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香蕉枯萎病菌實(shí)驗(yàn)室材料的常備形態(tài)及其制備與應(yīng)用方法與流程

文檔序號(hào):12056302閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.香蕉枯萎病菌實(shí)驗(yàn)室材料的常備形態(tài),其特征在于,用香蕉枯萎病菌的分生孢子作日常工作的常備形態(tài);分生孢子純凈無污染;分生孢子存放于無菌水中;分生孢子暫停生長發(fā)育,但轉(zhuǎn)到培養(yǎng)基上能馬上恢復(fù)正常生長發(fā)育。

2.如權(quán)利要求1所述的香蕉枯萎病菌實(shí)驗(yàn)室材料的常備形態(tài)的制備與應(yīng)用方法,其特征在于,制備和應(yīng)用方法步驟如下:

1)分生孢子的制備培養(yǎng):用三角瓶作培養(yǎng)器具,裝盛馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基作產(chǎn)孢培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基的組分配比為:馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g、水1000mL;將香蕉枯萎病菌的菌絲體移植入三角瓶內(nèi)的產(chǎn)孢培養(yǎng)基上,在合適的溫度下培養(yǎng),直到培養(yǎng)基面上形成菌落和分生孢子;

2)香蕉枯萎病菌材料常備形態(tài)的制備:取無菌水注入步驟1)培養(yǎng)獲得的產(chǎn)孢菌落上,輕輕洗脫菌落上的孢子,獲得含有菌絲碎段的孢子液;用滅菌紗布過濾去除該孢子液中的菌絲碎段;將該孢子液進(jìn)行離心沉淀,倒掉上清液,除去孢子液中混雜的菌體代謝產(chǎn)物和培養(yǎng)基組分;剩下的沉淀為純凈的分生孢子;以該純凈分生孢子作為香蕉枯萎病菌材料的常備形態(tài);用無菌水將沉淀孢子懸浮,攪動(dòng)使孢子充分分散,獲得香蕉枯萎病菌材料的常備孢子液;

3)香蕉枯萎病菌材料常備形態(tài)的孢子含量標(biāo)定:用無菌水將步驟2)獲得的常備孢子液的孢子濃度,調(diào)配為106孢子/mL;

4)香蕉枯萎病菌材料常備形態(tài)的日常存放:在無菌條件下,將步驟3)標(biāo)定的常備孢子液分裝到有蓋密閉的滅菌容器內(nèi),并轉(zhuǎn)移到25℃的暗環(huán)境中存放備用;

5)香蕉枯萎病菌材料常備形態(tài)的應(yīng)用:將步驟4)存放的香蕉枯萎病菌材料常備孢子液轉(zhuǎn)到超凈工作臺(tái),振蕩裝存常備孢子液的容器,使分生孢子充分懸浮和分散;開蓋后用移液器定量吸取孢子液,移植到相關(guān)的工作環(huán)節(jié)或?qū)嶒?yàn)程序中;吸液移植操作完畢后回蓋密封,將剩余的常備孢子液轉(zhuǎn)回步驟4)的存放處存放。

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