1.一種快速檢測(cè)蠟樣芽孢桿菌的測(cè)試片,其特征在于包括下層底板(4),珍珠紙(2),上層薄膜組件(1)和蠟樣芽孢桿菌特征顯色液體培養(yǎng)基,所述珍珠紙(2)中間具有圓形凹槽(3),所述圓形凹槽(3)內(nèi)均勻分布有蠟樣芽孢桿菌特征顯色液體培養(yǎng)基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測(cè)蠟樣芽孢桿菌的測(cè)試片,其特征在于所述蠟樣芽孢桿菌特征顯色液體培養(yǎng)基每100mL含有胰蛋白胨0.8~2.0g、牛肉浸出粉0.05~0.5g、氯化鈉0.1~1.0g、磷酸二氫鉀0.2~0.4g、磷酸氫二鉀0.2~0.4g、冷水可溶性膠0.5~2.0g、抑菌劑混合物100~500IU/mL、顯色酶解底物混合劑0.015~0.04g。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的快速檢測(cè)蠟樣芽孢桿菌的測(cè)試片,其特征在于所述顯色酶解底物混合劑由5-溴-6-氯-3-吲哚辛酯、5-溴-6-氯-3-吲哚基-D-葡糖苷酸環(huán)己胺鹽、4-甲基傘型酮-beta-D-葡糖苷酸、5-溴-4-氯-3-吲哚基-beta-D-葡糖苷酸環(huán)己胺鹽按重量比1:1:1:2混合組成。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的快速檢測(cè)蠟樣芽孢桿菌的測(cè)試片,其特征在于所述抑菌劑混合物為重量比為2:2:1的多粘菌素B、卡那霉素、頭孢克洛的混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測(cè)蠟樣芽孢桿菌的測(cè)試片,其特征在于所述圓形凹槽(3)直徑為50~65mm。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測(cè)蠟樣芽孢桿菌的測(cè)試片,其特征在于所述的測(cè)試片上層薄膜組件(1)上方粘貼有測(cè)試片標(biāo)簽(5)。
7.一種權(quán)利要求1~6任一項(xiàng)所述的快速檢測(cè)蠟樣芽孢桿菌的測(cè)試片的制備方法,包括如下步驟:
a.配制蠟樣芽孢桿菌特征顯色液體培養(yǎng)基:每100mL按照以下方式配制,稱量胰蛋白胨0.8~2.0g、牛肉浸出粉0.05~0.5g、氯化鈉0.1~1.0g、磷酸二氫鉀0.2~0.4g、磷酸氫二鉀0.2~0.4g、冷水可溶性膠0.5~2.0g,于燒杯中加蒸餾水100mL加熱攪拌溶解,在121℃高壓滅菌鍋條件下滅菌15min,冷卻至室溫后,依次加入經(jīng)過濾滅菌的抑菌劑混合物10000~50000IU及顯色酶解底物混合劑0.015~0.04g,得到蠟樣芽孢桿菌特征顯色液體培養(yǎng)基,在0~4℃下冷藏備用;
b.各組件的前處理
上層薄膜組件(1):在上層薄膜組件1的反面均勻敷上冷水可溶性凝膠,在正面貼上測(cè)試片標(biāo)簽(5),送輻照處理,輻照劑量為2KGy,使用前紫外滅菌30min;
下層底板(4)和珍珠紙(2):下層底板(4)與珍珠紙(2)采用不干膠粘貼貼合在一起后,送輻照處理,輻照劑量為2KGy,使用前紫外滅菌30min;
c.蠟樣芽孢桿菌特征顯色液體培養(yǎng)基添加:將步驟b中經(jīng)紫外滅菌后的下層底板(4)和珍珠紙(2)結(jié)合部件水平放置在水平臺(tái)面上,珍珠紙(2)中間圓形凹槽(3)開口向上,吸取1~3mL蠟樣芽孢桿菌特征顯色液體培養(yǎng)基添加于圓形凹槽(3)內(nèi),使培養(yǎng)基均勻分布,無菌條件下35~85℃烘干4h后,置于0~4℃的無菌冷藏箱內(nèi),備用;
d.組裝測(cè)試片:將經(jīng)上述步驟c后得到的測(cè)試片組件上貼上經(jīng)步驟a處理后的上層薄膜組件(1),具有測(cè)試片標(biāo)簽(5)的一面向上,即得到快速檢測(cè)蠟樣芽孢桿菌的測(cè)試片。
8.一種權(quán)利要求1~6任一項(xiàng)所述的快速檢測(cè)蠟樣芽孢桿菌的測(cè)試片檢測(cè)樣品中蠟樣芽孢桿菌的方法,包括以下步驟:
a.樣品前處理;
b.用權(quán)利要求1~6任一項(xiàng)所述的快速檢測(cè)蠟樣芽孢桿菌的測(cè)試片進(jìn)行接菌培養(yǎng);
c.分析檢測(cè)結(jié)果。