述抗體構(gòu)建物具有比所81.權(quán)利要求72的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白保留生物活性。82.權(quán)利要求73的抗體構(gòu)建物，其中所述抗體構(gòu)建物保留生物活性。83.權(quán)利要求74的抗體綴合物，其中所述抗體綴合物保留生物活性。84.編碼權(quán)利要求1-61任一項的結(jié)合蛋白氨基酸序列的分離的核酸。85.編碼權(quán)利要求62-65任一項的抗體構(gòu)建物氨基酸序列的分離的核酸。86.編碼權(quán)利要求66-69任一項的抗體綴合物氨基酸序列的分離的核酸。87.包含權(quán)利要求84-86任一項的分離的核酸的載體。88.權(quán)利要求87的載體，其中所述載體選自pcDNA、pTT、pTT3、pEFBOS、pBV、pJV和pBJ。89.包含權(quán)利要求87-88任一項的載體的宿主細(xì)胞。90.權(quán)利要求89的宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞是原核細(xì)胞。91.權(quán)利要求90的宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞是大腸桿菌。92.權(quán)利要求89的宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞是真核細(xì)胞。93.權(quán)利要求92的宿主細(xì)胞，其中所述真核細(xì)胞選自原生生物纟田月包、動物細(xì)胞、植物細(xì)胞和真菌細(xì)胞。94.權(quán)利要求92的宿主細(xì)胞，其中所述真核細(xì)胞是選自哺乳動物細(xì)胞、鳥類細(xì)胞和昆蟲細(xì)胞的動物細(xì)胞。95.權(quán)利要求92的宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞是CHO細(xì)胞。96.權(quán)利要求92的宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞是COS。97.權(quán)利要求92的宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞是酵母細(xì)胞。98.99.權(quán)利要求92的宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞是昆蟲Sf9細(xì)胞。100.能夠結(jié)合IL-12的p40亞單位的蛋白的制備方法，所述方法包括在足以產(chǎn)生能夠結(jié)合IL-12的p40亞單位的結(jié)合蛋白的條件下在培養(yǎng)基中培養(yǎng)權(quán)利要求89-99任一項的宿主細(xì)胞中。101.根據(jù)權(quán)利要求100的方法制得的蛋白。102.用于釋放結(jié)合蛋白的組合物，其中所述組合物包括(a)制劑，所述制劑包含權(quán)利要求72-83任一項的晶體形式的結(jié)合蛋白和組分，和(b)至少一種聚合載體。103.權(quán)利要求102的組合物，其中所述聚合載體是選自下列的聚合物聚(丙烯酸)、聚(氰基丙烯酸酯)、聚(氨基酸)、聚(酸酐)、聚(縮肽)、聚(酯)、聚(乳酸)、聚(乳酸-共-羥基乙酸)或PLGA、聚(P-羥基丁酸)、聚(己內(nèi)酯)、聚(二氧雜環(huán)己酮)；聚(乙二醇)、聚((羥丙基)甲基丙烯酰胺)、聚[(有機)磷溱]、聚(原酸酯)、聚(乙烯醇)、聚(乙烯吡咯烷酮)、馬來酸酐-烷基乙烯基醚共聚物、多聚醇、白蛋白、藻酸鹽、纖維素和纖維素衍生物、膠原、纖維蛋白、明膠、透明質(zhì)酸、低聚糖、糖氨基聚糖、硫酸多糖、他們的混合物和共聚物。104.權(quán)利要求102的組合物，其中所述組分選自白蛋白、蔗糖、海藻糖、乳糖醇、明膠、羥丙基-P-環(huán)糊精、曱氧基聚乙二醇和聚乙二醇。105.治療哺乳動物的方法，所述方法包括給動物施用有效量的權(quán)利要求96的組合物。106.藥物組合物，所述藥物組合物包含權(quán)利要求1-61任一項的結(jié)合蛋白和可藥用載體。107.權(quán)利要求106的藥物組合物，其中所述可藥用載體起用于提高所述結(jié)合蛋白的吸收或分散的佐劑的功能。108.權(quán)利要求107的藥物組合物，其中所述佐劑是透明質(zhì)酸酶。109.權(quán)利要求106的藥物組合物，其中所述藥物組合物還包含至少一種用于治療其中IL-12活性是有害的病癥的另外的治療劑。110.權(quán)利要求109的藥物組合物，其中所述另外的治療劑選自治療劑、造影劑、細(xì)胞毒性劑、血管生成抑制劑；激酶抑制劑；共同-刺激分子阻斷劑；粘著分子阻斷劑；抗-細(xì)胞因子抗體或者其功能片段；曱氨喋呤；環(huán)孢菌素；雷帕霉素；FK506;可檢測的標(biāo)記物或報道基因；TNF桔抗劑；抗風(fēng)濕藥物；肌肉松弛劑、麻醉劑、非甾類抗炎藥物(NSAID)、鎮(zhèn)痛劑、麻醉藥、鎮(zhèn)靜劑、局麻劑、神經(jīng)肌肉阻斷劑、抗微生物劑、抗牛皮癬劑、皮質(zhì)類固醇藥物、組成代謝甾類藥物、紅細(xì)胞生成素、致免疫劑、免疫球蛋白、免疫抑制劑、生長激素、激素替代藥物、放射性藥物、抗抑郁劑、抗精神病劑、興奮劑、哮喘藥物、(3-激動劑、吸入的甾類藥物、腎上腺素或類似物、細(xì)胞因子和細(xì)胞因子拮抗劑。111.用于降低人IL-12活性的方法，所述方法包括將人IL-12與權(quán)利要求1-61任一項的結(jié)合蛋白接觸，從而降低人IL-12活性。112.在患有其中IL-12活性是有害的病癥的人個體中降低人IL-12活性的方法，所述方法包括給所述人個體施用權(quán)利要求1-61任一項的結(jié)合蛋白，從而降低人個體中的人IL-12活性。113.治療個體的其中IL-12活性是有害的疾病或病癥的方法，所述方法包括給所述個體施用權(quán)利要求1-61任一項的結(jié)合蛋白，從而實現(xiàn)治療。114.權(quán)利要求113的方法，其中所述病癥選自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、幼年慢性關(guān)節(jié)炎、膿毒性關(guān)節(jié)炎、菜姆關(guān)節(jié)炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、脊推關(guān)節(jié)病、全身紅斑狼瘡、局限性回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、炎性腸病、胰島素依賴性糖尿病、曱狀腺炎、哮喘、變態(tài)反應(yīng)疾病、牛皮癬、皮炎^更皮病、移^t物抗宿主病、器官移#_排異、與器官移植相關(guān)的急性或慢性免疫疾病、肉狀瘤病、動脈粥樣硬化、傳播性血管內(nèi)凝血、Kawasaki's病、Grave's病、腎病綜合征、'f曼性疲勞綜合征、Wegener's肉芽腫病、Henoch-Schoenlein紫癜、腎微小性血管炎、慢性活性肝炎、眼色素層炎、膿毒性休克、中毒休克綜合征、膿毒癥綜合征、惡病質(zhì)、傳染病、由寄生蟲引起的疾病、獲得性免疫缺陷綜合征、急性橫向骨髓炎、亨廷頓舞蹈病、帕金森病、早老性癡呆、中風(fēng)、原發(fā)膽汁性肝硬化、溶血性貧血、惡性腫瘤、心力衰竭、心肌梗塞、Addison's病、散發(fā)性I型多腺缺乏和II型多腺缺乏、Schmidt's綜合征、成人(急性)呼吸窘迫綜合征、脫發(fā)、斑形脫發(fā)、血清反應(yīng)陰性關(guān)節(jié)病、關(guān)節(jié)病、Reiter's病、牛皮癬性關(guān)節(jié)病、潰瘍性結(jié)腸關(guān)節(jié)病、腸病性滑膜炎、衣原體、鼠疫和沙門氏菌相關(guān)關(guān)節(jié)病、脊推關(guān)節(jié)病、動脈粥樣化疾病/動脈硬化、特應(yīng)性變態(tài)反應(yīng)、自身免疫大皰病、尋常性天皰瘡、落葉性天皰瘡、類天皰瘡、線性IgA病、自身免疫性溶血性貧血、Coombs陽性溶血性貧血、獲得性性惡性貧血、少年惡性貧血、肌痛性大腦炎/RoyalFree病、慢性粘膜皮膚念珠菌病、巨細(xì)胞關(guān)節(jié)炎、原發(fā)性硬化性肝炎、起因不明自身免疫性肝炎、獲得性免疫缺陷病綜合征、獲得性免疫缺陷相關(guān)疾病、乙肝、丙肝、普通各式各樣的免疫缺陷(普通各式各樣的血丙種球蛋白減少癥)、膨脹心肌病、女性不孕癥、卯巢衰竭、早產(chǎn)卯巢衰竭、纖維變性肺病、起因不明的纖維組織形成牙槽炎、炎后間質(zhì)性肺病、間質(zhì)性肺炎、與間質(zhì)性肺病相關(guān)的結(jié)締組織疾病、與肺病相關(guān)的混合結(jié)締組織疾病、與間質(zhì)性肺病相關(guān)的全身硬化、與間質(zhì)性肺病相關(guān)的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、與肺病相關(guān)的全身紅斑狼瘡、與肺病相關(guān)的皮膚肌炎/多肌炎、與肺病相關(guān)的Sjogren's病、與肺病相關(guān)的僵硬脊推炎、結(jié)節(jié)性血管炎彌散肺病、與肺病相關(guān)的含鐵血黃素沉著病、藥物引起的間質(zhì)性肺病、纖維化、輻射纖維化、閉塞性毛細(xì)支氣管炎、慢性嗜酸性肺炎、淋巴細(xì)胞浸潤性肺病、傳染病后間質(zhì)性肺病、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、自身免疫性肝炎、1-型自身免疫性肝炎(典型自身免疫性或狼瘡樣肝炎)、2-型自身免疫性肝炎(抗-LKM抗體肝炎)、自身免疫介導(dǎo)的低血糖、具有黑色棘皮癥的B型胰島素抗性、曱狀旁腺機能減退、與器官移植相關(guān)的急性免疫疾病、與器官移植相關(guān)的慢性免疫疾病、骨關(guān)節(jié)炎、原發(fā)性硬化性膽管炎、1型牛皮癬、2型牛皮癬、特發(fā)性白細(xì)胞減少、自身免疫中性白細(xì)胞減少、腎病NOS、腎小球腎炎、腎微小性血管炎、萊姆病、盤形紅斑狼瘡、特發(fā)性男性不孕癥或NOS、精液自身免疫性、多發(fā)性硬化(所有亞型)、交感神經(jīng)眼炎、結(jié)締組織疾病繼發(fā)性高血壓、Goodpasture's綜合征、結(jié)節(jié)性多動脈炎的肺表現(xiàn)、急性風(fēng)濕性發(fā)燒、類風(fēng)濕性脊推炎、Still's病、全身硬化、Sjogren's綜合征、Takayasu's病/動脈炎、自身免疫性血小板減少、特發(fā)性血小板減少、自身免疫性甲狀腺病、甲狀腺機能亢進(jìn)、曱狀腺腫性自身免疫性曱狀腺機能減退(Hashimoto's病)、萎縮性自身免疫性曱狀腺機能減退、原發(fā)性粘液水胂、晶狀體原性眼色素層炎、原發(fā)性血管炎、白癜風(fēng)、急性肝病、慢性肝病、酒精性肝硬化、酒精引起的肝損傷、choleosatatis、特應(yīng)性肝病、藥物引起的肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、變態(tài)反應(yīng)和哮喘、B族鏈球菌(GBS)感染、精神病(例如抑郁癥和精神分裂癥)、Th2型和Thl型介導(dǎo)的疾病，急性和慢性疼痛(不同形式的疼痛)和癌癥，例如肺癌、乳腺癌、胃癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、卯巢癌、前列腺癌和直腸癌，以及造血惡性胂瘤(白血病和淋巴瘤)，無(3脂蛋白血癥、手足發(fā)紺、急性和慢性寄生或感染過程、急性白血病、急性成淋巴細(xì)胞性白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、急性或慢性細(xì)菌感染、急性胰腺炎、急性腎衰竭、腺癌、空異位搏動、AIDS癡呆綜合征、酒精誘導(dǎo)的肝炎、過敏性結(jié)膜炎、過敏性接觸性皮炎、過敏性鼻炎、同種移植物排斥、oc-l-抗胰蛋白酶缺乏、肌萎縮性側(cè)索石更化、貧血、心絞痛、前角質(zhì)細(xì)胞變性、抗cd3治療、抗磷脂綜合征、抗-受體過敏反應(yīng)、主動月永和周圍動脈瘤、主動脈切開、動脈高血壓、動脈石更化、動靜脈瘺、共濟(jì)失調(diào)、心房纖維性顫動(持續(xù)或陣發(fā)性的)、心房樸動、房室阻滯、B細(xì)胞淋巴瘤、骨移植排斥、骨髓移植(BMT)排斥、束支傳導(dǎo)阻滯、Burkitt's淋巴瘤、燒傷、心臟心律不齊、心臟震顫綜合征、心臟腫瘤、心肌病、心肺旁路炎癥反應(yīng)、軟骨移植排斥、腦皮層變性、混亂或多灶性心房性心博過速、與化療有關(guān)的病癥、t曼性髓細(xì)胞性白血病(CML)、慢性酒精中毒、慢性炎性病變、慢性淋巴細(xì)胞性白血病(CLL)、慢性阻塞性肺病(COPD)、慢性水楊酸中毒、結(jié)腸直腸癌、充血性心力衰竭、結(jié)膜炎、接觸性皮炎、肺原性心臟病、冠狀動脈疾病、Creutzfeldt-Jakob病、培養(yǎng)陰性膿毒癥、嚢性纖維化、與細(xì)胞因子治療有關(guān)的病癥、拳擊手癡呆、脫髓鞘性疾病、登革熱、出血熱、皮炎、皮膚病癥、糖尿病、糖尿病癥、糖尿病性動脈粥樣疾病、彌散性雷維小體病、擴(kuò)張性充血性心肌病、基底神經(jīng)節(jié)病癥、中年Down's綜合征、阻斷CNS多巴胺的藥物誘導(dǎo)的運動障礙、藥物敏感性、濕疹、腦脊髓炎、心內(nèi)膜炎、內(nèi)分泌病、會厭炎、愛-巴病毒感染、紅斑性肢痛癥、錐體束外和腦病癥、家族性噬紅細(xì)胞細(xì)胞淋巴組織細(xì)胞增多癥、胎兒胸腺移植排斥、Friedreich's共濟(jì)失調(diào)、功能性周圍動脈病癥、真菌膿毒癥、氣性壞疽、胃潰瘍、腎小球性腎炎、任何器官或組織的移植物排斥、革蘭氏陰性膿毒癥、革蘭氏陽性膿毒癥、由于細(xì)胞內(nèi)生物體導(dǎo)致的肉芽腫、毛細(xì)胞白血病、Hallerrorden-Spatz疾病、橋本氏曱狀腺炎、枯草熱、心臟移才直排斥、血色素沉著癥、血液透析、溶血尿毒癥綜合征/溶血栓血小板生成紫癜、出血、肝炎(A)、希斯束心律失常、EQV感染/HIV神經(jīng)病、Hodgkin's病、運動機能亢進(jìn)病癥、過敏反應(yīng)、過敏性肺炎、高血壓、運動機能減退病癥、海馬-垂體-腎上腺軸評估、特發(fā)性Addison's病、特發(fā)性肺纖維化、抗體介導(dǎo)的細(xì)胞毒性、衰弱、嬰兒脊髓肌肉萎縮、主動脈炎癥、流感、離子輻射暴露、虹膜睫狀體炎/目艮色素層炎/視神經(jīng)炎、缺血-再灌注損傷、缺血性中風(fēng)、幼年類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、幼年脊髓肌肉萎縮、Kaposi's肉瘤、腎移植排斥、軍團(tuán)菌病、利什曼病、麻風(fēng)病、皮質(zhì)脊髓系統(tǒng)損傷、脂肪水腫、肝臟移植排斥、淋巴水肺、癡疾、惡性淋巴瘤、惡性組織細(xì)胞增多癥、惡性黑素瘤、軟膜蛛網(wǎng)膜炎、腦膜炎球菌血癥、代謝性/特發(fā)性、偏頭痛、線粒體多系統(tǒng)病癥、混合型結(jié)締組織疾病、單克隆y-球蛋白病、多骨髄瘤、多系統(tǒng)變性(MencelDejerine-ThomasShi-Drager和Machado-Joseph)、重癥肌無力、細(xì)胞內(nèi)鳥分枝桿菌、結(jié)核分枝桿菌、脊髓發(fā)育不良綜合征、心急梗塞、心肌缺血性病癥、鼻咽癌、新生兒慢性肺病、腎炎、腎變病、神經(jīng)變性疾病、神經(jīng)原性I型肌肉萎縮、粒細(xì)胞缺乏性發(fā)熱、非何杰氏淋巴瘤、腹部主動脈及其分枝閉塞、閉塞性動脈病癥、okt3治療、睪丸炎/附睪炎、睪丸炎/輸精管切除述逆向操作、器官巨大癥、骨質(zhì)疏松、胰腺移植排斥、胰腺癌、腎瘤形成綜合征/惡性高鈣血癥、曱狀旁腺移植排斥、骨盆炎癥疾病、常年性鼻炎、心包病、周圍動脈粥樣硬化疾病、周圍血管病癥、腹膜炎、惡性貧血、卡氏肺嚢蟲肺炎、肺炎、POEMS綜合征(多精神病、器官巨大癥、內(nèi)分泌病、單克隆y-球蛋白病和皮膚改變綜合征)、灌注后綜合征、泵后綜合征、MI心臟切開術(shù)后綜合征、子癇前期、進(jìn)行性核上性麻痹、原發(fā)性月市動脈高血壓、》文療、Raynaud's現(xiàn)象和疾病、Raynoud's病、Refsum's病、規(guī)律性窄QRS心搏過速、腎血管高血壓、再灌注損傷、限制性心肌病、肉瘤、硬皮病、老年舞蹈病、雷維小體型老年癡呆、血清反應(yīng)陰性關(guān)節(jié)病、休克、鐮狀細(xì)胞性貧血、皮膚同種移植物排斥、皮膚改變綜合征、小腸移植排斥、實體瘤、特異性心律失常、脊髓性共濟(jì)失調(diào)、脊髓小腦變性、鏈球菌肌炎、小腦結(jié)構(gòu)損傷、亞急性硬化性全腦炎、昏厥、心血管系統(tǒng)梅毒、全身性過敏反應(yīng)、全身性炎性反應(yīng)綜合征、全身性發(fā)作型幼年類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、T-細(xì)胞或FABALL、毛細(xì)管擴(kuò)張、閉塞性血栓血管炎、血小板減少癥、中毒、移植、創(chuàng)傷/出血、III型過敏反應(yīng)、IV型過敏反應(yīng)、不穩(wěn)定心絞痛、尿毒癥、尿膿毒癥、蕁麻滲、瓣性心臟病、靜脈曲張、血管炎、靜脈疾病、靜脈血栓形成、心室纖維性顫動、病毒和真菌感染、病毒性腦炎/無菌性腦膜炎、與病毒有關(guān)的噬血細(xì)胞綜合征、Wernicke-Korsakoff綜合征、Wilson's病、任何器官或組織的異種移植排斥。115.治療患者中其中人IL-12是有害的病癥的方法，所述方法包括在施用第二種治療劑之前、同時或之后施用權(quán)利要求1-61任一項的結(jié)合蛋白的步驟，其中所述第二種治療劑選自布地奈德、表皮生長因子、皮質(zhì)甾類藥物、環(huán)孢菌素、柳氮磺胺吡啶、氨基水楊酸鹽、6-巰基噪呤、硫唑。票呤、曱硝噠唑、脂氧合酶抑制劑、美沙拉溱、奧沙拉嗪、巴柳氮、抗氧化劑、血栓烷抑制劑、IL-1受體拮抗劑、抗-IL-l卩單克隆抗體、抗-IL-6單克隆抗體、生長因子、彈性蛋白酶抑制劑、吡p定基-咪唑化合物，TNF、LT、IL-1、IL-2、IL-6、IL-7、IL-8、IL-15、IL陽16、IL-18、EMAP-II、GM-CSF、FGF和PDGF的抗體或激動劑，CD2、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD90或其配體的抗體，甲氨喋呤、環(huán)孢菌素、FK506、雷帕霉素、霉酚酸酯、來氟洛米、NSAID、布洛芬、皮質(zhì)甾類藥物、氬化潑尼松、磷酸二酯酶抑制劑、腺苷激動劑、抗血栓劑、補體抑制劑、腎上腺素能劑、IRAK、NIK、IKK、p38、MAP激酶抑制劑、IL-lj3轉(zhuǎn)化酶抑制劑、TNFa轉(zhuǎn)化酶抑制劑、T-細(xì)胞信號傳導(dǎo)抑制劑、金屬蛋白酶抑制劑、柳氮磺胺吡啶、硫唑嘌呤、6-巰基嘌呤、血管緊張肽轉(zhuǎn)化酶抑制劑、可溶性細(xì)胞因子受體、可溶性p55TNF受體、可溶性p75TNF受體、sIL-lRI、sIL-lRII、sIL-6R、抗炎細(xì)胞因子、IL-4、IL畫10、IL-ll、IL-13和TGF卩。116.權(quán)利要求113的方法，其中所述施用給個體是通過選自下列的方式進(jìn)行的胃腸外、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、支氣管內(nèi)、腹內(nèi)、嚢內(nèi)、軟骨內(nèi)、腔內(nèi)、腹腔內(nèi)、小腦內(nèi)、腦室內(nèi)、結(jié)腸內(nèi)、子宮頸內(nèi)、胃內(nèi)、肝內(nèi)、心肌內(nèi)、骨內(nèi)、骨盆內(nèi)、心包內(nèi)、腹膜內(nèi)、胸膜內(nèi)、前列腺內(nèi)、肺內(nèi)、直腸內(nèi)、腎內(nèi)、視網(wǎng)膜內(nèi)、脊柱內(nèi)、滑液內(nèi)、胸內(nèi)、子宮內(nèi)、膀胱內(nèi)、快速濃注、經(jīng)陰道、經(jīng)直腸、頰、舍下、鼻內(nèi)和經(jīng)皮。全文摘要本申請包括IL-12p40結(jié)合蛋白，特別是結(jié)合人白介素-12(hIL-12)和/或人IL-23(hIL-23)的抗體。具體來說，本發(fā)明涉及的抗體是嵌合型抗體、CDR接枝抗體和人源化抗體。優(yōu)選的抗體對于hIL-12和/或hIL-23具有高親和力，并且在體外和天內(nèi)中和hIL-12和/或hIL-23活。本發(fā)明抗體可以是全長抗體或其抗原結(jié)合部分。本發(fā)明還提供了制備和使用本發(fā)明抗體的方法。本發(fā)明抗體或抗體部分可用于檢測hIL-12和/或hIL-23和抑制hIL-12和/或hIL-23活性，例如在患有其中hIL-12和/或hIL-23活性是有害的病癥的人個體中。文檔編號C07K16/00GK101379085SQ200680024097公開日2009年3月4日申請日期2006年6月29日優(yōu)先權(quán)日2005年6月30日發(fā)明者E·馮,J·P·貝爾克,M·羅古斯卡,P·R·辛頓,R·W·迪克松,S·E·萊西,S·庫馬申請人:艾博特公司